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UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Y CIENCIAS DE LA


SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE ESTOMATOLOGIA

GUÍA DE PRÁCTICAS DE BIOLOGÍA Y GENÉTICA

PARA LA ESCUELA PROFESIONAL DE ESTOMATOLOGÍA

SEMESTRE CADÉMICO 2012 - I

COORDINADOR DEL CURSO: Mg. Marco Antonio Mesía Guevara

DOCENTES COLABORADORES:

Blgo. Nelson Rivera Fernandez


Q.F Adriana Cordero Vilca
CD. Giovanna García Huamàn
CD. Ciro Calderón Guevara

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INTRODUCCIÓN

El laboratorio constituye el lugar trabajo, tanto para la enseñanza como para la


investigación y es preciso conocer los diferentes materiales, instrumentos, reactivos
y equipos con los que cuenta.
Las prácticas de biología son una parte fundamental en la enseñanza de dicha
materia ya que permiten que los conocimientos teóricos aprendidos por el alumno
se puedan aplicar, es por esta razón que los estudiantes deben comprender los
procedimientos básicos en la técnica del manejo de los materiales y equipos de
laboratorio para lograr un buen aprendizaje de la bilogía.
El concepto de asepsia y de trabajo ordenado ayuda al desarrollo de la práctica.
El trabajo de laboratorio representa uno de los aspectos fundamentales que
contribuye en la definición de la vocación tecnológica y científica del ser humano y
en especial de los jóvenes por estar en un periodo de formación intelectual, ya que
ello permite que la teoría sea comparada con la práctica.
Es tarea fundamental de los docentes es motivar la participación activa de los
estudiantes en el desarrollo de prácticas de laboratorio y de campo, con el fin de
que se mejoren sus habilidades y destrezas en cuanto al manejo de materiales y
reactivos, con lo cual están en posibilidades de lograr un cambio o transformación
del entorno en donde vive, así como la de su propia realidad.

Por esta razón, creímos por conveniente la elaboración de esta guía de práctica,
cuyo contenido tiene como finalidad brindar al estudiante un material ordenado y
de fácil acceso al trabajo de laboratorio en la asignatura de Biología.
Esta guía está descrita de manera clara y sencilla con el fin de que la ejecución
práctica pueda hacerse completamente.
El presente trabajo consta de catorce experiencias, las cuales se
desarrollaron en varias etapas mediante la recopilación de prácticas. Cada
práctica inicia con el título en la parte central, el cual se seleccionó de acuerdo a la
dosificación del programa por semana. La competencia hace referencia al aspecto

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significativo que se pretende que logren los alumnos al final del experimento. El
fundamento teórico de cada una de las prácticas, fue elaborado en base a
diversas referencias bibliográficas. En la parte experimental, el procedimiento fue
desarrollado consultando diversos manuales de Educación Superior; del mismo
modo, en la preparación de la guía nos hemos apoyado en los años de experiencia
en la enseñanza universitaria en diversas instituciones. El cuestionario en el que el
alumno demuestra su aprovechamiento logrado al final de la secuencia de
aprendizaje, se elaboró basado en el aspecto introductorio y resultados
experimentales que se esperan de cada práctica.
Finalmente, agradezco anticipadamente en nombre de la plana del curso y el mío
propio a sus lectores por hacerlo de su conocimiento. Asimismo; agradezco de
manera muy especial a la profesora Adriana Cordero Vilca por su valiosa
participación en la elaboración de la presente guía.

Mg. Marco Antonio Mesía Guevara


Coordinador de la Asignatura de Biología y Genética

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RECOMENDACIONES GENERALES PARA EL TRABAJO EN EL LABORATORIO DE
BIOLOGÍA

1. La asistencia a práctica es obligatoria, no habrá tolerancia y el inicio es a la hora


indicada, después de este tiempo, no se permitirá al acceso al laboratorio.
2. Los alumnos deberán ingresar con el uniforme completo, estando el guardapolvo
debidamente abotonado.
3. Las mesas deberán estar siempre limpias y desocupadas, las mochilas serán
colocadas en los cajones de las mesas de trabajo.
4. Está prohibido comer y fumar en el laboratorio, evite el uso de celulares durante el
desarrollo de la práctica.
5. Limpiar y desinfectar el área de trabajo antes y después de usarla.
6. No pasear entre las mesas del laboratorio, el trabajo deberá efectuarse sentado y en
su equipo de trabajo. Hablar sólo lo necesario con los compañeros.
7. El material para el desarrollo de la práctica, es responsabilidad de los integrantes del
grupo, en caso de no traerlo se suspenderá la práctica para dicho grupo.

8. Ser cuidadoso con el uso del material de laboratorio (microscopios, materiales de


vidrio y porcelana, reactivos, etc.), con el fin de evitar cualquier accidente.
9. Verifique que los frascos con las sustancias a emplear estén debidamente rotulados
o etiquetados.
10. El material una vez terminada la práctica, deberá ser entregado totalmente limpio y
ordenado.
11. Informe al profesor de cualquier accidente que ocurra. En caso de daño o deterioro
de algún instrumento o equipo, SON LOS ALUMNOS QUE CONFORMAN LA MESA
LOS RESPONSABLES DE DICHO DAÑO y deberán subsanarlo a la brevedad
posible y en un tiempo no mayor a una semana, siendo retenido su carnet hasta el
cumplimiento de la deuda pendiente.
12. La evaluación en el laboratorio será permanente. Se tomará dos exámenes, un
examen parcial y un examen final de práctica sin derecho a sustitutorio.

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CONTENIDO DE LAS PRÁCTICAS

SEMANA PRÁCTICA TEMAS PÁGINA


1 1 RECONOCIMIENTO, USO Y MANEJO DE MATERIALES DE 6

LABORATORIO.

2 2 MICROSCOPÍA 16

3 3 RECONOCIMIENTO DE GLÚCIDOS 26

4 4 RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS 32

5 5 RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS 38

6 6 ACTIVIDAD ENZIMÁTICA 42

7 7 AISLAMIENTO DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS 49

8 EXAMEN PARCIAL

9 8 CÉLULA PROCARIOTA: TÉCNICA DE COLORACIÓN BACTERIANA 53

10 9 CÉLULA EUCARIOTA: ÓSMOSIS 59

11 10 PLASTIDIOS E INCLUSIONES CITOPLASMÁTICAS 69

12 11 CARIOTIPO HUMANO 75

13 12 DIVISIÓN CELULAR: MITOSIS 84

14 13 LEYES DE MENDEL 87

15 14 LA FERMENTACIÓN 90

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PRÁCTICA 1: RECONOCIMIENTO DEL MATERIAL DE LABORATORIO

Y MEDICIÓN DE VOLÚMENES

I. COMPETENCIAS:
 Reconoce los materiales de laboratorio.
 Describe correctamente el uso de ellos.
 Efectúa mediciones de volúmenes usando los materiales necesarios.

II. MATERALES

Vaso de Precipitado
Erlenmeyer
Triángulo
Balón de Fondo Redondo
Pinza para Tubos de Ensayo
Balón de Fondo Plano
Espátula
Probeta
Soportes
Bureta
Vidrio de Reloj
Pipeta Graduada.
Pizetas
Pipetas Aforadas
Placas de toque
Tubos de Ensayo
Micropipetas
Agitador
Pipeteadores
Embudo
Mortero y pilón.
Embudo de Separación
Escobilla para tubos
Cápsula de Porcelana
Mechero bunsen
Crisoles
Gradilla

III. FUNDAMENTO TEÓRICO

En el laboratorio se emplean una variedad de implementos para la realización de


las experiencias, algunos de ellos son denominados volumétricos, ya que se usan
para medir volúmenes de fluidos, ya sean líquidos o gases.
Entre los aparatos volumétricos más usados tenemos: Probetas, Pipetas, Buretas,
Vasos de precipitado, tubos de ensayo, entre otros. En algunos aparatos el líquido
se mide adicionándolo en el interior de este, mientras que en otros como en el caso
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de las pipetas el líquido se mide llenando esta mediante succión (o vacío) con
peras de caucho. Una alternativa poco recomendable es hacerlo por succión por la
boca y poniendo el dedo índice sobre la parte superior de la pipeta para evitar la
salida de líquido, pero cuando se trabaja con líquidos corrosivos o venenosos esto
puede desembocar en quemaduras o envenenamiento. Al medir un líquido con el
uso de pipetas se debe tener la precaución de que la punta inferior quede muy por
debajo de la superficie del líquido, ya que de lo contrario absorberá aire, el cual
impulsará el líquido hasta hacer contacto con la
boca o con la pera de caucho.

Cuando se mide un líquido, la superficie de este


generalmente adopta una curvatura denominada
menisco, para efectos de una buena medición la
parte inferior del menisco debe quedar tangente a la señal de referencia.

Diferencia entre materiales, instrumentos, reactivos y equipos de laboratorio

Artefactos que
facilitan el estudio

A continuación se hace referencia a los materiales de uso común en el laboratorio:

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PROBETA GRADUADA

Se utiliza, para contener o medir volúmenes de


líquidos de una forma aproximada. Es un
recipiente cilíndrico de vidrio con una base ancha,
que generalmente lleva en la parte superior un
pico para verter el líquido con mayor facilidad.

PIPETA VOLUMÉTRICA

Instrumento de laboratorio que se utiliza para


medir o transvasar pequeñas cantidades de
líquido..

ERLENMEYER

Son matraces de paredes rectas, muy usados


para las valoraciones. Se pueden calentar
directamente sobre la rejilla.

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MORTEROS

Se utilizan para disgregar sustancias, mediante la


presión ejercida, suelen ser de porcelana.

BURETA

Bureta, instrumento de laboratorio que se utiliza en


volumetría para medir con gran precisión el
volumen de líquido vertido.

PIZETA O FRASCO LAVADOR

Se utilizan para enjuagar el material de laboratorio

BALON DE FONDO PLANO

Son recipientes de vidrio, esféricos, provistos de


un cuello. Algunos tienen marcada una
determinada capacidad (aforados).

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TRÍPODE

Se utiliza como soporte para calentar distintos


recipientes; sobre la plataforma del trípode se
coloca una malla metálica para que la llama no dé
directamente sobre el vidrio y se difunda mejor el
calor.

MECHERO BUNSEN

Mechero Bunsen, dispositivo que se utiliza mucho


en los laboratorios debido a que proporciona una
llama caliente, constante y sin humo.

REJILLA DE ASBESTO

Material de laboratorio de metal que está cubierto


con un círculo de asbesto; se usa para proteger el
fuego directo el material de vidrio que va a sufrir
calentamiento. Se suelen colocar encima del
mechero, apoyadas en un aro sujeto al soporte.
Sobre ellas se coloca el matraz o recipiente que
queremos calentar, evitando así que la llama le dé
directamente.

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EMBUDO BUCHNER

Es un embudo con la base agujereada. Se acopla


por su extremo inferior mediante un corcho
taladrado al matraz kitasato. Encima de los
orificios se coloca un papel de filtro. Se utiliza para
filtrar sustancias pastosas.

CAJA PETRI

La placa de Petri es un recipiente redondo, de


cristal o plástico, de diferentes diámetros (siendo
más comunes los de diámetros alrededor de 10
cm), de fondo bajo, con una cubierta de la misma
forma que la placa, pero algo más grande de
diámetro, para que se pueda colocar encima y
cerrar el recipiente.

Se utiliza en los laboratorios principalmente para el


cultivo de bacterias y otros microorganismos.

CRISOL GUSH O CRISOL FILTRANTE

Suele ser de porcelana, de un metal inerte o de


algún tipo de material refractario. Se utiliza para
calcinar o fundir sustancias. Se calienta a fuego
directo. Es similar a las cápsulas.

CÁPSULA DE PORCELANA

Sirve para calentar y evaporar líquidos, fundir


cristalizar sólidos.

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VARILLA DE AGITACIÓN

La varilla de agitación es de vidrio y se utiliza para


agitar las disoluciones.

GRADILLA

Pueden ser de metal, madera o platico. Se utilizan


para sostener los tubos de ensayo.

TUBOS DE ENSAYO

Son cilindros de vidrio cerrados por uno de sus


extremos que se emplean para calentar, disolver o
hacer reaccionar pequeñas cantidades de
sustancias. Los hay de vidrio ordinario y de
“PIREX”. Estos últimos son los que se deben
utilizar cuando se necesita calentar.

VASOS DE PRECIPITADO

Se usan para preparar, disolver o calentar


sustancias. Junto con el matraz, la probeta y los
tubos de ensayo constituyen lo que se llama en el
laboratorio “Material de vidrio de uso general”. Se
fabrican en vidrio ordinario y en “PIREX”, y de
distintos tamaños. Son cilíndricos y en la boca
llevan un pequeño apéndice en forma de pico para
facilitar el vertido de las sustancias cuando se
transvasan. Puede ir aforados o graduados, si bien
su exactitud es menor que la de un matraz aforado
o una probeta.

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MATRAZ FONDO REDONDO

También se conoce con el nombre de matraz de


fondo esférico y se utiliza en pocas experiencias.

