Normas de bioseguridad

PROGRAMA: LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACION AMBIENTAL

Materiales utilizados:

 Conferencia a cargo del docente o auxiliar responsable de la práctica.

 Tercera Edición del Manual de Bioseguridad en laboratorio de la Organización Mundial de
las Naciones Unidas, Ginebra 2005 (Este Manual será en entregado en pdf por el profesor).
 Conexión a internet para la explicación de la práctica y seguimiento del proceso
aprendizaje del estudiante.

INTRODUCCION

El tema de normas Bioseguridad en el laboratorio son muy importantes para nosotros los alumnos
para que al momento de las practicas evitemos accidentes que muchas veces son provocados por
la imprudencia de algunos estudiantes que nos respetan las normas de bioseguridad.

Las normas de bioseguridad en el laboratorio de química orgánica o de bilogía son un conjunto de

medidas y normas preventivas, destinadas a mantener el control de riesgos laborales procedentes
de agentes biológicos, físicos o químicos, logrando la prevención de impactos nocivos frente a
riesgos propios de su actividad diaria, asegurando que el desarrollo o resultado final de dichos
procedimientos no atente contra la seguridad del trabajador.

Objetivos

 Conocer las normas de bioseguridad y ponerlas en práctica al momento de llevar a cabo

una práctica de laboratorio.
 Reconocer si los laboratorios de la Universidad de Nariño cumplen con las normas de
bioseguridad.
 Determinar la conducta a seguir frente a un accidente con exposición a dichos elementos.

Laboratorios de contención, nivel de bioseguridad 3

Existen principios de bioseguridad en el cual tenemos la universalidad que consiste que todo el
personal debe seguir las precauciones estándares rutinarias para prevenir accidentes que
puedan ocurrir al momento de ingresar o realizar prácticas dentro de los laboratorios, sin
importar que tanta complejidad tenga estas normas.

Además, debemos de saber que según la OMS (Organización mundial de la salud), existen 4
niveles de seguridad según los 4 grupos de riesgos que se clasifican según su patogenicidad,
dosis infectiva, modo de transmisión, rango del hospedero, disponibilidad de medidas de
prevención efectivas y disponibilidad de tratamiento.

Grupo 1

• Esta clase posee bajo riesgo individual y colectivo;

• No constituyen riesgo para el medio ambiente;

 Grupo 2

• Esta clase posee riesgo individual moderado y riesgo colectivo limitado.

• Microorganismos que pueden provocar enfermedades en el hombre, con poca

probabilidad de alto riesgo para los profesionales de laboratorio. Ejemplos: Schistossoma mansoni,
Wuchereria bancrofti y Sporothrix schenckii.

Grupo 3

• Esta clase posee riesgo individual elevado y riesgo colectivo bajo, puede causar
enfermedades graves a los profesionales de laboratorio. Ejemplos: Mycobacterium tuberculosis,
HIV y Trypanossoma cruzi.

Grupo 4

• Esta clase agrupa los agentes que causan enfermedades graves para el hombre y
representan riesgo serio para los profesionales de laboratorio y para la colectividad.

• Posee agentes patogénicos altamente infecciosos que se propagan fácilmente, pudiendo

causar la muerte rápidamente. Ejemplos: Virus Ebola; Lassa; Machup; Marbug.

Como precauciones tenemos el uso de barreras de protección para evitar la exposición directa al
material manipulado, entre ellas están: bata blanca debidamente cerrada, tapabocas el cual debe
tapar completamente nariz y boca, guantes de nitrilo, gorro desechable el cual debe cubrir
completamente el cabello y por ultimo gafas de seguridad. Todas las personas deben hacer un
correcto lavado de manos al ingresar y salir del laboratorio.

Las responsabilidades que tenemos nosotros como estudiantes son que al ingresar al laboratorio
debemos utilizar los elementos de protección personal, cuidar y mantener en buen estado los
materiales, equipos enseres y medio ambiente de la UNIVERSIDAD, informar inmediatamente al
personal encargado dela practica sobre síntomas inusuales, accidentes o escape de sustancias
químicas, debemos conocer con anterioridad las guías, materiales, sustancias y productos
peligrosos que se manipularan en el desarrollo de la práctica de laboratorio.

Dentro de las instalaciones de laboratorio existen unas restricciones como por ejemplo que no se
dará acceso a personas ajenas al laboratorio o sin elementos de protección personal, se prohíbe el
uso de joyas grandes y largas o de accesorios electrónicos. No se deben usar faldas, shorts y
sandalias, con el fin de evitar que la piel se exponga a alguna sustancia química. Personas bajo el
efecto de alcohol o sustancias psicoactivas de podrá ingresar al laboratorio. Nunca se debe
pipetear con la boca, siempre utilizar un pipeteador o en casos extremos una jeringa con
manguera. Bajo ninguna circunstancia se permite comer, fumar o beber dentro del laboratorio.

