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BIOTECNOLOGIA Y MEDIO AMBIENTE

CONCEPTOS

 Organización para la Cooperación y el Desarrollo Económico (OCDE)


aplicación de los principios de la ciencia y la ingeniería al tratamiento de materias por agentes
biológicos en la producción de bienes y servicios (1982).
 Oficina de Evaluación Tecnológica (OTA, Office of Technology Assessment)
biotecnología, en un sentido amplio, incluye cualquier técnica que utilice organismos vivos (o
parte de ellos) para obtener o modificar productos, mejorar plantas y animales, o desarrollar
microorganismos para usos específicos (1984).
 Federación Europea de Biotecnología (EFB, European Federation of Biotechnology)
uso integrado de la bioquímica, la microbiología y la ingeniería genética para poder aplicar las
capacidades de microorganismos, células cultivadas animales o vegetales o parte de los
mismos en la industria, en la salud y en los procesos relacionados con el medioambiente
(1988).
 E. H. Houwink
el uso controlado de la información biológica (1989).
 Organización de la Industria Biotecnológica (BIO, Biotechnology Industry Organization)
en un sentido amplio, biotecnología es “bio” + “tecnología”, es decir, el uso de procesos
biológicos para resolver problemas o hacer productos útiles (2003).

Tienen 3 factores en común: uso de microorganismo, mejora de la calidad de vida y la aplicación


de diferentes ciencias.

BENEFICIOS:

o Mejora la salud y a su vez reduce el hambre (mejora la capacidad nutricional de alimentos)


o Incrementa la flexibilidad en la forma de cultivos (cultivar alimentos en condiciones extremas)
o Ayuda a reducir la contaminación ambiental (eliminación de desechos mediante rrmediacion)

RIESGOS:

Existen implicaciones éticas, ecológicas y sociales de todos los aspectos biotecnológicos,


destacando los referentes a ingeniería genética, clonación y el proyecto genoma humano.

 Puede ser usada como un arma de destrucción


 Posee muchísimas incógnitas – no sabemos el resultado final ni los efectos que puedan
ocasionar

ANTECEDENTES

 El antecedente de la biotecnología es la biología moderna.


 La biotecnología ha realizado un gran avance en las técnicas de manipulación de organismos
complejos y ha mejorado el conocimiento de muchos procesos tradicionales en los que los
agentes biológicos se utilizaban de una forma poco controlada y deliberada.
 La industria moderna de la biotecnología fermentativa es el resultado de la aplicación de
microorganismos seleccionados y manipulados para fines específicos.
 A título de ejemplo, destacaremos dos aspectos industriales de la biotecnología moderna de la
fermentación: en primer lugar, la obtención de biomasa a partir de fangos activados y, en
segundo lugar, la selección y propagación a gran escala de cepas específicas de Clostridium
para la producción de acetona y butanol.

INICIOS DE LA BIOTECNOLOGIA

En muchos sentidos la biotecnología es una ciencia antigua.


Sin saber ni entender los principios de la fermentación o de la genética, la humanidad ha
estado utilizando algunos procesos biotecnológicos desde tiempos antiguos, por ejemplo, en
la producción de queso, pan, vino, cría selectiva de animales y plantas, etc.
En cuanto al término biotecnología, fue acuñado por Karl Ereky en 1919 para describir la
interacción entre biología y tecnología.
Cuando se empezaron a cultivar plantas o criar animales, a elaborar cerveza o vino o a
producir queso, se estaban aplicando los principios de la biotecnología en sentido amplio.
El primer estadio del desarrollo biotecnológico es el uso de las técnicas de fermentación.
Posteriormente, en los años setenta, empezó a aplicarse a los espectaculares resultados de las
emergentes técnicas de la biología molecular.
A continuación, se citan los hitos más relevantes de los procesos biotecnológicos de la
antigüedad:
 bebidas alcohólicas (prehistoria)
 elaboración de cerveza (3000 a. C.)
 elaboración de pan (3000 a. C.)
 elaboración de vinagre (s. XIV)
 descripción de las células de levaduras por Leeuwenhoek (1689)
 descubrimiento de las propiedades fermentativas de las levaduras por parte de Erxleben
(1818).

BIOTECNOLOGIA MODERNA

 El interés actual de la biotecnología reside en el potencial que supone la unión de procesos y


métodos biológicos —antiguos y nuevos— con las técnicas de la ingeniería química y la
electrónica.

 El nacimiento de la biotecnología moderna se asocia con el desarrollo, a escala industrial, de


los procesos de fabricación de penicilina.

 Más tarde, la moderna industria biotecnológica se planteó como objetivo el uso de enzimas
(no producen reacciones secundarias y no se suelen multiplicar). Las enzimas son los principios
activos de los microorganismos y en realidad los responsables de las bioreacciones.

 Las primeras aplicaciones de las enzimas en la industria biotecnológica fueron la fabricación de


edulcorantes (por ejemplo, obtención de jarabe de fructosa a partir del trigo) y el empleo de
lipasas y proteasas en los detergentes para eliminar las manchas difíciles en los tejidos.

 Con la utilización de enzimas específicas, muchas obtenidas de microorganismos manipulados


genéticamente, empieza la segunda generación de la biotecnología industrial (o biotecnología
moderna), que integra ya de forma clara la microbiología, la bioquímica y la ingeniería de
procesos

LA ULTIMA GENERACION

 La biotecnología empieza a considerarse una ciencia moderna en los años setenta por los
avances en biología molecular y genética.

 Estos avances desembocaron en las técnicas de clonación y ADN recombinante que


permitieron a los científicos un mejor conocimiento de las funciones celulares y sus
componentes en los seres vivos e hicieron posible el desarrollo de nuevos métodos para aislar
células madre y genes de los organismos vivos para producir in vitro productos de su
metabolismo que antes sólo podían obtenerse a partir del organismo vivo.

 Muchos productos farmacéuticos se obtienen ya con enzimas y microorganismos de diseño,


concretamente productos que incluyen sustancias como la insulina, el interferón o los
plasmidios activadores y que antes eran muy complicados o caros de fabricar.

 Actualmente, en diferentes sectores industriales se están aplicando técnicas biotecnológicas


para sustituir técnicas industriales ambientalmente peligrosas o contaminantes. Estas nuevas
técnicas utilizan microorganismos o enzimas para conseguir una técnica más limpia o menos
contaminante y residuos más biodegradables. De esa forma, se reducen in situ los efectos
nocivos de los residuos e, incluso, su cantidad, pero también muchas veces también el gasto
de agua y energía.

HISTORIA

La historia de la biotecnología puede dividirse en 4 periodos.

Primer Periodo  Era anterior a Pasteur (comienzos de la humanidad), donde la


biotecnología comprendía la selección de plantas y animales y sus cruzas.
 Fermentación para preservar y enriquecer el contenido proteico de los
alimentos.
Segundo Periodo  Comienza con la identificación de los microorganismos (Pasteur)
 Descubrimiento de la capacidad de las enzimas de convertir azúcares en
alcohol (Buchener) como un proceso para preservar y enriquecer
Tercer periodo  ¨Avance y retroceso de la biotecnología¨.
 industria petroquímica tiende a desplazar los procesos biotecnológicos de
la fermentación
 el descubrimiento de la penicilina por Fleming en 1928, sentaría las bases
para la producción en gran escala de antibióticos.
 En los años 30s, empieza la aplicación de variedades híbridas en la zona
maicera de los Estados Unidos ("corn belt"), de la aplicación de
variedades híbridas en la zona maicera de los Estados Unidos ("corn
belt").
Cuarto periodo  Biotecnología actual
 Descubrimiento de la doble estructura axial del ácido "desoxi-
ribonucleico" (ADN) por Crick y Watson (1953).
 Primeros experimentos de ingeniería genética realizados por Cohen y
Boyer (1973)
 Aplicación de la técnica del "hibridoma" para la producción de
anticuerpos "monoclonales", gracias a los trabajos de Milstein y Kohler
(1975).
NUEVAS BIOTECNOLOGIAS

 Técnicas para el cultivo de células y tejidos.


