Synthèse
Ann Biol Clin 2013 ; 71 (4) : 401-7
Importance de l’étape préanalytique en hémostase
Importance of preanalytical step in hemostasis
Rym Ellouze
Sami Guermazi
Laboratoire d’hématologie, Hôpital
Copyright © 2020 John Libbey Eurotext. Téléchargé par M. FRANCIS KAMBEMBO le 31/07/2020.
Charles-Nicolle, Tunis, Tunisie
<rym.ellouze@yahoo.fr>
Article reçu le 11 novembre 2012,
accepté le 1 février 2013
La fiabilité des résultats d’analyses en hémostase dépend
étroitement des conditions préanalytiques. Ce sujet ancien
est de nouveau d’actualité ; le regroupement des labo-
ratoires et la sous-traitance des analyses sont de plus
en plus fréquents, créant une situation nouvelle avec un
déplacement des prélèvements sur des dizaines voire des
centaines de kilomètres. L’automatisation des laboratoires
d’hémostase et l’amélioration de la qualité de la phase
analytique n’assurent pas, parfois, aux yeux du clinicien
la fiabilité qu’il aurait souhaité. L’étape préanalytique
demeure donc un maillon faible, vulnérable et le rôle du
biologiste doit dépasser le cadre de son laboratoire pour
parer aux failles qui persistent avant l’arrivée du tube au
laboratoire [1]. Il est nécessaire d’assurer un respect des
procédures recommandées pour des résultats fiables [2, 3].
Le biologiste doit sensibiliser le milieu médical et para-
doi:10.1684/abc.2013.0870
médical environnant sur l’importance capitale du respect
des conditions préanalytiques et les facteurs d’influences
Tirés à part : R. Ellouze
Pour citer cet article : Ellouze R, Guermazi S. Importance de l’étape préanalytique en hémostase. Ann Biol Clin 2013 ; 71(4) : 401-7 doi:10.1684/abc.2013.0870
Résumé. Les conditions préanalytiques constituent un volet majeur
d’assurance de la fiabilité et de la validité des résultats en hémostase. Elles
s’étendent depuis la prescription de l’analyse, la préparation du patient, la qua-
lité du prélèvement lui-même et les conditions de transport, de centrifugation et
de conservation jusqu’au moment de l’analyse et la mise en route de l’examen.
Elles constituent les sources les plus importantes des résultats erronés ou non
interprétables d’autant que la qualité de l’étape analytique a connu de grands
progrès des instruments et des réactifs. La maîtrise et les efforts de standardisa-
tion de ces conditions préanalytiques sont primordiaux pour assurer la qualité
de l’exploration en hémostase.
Mots clés : préanalytique, hémostase, prélèvement, qualité, plasma
Abstract. The preanalytical conditions are the major component to assure the
reliability and validity of results in hemostasis. They extend from the requi-
rement of analysis, patient preparation, blood collection and the conditions of
transport, centrifugation and plasma storage until analysis. They are the most
important sources of erroneous or inconclusive results; mainly the quality of the
analytical stage has seen great progress of instruments and reagents. Control and
standardization efforts of these preanalytical conditions are essential to ensure
the quality of exploration in hemostasis.
Key words: preanalytic, hemostasis, blood collection, quality, plasma
et d’erreurs les plus importants qui conditionnent la fiabi-
lité des résultats du laboratoire. En effet, selon des données
fiables, les erreurs préanalytiques représentent encore près
de 60 % à 70 % de toutes les erreurs survenant dans le
laboratoire [1, 4, 5], constituant une perte de temps pour
le patient et un surcoût. La figure 1 illustre l’importance
de l’étape préanalytique dans la réalisation d’un bilan
d’hémostase.
Nous rappelons ici les principales recommandations sur
cette phase préanalytique.
