J. Dairy Sci.
97: 291–298
http://dx.doi.org/10.3168/jds.2013-7099
© Asociación Estadounidense de Ciencias Lácteas ®, 2014.
Efectos del tiempo y el lugar de muestreo en las concentraciones
A. Mahrt, O. Burfeind y W. Heuwieser 1
Clínica de Reproducción Animal, Facultad de Medicina Veterinaria, Freie Universität Berlin, Koenigsweg 65, 14163 Berlín, Alemania
RESUMEN
Se realizaron dos ensayos para examinar los factores que potencialmente
influyen en la medición del ácido β-hidroxibutírico (BHBA) en sangre en vacas
lecheras. El objetivo del primer ensayo fue estudiar los efectos del tiempo de
muestreo sobre la concentración de BHBA en vacas lecheras alimentadas
continuamente. Además, determinamos las características de la prueba de una
única medición de BHBA en un momento aleatorio del día para diagnosticar la
cetosis subclínica considerando los puntos de corte comúnmente utilizados (1.2
y 1.4 mmol / L). Finalmente, nos propusimos evaluar si las características de la
prueba podrían mejorarse repitiendo las mediciones después de diferentes
intervalos de tiempo. Durante 4 visitas al hato, un total de 128 vacas (de 8 a 28
d en leche) alimentadas 10 veces al día fueron evaluadas a las 09:00 hy
preseleccionadas por concentración de BHBA. Se extrajeron muestras de
sangre de los vasos de la cola y se midieron las concentraciones de BHBA
utilizando un medidor BHBA electrónico (Precision Xceed, Abbott Diabetes
Care Ltd., Witney, Reino Unido). Las vacas con concentraciones de BHBA ≥0,8
mmol / L en este momento se inscribieron en el ensayo (n = 92). Las siguientes
mediciones de BHBA se realizaron cada 3 h para un total de 8 mediciones
durante 24 h. El efecto del tiempo de muestreo sobre las concentraciones de
BHBA se probó en un ANOVA de medidas repetidas de tiempo de muestreo
repetido. El tiempo de muestreo no afectó las concentraciones de BHBA en
vacas lecheras alimentadas continuamente. Definiendo la concentración diaria
promedio de BHBA calculada a partir de las 8 mediciones como el estándar de
oro, una sola medición en un momento aleatorio del día para diagnosticar la
cetosis subclínica tuvo una sensibilidad de 0.90 o 0.89 en los 2 puntos de corte
de BHBA (1.2 y 1.4 mmol / L). La especificidad fue 0,88 o 0. 90 usando los
mismos puntos de corte. La repetición de mediciones después de diferentes
intervalos de tiempo mejoró las características de la prueba solo ligeramente.
En el segundo experimento, comparamos las concentraciones de BHBA de
muestras extraídas de 3 lugares de muestreo de sangre diferentes (vasos de la
cola, vena yugular y vena mamaria) de 116 vacas lecheras lactantes. Las
concentraciones de BHBA difirieron en las muestras de los 3 lugares de
muestreo. BHBA medio
Recibido el 4 de junio de 2013.
Aceptado el 12 de septiembre de 2013.
1 Autor para correspondencia: w.heuwieser@fu-berlin.de
291
La concentración fue 0.3 mmol / L menor cuando se midió en la vena
mamaria en comparación con la vena yugular y
0.4 mmol / L más bajo en la vena mamaria en comparación con los vasos de la
cola. Concluimos que para medir el BHBA, se pueden extraer muestras de sangre
de vacas lecheras alimentadas continuamente en cualquier momento del día. Una
sola medición proporciona muy buenas características de prueba para las
condiciones de la granja. Las muestras de sangre para la medición de BHBA
deben extraerse de la vena yugular o de los vasos de la cola; la vena mamaria no
debe usarse para este propósito.
Palabras clave: cetosis subclínica, β-hidroxibutírico
ácido, ritmo diurno, salud del rebaño
INTRODUCCIÓN
Durante el período de transición, las vacas lecheras deben
adaptarse al aumento de la demanda de energía resultante de la gestación
tardía y el inicio de la lactancia después del parto (Goff y Horst, 1997)
mientras se reduce la DMI. Posteriormente, un balance energético negativo ( NEBRASK
ocurre en la mayoría de las vacas (Herdt, 2000). La lipólisis resultante causa
niveles elevados de NEFA séricos y, si su oxidación completa en el hígado
falla debido a una sobrecarga, los niveles de cuerpos cetónicos séricos (es
decir, BHBA, acetoacetato, acetona) también aumentan (Krebs, 1966; Herdt,
2000). Cetosis subclínica ( SCK) es una de las enfermedades metabólicas
más importantes en el ganado lechero de alta producción y se define como
la presencia de concentraciones elevadas de cuerpos cetónicos circulantes
sin la aparición de signos clínicos (Anderson, 1988). Las vaquillas de primera
paridad y las vacas de segunda paridad tienen un riesgo reducido de SCK en
comparación con las vacas más viejas (Duffield et al., 1998). La cetosis
subclínica causa pérdidas económicas (Duffield, 2000; Geishauser et al.,
2001; Hogeveen, 2012) y aumenta el riesgo de enfermedades posteriores;
por ejemplo, abomaso desplazado (LeBlanc et al., 2005; Duffield et al.,
2009), metritis (Duffield et al., 2009), cetosis clínica (Duffield et al., 2009;
Seifi et al., 2011), y cojera (Suthar et al., 2013). Está bien documentado que
la SCK afecta negativamente el desempeño reproductivo (Koller et al., 2003;
Walsh et al., 2007a, b; Ospina et al., 2010b) y producción de leche (Ospina
et al., 2010b). Roberts y col. (2012) encontraron un mayor riesgo de descarte
dentro de los primeros 60 DIM para vacas con concentraciones elevadas de
BHBA.
292 MAHRT ET AL.
La cetosis subclínica se ha descrito como una enfermedad umbral (Oetzel,
2004) y el diagnóstico depende de un punto de corte (es decir, de 1,2 a 1,4
mmol / L; Duffield et al., 1998; Enjalbert et al., 2001; Oetzel, 2004 ). Por lo
tanto, los métodos de diagnóstico tienen que determinar la concentración de
cuerpos cetónicos de forma semicuantitativa o cuantitativa en diferentes
fluidos corporales. La medición de la concentración de BHBA en sangre en
laboratorios es la prueba estándar de oro para el diagnóstico de SCK (Oetzel,
2004). Además, se encuentra disponible una variedad de pruebas de cuerpos