 Procesos biotecnológicos, fundamentalmente de fermentación, y que incluyen la técnica
de inmovilización de enzimas.
 Técnicas que aplican la microbiología a la selección y cultivo de células y microorganismos.
 Técnicas para la manipulación, modificación y transferencia de materiales genéticos
(ingeniería genética).
 Cultivos de tejidos y células
 Uso de enzimas o fermentación microbiana (conservación de la materia prima)
 Tecnología del "hibridoma"
 Ingeniería de proteínas
 Bioinformática (utilización de las proteínas en aparatos electrónicos, conocida también
como sensores biológicos/biochips)

BIOTECNOLOGIA EN COLORES:

ROJA Se aplica a la utilización de biotecnología a la prevención, diagnóstico y tratamiento


de enfermedades nuevas y conocidas del ser humano. Algunos ejemplos son: la
obtención de organismos para producir antibióticos, el desarrollo de vacunas y
nuevos fármacos. También se refiere a los diagnósticos moleculares, las terapias
regenerativas y el desarrollo de la ingeniería genética para curar enfermedades a
través de la manipulación génica

BLANCA También conocida como biotecnología industrial, es aquella aplicada a procesos


industriales. Tienen como objetivo la creación de productos fácilmente
degradables, que consuman menos energía y generen menos desechos durante su
producción a través del uso de células y enzimas. 
VERDE Es la biotecnología aplicada a procesos agrícolas. Un ejemplo de ello es la
obtención de plantas transgénicas capaces de crecer en condiciones ambientales
desfavorables o plantas resistentes a plagas y enfermedades. Se espera que la
biotecnología verde produzca soluciones más amigables con el medio ambiente
que los métodos tradicionales de la agricultura industrial. 
AZUL También llamada biotecnología marina, es un término utilizado para describir las
aplicaciones de la biotecnología en ambientes marinos y acuáticos. A través de ella
se pretende el uso de organismos marinos completos, sus células o moléculas para
proveer soluciones de utilidad para la sociedad. Un ejemplo de ello es la
producción de biodiesel.
AMARILLO Se refiere al uso de los organismos vivos y/o biomoléculas en la industria
alimentaria. Principalmente se basa al uso de enzimas para la producción y
procesamiento de los alimentos. 
MARRON Se utiliza este término a la biotecnología utilizada en veterinaria. Uno de sus
objetivos es desarrollar y producir fármacos, vacunas y mejoramiento animal.
GRIS Tiene que ver con uso de las herramientas de la ingeniería genética y biología
molecular para mejorar el ambiente.  Entre sus objetivos esta: la biorremediación,
biofiltros, limpieza de contaminación, entre otros
ROSADA o Se refiere a áreas de propiedad intelectual, patentes y bioseguridad de los procesos
VIOLETA en los que interviene algún organismo vivo o alguna biomolécula obtenida de ellos.
Sin embargo, aún es un tema bastante complejo. 
DORADA Se refiere al uso de las herramientas informáticas y modelos computacionales
disponibles para el diseño de drogas, enzimas, rutas metabólicas (in silico); así
como también novedosas nanoestructuras dentro de contextos biológicos. 

CIENCIA DE MUCHAS DISCIPLINAS

 La biotecnología no es, en sí misma, una ciencia; es un enfoque multidisciplinario que


involucra varias disciplinas y ciencias (biología, bioquímica, genética, virología, agronomía,
ingeniería, química, medicina y veterinaria entre otras).
 Es imposible hablar de biotecnología sin considerar las importantes contribuciones de
diversos campos de la ciencia.
 Más bien es un campo amplio que en gran medida depende de las contribuciones de
muchas áreas de biología, química, matemáticas, informática e ingeniería, además de
otras disciplinas como la filosofía y la economía.

TIPOS DE BIOTECNOLOGIA

La Biotecnología microbiana estudia los microorganismos y los procesos


a gran escala que derivan de ellos, con el fin de obtener productos de
interés para el ser humano.
Además, se estudia el aislamiento, selección y conservación de
microorganismos industriales, así como los factores ambientales que
Biotecnología modifican su crecimiento, la obtención de metabolitos primarios y
microbiana secundarios en las principales industrias de interés biotecnológico
(disolventes, aditivos, polímeros, productos alimenticios, sanitarios y
agrícolas).
De igual forma se estudian los aspectos relacionados con la modificación
genética de microorganismos y su aplicación en el desarrollo de nuevos
productos de interés biotecnológico.
En este tipo de biotecnología examinamos gran variedad de temas,
desde plantas transgénicas resistentes a las pestes que no necesitan
fumigación, hasta alimentos de mayor contenido proteico o vitamínico y
medicamentos desarrollados y cultivados como productos vegetales.
manipulación genética de plantas se ha utilizado durante más de 20
Biotecnología años para producir plantas transgénicas con alteraciones de las
agrícola características de crecimiento como resistencia a sequías, tolerancia al
frío y una mayor producción. La investigación de los últimos diez años
demuestra claramente que las plantas se pueden modificar para
producir gran variedad de proteínas farmacéuticas en diversos tipos de
cosechas y tejidos. Las plantas también ofrecen ciertas ventajas sobre las
bacterias para la producción de proteínas recombinantes (fabricación
molecular)
Biotecnología Los animales pueden utilizarse como «biorreactores» para producir
animal productos importantes. Por ejemplo, se están usando cabras, reses,
ovejas y pollos como fuentes de proteínas útiles para la medicina como
los anticuerpos, que son proteínas protectoras que reconocen y ayudan
a las células del organismo a destruir material extraño en el cuerpo.
Animales transgénicos (contienen genes procedentes de otra fuente)
La intención del knockout es alterar un gen y después, viendo las
funciones afectadas en un animal como resultado de la pérdida de un
gen determinado, definir el papel y la importancia de ese gen.
Animales clonados (Dolly, estas técnicas pueden llevar a la clonación de
animales que contengan órganos transgénicos que puedan trasplantarse
en humanos sin los riesgos del rechazo tisular.)
¿Qué tienen en común O. J. Simpson, la princesa Anastasia, los reclutas
de la Armada Estadounidense (U.S. Army), los huesos de dinosaurios, las
bacterias fecales y los fósiles de hombres australianos de 60.000 años?
-> Huellas genéticas: conjunto de métodos para la detección del patrón
Biotecnología genético único de un organismo.
forense Las huellas genéticas pueden realizarse utilizando rastros de tejido, pelo,
sangre o fluidos corporales dejados en la escena de un crimen.
Otra aplicación es la identificación genética de especies en peligro de
extinción.
Los científicos también utilizan la identificación genética para seguir el
curso y confirmar la expansión de enfermedades como Escherichia coli
en carnes contaminadas, o el sida, la meningitis, la tuberculosis, la
enfermedad de Lyme y el virus del Nilo Occidental.
Uso de la biotecnología para procesar y degradar varias sustancias
naturales y artificiales, en concreto aquellas que contribuyen a la
Biorremediació contaminación del medio ambiente.
n Muchos procesos de la biorremediación dependen de aplicaciones de la
biotecnología microbiana. En la década de 1970, la primera patente
estadounidense de un microorganismo transgénico se concedió a
Ananda Chakrabarty.
Una de las aplicaciones más antiguas de la biotecnología acuática es la
acuicultura, la cría de pescado y marisco en condiciones controladas
para usarlas como fuente de alimento. (Recientemente se ha estimado
que cerca del 30 por ciento de todo el pescado que consumen los
Biotecnología humanos en todo el mundo procede de la acuicultura).
acuática La singularidad de muchos organismos acuáticos es otra atracción para
los biotecnólogos. Las bacterias marinas, algas, mariscos, peces y un
sinnúmero de organismos de nuestros océanos viven bajo algunas de las
condiciones más duras del mundo. (Se cree que tales organismos son
ricas y valiosas fuentes de nuevos genes, proteínas y procesos
metabólicos que pueden tener importantes aplicaciones para el
beneficio humano. Por ejemplo, se ha descubierto que algunas especies
de plancton marino y caracoles son fuentes ricas en moléculas
antitumorales y anticancerígenas.)
Biotecnología La biotecnología médica comprende varios espectros de la medicina
médica humana desde la medicina preventiva hasta el diagnóstico de
enfermedades o el tratamiento de las mismas.
El Proyecto del Genoma Humano ha dado lugar a nuevas técnicas para
que las pruebas genéticas identifiquen genes defectuosos y alteraciones
genéticas.
Las propuestas de la terapia génica, en las que se pueden tratar
enfermedades genéticas insertando genes normales en un paciente o
reemplazar genes enfermos por genes normales, están siendo las
primeras en usarse.
La tecnología de células madre es una de las aplicaciones más nuevas y
prometedoras de la biotecnología médica (Las células madre son células
inmaduras que tienen el potencial de desarrollarse y especializarse en
células nerviosas, células sanguíneas, musculares, y prácticamente
cualquier otro tipo de célula del cuerpo. Las células madre pueden
cultivarse en laboratorio y, cuando se tratan con diferentes productos
químicos, pueden estimularse para que se desarrollen en diferentes
tipos de tejido humano que podrían usarse para el trasplante de tejidos
dañados.)