La prescription de l’analyse
Cette étape fait partie de la phase préanalytique et parti-
cipe à la qualité de l’analyse, non sur le plan technique,
mais plutôt de sa pertinence et de ses conséquences diag-
nostiques ou thérapeutiques pour le patient. Le médecin
prescrit des tests dont il connaît les indications, pas toujours
les limites voire les contre-indications, surtout s’il s’agit de
tests spécialisés récents. Ainsi, le dosage des D-dimères
401
 Synthèse
Prescription Interprétation
Clinicien
- Préparation du patient
- Méthode du prélèvement
Prélèvement
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- Choix du tube
- Anticoagulant
Identification du prélèvement
- Condition du transport
Transport - Délai entre prélèvement et le test
- Température
Phase préanalytique Phase analytique
Figure 1. Représentation du circuit depuis la prescription jusqu’à l’interprétation de l’analyse soulignant l’importance de la phase préana-
lytique afin de contrôler et garantir la fiabilité des résultats d’un bilan d’hémostase.
pour exclure une thrombose veineuse après un acte chirur-
gical, un accouchement ou dans un contexte infectieux est
tout aussi inutile que coûteux, retardant même l’exploration
par les techniques d’imagerie. Les dosages de la protéine S,
qui baisse en cours de grossesse, du facteur Willebrand qui
augmente risquent d’induire le clinicien en erreur du fait
des modifications physiologiques de l’hémostase chez la
femme enceinte. L’insuffisance hépatique rend également
ininterprétable un dosage des inhibiteurs de la coagula-
tion chez un patient présentant une thrombose porte ou
des veines sus hépatiques. Il est donc du rôle du biolo-
giste d’aider le clinicien à prescrire les bons tests au bon
moment pour éviter des erreurs d’interprétation et partici-
per à une rationalisation des examens de laboratoire. Le
développement d’une interface d’échange, de formation et
d’information clinicobiologique dans les structures de santé
est important pour instaurer un climat de confiance et de
collaboration entre les équipes.
Le prélèvement
Avant le prélèvement
Recueil des renseignements cliniques
Le prélèvement apporte des données intéressantes pour le
biologiste lorsqu’il est réalisé au laboratoire : âge, sexe,
402
Validation
Biologiste
Résultat de l’analyse
Phase analytique
- Centrifugation
Traitement - Congélation
- Décongélation
Phase postanalytique
contexte de la demande (bilan pré-opératoire, bilan de
thrombose, recherche de maladie hémorragique, suivi de
traitement...), statut physiologique actuel (grossesse. . .),
groupe sanguin (en particulier pour les facteurs VIII
et Willebrand), maladie(s) connue(s) (lupus, hépatite,
cirrhose, infection, insuffisance rénale. . .), antécédents
personnels et/ou familiaux éventuels, traitements anticoa-
gulants ou autres qui peuvent avoir leur importance au
moment de la validation. Ces renseignements peuvent être
aussi obtenus à distance mais demandent alors un effort
particulier.
Les renseignements cliniques collectés doivent être soi-
gneusement notés de façon à assurer une traçabilité.
Préparation du patient
Le prélèvement est fait en général le matin, en dehors de tout
contexte d’urgence, de préférence à jeun (ou après un déjeu-
ner léger dépourvu de matière grasse). L’alcool, le tabac,
le café sont déconseillés ainsi que l’exercice physique [6-
8]. En effet, l’effort physique entraîne une activation de la
coagulation et de la fibrinolyse, des repas riches en lipides
peuvent interférer avec plusieurs paramètres (la réactivité
plaquettaire, le taux de facteur VII ainsi qu’une hypofi-
brinolyse), le tabac stimule l’agrégation plaquettaire et la
fibrinolyse [7]. Le prélèvement est effectué chez un patient
en position assise, en repos depuis cinq minutes. Pour
Ann Biol Clin, vol. 71, n◦ 4, juillet-août 2013

certaines analyses, en particulier l’étude de la fibrinolyse, la
position couchée pendant 20 à 30 minutes est recommandée
[7].