EMBUDOS

Se emplean para filtrar sustancias liquidas o


simplemente para trasvasarlas de un recipiente a
otro. En el laboratorio se utilizan embudos de
diversos materiales: vidrio ordinario, “PIREX”,
plástico o porcelana, según el tipo aplicación que
se les vaya a dar. Hay embudos de cristal
graduados; en este caso tienen una llave en el
tubo que, al cerrarla, impide la salida del líquido.
Es preferible que el extremo del embudo tenga un
corte oblicuo para facilitar la caída del líquido.

PINZAS PARA TUBOS DE ENSAYO

Son instrumentos en forma de tenacillas que


sirven para sujetar los tubos de ensayo; pueden
ser de madera o metálicas.

ESCOBILLA

Se utiliza para la limpieza del material de


laboratorio.

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SOPORTE UNIVERSAL

El soporte universal es una herramienta que se


utiliza en laboratorio para realizar montajes con los
materiales presentes en el laboratorio y obtener
sistemas de medición o de diversas funciones,
como por ejemplo: un fusiómetro, un equipo de
destilación.
Está formado por una base o pie en forma de
semicírculo o de rectángulo, y desde el centro de
uno de los lados, tiene una varilla cilíndrica que
sirve para sujetar otros elementos a través de
doble nueces.

IV. PARTE EXPERIMENTAL:

RECONOCIMIENTO DE MATERIALES DE LABORATORIO

1- Para el desarrollo de la práctica el grupo recibirá un conjunto de materiales


para identificarlos y señalar sus características.
2- Efectuar el dibujo científico correspondiente de todos los materiales de la
práctica.
3- Realizar la actividad con sumo cuidado evitando romper los materiales.

MEDICIÓN DE VOLÚMENES
1. Cada alumno de la mesa medirá 2,5 y 7 ml de agua destilada y lo colocará
en tubos de ensayo.
2. Medir 10 ml. de agua con una pipeta aforada de 5 ml y colocarlos en un tubo
de ensayo.
3. Colocar 50 ml de agua medidos desde una probeta a un beaker.
4. Colocar en un vaso de precipitado de 250 ml, 200 ml de agua medidos con
probetas, comparando los volúmenes.
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V. CUESTIONARIO

1. ¿Qué volumen cree usted más exacto, el medido con una pipeta aforada o el
medido con una graduada?
2. ¿Qué implementos volumétricos miden vaciando?
3. ¿Para qué se usan los implementos que se le entregaron en esta sesión de
laboratorio?
4. ¿Cuál es el objetivo de usar la rejilla de asbesto?

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PRÁCTICA 2: MICROSCOPÍA

I. COMPETENCIAS:
 Identifica sin error cada una de las partes del sistema mecánico y
óptico del microscopio convencional.
 Describe correctamente el funcionamiento de cada una de las partes
del microscopio compuesto.
 Prepara correctamente las muestras para ser observadas al
microscopio. Ilumina correctamente el campo del microscopio.
 Gradúa debidamente la apertura del diafragma del microscopio
compuesto para visualizar una imagen.

II. MATERIALES
 Microscopio
 Láminas
 Laminillas
 Pizeta con agua destilada
 Azul de metileno
 Lana
 Hisopos.
 Una hoja de papel periódico con letras pequeñas.
 Papel absorbente.
 Microscopio.

III. FUNDAMENTO TEÓRICO

MICROSCOPIO ÓPTICO

Se usa para aumentar el tamaño de la imagen aparente de los objetos, lo cual


permite observar los detalles estructurales de los microorganismos.

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El microscopio óptico normal que se usa para observar bacterias y otros
organismos celulares es un microscopio compuesto, el cual está provisto de una
fuente luminosa, una lente condensadora de luz que la dirige hacia el objeto a
observar y dos juegos de lentes que ayudan a la amplificación de la imagen.

AMPLIFICACIÓN
La capacidad amplificadora de un microscopio compuesto es el producto del
aumento individual de los oculares y los lentes objetivos. Un microscopio típico que
se usa en bacteriología tiene objetivos con poder de amplificación de 10X, 40X y
100X y oculares de 10X, por lo cual es capaz de amplificar la imagen de la muestra
100, 400 y 1000 veces.

PODER DE RESOLUCIÓN
La resolución se define como la capacidad para observar claramente dos puntos
vecinos en el campo visual como entidades diferentes o independientes.
El poder de resolución se mide utilizando como unidad la inversa del límite de
resolución.
Poder de resolución= 1/Límite de resolución

LÍMITE DE RESOLUCIÓN
Se define como la distancia mínima entre 2 puntos, para que puedan distinguirse
como tales.
Se calcula con la fórmula de Abbe:

Límite de resolución = 0,61 X Longitud de onda


Apertura numérica

A menor límite de resolución, mayor es el poder de resolución.

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APERTURA NUMÉRICA
Esta expresión, que suele abreviarse AN, indica la cantidad de luz que entra en un
objetivo desde un punto del campo del microscopio. La apertura numérica es una
constante de cada lente y mide su calidad para concentrar luz. Tal valor es de
suma importancia, de él depende el Límite de Resolución, la propiedad más
importante de un objetivo.
La apertura numérica es igual:

n x seno α

Siendo n el índice de refracción (cambio en la velocidad de la luz difractada) del


medio entre el medio y el objeto, α es el ángulo de semiapertura de la lente, su
valor siempre es menor a 1 (0,93 como máximo en los microscopios actuales.)

El aire tiene un índice de refracción de 1.0, que


limita la resolución que se puede obtener, pero se
puede incrementar la AN poniendo aceite de
inmersión entre el espécimen y el objetivo,
aumentando así el poder de resolución del
microscopio.

El aceite de inmersión tiene un índice de


refracción de 1.5, lo que aumenta
considerablemente la AN ingresando por lo tanto un mayor cono de luz hacia el
objetivo y permitiendo de esta manera la observación de la muestra.

La calidad de un objetivo es tanto mayor cuanto más elevada es su apertura


numérica.

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TIPOS DE MICROSCOPIO

Simple.
Los primeros microscopios, construidos por Leeuwenhoek alrededor de 1675, eran
simples, es decir, contenían sólo una lente o lupa.
Compuesto.
Tiene varias lentes combinadas, capaces de producir gran aumento. Existe además
el Microscopio electrónico, que debido a sus posibilidades para obtener imágenes
claras de los objetos más diminutos, ha hecho contribuciones de la mayor
importancia, sobre todo en el estudio de la constitución y ciclos vitales de los virus
filtrables.

MICROSCOPIO COMPUESTO DE CAMPO LUMINOSO

El microscopio de uso más común en el trabajo de laboratorio es el microscopio


compuesto de campo luminoso.
El microscopio compuesto consta de una fuente luminosa, una lente que concentra
la luz (condensador) y la dirige hacia el espécimen y dos juegos de lentes
convergentes, objetivo y ocular, que ayudan a la amplificación de la imagen.

El objetivo está en el extremo inferior del tubo del microscopio, justo por encima del
objeto que se halla encima de la platina, y cuya distancia focal es muy pequeña
(distancia focal, es la distancia entre el foco de la lente y su centro óptico). El
objetivo forma imagen real, invertida y aumentada del objeto. La otra lente llamada
ocular, se halla en el extremo superior, de mayor distancia focal, y es por donde se
observa para percibir las imágenes. El ocular forma una imagen virtual, aumentada
y derecha de la imagen formada por el objetivo.

El microscopio compuesto consta básicamente de dos lentes convergentes: el


objetivo y el ocular que reproducen al combinarse una imagen virtual, i nvertida y
cuyo tamaño es el producto de las amplificaciones de ambas lentes.

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OCULAR X OBJETIVO = AUMENTO

OCULAR OBJETIVO AUMENTO

10 X 4X 40 X
10 X 10 X 100 X
10 X 40 X 400 X
10 X 100 X 1000 X

PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO


Localice estas partes en su microscopio e indique en el esquema.

PARTE MECÁNICA:
1. Tubo óptico
2. Tornillo Macrométrico
3. Tornillo Micrométrico
4. Revolver
5. Brazo
6. Platina
7. Base o pie

1. Tubo Óptico: Es un cilindro de metal que en su parte superior se


encuentra colocado el OCULAR y en su parte inferior se dispone el
REVOLVER al cual se atornillan los OBJETIVOS. En la parte posterior
se encuentra la CREMALLERA que se adapta a un piñón interno.
2. Tornillo Macrométrico: Se utiliza para enfocar la preparación, es de
largo recorrido y permite movimientos de gran amplitud. Se utiliza para
movilizar el tubo o platina (enfoque grosero).
3. Tornillo Micrométrico: También se utiliza para enfocar la preparación,
pero es de pequeño recorrido, para movimientos de pequeña amplitud.

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4. Revolver: Es un dispositivo metálico giratorio que se encuentra en la
parte inferior del tubo óptico y posee de dos a cuatro lentes que al
hacerles girar deben disponerse en el Retén, indicando que se
encuentran en posición de observación.
5. Brazo: es el metal macizo, en forma de “C”. Por la parte superior se une
con el TUBO y por su extremidad inferior se pone en contacto con la
BASE por medio de la CHARNELA, la que permite inclinar el aparato.
En su extremo superior se encuentra el TORNILLO MACROMÉTRICO.
El Brazo sirve para transportar el microscopio.
6. Platina: es una plancha metálica de forma circular o cuadrangular, que
se encuentra en la parte inferior del Brazo.
Posee una abertura central denominada ABERTURA DE PLATINA,
cuyo fin es dejar pasar la luz hacia el objeto de observación colocado en
su respectivo portaobjetos sujetado por las Presillas.

7. Base o pie: Es un dispositivo metálico pesado, unas veces en forma de


herradura, otras en forma circular que permite la estabilidad del
Microscopio.

PARTE ÓPTICA:

1. Oculares
2. Objetivos
3. Condensador
4. Diafragma
5. Espejo

1. Oculares.- Son cilindros cortos y huecos que se


colocan en la parte superior del tubo óptico.
Interiormente llevan dos lentes uno en cada
extremo y entre ambos existe un diafragma.
La lente superior se denomina lente ocular y la inferior lente de campo.

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Observando la parte exterior del ocular notaremos la presencia de unos
números 5X, 10X, 15X, etc., que es el aumento de cada ocular. Esta
parte se llama así porque el ojo del observador se coloca en este lugar.
La función del ocular es aumentar la imagen real e invertida dada por el
objetivo.

Cuando se utiliza el ocular 10X con el objetivo de pequeño aumento da


una amplificación final de 100 veces. El de 50X dará una amplificación
final de 500 veces y el de 100X una amplificación final de 1000 veces.
Actúa como una lupa y produce imagen virtual aumentada y derecha de
la imagen del objetivo.

2. Objetivos.- Son tubos cortos atornillados al revolver en la parte inferior del


tubo óptico. El objetivo es un sistema de lentes de los cuales el que está
más cerca del objeto se denomina lente frontal. El aumento de cada
objetivo se encuentra en la parte exterior del mismo: 5X, 10X, 45X, etc.
Objetivo de pequeño aumento o "Seco débil".
Útil para observar microorganismos grandes, p. ej. Protozoarios. Este
objetivo está marcado con un “3” ó “2/3”, que significa 2/3 de pulgada
ó 16 mm.
También está marcado como 10X. Tiene una lente en el extremo
mucho más grande que cualquiera de los otros objetivos.
Objetivo de gran aumento o "Seco fuerte".
Este se usa para el examen de microorganismos vivos suspendidos
en gotas de agua u otros líquidos. Está marcado con “6” ó “1/6” que
significa 1/6 de pulgada ó 4 mm. También está marcado como 45X o
50X. La lente del extremo es de menor tamaño que la del seco débil.
Objetivo de inmersión en aceite.
Existen los objetivos denominados de inmersión (100X), que se utiliza
con aceite de cedro y se les reconoce por que llevan una banda roja.

3. Condensador.- Es un sistema de lentes cuya función es concentrar los


rayos luminosos a la preparación, los que son proyectados por el espejo.
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Se moviliza mediante una cremallera accionada por un tornillo de
enfoque.

4. Diafragma.- En algunos microscopios desprovistos de condensador, es


un disco metálico circular que se encuentra dispuesto por debajo de la
platina. Posee aberturas de diferentes diámetros y su función es regular
la cantidad de luz proyectada a la abertura de platina. Existe diafragma
iris que se encuentra por debajo del condensador.

5. Espejo.- Se encuentra debajo de la platina montada en un soporte


metálico en forma de herradura. Posee dos caras: una cóncava y otra
plana.

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

A. MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

1. Coloque el microscopio delante suyo y acomode su asiento de tal manera


que pueda observar con facilidad. Prenda el foco del microscopio.
2. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la
platina completamente. Si el microscopio se recogió correctamente en el uso
anterior, ya debería estar en esas condiciones.
3. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas.
4. Comenzar la observación con el objetivo de 5x (ya está en posición).