Existen muchos medios de contactos como pueden ser: por contacto, gotas o derrames, vectores,
accidentes, riesgo biológico y material microparticulado, en cualquier caso de contagio debemos
ser cuidadosos y avisar lo más pronto posible al laboratorista encargado, para que él nos de las
indicaciones a seguir en estos accidentes.

El laboratorio de contención nivel de bioseguridad 3 está construido e instalado para trabajar con
microorganismos del grupo de riesgo 3, también grandes cantidades de microorganismos de
riesgo 2. Los laboratorios de esta categoría deben figurar en un registro o una lista que
establecerán las autoridades sanitarias nacionales u otra autoridad competente.

Código de practicas

1. El símbolo y signo internacional de advertencia de peligro biológico expuesto en la puertas

de laboratorio debe especificar el nivel de bioseguridad y el nombre del supervisor del
laboratorio que controlo el acceso a este.
2. En el laboratorio se debe llevar ropa protectora apropiada, las batas con botones adelante
no son apropiadas, no se debe usar la ropa de laboratorio por fuera de este antes de ser
enviada a la lavandería.
3. Toda manipulación abierta de material potencialmente infeccioso debe realizarse dentro
de una CSB u otro dispositivo de contención primaria.
4. Para ciertos procedimientos de laboratorio o para trabajos con animales que estén
infectados con ciertos agentes patógenos se debe utilizar equipo de protección
respiratoria.

Diseño e instalaciones del laboratorio

El laboratorio debe estar separado de las zonas del edificio por las que se puede circular sin
restricciones. Se debe habilitar un espacio para el vestíbulo donde se separe la ropa sucia de
limpia. En casos necesarios debe ser instalada una ducha. Las dobles puertas de acceso al
laboratorio deben ser de cierre automático y disponer de mecanismo de interbloqueo. Las
superficies de las paredes, suelos y techos deben ser impermeables y fáciles de limpiar. La sala del
laboratorio debe poderse precintar para proceder a su descontaminación. Los sistemas de
conducción de aire han de estar construidos de modo que sea factible la descontaminación con
gases. Las ventanas deben estar cerradas herméticamente y llevar cristales resistentes a la rotura.
En la salida del laboratorio debe haber un lavabo que no sea accionada con la mano. Debe haber
un sistema de ventilación que establezca un flujo direccional hacia el laboratorio. El sistema de
ventilación del edificio debe estar construido de modo que el aire del laboratorio de contención
nivel de bioseguridad 3 no se dirija a otras zonas del edificio. Todos los filtros HEPA deberán estar
instalados de modo que permitan la descontaminación con gases y la realización de pruebas. Las
CSB deben estar alejadas de las zonas de paso y de los lugares de cruce de corrientes procedentes
de puertas y sistemas de ventilación. Dentro del laboratorio de contención debe haber una
autoclave para descontaminar el material de desecho infectado, si se desea sacar ese material
tiene que ser transportado en recipientes herméticos, irrompibles e impermeables. El sistema de
abastecimiento de agua debe estar dotado de dispositivos contra el reflujo. El diseño de las
instalaciones y los procedimientos de trabajo del laboratorio de contención – nivel de
bioseguridad 3 deben estar documentados.

Material de laboratorio

Los principios aplicables a la selección del material son los mismos para el laboratorio básico nivel
de bioseguridad 2, con la excepción de que todas las actividades de manipulación de todo el
material potencialmente infeccioso deben realizarse dentro de una CSB u otro dispositivo de
contención física primaria. Si se utilizan centrifugadoras se debe utilizar cubetas de seguridad o
rotores de contención.
En la siguiente imagen se muestra como debería ser un laboratorio de contención nivel de
bioseguridad 3.

Vigilancia médica y sanitaria

Se aplican los objetivos de vigilancia médica y sanitaria de los laboratorios básicos de bioseguridad
1 y 2 con las siguientes excepciones:

 Todo el personal médico que trabaje en el laboratorio de contención debe comprender un

historia clínica detallada y reconocimiento físico orientado a la actividad laboral.
 A todo el personal examinado luego de entregado el informe se le asigna una tarjeta de
contacto medico

en la que se declare que trabaja en un centro que tiene un laboratorio de contención – nivel de
bioseguridad 3. Esa ficha tendrá el tamaño de un billetero, llevará la fotografía del titular y éste la
llevará siempre consigo. Quienes figurarán como «contacto» en la tarjeta es algo que tendrá que
acordarse en el plano local, pero entre esas personas deben estar el director del laboratorio, el
asesor médico o el funcionario responsable de la bioseguridad.