Pour les femmes, il faut éviter de doser le facteur de Wille-
brand, le facteur VIII de la coagulation ainsi que la protéine
S pendant la grossesse ; tout résultat anormal pendant la
grossesse doit être contrôlé à distance (au moins deux mois
après l’accouchement).
Méthodes de prélèvement
Le prélèvement est en général fait par ponction veineuse
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franche au pli du coude (veine de grand calibre) par une
aiguille de calibre suffisant (0,7 à 1 mm), permettant un
écoulement facile du sang. Par ailleurs, pour les enfants et
les patients difficiles à piquer, on peut utiliser des aiguilles
à ailettes « épicrâniennes » à condition que la tubulure
soit courte (inférieure à 6 cm) [6]. Les tubes sous vide
contenant du citrate de sodium (0,105 M) sont actuelle-
ment très utilisés. Selon les recommandations du Groupe
d’étude hémostase et thrombose (GEHT), le garrot doit être
peu serré pour éviter la stase prolongée et maintenu peu de
temps, à moins d’une minute, afin d’éviter l’activation des
cellules endothéliales et de l’hémostase [6, 8, 9].
Il est préférable de rejeter les premiers millilitres de sang
prélevés car ils peuvent contenir des débris tissulaires
capables d’activer la coagulation. Si d’autres bilans non
destinés à l’hémostase sont à réaliser, il est recommandé
de prélever les tubes d’hémostase en seconde position,
mais aussi pas à la fin car la présence prolongée d’une
aiguille dans la paroi endothéliale peut entraîner une
activation de la coagulation par lésion de l’endothélium
[6, 10]. Les tubes prélevés doivent être correctement rem-
plis et immédiatement agités par quelques retournements
lents.
Des gestes sont à proscrire [6] : prélèvement à la seringue ;
prélèvement sur cathéter, si nécessaire, après rejet de 5 à
10 mL (car risque de souillure par l’héparine et d’activation
de la coagulation).
Choix des tubes
Il est recommandé d’utiliser des tubes de prélèvement sous
vide. Les tubes utilisés pour l’étude de l’hémostase ne
doivent pas activer la coagulation, pour cela on utilise soit
des tubes en verre siliconés, soit des tubes en matière plas-
tique (polyéthylène téréphtalate) [6, 9]. Les études faites sur
les tubes sous vide de différents fournisseurs, ne détectent
aucune différence significative [6].
Par ailleurs, il faut toujours respecter la date de péremp-
tion des tubes, aussi bien pour la qualité de l’anticoagulant
(contamination bactérienne) que pour le maintien du vide
initial (mauvais remplissage par perte du vide).
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Étape préanalytique en hémostase
En revanche, quelques tests pour l’étude de l’hémostase
doivent se faire sur des tubes en verre :
– étude de la rétraction du caillot : sang total, sans anticoa-
gulant ;
– dosage des produits de dégradation de la fibrine et du
fibrinogène.
Enfin, l’utilisation des tubes sous vide est décon-
seillée pour l’étude des fonctions plaquettaires (tests
d’agrégation, activations plaquettaires, étude des glycopro-
téines membranaires. . .) car l’aspiration brutale du sang
peut activer les plaquettes. Il est recommandé de ne pas uti-
liser des tubes sous vide mais plutôt de prélever avec une
aiguille directement dans un tube débouché.
Anticoagulant
La nature et le volume de l’anticoagulant sont importants à
préciser.
Nature de l’anticoagulant
L’anticoagulant de référence recommandé par le GEHT est
le citrate de sodium [6], mais d’autres substances peuvent
être utilisées.