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PARA REALIZAR EL ENFOQUE DE LA MUESTRA

a. Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el


tornillo macrométrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a
través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en
la preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos.
b. Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente
el objetivo de la preparación con el macrométrico y, cuando se
observe algo nítida la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un
enfoque fino.

c. Pasar al siguiente objetivo. Para cambiar de objetivo, gire


cuidadosamente el revólver hasta escuchar un click que indica un
tope. De esta forma usted pasará desde el objetivo de 5 al de 10 X y
luego al de 40X.

ES PROBABLE QUE AL OBSERVAR LA MUESTRA LUEGO DEL CAMBIO DE


OBJETIVO SE NOTE ALGO BORROSO. PARA CORREGIR SOLAMENTE DEBE
MOVER EL TORNILLO MICROMÉTRICO, NO DEBE MOVER EL TORNILLO
MACROMÉTRICO, SI LO HACE DESENFOCARÁ LA MUESTRA Y DEBERÁ
EMPEZAR DE NUEVO DESDE EL PASO 5 DE ENFOQUE DE LA MUESTRA.

B. PREPARACION Y OBSERVACIÓN DE LAS MUESTRAS.-

1. Corte una letra “e” minúscula de la hoja de periódico o revista, dejándole un


pequeño marco alrededor.
2. Coloque el pedacito de papel en la parte media del portaobjeto. La letra
debe estar siempre derecha.
3. Agregue una gota de agua sobre la muestra.
4. Cubra la muestra con una laminilla cubreobjetos evitando que se formen
burbujas .Para esto en un primer momento, la laminilla debe ser colocada en
uno de los extremos del preparado con una inclinación en un ángulo de 45
grados. Luego se deja caer suavemente la laminilla sobre la muestra, de

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esta forma se evita la formación de burbujas que evita la correcta
visualización de la muestra .Si la laminilla quedara chueca enderezarla
delicadamente con ayuda de la pinza.
5. Quitar el excedente de agua tanto en la parte superior como de la base de la
laminilla con ayuda de un pedazo de papel higiénico.
6. En otra lámina coloque una hebra muy delgada de lana o hilo de color y deje
caer una gota agua sobre ella. Cúbralo con la laminilla como hiciera con la
letra “e”. NO SE DEBE COLOCAR UN PEDAZO DE LANA GRUESA
PORQUE ESTO IMPEDIRA EL PASO DE LUZ Y NO PODRA VISUALIZAR
LA MUESTRA.
7. Trabaje con las muestras que haya traído siguiendo el mismo procedimiento.

C. CUIDADOS DEL MICROSCOPIO AL TERMINAR DE TRABAJAR

1. Luego de que ha realizado sus observaciones y hecho sus esquemas,


saque la lámina de la platina y con un pedazo de papel higiénico limpie
dicha platina.
2. Gire el revólver y colóquelo en el objetivo de menor aumento.
3. Apague la lámpara de iluminación.
4. desenchufe el microscopio y enrolle el cable alrededor de él.

CUESTIONARIO

1- Hacer un esquema del recorrido de la luz a través de un microscopio óptico


compuesto.

2- Mencione las características de un microscopio compuesto.


3- Defina: imagen virtual, imagen real, límite de resolución, lente convergente,
poder de resolución.
4- ¿Cuál es la importancia que tiene el diafragma en el microscopio?
5- Importancia del microscopio en la actualidad.

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PRÁCTICA 3: RECONOCIMIENTO DE GLÚCIDOS

I. COMPETENCIAS:
 Identifica la presencia de carbohidratos en diferentes insumos
alimenticios.

II. MATERIALES

- Soluciones diluidas (5 gr. en 100 ml.) de glucosa, almidón.


- Muestras de tubérculos, semillas, jugos, etc.
- Reactivo de Benedict
- Reactivo de Lugol (solución iodada).
- Gradilla con tubos de ensayo, pinzas sujetatubos, pipetas,
Beaker y mechero de alcohol.

III. FUNDAMENTO TEÓRICO

Los carbohidratos o hidratos de carbono ó glúcidos constituyen compuestos


químicos formados principalmente por carbono, hidrógeno y oxígeno, elementos
que se conjugan para formar diversos tipos, en una proporción generalmente de
1:2:1, respectivamente. Químicamente se definen como polialcoholes con un grupo
aldehído o cetona.

Estas biomoléculas ejercen funciones fundamentales en los seres vivos, como:


soporte (celulosa), reserva de alimento (almidón), reserva energética (glucógeno),
energía inmediata (glucosa).
Pueden clasificarse atendiendo a varios criterios: de acuerdo al número de
monómeros que constituyen al carbohidrato, al número de carbonos de sus
monómeros, según el grupo funcional que posee ese monómero.
Responden a la fórmula general (CH2O)n. Con n entre 3 y 7.

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RECONOCIMIENTO DE AZÚCARES REDUCTORES

REACTIVO DE BENEDICT

Los monosacáridos tienen poder reductor debido a los radicales aldehído o cetona
de sus moléculas. Los disacáridos con enlace glucosídico entre un radical reductor
y un grupo alcohol también tienen poder reductor. Si el enlace se realiza entre los
dos radicales reductores (carbonos carbonílicos), no tienen poder reductor. Este
poder reductor puede ponerse de manifiesto frente a sales de cobre, ya que el ión
cúprico se reduce por ganancia de un electrón, pasando a ión cuproso en un medio
alcalino:

Cu++ + radical reductor -----> Cu+ + radical oxidado

(Cúprico) (Cuproso)

Esta reacción es específica para azúcares con grupo reductores libres (C=O).
Todos los monosacáridos poseen un grupo reductor libre. Los disacáridos maltosa
y lactosa tienen grupos reductores libres, pero la sacarosa no los posee, ya que se
pierden los grupos reductores de sus componentes cuando ésta es formada.

La acción reductora se manifiesta mediante una solución de sulfato cúprico


(SO4Cu) de color azul, que pasa a óxido cuproso (Cu2O) de color rojo ladrillo que
precipita. El reactivo utilizado es el de Benedict o el de Fehling, que contienen
sulfato cúprico. Una turbidez verde-amarillenta en los resultados indica un 0,1-0,3%
de azúcar reductor. Un precipitado de color ámbar anaranjado, indica más de un
1,5% de azúcar reductor.

La coloración dependerá de la concentración de óxido de cobre y ésta a su vez de


la reducción del cobre; va desde verde, amarillo, anaranjado o rojizo.

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RECONOCIMIENTO DE POLISACÁRIDOS

REACTIVO DE LUGOL

El Lugol (solución de yodo-yodurado) colorea las micelas de almidón de color azul


intenso casi negro. El almidón es una mezcla (en diferentes proporciones según las
especies) de los polisacáridos amilosa (10-20%) y amilopectina (80-90%). El
almidón es coloreado de azul en presencia de Lugol, debido a una adsorción o
fijación del I-3 sobre las unidades de glucosa de la amilosa, y ayuda a mantener su
estructura. Al calentar hasta ebullición, desaparece la estructura ternaria (incoloro)
y reaparece al enfriar (azul-violeta).

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

A. Preparación de las muestras


1. Se preparan soluciones con las diferentes muestras de alimentos
raspando o triturando un trocito de tubérculo o semillas, adicionando
aproximadamente 5 ml de agua destilada.
2. En el caso de jugos diluir previamente la muestra: Medir 0,5 mL de
jugo y agregar 5 ml de agua destilada. Reservar en frascos rotulados.

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3. En el laboratorio se tendrán muestras controles de soluciones de
almidón, glucosa, etc.
B. Identificación cualitativa de azúcares reductores con el reactivo de
Benedict
1. Se preparan una serie de tubos de ensayo con 2 ml. de las
soluciones preparadas en A rotulando cada tubo.
2. Preparar un tubo control con 2 ml de la solución de glucosa.
3. Agregar a cada tubo 0,5 ml de reactivo de Benedict.
4. Llevar todos los tubos a baño María hirviente por 3 minutos.
Observar si se producen variaciones de coloración e
interpretar los resultados. Concluye acerca de la existencia de
azúcares reductores en la solución problema.
C. Identificación cualitativa de almidón con el reactivo de Lugol
1. Se preparan una serie de tubos de ensayo con 2 ml. de las
soluciones preparadas en A rotulando cada tubo.
2. Preparar un tubo control con 2 ml de la solución de almidón.
3. Agregar a cada tubo 5 gotas de reactivo de Lugol.
4. Observar e interpretar los resultados. Concluye acerca de la
existencia de almidón en la solución problema.
D. Resultados:
1. Llenar la siguiente tabla en donde se colocará positivo (+) si hay
cambio de coloración, formación de precipitado, etc. o negativo (-) si
la muestra no cambia con la adición del reactivo de identificación

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Muestra Reactivo Reactivo de
Lugol Benedict

E. Análisis de resultados:
1- Por cada muestra se indicará por separado si existe almidón ó
azúcares reductores o si hay una mezcla de ambas.

V. CUESTIONARIO
1. ¿Qué otros reactivos químicos se utilizan para la identificación de
carbohidratos?
2. Ejemplos de carbohidratos reductores y no reductores.
3. Esquematice la estructura química del almidón, de la glucosa, de la
sacarosa, de la lactosa.
4. ¿Por qué se considera reductor un azúcar?
5. Escriba la reacción de cada una de las pruebas realizadas en la
práctica.

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6. ¿Qué ocurre si la disolución de sacarosa es tratada previamente con
ácido clorhídrico? Explica tu respuesta.
7. ¿A qué se debe que el almidón con Lugol pierda el color al calentar, y
que vuelva a recuperar su color azul-violeta después de enfriarse?

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PRÁCTICA 4: RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

I. COMPETENCIAS:
 Identifica cualitativamente la presencia de lípidos en muestras de
alimentos.

II. MATERIALES

Mechero.
Trípode
Rejilla de asbesto
Gradillas con tubos de ensayo
Vaso de precipitado
Solución de detergente
Aceite vegetal
Solución de Sudán III en frasco cuentagotas
Solución de Hidróxido sódico al 20%.
Éter
Cloroformo.
Bencina
Alcohol
Acetona

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III. FUNDAMENTO TEÓRICO

Los lípidos son un conjunto de moléculas orgánicas, la mayoría biomoléculas,


compuestas principalmente por carbono e hidrógeno y en menor medida oxígeno,
aunque también pueden contener fósforo, azufre y nitrógeno, que tienen como
característica principal el ser hidrofóbicas o insolubles en aguay sí en disolventes
orgánicos como la bencina, el alcohol, el benceno y el cloroformo.
En términos generales llamamos aceites a los triglicéridos de origen vegetal, y
corresponden a derivados que contienen ácidos grasos insaturados
predominantemente por lo que son líquidos a temperatura ambiente. (aceites
vegetales de cocina, y en los pescados.

Los lípidos desempeñan diferentes tipos de funciones biológicas:

Función de reserva energética. Los triglicéridos son la principal reserva de


energía de los animales ya que un gramo de grasa produce 9 kilocalorías en
las reacciones metabólicas de oxidación, mientras que las proteínas y los
glúcidos sólo producen 4 kilocalorías por gramo.
Función estructural. Los fosfolípidos, los glucolípidos y el colesterol forman
las bicapas lipídicas de las membranas celulares. Los triglicéridos del tejido
adiposo recubren y proporcionan consistencia a los órganos y protegen
mecánicamente estructuras o son aislantes térmicos.
Función reguladora, hormonal o de comunicación celular. Las vitaminas
liposolubles son de naturaleza lipídica (terpenos, esteroides); las hormonas

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esteroides regulan el metabolismo y las funciones de reproducción; los
glucolípidos actúan como receptores de membrana; los eicosanoides
poseen un papel destacado en la comunicación celular, inflamación,
respuesta inmune, etc.
Función transportadora. El transporte de lípidos desde el intestino hasta su
lugar de destino se realiza mediante su emulsión gracias a los ácidos biliares
y a las lipoproteínas.

La característica común a todos los lípidos es que son insolubles en agua y


solubles en disolventes orgánicos como la gasolina, benceno, xilol, cloroformo.
Las grasas son insolubles en agua. Cuando se mezcla agua y aceite y se agita
fuertemente la mezcla, se forma una emulsión transitoria. Esto significa que si se
deja la “mezcla” reposar unos instantes, las gotas de aceite, de menor densidad,
suben y se unen entre sí, formándose dos capas, la superior de aceite y la inferior
de agua.
Si a esta mezcla se la añade una solución de jabón o detergente y se agita, se
produce entonces una emulsión permanente. Esto es debido a que el jabón rodea
a las gotas de aceite quedando su parte hidrofóbica (cola del ácido graso) en
contacto con el aceite y su zona polar (COO –Na+) en contacto con el agua. Esto
es lo que da a los jabones en general, sus cualidades como agentes de limpieza y
es una propiedad muy utilizada en la fabricación de cosméticos que tienen en su
composición agua y aceites, consiguiéndose un producto homogéneo (se evita la
formación de dos fases)

IV. PARTE EXPERIMENTAL

1- PRUEBA DE SOLUBILIDAD

OBJETIVO: Comprobar la solubilidad de las grasas y los aceites en diferentes


solventes.