Para finalizar se recomienda que los presentes en el laboratorio de química deben conocer y
cumplir las normas de bioseguridad para evitar accidentes. También debemos llevar el equipo
necesario y ponerlo antes de entrar, en caso de un accidente Debemos saber qué hacer y cómo
actuar, Seguir las recomendaciones del profesor y escucharlo atentamente puede prevenir un
accidente.

FUENTES DE INFORMACION:

 https://www.who.int/topics/medical_waste/manual_bioseguridad_laboratorio.pdf

UTILIZACIÓN DEL MICROSCOPIO DE LUZ

PROGRAMA: LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACION AMBIENTAL

Introducción

El instrumento básico para el estudio de células y tejidos vegetales es el MICROSCOPIO DE LUZ,

tiene un poder resolutivo capaz de hacer objetos que están muy juntos aparezcan separados; una
idea de poder resolutivo del ojo humano es aproximadamente 0,1mm, si hay una estructura que
está separada a 0,1mm se mirara como una sola no importa cuánto se acerque el observador, por
ejemplo la mayoría de las células tienen un diámetro inferior a 0,1 mm es decir que sin la ayuda de
un microscopio siempre la vamos a ver como una sola estructura.

En la actualidad el instrumento de microscopio se ha ido mejorando permitiendo captar y analizar

imágenes a través de varios dispositivos como un computador, un celular o una Tablet, mejorando
la calidad de imagen, procesarla y almacenarla de forma adecuada, Los microscopios empleados
en microscopia común son de tipo óptico o compuesto y el estereoscopico o de disección; se
disponen de una gran variedad de modelos en su construcción; básicamente, los microscopios
ópticos se caracterizan por tener un tubo que lleva dos sistemas de lentes: el ocular en el extremo
superior y el objetivo en el extremo inferior; la imagen se forma por el objetivo y se magnifica por
el ocular.

Objetivos

 Identificar las partes del microscopio óptico y su función.

 Conocer el manejo adecuado, componentes, cuidados y limpieza del microscopio

Marco teórico

Los microscopios pueden ser monoculares (un solo ocular) o binoculares (dos oculares),
dependiendo del tipo de microscopio puede estar equipado con diferentes objetivos
intercambiables los más comunes son 2.5x (lupa), 10x, 40x y 100x. Un accesorio indispensable en
los microscopios es el condensador, el cual es un tercer sistema de lentes que ayuda a regular el
contraste de la imagen y la intensidad de la iluminación.

Con el microscopio óptico pueden lograrse aumentos de hasta 2000x. El aumento total es el
producto de poder de aumento del ocular multiplicado por el poder de aumento del objetivo y por
el poder de aumento del condensador. El poder resolutivo del microscopio de luz, está limitado
por la longitud de onda de la luz visible que utiliza, a esto se le denomina campo brillante; sin
embargo ciertas técnicas de la microscopia de luz, han ayudado a aumentar el alcance de éste
instrumento; una de éstas técnicas se conoce como microscopia de campo obscuro, en éste
método se utilizan lentes que desvían los rayos de luz de manera que sólo la luz que pasa a través
del espécimen llega hasta el ojo del observador, esto hace que el objeto parezca brillante sobre un
fondo obscuro.1

Microscopía: Iluminación de Köhler y diversidad celular

En1893AugustKöhler(1866-1948)publicó el trabajo “Un nuevo sistema de iluminación en

microfotografía” donde dio a conocer los fundamentos básicos de la técnica de iluminación que
actualmente lleva su nombre. Dicha técnica revolucionó el diseño de los microscopios y sus
principios siguen gobernando la construcción delos actuales microscopios ya que el sistema de
iluminación crítica que se utilizaba por aquel entonces proporcionaba una iluminación irregular y
desigual del a preparación histológica. El sistema de iluminación de Köhler resulta de aplicación no
solo en microscopía óptica convencional sino también en otras técnicas de microscopía como
contraste de fases, microscopía de contraste por interferencia diferencial, epifluorescencia y
microscopía con focal. Actualmente el sistema de iluminación Köhler y el microscopio están
diseñados detalmodoquecoexistenrecíprocamentedosconjuntosdeplanosfocalesconjugados. Los
planos conjugados se refieren a un conjunto de planos en un sistema óptico formador de
imágenes que están ligados ópticamente y cuyas imágenes están superpuestas al observador y se
hallan simultáneamente en foco. La iluminación Köhler consiste en regular la marcha de los rayos
de luz, centrando la mayor intensidad de luz y cubriendo exactamente el diámetro frontal de cada
objetivo. Con ello se consigue iluminar exclusivamente aquella parte de la preparación incluida en
el campo de visión del objetivo bloqueando y evitar que la luz reflejada o refractada por la
preparación u otros elementos del sistema óptico puedan deteriorar la imagen. 2