cetónicos en el lado de la vaca. Se han evaluado varias pruebas
semicuantitativas de orina o leche (Geishauser et al., 1998, 2000; Carrier et
al., 2004). Recientemente se validó una prueba electrónica del lado del
paciente que mide la concentración de BHBA en sangre total (Precision
Xceed, Abbott Diabetes Care Ltd., Witney, Reino Unido) para su uso en
vacas lecheras (Iwersen et al., 2009) y ovejas (Panousis et al., 2012). Sus
principales ventajas incluyen una medición cuantitativa inmediata con alta
sensibilidad y especificidad sin esfuerzos logísticos para análisis de
laboratorio (por ejemplo, enfriamiento, centrifugación o envío).
Los puntos de corte de uso frecuente para la concentración de BHBA en suero
de vacas lecheras son 1.2 mmol / L (Duffield et al., 1998; Enjalbert et al., 2001;
Suthar et al., 2013) y 1.4 mmol / L (Geishauser et al., 2013). al., 2001; Oetzel, 2004).
Sin embargo, dichos puntos de corte están sesgados por el tiempo de muestreo en
relación con el parto y los criterios de puntos de corte como la prevalencia de
enfermedades, la producción de leche o ambos (Duffield et al.,
2009). Varios autores recomiendan programas estratégicos para monitorear los
rebaños lecheros en cuanto a la magnitud de NEB, SCK y enfermedades
posteriores (Duffield, 2000; Oetzel, 2004; LeBlanc et al., 2005).
Para implementar protocolos de detección con resultados confiables y
repetibles, es esencial la información sobre los factores que pueden
influir en la medición de BHBA. Oetzel (2004) supuso que la ubicación de
la muestra de sangre afecta la concentración de BHBA. Recomendó que
las muestras de sangre para medir la concentración de BHBA no se
recolectaran de la vena mamaria (V. epigastrica cranialis superficialis)
porque la glándula mamaria puede utilizar BHBA como fuente de energía
(Kronfeld et al., 1968), lo que podría afectar las venas Concentración de
BHBA. Un estudio anterior observó concentraciones de BHBA 9.3% más
bajas en muestras de sangre obtenidas de la vena mamaria en
comparación con la vena yugular (Redetzky et al., 2003). Sin embargo, el
tamaño de la muestra fue limitado (n = 12) y la diferencia no fue
significativa en este estudio. Wilhelm y col. (2013) también encontraron
concentraciones más altas de BHBA en muestras tomadas de la vena
yugular y las venas safenas en comparación con la vena mamaria en
vacas lecheras lactantes. Sin embargo, los vasos de la cola no se
consideraron en ninguno de estos ensayos. En general, hay escasez de
información sobre el efecto
Revista de ciencia láctea vol. 97 No. 1, 2014
de las ubicaciones de muestreo comúnmente utilizadas (es decir, vena yugular,
vena mamaria, vasos de la cola) en las concentraciones de BHBA. Además,
varios autores han informado efectos de los patrones diurnos (Andersson, 1988;
Plaizier et al., 2005) o del tiempo de muestreo relativo a la alimentación (Oetzel,
2004; Nikkhah et al., 2008; Quiroz-Rocha et al., 2010 ) sobre las
concentraciones de BHBA en sangre. Se encontró que el ritmo diurno de BHBA
está asociado con la frecuencia de alimentación (Eicher et al., 1999). Estos
últimos autores recomendaron la recolección de 2 muestras (mañana y tarde)
para mejorar la evaluación de situaciones metabólicas. Una mayor frecuencia
de alimentación reduce tanto la concentración máxima como la amplitud de las
fluctuaciones diarias en las concentraciones de BHBA (Sutton et al., 1988).
Falta información sobre los patrones diurnos de concentración de BHBA en
condiciones de un régimen de alimentación continua con TMR y cómo el tiempo
de muestreo y la frecuencia de las pruebas afectan las características de la
prueba (es decir, sensibilidad y especificidad). Por lo tanto, el objetivo general
de este estudio fue analizar los efectos diurnos sobre las concentraciones de
BHBA para vacas con una alimentación continua de TMR. Específicamente,
nos propusimos (1) estudiar los efectos del tiempo de muestreo sobre la
concentración de BHBA en vacas lecheras alimentadas continuamente con
TMR, (2) determinar las características de la prueba (sensibilidad, especificidad,
valores predictivos positivos y negativos) de una sola medición de BHBA en un
momento aleatorio del día para diagnosticar la SCK, (3) evaluar si las
características de la prueba pueden mejorarse repitiendo las mediciones, y (4)
comparar las concentraciones de BHBA de muestras extraídas de 3
ubicaciones de muestreo de sangre diferentes.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se realizaron dos ensayos entre abril y julio
2012 en una granja lechera comercial (Sachsen-Anhalt, Alemania) que albergaba
aproximadamente 1,200 vacas lecheras Holstein-Friesian con una producción de
leche anual promedio de 10,701 kg (4.04% de grasa y 3.35% de proteína). Las
vacas se alojaron en un establo independiente con pisos de rejilla y cubículos
equipados con tapetes de goma. Las vacas fueron alimentadas con un TMR que
consistía en ensilado de maíz al 38.5%, mezcla de concentrados minerales al
35.9%, ensilaje de pasto al 22.5% y paja de cebada al 3.1%.
sobre una base DM (NE L = 7,15 MJ / kg de MS). El alimento se entregó a través de
un sistema de cinta transportadora 10 veces al día.
Las vacas se ordeñaron 3 veces al día aproximadamente a las 06:30,
14.30 y 22.30 h en una sala de ordeño giratoria de 52 puestos
(Lemmer-Fullwood GmbH, Lohmar, Alemania).
En ambos ensayos, el BHBA se midió con un medidor de BHBA
electrónico (Precision Xceed, Abbott Diabetes Care Ltd.) que se ha
utilizado en múltiples ensayos de investigación (Iwersen et al., 2009;
Endecott et al., 2012; McArt et al., 2012). El sistema de prueba consta
del dispositivo portátil y las tiras reactivas, que están equipadas con un
 TM NG Y SAM L NG L CAT NFRH DR
campo de reacción electroquímica en la punta. Los resultados se muestran
en milimoles por litro.
El propósito de la prueba 1 fue evaluar los efectos del tiempo de muestreo
