Biología de Microorganismos

FORMATO: MEDIO DE CULTIVO

Nombre: Sebastián Alberto De Mendoza Corrales

Bacteria asignada: Cyanobacteria/Synechococcus

Muestreo Composición del medio de cultivo Incubación

¿Dónde tengo más
probabilidades de encontrar mi
bacteria? o ¿Cuál es el hábitat
de dicha bacteria? (Ambiente,
tipo de muestra, sistema
biológico)
¿Qué nutrientes debe tener el
medio de cultivo para permitir el
crecimiento de mi bacteria?
Mi respuesta
¿En qué condiciones se debe
incubar el medio de cultivo para
permitir el crecimiento de mi
bacteria?

El Cultivo de Synechococcus Los cultivos se realizan en

La bacteria se encuentra
en la mayor parte de la
superficie oceánica, más se
encuentra con mayor
probabilidad en el Océano
Pacífico ecuatorial
occidental y fluye hacia el
norte a lo largo incluso el
margen exterior del Mar de
China Oriental, en concreto
en kuroshiro. En las
condiciones con las que se
encuentra usualmente se
caracteriza por altas
temperaturas, alta salinidad
y ultra-oligotrofia, según la
corriente de kuroshio que es
una de las principales
corrientes fronterizas
Las microalgas, las y
cianobacterias,
particularmente en minerales
y vitaminas.
Consecuentemente, se han
desarrollado numerosos
medios de cultivo, descritos en
la bibliografía especializada
(Vonshak, 1986; Becker, 1994),
cuya composición cualitativa
suele ser similar.
La composición del medio de
cultivo Synechococcus en los
cultivos "stock" es la siguiente:
NaNO3 – 4.0 mM
NaH2Po4 2(H2O) - 0.2 mM
Citrato férrico: C6H5 +
botellas de 1 litro con 900 ml
de medio de cultivo. Estos
cultivos se doblan
periódicamente, de manera
que se mantengan en fase
exponencial. De estos
cultivos se toman los inóculos
para las distintas
experiencias. La agitación en
los cultivos se realiza
mediante burbujeo de aire a
un flujo de 21 min-1,
inyectado con un
turbosoplador y filtrado a
0.25 µm mediante filtros
Millipore antes de la entrada
en el cultivo: Esta agitación
constante impide que las
células sedimenten y permite
que estén expuestas a la
misma intensidad lumínica

Universidad de los Andes | Vigilada Mineducación

Reconocimiento como Universidad: Decreto 1297 del 30 de mayo de 1964.
Reconocimiento personería jurídica: Resolución 28 del 23 de febrero de 1949 Minjusticia.