Le citrate trisodique est disponible à deux concentrations :
3,2 % (0,109 M) et 3,8 % (0,129 M). Il est recommandé
d’utiliser la concentration de 0,109 M, mais la concentra-
tion de 0,129 M est considérée comme acceptable par le
GEHT. Le citrate doit être tamponné de façon à assurer
un pH dans l’échantillon plasmatique entre 7,30 et 7,45
car le temps de Quick est très sensible à ces variations du
pH. En effet, le pH du citrate est basique de 8,6 ; on tam-
ponne par l’acide citrique [8]. Le citrate est le chélateur
de calcium de choix pour inhiber la coagulation et empê-
cher la dégradation des facteurs V et VIII. En revanche,
l’inhibition de la coagulation par le citrate est insuffisante
pour bloquer l’activation plaquettaire, ce qui constitue un
inconvénient majeur dans la surveillance du traitement par
l’héparine. En effet, l’activation plaquettaire se traduit par
la libération du facteur 4 plaquettaire (F4P) qui neutralise
in vitro l’héparine plasmatique. Ce phénomène est d’autant
plus marqué que le temps d’acheminement au laboratoire
est plus long (supérieur à 2 heures).
Le CTAD est constitué par le citrate de sodium additionné
d’inhibiteurs de l’activation plaquettaire (théophylline, adé-
nosine, dipyridamole). En effet, le CTAD limite la sécrétion
plaquettaire et donc la neutralisation de l’héparine par le
F4P [11]. Il permet aussi d’éviter la contamination du pool
plasmatique par le contenu intraplaquettaire. De ce fait, le
CTAD est utile lors du traitement par l’héparine non frac-
tionnée, surtout lorsque le délai entre le prélèvement et
l’analyse est long et en pédiatrie [12]. Les tubes CTAD
sont aussi recommandés pour la mesure des marqueurs
d’activation plaquettaire.
403
 Synthèse
Volume de l’anticoagulant
Il est primordial de respecter strictement le rapport 1 volume
d’anticoagulant pour 9 volumes de sang total. Il est recom-
mandé que le tube soit rempli à plus de 90 %, et pour un
remplissage inférieur à 80 %, il faut refuser le prélèvement
[6]. Dans le cas de polyglobulie, le volume de sang total final
est fixe, le volume de plasma diminue et l’anticoagulant est
en proportion beaucoup plus importante et sera responsable
d’un faux allongement des tests, dans ce cas il faut ajuster
le volume d’anticoagulant [13]. Ceci est également observé
dans les cas des tubes insuffisamment remplis. Inverse-
ment, en cas d’hématocrite bas (hémodilution, anémies
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chroniques, hémorragies aiguës compensées), le volume
d’anticoagulant est insuffisant et il y aura une activation
de la coagulation responsable de dosages erronés [14].
Il est donc nécessaire de prendre en considération
l’hématocrite et d’augmenter ou diminuer l’anticoagulant,
en cas de polyglobulie ou anémie (Ht < 30 % ou
> 55 %), selon la formule de McGann : volume anti-
coagulant (mL) = 0,00185 × volume final de sang en
mL × [100 - hématocrite (%)] ou d’Ingram : volume
d’anticoagulant (mL) = volume de sang (mL) × (100 -
hématocrite(%))/[595-hématocrite (%)].
Addition d’inhibiteurs de la fibrinolyse
Lors d’un traitement thrombolytique, l’exploration de
l’hémostase en particulier le dosage du fibrinogène peut
être faussé (par augmentation des produits de dégradation
de la fibrine). C’est pourquoi, il est préconisé d’ajouter à la
solution anticoagulante habituelle, un inhibiteur de la fibri-
nolyse : l’aprotinine (mais ceci nécessite une préparation
extemporanée).
Prélèvements en pédiatrie
Il est difficile d’obtenir un prélèvement d’hémostase de
bonne qualité en pédiatrie ; les difficultés de prélèvement
chez les enfants sont fréquentes (veines de calibre réduit,
agitation du patient liée au stress) avec donc un risque
d’activation de la coagulation in vitro. De plus, il y a chez
le nouveau-né un état d’hypercoagulabilité physiologique
qui raccourcit les temps de coagulation.