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PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Colocar aproximadamente 2ml de aceite en 4 tubos de ensayo previamente


rotulados.
2. Añadir a uno de ellos 2ml de agua, al otro 2ml de bencina, al otro 2 mL de
cloroformo y 2 ml de alcohol al último tubo.
3. Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar.
4. Observar los resultados.
5. Colocar soluble, poco soluble, insoluble de acuerdo a sus resultados en la
siguiente tabla:

bencina agua cloroformo alcohol


Aceite

2- TINCIÓN CON SUDÁN III

OBJETIVO: Reconocer Lípidos con la Coloración de Sudan III.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Poner 2 ml. de aceite en un tubo, añadir 2 ml. de agua y dejar reposar. Una
vez formadas las dos fases, dejar caer unas gotas de Sudán III y agitar.
Dejar reposar el tubo y anotar los resultados.

Las grasas se colorean en rojo anaranjado por el colorante denominado


Sudan III.
Se observará en el tubo al que se le añadió Sudán, que todo el aceite
aparece teñido.

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3- SAPONIFICACIÓN

OBJETIVO: Comprobar cómo los lípidos saponificables forman jabón.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Colocar en un tubo de ensayo 2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%.


2. Agitar enérgicamente y colocar el tubo al baño María de 20 a 30 minutos.
3. Pasado este tiempo, se pueden observar en el tubo 3 fases: una inferior clara
que contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina formada, otra
intermedia semisólida que es el jabón formado y una superior lipídica de aceite
inalterado.
4. Dibuja el tubo de ensayo indicando lo que contiene cada una de las fases que
observas.

4- FORMACIÓN DE EMULSIÓN ESTABLE

OBJETIVO:
Simular la acción de la Bilis durante la emulsión.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. En 2 tubos de prueba secos colocar en cada uno de ellos ,2 ml de aceite


más 2 ml de agua.
2. Se mezcla y luego de unos minutos se le agrega 0,5 ml de detergente (que
simula la acción de la Bilis) sólo a uno de los tubos y se mezcla
nuevamente.
3. Observar los resultados. Dibuja los tubos e indica en cuál se forma una
emulsión transitoria y en cuál una emulsión permanente.

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V. CUESTIONARIO

1. ¿Qué son los jabones?


2. ¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrólisis de las grasas?
3. ¿Qué es el Sudan III?
4. ¿Qué es una emulsión?
5. ¿Qué son las sales biliares y cuáles son sus funciones?

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PRÁCTICA 5: RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS

I. COMPETENCIAS:
 Identifica la presencia de proteínas en diferentes insumos
alimentarios
II. MATERIALES

Mechero.
Trípode
Rejilla de asbesto
Gradillas con tubos de ensayo
Vaso de precipitado
Pipetas
Clara de huevo o leche
Pizeta con agua destilada
HCl concentrado
Alcohol etílico
Reactivo de Biuret (Solución de SO4Cu al 1% /NaOH al 20%)
Solución de albúmina al 1-2%
Solución de Hidróxido sódico al 20%.

III. FUNDAMENTO TEÓRICO

Las proteínas son macromoléculas compuestas por carbono, hidrógeno, oxígeno y


nitrógeno. La mayoría también contienen azufre y fósforo. Las mismas están
formadas por la unión de varios aminoácidos, unidos mediante enlaces peptídicos.
El orden y disposición de los aminoácidos en una proteína depende del código
genético, ADN, de la persona.

Las proteínas constituyen alrededor del 50% del peso seco de los tejidos y no
existe proceso biológico alguno que no dependa de la participación de este tipo de
sustancias.

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Las proteínas desempeñan un papel fundamental para la vida y son las
biomoléculas más versátiles y más diversas. Son imprescindibles para el
crecimiento del organismo. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes,
entre las que destacan:

Estructural (colágeno y queratina


Reguladora (insulina y hormona del crecimiento)
Transportadora (hemoglobina)
Defensiva (anticuerpos),
Enzimática (sacarasa y pepsina)
Contráctil (actina y miosina)
Son esenciales para el crecimiento. Las grasas y carbohidratos no las
pueden sustituir, por no contener nitrógeno.
Proporcionan los aminoácidos esenciales fundamentales para la síntesis
tisular.
Son materia prima para la formación de los jugos digestivos, hormonas,
proteínas plasmáticas, hemoglobina, vitaminas y enzimas.
Funcionan como amortiguadores, ayudando a mantener la reacción de
diversos medios como el plasma.

Las proteínas están formadas por aminoácidos. Las proteínas de todo ser vivo
están determinadas mayoritariamente por su genética (con excepción de algunos
péptidos antimicrobianos de síntesis no ribosomal), es decir, la información
genética determina en gran medida qué proteínas tiene una célula, un tejido y un
organismo.

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COAGULACIÓN DE LAS PROTEÍNAS

Las proteínas, debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua
soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formación de
coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70°C o al ser tratadas
con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc.
La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su
desnaturalización por los agentes indicados, que al actuar sobre la proteína la
desordenan por la destrucción de su estructura secundaria, terciaria y cuaternaria.

REACCIÓN DE BIURET

Esta reacción la producen los péptidos


y las proteínas, pero no los
O C C O
aminoácidos ya que se debe a la
presencia del enlace peptídico CO-NH HN NH
que se destruye al liberarse los
R CH HC R
2+
aminoácidos. Cu
El reactivo de Biuret contiene CuSO4 O C C O

en solución acuosa alcalina (gracias a HN NH


la presencia de NaOH o KOH). La
R CH HC R
reacción se basa en la formación de un
compuesto de color violeta, debido a la
formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de
electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos.
La intensidad de color depende de la concentración de proteínas.

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IV. PARTE EXPERIMENTAL

REACCIÓN DE BIURET
1. En 2 tubos de ensayo colocar en uno 2 ml de clara de huevo diluida con
agua y en el otro tubo 2 ml leche diluida con agua.
2. Agregar 1 ml del reactivo de Biuret a cada tubo.
3. Observar los resultados.

COAGULACIÓN DE PROTEINAS
1. Colocar en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo
(puede diluirse en un poco de agua para obtener una mezcla espesa) o 2-3ml de
leche.
2. Calentar uno de los tubos al baño María, añadir a otro 2-3ml de HCl concentrado
y al tercero 2 o 3ml de alcohol etílico.
3. Observar los resultados.

V. CUESTIONARIO

1. ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la clara de huevo?


2. ¿Cuál de los agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalización?
3. ¿Cómo podríamos saber que una sustancia desconocida es una proteína?
4. ¿Qué coloración da la reacción del Biuret?
5. ¿Una proteína coagulada podría dar la reacción del Biuret?
6. Si se realiza la reacción del Biuret sobre un aminoácido como la Glicina ¿es
positiva o negativa? ¿Por qué?

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PRÁCTICA 6: ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

I. COMPETENCIAS:
Al finalizar esta práctica el alumno:

 Pondrá de manifiesto la presencia de la enzima catalasa en tejidos


animales y vegetales.
 Comprobará la acción de la temperatura sobre la actividad de las
enzimas.
 Comprobará la acción hidrolítica de la amilasa.
 Realiza experimentalmente la hidrólisis del almidón por acción de la
amilasa salival.
 Identifica cualitativamente la presencia de sustrato y producto.
 Evalúa el efecto del pH en la acción de la enzima.

II. MATERIALES:

 Gradillas
 Tubos de ensayo
 Mechero
 Pipetas
 Baño María
 Trocitos de hígado
 Trocitos de papa
 Arena fina
 Agua oxigenada
 Beaker pequeño para colectar saliva
 Solución de almidón al 1%
 HCl
 Reactivo Lugol
 Reactivo de Benedict

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III. FUNDAMENTO TEÓRICO

Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones


químicas, siempre que sea termodinámicamente posible .En estas reacciones, las
enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos, las cuales se
convierten en moléculas diferentes denominadas productos. Casi todos los
procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas
significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones
enzimáticas.

Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energía de


activación (ΔG‡) de una reacción, de forma que se acelera sustancialmente la tasa
de reacción. Las enzimas son generalmente proteínas globulares sintetizadas por
las propias células.

Las actividades de las enzimas vienen determinadas por su estructura


tridimensional, la cual viene a su vez determinada por la secuencia de
aminoácidos. Casi todas las enzimas son mucho más grandes que los sustratos
sobre los que actúan, y solo una pequeña parte de la enzima (alrededor de 3 a 4
aminoácidos) está directamente involucrada en la catálisis. La región que contiene
estos residuos encargados de catalizar la reacción es denominada centro activo. La
mayoría de las enzimas, al igual que el resto de las proteínas, pueden ser
desnaturalizadas si se ven sometidas a agentes desnaturalizantes como el calor y
los pHs extremos. Estos agentes destruyen la estructura terciaria de las proteínas
de forma reversible o irreversible, dependiendo de la enzima y de la condición.

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IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL A

Para todas las pruebas, la velocidad de reacción (desprendimiento de


burbujas), se registrará como sigue:

0 = No reacciona

1 = Lenta

2 = Moderada

3 = Rápida

4 = Muy rápida

1. Reconocimiento de la catalasa:

Como se mencionó anteriormente la catalasa es una enzima que se encuentra en


las células de los tejidos animales y vegetales.

La función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el


metabolismo celular, se forma una molécula tóxica que es el peróxido de
hidrógeno, H 2O2 (agua oxigenada).

Esta enzima, la catalasa, lo descompone en agua y oxígeno, por lo que se


soluciona el problema.
La reacción de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:

La existencia de catalasa en los tejidos animales, se aprovecha para utilizar el agua


oxigenada como desinfectante cuando se echa sobre una herida. Como muchas de
las bacterias patógenas son anaerobias (no pueden vivir con oxígeno), mueren con

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el desprendimiento de oxígeno que se produce cuando la catalasa de los tejidos
actúa sobre el agua oxigenada.
Desarrollo:

 Rotular tres tubos de ensayo con las letras A, B y C.


 Colocar en el tubo A un pedazo de hígado del tamaño de un frijol, en
el tubo B un pedazo similar de papa y en el tubo C arena.
 Añadir 3 mililitros de agua oxigenada a cada tubo.
 Se observa un intenso burbujeo debido al desprendimiento de
oxígeno (anote la velocidad de reacción según lo indicado
anteriormente).
2. Reutilización de la enzima:
 Rotule dos tubos con las letras D y E.
 Sacar 2 ml del sobrenadante del tubo A.
 Verter 1 ml de dicho sobrenadante en D y 1ml en E.
 Añadir al tubo D un pedazo de hígado fresco y al tubo E 1ml de agua
oxigenada.
 Anote sus observaciones.
3. Efecto del tamaño de las partículas:
 Rotule dos tubos con las letras F y G.
 Triturar un pedazo de hígado y colocarlo en el tubo F.
 Triturar un pedazo de papa y colocarlo en el tubo G.
 Añadir 2 ml de agua oxigenada a cada tubo.
 Observar la velocidad de reacción y anote sus resultados.
4. Desnaturalización de la catalasa:

Mediante esta experiencia, vamos a ver una propiedad fundamental de proteínas,


que es la desnaturalización.
Ya que la catalasa químicamente es una proteína, podemos desnaturalizarla al
someterla a altas temperaturas. Al perder la estructura terciaria, pierde también la
función y como consecuencia su función catalítica, por lo que no podremos

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descomponer el agua oxigenada y no se observaremos ningún tipo de reacción
cuando hagamos la experiencia anterior con muestras de tejidos hervidos.

1. Colocar en un tubo de ensayo un trocito de hígado entero.


2. Poner el tubo en un beaker con agua hirviendo durante cinco minutos.
3. Después de este tiempo, retirar el tubo.
4. Añadir 2 ml de agua oxigenada.
5. Observar el resultado.
6. Repetir lo mismo con la papa cruda.

HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN POR ACCIÓN DE LA AMILASA

El almidón es un polisacárido homogéneo, formado por molécula de glucosa


unidas mediante enlaces glucosídicos. Constituye la principal forma de
almacenamiento de sustancias de reserva de los vegetales y de algunas bacterias
bajo la forma de gránulos.

Estructuralmente el almidón se encuentra bajo 2 formas: la α- amilosa (cadena


lineal) y la amilopectina (cadena ramificada). Mediante esta experiencia, vamos a
ver la actividad de la enzima amilasa, presente en la saliva. Esta enzima actúa
sobre el almidón, hidrolizando el enlace α-glucosídico, obteniéndose azúcares
reductores como producto de la acción de la enzima. Se verá como el pH ácido
afecta la acción de la enzima.

V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL B

COLECCIÓN DE SALIVA Antes de la colección se procederá a un enjuague


simple de la cavidad oral con agua; luego manteniendo la boca cerrada esperará
entre 5 a 7 minutos evitando hablar y pasar saliva. La colección se realizará en un
recipiente de boca ancha (beaker) dejando caer por gravedad la saliva, evitando
así la formación de espuma.

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DILUCIÒN DE LA SALIVA
En un tubo de ensayo colocar 1 ml de saliva y agregar 4 ml de agua destilada.
Mezclar por inversión .Se obtiene así la saliva diluida.