occidentales en los
océanos globales, se
origina en el Océano
Pacífico ecuatorial
occidental y fluye hacia el
norte a lo largo del margen
exterior del Mar de China
Oriental a concentraciones
consistentemente por
debajo de 0,2 mg m-3. A
diferencia de, el subsuelo
de Kuroshio es más frío y
más rico en nutrientes
sureste del Mar de China
Oriental, el agua
subterránea es a menudo
elevada por surgencia
inducida
topográficamente.
Charpy, L., & Larkum, A. W. D.
(1999b). Marine Cyanobacteria.
Musée océanographique.
4YfexNyO7 – 40.0 µm
ZnCl2 – 2.0 µm
MnCl2 – 2.0 µm
NaMoO4 5(H2O) µm
CuCl3 – 0.2 µm
CuSO4 5(H2O) µm
Tiamina: C12H17N4OS4 – 70.0
µg.l-1
Biotina: C10H16N2OS – 10.0
µg.l-1
Vitamina B12:
C63H88CoN14O14P - 92.8 µm
Agua de mar – 1000 ml
El agua filtrada 0.45 µm Y
esterilizada a 120 C durante 20 [Libro electrónico]. A Coruña.
minutos.
Producción, purificación y
caracterización de ficocianina
de Synechococcus sp. I09201
aislada en aguas de Cuba
(Revisado ed., Vol. 1). (1997).
[Libro electrónico]. A Coruña.
https://ruc.udc.es/dspace/bits
tream/handle/2183/5606/Beta
ncourtFernandez_Liliana_TD_1
997.pdf
Biología de Microorganismos
media, evitando asímismo la
formación de gradientes de
nutrientes minerales o
gaseosos, obteniéndose un
crecimiento más uniforme
(R.aven,1988)). La aireación
proporciona además un
aporte de C02 (0.03% V: V en
el aire) el cual actúa como
^fuente de Carbono y
colabora en el
taponamiento del medio de
cultivo.
Producción, purificación y
caracterización de
ficocianina de
Synechococcus sp. I09201
aislada en aguas de Cuba
(Revisado ed., Vol. 1). (1997).
https://ruc.udc.es/dspace/bit
stream/handle/2183/5606/Be
tancourtFernandez_Liliana_T
D_1997.pdf
 Universidad de los Andes
Sugerencias de redacción:
● Fluye hacia el norte,
incluso a lo largo del
margen exterior...
● Las condiciones en las
que se encuentra
usualmente son
temperaturas...
● No comprendo muy bien
lo que quieres decir en
las últimas líneas (desde
a diferencia), ya que es
un poco confusa la
redacción, creo que es
conveniente un cambio
en la puntuación
Puedes añadir brevemente
información sobre cómo se
toman las muestras que se
llevan al laboratorio y como se
deben mantener en el periodo
desde que son tomadas hasta
que son inoculadas en el
cultivo.
Cambios a partir de la retroalimentación de mi compañero
Muestreo Composición del medio de cultivo
La bacteria Synechococcus
se encuentra en la mayor
parte de la superficie
oceánica, más se
encuentra con mayor
probabilidad en el Océano
Retroalimentación de mi compañero
Al comienzo de este bloque me
parece que la información está
cortada, es decir, son palabras
sueltas y no se logra entender el
hilo que siguen por lo que no se
comprende bien lo que ocurre
consecuentemente.
Creo que podría ser interesante
brevemente explicar el orden en
que se debe añadir los diferentes
compuestos, si es que hay alguno
estricto. Ya que, aunque esto no se
solicita explícitamente considero
que de tener algún orden
específico podría ser también una
condición determinante. En otras
palabras, indicar cual es el medio
o compuesto base al que se
añaden los demás.
Las microalgas, las y
cianobacterias,
particularmente en minerales
y vitaminas poseen un
metabolismo similar.
Creo que tanto en este bloque
como en los otros el
procedimiento de referenciación
se quede un poco escaso. Si el
caso es que utilizaste la misma
fuente para cada bloque
deberías igual a lo largo del
párrafo, tras una frase que sea de
información muy puntual señalar
esta con un superíndice o
números entre paréntesis, (por
ejemplo: después de la primera
vez que escribes kuroshiro poner
(1)) con el fin de indicar de
donde se ha obtenido cada
parte de la información, pues si
bien toda es del mismo
documento hay que ser más
específico.
También respecto con este tema,
creo que sería bueno poner
alguna otra fuente. De estar bien
la información no habría ni que
cambiar la redacción, pero si
otorga más fiabilidad en el texto.
Incubación
Los cultivos se realizan en
botellas (u otros
contenedores asemejables)
de 1 litro con 900 ml de
medio de cultivo.
3