Les prélèvements sous vide peuvent être utilisés, mais
nécessitent un volume de sang relativement important (pour
cet âge). Par ailleurs, les prélèvements en microtubes (1
à 1,3 mL) sont plus adaptés, mais souvent coagulés [15].
Les prélèvements sur cathéter peuvent être réalisés en cas
de nécessité, mais après rejet de 10 à 15 mL selon les
recommandations, du fait du risque essentiel de contami-
nation par l’héparine utilisée pour prévenir les thromboses.
Enfin, les prélèvements capillaires par microméthodes, au
doigt ou au talon, peuvent être effectués chez le nouveau-
né ou le prématuré, mais ce type de prélèvement ne permet
404
qu’un dosage ponctuel (fibrinogène, facteurs, numération
plaquettaire) et nécessite un personnel expérimenté.
En plus, l’hématocrite habituellement élevé (> 55 %)
pour cette tranche d’âge peut être source d’erreur dans
l’interprétation des tests, d’où la nécessité d’adapter le
volume d’anticoagulant au volume plasmatique [15, 16].
De ce fait, l’importance de la collaboration entre clinicien
et biologiste est primordiale.
Identification du prélèvement
Elle doit être effectuée avec le plus grand soin ; la vérifica-
tion de l’identité du patient et l’étiquetage des tubes doivent
se faire au moment du prélèvement. Il faut s’assurer de la
concordance du nom et prénom du patient avec celui mar-
qué sur la demande d’analyse et l’étiquette qui sera collée
sur le tube. L’erreur d’identification est considérée comme
rare, mais elle est probablement sous-estimée car souvent
méconnue [5].
Prélèvements non conformes
Les prélèvements hémolysés : théoriquement, l’hémolyse
peut activer les facteurs-contact, modifier les fonctions pla-
quettaires et raccourcir le TCA, mais elle a probablement
peu d’importance sur le plan pratique [17]. Toutefois, un
prélèvement peut être hémolysé parce qu’il a été difficile,
et il n’est pas rare que le transvasement dans un autre
tube montre un microcaillot. Un prélèvement hémolysé
doit toujours être signalé sur la feuille de résultat avec une
recommandation de contrôle.
Les prélèvements lactescents : il est déconseillé de faire les
tests d’hémostase après un repas gras. Il faut contrôler un
bilan d’hémostase si le prélèvement est lactescent.
Prise de certains médicaments : certains médicaments
peuvent modifier les résultats. Les traitements anticoa-
gulants doivent être signalés sur la demande d’analyses
pour confronter les résultats obtenus aux résultats attendus,
éviter des tests complémentaires inutiles. Ainsi il est recom-
mandé de ne pas doser les protéines C et S chez un patient
sous antivitamines K, ou de rechercher un anticoagulant de
type lupique sous héparine.
Non-respect des conditions préanalytiques :
– prélèvement effectué du même côté d’une perfusion
à héparine ou d’une dérivation artério-veineuse pour les
hémodialysés. Le même problème se pose en cas de prélè-
vement sur cathéter ;
– tube insuffisamment rempli par rapport au volume
d’anticoagulant : le remplissage doit être supérieur à 80 %.
Un tube mal rempli correspond souvent à un prélèvement
difficile et on peut noter la présence de caillots ou de micro-
caillots ;
– tube non approprié (tube sec, tube hépariné ou EDTA,
tube en verre non siliconé. . .), ou sans identité du patient.
Ann Biol Clin, vol. 71, n◦ 4, juillet-août 2013

Conditions de transport
et de conservation
Conditions de transport
Lorsque le prélèvement n’est pas effectué au laboratoire,
les tubes doivent être maintenus en position verticale pour
éviter tout contact avec le bouchon. Il faut éviter les agita-
tions et les vibrations qui peuvent entraîner une hémolyse
[6]. Le transport pneumatique est possible pour les tests
courants [8], non recommandé pour l’exploration des fonc-
tions plaquettaires en raison d’un risque d’activation de ces
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dernières [18, 19].