en las concentraciones de BHBA. Para esta prueba, se visitó la granja 4
veces a intervalos de 3 semanas cada una. Todas las vacas multíparas entre
8 y 28 DIM en el momento de la visita se consideraron elegibles y se
examinó un total de 128 vacas. El cribado inicial tuvo lugar aproximadamente
a las 09.00 h. Se recogieron muestras de sangre de los vasos de la cola
usando una jeringa de 2 ml (Henry Schein Inc., Melville, NY) y una aguja de
calibre 23 (Sterican, B. Braun, Melsungen, Alemania). La sangre se analizó
inmediatamente después de la toma de muestras aplicando una pequeña
cantidad de sangre de la jeringa en la tira reactiva. Se registraron las
concentraciones de BHBA mostradas. Se inscribieron en el ensayo vacas
con una concentración de BHBA ≥0,8 mmol / L a las 0900 h. Las mediciones
subsiguientes de BHBA se realizaron cada 3 h durante un total de 24 h (es
decir, 1200,
1500, 1800, 2100, 2400, 0300 y 0600 h). Un total de 92 vacas (DIM: 18 ± 6,
paridad: 3,2 ± 1,2) cumplieron con los criterios de inclusión (es decir, vaca
multípara, DIM 8 a 28, concentración de BHBA ≥ 0,8 mmol / L a las 0900 h)
y se utilizaron para los análisis.
El ensayo 2 se llevó a cabo para comparar las concentraciones de
BHBA de muestras extraídas de 3 lugares diferentes de muestreo de
sangre. Se tomaron muestras de sangre de 116 vacas postparto (DIM: 19
± 13, paridad: 2,9 ± 1,2). Se tomaron muestras en 3 ± 1 min en cada vaca
de los vasos de la cola (A./V. Coccygea), la vena yugular (V. jugula- ris) y
la vena mamaria (V. epigastrica cranialis superficialis) utilizando un tubo
de vacío. sistema (Vacu- ette, Greiner bio one, Kremsmünster, Austria).
Las muestras de sangre total se analizaron inmediatamente después de la
recolección utilizando el medidor de mano Precision Xceed y las tiras
reactivas conectando el campo de reacción al final de la tira reactiva con
la superficie de la sangre. Se registraron las concentraciones de BHBA
mostradas.
Todos los datos se analizaron estadísticamente con SPSS (versión
19.0, SPSS Inc., Munich, Alemania). El efecto del tiempo de muestreo
sobre las concentraciones medidas de BHBA se probó en un ANOVA
de medidas repetidas de tiempo de muestreo repetido. En un segundo
enfoque, se determinaron las características de prueba de una única
medición de BHBA en un momento aleatorio del día para diagnosticar
la SCK utilizando 2 puntos de corte diferentes (1,2 y 1,4 mmol / L) que
se utilizan comúnmente para definir la SCK. La concentración diaria
promedio de BHBA calculada a partir de las 8 mediciones se utilizó
como estándar de oro para definir una vaca como sana o con SCK. Las
vacas se definieron como sanas cuando la concentración diaria
promedio de BHBA fue menor que el punto de corte respectivo (1.2 o
1.4 mmol / L) y como con SCK cuando se alcanzó el punto de corte.
PERO MEDICIÓN RC AC D 293
(es decir, la concentración de BHBA medida en el momento particular del
día fue igual o superior al punto de corte considerado y la concentración
diaria promedio de BHBA fue igual o superior al punto de corte
considerado). La especificidad se calculó como la proporción de
mediciones que diagnosticaron correctamente a una vaca sin SCK como
sana (la concentración de BHBA medida en el momento particular del día
estaba por debajo del punto de corte considerado y la concentración diaria
promedio de BHBA estaba por debajo del punto de corte considerado ). El
valor predictivo positivo se determinó como la proporción de mediciones
iguales o mayores que el punto de corte considerado en el que la vaca
realmente padecía SCK (la concentración diaria promedio de BHBA fue
igual o superior al punto de corte considerado). El valor predictivo negativo
se calculó como la proporción de mediciones por debajo del punto de corte
considerado en el que la vaca estaba verdaderamente sana (la
concentración diaria promedio de BHBA estaba por debajo del punto de
corte considerado). Se realizó un segundo análisis para estudiar si las
características de la prueba aumentaron en casos marginales (es decir,
concentraciones de BHBA de 1.0 a 1.6 mmol / L) usando valores obtenidos
por mediciones repetidas en lugar de una sola medición. Las vacas con
concentraciones de BHBA <1.0 mmol / L o> 1.6 mmol / L en el momento
dado del día se clasificaron como claramente sanas o claramente
subclínicamente cetóticas, respectivamente, y la concentración inicial
medida se utilizó para el análisis. Para mediciones con concentraciones
marginales de BHBA en la primera muestra (es decir, 1.0 a 1.6 mmol / L),
una segunda medición 3,
Se utilizó 6, 9, 12, 15, 18 o 21 h más tarde y se calculó el promedio con la
medición inicial. Posteriormente, este promedio se utilizó para clasificar a
una vaca como sana o con SCK. Las características de la prueba
(sensibilidad, especificidad, valores predictivos positivos y negativos) se
calcularon como se describió anteriormente. Nuevamente, la concentración
diaria promedio de BHBA se utilizó como el estándar de oro para definir
una vaca como sana o con SCK.
Las relaciones entre las concentraciones de BHBA medidas en los 3
lugares de muestreo diferentes se calcularon con la correlación de
Pearson. Las diferencias entre las ubicaciones de muestreo se
determinaron con un ANOVA de una vía. Las diferencias medias se
determinaron con la prueba post hoc de diferencia mínima significativa.
Debido a que una comparación de mediciones clínicas puede ser
inapropiada usando la correlación de Pearson, la concordancia entre las 3
ubicaciones de muestreo se analizó gráficamente con Med-Calc (versión
12.0.3.0, MedCalc Software bvba, Ostende, Bélgica) como lo describen
Bland y Altman ( 1986).
RESULTADOS
Prueba 1
De 128 vacas elegibles examinadas antes del ensayo, 92 mostraron
concentraciones de BHBA ≥0,8 mmol / L en la primera
Revista de ciencia láctea vol. 97 No. 1, 2014
294 MAHRT ET AL.