RETOS BIOLOGICOS DEL SIGLO XXI

 La Historia mostrará que el año 2001 señaló un hito en la cronología de la biotecnología. En


febrero de aquel año, algunos de los biólogos moleculares más célebres del mundo se
reunieron en una conferencia de prensa para anunciar la publicación del borrador preliminar
del genoma humano, el mayor logro del Proyecto del Genoma Humano. La secuencia genética
(leída como las letras A, G, C y T) de los cromosomas humanos estaba casi completa. Una gran
sorpresa de esa reunión fue el anuncio de que el genoma humano estaba constituido por
mucho menos de 100.000 genes, como se había esperado. Como veremos en otros capítulos,
el Proyecto del Genoma Humano se completó en el año 2003 y ha llevado a nuevos
descubrimientos en biotecnología fascinantes.
 La comprensión de los genes humanos también nos permitirá estudiar la evolución del
hombre, y comparando nuestros genes con los de otras especies como chimpancés, bacterias,
moscase incluso gusanos, desarrollaremos un mejor entendimiento de la relación del ser
humano con otras especies.
 Uno de los beneficios de este proyecto estará en su uso para descifrar el proteoma, el
conjunto de proteínas responsable de la actividad de la célula humana. Incluso ahora que se
ha completado el Proyecto del Genoma Humano, los científicos continúan trabajando para
descubrir los secretos de cómo funcionan todos los genes humanos, y cómo provocan
enfermedades los genes y las proteínas.

DEFINICIONES
“Aplicación de las herramientas y métodos biotecnológicos a la resolución de los problemas
ambientales” (OCDE,2002)”

integración de la ciencia y la ingeniería para el desarrollo, uso y regulación de los sistemas


biológicos para la descontaminación del medio ambiente (tierra, aire, agua) y para el desarrollo de
procesos amigables con el medioambiente (tecnologías verdes y desarrollo sostenible). - ISEB
(Sociedad Internacional de la Biotecnología Ambiental)

Aplicación de los procesos biológicos modernos para la protección y recuperación de la calidad del
medioambiente. - (Scragg,1999)

BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL: ¨Planetary boundary¨

Clasificados desde la mayor amenaza hasta la menor amenaza, todos estos deben estar en
equilibrio

Pérdida de biodiversidad, ciclos del nitrógeno y fósforo  Cambio climático  Acidificación


oceánica  Calidad de las aguas continentales  Usos agrícolas  Descarga de aerosoles en la
atmósfera  Capa de ozono atmosférica  Contaminación química.

ENFOQUES METOLOGICOS: dos maneras de realizar estudios

Las metodologías basadas en el aislamiento del microorganismo de interés y en la caracterización


de sus funciones metabólicas a partir de su estudio en el laboratorio mediante su cultivo puro.

Las metodologías basadas en el análisis del consorcio microbiano (microbiota) considerándolo


como una unidad funcional.

AMBITOS DE APLICACIÓN ACTUAL

Cambio climático Energías alternativas Procesos de reciclaje


En el control de las Síntesis de hidrógeno por parte biodegradación
emisiones de CO2 por el de nuevas cepas de microbiana de
suelo, así como la arqueobacterias o la producción compuestos aromáticos
posibilidad de secuestrar de la llamada bioelectricidad derivados de las
cantidades importantes de mediante los generadores actividades industriales
carbono en el suelo microbianos de energía dentro que resulta esencial para
mediante cambios de una escala muy modesta mantener el ciclo del
significativos en las (microbial fuel cells). carbono en el planeta.
prácticas agrícolas Fuentes energéticas alternativas Muchos de los procesos
rutinarias. están considerando la utilización de degradación de los
En el control o la del metabolismo microbiano compuestos aromáticos
prevención de las emisiones para producir gas natural se han basado en la
de metano procedente de (metano), etanol o hidrógeno. utilización de cepas del
residuos, de prácticas Estas unidades están basadas en género Pseudomonas,
agrícolas y de sistemas generar electricidad aunque no
naturales. directamente a partir de la exclusivamente, ya que
oxidación de compuestos no podemos descartar el
orgánicos por el metabolismo uso de otros grupos
bacteriano (cepas de los géneros bacterianos
Geobacter o Rhodoferax).
Tenemos que valorar en un
futuro los progresos de técnicas
que se consigan con el fin de
aumentar el rendimiento
energético a gran escala de las
diferentes fuentes de
bioenergía, principalmente la
síntesis de metano, etanol e
hidrógeno.

Recursos hídricos Salud y medio ambiente


La calidad en el suministro El uso excesivo de antibióticos
de agua, el saneamiento de ha dado como resultado la
las aguas residuales (por selección de resistencias a
procesos eficientes y de algunos de ellos por parte de
bajo consumo energético) y algunas poblaciones bacterianas
su potencial regeneración en el trato intestinal de los
se están convirtiendo en un animales que se utilizan en la
reto primordial para poder cadena alimenticia humana.
garantizar este recurso con Eso ha contribuido a la aparición
la calidad adecuada que de cepas de patógenos
requieren las distintas resistentes a los antibióticos en
actividades humanas en la medicina humana.
muchas zonas del planeta Hay una demanda creciente de
con recursos hídricos métodos de diagnóstico y
limitados o muy variables. detección efectivos y operativos
Resulta cada vez más (fácil uso y bajo coste), que se ha
importante la identificación convertido en una actividad de
de las contaminaciones de desarrollo importante para la
las aguas en su origen biotecnología ambiental para el
En los últimos años se están control y la contención de los
haciendo esfuerzos patógenos en nuestra sociedad.
importantes en el desarrollo Entre estos procesos pueden
de metodologías por destacar la utilización de los
detectar el origen de la autoinductores e inhibidores de
contaminación fecal en las los mecanismos o percepción de
aguas superficiales quórum o quorum sensing
(detección del origen bacterianos
microbiano o microbial
source tracking) Y poder
detectar, contener y
eliminar este tipo de
contaminación fecal.
También ha habido más
interés por la detección de
contaminantes y patógenos
en el agua con el fin de
determinar los riesgos
sanitarios y tomar medidas
para su control y/o
eliminación.

BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL: CELULAS EUCARIOTAS Y PROCARIOTAS

Bacterias:

Son un grupo diverso de microorganismos unicelulares, procariotas, que se pueden encontrar


prácticamente en cualquier ambiente (suelos, aguas, aire, y como simbiontes, parásitos, o
patógenos del hombre, otros animales y plantas.