5. Regulador de intensidad de iluminación

6. Interruptor ON/OF con bombilla de control

integrada

7. Botón de enfoque-mando micrométrico

(en ambos lados)

8. Botón de enfoque-mando macrométrico

(en ambos lados)

9. Mando coaxial para desplazar la platina en

cruz en dirección x

10. Mando coaxial para desplazar la platina

en cruz en dirección y

11. Diafragma de campo luminoso

12. Portacondensador

13. Palanca para regular el diafragma de

apertura

14. Condensador

15. Tornillos para centrar el condensador (en

ambos lados)

16. Platina en cruz con portaobjetos

1. Oculares
17. Objetivo
2. Tubo binocular
18. Revólver portaobjetivos cuádruplo o
3. Estativo del microscopio quíntuplo.

4. Tornillo moleteado para fijar el tubo

Figura 1. Partes del Microscopio óptico. Fuente: Modificada por los autores de Carl Zeiss. Light
Microscopy. Instrucciones de manejo del microscopio Axiostar Plus. Microscopio de luz
transmitida

Bases ópticas de la microscopia – formación de la imagen

La luz que atraviesa las lentes condensadoras, es uniformemente distribuida sobre el portaobjetos
y ultrapasa el objeto observado incidiendo en el objetivo. Estando el objeto colocado anterior al
punto focal del lente objetivo, se forma en el plano focal de la lente ocular una imagen real (que
puede ser proyectada en un antiparo), mayor e invertida. La luz, al atravesar el ocular formará una
imagen virtual mayor y derecha, con relación a la imagen formada por el objetivo. De este modo,
la imagen final del objeto, proporcionada por el microscopio, será virtual, mayor e invertida. 3

Poder de resolución: Se refiere a la capacidad de un sistema óptico para discriminar la imagen de

un objeto que se encuentra en su campo de visión. Por ejemplo; abajo de un cierto límite mínimo
(0,1mm), el ojo humano no identifica la ocurrencia de dos objetos distintos, eventualmente
visualizándolos como un único objeto. Para poder calcular a que distancia real deben estar las dos
estructuras o puntos para que se vean por separado se aplica la fórmula que relaciona la longitud
de onda de la luz (550 nm) con el doble de la apertura numérica, el resultado es la distancia real en
nm a la que se encuentran los dos puntos. Con el microscopio óptico, el poder separador máximo
es de 0,2 décimas de micra. Mejora la visión unas 500 veces con relación a la del ojo humano. 4

El poder de resolución depende de la longitud de onda (λ) y de la apertura numérica del objetivo
(A.N.) El Poder de resolución está dado por la fórmula:
Donde A.N: relaciona el ángulo de apertura de los rayos de luz, que provienen de la muestra, con
el índice de refracción.

Poder de aumento: Permite magnificar la imagen. Corresponde al aumento (A) dado por la
relación: Tamaño de la imagen / tamaño del objeto. La ampliación es igual al producto del
aumento del lente ocular por el del objetivo. Cada objetivo y cada ocular tienen grabado el
número de veces que aumentan la imagen. Si la imagen del objeto se hace aumentar 40 veces
mediante el objetivo y enseguida 10 mediante el ocular, su aumento total será 10X40= 400. 5

El aumento de una muestra se calcula multiplicando el aumento que señala el ocular por el
aumento del objetivo

Aumento total = aumento del ocular X aumento del objetivo X Factor de tubo (q) Se calcula
multiplicando el aumento del ocular por el aumento del objetivo respectivo, por factor de tubo, si
es que el microscopio lo posee.

Materiales utilizados

• Microscopio óptico

• Papel seda *

• Aceite de inmersión

• Pinzas de disección

• Frasco con etanol

• 2 ml de azul de metileno al 0.2%

• Bisturí *

• Portaobjetos

• Cubreobjetos

• Palillos o hisopos*

• Cebolla *

• Papel toalla *

• Compás*

• Marcador de vidrio*

• Jabón antibacterial para lavado de manos*

• Video de soporte
Metodología realizada:

Es muy importante no tocar las lentes de microscopio y limpiarlas para que proporciones
imágenes de buena calidad, para limpiar dichas lentes se emplea (papel seda, tela ojo de pescado
o tela especial para limpieza de gafas).