Tabla 1. Pruebe las características de las mediciones únicas y repetidas de la concentración de BHBA después de diferentes intervalos de tiempo para diagnosticar la cetosis subclínica (SCK) en vacas lecheras 1

Intervalo de tiempo entre 2 mediciones repetidas

Umbral y Soltero
características de la prueba medición 3h 6h 9 horas 12 h 15 h 18 h 21 h

1,2 mmol / L
Sensibilidad 0,90 0,91 0,91 0,91 0,91 0,90 0,90 0,88
Especificidad 0,88 0,94 0,96 0,97 0,97 0,96 0,96 0,98
Valor predictivo positivo 0,91 0,95 0,97 0,98 0,97 0,97 0,97 0,98
Valor predictivo negativo 0,87 0,89 0,89 0,89 0,89 0,88 0,89 0,87
1,4 mmol / L
Sensibilidad 0,89 0,91 0,93 0,93 0,93 0,93 0,91 0,89
Especificidad 0,90 0,92 0,94 0,92 0,92 0,94 0,94 0,96
Valor predictivo positivo 0,86 0,88 0,92 0,89 0,89 0,91 0,91 0,94
Valor predictivo negativo 0,92 0,94 0,95 0,95 0,95 0,95 0,94 0,93
1 Cada medición de cada vaca (8 mediciones por vaca) fue probada para SCK. Las vacas con valores <1.0 mmol / L fueron clasificadas como claramente sanas en ese momento y las vacas con

valores> 1.6 mmol / L fueron clasificadas como claramente subclínicamente cetóticas en ese momento. Vacas con valores entre
1,0 mmol / L y 1,6 mmol / L se clasificaron como marginales. En estos casos se consideró otra medición a las 3, 6, 9, 12, 15, 18 o 21 h y se calculó el promedio con la medición
inicial. Posteriormente, este promedio se utilizó para clasificar a una vaca como sana o con SCK. Para calcular las características de la prueba, la concentración diaria promedio de
BHBA calculada a partir de las 8 mediciones se utilizó como estándar de oro para definir una vaca como sana o con SCK.

medición a las 0900 hy se incluyeron en el ensayo. De todas las vacas, 52 se muestran concentraciones de 1.0 a 1.6 mmol / L) (Tabla 1).
(40.6%) fueron diagnosticadas con SCK usando un punto de corte de 1.2
mmol / L. El aumento del punto de corte a 1,4 mmol / L redujo el número de
vacas diagnosticadas con SCK a 38 (29,7%).
Prueba 2

El tiempo de muestreo no afectó las concentraciones de BHBA en vacas
lecheras alimentadas continuamente ( P = 0,23; Figura 1). Las características de la
prueba (sensibilidad, especificidad, valores predictivos positivos y negativos) de una
única medición de la concentración de BHBA en un momento aleatorio del día para
diagnosticar la SCK, usando 2 puntos de corte diferentes, se muestran en la Tabla
1. Además, las características de la prueba usando re - mediciones repetidas
después de diferentes intervalos de tiempo (3,
6, 9, 12, 15, 18 y 21 h) en casos marginales (BHBA
En el ensayo se incluyó un total de 116 vacas posparto. Considerando las
concentraciones de BHBA medidas en muestras de sangre extraídas de los
vasos de la cola, 54 vacas (46,6%) fueron diagnosticadas con SCK usando un
punto de corte de
1,2 mmol / L. El uso de un punto de corte de 1,4 mmol / L redujo el
número de vacas diagnosticadas con SCK a 38 (32,8%). Las
concentraciones de BHBA difirieron al comparar muestras de las 3
ubicaciones de muestreo (vasos de la cola: 1,6 ± 1,2 mmol / L, vena
yugular: 1,5 ± 1,2 mmol / L, vena mamaria: 1,2 ± 1,1 mmol / L; P = 0,03).
La concentración media de BHBA fue 0,3 mmol / L menor cuando se
midió en la vena mamaria en comparación con la vena yugular ( P = 0,03;
Figura 2A). La concentración media de BHBA fue

0.4 mmol / L menos cuando se mide en la vena mamaria en

comparación con los vasos de la cola ( P = 0,02; Figura 2B). La
concentración de BHBA medida no difirió significativamente entre la
vena yugular y los vasos de la cola ( P = 0,82; Figura 2C). Las
concentraciones de BHBA se correlacionaron fuertemente para cada
combinación de ubicaciones de muestreo (vena yugular y vena mamaria:
r = 0,98; vena yugular y vasos de la cola: r = 0,99, vena mamaria y vasos
de la cola: r = 0,99; P < 0,05).

DISCUSIÓN

En ambos ensayos realizados durante este estudio, la prevalencia de

SCK fue mayor que el rango (11,2 a 36,6%

Figura 1. Ritmo diurno medio y desviación estándar de concentración a un punto de corte de 1,2 mmol / L) descrito en
traciones de BHBA en 92 vacas lecheras multíparas a 18 ± 6 DIM. estudios (McArt et al., 2012; Suthar et al., 2013). por