Délai entre le prélèvement et le test
Les prélèvements doivent être rapidement acheminés au
laboratoire et traités. L’idéal est un délai de 1 à 2 h sans
dépasser 4 h (maximum de 6 h est accepté pour le temps de
Quick), Sinon, il faut séparer par centrifugation le plasma
et le congeler jusqu’au moment de l’analyse [6, 8, 20].
Il est à noter que :
– certains facteurs de coagulation sont particulièrement
labiles (notamment facteurs V et VIII) et le prélèvement
doit être acheminé le plus rapidement possible sans excéder
3h;
– en cas de traitement par héparine, ce délai ne doit pas
excéder 2 h en milieu citraté habituel, car l’héparine peut
être neutralisée par le F4P. Le prélèvement sur tube CTAD
rend possible un délai de 4 h entre le moment du prélève-
ment et l’analyse ;
– les tests fonctionnels plaquettaires sont effectués extem-
poranément, dans l’heure qui suit le prélèvement, sur un
plasma riche en plaquettes. Il faudrait, dans les 3 à 4 h
qui suivent le prélèvement que l’exploration des fonctions
plaquettaires soit terminée. Pour l’étude des fonctions pla-
quettaires, un parcours supérieur à 1 h ou 1 h 30 tout au plus
rend nécessaire le déplacement du patient pour prélèvement
au laboratoire d’hémostase ;
– les composants du système fibrinolytique sont très
labiles ; l’étude analytique de la fibrinolyse, en particu-
lier les activateurs, est du ressort de laboratoires spécialisés
qui organisent des conditions rapides et optimales de trai-
tement et de conservation des échantillons pour les dosages
différés.
Température
Les prélèvements en hémostase pour études de la coa-
gulation (tests globaux, dosages des activateurs et des
inhibiteurs, fonctions plaquettaires) doivent être conser-
vés à température ambiante pendant le transport jusqu’au
moment de l’analyse. Le froid peut entraîner une altération
irréversible des fonctions plaquettaires et une activation de
Ann Biol Clin, vol. 71, n◦ 4, juillet-août 2013
Étape préanalytique en hémostase
certains facteurs de coagulation (facteurs VII, VIII et fac-
teur de Willebrand) [21, 22]. D’une manière générale, il est
recommandé pour ces tests de maintenir une température
comprise entre 18 et 22 ◦ C et d’éviter le grand froid autant
que la chaleur excessive [23]. La conservation au réfrigéra-
teur ou le transport dans de la glace fondante sont proscrits.
Si un prélèvement doit être acheminé sur de grandes dis-
tances et un délai supérieur à 1-2 h, il faut envoyer le plasma
déplaquetté congelé dans de la carboglace ; il doit parvenir
à destination parfaitement congelé.
Pour les cas particuliers d’exploration de la fibrinolyse, le
prélèvement, même exécuté à l’intérieur ou à proximité du
laboratoire, doit être transporté rapidement dans un bain de
glace fondante et traité en respectant la chaîne de froid.
Séparation du plasma
Les tests de routine sont effectués sur un plasma pauvre en
plaquettes nécessitant une seule centrifugation de 15 min
à 2 500 g à température ambiante [24]. Par ailleurs,
une double centrifugation séparée par une décantation du
plasma est nécessaire en cas de recherche de lupus anticoa-
gulant, recherche d’une résistance à la protéine C activée
et congélation du plasma pour des dosages différés. Ceci
permet d’assurer un nombre de plaquettes résiduelles infé-
rieur à 10 G/L [25]. Cette décantation du plasma doit être
faite avec soin, en évitant de se rapprocher du culot mais
aussi de la couche superficielle du plasma qui peut être riche
en débris membranaires. L’aspiration du plasma doit être
douce pour ne pas mobiliser les plaquettes du culot.