Los materiales que se van a observar se colocan sobre una pieza de vidrio llamada portaobjetos o
lámina, y en la mayoría de las veces se cubren con una lámina de vidrio más pequeña y delgada
llamada cubreobjetos (o laminilla). Ambas deben limpiarse muy bien antes de usarse.

Montaje húmedo de la letra e

1. Con unas tijeras se cortó un pedazo de papel periódico (3 x 3 mm) que contenía una letra “a” ó
“e” (impresa por un solo lado); se colocó en el centro del portaobjetos y con un gotero se depositó
una gota de agua. Luego se colocó el cubreobjetos sobre el papel. Para evitar la formación de
burbujas se colocó el cubreobjetos de tal manera que formó un ángulo de 45º con el portaobjetos
y se dejó caer lentamente. Si se formaron burbujas se ejerció presión suave sobre el cubreobjetos.

2. El montaje fue observado en menor aumento (esto permitió realizar un enfoque adecuado de la
imagen) y posteriormente se realizó el enfoque en 10X y 40X.

3. para desmontar la placa se bajó la platina a su tope máximo y con ayuda del revolver se regresó
al objetico de menos aumento, se abrió la pinza y se sacó la muestra.

Montaje húmedo de papel fotográfico

1. Con ayuda de la pinza se tomó el recorte del papel fotográfico y se lo coloco en la mitad de
portaobjetos, y con un gotero se depositó una gota de agua. Luego se colocó el cubreobjetos
sobre el papel.

2. Se enfocó en el objetivo de 4X con la ayuda del tornillo micrométrico, posteriormente se

enfocó en 10x y por último se enfocó en 40x.

Montaje células bucales

1. Con un hisopo estéril se froto la parte interna de la mejilla, luego se froto en el portaobjetos y
se dejó secar.

2. Posteriormente se adiciono una gota de azul de metileno al 0.2%, y se cubrió con el cubre
objetos

3. Se llevó la muestra y se observó en el objetivo de 4X,10X Y 40X.

Montaje epidermis de la cebolla

1. Se cortó un fragmento de la capa gruesa de la cebolla y se tomó la capa delgada, se coloca

en el portaobjetos, cuidadosamente y se revisó que la muestra quede totalmente
extendida

2. Posteriormente se adiciono una gota del colorante de lugol de gram y se colocó el

cubreobjetos.
 3. Se enfocó en el objetivo de 4x, 10x, 40x

Para la entrega de material se desmonto la placa se bajó la platina a su tope máximo y con ayuda
del revolver se regresó al objetico de menos aumento, se abrió la pinza y se sacó la última
muestra, se bajó la intensidad lumínica hasta que se apagó el microscopio, se desconectó el
adaptador de corriente eléctrica y se entregó al laboratorista encargado.

Resultados obtenidos

Observación de la letra “e” en 4x Observación de la letra “e” en 10x

Observación de la letra “e” en 40x
Discusión de resultados

Según el material de apoyo verifique la posición de la imagen de la letra que se observó al

microscopio, con su posición real en el portaobjetos. ¿Se ve en la misma posición? Explique el
porqué de ese fenómeno.

R/se mira invertida porque Las lentes convexas, que permiten modificar el tamaño de las
imágenes que las atraviesan (esto ocurre al atravesar la lente la luz), invierten naturalmente su
disposición, de tal manera que la nueva imagen se forma invertida si la comparamos con la
original.6

Cuando se desplaza el portaobjetos en dirección contraria (orientación hacia el brazo del

microscopio). ¿En qué dirección se mueve la imagen? ¿Por qué sucede esto?

R/ se mueve en dirección vertical de arriba hacia abajo gracias al macrometrico El desplazamiento

de la platina puede ser en sentido longitudinal y transversal, además de los movimientos circulares
de la platina en los microscopios especializados. 7

Al sustituir el objetivo de menor aumento por el de mayor aumento, ¿cambia la posición de la

imagen? ¿Por qué?

R/ no, imagen queda en la misma posición solo que se ve un segmento más pequeño ya que se
hizo un aumento en el objetivo.

En el montaje húmedo de papel fotográfico que fue mostrado por el auxiliar de laboratorio,
¿Cuál es la diferencia entre lo observado a simple vista y lo observado al microscopio? ¿Qué
poder es evidente en esta observación?