Revista de ciencia láctea vol. 97 No. 1, 2014

 TM NG Y SAM L NG L CAT NFRH DR
En el primer ensayo, una posible razón de esta diferencia podría ser la
selección de vacas multíparas (paridad 3.2 ± 1.2) solamente. Las vaquillas de
primera paridad y las vacas de segunda paridad tienen menor riesgo de
desarrollar SCK (Duffield et al.,
1998); por lo tanto, es plausible una mayor prevalencia de SCK en un grupo
que consiste únicamente en vacas multíparas. Para el segundo ensayo, solo
se inscribieron 10 primíparas y 106 vacas multíparas (paridad 2.9 ± 1.2), lo
que también aumentó la prevalencia de SCK. Se han identificado múltiples
factores que influyen en el desarrollo de SCK, lo que lleva a variaciones en las
tasas de prevalencia entre granjas y países (Suthar et al., 2013). Varios
autores encontraron asociaciones entre la cetosis y el manejo de las vacas en
transición, las estrategias de alimentación, la variación genética, la producción
de leche, las enfermedades concomitantes y los patrones de puntuación de la
condición corporal durante el período de transición y la lactancia temprana
(Oetzel, 2007; Roche et al., 2009; van der Drift et al., 2012).
Efectos del tiempo de muestreo en la concentración de BHBA
La evidencia sugiere que la concentración de BHBA en vacas lecheras puede verse
influenciada por el tiempo de muestreo en relación con el tiempo de alimentación
(Wylie et al., 2008; Quiroz-Rocha et al.,
2010) y pueden estar sujetos a variaciones diurnas (Sutton et al., 1988;
Eicher et al., 1999; Blum et al., 2000; Nielsen et al., 2003; Plaizier et
al., 2005; Meier et al. .,
2010). En la mayoría de estos estudios, las concentraciones de BHBA
mostraron aumentos posprandiales (Sutton et al., 1988; Blum et al., 2000;
Wylie et al., 2008), lo que puede explicarse por el metabolismo del butirato
del epitelio del rumen después de la ingesta de alimento. (Pennington, 1952;
Reynolds,
2002). Curiosamente, este efecto fue mayor cuando se alimentó una vez a las 2100 h
en lugar de una vez a las 0900 h (Nikkhah et al., 2008). Los autores propusieron que
este efecto del tiempo de entrega de alimento podría ser causado por un aumento en el
consumo de alimento cuando las vacas fueron alimentadas a las 2100 h en
comparación con las 0900 h, lo que podría haber aumentado la síntesis de BHBA en la
pared del rumen.
En nuestro estudio no se encontró un efecto del tiempo de muestreo sobre las
concentraciones de BHBA en vacas lecheras. Una explicación probable de este
resultado diferente en comparación con otras investigaciones es la
implementación de diferentes estrategias de alimentación dentro de estos
ensayos. Las vacas en otros estudios recibieron alimentación por componentes
(Sutton et al., 1988; Eicher et al., 1999; Blum et al., 2000; Wylie et al.,
2008) o, en el caso de una alimentación con TMR, fueron alimentados solo una
o dos veces al día (Plaizier et al., 2005; Nikkhah et al., 2008; Meier et al., 2010;
Quiroz-Rocha et al., 2010), mientras que las vacas de nuestro estudio tuvieron
acceso continuo a TMR recién entregado.
Sutton y col. (1988) determinaron que la amplitud de los patrones diurnos de
concentración de BHBA depende de la frecuencia de alimentación en vacas
alimentadas con componentes. Más
PERO MEDICIÓN RC AC D 295
la alimentación frecuente redujo tanto las concentraciones máximas como las
variaciones diarias en BHBA. Eicher y col. (1999) también encontraron patrones
significativamente diferentes de variaciones diurnas de las concentraciones de
BHBA en 2 hatos con diferentes frecuencias de alimentación de concentrado. Una
mayor frecuencia de alimentación con pequeñas cantidades de concentrados en
un rebaño produjo una concentración constante de BHBA. El otro rebaño fue
alimentado con concentrados en grandes cantidades solo dos veces al día y
mostró diferencias significativas entre las concentraciones de BHBA por la mañana
y por la tarde. Se ha identificado una alta frecuencia de alimentación de
concentrados como un factor importante en la prevención de la hipercetoninemia
en vacas lecheras alimentadas con componentes (Gustafsson et al.,
1995).
Las estrategias de alimentación modernas para vacas lecheras generalmente
implican alimentar una dieta TMR (VandeHaar y St-Pierre, 2006; Winsten et al.,
2010). Los patrones de asistencia al callejón de alimentación diurna y el
comportamiento de alimentación de vacas lecheras lactantes alimentadas con TMR
se ven afectados por el retorno del ordeño, las flexiones de alimentación y, en
particular, la entrega de alimento fresco (DeVries et al., 2003; DeVries y von
Keyserlingk, 2005; Mäntysaari et al., 2006). Se encontró un aumento en el tiempo de
alimentación diario, así como una distribución más uniforme del tiempo de
alimentación durante el día, en las vacas lecheras cuando se aumentó la frecuencia
de alimentación de TMR (DeVries et al., 2005). Estos hallazgos podrían explicar un
metabolismo más continuo de BHBA y, en consecuencia, la ausencia de patrones
diurnos, como se describe en este estudio. Nuestros datos de BHBA subrayan la
importancia de las estrategias de alimentación que garantizan el acceso constante a
la TMR recién entregada.
Hasta donde sabemos, este es el primer ensayo que estudia vacas
preseleccionadas por concentración de BHBA como en riesgo de SCK. Otros
estudios no implementaron tal criterio de inclusión para la inscripción de animales
de estudio; en consecuencia, la mayoría de las vacas investigadas tenían
concentraciones de BHBA por debajo de los puntos de corte aceptados
actualmente para el diagnóstico de SCK.
Características de prueba de una sola medición
de BHBA en un momento aleatorio del día
Eicher y col. (1999) recomendaron estandarizar el tiempo después de la
alimentación para la recolección de muestras y sugirieron 4 a 5 h después del
inicio de la alimentación como un tiempo de muestreo adecuado para las
pruebas de trastornos metabólicos. Aunque plausible, esta hipótesis no fue
probada. Por el contrario, el tiempo antes de la alimentación matutina se ha
descrito como el más útil para evaluar a las vacas en la lactancia temprana
para los parámetros de NEB (Wylie et al.,
2008). En el último estudio, sin embargo, solo se utilizaron vacas
primíparas y se alimentaron solo una vez al día. El alcance de nuestro
estudio fue investigar los efectos diurnos en vacas multíparas en
condiciones de alimentación continua con TMR.
Revista de ciencia láctea vol. 97 No. 1, 2014
296 MAHRT ET AL.

Una sola medición de la concentración de BHBA en un momento aleatorio del

día permitió la clasificación correcta de una vaca que padecía SCK con una
sensibilidad de 0,90 (≥1,2 mmol / L) o 0,89 (≥1,4 mmol / L), respectivamente. La
especificidad fue de 0,88 o 0,90 utilizando los mismos puntos de corte. Estas
características de la prueba pueden considerarse muy buenas para una prueba
al lado de la vaca. Con base en nuestros resultados, la detección de SCK en
vacas lecheras en condiciones de un régimen de alimentación TMR continuo se
puede integrar en un protocolo de vaca fresca en cualquier momento del día.