L’exploration plaquettaire est effectuée sur un plasma riche
en plaquettes obtenu après une centrifugation douce à 800 g
pendant 10 min à température ambiante.
Congélation-décongélation
Lorsque les tests doivent être différés, il faut recourir à la
congélation. Cette dernière s’effectue dans les courts délais
dans des tubes en plastique hermétiquement bouchés, en
petits aliquots (500 à 1 200 ␮L) de préférence à - 70 ◦ C
(jusqu’à 6 mois), à défaut à - 20 ◦ C (pour une durée infé-
rieure à 2 semaines, acceptable jusqu’à 30 jours) [6].
La décongélation doit être rapide au bain-marie à 37 ◦ C
pendant 5 minutes (jamais à température ambiante sur la
paillasse ou au four micro-ondes). Une fois décongelé, le
plasma doit être homogénéisé et immédiatement traité [6]
(afin d’éviter l’activation de la coagulation et la diminution
des facteurs labiles V et VIII). Un plasma décongelé ne doit
pas être recongelé, du moins pour les tests fonctionnels.
Causes d’erreurs
La figure 2 résume les causes d’erreurs les plus fréquem-
ment rencontrées dans le laboratoire d’hémostase.
405
 Synthèse
1. Tube insuffisamment rempli
2. Prélèvement coagulé
3. Prélèvement hémolysé
4. Erreur d’identification du prélèvement
5. Prélèvement souillé par l’héparine
6. Conditions de conservation et/ou de transport
inappropriées
7. Conditions de centrifugation inappropriées
8. Autres
Figure 2. Les causes d’erreur les plus fréquentes au cours de
l’étape préanalytique.
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Quelques aspects pratiques
Recherche de lupus anticoagulant [26]
L’étape préanalytique est primordiale dans la stratégie diag-
nostique du lupus anticoagulant. En effet, le plasma doit
être parfaitement déplaquetté par double centrifugation
pour éviter que les phospholipides libérés par lyse pla-
quettaire neutralisent l’anticoagulant circulant, surtout si
l’échantillon est testé après décongélation. La filtration du
plasma à travers un filtre à pores de 0,22 ␮m a été propo-
sée, mais des débris membranaires peuvent se former sous
pression au moment de la filtration et fausser les résultats en
inhibant un lupus anticoagulant peu puissant. La filtration
peut également allonger le TQ et le TCA, ce qui suggère
une altération des facteurs de la coagulation.
La congélation du plasma est possible, mais il est préférable
de travailler sur un plasma frais. Elle se fait à - 80 ◦ C, à
défaut à - 20 ◦ C, à condition que le plasma soit utilisé dans
les 2 semaines. La décongélation doit être rapide au bain-
marie à 37 ◦ C.
Il faut disposer des renseignements concernant le traitement
reçu par le patient. En effet, il faut s’assurer de l’absence
d’héparine dans le prélèvement (détecté par un allonge-
ment du temps de thrombine au besoin) pouvant entraîner
des faux positifs. En revanche, la recherche d’anticoagulant
circulant est possible chez les patients sous antivitamine K.
Surveillance des traitements anticoagulants
Surveillance du traitement par héparine : pour un traite-
ment en intraveineux contenu, le prélèvement s’effectue par
ponction veineuse au bras opposé à la perfusion d’héparine
et il peut se faire à n’importe quel moment. Par ailleurs,
lorsque le traitement est par voie sous-cutanée, il faut préle-
ver à mi-temps entre 2 injections. Le prélèvement s’effectue
en tube citraté habituel avec acheminement rapide au labo-
ratoire ; la centrifugation s’effectue dans la demi-heure
suivant le prélèvement car il y a un risque de neutralisation
de l’héparine par le F4P (surtout en cas de thrombocytose).
Par ailleurs, pour un délai entre le prélèvement et l’analyse
long (> 2 heures), il est nécessaire de prélever sur CTAD.