TUBOS DE DIGESTION 1 2
ml de almidón al 1% 2.0 2.0
ml de agua 1,0 -
ml HCl 0.5 N - 1,0
ml saliva diluida 1.0 1.0

Incubar en baño María de 37 °C por 10 minutos .Luego retirar del baño María y
agitando previamente los tubos de la digestión preparar las siguientes baterías:

REACCIÓN DE LUGOL
TUBOS 1 2
Digerido 1 ml 1.0 -
Digerido 2 ml - 1.0
HCl 0.5 N ml 0.5 0.5
Lugol ml 2.0 2.0

Mezclar y observar los resultados:

REACCIÓN DE BENEDICT:

TUBOS 1 2
Digerido 1 ml 0.5 -
Digerido 2 ml - 0.5
Reactivo de Benedict ml 0.5 0.5

Colocar en baño de agua hirviente (100 °C) por 5 minutos, observe los resultados.

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VI. CUESTIONARIO

a. ¿Qué sucede cuando se pone peróxido de hidrógeno en una herida?


¿Qué sugiere la evidencia?
b. Explique por qué tantas especies producen la enzima catalasa.
c. Mencione ejemplos de cosas en nuestro diario vivir que envuelven
algún uso de enzima.
d. ¿Cuáles son los productos finales de la digestión del almidón por la
amilasa?
e. ¿Qué función cumple el HCl 0,5 N en el tubo 3 de digestión?

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PRÁCTICA 7: AISLAMIENTO DE ÁCIDOS NUCLEICOS

I. COMPETENCIAS

 Utiliza técnicas de extracción de núcleos de los tejidos


 Emplea técnica de extracción del ADN
 Reconoce las fibras de ADN extraídas

II. MATERIALES

 SDS al 20% ò detergente líquido.


 NaCl 2M
 Agua destilada
 Colorante Wright
 Baguetas
 Embudos
 Morteros c/ pilón
 Hoja de bisturí
 Guantes
 Lámina y laminilla por Alumno
 Hígado de pollo con sus dos lóbulos. al que se ha quitado previamente todo el
tejido conjuntivo

 150 gr. de fresa(6 fresas)


 2 vasos de Beaker medianos :100 mL
 1 paquete pequeño de gasa
 Jugo fresco colado de piña recién hecho ( 50 mL)
 2 frascos de 100 ml. alcohol etílico Helado

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ATENCIÓN el alcohol debe ser colocado en el frízer desde el día anterior y tiene
que ser de 96º si Ud. tuvieran un recipiente hermético colocarlo para que se
conserve bien frio hasta la hora de la práctica.

III. FUNDAMENTO TEÓRICO

La información necesaria para la construcción de los seres vivos se encuentra


almacenada en los ácidos nucleicos. Su nombre deriva de su carácter ácido y del
hecho de que fueron descubiertos en el núcleo de las células eucariontes.
Existen dos variedades químicas de ácidos nucleicos: el DNA (ácido
desoxirribonucleico) y el RNA (ácido ribonucleico). Generalmente, la información
genética se almacena en forma de cromosomas de DNA y se expresa en forma de
mRNA (RNA mensajero).

Las células eucariotas presentan un contenido en DNA mucho mayor que las
células procariotas. Las moléculas de DNA en eucariotas se combinan con
proteínas y se organizan en fibras de cromatina, la cual está totalmente
condensada con el fin de ocupar el mínimo volumen posible en el interior del núcleo
de la célula.
Las principales funciones del DNA son:
- Almacenar la información genética completa, necesaria para determinar la
estructura de todas las proteínas y RNAs de cada especie.
- Programar en el tiempo y espacio ordenadamente la biosíntesis de las células y
los componentes de los tejidos.
- Determinar las actividades de un organismo a través de su ciclo de vida.
- Determinar la individualidad de un organismo dado.
Los RNAs, aun siendo mucho más cortos que los DNAs, son mucho más
abundantes en la mayoría de las células. Tanto en células eucariotas como
procariotas las tres clases mayoritarias de RNAs son: mensajero (mRNA),

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ribosomal (rRNA) y transferente (tRNA). Cada uno consta de una cadena simple de
ribonucleótidos con un determinado peso molecular, secuencia de nucleótidos y
función biológica.
La cantidad y pureza de los ácidos nucleicos en una preparación puede estimarse
mediante espectrofotometría. La absorción a 260 nm permite calcular su
concentración: 1 unidad de absorbancia (UA) corresponde aproximadamente a
50 μg/mL para DNA de cadena doble y 40 μg/mL para DNA de cadena simple y
RNA. El cociente A260/A280 da una estimación de la pureza de los ácidos
nucleicos: una preparación pura de DNA y RNA tiene un valor de A260/A280 de 1,8
y 2,0 respectivamente. Valores significativamente menores indican contaminación
con proteínas o fenol, y, por consiguiente, no será posible cuantificar con precisión
la cantidad de ácidos nucleicos.
El objetivo de esta práctica es aislar ácidos nucleicos (fundamentalmente DNA) a
partir de un tejido animal: Hígado de pollo y tejido vegetal: Fresa

UTILIDAD DE LA PURIFICACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS


La importancia del proceso de obtención y purificación del material genético es
recobrar el producto máximo de ADN de alto peso molecular libre de proteínas,
fenol e inhibidores de las enzimas de restricción. El ADN de alta calidad es un
prerrequisito para su uso en técnicas de Biología molecular como impresiones
digitales de ADN o Fingerprinting (utilizando secuencias altamente repetitivas
denominadas mini satélites que permite la identificación genética de las personas)
y PCR (para la identificación de las secuencias específicas de ADN mediante el
usos de cebadores).

IV. PROCEDIMIENTO

EXTRACCIÓN DE ADN: TEJIDO ANIMAL Ò VEGETAL

1. Triturar el hígado de pollo ò la fresa en un mortero.


2. Añadir al triturado, 50 ml. de agua destilada y con una cuchara, mover y
presionar hasta que se torne homogénea.

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3. Filtrar, mediante una gasa, hasta verificar la separación de los restos de
tejido.
4. El filtrado trasvasarlo a un Beaker mediano y añadir un volumen similar de
NaCl 2M, mezclar. Agregar 5 ml. de Lauril sulfato de sodio (SDS) ò
detergente líquido y mezclar bien agitando suavemente por 10 minutos.
5. Añadir 2 mL de jugo de piña fresco y agitar suavemente para no romper el
ADN.
6. Añadir suavemente, por la paredes del vaso, alcohol etílico de 96º
(preferencia frío), verificando que se formen 2 fases. En la interfase precipita
el ADN.
7. Introducir una bagueta o varilla de vidrio y mover en una misma dirección
para que las hebras de ADN se vayan enrollando y adhiriendo a la bagueta.
8. COLORACION: Tomar una muestra del ADN enrollado en la bagueta y
extender sobre una lámina, dejar secar bien y agregar el colorante Wright,
dejar por 5 minutos. Lavar y dejar secar, observar al microscopio con los
objetivos de 10 y 40X.

V. CUESTIONARIO

1. Explique los paso para realizar la extracción de ADN


2. ¿Qué función cumplen cada uno de los reactivos utilizados en la extracción
de ADN?
3. ¿Qué utilidad tiene la extracción de ADN en el laboratorio?
4. ¿Qué importancia tiene la extracción del ADN en salud?

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PRÁCTICA 8: CÉLULA PROCARIOTA-TÉCNICA DE

COLORACIÓN BACTERIANA

TINCIÓN DE PARED CELULAR

I. COMPETENCIA
 Conoce las diversas técnicas de tinción y el fundamento de las mismas.

II. MATERIALES
 Asa de siembra  Mechero Bunsen
 Microscopio  Batería para tinción Gram
 Porta objetos  Mondadientes
 Aceite de inmersión  Guantes
 Pizeta con agua destilada  Gorro
 Solución salina  Mascarilla

III. FUNDAMENTO TEÓRICO

PARED CELULAR

Debajo de las sustancias extracelulares tales como las cápsulas o


capas mucosas y externas a la membrana citoplasmática está la pared
celular que es una estructura muy rígida y que da forma a la célula. Las
paredes celulares bacterianas son esenciales para el crecimiento y la
división. Todas las bacterias poseen paredes celulares rígidas que protegen
a la célula de explotar en medios de baja presión osmótica.
Composición química de las paredes celulares.- El péptidoglucano
proporciona a la pared celular una estructura rígida. Estos grandes
polímeros, están compuestos de tres clases de bloques estructurales: N-
Acetil-Glucosamina, Ácido N- Acetil-Murámico y un péptido que consta de
cuatro o cinco aminoácidos. Además contiene proteínas con polisacáridos,
lipoproteínas y lipopolisacáridos.

Mg. Marco Antonio Mesía Guevara Página 53


Propiedades y Funciones:
 Brinda protección y resistencia a la bacteria frente a los posibles
cambios de presión osmótica del medio en el que se encuentra y a la
acción de ciertos agentes externos.
 Presenta Poros que actúan como filtros, permitiendo el pasaje de
agua y metabolitos esenciales.
 Presenta antígenos de tipo y grupo específicos.
 Participa en la división (multiplicación) bacteriana (se invagina junto
con la membrana plasmática).
 En las bacterias Gram .negativas tiene poder patógeno debido a que
presenta endotoxinas (Lípido A).

MÉTODO DE TINCIÓN DE GRAM

A pesar de que fue desarrollada en el siglo XIX la tinción de Gram es la más


utilizada en el diagnóstico microbiológico.

La tinción de Gram es una tinción diferencial que permite distinguir dos grandes
grupos bacterianos: las Gram (+) y las Gram (-).
Tinción empleada en microbiología para la visualización de bacterias en muestras
clínicas. También se emplea como primer paso en la diferenciación bacteriana. El
examen con microscopio óptico de preparación con tinción de Gram se emplea de
rutina para determinar la forma de las bacterias. Las formas comunes son cocos
(esféricas), bacilos (alargadas) y formas espiraladas Las bacterias pueden
diferenciarse con esta tinción en dos grupos. Los microorganismos Grampositivos
se tiñen de azul, mientras que aproximadamente un tercio de los cocos, la mitad
de los bacilos y todos los organismos espira lados se tiñen de rojo y se dice que
son Gramnegativos.
El valor diagnóstico de esta tinción es variable; normalmente permite una buena
orientación al microbiólogo para seleccionar las técnicas de cultivo más adecuadas

Mg. Marco Antonio Mesía Guevara Página 54


y también tiene valor en orientar hacia un diagnóstico etiológico, en especial para
instaurar un tratamiento inicial.
La tinción de Gram requiere cuatro soluciones:
 Primer colorante: El cristal violeta es un colorante básico que en contacto
con las células bacterianas cargadas negativamente, reaccionan con ellas
coloreándolas.
 Solución mordiente: El Lugol que fija las tinciones y aumenta la afinidad
entre el colorante y las células. El ingrediente activo de este compuesto es el
I2; El KI simplemente hace soluble el I2 en el agua. El I2entra en las células y
forma un complejo insoluble en agua con el cristal violeta. Hasta este
momento las células Gram (+) como Gram (-) se encuentran teñidas de color
violeta.
 Agente decolorante: El alcohol acetona es un solvente orgánico que disuelve
la membrana externa de las Gram (-) facilitando la salida del complejo
colorante-mordiente. Debemos tomar en cuenta la delgada capa de mureína
incapaz de retener este complejo en las Gram (-).
Luego de este tratamiento las bacterias Gram (+) mantienen el color violeta y
las Gram (-) quedan decoloradas.
 Colorante de contraste: Es un colorante básico de distinto color que el primer
colorante, como la safranina ola fucsina básica

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Los dos grupos bacterianos que distingue esta técnica difieren en el color con el
que finalmente aparecen. Las bacterias Gram (+) se tiñen de azul-violeta por el
cristal violeta y no perderán esta coloración durante los pasos sucesivos. Las
bacterias Gram (-) perderán la coloración inicial del cristal violeta en los siguientes
pasos y se teñirán de rosa debido al colorante de contraste.
La diferencia está determinada por la composición de su pared celular. Las
bacterias Gram (+) poseen una gruesa malla de péptidoglucano en su parte más
externa, mientras que, las Gram (-), recubriendo una capa fina de péptidoglucano,
presentan una membrana lipídica externa que envuelve toda la célula.

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PROCEDIMIENTO
REALIZACIÓN DEL FROTIS

1. Colocar una pequeña gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio.


Es necesaria muy poca cantidad de agua, por lo que se puede usar el asa
de siembra, ya que en el extremo curvo de su filamento queda retenida una
mínima gota de agua, que resulta suficiente.
2. Flamear el asa de siembra, tomar, en condiciones asépticas, una pequeña
cantidad del cultivo bacteriano en medio sólido y transferirlo a la gota de
agua. Remover la mezcla con el asa de siembra hasta formar una
suspensión homogénea que quede bastante extendida para facilitar su
secado. Si la muestra se toma de un cultivo en medio líquido, no es
necesario realizar los dos primeros pasos ya que basta con colocar y
extender una gota de la suspensión bacteriana, que se toma con el asa de
siembra, directamente sobre el portaobjetos.
3. Esperar hasta que el líquido se evapore o acelerar su evaporación
acercando el portaobjeto a la llama del mechero. En este caso hay que tener
mucha precaución de no calentar demasiado el porta pues las células
pueden deformarse o romperse.