Ojo: Representan el 50% de materia viva que vive en el planeta, se reproducen por fisión binaria,
algunos tienen vida libre y otra vida intracelular ligada, está conformado por un cromosoma único
circular, su pared celular es plasma, algunas bacterias poseen una capa exterior de carbohidratos
llamada “capsula”.

Son los organismos más pequeños que contienen toda la maquinaria requerida para su
crecimiento y autorreplicación a expensas del material alimenticio.

o Tamaño: El tamaño de las bacterias oscila entre las 0.5 y 3 µm, pudiendo llegar en algunos
tipos a 10 µm. Las bacterias de interés médico tienen un tamaño entre 0.4 y 2 µm.
o Morfología:
 Microscópica: La forma de las bacterias al microscopio está determinada por la
rigidez de su pared celular. La morfología bacteriana debe ser observada con el
microscopio óptico o el microscopio electrónico. Las bacterias pueden observarse
sin tinción (examen en fresco). Las coloraciones que se usan para teñir los
preparados de bacterias, se pueden dividir en: simples, diferenciales y especiales.
 Macroscópica: La mayoría de las bacterias se multiplican rápidamente y son
visibles como colonias cuando se las siembra en medios de cultivo sólidos
adecuados. Una colonia está constituida por los descendientes de una o unas
pocas células. Las características de la colonia también dependen de la movilidad
de la bacteria.
o Estructura bacteriana: Las diferentes estructuras bacterianas que observamos las
podemos dividir, según sean constantes en las células o no, en estructuras permanentes o
variables.
Dentro de las primeras se destaca: la pared celular, la membrana celular, los ribosomas y
el material genético. Las estructuras variables son: los flagelos, las fimbrias o pilis, la
cápsula y los esporos.

BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL: HONGOS


Los hongos son organismos heterótrofos, debido a la falta de clorofila y pigmentos fotosintéticos.
Presentan una pared celular de quitina Son inmóviles y se reproducen sexual y asexualmente por
medio de esporas. Su nutrición la realizan por medio de esporas

o Morfología interna: El hongo se encuentra formado por una red de filamentos (hifas), que
su vez forman una masa entretejida y algodonosa conocida como micelio. Las hifas
pueden ser tabicadas y no tabicadas
o Morfología externa: El cuerpo fructífero del hongo tiene 3 partes: sombrero, himenio o
henio y pie o talo.
o Formas de vida: Están relacionadas al tipo de nutrición que estos tienen.
 Saprobios: absorben los nutrientes de la materia orgánica no viviente. 
responsables de enfermedades en plantas
 Parásitos: absorben los nutrientes de sus huéspedes.
 Simbióticos: forman relaciones simbióticas con los animales, algas y
cianobacterias.
o Reproducción: Reproducción sexual: se da a través del núcleo de cada hifa. Reproducción
asexual: no presenta células sexuales ni la unión de núcleos. Dispersión de esporas: en
cualquiera de los casos de reproducción se forman esporas
o Clasificación: Su clasificación está basada en los métodos de reproducción. Ascomycota,
Basidiomycota, Chytriomycota, Zygomycota

BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL: LEVADURAS (es un tipo de hongo)

Son organismos eucariotas, unicelulares. Las levaduras son hongos que forman sobre los medios
de cultivo colonias pastosas. Las dimensiones pueden oscilar de 1 a 9 µm de ancho y 2 a más de 20
µm de longitud según la especie, nutrición, edad y otros factores. Actualmente se han descrito
1500 especies.

La levadura más utilizada es la saccharomyces cerevisiae, productora de anticuerpos


recombinantes, utilizada para la expresión génica.

o Clasificación: Se encuentran clasificados dentro de los Ascomicetos, Basidiomicetos y


Deuteromicetes
o Método de identificación: Características de la reproducción vegetativa, Características
sexuales, Características bioquímicas y fisiológicas
o Fisiología del crecimiento: Necesidades nutricionales: C, N, P, S, K, Mg, Ca, Zn, Mn y otros
iones. Influencia del entorno: temperatura, presión osmótica, oxígeno y agentes químicos.

BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL: VIRUS

Son parásitos intracelulares obligatorios, no pueden sintetizar ATP ni proteínas


independientemente de la célula. Los virus no son seres celulares. Los virus necesitan infectar a
una célula para poder reproducirse. Más del 40% del material genético que poseen las personas se
encuentran constituidos por los virus.  El genoma viral puede ser ARN o ADN, pero no ambos.
Los virus poseen una cápside protéica y algunos una envoltura. Los componentes virales se
ensamblan y no se replican por “división”.

o Tamaño: 20 – 250 nm.


o Estructura:

o Genoma viral:

o Capsides: Es una estructura que


rodea y protege al genoma vírico y está formado por proteínas codificadas por genes del
virus. Estas proteínas que forman la cápside se denominan protómeros. Simetría es la
forma que adopta un virus en el espacio, está dada por la estructura de la Nucleocápside.
En base a su configuración puede tener una:
o Envoltura: Es una capa membranosa que rodea la nucleocápside de diferentes virus. Esta
envoltura tiene estructura de membrana, con bicapa lipídica con proteínas: Los lípidos de
la envoltura proceden de las membranas de la célula hospedadora. Las proteínas están
codificadas por genes del virus Glicoproteínas: tiene unidos azucares. Sobresalen de la
membrana. Espículas o peplómeros. Fn: Unión a célula hospedadora Actividad
enzimática
o Proteínas: Constituyen del 50 al 90% de la partícula viral. Estructurales: están presentes en
el virión en una proporción importante y mantienen la estructura del mismo. Superficie:
constituyen los capsómeros y peplómeros (proyecciones de la envoltura, glicoproteínas,
ej: Hemaglutinina y Neuraminidasa) Internas: ubicadas en la cara interna de la envoltura,
entre capas de capsómeros, en el centro del virión. No Estructurales: enzimas requeridas
para el ciclo de replicación, que se sintetizan en la fase temprana de la replicación.
o Clasificación viral: Criterios: Genoma: tipo de ácido nucléico y características del mismo
Tamaño del virión, Cápside (simetría), Envoltura: presencia o ausência, Genómica:
secuencia nucleotídica.

MICROORGANISMOS IMPORTANTES EN LA BIOTECNOLOGIA:

o Microorganismos utilizados como herramientas


 Enzimas microbianas: Los microbios son una fuente de enzimas excelente y útil,
algunas de las primeras enzimas disponibles en comercios aisladas para su uso en
biología molecular.
 Transformación bacteriana: La transformación (habilidad de las bacterias para
apropiarse del DNA que las rodea) es una etapa esencial en los procesos de
clonación de DNA recombinante. Cuando se clona el DNA, los plásmidos
recombinantes se pueden introducir en las células bacterianas por medio de una
transformación, por lo que la bacteria puede duplicar los plásmidos
recombinantes.
 Electroporación: La electroporación es otra técnica habitual utilizada para
transformar las células.
 Técnicas de clonación y expresión: Una de las razones por la cual se transforman
las células bacterianas es para duplicar el DNA recombinante de interés.

o Microorganismos importantes en la biotecnología


La biodiversidad de los microorganismos, así como la naturaleza única y las capacidades
biosintéticas en condiciones ambientales específicas hacen que los microorganismos sean
los probables candidatos para resolver problemas de escases de alimentos, control de
plagas, biodegradación de los xenobióticos, descomposición de la basura, las pilas de
desechos producidas, entre otros.
o Criterios de selección o interés de microorganismos:
 Ingente variedad de actividades y productos de interés (metabolismo aerobio,
anaerobio, quimiolitotroía, etc. permiten diversas aplicaciones).
 Son fáciles de cultivar en grandes cantidades (sistemas industriales).
 Su crecimiento es muy rápido.
 Los sustratos para su crecimiento son baratos.
 Se pueden manipular genéticamente.