R/ cuando se observa el papel fotográfico a simple vista solo se mira la diferencia de dos colores,
ya cuando se observa en el microscopio se puede apreciar que hay diferentes estructuras dentro
del papel fotográfico y que se componen por diferentes colores, es decir se puede apreciar más de
los dos colores que se observaba con el ojo humano, el poder que actúa aquí es el Poder de
definición el cual Se refiere a que el microscopio nos permite observar las formas puras de los
objetos en estudio, es decir es la capacidad del objetivo de formar imágenes de contornos nítidos.

Cuestionario

1. Indique la importancia del microscopio de campo claro en la investigación científica.

Respuesta: El microscopio óptico de campo claro o luz transmitida es una valiosa herramienta para
el análisis y la observación de células, secciones histológicas de órganos y tejidos humanos,
animales y vegetales, en el diagnóstico de patologías y parasitología animal y vegetal, de
microorganismos, en estudios de histoquímica y de substratos para síntesis química.

En campo claro toda la luz desde el espécimen. Y sus alrededores es colectada por el objetivo para
formar una imagen contra un fondo brillante. La luz pasa a través de o reflejada del espécimen, la
iluminación no se altera por aditamentos que cambien las propiedades de luz como (Polarizados o
Filtros).

La aplicación del microscopio de campo claro es usada ampliamente para tinciones o pigmentos
naturales o especímenes altamente contrastados montados en una porta objetos. El espécimen es
iluminado desde abajo y observado desde arriba. El espécimen aparece brillante, pero más oscuro
que el brillante fondo. Esta técnica es ampliamente usada en patología para ver secciones de
tejidos fijos o películas celulares.8

2. ¿Qué importancia tiene realizar la iluminación de Kohler?

Respuesta: la iluminación Köhler debe ser aplicada donde cualquier iluminación deficiente en la
muestra impide su observación adecuada. La iluminación Köhler puede brindar una iluminación
uniforme de las muestras en campo claro, campo oscuro y en todas las variaciones de microscopía
óptica de contraste de fase mediante el uso de los recorridos de luz transmitida y reflejada. La
iluminación Köhler facilita la iluminación uniforme, la alta resolución y el buen contraste de la
muestra.9

3. ¿Qué cuidados hay que tener al utilizar aceite de inmersión?

Respuesta: después de observar el lote de preparaciones, es decir, al terminar la jornada de

trabajo, se debe limpiar cuidadosamente el objetivo de 100X, usando un papel para lentes con
etanol. Si se deja el lente sucio, el aceite se secará sobre él y luego será muy difícil retirarlo,
dañando el campo de visualización.

Así mismo, hay que tener en cuenta que el aceite es inflamable y debe tenerse alejado de fuentes
de calor (mecheros). Es importante evitar calentarlo por encima de 65°C.

Finalmente, el aceite es un producto tóxico. Por tanto debe evitarse el contacto directo con piel y
mucosas, donde puede producir irritación leve. Para evitar accidentes, se recomienda el uso de
guantes y lentes de seguridad para manipularlo.

En caso de que se tenga contacto con el aceite, debe lavarse el área con abundante agua. Si el
aceite salpica en los ojos, se debe lavar de la misma manera, manteniendo los ojos abiertos. En
caso de ingestión accidental, es importante ingerir agua tibia e inducir el vómito, además de acudir
al médico más cercano.10

Diga las diferencias y semejanzas que hay entre las células animales y vegetales.

Las diferencias podemos apreciarlas en el siguiente cuadro:

 11

Las semejanzas que hay entre célula animal y vegetal son las siguientes:

 Una de las principales semejanzas o similitudes entre estos dos tipos de células es que son
las unidades morfológicas y funcionales básicas.

 Tanto las células vegetales como animales son células eucariotas. Las células eucariotas
animales y vegetales, a diferencia de las células procariotas (bacterias y arqueas), poseen
un núcleo celular organizado con una cubierta que los protege, orgánulos celulares,
citoesqueleto (esqueleto celular) y un genoma organizado y empaquetado en
cromosomas, entre otras cosas.

 Están rodeadas por una membrana plasmática semipermeable que delimita el citoplasma.

 Tamaño que oscila entre 10 y 100 µm. Las células animales pueden alcanzar las 30 µm,
mientras que las vegetales, las 100 µm una micra es una milésima parte de un milímetro).

 Dado su pequeño tamaño, no pueden ser observadas a simple vista y se requiere la ayuda
de microscopios.10

Conclusiones

 Es de suma importancia conocer las partes y el funcionamiento del microscopio a la hora

de realizar las prácticas para que de esta manera no ocurran accidentes inesperados.