A) TINCIÓN DE GRAM

1. Realiza la preparación del frotis bacteriano como se explicó en el paso


anterior
2. Teñir con cristal violeta 1min.
3. Lavar con abundante agua el exceso de colorante.
4. Cubrir con Lugol 1min.
5. Lavar con agua el exceso de Lugol.
6. Decolorar con alcohol-acetona o simplemente con alcohol hasta que la
preparación deje de perder color (30”)
7. Lavar con abundante agua para eliminar el resto de disolvente.
8. Teñir con safranina 1min.

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9. Lavar con agua para eliminar el colorante de contraste.
10. Secar la preparación.
11. Examinar al microscopio con aceite de inmersión y fijándose sobre todo en
el color de cada preparación.

CUESTIONARIO

1. ¿Qué es un frotis?
2. ¿Con qué finalidad se fija la muestra de microorganismos en el porta
objetos?
3. ¿Qué importancia tiene teñir las muestras bacterianas?
4. ¿Por qué es necesario emplear aceite de inmersión para la observación de
los microorganismos?
5. De los reactivos que utilizaste para la tinción de Gram, ¿cuál es el que
funciona como colorante primario?
6. ¿Qué función tiene el Yodo en la tinción de Gram?
7. ¿Qué color se tiñen las bacterias Gram (+) y Gram (-)?
8. Menciona tres bacterias Gram (+) y escribe la enfermedad que causan.
9. Menciona tres bacterias Gram (-) y escribe la enfermedad que causan.

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PRÁCTICA 9: CÉLULA EUCARIOTA-ÓSMOSIS

I. COMPETENCIAS:
Al finalizar esta práctica el alumno:

 Describe la estructura general de las células animales y vegetales y


comprueba la importancia que tiene la concentración del medio en
que están inmersas, para la vida de las células.
 Comprueba el fenómeno de ósmosis en células animales y vegetales

II. MATERIALES

Proporciona el Laboratorio Traerán los alumnos


Microscopio Compuesto. Hisopos estériles.
Azul de metileno. Planta Elodea
Lugol Bulbo de cebolla
Solución salina: Hoja de geranio
 0.9% NaCl Pinza
 0.2% NaCl Gotero
 2.0% NaCl Hoja de afeitar
Láminas portaobjeto Papel servilleta
Láminas cubreobjetos
Gota de sangre

III. FUNDAMENTO TEÓRICO

La biología celular (antiguamente citología de cito=célula y Logos=Estudio o


Tratado ) es una disciplina académica que se encarga del estudio de las
células en cuanto a sus propiedades, estructura, funciones, orgánulos que
contienen, su interacción con el ambiente y su ciclo vital.

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Con la invención del microscopio óptico fue posible observar estructuras
nunca antes vistas por el hombre, las células. Esas estructuras se estudiaron
más detalladamente con el empleo de técnicas de citoquímica y con la ayuda
fundamental del microscopio electrónico.

La biología celular se centra en la comprensión del funcionamiento de los


sistemas celulares, de cómo estas células se regulan y la comprensión del
funcionamiento de sus estructuras. Una disciplina afín es la biología molecular

La célula es la unidad fundamental de la vida, representa la unidad


morfológica, fisiológica, genética y evolutiva de todos los seres vivos. Las
células vivientes difieren unas de otras en forma, tamaño, estructura interna,
funciones, etc. No existe pues, célula viva típica, hay una gran variedad en
morfología y función, pero todas coinciden en la estructura básica: Envoltura
celular, membrana, citoplasma y núcleo.
En las células vegetales podemos encontrar además la presencia de plastos y
pared celular celulósica y la ausencia de centriolo y lisosomas.
Sin embargo, hay características comunes a la mayor parte de las células, de
este modo, las cuatro partes básicas corresponden a:
a. Envoltura celular
b. Membrana celular
c. Citoplasma
d. Núcleo

DIFERENCIAS ENTRE CELULA ANIMAL Y VEGETAL

CÉLULA ANIMAL.
1. Presenta una membrana celular simple.
2. La célula animal no lleva plastidios.
3. El número de vacuolas es muy reducido.
4. Tiene centrosoma.
5. Presenta lisosomas.

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6. No se realiza la función de fotosíntesis (nutrición heterótrofa).
7. Nutrición heterótrofa.

CÉLULA VEGETAL
1. Presenta una membrana celulósica o pared celular, rígida que contiene
celulosa.
2. Presenta plastidios o plastos como el cloroplasto.
3. Presenta numerosos grupos de vacuolas.
4. No tiene centrosoma.
5. Carece de lisosomas.
6. Se realiza función de fotosíntesis (nutrición autótrofa).

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Para observar célula animal:


1. Con un hisopo haga un raspado del epitelio bucal.
2. Coloque en una lámina porta objetos la muestra obtenida.
3. Realice un frotis en una sola dirección (extendido de la muestra).
4. Secar al medio ambiente durante 5 minutos.
5. Agregar 1 a 2 gotas de azul de metileno y esperar 3 minutos.
6. Echar unas gotas de agua sobre la preparación para lavar el exceso.
7. Observe al microscopio a menor y mayor aumento. Esquematice.

Para observar célula vegetal:


 Célula de epidermis de la cebolla (Allium cepa)

1. Coloque una gota de agua en el


centro de la lámina.
2. Con una pinza desprenda la
epidermis de la cara interior de un
catáfila de cebolla, la capa
epidérmica deberá ser

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transparente.
3. Coloque en la lámina porta objeto la epidermis de la cebolla.
4. Extienda cualquier doblez de la epidermis.
5. Coloque una lámina cubre objetos sobre la epidermis; no aplique
presión alguna sobre la lámina.
6. Observe con los objetivos: seco débil y seco fuerte. Esquematice.
7. Una vez observado la muestra anterior, separe la lámina del
microscopio, levante el cubre objetos para agregarle 2 gotas de lugol
y espere unos 3 minutos.
8. Si hay exceso de colorante, lave la muestra con cuidado o elimine con
papel servilleta.
9. Coloque nuevamente el cubre objeto y observe.

 Célula de Elodea (Planta acuática)

1. Coloque una gota de agua en el centro de la lámina.


2. Tome una hoja de Elodea, llévela al porta objeto.
3. Coloque una laminilla. Luego observe con los objetivos: seco débil y
seco fuerte. Esquematice.

Pared celular

Cloroplastos

Citoplasma

Célula de Geranio
1. Coloque una gota de agua en el centro de la lámina.
2. Con una pinza desprenda la epidermis de la cara interior de la hoja, la
capa epidérmica deberá ser transparente.

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3. Coloque en la lámina porta objeto la epidermis del geranio.
4. Extienda cualquier doblez de la epidermis.
5. Coloque una lámina cubre objetos sobre la epidermis; no aplique presión
alguna sobre la lámina.
6. Observe con los objetivos: seco débil y seco fuerte. Esquematice.
7. Una vez observado la muestra anterior, separe la lámina del microscopio,
levante el cubre objetos para agregarle 2 gotas de lugol y espere unos 3
minutos.
8. Si hay exceso de colorante, lave la muestra con cuidado o elimine con
papel servilleta.
9. Coloque nuevamente el cubre objeto y observe.

Ostiolo

Célula estomática

FUNDAMENTO TEÓRICO-ÓSMOSIS

La membrana celular además de delimitar y proteger las células, se encarga de


regular el transporte de materiales entre éstas y su medio circundante.

Existen diferentes tipos de transporte, dependiendo de la naturaleza de las


sustancias transportadas y de la cantidad en que se encuentren, dentro o fuera de
las células.

A escala celular se reconocen 2 tipos de transporte: el pasivo y el activo. El


transporte pasivo es el movimiento de moléculas a través de los poros de la
membrana celular, desde una zona de alta concentración a otra de menor
concentración; el proceso no implica gasto de energía. La difusión y osmosis son
ejemplo de este tipo de transporte. La ósmosis es el movimiento de moléculas de
agua a través de una membrana semipermeable.

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La difusión es el movimiento de moléculas de una sustancia a través de la
membrana desde una zona de mayor concentración de moléculas a una de menor
concentración. Es un proceso físico irreversible, en el que partículas materiales se
introducen en un medio que inicialmente estaba ausente, aumentando la entropía
del sistema conjunto formado por las partículas difundidas o soluto y el medio
donde se difunden o disolvente.

Normalmente los procesos de difusión están sujetos a la Ley de Fick. La membrana


semipermeable puede permitir el paso de partículas y disolvente siempre a favor
del gradiente de concentración. La difusión, proceso que no requiere aporte
energético, es frecuente como forma de intercambio celular.

La ósmosis es el movimiento de moléculas de agua a través de una membrana


semipermeable, se la define como un fenómeno en el que se produce el paso o
difusión de un disolvente a través de una membrana semipermeable, la cual
permite el paso del disolvente pero no el del soluto, desde una disolución más
diluida a otra más concentrada.

La capacidad que tiene el agua de atravesar la membrana plasmática, que se


comporta como una membrana semipermeable, depende de la diferencia de
concentración entre los líquidos extracelular e intracelular y viene determinada por
la presencia de sales minerales y moléculas orgánicas disueltas.

SOLUCIONES FISIOLÓGICAS

El agua se mueve fácilmente cruzando las membranas celulares, a través de


canales especiales revestidos de proteína. Si el total de la concentración de todos
los solutos disueltos no es igual en ambos lados, habrá un movimiento neto de
moléculas de agua hacia dentro o fuera de la célula. Para donde es el movimiento
del agua, depende si el medio donde se encuentra la célula es isotónico, hipotónico
o hipertónico.

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Solución isotónica
Cuando dos medios son isotónicos, el total de la
concentración molar de los solutos disueltos es el mismo
en ambos.
Cuando las células están en una solución isotónica, el
movimiento de agua hacia afuera está balanceado con el
movimiento de agua hacia adentro. Un 0.9% de solución
de NaCl (salina) es isotónica para las células animales. Note que el número de
moléculas de agua en ambos lados de la membrana, permaneces esencialmente
sin cambios.

Solución hipotónica

Hipotónico viene del griego "hypo," que significa bajo, y


"tonos," que significa dilatarse. En una solución hipotónica,
el total de la concentración molar de todas las partículas
disueltas, es menos que el de otra solución o menos que el
de la célula.

Si las concentraciones de solutos disueltos son menos fuera de la célula que


dentro, la concentración de agua afuera es correspondientemente más grande.
Cuando una célula es expuesta a condiciones hipotónicas, hay un movimiento neto
de agua hacia dentro de la célula. Las células sin pared celular se inflan y pueden
explotar (lisis). Si el exceso de agua no es removido de la célula. Las células con
paredes celulares a menudo se benefician de la presión que da rigidez en medios
hipotónicos. Note que el número de moléculas de agua dentro de la célula se
incrementa con el tiempo, y la célula se hincha como resultado.

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Solución hipertónica

Hipertónica viene del griego "hyper," que significa sobre


y "tonos," que significa expandirse. En una solución
hipertónica, la concentración molar total de todas las
partículas de soluto disuelto, es más grande que el de
la otra solución, o más grande que la concentración de
la célula.

Si las concentraciones de solutos disueltos son mayores fuera de la célula, la


concentración de agua es correspondientemente menor. Como resultado, el agua
dentro de la célula sale para alcanzar el equilibrio, produciendo un encogimiento de la
célula. Al perder agua la célula también pierden su habilidad para funcionar o
dividirse. Los medios hipertónicos, como la salmuera o jarabes, han sido utilizados
desde la antigüedad para preservar la comida, debido a que los microbios que
causan la putrefacción, son deshidratados en esos medios hipertónicos y son
incapaces de funcionar. Note que el número de moléculas de agua dentro de la célula
disminuye con el tiempo, y la célula se encoge como resultado.

I. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Experiencia 1: Permeabilidad celular en epidermis de cebolla


 Haga tres preparaciones húmedas de epidermis de cebolla.
 En la primera lámina coloque tres gotas de solución salina 0.9%
(solución isotónica), en la segunda lámina coloque solución salina 2%
(solución hipertónica) y en la última lámina coloque solución salina
0.2% (solución hipotónica).
 Marque cada una de las preparaciones.
 Cubra las diferentes preparaciones con las laminillas.
 Examine al microscopio cada una de las preparaciones con los
objetivos de menor y mayor aumento.

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 Dibuje sus observaciones. Incluya los dibujos con el aumento en
donde se note mejor la estructura.
Experiencia 2: Permeabilidad celular en hoja de Elodea

 Haga tres preparaciones húmedas de la hojita de Elodea.


 Adiciónele tres gotas de solución isotónica a la primera lámina, tres
gotas de solución hipertónica a la segunda lámina y finalmente tres
gotas de solución hipotónica a la tercera lámina.
 Marque cada una de las preparaciones.
 Cubra las diferentes preparaciones con laminillas.
 Observe con menor y mayor aumento.
 Dibuje sus observaciones.