Ejemplos:

BACTERIAS CARACTERISTICAS USOS


Lacticas Bacterias Gram positivas, no Biotecnología de alimentos:
esporulantes, ácido-tolerantes producción de yogur, quesos y otros
Fermentación homoláctica o alimentos fermentados (carnes y
heteroláctica (la fermentación es la vegetales). Ejemplos de productos
característica principal, no desde un fermentados son el salchichón, chorizo
punto taxonómico pero sí funcional) y aceitunas.
Múltiples requerimientos nutricionales Producción de ácido lácico
(aas, vitaminas, bases nitrogenadas). Producción de nisina (Lactococcus
Auxótrofos de varios compuestos. lacis), una bacteriocina (molécula
Son anaerobias tolerantes, no utilizan el producida por bacteria que mata a
oxígeno pero este tampoco las mata. otras bacterias. Son similares a
Lactobacillus, Streptococcus, anibióicos pero en un rango más
Lactococcus, Pediococcus, reducido, solo afecta a otras bacterias
Biidobacterium de la misma familia.)
Producción de dextrano (Leuconostoc y
otras esirpes de LAB), polímero de
glucosa con aplicaciones biomédicas
(aumenta volumen del torrente
sanguíneo, etc

Actinomiceto o Bacterias Gram posiivas, esporulantes, o Biotecnología de alimentos:


muchas son ilamentosas (no confundir producción de yogur, quesos y otros
con hongos). alimentos fermentados
o Bacterias predominantes en suelos, o (carnes y vegetales). Ejemplos de
aunque también en agua dulce productos fermentados son el
o Crecimiento lento pero muy importante salchichón, chorizo y aceitunas.
en el reciclaje del C en suelos (poseen o Producción de ácido lácico
actividad despolimerizante, para la cual o Producción de nisina (Lactococcus
requieren enzimas hidrolíicas) lacis), una bacteriocina (molécula
o Producen una enorme variedad de producida por bacteria que mata a
metabolitos secundarios bioacivos otras bacterias. Son similares a
(tienen algún efecto beneficioso sobre anibióicos pero en un rango más
los seres humanos) reducido, solo afecta a otras bacterias
o Streptomyces es el género de la misma familia.)
farmaceuicamente más importante, o Producción de dextrano (Leuconostoc y
produce muchos anibioico otras esirpes de LAB), polímero de
glucosa con aplicaciones biomédicas
(aumenta volumen del torrente
sanguíneo, etc)

Corinebacteria Las características de las corinebacterias son o Producción de aminoácidos (glutámico,


s similares a las de atcinomicetos, pero lisina) y nucleóidos
carecen de la producción de metabolitos o Maduración de algunos quesos
secundarios. (Brevibacterium)
o Bacilos Gram positivos, no esporulantes,
relacionadas con los acinomicetos
o Bacterias predominantes en suelos,
aunque también en agua dulce
o Muy importante en el reciclaje del C en
suelos
o Corynebacterium y Brevibacterium son
los géneros más importantes

LOS MICROORGANISMOS UTILIZADOS COMO:

Productos alimenticios:

 En la década de 1980, gracias a las técnicas de DNA recombinante, los científicos clonaron
la renina y la expresaron en células bacterianas y hongos como es el caso del
Aspergillusniger. La renina recombinante (actualmente llamada quimosina) procedente de
los microbios es muy utilizada por los fabricantes de queso por ser un sustituto barato que
sirve para evitar extraer la renina de los terneros.
 Microbios fermentadores

Proteínas terapéuticas

 El desarrollo de la tecnología de DNA recombinante permitió rápidamente utilizar las


bacterias para fabricar medicamentos como las proteínas terapéuticas. La insulina fue la
primera molécula recombinante expresada en bacterias que se utilizan en humanos.
 En este caso, estudiaremos la producción de insulina como un ejemplo de cómo se pueden
utilizar los microbios para fabricar proteínas terapéuticas.

Utilización de microbios contra otros microbios

 La gran mayoría de los antibióticos se aíslan de las bacterias, y la mayor parte de estas
sustancias inhiben el crecimiento de otras bacterias.

Trabajos de campo con microorganismos recombinantes

 Microbios recombinantes en el campo

ENZIMAS

 Son proteínas
 Función: Biocatalizadores
 Moléculas encargadas de acelerar las velocidades de las reacciones químicas en medio
acuoso
 Actividad de la enzima se denomina “Actividad Catalítica”, que depende del plegamiento a
las estructuras tridimensionales (sitios activos), el sustrato tiene cierta afinidad para
formar los productos.
 Algunos para su actividad solo necesitan tener su estructura aminosidica y otros necesitan
de cofactores (hierro, manganeso, zinc o moléculas inorgánica); enzimas mediante enlace
covalente forman el grupo prosetico, si se junta con un enlace débil se llama coenzima.

CLASIFICACIÓN

ACTIVIDAD
ENZIMATICA

o Las reacciones sean catalizadas o no, dependen para su desarrollo de las leyes termodinámicas
o Parámetro termodinámico  Energía libre de Gibbs, (ΔG).: Permite deducir si una reacción se
desarrolla o no de forma espontánea, esta energía mide la capacidad que tiene un sistema
para desarrollar un trabajo.
o En una reacción química la conversión de sustrato en producto requiere una situación
energética intermedia que se denomina estado de transición.
o La diferencia entre el nivel de energía basal y la correspondiente al estado de transición se
denomina energía de activación. (a más energía de activación va ser menor la velocidad de
reacción.)
o Un detalle importante a la hora de analizar la actividad enzimática, es que, en las reacciones
catalizadas enzimáticamente, se incrementa la velocidad de la reacción; pero lo que no se
modifica es el equilibrio de la misma, que sigue las leyes termodinámicas independientemente
de la presencia o ausencia del catalizador.
o Para que se realice la transformación de una molécula, que denominamos sustrato (S), en otra
que denominamos producto (P), el cambio de energía libre de Gibbs ha de ser negativo, lo que
implica que la energía libre del producto ha de ser menor que la del sustrato.

UNIÓN DE LA ENZIMA CON EL SUSTRATO

o La molécula o moléculas a modificar se sitúan en una región concreta de la enzima


denominada centro o sitio activo.
o El sitio activo otorga dos propiedades básicas de la molécula: la especificidad y la acción
catalizadora de la proteína. Existen enzimas de alta especificidad que solo aceptan un solo tipo
de molécula.
o La interacción entre enzima y sustrato se realiza a través de enlaces de naturaleza débil entre
la molécula de sustrato y el centro activo. A mayores enlaces – mayor especificidad de la
enzima.
o Modelo: ¨Llave y su cerradura¨¨: Fisher en 1890. Estudio la especificidad de las enzimas
o Modelo ¨Guante y la mano¨: Koshland Neet - teoría del ajuste inducido.

CATÁLISIS ENZIMÁTICA – Mecanismos de aceleración

o Disminución de la entropía
o Facilitación del medio ambiente de la reacción (el centro activo posee diferentes grupos
funcionales lo cual puede modificar el M.A. del sustrato)
o Introducción de tensión o distorsión sobre el sustrato (la complementariedad entre el sustrato
y el centro activo va a modificar la aparición de enlaces entre ambos)
o Existencia de grupos catalíticos específicos (van a colaborar en la formación de enlaces que
unen el centro activo y sustrato.

CINÉTICA ENZIMÁTICA

El estudio de la actividad enzimática implica el análisis de la velocidad de actuación de la enzima.


(se puede decir que la velocidad de actuación se refiere a la velocidad en que forma el producto o
la velocidad con la cual va desaparecer el sustrato). Si se aumenta la concentración de sustrato-
aumentara también la velocidad de reacción.

Modelo:

L.Michaelis y M. Menten en 1913, diseñaron un modelo o teoría general de la acción


enzimática: Explica el comportamiento hiperbólico de la velocidad con respecto a la
concentración de sustrato. En el modelo postularon que la enzima (E) se combina en primer
lugar con el sustrato (S), de forma reversible, formando el complejo enzima-sustrato (ES).