Pacífico ecuatorial y
occidental, fluye hacia el
norte a lo largo del margen
exterior del Mar de China
Oriental, en concreto en
kuroshiro.
En las condiciones con las
que se encuentra
usualmente se caracteriza
por altas temperaturas, alta
salinidad y ultra-oligotrofia,
principalmente según la
corriente de kuroshio que es
una de las principales
corrientes fronterizas
occidentales en los
océanos globales que
cumple con las
características previamente
mencionadas.
kuroshio se origina en el
Océano Pacífico ecuatorial
occidental y fluye hacia el
norte a lo largo del margen
exterior del Mar de China
Oriental a concentraciones
consistentemente por
debajo de 0,2 mg m-3. A
diferencia de, el subsuelo
Biología de Microorganismos
Consecuentemente, se han
desarrollado numerosos
medios de cultivo, descritos en
la bibliografía especializada
(Vonshak, 1986; Becker, 1994),
cuya composición cualitativa
suele ser similar por ello hay
que tomar medidas para
evitar que esos
microorganismos se
introduzcan afectando el
experimento.
El agua filtrada 0.45 µm Y
esterilizada a 120 C durante 20
minutos logrando que solo la
bacteria resistente a altas
temperaturas más los
nutrientes específico se
permitirá tener certeza que
otros microorganismos no
afectarán el desarrollo de la
bacteria Synechococcus .
En 100 ml de agua filtrada y
esterilizada se deben incluir los
siguientes nutrientes:
La composición del medio de
cultivo Synechococcus en los
cultivos "stock" es la siguiente:
NaNO3 – 4.0 mM
NaH2Po4 2(H2O) - 0.2 mM
Estos cultivos se doblan
periódicamente, de manera
que se mantengan en fase
exponencial.
De estos cultivos se toman los
inóculos para las distintas
experiencias.
La agitación en los cultivos se
realiza mediante burbujeo de
aire a un flujo de 21 min-1,
inyectado con un turbo
soplador y filtrado a 0.25 µm
mediante filtros Millipore
antes de la entrada en el
cultivo.
Esta agitación constante
impide que las células
sedimenten y permite que
estén expuestas a la misma
intensidad lumínica media,
evitando asimismo la
formación de gradientes de
nutrientes minerales o
gaseosos, obteniéndose un
crecimiento más uniforme
(R.aven,1988)).
La aireación proporciona
además un aporte de C02
(0.03% V: V en el aire) el cual
actúa como fuente de
Carbono y colabora en el
taponamiento del medio de
cultivo.
 Universidad de los Andes
de Kuroshio es más frío y
más rico en nutrientes por
estas condiciones fue
seleccionado para la
recolección de la bacteria,
la cual por su naturaleza
abundante en esta área no
precisa de un método
específico para su
extracción.
Además, el sureste del Mar
de China Oriental, el agua
subterránea es a menudo
elevada por surgencia
inducida
topográficamente. Otra
razón por la cual no es difícil
su extracción por medio de
la recolección agua en la
cual se encontrará el
microrganismo siempre y
cuando se sigan las
indicaciones previamente
mencionados.
(me di cuenta de que debo
hallar el método específico
para poder extraer el
microrganismo porque no
se cuanta muestras de
agua debo tomar para
La duración del experimento
Citrato férrico: C6H5 + dependerá del objetivo a la
4YfexNyO7 – 40.0 µm población a alcanzar, mas
no se recomienda pasar de
ZnCl2 – 2.0 µm
los 30 días sin ir controlando
MnCl2 – 2.0 µm la proporción de nutrientes y
condiciones del medio.
NaMoO4 5(H2O) µm
CuCl3 – 0.2 µm
Producción, purificación y
CuSO4 5(H2O) µm caracterización de
ficocianina de
Tiamina: C12H17N4OS4 – 70.0
Synechococcus sp. I09201
µg.l-1
aislada en aguas de Cuba
Biotina: C10H16N2OS – 10.0 (Revisado ed., Vol. 1). (1997).
[Libro electrónico]. A Coruña.
µg.l-1
https://ruc.udc.es/dspace/bit
Vitamina B12: stream/handle/2183/5606/Be
C63H88CoN14O14P - 92.8 µm tancourtFernandez_Liliana_T
D_1997.pdf
Todos los nutrientes tienen que
estar presentes en el agua (me di cuenta de que debo
filtrada antes de introducir la hallar más características del
bacteria. crecimiento en sí de la
bacteria serán incluidas
próximamente tomando
datos de los enlaces:
http://iiowww.cienciasmarina
s.com.mx/index.php/cmarina
s/article/view/59
https://d1wqtxts1xzle7.cloudfr
ont.net/35704399/15._2014._A
vila-
(https://www.scielo.sa.r/img/revist Poveda_et_al_Synechococc
5