Experiencia 3: Permeabilidad celular en eritrocitos

 Haga tres preparaciones colocando una gota de sangre sobre láminas


portaobjeto.

 Adiciónele tres gotas de solución isotónica a la primera lámina, tres


gotas de solución hipertónica a la segunda lámina y finalmente tres
gotas de solución hipotónica a la tercera lámina.
 Marque cada una de las preparaciones.
 Cubra las diferentes preparaciones con laminillas.
 Observe con menor y mayor aumento.
 Note el cambio que se produce en las células
 Dibuje sus observaciones.

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Plasmólisis en células de cebolla Plasmólisis en Elodea Crenación En glóbulos rojos

II. CUESTIONARIO

1. ¿Por qué es posible obtener algunas células por simple frotamiento del
interior de la mejilla?
2. ¿Qué diferencia existen entre una célula eucariota y una célula
procariota?
3. ¿Qué es una célula animal?
4. ¿Con qué finalidad empleamos el Lugol?
5. ¿Qué es una célula vegetal y cuáles son sus componentes?
6. ¿Por qué la pared celular es más fácil de observar que las estructuras de
la áreas internas de la célula?
7. ¿Qué estructuras observó en la célula de Elodea?
8. ¿Qué diferencias estructurales existen entre las células del epitelio bucal
con las de la cebolla?
9. ¿Qué es la ciclosis?
10. ¿A qué se llama solución hipertónica, hipotónica e isotónica?
11. ¿Qué es el osmómetro y en qué consiste?
12. ¿Qué es y en qué tipo de células actúa la bomba de Sodio / Potasio?
13. ¿Qué mecanismo presentan los peces para vivir, algunos en el agua
salada y otros en el agua dulce? Explique.
14. ¿Qué puedes decir sobre la concentración osmótica del citoplasma de
las células de la epidermis de cebolla?
15. ¿Se habrían obtenido los mismos resultados si se hubiera empleado un
alga marina en el experimento?
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PRÁCTICA 10: PLASTIDIOS E INCLUSIONES CITOPLASMÁTICAS

I. COMPETENCIAS:

 Reconoce algunos orgánulos vegetales: cromoplastos y amiloplastos, así


como las diferentes inclusiones citoplasmáticas.

II. MATERIALES
 Microscopio óptico
 Portaobjetos y cubreobjetos
 Soporte para tinciones
 Cuchilla o bisturí
 Lugol.

Material biológico:

 Papa  Tomates
 Camote  Pimiento
 Yuca  Zanahoria
 Semillas de trigo  Penca de tuna
 Arroz  Ajos.

III. FUNDAMENTO TEÓRICO


Los vegetales son seres autótrofos fotosintéticos. Gracias a la clorofila son
capaces de sintetizar materia orgánica, fundamentalmente glúcidos, a partir de

compuestos inorgánicos como el CO2. Los plastos son los principales orgánulos

implicados en dicho proceso.

A. LOS PLASTIDIOS
Son orgánulos exclusivos de vegetales, provistos de una doble membrana y cuya
función es almacenar y sintetizar determinadas sustancias.

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Pueden ser:
 CLOROPLASTOS: Son los plastidios más importantes, dentro de ellos se
encuentra la clorofila y por eso los vegetales pueden fotosintetizar.

 CROMOPLASTOS: Son plastidios fotosintéticamente inactivos, contiene


pigmentos amarillos, (Xantofilas) anaranjados (Carotenos) y rojos (Licopeno)
Son los responsables del color de las flores y frutos. Sirven como indicadores de
madurez en función de su concentración además poseen proteínas lípidos y RNA.

 LEUCOPLASTOS
Presentes en órganos de reserva. Los encontramos en tubérculos (papa), rizomas
(batata), frutos (banana), y semillas (maíz). Es una fuente de energía.

 AMILOPLASTOS
Son leucoplastos especializados en la reserva de almidón

B. INCLUSIONES CITOPLASMÁTICAS:

 CRISTALES DE OXALATO DE CALCIO:

La formación de cristales de oxalato de calcio parece jugar un papel central en


importantes funciones de las plantas, entre las que se incluyen la regulación en los
niveles de calcio, la protección contra la herbivoría y la detoxificación de metales
pesados. Las morfologías especie-específicas que presentan estos cristales, indican que
su formación está altamente regulada. Esta regulación es llevada a cabo por una matriz
proteica que se encuentra dentro de la vacuola de células altamente especializadas
llamadas idioblastos. Esta matriz controla la forma, orientación y estado de hi dratación
de los cristales de oxalato de calcio formados por la planta, dotándolos de características
especiales que no comparten con su contraparte inorgánica.

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La mayoría de las plantas producen cristales de oxalato de calcio, los cuales pueden
representar más del 85 % del peso seco de algunas de ellas (cactáceas) (1). Los
primeros reportes de estos cristales en las plantas fueron realizados por Leeuwenhoek
en el siglo XVII; sin embargo, no se les dio mucha importancia, ya que se les consideró
sólo como productos de desecho. Debido a que presentaban morfologías peculiares y
una compleja fenomenología asociada a su formación, en la década de los años 70 se
iniciaron una serie de estudios para demostrar que estos cristales no eran simples
productos de desecho.
Cristales de este mineral han sido observados virtualmente en todos los tipos de tejidos
vegetales e igualmente en algunas bacterias, hongos y animales. La formación de
oxalato de calcio es un proceso esencial en la mayoría de las especies de plantas
conocidas y en algunos casos cerca del 90 % del calcio total en la planta puede
encontrarse secuestrado en forma de cristales de oxalato de calcio; sin embargo, este
porcentaje varía entre las diferentes especies de plantas que presentan este tipo de
cristales. Lo anterior parece indicar que su formación representa el mayor mecanismo de
regulación de los niveles de calcio en la planta.
Las plantas producen cristales de oxalato de calcio en una gran variedad de formas y
tamaños, aunque la mayoría de los cristales pueden clasificarse dentro de cuatro tipos
principales en base a su morfología: rafidios (cristales aciculares en agregados), drusas
(agregados cristalinos esféricos), estiloides (cristales aciculares) y prismas. (Fig.1).
Generalmente la morfología de los cristales y su distribución dentro de los tejidos de la
planta son especie específicos.
El tipo de polimorfo del oxalato de calcio presente en las plantas también es especie-
específico y puede ser la whewellita (oxalato de calcio monohidratado) o la weddellita
(oxalato de calcio dihidratado)

CÉLULAS FORMADORAS DE CRISTALES


Los idioblastos son células que están especializadas para la acumulación de Ca2+ en
forma de oxalato de calcio cristalino. Estas células crecen muy rápidamente y se
diferencian de todas las demás células vegetales por su gran tamaño.
Los idioblastos jóvenes son células extremadamente activas en relación a la síntesis de
proteínas, además poseen una gran cantidad de mitocondrias, aparato de Golgi,

Mg. Marco Antonio Mesía Guevara Página 71


ribosomas y retículo endoplásmico, organelos asociados con los procesos metabólicos,
los cuales proveen la energía para el secuestro del calcio, la síntesis de proteínas,
lípidos y polisacáridos y la producción de ácido oxálico.
Cuando los idioblastos maduran totalmente (es decir poseen un cristal totalmente
formado en su interior) inhiben el flujo de calcio hacia su interior, lo cual demuestra su
capacidad para regular los procesos de transporte de calcio a través de la membrana
plasmática. A pesar de que el cristal ocupa casi todo el espacio disponible en los
idioblastos, estos permanecen activos, lo cual está relacionado con su habilidad para
utilizar el calcio cristalino almacenado bajo condiciones de déficit de calcio en la planta.

TIPOS DE CRISTALES DE OXALATO CÁLCICO:


DRUSAS
Cristales de oxalato cálcico con numerosas caras y puntas muy agudas.
Tamaño: 5-10 nm de diámetro.
Normalmente hay una por célula.

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RAFIDIOS
Cristales de oxalatos cálcicos muy largos, finos y afilados que se presentan agrupados y
en gran número formando un haz dentro de la célula.
Algunos están bajo presión dentro de la célula.

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

CROMOPLASTOS.

1. Partir una zanahoria y raspar con la punta del bisturí, depositando el producto
obtenido en un portaobjeto.
2. Adicionar una gota de agua y colocar el cubreobjetos.
3. Observar al microscopio a menor y mayor aumento.
4. Esquematice sus observaciones.
5. Repetir con tomate, pimiento.

LEUCOPLASTOS: AMILOPLASTOS.

1. Partir una patata y raspar con la punta del bisturí,


depositando el producto obtenido en dos porta-
objetos.
2. A la primera lámina adicionar una gota de agua y
colocar la lámina cubreobjetos.
3. A la segunda lámina adicionar una gota de Lugol y colocar la lámina cubreobjetos.
4. Observe al microscopio a menor y mayor aumento.

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5. Esquematice sus observaciones.
6. Repetir el proceso con camote, yuca y semillas de arroz, trigo.

INCLUSIONES CITOPLASMÁTICAS: CRISTALES

OBSERVACIÓN DE DRUSAS

1. Realizar un corte fino de la aparte interna del tallo de una tuna y extenderla sobre
una lámina.
2. Agregar una gota de agua y cubrir con una lámina cubreobjetos.
3. Observar a menor y mayor aumento.
4. Esquematice sus observaciones.

OBSERVACION DE RAFIDIOS

1. Exprimir un trozo de hoja de una planta ornamental que el profesor le


proporcionara.
2. Extender sobre un portaobjetos.
3. Cubrir con una lámina cubreobjetos.
4. Observar a menor y mayor aumento.
5. Esquematice sus observaciones.

ANÁLISIS Y CONCLUSIONES.

Realizar un informe en el que se incluyan las figuras de cada uno de los tipos de
plastos, y cristales analizando las diferencias de los mismos.

V. CUESTIONARIO:
1- ¿Qué son los cromoplastos y leucoplastos y qué funciones cumplen?
2- ¿Qué importancia tienen los cristales de oxalato de calcio para la planta?
3- ¿Cuál es la razón de utilizar Lugol para el reconocimiento de leucoplastos.
4- Defina cada una de las inclusiones observadas en la práctica.

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PRÁCTICA 11: CARIOTIPO

I. COMPETENCIAS:
Al finalizar esta práctica el alumno:

 Reconoce los pares cromosómicos humanos a partir de las placas


metafísicas.
 Construye el Cariotipo Humano sobre la base de las características
establecidas.

II. MATERIALES
Foto de placas matafásicas (Anexo)
Lápiz
Tijeras
Regla
Goma

III. FUNDAMENTO TEORICO

El conjunto de cromosomas de un individuo constituye su cariotipo. En 1956 Tjio y


Levan demostraron que el cariotipo humano está formado por 46 cromosomas, o lo que
es igual, 23 parejas. Para estudiar los cromosomas humanos se cultivan linfocitos y
mientras se están dividiendo se tratan con colchicina, que interrumpe las mitosis en
metafase, que es el momento más adecuado para observar los cromosomas. Después
se someten a una solución hipotónica para que se hinchen y dispersen, y por último se
tiñen con orceína acética y se fotografían a través del microscopio.

Los cromosomas se diferencian por su tamaño y por su forma; en 1960 un grupo de


expertos acordó ordenar los cromosomas humanos de mayor a menor tamaño, y dentro
del mismo tamaño, por la posición del centrómero. Se clasificaron después en 7 grupos
designados por letras (desde la A a la G). Un idiograma es la representación
esquemática del tamaño, forma y patrón de bandas de todo el complemento

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cromosómico, los cromosomas se sitúan alineados por el centrómero, y con el brazo
largo siempre hacia abajo.

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TIPO DE CARACTERÍSTICAS Y
SÍNDROME
MUTACIÓN SÍNTOMAS DE LA MUTACIÓN
Síndrome de Trisomía del 21 Se caracteriza por retraso mental,
Down o (tienen 47 ojos oblicuos, trastornos cardiacos,
mongolismo cromosomas) crecimiento retardado, propensión a
las infecciones, etc. Es más frecuente
en hijos de madres adolescentes o de
edades tardías, por anomalías en la
meiosis.
Síndrome de Trisomía del 18 Anomalías en la forma de la cabeza,
Edwards (tienen 47 boca pequeña, mentón huido, lesión
cromosomas) cardiaca y membrana interdigital en
los pies.
Síndrome de Trisomía del 13 Labio leporino, lesiones cardiacas,
Patau o del 15 frecuentemente dedos
(tienen 47 supernumerarios, etc.
cromosomas)
Síndrome de 44 autosomas Varones de estatura elevada, brazos
Klinefelter + XXY y piernas largos, bajo coeficiente de
(intersexo inteligencia, desarrollo de mamas y
masculino) esterilidad.
Síndrome de 44 autosomas Elevada estatura, personalidad
duplo Y + XYY infantil, bajo coeficiente intelectual,
tendencia a la agresividad y al
comportamiento antisocial, etc.
Síndrome de 44 autosomas Mujeres con cuello ancho y aspecto
Turner (intersexo +X hombruno, tórax en forma de escudo,
femenino) baja estatura, atrofia de ovarios, etc.
Síndrome de 44 autosomas Infantilismo y escaso desarrollo de las
triple X + XXX mamas y de los genitales externos.