Características de prueba de mediciones repetidas

Eicher y col. (1999) supusieron que la recolección de 2 muestras (por la

mañana y por la tarde) era más informativa sobre el estado metabólico de un
rebaño. Sin embargo, la sensibilidad y la especificidad de las mediciones
repetidas después de diferentes intervalos de tiempo para diagnosticar la SCK
(Tabla 1) aumentaron solo ligeramente en comparación con una sola medición
en un momento aleatorio del día. Por tanto, a partir de nuestros datos, se
puede elegir el intervalo de muestreo preferido. Como estas mejoras son
prácticamente insignificantes, creemos que las características de prueba de
una sola medición son suficientes para situaciones en la granja.

Concentraciones de BHBA de muestras extraídas de 3

ubicaciones de muestreo de sangre diferentes

Se ha informado que las muestras de sangre para medir la

concentración de BHBA no deben recolectarse de la vena mamaria
(Oetzel, 2004; Wilhelm et al., 2013) sino de los vasos de la cola
(LeBlanc,
2006). Se sabe que la glándula mamaria lactante extrae BHBA como un
precursor de la grasa de la leche de la sangre, lo que conduce a una
diferencia arteriovenosa en la concentración de BHBA (Kronfeld et al.,
1968; Guinard-Flament et al., 2011). El factor más importante que afecta
la extensión de esta captación es la concentración arterial de BHBA
(Miller et al., 1991).

Wilhelm y col. (2013) compararon las concentraciones de BHBA en

muestras de sangre tomadas de 4 lugares de muestreo diferentes (vena
mamaria, vena yugular y V. saphena externa lateralis izquierda y derecha).
Los autores encontraron concentraciones más altas de BHBA en muestras
tomadas de la vena yugular y Vv. safena en comparación con la vena
mamaria en vacas lecheras lactantes. Redetzky y col. (2003) también
encontraron niveles más altos de BHBA en la sangre extraída de la vena
yugular en comparación con la vena mamaria en vacas lecheras lactantes.
Curiosamente, las concentraciones de BHBA en vacas no lactantes
mostraron una relación inversa (Wilhelm et al., 2013). Los autores
especifican

Figura 2. Diferencias de concentraciones de BHBA medidas en sangre informó que diferentes tasas de consumo de BHBA en el
muestras tomadas de 3 lugares de muestreo diferentes: recipientes de cola (A./V.
coccygea), vena yugular (V. jugularis) y vena mamaria (V. epigas- tejidos drenados por estas venas (es decir, especialmente el cerebro y
trica cranialis superficialis). ubre) causó esta diferencia. Sin embargo, la cola ves-