asegurarme encontrar la
bacteria lo incluiré
próximamente)
Charpy, L., & Larkum, A. W. D.
(1999b). Marine Cyanobacteria.
Musée océanographique.
Muestreo
En la naturaleza, los
microorganismos se encuentran
formando poblaciones mixtas
con otros tipos de
microorganismos. Los cultivos
de estas mezclas se llaman por
ello cultivos mixtos. Sin
embargo, el conocimiento de los
microorganismos se consigue
mediante el estudio de cepas
aisladas, cultivadas en el
laboratorio en cultivos puros.
Biología de Microorganismos
as/rbt/v56n2/art01i2.jpg)
Producción, purificación y
caracterización de ficocianina
de Synechococcus sp. I09201
aislada en aguas de Cuba
(Revisado ed., Vol. 1). (1997).
[Libro electrónico]. A Coruña.
https://ruc.udc.es/dspace/bits
tream/handle/2183/5606/Beta
ncourtFernandez_Liliana_TD_1
997.pdf
ENTREGA FINAL
Composición del medio de cultivo
Los medios de cultivo son
soluciones acuosas donde se
desarrollan los microorganismos. El
desarrollo de los microorganismos
solo ocurre en presencia de los
nutrientes requeridos que
dependen del microorganismo
particular.
Las microalgas y cianobacterias
us.pdf?
1416816700=&response-
content-disposition=inline
%3B+filename
%3DEvidence_for_accumulati
on_of_Synechococc.pdf&Exp
ires=1600789219&Signature=a
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Ob6JkgXsadP1k8r7TazOrTgDu
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FEbxbygBoqFpybZWAs5-
LLkfj6-
sVXowlkYPAWUDMZdT3psXF9Z
G0pRUPiLgHRCTSqvLlpYLojQ_
_&Key-Pair-
Id=APKAJLOHF5GGSLRBV4Z)
Incubación
Los cultivos se realizan en
botellas(otros contenedores
asemejables) de 1 litro con 900
ml de medio de cultivo.
Estos cultivos se doblan
periódicamente, de manera que
se mantengan en fase
exponencial.
De estos cultivos se toman los
inóculos para las distintas
 Universidad de los Andes
Para ello se toma una pequeña
cantidad de muestra del agua
con un asa de platino y se
reparte sobre la superficie del
medio de cultivo. Sobre el medio
quedan separadas e
inmovilizadas las células
bacterianas. Tras la incubación
en condiciones adecuadas, cada
célula viable origina una colonia
visible resultado de sucesivas
divisiones celulares. El éxito del
aislamiento, de la separación
sobre el medio de cultivo,
depende de la superficie sobre la
que se ha distribuido la muestra.
Es muy importante realizar el
mayor número de estrías
posible. En las primeras estrías
aparecerán colonias confluentes
o una masa continua de
microorganismos. En las estrías
finales deberán aparecer
colonias separadas unas de
otras.
Es aconsejable hacer un
segundo aislamiento antes de
proceder a la obtención del
cultivo puro. Si todas las
colonias de la segunda placa
resultan idénticas, puede usarse
una de ellas para establecer el
cultivo puro.
han sido ampliamente estudiadas experiencias.
por varios propósitos, tales como la
producción de biomasa como una La yectado con un turbo soplador
y filtrado a 0.25 µm medagitación
fuente de compuestos químicos de
en los cultivos se realiza mediante
gran valor económico. Es necesario burbujeo de aire a un flujo de 21
el estudio de cianobacterias min-1, iniante filtros Millipore
aisladas de ambientes hipersalinos antes de la entrada en el cultivo.
y sometidos a cambios drásticos de
las condiciones ambientales en
zonas tropicales, debido a que
diversas cepas pueden inducir la
producción de metabolitos de
interés económico cuando son
expuestas a condiciones extremas
de salinidad, temperatura,
irradiancia y deficiencia de
nutrientes.
Se debe utilizar destilada. Esto
debido a que el agua corriente
posee ciertos cationes como Ca2+ o
Mg2+ pueden formar sales
insolubles con otros componentes
del medio principalmente durante
la esterilización. https://thumbs.dreamstime.c
om/b/etapas-del-
crecimiento-de-las-bacterias-
bacteria-en-placas-de-petri-
9523801418.jpg
Esta agitación constante
impide que las células
sedimenten y permite que
estén expuestas a la misma
intensidad lumínica media,
evitando asimismo la
https://www.google.com/url? formación de gradientes de
sa=i&url=https%3A%2F nutrientes minerales o
%2Fwww.tplaboratorioquimico.com gaseosos, obteniéndose un
%2Flaboratorio-quimico crecimiento más uniforme
%2Fprocedimientos-basicos-de-
7