IV. PROCEDIMIENTO

Realiza los idiogramas correspondientes a los cariotipos de los individuos de las páginas
adjuntas. Para ello recorta los cromosomas y pégalos en los lugares correspondientes,
fijándote en el cuadro que acompaña. En cada caso indica su sexo y, si la hay, tipo de
anomalía cromosómica y síndrome a que da lugar.

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INDIVIDUO Nº 1:

A B
1 2 3 4 5

C
X 6 7 8 9 10 11 12

D E
13 14 15 16 17 18

F G
19 20 Y 21 22

SEXO: ..............................

ANOMALÍA CROMOSÓMICA: ..................................................................

SÍNDROME: ...................................................

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INDIVIDUO Nº 2:

A B
1 2 3 4 5

C
X 6 7 8 9 10 11 12

D E
13 14 15 16 17 18

F G
19 20 Y 21 22

SEXO: ..............................

ANOMALÍA CROMOSÓMICA: ..................................................................

SÍNDROME: ...................................................

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INDIVIDUO Nº 3:

A B
1 2 3 4 5

C
X 6 7 8 9 10 11 12

D E
13 14 15 16 17 18

F G
19 20 Y 21 22

SEXO: ..............................

ANOMALÍA CROMOSÓMICA: ..................................................................

SÍNDROME: ...................................................

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INDIVIDUO 1

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INDIVIDUO 2:

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INDIVIDUO 3:

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PRÁCTICA 12: MITOSIS

I. COMPETENCIAS:
Al finalizar esta práctica el alumno:
 Reconoce cada una de las fases de la mitosis en células meristemáticas
de raíz de cebolla (Allium cepa)

II. MATERIALES
 Raíces de cebolla
 Bisturí
 Láminas portaobjetos
 Laminillas
 Orceína acética
 Lápiz con borrador en un extremo
 Microscopios

III. FUNDAMENTO TEÓRICO

La división celular es el fenómeno citológico por el que una célula origina dos
células hijas, cada una de las cuales recibe idéntica información genética. Consta de dos
etapas: la cariocinesis o mitosis que asegura el reparto equitativo del material
hereditario y la citocinesis o división del citoplasma.

El significado biológico de la mitosis es asegurar la conservación del patrimonio


hereditario nuclear en el proceso de formación de un individuo adulto a partir de una
célula inicial o cigoto.

La mitosis consta de las siguientes etapas: profase, metafase, anafase y telofase.

(a) Antes de la profase hay una interface, durante la cual se produce la duplicación del
material hereditario, con lo cual los cromosomas están formados por dos cromátidas

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unidas mediante el centrómero.

Profase. La cromatina comienza a condensarse, a medida que avanza este estadio


desaparece el nucléolo. Los “cromosomas” aparecen como filamentos delgados.

Metafase. Cada cromosoma, integrado por dos cromátidas hermanas, se dispone con su
centrómero en el plano ecuatorial.

Anafase. Las cromátidas hermanas se separan y comienzan a migrar hacia los polos
opuestos de la célula. Ahora los cromosomas se observan formados por una sola
cromátida, con los centrómeros dispuestos hacia los polos y los telómeros hacia el centro
de la célula.

Telofase. Los nucléolos reaparecen y los cromosomas comienzan a descondensarse,


con lo que dejan de ser visibles. La membrana nuclear reaparece alrededor de cada
grupo de cromosomas, delimitándose así dos zonas nucleares, una en cada polo de la
célula. Las membranas se forman a partir del retículo endoplásmico.

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Preparación previa.

Tres o cuatro días antes de hacer la práctica se pone un bulbo de cebolla en un vaso de
precipitados lleno de agua, de tal manera que la parte inferior del mismo esté en
contacto con el agua. Al cabo de esos tres o cuatro días se habrán formado numerosas
raicillas, cuyos ápices se utilizarán en esta práctica.

1. Con una tijera se corta el extremo de varias raicillas, procurando que su longitud
sea de unos 2 a 3 mm. ya que es en esta zona de la raíz donde se encuentran las
células en división.

2. Se depositan los trozos de raíz en un vidrio de reloj, en el que previamente se


han vertido de 2 a 3 ml de orceína A, cuya función es la de reblandecer las membranas
celulares.

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3. Con ayuda de unas pinzas de madera se calienta el vidrio de reloj a la llama del
mechero durante 8 minutos, teniendo gran cuidado de que no entre en ebullición (si es
necesario se retirará el vidrio de reloj para que no se produzca la ebullición); el
calentamiento termina cuando se observa la emisión de unos tenues vapores.

4. Se coge con las pinzas de punta fina uno de los extremos (ápice) de la raíz y se
coloca en un portaobjetos añadiendo una gota de orceína B y se deja actuar durante un
minuto. La función de la orceína B es la de completar el proceso de teñido de los
cromosomas.

5. Hacer un squash: que consiste básicamente en poner la preparación en un


portaobjetos y aplastarla con otro mientras este otro se gira.,la presión se ejerce para
separar las células, que no haya capas de estas para que la observación se pueda hacer
claramente

6. Se observa la preparación con el microscopio empezando con el objetivo de menor


aumento para luego utilizar los de mayor aumento.

Resultados

Dibujar lo observado a través del microscopio, indicando: número de aumentos con lo que
se está trabajando, estructuras observadas y etapas de la mitosis que se han visto.

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PRÁCTICA 13: LEYES DE MENDEL

I. COMPETENCIAS
 Realiza cruzamientos simulados para comprobar los resultados estadísticos de
las Leyes de Mendel.
II. MATERIALES

 20 fichas circulares de cartoncillo negro y 20 fichas de cartoncillo blanco, todas de


5 cm. de diámetro y con una ranura radial.

 Frijoles de dos colores contrastantes (claro y obscuro)


 Dos bolsas de papel

III. FUNDAMENTO TEÓRICO

La Ciencia explica los fenómenos de la naturaleza mediante teorías que son en realidad
la interpretación de cómo actúan y se relacionan los diferentes factores que intervienen
en el fenómeno que se está estudiando. Estas teorías pueden representarse en el
lenguaje matemático o por otros medios. La herencia de gran cantidad de características
somáticas de los seres vivos obedece a las Leyes de Mendel.
Al cruzar dos individuos Homocigotos con una característica contrastante, se obtendrá
en la Primera Generación (F1), un 100% de Híbridos, todos con el carácter Dominante.
Si se cruzan dos Híbridos de la Primera Generación, se obtendrá en la Segunda (F 2),
una proporción de 3:1 en el Fenotipo y una proporción de 1:2:1 en el Genotipo.

IV. PROCEDIMIENTO

Se maneja un modelo con fichas blancas y negras; frijoles claros y obscuros: cada ficha
representa un Gameto o célula sexual que contiene un Gene Alelo. Las blancas llevan el
Alelo Recesivo y las negras el Alelo Dominante, (número Haploide o “n”).

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Cada pareja de fichas ensambladas representa un individuo (número “2n”).
Si son dos blancas, representa a un individuo con carácter puro Recesivo.
Si son dos negras, representa a un individuo con carácter puro Dominante.
Si es una blanca y una negra, representa a un Híbrido.
Los frijoles representan al Fenotipo. El frijol claro representa el carácter recesivo y el
obscuro el dominante.

1. En una bolsa de papel, se colocan las fichas ensambladas de color negro, y en la otra
bolsa las fichas ensambladas de color blanco, número 2 n de cromosomas. Ambas
representan los genotipos de los individuos Homocigotos con carácter Dominante y los
Homocigotos con carácter Recesivo.
2. Para obtener la primera generación Filial (F 1), se separan las fichas ensambladas de
cada bolsa, esto simula la meiosis o división celular para producir los gametos, los
cuales tienen el número “n” de cromosomas.
Se saca una ficha sencilla de cada bolsa y se unen, esto representa la fecundación.
Las fichas ensambladas se colocan en la mesa y junto se pone un frijol que representa
el fenotipo. Se anotan los resultados y la proporción.

3. Segunda Generación Filial (F 2). Las fichas ensambladas obtenidas anteriormente se


distribuyen equitativamente en las dos bolsas vacías.

Se separan dentro de la bolsa (meiosis) y se repite el procedimiento del punto 2


Se sacan ala azar las fichas de ambas bolsas para formar parejas, pues esto demuestra
la unión aleatoria de los gametos en la naturaleza.

4. Se anota cuántos “puros” Recesivos, cuántos “puros” dominantes y cuántos “híbridos”


se obtuvieron.
5. Se anotan los Fenotipos obtenidos
6. En el pizarrón, se concentran en un cuadro los resultados de todos los equipos.
7. Se suman las columnas para comprobar que se presentan las proporciones
aproximadas de 3:1 del Fenotipo y de 1:2:1 de Genotipo como lo establece la Ley de la
Segregación de Caracteres.

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V. CUESTIONARIO
1. ¿Qué importancia tienen los trabajos de Mendel?
2. ¿Con que organismos trabajó Mendel?
3. Investigue ¿Cuáles son los dos principios de probabilidad de importancia
para la genética?
4. ¿Sale exacta la proporción 3:1 y 1:2:1? ¿Por qué?
5. Analice el dibujo o Cuadro de Punnett donde se muestra la herencia de
la forma de la semilla de chícharo. Complete el Cuadro de Punnett,
suponga que los progenitores son Homocigotos para el carácter dominante
y recesivo. Interprete el cuadro.

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PRÁCTICA 14: LA FERMENTACIÓN

FERMENTACIÓN LÁCTICA Y BACTERIAS DEL YOGUR.

I. COMPETENCIAS
 Obtiene yogur por fermentación láctica.
 Distingue las bacterias causantes de la fermentación.
II. MATERIALES
 Microscopio  Pipeta de 5 mL
 Portaobjetos  Varilla de vidrio
 Asa de siembra  Papel indicador de pH
 Mechero  Metanol ò xileno
 Estufa de cultivo o yogurtera  Cristal violeta (o azul de
 Matraz de 250 mL metileno).

III. FUNDAMENTO TEÓRICO

Las fermentaciones son procesos de respiración anaerobia realizados por ciertas


bacterias y levaduras. En ellos, el aceptor de H+ y electrones cedidos por una molécula
orgánica no es el oxígeno sino otra molécula. Dependiendo de cuál sea esta molécula se
obtendrán distintos productos finales. En el caso de la fermentación láctica, la molécula
aceptora es el ácido pirúvico y el producto resultante es el ácido láctico. Esta
fermentación se emplea en la industria alimentaria para obtener derivados lácteos como
el yogur.

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El yogur es un producto producido por la fermentación natural de la leche. A escala
industrial se realiza la fermentación añadiendo a la leche dosis del 3-4 % de una
asociación de dos cepas bacterianas. El Streptococcus thermophilus, poco productor de
ácido, pero muy aromático, y el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante. En esta
preparación se podrán, por tanto, observar dos morfologías bacterianas distintas (cocos
y bacilos) y un tipo de agrupación (estreptococos, cocos en cadenas arrosariadas).
Además, el tamaño del lactobacilo (unos 30 um de longitud) facilita la observación
aunque no se tenga mucha práctica con el enfoque del microscopio.
IV. PROCEDIMIENTO

Experimento 1. Obtención de yogur por fermentación láctica.


1. Coloca 100 mL de leche en el matraz y añade 1 mL de yogur.
2. Incuba el matraz en la estufa durante 24 horas a 37 ºC.
3. Saca el matraz y observa el contenido.
4. Mueve con la varilla para homogeneizarlo e introduce una tipa de papel indicador de
pH.
5. Describe lo observado en el matraz y en el papel indicador.
Para realizar este experimento también puedes utilizar una yogurtera doméstica.

Experimento 2. Observación de las bacterias causantes de la fermentación.

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1. Con el asa de siembra toma una gota de yogur y deposítala sobre un portaobjetos
limpio. Añade una gota de metanol ò también xileno para desengrasar y mézclala con el
yogur.
2. Extiende la mezcla y déjala secar completamente. Luego pasa el portaobjetos por la
llama del mechero 4 o 5 veces para fijar la preparación.
3. Aplica el colorante cristal violeta durante 2 minutos.
4. Lava cuidadosamente con agua destilada hasta que el líquido no salga teñido y
deposita sobre ella un cubre cuidando que no se formen burbujas.
5. Observa al microscopio con el objetivo adecuado (utiliza los mayores aumentos)
6. Dibuja lo que ha observado.

V. CUESTIONARIO
1. Elabora hipótesis sobre lo sucedido en el experimento 1.
2. ¿Por qué se utiliza papel indicador de pH en este experimento?
3. Si la leche utilizada no estuviera pasteurizada o esterilizada, ¿El producto obtenido
hubiera sido distinto?
4. ¿Qué tipo de microorganismos observas al microscopio?

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