406
Surveillance du traitement par antivitamine K (AVK) : il n’y
a pas de précaution particulière à prendre au niveau du pré-
lèvement. Il faut signaler toute prise médicamenteuse, car
certains médicaments peuvent potentialiser ou au contraire
inhiber l’effet des AVK. Le traitement AVK doit être signalé
sur la demande d’analyse.
Surveillance du traitement thrombolytique : il est préconisé
d’ajouter un inhibiteur de la fibrinolyse à la solution anticoa-
gulante habituelle lors du traitement thrombolytique, car ce
traitement entraîne une augmentation de l’activité fibrinoly-
tique circulante (diminution du fibrinogène, augmentation
des PDF et des D-dimères). L’aprotinine peut être ajoutée à
la dose de 200 à 500 unités inhibitrice de kallicréine par mL
de sang total, mais nécessite une préparation extemporanée.
Étude des fonctions plaquettaires
Les échantillons lactescents, hémolysés ou ictériques
peuvent gêner la transmission optique en agrégométrie. Le
patient ne doit pas consommer des médicaments dans les
48 h précédant le prélèvement ni d’acide acétylsalicylique
pendant 10 jours (sauf si le but de l’exploration est juste-
ment d’étudier l’effet d’un traitement anti-agrégant). Les
anti-inflammatoires non stéroïdiens, certains antibiotiques
et antidépresseurs et d’autres médicaments peuvent alté-
rer les fonctions plaquettaires pendant une semaine. Il
est nécessaire d’effectuer un prélèvement par écoulement
direct dans des tubes en matière plastique, sans système de
vide, avec un garrot peu serré et une technique non trau-
matique pour éviter l’activation plaquettaire. Les tests sont
effectués extemporanément, dans l’heure suivant le prélè-
vement sur un plasma riche en plaquettes. La conservation
des échantillons s’effectue à température ambiante car le
froid active les plaquettes.
Étude de la fibrinolyse
Certaines précautions sont à prendre lors de prélèvement
pour étude de la fibrinolyse. En effet, l’exploration du
système fibrinolytique doit tenir compte des possibles varia-
tions de ces tests au cours de la journée ainsi que celles
entraînées par l’exercice physique, l’alcool, le café, stase
veineuse, l’inflammation [7, 27, 28]. Il est nécessaire que
le prélèvement s’effectue par écoulement direct, sans gar-
rot, le sujet étant au repos (depuis au moins 20 min), à jeun,
à distance d’une prise d’alcool (6 h minimum) ou du café et
d’un épisode infectieux. En général les prélèvements sont
effectués le matin à jeun.
Conclusion
L’automatisation, l’informatisation, la mise en place de
systèmes de contrôles de qualité internes et externes ont
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considérablement réduit les risques d’erreurs liés à la phase
analytique en hémostase. L’étape préanalytique demeure
le maillon faible de la chaîne de traitement des prélève-
ments, d’autant qu’elle échappe au contrôle du biologiste
médical qui pourtant constitue une cible privilégiée des
critiques en cas de résultats aberrants. Le regroupement
des laboratoires, le développement des sites de prélève-
ments et d’envoi pour une sous-traitance des analyses dans
des laboratoires spécialisés ou des « méga-laboratoires »
presque industriels, les déplacements parfois longs et même
par avion des prélèvements a remis à l’ordre du jour
l’importance de l’étape préanalytique. Le tube primaire de
Copyright © 2020 John Libbey Eurotext. Téléchargé par M. FRANCIS KAMBEMBO le 31/07/2020.
prélèvement du patient peut ne plus être accessible au biolo-
giste qui reçoit des plasmas congelés, ce qui pose parfois des
problèmes si les recommandations depuis la prescription de
l’analyse, le prélèvement et le traitement de l’échantillon
avant envoi n’ont pas été respectées minutieusement.
Liens d’intérêts : aucun.
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