Revista de ciencia láctea vol. 97 No. 1, 2014

 TM NG Y SAM L NG L CAT NFRH DR
Los sellos no se incluyeron en estas dos comparaciones (por ejemplo,
aunque esta ubicación de muestreo tiene beneficios prácticos
un manejo más fácil) y se han utilizado en
ensayos de investigación (Enjalbert et al., 2001; Iwersen et al., 2009; McArt
et al., 2012).
Comparando la vena mamaria, vena yugular y
vasos de la cola, encontramos diferencias significativas en sangre
Concentraciones de BHBA entre muestras extraídas de la vena
mamaria y otras dos ubicaciones.
Concentraciones de BHBA en muestras de sangre extraídas de
la vena mamaria fue 0,3 y 0,4 mmol / L más baja en comparación con
las muestras tomadas de la vena yugular
y vasos de cola, respectivamente. Sin diferencia significativa
se observó entre muestras tomadas de la vena yugular y los vasos de
la cola. Por tanto, recomendamos el uso
de la vena yugular o los vasos de la cola como lugar de muestreo
para mediciones de BHBA.
CONCLUSIONES
Detección de SCK en vacas lecheras en condiciones de
La alimentación de TMR continua se puede realizar en cualquier momento del
día. Una sola medición proporciona muy buenas
características de prueba para las condiciones de la granja. Características de la
Mediciones después de diferentes intervalos de tiempo Se deben utilizar vasos
prueba repetidas solo ligeramente en nuestro estudio. Las yugulocaciones para la
mejorados de la vena lar o la cola como muestra de sangre
medición de BHBA. Sangre extraída de
la vena mamaria contiene concentraciones más bajas de BHBA en
comparación con la vena yugular o los vasos de la cola.
EXPRESIONES DE GRATITUD
Los autores agradecen a los propietarios, a la pastora ya Anne Rees por
el personal de la finca participante. Gracias especiales ir
su apoyo durante la recolección de muestras.
REFERENCIAS
Andersson, L. 1988. Cetosis subclínica en vacas lecheras. Veterinario. Clin. norte
A.m. Food Anim. Pract. 4: 233-251.
Bland, JM y DG Altman. 1986. Métodos estadísticos para
Sesión de acuerdo entre dos métodos de medición clínica. Lancet 1: 307–310.
Blum, JW, RM Bruckmaier, PY Vacher, A. Münger y F.
Jans. 2000. Patrones de hormonas y metabolitos de veinticuatro horas en la semana 9 y 19 de
lactancia en vacas lecheras de alto rendimiento alimentadas con triglicéridos y ácidos grasos
libres. J. Vet. Medicina. Un Physiol. Pathol. Clin. Medicina. 47: 43–60.
Carrier, J., S. Stewart, S. Godden, J. Fetrow y P. Rapnicki. 2004.
Evaluación y uso de tres pruebas de lado de la vaca para la detección de cetosis
subclínica en vacas de posparto temprano. J. Dairy Sci. 87: 3725–3735. DeVries, TJ y MAG
von Keyserlingk. 2005. Tiempo de alimentación
El parto afecta los patrones de alimentación y acostado de las vacas lecheras. J. Dairy Sci. 88:
625–631.
DeVries, TJ, MAG von Keyserlingk y KA Beauchemin.
2003. Comunicación breve: Patrón de alimentación diurna de vacas lecheras lactantes. J.
Dairy Sci. 86: 4079–4082.
PERO MEDICIÓN RC AC D 297
DeVries, TJ, MAG von Keyserlingk y KA Beauchemin.
2005. La frecuencia de suministro de alimento afecta el comportamiento de las vacas lecheras
lactantes. J. Dairy Sci. 88: 3553–3562.
Duffield, T. 2000. Cetosis subclínica en ganado lechero lactante. Veterinario.
Clin. North Am. Food Anim. Pract. 16: 231-253.
Duffield, TF, KD Lissemore, BW McBride y KE Leslie.
2009. Impacto de la hipercetonemia en vacas lecheras de lactancia temprana en la salud y la
producción. J. Dairy Sci. 92: 571–580.
Duffield, TF, D. Sandals, KE Leslie, K. Lissemore, BW McBride,
JH Lumsden, P. Dick y R. Bagg. 1998. Eficacia de la monensina para la prevención de
la cetosis subclínica en vacas lecheras lactantes. J. Dairy Sci. 81: 2866–2873.
Eicher, R., A. Liesegang, E. Bouchard y A. Tremblay. 1999. Efecto
de los factores específicos de la vaca y la frecuencia de alimentación del concentrado en las variaciones
diurnas de los metabolitos sanguíneos en las vacas lecheras. A.m. J. Vet. Res. 60: 1493-1499.
Endecott, RL, SH Cox, CM Rubio, CA Löest, DE Hawkins,
y MK Petersen. 2012. Efectos de los suplementos con un contenido creciente de
precursores glucogénicos sobre la reproducción y la utilización de nutrientes en vacas
jóvenes de rango posparto. Livest. Sci. 145: 109-118. Enjalbert, F., MC Nicot, C.
Bayourthe y R. Moncoulon. 2001.
Cuerpos cetónicos en la leche y la sangre de vacas lecheras: Relación entre
concentraciones y utilización para la detección de cetosis subclínica. J. Dairy Sci. 84:
583–589.
Geishauser, T., K. Leslie, D. Kelton y T. Duffield. 1998. Evaluación
de cinco pruebas en el lado de la vaca para usar con leche para detectar cetosis subclínica en vacas
lecheras. J. Dairy Sci. 81: 438–443.
Geishauser, T., K. Leslie, D. Kelton y T. Duffield. 2001. Monitor-
ing para cetosis subclínica en hatos lecheros. Comp. Contin. Educ. Veterinario. 23: 65–71.
Geishauser, T., K. Leslie, J. Tenhag y A. Bashiri. 2000. Evaluación
de ocho pruebas de cetonas en el lado de la vaca en la leche para la detección de cetosis subclínica en
vacas lecheras. J. Dairy Sci. 83: 296–299.
Goff, JP y RL Horst. 1997. Cambios fisiológicos en el parto.
ción y su relación con los trastornos metabólicos. J. Dairy Sci. 80: 1260-1268.
Guinard-Flament, J., S. Lemosquet, E. Delamaire, G. Le Bris, P. Lam-
berton y C. Hurtaud. 2011. Alteración de la absorción de nutrientes por la ubre durante
un intervalo de ordeño extendido en vacas lecheras. J. Dairy Sci. 94: 5458–5468.
Gustafsson, AH, L. Andersson y U. Emanuelson. 1995. Influencia
del manejo de la alimentación, la ingesta de concentrados y la ingesta de energía sobre el riesgo de
hipercetonamia en los rebaños lecheros suecos. Prev. Veterinario. Medicina. 22: 237–248.
Herdt, TH 2000. Adaptación de los rumiantes al balance energético negativo.
Influencias en la etiología de la cetosis y el hígado graso. Veterinario. Clin. North Am.
Food Anim. Pract. 16: 215-230.
Hogeveen, H. 2012. Costos de las enfermedades de producción. Páginas 36–42 en Proc.
27º Congreso Mundial de Buiatría, Lisboa, Portugal. LouresGráfica, Loures,
Protugal.
Iwersen, M., U. Falkenberg, R. Voigtsberger, D. Forderung y W.
Heuwieser. 2009. Evaluación de una prueba electrónica del lado de la vaca para detectar
cetosis subclínica en vacas lecheras. J. Dairy Sci. 92: 2618–2624. Koller, A., M. Reist, JW
Blum y U. Kupfer. 2003. Tiempo vacío
y estado de cuerpos cetónicos en el período posparto temprano de las vacas lecheras.
Reprod. Domest. Anim. 38: 41–49.
Krebs, HA 1966. La regulación de la liberación de cuerpos cetónicos por
el hígado. Adv. Enzyme Regul. 4: 339–354.
Kronfeld, DS, F. Raggi y CF Ramberg Jr .. 1968. Mammary