 En el microscopio de luz se pudo observar detenidamente las partículas con conformaban

las diferentes muestras y como estas no se pueden detallar con el ojo humano.

 Al enfocar con cada objetivo se pudo observar las diferencias de aumento que existe con
cada alenté y como la luz es un gran influyente para la visualización de la placa,
obteniendo más nitidez en cada imagen.
Recomendaciones

 Al finalizar el trabajo, se debe limpiar el objetivo de inmersión (100X) con cuidado

empleando un papel especial para óptica (papel de arroz). Comprobar también que el
objetivo 40x está perfectamente limpio.

 Manejar con precaución objetivos con aceite de inmersión; una sola gota es suficiente y
cuando gire el revólver, hágalo de menor a mayor aumento para evitar que los otros
lentes se impregnen del aceite de la lámina y se contaminen.

Referencias bibliográficas

1. https://www.uv.mx/personal/tcarmona/files/2016/08/practica-1.pdf

2. https://www.coursehero.com/file/48022930/Pr%C3%A1ctica-2-Microscop%C3%ADa-
Iluminaci%C3%B3n-K%C3%B6hler-y-diversidad-celularpdf/

3. Manual de biología celular y molecular Universidad de Nariño

4. Manual de biología celular y molecular Universidad de Nariño

5. Manual de biología celular y molecular Universidad de Nariño

6. https://www.buenastareas.com/ensayos/Por-Qu%C3%A9-Las-Letras-En-El/68555923.html

7. Publicado en  12 marzo 2009  por Maria Paulina Camacho. http://estudiandobiologia.over-

blog.es/article-28926996.html#:~:text=i)%20Desplazamiento%20de%20platina%3A
%20dispositivo,Microm%C3%A9trico%3A%20permite%20enfocar%20con%20precisi
%C3%B3n. }

8. http://www.tecnicaenlaboratorios.com/Nikon/Info_campo_claro.htm

9. https://www.olympus-ims.com/es/insight/making-the-most-of-kohler-illumination/

10. https://www.lifeder.com/aceite-de-inmersion/

11. https://www.diferenciador.com/celula-animal-y-vegetal/#:~:text=La%20c%C3%A9lula
%20animal%20es%20una,las%20de%20una%20c%C3%A9lula%20vegetal.
Mediciones microscópicas
PROGRAMA: LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACION AMBIENTAL

Introducción

Tanto en las células y sus estructuras como los organismos que dominan el mundo microscópico,
es difícil determinar un tamaño exacto debido a las dimensiones tan pequeñas que los
caracterizan; el microscopio es uno de los inventos más revolucionarios en el estudio
de los organismos vivos y su constitución. En el estudio de la biología celular la unidad de
medida más frecuente es la micra representada con la letra griega μ y equivale a 0,001 mm. Al
hacer observaciones microscópicas debemos tener en cuenta, que dichas observaciones deben ser
cuantitativas respecto a las características del objeto que estamos observando. Por dicha razón en
esta práctica de laboratorio hemos aprendido a cómo identificar y/o encontrar las dimensiones del
campo del microscopio para los diferentes objetivos de aumento que el microscopio posee.
También hemos aprendido a relacionar el campo visual que genera cada objetivo con el tamaño
del objeto que estamos observando. Las observaciones microscópicas se hacen con campos de
ampliación que se pueden denominar que son muy pequeños debemos aprender manejar
medidas apropiadas y adecuadas para este tipo de observaciones.

Objetivos
 Aplicar la teoría suministrada por la guía, mediante procesos y prácticas, desarrollar la
habilidad para enfocar objetos de menor y mayor tamaño teniendo en cuenta el campo
del objeto observado.
 Estimar las dimensiones del campo del microscopio para los objetivos de menor y mayor
aumento.
 Relacionar el tamaño del campo del microscopio con los objetos observados

Marco teórico

1. Determinación del aumento total para cada objetivo:

De acuerdo con los diferentes tipos de microscopio se han adaptado diferentes lentes
oculares, siendo que los aumentos más habituales son 6x, 10x, 15x, y 20x. el aumento
proporcionado por un ocular suele estar inscrito en su parte lateral.

El aumento total para cada objetivo es calculado multiplicando el aumento del lente ocular
(10X) por el aumento del lente objetivo x el lente del tubo (si el tubo de su microscopio señala
que tiene aumento).