https://2.bp.blogspot.com/-
D1b7GLR2cqY/UI5RoNFJlRI/AAA
AAAAAADE/8v508u4YifU/s1600/
Synechococcus-Elongatus-in-
Petri-Dish.jpg
La bacteria Synechococcus se
encuentra en la mayor parte de la
superficie oceánica, más se
encuentra con mayor probabilidad
en el Océano Pacífico ecuatorial y
occidental, fluye hacia el norte a
lo largo del margen exterior del
Mar de China Oriental, en
concreto en Kuroshiro.
En las condiciones con las que se
encuentra usualmente se
caracteriza por altas temperaturas,
alta salinidad y ultra-oligotrofia,
principalmente según la corriente
de kuroshio que es una de las
principales corrientes fronterizas
occidentales en los océanos
globales que cumple con las
características previamente
mencionadas.
El kuroshio se origina en el
Océano Pacífico ecuatorial
laboratorio%2Fque-es-la-
destilacion.html&psig=AOvVaw3wM
cmcWJOzx-
HUUr1gpMXs&ust=1601430647751
000&source=images&cd=vfe&ved=
0CAIQjRxqFwoTCNiwsJugjewCFQAA
AAAdAAAAABAD
El agua filtrada Y esterilizada a
120 C durante 20 minutos logrando cultivo.
que solo la bacteria resistente a
altas temperaturas más los
nutrientes específicos permitirá
tener certeza que otros
microorganismos no afectarán el
desarrollo de la bacteria
Synechococcus .
En 100 ml de agua filtrada y
esterilizada se deben incluir los
siguientes nutrientes:
NaNO3 – 4.0 mM
NaH2Po4 - 0.2 mM
Citrato férrico: C6H5 + 4YfexNyO7
– 40.0 µm
ZnCl2 – 2.0 micrometros
MnCl2 – 2.0 micrometros
NaMoO4 micrómetros
Biología de Microorganismos
(R.aven,1988)).
La aireación proporciona
además un aporte de C02
(0.03% V: V en el aire) el
cual actúa como fuente de
Carbono y colabora en el
taponamiento del medio de
La duración del experimento
dependerá del objetivo a la
población a alcanzar, mas
no se recomienda pasar de
los 30 días sin ir
controlando la proporción de
nutrientes y condiciones del
medio.
Producción, purificación y
caracterización de
ficocianina de
Synechococcus sp. I09201
aislada en aguas de Cuba
(Revisado ed., Vol. 1). (1997).
[Libro electrónico]. A Coruña.
https://ruc.udc.es/dspace/bit
stream/handle/2183/5606/Be
tancourtFernandez_Liliana_T
D_1997.pdf
 Universidad de los Andes

occidental y fluye hacia el norte a

lo largo del margen exterior del CuCl3 – 0.2 micrometros

Mar de China Oriental a

concentraciones consistentemente
por debajo de 0,2 mg m-3. A CuSO4 micrómetros
diferencia de, el subsuelo de
Kuroshio es más frío y más rico
en nutrientes por estas Tiamina: C12H17N4OS4 – 70.0
µg.l-1
condiciones fue seleccionado para
la recolección de la bacteria, la
cual por su naturaleza abundante
Biotina: C10H16N2OS – 10.0 µg.l-
en esta área no precisa de un 1
método específico para su
extracción.
Vitamina B12: C63H88CoN14O14P
Además, el sureste del Mar de
- 92.8 µm
China Oriental, el agua
subterránea es a menudo elevada
por surgencia inducida
Todos los nutrientes tienen
topográficamente. Otra razón por
la cual no es difícil su extracción que estar presentes en el
por medio de la recolección de
agua destilada antes de
agua en la cual se encontrará el
microorganismo siempre y cuando introducir la bacteria.
se sigan las indicaciones
previamente mencionadas.

Charpy, L., & Larkum, A. W. D.

(1999b). Marine Cyanobacteria.
Musée océanographique.

ISO 7218:1996(E) Microbiology of

food and animal feeding stuff-
General rules for microbiological
examinations

(https://www.scielo.sa.r/img/revist

9
 Biología de Microorganismos

as/rbt/v56n2/art01i2.jpg)

Producción, purificación y
caracterización de ficocianina de
Synechococcus sp. I09201 aislada
en aguas de Cuba (Revisado ed.,
Vol. 1). (1997). [Libro electrónico].
A Coruña.
https://ruc.udc.es/dspace/bitstrea
m/handle/2183/5606/BetancourtFe
rnandez_Liliana_TD_1997.pdf