MODELO DE MICHAELIS – MENTEN

o La enzima puede existir en dos formas, en forma libre (E) o combinada como ES (enzima-
sustrato).
o Cuando la [S] es baja la mayoría de la enzima estará libre y se verá favorecida la formación de
ES, cuando se va incrementando la [S] la velocidad aumenta linealmente.
o La [E] libre será la diferencia entre la [E] total o inicial y la [ES] o enzima combinado con el
sustrato, y la velocidad máxima se alcanzará cuando toda la enzima se encuentre en forma de
ES, llegándose a la saturación de la enzima por su sustrato.
o Al disponer de una concentración de sustrato saturante,
la reacción alcanza rápidamente un estado estacionario
en el que la [ES] se mantiene prácticamente constante y
la velocidad medida durante este estado es la velocidad
analizada por el modelo de Michaelis-Menten que
también se denomina modelo del estado estacionario.
o La ecuación de Michaelis-Menten puede transformarse algebraicamente.
o Su representación gráfica será una línea recta.
o Otra linearización de la ecuación de Michaelis es la obtenida por el método de Eadie-Hofstee,
donde en el eje de abscisas se representa v y en el de ordenadas v/S.
o La constante “Km” suele relacionarse la afinidad de la enzima por el sustrato.

FACTORES QUE INFLUYEN EN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

 Las cargas sirven para estabilizar la conformación natural de la proteína y


cuando el pH las cambia, también se modifica la estructura, llevando en
Ph último extremo a la desnaturalización de la proteína, y en el caso de las
enzimas a la pérdida de actividad.
 Ph óptimo: valor en el que la enzima logra su máxima actividad.
 La mayor parte de las enzimas son muy sensibles excepto la amilasa salival
 Este factor tiene dos efectos contrapuestos.
Temperatur  La temperatura aumenta la velocidad de reacción y por otro lado
a desnaturaliza o perdida de actividad.

INHIBICIÓN ENZIMÁTICA: Conjunto de moléculas que disminuyen la actividad enzimática se les


denomina inhibidores. Estos dos tipos de inhibición depende del tipo de unión entre enzima e
inhibidor.

Inhibición reversible (unidos por enlaces no Inhibición irreversible (unidos por fuertes
covalentes) enlaces covalentes)
 inhibidores competitivos (compiten con el  Son los que se unen a la enzima mediante
sustrato por ocupar el centro activo), enlaces covalentes. (se unen en el centro
aumentan la constante de Km pero no activo en cualquier otro lugar causando
suele modificar la velocidad máxima. inactivación permanente)
 no competitivos (se unen a la enzima en  Ejemplo: Fármacos (bloquea las enzimas
puntos distintos al centro activo, su unión para impedir la actividad de síntesis de la
va incapacitar a la enzima para que se pared bacteriana)
desarrolle su capacidad catalítica)
 acompetitivos o incompetitivos (no tienen
ninguna afinidad por la molécula o enzima
sino que se va unir a la enzima cuando
forme el complejo ES.

BIOLOGÍA MOLECULAR:

DEFINICIÓN

Rama de la biología molecular que estudia los mecanismos que regulan la disponibilidad y la
actividad de las proteínas en las células a partir de la información genética contenida en ácidos
nucleicos. Dos macromoléculas son su objeto de estudio: el ADN y ARN. Cada célula tiene entre 10
– 10000 clases de moléculas diferentes. Existen 4 tipos de macromoléculas: proteínas, ácidos
nucleicos, polisacáridos y lípidos
HISTORIA

o Principios siglo XIX: Teoría del origen de las especies – charles Darwin
o 1866: Teoría de Herencia Mendeliana – padre de la genética
o 1869: Meicher aísla por primera vez el ADN, la sustancia encontrada la llamo “nucleina”
o 1940: Una fracción ácida purificada es capaz de transformar neumococo.
o 1944: Avery demuestra que, durante la trasformación bacteriana en el ADN, y no las
proteínas, el que contiene la información genética
o 1953: A partir de los estudios con rayos X efectuados por Franklin y Williams, Watson y Crick
proponen que la estructura del ADN se asemeja a la de una doble espiral.
o 1957: Komberg, descubre el ADN polimerasa (enzima que sintetiza el ADN)
o 1961 Mamur y Doty desarrollan la técnica de hibridación del ADN.
o 1962: Arber descubre las nucleasas de restricción (enzimas que separan en fragmentos al
ADN).
o 1966: Nirenberg, Ohoa y Khorana descubren el código genético.
o 1967: Geller descubre el ADN ligasa 8que une fragmentos de ADN).
o 1972-73: Boyer. Cohen y Berg desarrollan las técnicas de clonación del ADN.
o 1975-77: Sanger y Barrel y Gilbert desarrollan métodos de secuenciación rápida del ADN.
o 1981-82: Palmiter y Brinster desarrollan ratones transgénicos.

ÁCIDOS NUCLEICOS:

CARÁCTERÍSTICAS

o Son macromoléculas que se encuentran formadas por subunidades de cadenas de DNA y


RNA
o Conforman las subunidades de las cadenas de DNA y RNA
o Almacenamiento y transmisión de la información genética
o Transporta energía
o Son parte de coenzimas esenciales
o Regulan numerosas funciones metabólicas.

TERMINOLOGÍA

Grupos fosfatídicos Forman parte de los ácidos nucleicos y nucleótidos en forma


de monofosfatos, difosfatos o trifosfatos
Residuos de azúcares Generalmente son derivados de una ribosa, como β-D-ribosa o
β-D-desoxirribosa.
Bases nitrogenadas La citosina (C), la timina (T) y el uracilo (U)
de pirimidina
Bases nitrogenadas La adenina (A) y la guanina (G) son las dos bases nitrogenadas
de purina de purina.
Nucleósidos y Un nucleósido es un compuesto de un residuo de azúcar + una
nucleótidos base nitrogenada
Ácido nucleico Los ácidos nucleicos se forman cuando los nucleótidos se unen
entre sí por medio de puentes fosfodiéster entre el átomo de
C3’ de un nucleótido y el C5’ del siguiente
ESTRUCTURA DE NUCLEÓSIDOS Y NUCLEÓTIDOS

ADN: ESTRUCTURA

o Cada molécula de ADN está formada por dos polímeros lineales de nucleótidos.
o Cada nucleótido consta de una base nitrogenada y un azúcar.
o Los nucleótidos están unidos entre sí por enlaces covalentes fosfodiéster que unen el
carbono en posición 5´ de una desoxirribosa con el carbono 3´ de la desoxirribosa siguiente.
o Las dos cadenas constituyen cada molécula de ADN se enrollan entre sí forman una doble
hélice.
o Ello es posible porque entre las bases de cada polímero se forman parejas de bases
complementarias.
o Cada pareja a través de puentes de H, de la adenina de un polímero con la tiamina del otro y
de la guanina de un polímero con la citosina del otro

ADN: REPLICACIÓN

o Es el proceso por el cual se copia cada cadena del DNA para dar origen a una nueva cadena
de DNA complementaria. Esto ocurre en cada división celular (mitosis) y asegura que la
información genética sea transmitida a ambas células hijas.
o La síntesis de DNA involucra la acción altamente coordinada de muchas proteínas que se
encuentran en un complejo denominado replisoma. Durante la replicación cada cadena de
DNA sirve como molde para la formación de una nueva cadena. Esto se conoce como
replicación semiconservativa.
o También existe replicación durante la recombinación y la reparación del DNA dañado.

ADN: REPLICACIÓN SEMICORSEVATIVA


Empieza con la enzima Helicasa que separa las dos cadenas de nucleótidos, cortando los puentes
de hidrogeno, los cebadores de RNA van a iniciar el proceso de replicación de DNA ya que sirven
de sitios de unión para las DNA polimerasa, las enzimas claves de sintetizar las nuevas hebras de
DNA son DNA polimerasa.