2. Cálculo del diámetro del campo visual y área del campo

El campo de visión de un microscopio es la zona circular que se observa bajo un determinado

aumento. Para medir el campo de visión de un microscopio, se debe usar una unidad llamada
micra. Una micra equivale a 0,0001 mm; en otras palabras, hay 1000 micras en un milímetro. El
diámetro de este campo es su medida. Utilice la fórmula para determinación del diámetro del
campo visual para cada uno de los objetivos, realice la conversión respectiva en micras.

Área del campo visual=πr2

3. Estimación del tamaño celular utilizando el micrómetro

Para medir células y otras muestras al microscopio, algunas referencias cuentan con un sistema de
reglilla como el microscopio Axiostar en nuestro caso se puede estimar mediante el uso de
fórmulas matemáticas (geométricas) es necesario utilizar formulas.

Para medir longitudes microscópicas con el microscopio Axiostar Plus disponible cuenta con
micrómetro reticular para oculares 10: 100, d=26 mm

Discusión de resultados

Calcule el aumento total para cada uno de los objetivos de su microscopio.

OBJETIVO LENTE OCULAR LENTE OBJETIVO AUNMENTO TOTAL

De exploración 10X 5X 50X
De bajo poder 10X 10X 100X
De alto poder 10X 40X 400X
De inmersión 10X 100X 1000X

Teniendo en cuenta que el índice del campo visual (ICV) de los microscopios que trabajamos es 18
calcule el diámetro del campo visual para el objetivo de 10X en mm y en micras:

ICV OBJETIVO Q(factor de DIAMERTO MM DIAMETRO EN

tubo) MICRAS
18 5 1 3,6 3600
18 10 1 1,8 1800
18 40 1 0,45 450
18 100 1 0,18 180
Con base en el dato anterior determine el área del campo visual en el objetivo de 10X en micras y
mm.

Pi D(mm) r(mm) Área(mm2) Área (micras2)

3,1416 3,6 1,8 10,178784 10178784
3,1416 1,8 0,9 2,544690 2544690
3,1416 0,45 0,225 0,1590431 159043,12
3,1416 0,18 0,09 0,02544696 25446,96

A.objetivo D campo Y X Alto(mm) Ancho(mm) Área Área

visual elodea(mm2) elodea(micras)

Es importante calibrar para establecer con exactitud que los resultados que arroja un instrumento
de medida sean los mismo que la magnitud que se mide con él. Esto se logra con un patrón de
referencia que sea reconocido y tenga trazabilidad. 1

¿ Al observar una misma célula a 10X y a 40X. ¿cambia su tamaño? Justifique su respuesta

El tamaño dela célula es diferente ya que se aumenta su tamaño cuarenta veces

¿Puede calibrarse el microscopio para observar muestras con el objetivo de 100X o cualquier
otro objetivo diferente a los de 10X y 40X? ¿De qué forma se haría?

Si y se procede dela siguiente forma:

Paso 1

Coloca el retículo dentro del ocular. Luego, ajusta el ocular de tal manera que la escala que está
grabada en el retículo quede correctamente enfocada.

Paso 2

Coloca el calibre micrométrico en la platina del microscopio. Hay un círculo grabado en el

micrométrico que puede verse a simple vista. Usa el círculo para centrar el micrómetro, y enfoca
el microscopio usando la lente objetivo de menor aumento. Luego, coloca el objetivo deseado en
posición y enfoca correctamente la escala de calibre micrométrico.

Paso 3

Usa las perillas x-y para controlar el movimiento de la platina. Alinea el retículo ocular con el
calibre micrométrico. Una vez que coincidan los dos conjuntos de líneas, busca otra ubicación
donde coincidan precisamente de nuevo.

Paso 4
Calcula la distancia entre las dos líneas del micrómetro que coincidan. Por ejemplo, si la distancia
entre dos divisiones es de 10 micrómetros, y hay 15 divisiones entre las dos líneas que coinciden,
la distancia total es de 150 micrómetros.

Paso 5

Cuenta el número de divisiones en el retículo ocular entre las dos líneas que coinciden, luego
calcula la distancia ente cada línea. Por ejemplo, si hay 30 divisiones entre las dos líneas que
coinciden, y sabemos por el calibre micrométrico que la distancia es de 150 micrómetros, la
división en el ocular representa 150 micrómetros / 30 divisiones = 5 micrómetros / división.

Conclusiones

 Es de suma importancia determinar el aumento total para cada objetivo porque este
indica en qué medida este puede aumentar la imagen de la muestra observada.

 Una vez calculado el campo visual, es muy fácil calcular el tamaño de un objeto. Para ello
basta con contar el número de células que caben en el campo visual y posteriormente,
dividir el diámetro entre el número de células.

Referencias bibliográficas

 Manual de biología celular y molecular Universidad de Nariño