flujo sanguíneo y metabolismo de cuerpos cetónicos en vacas normales, en ayunas y cetosas.
A.m. J. Physiol. 215: 218-227.
LeBlanc, SJ 2006. Programas de seguimiento para vacas lecheras en transición.
Páginas 460–472 en Proc. 24º Congreso Mundial de Buiatría, Niza, Francia.
Asociación Mundial de Buiatría.
LeBlanc, SJ, KE Leslie y TF Duffield. 2005. Metabólico
predictores de abomaso desplazado en ganado lechero. J. Dairy Sci. 88: 159-170.
Mäntysaari, P., H. Khalili y J. Sariola. 2006. Efecto de la alimentación gratuita
frecuencia de una ración mixta total sobre el rendimiento de vacas lecheras de alto rendimiento.
J. Dairy Sci. 89: 4312–4320.
Revista de ciencia láctea vol. 97 No. 1, 2014
298 MAHRT ET AL.
McArt, JAA, DV Nydam y GR Oetzel. 2012. Epidemiología
de cetosis subclínica en ganado lechero de lactancia temprana. J. Dairy Sci. 95: 5056–5066.
Meier, S., ES Kolver, GA Verkerk y JR Roche. 2010. Efectos
de la cepa divergente de Holstein-Friesian y la dieta sobre patrones diurnos de
metabolitos y hormonas plasmáticas. J. Dairy Res. 77: 432–437. Miller, PS, BL Reis,
CC Calvert, EJ DePeters y RL Bald-
ganar. 1991. Patrones de absorción de nutrientes por las glándulas mamarias de vacas lecheras
lactantes. J. Dairy Sci. 74: 3791–3799.
Nielsen, NI, KL Ingvartsen y T. Larsen. 2003. Variación diurna
y el efecto de la restricción alimenticia sobre los metabolitos de la leche y el plasma en vacas lecheras
alimentadas con TMR. J. Vet. Medicina. Un Physiol. Pathol. Clin. Medicina. 50: 88–97.
Nikkhah, A., CJ Furedi, AD Kennedy, GH Crow y JC
Plaizier. 2008. Efectos del tiempo de entrega del alimento sobre el consumo de alimento, la producción de
leche y los metabolitos sanguíneos de las vacas lecheras. J. Dairy Sci. 91: 4249–4260.
Oetzel, GR 2004. Monitoreo y análisis de ganado lechero para metabolismo
enfermedad. Veterinario. Clin. North Am. Food Anim. Pract. 20: 651–674. Oetzel, GR 2007.
Cetosis a nivel de rebaño: diagnóstico y factores de riesgo.
Páginas 67–91 en Proc. 40th Annu. Conf. A.m. Assoc. Práctica bovina, Vancouver,
Canadá. A.m. Assoc. Bovine Pract., Auburn, AL. Ospina, PA, DV Nydam, T. Stokol y
TR Overton.
2010b. Asociaciones de concentraciones elevadas de ácidos grasos no esterificados y
de β-hidroxibutirato con el desempeño reproductivo de la lactancia temprana y la
producción de leche en ganado lechero de transición en el noreste de los Estados
Unidos. J. Dairy Sci. 93: 1596–1603. Panousis, N., C. Brozos, I. Karagiannis, ND
Giadinis, S. Lafi y
M. Kritsepi-Konstantinou. 2012. Evaluación del medidor de precisión xceed® para la
monitorización in situ de concentraciones de glucosa y ácido β-hidroxibutírico en sangre en
ovejas lecheras. Res. Veterinario. Sci. 93: 435–439. Pennington, RJ 1952. El metabolismo de los
ácidos grasos de cadena corta en
la oveja. 1. Utilización de ácidos grasos y producción de cuerpos cetónicos por el
epitelio del rumen y otros tejidos. Biochem. J. 51: 251-258. Plaizier, JC, AM Fairfield,
PA Azevedo, A. Nikkhah, TF
Duffield, GH Crow, R. Bagg, P. Dick y BW McBride. 2005. Efectos de la monensina y la
etapa de lactancia sobre la variación de los metabolitos sanguíneos dentro de las
veinticuatro horas en vacas lecheras. J. Dairy Sci. 88: 3595–3602.
Quiroz-Rocha, GF, SJ LeBlanc, TF Duffield, B. Jefferson, D.
Wood, KE Leslie y RM Jacobs. 2010. Comunicación breve: Efecto del tiempo de
muestreo relativo a la primera alimentación diaria sobre la interpretación de las
concentraciones séricas de ácidos grasos y β-hidroxibutirato en ganado lechero. J. Dairy
Sci. 93: 2030–2033.
Redetzky, R., J. Hamann y V. Krömker. 2003. Zum Einfluss des
Blutentnahmeortes auf Parameter des Blutprofils bei hochleis- tenden Kühen.
Tierarztl. Prax. Ausg. G Grosstiere Nutztiere 31: 308–313.
Reynolds, CK 2002. Economía del metabolismo energético visceral en
rumiantes: ¿peaje o servicio de ingresos internos? J. Anim. Sci. 80 (E. Supl.): E74 –
E84.
Revista de ciencia láctea vol. 97 No. 1, 2014
Roberts, T., N. Chapinal, SJ LeBlanc, DF Kelton, J. Dubuc y
TF Duffield. 2012. Parámetros metabólicos en vacas en transición como indicadores de riesgo de
descarte durante la lactancia temprana. J. Dairy Sci. 95: 3057–
3063.
Roche, JR, NC Friggens, JK Kay, MW Fisher, KJ Stafford,
y DP Berry. 2009. Revisión invitada: Puntuación de la condición corporal y su asociación con la
productividad, la salud y el bienestar de las vacas lecheras. J. Dairy Sci. 92: 5769–5801.
Seifi, HA, SJ LeBlanc, KE Leslie y TF Duffield. 2011.
Predictores metabólicos de enfermedad posparto y riesgo de sacrificio en ganado lechero.
Veterinario. J. 188: 216–220.
Suthar, VS, J. Canelas-Raposo, A. Deniz y W. Heuwieser. 2013.
Prevalencia de cetosis subclínica y relaciones con enfermedades posparto en vacas
lecheras europeas. J. Dairy Sci. 96: 2925-2938. Sutton, JD, IC Hart, SV Morant, E.
Schuller y AD Sim-
monds. 1988. Frecuencia de alimentación para vacas lactantes: Patrones diurnos de
hormonas y metabolitos en sangre periférica en relación con la concentración de grasa de la
leche. Br. J. Nutr. 60: 265-274.
van der Drift, SGA, KJE van Hulzen, TW Teweldemedhn,
R. Jorritsma, M. Nielen y HCM Heuven. 2012. Variación genética y no genética en las
concentraciones de β-hidroxibutirato y acetona de la leche en el plasma y la leche de vacas
lecheras de lactancia temprana. J. Dairy Sci. 95: 6781–6787.
VandeHaar, MJ y N. St-Pierre. 2006. Principales avances en nutrición
ción: Relevancia para la sostenibilidad de la industria láctea. J. Dairy Sci. 89:
1280-1291.
Walsh, RB, DF Kelton, TF Duffield, KE Leslie, JS Wal-
ton, y SJ LeBlanc. 2007a. Prevalencia y factores de riesgo para la condición
anovulatoria posparto en vacas lecheras. J. Dairy Sci. 90: 315–324.
Walsh, RB, JS Walton, DF Kelton, SJ LeBlanc, KE Leslie,
y TF Duffield. 2007b. El efecto de la cetosis subclínica en la lactancia temprana sobre el
desempeño reproductivo de las vacas lecheras posparto.
J. Dairy Sci. 90: 2788–2796.
Wilhelm, K., J. Wilhelm y M. Fürll. 2013. Vergleichende Betrach-
tung ausgewählter Blutparameter von Hochleistungskühen bei un- terschiedlichen
Entnahmestellen. Tierarztl. Prax. Ausg. G Gross- tiere Nutztiere 41: 7-14.
Winsten, JR, CD Kerchner, A. Richardson, A. Lichau y JM
Hyman. 2010. Tendencias en la industria láctea del noreste: alimentación en confinamiento
moderno a gran escala y pastoreo intensivo en manejo.
J. Dairy Sci. 93: 1759-1769.
Wylie, ARG, S. Woods, AF Carson y M. McCoy. 2008. Perip-
Cambios randiales en las concentraciones de metabolitos y hormonas metabólicas en novillas
lecheras de alto mérito genético y su relación con el balance energético en la lactancia
temprana. J. Dairy Sci. 91: 577–586.