GEN

o Lo principal que transmitimos por procesos de replicación son los genes


o Unidades heredadas
o Un gen es una secuencia de nucleótidos que proporciona a las células las instrucciones para
la síntesis de una proteína específica o un tipo particular de RNA.
o Los influyen en el metabolismo celular y en el comportamiento y las habilidades cognitivas<
o Los rasgos “apariencia heredada” pueden ser controlados por un único gen, mientras que
otros están determinados por múltiples genes que codifican proteínas que interactúan de
manera compleja.
o Tienen entre 1000 - 4000 nucleótidos de largo.

GENOMA

o Todo el DNA de las células de un organismo se denomina genoma.


o Existen aproximadamente 20.000 genes repartidos entre 3 mil millones de pares de bases de
DNA
o El estudio de los genomas la realiza la genómica.

ARN

o Es una macromolécula que tiene una cadena simple, el azúcar presente es la ribosa y posee
el uracilo en vez de timina.
o Suele ser mucho más rígido que el ADN debido a que cuenta con moléculas de agua
o Se diferencia del ADN por su base nitrogenada Uracilo (U),
o Además, su estructura es de hélice simple a diferencia de la doble hélice del ADN.
o El ARN se diferencia del ADN por sus funciones. Existen 3 tipos: el ARN mensajero (ARNm), el
ARN de transferencia (ARNt) y el ARN ribosómico (ARNr).
o Guarda, transporta y transmitir información entregada por el ADN.
o Sintetiza proteínas importantes.

ARN: TRANSCRIPCIÓN
La RNA polimerasa (enzima clave para llevar este proceso), dentro del núcleo se encarga de
desenrollar la hélice de DNA y luego va a copiar una cadena de RNA, solo se transcribe en los
segmentos de un cromosoma que contengan genes.

ARN: REGULACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN

o Para que las RNA polimerasas inicien la transcripción se requiere de factores de transcripción
que señalan el gen que deben transcribir.
o Esto ocurre porque a poca distancia del gen hay unas secuencias de ADN, llamadas región
promotora, a las que se unen los factores de transcripción
o Los factores de transcripción son sintetizados por genes físicamente alejados del lugar donde
ejercen su acción y se llama acción “trans”. Los elementos que conforman una región
promotora actúan de forma “cis”, puesto que su función se limita al gen que está situado a
continuación. Los reguladores en “cis” de la transcripción de un gen son: Secuencias
promotoras, Secuencia amplificadoras, Secuencia silenciadoras.

ARN: TIPOS

ARN mensajero  El mRNA se produce cuando se copian muchos genes a RNA


(mRNA)  El mRNA lleva la información que codifica para la síntesis de una
proteína.
 Se forma mediante la transcripción en forma de codones
ARN  Tiene forma de trébol y solo tiene 80 nucleótidos
Transferencia  su función consiste en aportar la forma activada de los AA a
(tRNA) moléculas de proteína en los ribosomas.
 Cada molécula de tRNA posee dos sitios de reconocimiento (para el
codón y para el aminoácido)
RNA ribosómico  El ribosoma es la estructura física en el citoplasma en la que tiene
(rRNA) lugar la síntesis de proteínas.
 El rRNA constituye el 60% del ribosoma
 Los ribosomas en el citoplasma comienzan a sintetizar proteínas.

ARN: TRADUCCION

En eucariotas, comprende 3 procesos iniciación, elongación (RNA de transferencia entra al


ribosoma) y terminación.

ADN: EVIDENCIA DE QUE EL DNA ES EL MATERIAL GENÉTICO HEREDADO

o Miescher purificó nucleína a partir de glóbulos blancos de la sangre y observó que la


nucleína no podía ser degradada por las enzimas para la digestión de proteínas llamadas
proteasas.
o Este descubrimiento sugirió que la nucleína no estaba formada exclusivamente por
proteínas.
o Estudios posteriores determinaron que este material tenía propiedades ácidas, luego la
nucleína pasó a llamarse «ácido nucleico»
o El DNA y el ácido ribonucleico (RNA) son los dos tipos principales de ácidos nucleicos.
o la prueba de que el DNA era el material genético que se heredaba fue proporcionada por
primera vez por el microbiólogo británico Frederick Griffith en 1928.
o En 1944, Oswald Avery, Colin MacLeod y Maclyn McCarty purificaron el DNA a partir de
grandes cantidades de S. pneumoniae crecido en cultivo líquido.
o En el experimento de Avery, MacLeod, McCarty, homogeneizaron mezclas de bacterias de
S. pneumoniae y trataron estos extractos con proteasas, enzimas de degradación del RNA
(RNAsa), o enzimas de degradación del DNA (DNAsa).
o Posteriormente, llevaron a cabo experimentos de transformación con estos extractos
lavados.

INGENIERÍA GENÉTICA:

La Ingeniería Genética es una rama de la genética que se concentra en el estudio del DNA y en el
uso tecnología de manipulación y transferencia del DNA de unos organismos a otros.

HISTORIA

o 1982: Primer fármaco recombinante (Insulina humana)


o Ratones transgénicos (hormona de crecimiento)
o 1983: Técnica de la PCR.  replicar varios fragmentos específicos de DNA de manera rápida
sin necesitar técnicas de clonación
o Primero vegetales transgénicos (Flavr Savr y máiz Bt)
o 1990: vacas transgénicas (proteínas humanas en leche)
o 1997: Clonación (Oveja Dolly)
o Empieza la terapia génica en humanos – tratamientos de enfermedades
o Era genómica: Proyecto Genoma Humano
o 1995: secuenciación de genomas bacterianos (Hemophilus influenzae y Mycoplasma
genitalium)
o 1996: secuenciación de levadura (Saccharomyces cerevisiae)
o 1998: secuencia del primer organismo multicelular (Caenorhabditis elegans).
o 2003: Finalización del Proyecto Genoma Humano
o Creación de plataformas de secuenciación masivas
o Era posgenómica: generación de secuencias genómicas de varios organismos
o Tecnologías ómicas: estudio de genes, proteínas y metabolitos, técnicas de síntesis in vitro
de genomas enteros y manipulación a nivel genómico.
o 2005: Descubrimiento de nucleasa CRISPR/Cas
o Creación del primer genoma bacteriano sintético
o 2010: Primer forma de vida sintética (Synthia).

PROYECTO GENOMA HUMANO

o En 1990 se inició uno de los proyectos más gigantescos y ambicioso, el PROYECTO GENOMA
HUMANO (PGH)
o En 1988, se creó HUGO (HUMAN GENOME ORGANIZATION), un Consorcio internacional (CI)
para coordinar tareas relacionadas con el proyecto de secuensación. Participaron 20 grupos
y 6 países (U.S.A, Inglaterra, Japón, Francia, Alemania y China).
o En 1999, se publicó la secuencia completa del cromosoma 22 humano
o En 2000; se publicó la secuencia del cromosoma 21.
o En 2003, HUGO hizo pública la secuencia casi definitiva de más de 2850 pares de bases que
supone un 99.999% de las regiones eucromáticas del GH.

PROYECTO GENOMA HUMANO: PRINCIPALES CONCLUSIONES

o Los exones ocupan el 1.1% del genoma, lo intrones el 24%. El 75 % de DNA restante
corresponde a DNA intergénico.
o El número total de genes presentes en el genoma es de 25 000 aprox.
o Alrededor del 60 % de genes tienen homología con otros genomas ya secuenciados.
o Solamente el 2% del genoma contiene genes que codifican para proteínas.
o Un gen codifica para 2 o 3 RNA distintos, por lo que el proteoma puede contener 75 000 –
100 000 proteínas.
o Compartimos un 30% de nuestros genes con levadura, alrededor de 80% con ratón y un 95%
con chimpancés.

PROYECTO GENOMA HUMANO: APLICACIONES

o Diagnóstico molecular de enfermedades


o Detección temprana de predisposición genética e enfermedades
o Diseño racional de fármacos y sistemas de control de fármaco (farmacognómica).
o Terapia génica
o Bioantroplogía: comprensión del linaje humano y exploración de corrientes de migración.
o Identificación mediante DNA: víctimas de catástrofes, identificación de parentescos, análisis
criminal basado en perfiles genéticos, pedigríes de animales, plantas, alimentos,
identificación de contaminantes en aire, agua y suelo, animales.
o Agricultura, ganadería y bioprocesado: obtención de plantas y animales más resistentes,
obtención de alimentos más nutritivos y abundantes, producción de vacunas comestibles,
plagas y condiciones ambientales.
o Biorremediación: limpieza de residuos tóxicos, captura del exceso de carbono, generación de
fuentes limpias de energía, etc.

INGENIERÍA GENÉTICA: TÉCNICAS

o La ingeniería genética es un conjunto de técnicas que permite manipular los genes. El


descubrimiento de las enzimas de restricción fue clave para poder desarrollar estos
procedimientos. La obtención in vitro de ADN recombinante, su posterior introducción en
bacterias mediante vectores y su amplificación en múltiples copias iguales (clonación) son
algunos usos de la ingeniería genética.
o En la actualidad, es evidente la importancia de la ingeniería genética para la medicina y la
mejora cualitativa y cuantitativa de la producción animal y vegetal, así como en los procesos
de la biotecnología ambiental.

INGENIERÍA GENÉTICA: TRANSFORMACIÓN

o Es la alteración genética de una célula resultante de la absorción directa, incorporación y


expresión del material genético exógeno (ADN exógeno).
o La transformación se refiere a un cambio genético estable producido al incorporar ADN al
genoma, y la competencia refiere al estado de ser capaz de incorporar ADN exógeno del
ambiente.
o Dos formas distintas de competencia (cuando el organismo ya ha adquirido cierta
característica) deben ser distinguidas: natural y artificial.

INGENIERÍA GENÉTICA: ENZIMAS DE RESTRICCIÓN

Son enzimas bacterianas que cortan el ADN en un punto determinado, situado en unas secuencias
denominadas palindrómicas, que son iguales en ambas hebras y que presentan simetría según la
complementariedad de bases. Las enzimas de restricción cortan un segmento de ADN y lo dejan
flanqueado por extremos cohesivos, que facilitan la unión entre fragmentos de ADN cortados con
la misma enzima. Ejemplo: Enzima endonucleasa capaces de hidrolizar las moléculas de DNA en
sitios específicos.

ENZIMAS DE RESTRICCIÓN: CARACTERÍSTICAS

o Las enzimas de restricción cortan el DNA rompiendo el enlace fosfodiéster (en el eje azúcar
fosfato) que une los nucleótidos adyacentes en una cadena de DNA.
o Las enzimas de restricción se encuentran sobre todo en las bacterias y se les da nombres
abreviados basados en los nombres del género y especie de las bacterias.
o A las enzimas de restricción se las conoce normalmente como cortadoras de cuatro o de seis
pares de bases porque reconocen típicamente posiciones con una secuencia de cuatro o seis
nucleótidos.
o Para ellas, el sustrato vendría ser el DNA.
INGENIERÍA GENÉTICA: VECTORES

o Son moléculas transportadoras que transfieren y replican fragmentos de ADN que llevan
insertados mediante técnicas de ADN recombinante.
o Para que sirva de vector, una molécula debe ser capaz de replicarse junto con el fragmento
de ADN que transporta. También tiene que tener secuencias de reconocimiento que
permitan la inserción del fragmento de ADN a clonar.
o Para insertar el fragmento de DNA en un vector se utiliza las enzimas de restricción.

VECTORES: CARACTERÍSTICAS

 Deberían ser lo suficientemente pequeños como para


Tamaño que se puedan separar fácilmente del DNA
cromosómico de la bacteria hospedadora
 Es el sitio de replicación del DNA.
Origen de replicación:  Número de copias: número de plásmidos que hay en
una célula
Genes marcadores que se  Permiten la selección e identificación de bacterias
puedan seleccionar transformadas mediante un plásmido recombinante
Secuencias del promotor de  Se utilizan estas secuencias para la transcripción del
RNA polimerasa RNA in vivo e in vitro por la RNA polimerasa.
Secuencias de cebadores  Permiten la secuenciación de nucleótidos de
(primers u oligonucleótidos) fragmentos de DNA clonado
para la secuenciación del DNA.

VECTORES DE CLONACIÓN: TIPOS

Extraídos de células procariontes Extraídos de células eucariontes


 Plásmidos bacterianos  Levaduras
 Bacteriófagos derivados del plasmido2µ
 Cósmidos  YACs
 BACs

INGENIERÍA GENÉTICA: BIBLIOTECAS DE DNA

o Las bibliotecas son colecciones de fragmentos de DNA clonados de un organismo particular


contenidos dentro de bacterias o virus como hospedadores.
o Las bibliotecas pueden almacenarse durante períodos relativamente largos de tiempo y
«rastrearse» para elegir diversos genes de interés.
o Se suelen utilizar dos tipos de bibliotecas para la clonación: las bibliotecas de DNA genómico
y las bibliotecas de DNA complementario.

INGENIERÍA GENÉTICA: PCR

o La PCR es una técnica para hacer copias o amplificar una secuencia específica del DNA en un
corto período de tiempo.
o Aquí, se añade el DNA diana que se desea amplificar a un tubo de paredes finas y se mezcla
con desoxirribonucleótidos (dATP, dCTP, dGTP, dTTP), solución tampón (o buffer) y DNA
polimerasa. Se añade a la mezcla una pareja de primers (oligonucleótidos de 20-
30nuceotidos)
o El tubo de reacción se coloca en un instrumento llamado “termociclador”. El termociclador
toma la muestra mediante una serie de reacciones llamadas ciclo de PCR  tiene 3 fases:
desnaturalización, hibridación y elongación.
o Antes se utilizaba la técnica de sanger – convencional

INGENIERÍA GENÉTICA: APLICACIONES DE LA TECNOLOGÍA DEL DNA RECOMBINANTE

INGENIERÍA GENÉTICA: MAPA DE RESTRICCIÓN

o Es como un mapa físico del gen que determina qué enzimas de restricción lo cortan y la
ubicación de estos sitios de corte.
o Para crear un mapa de restricción, el DNA clonado se somete a una serie de digestiones
simples con enzimas de restricción o con enzimas combinadas. Después, se utiliza la
electroforesis en gel de agarosa para separar y visualizar los fragmentos de DNA basándose
en el tamaño.

INGENIERÍA GENÉTICA: SECUENCIACIÓN DEL DNA

o Deducir la secuencia de aminoácidos de una proteína codificada por un gen clonado


o Determinar la estructura exacta del gen,
o Identificar los elementos de regulación, tales como las secuencias del promotor, Identificar
las diferencias entre genes creados por empalme (también llamado splicing) de genes
o Para identificar mutaciones genéticas.

SECUENCIACIÓN DEL DNA: MÉTODO SANGER

Método Sanger  Métodos de secuenciación de DNA automatizados por ordenador.

INGENIERÍA GENÉTICA: LOCALIZACIÓN DE UN GEN

 Identifica que cromosoma contiene un gen interés


 los cromosomas se aíslan de células como los leucocitos y se
extienden sobre un portaobjetos de cristal para microscopio. Se
Hibridación marca químicamente con nucleótidos fluorescentes una sonda
fluorescente in situ de cDNA para el gen de interés y después se incuba en solución
(FISH) con el portaobjetos.
 cuando la sonda se ha unido a un cromosoma, la sonda marcada
con fluorescencia se iluminará indicando la presencia de ese gen
 Se utiliza para determinar el número de copias de un gen.
 comienza por la digestión del DNA cromosómico en pequeños
Transferencia Southern fragmentos con enzimas de restricción. Los fragmentos de DNA
se separan mediante electroforesis en gel de agarosa
 Tecnología del sándwich

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