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BIOTECNOLOGÍA

Cátedra de Industrias y Servicios I

Autores:
•Ávila, Ariel - Lº Nº 8723
•Fajer, Emmanuel - Lº Nº 8652
•Gabriac, Simon - Lº Nº 10271
•Heinke, Tomás - Lº Nº 8736
•Lobato, Francisco - Lº Nº 8878
•Martin, Miguel - Lº Nº 8805

Universidad Nacional de Cuyo


Año 2010

Biotecnología - Ávila, Fajer, Gabriac, Heinke, Lobato, Martin


La Biotecnología: lntroducción
Industrias y Servicios I

1.Definición El término(plazo) "biotecnología" ha sido imaginado en


1913 por un ingeniero agrícola húngaro, Karl Ereky, que
“Biotecnología es el uso de organismos vivos o de
quería transformar su país natal, Hungría, en comarca rica y
compuestos obtenidos de organismos vivos para exportadora de productos agrícolas a la imagen de Dinamarca.
obtener  productos  de  valor  o servicios para  el Uno de los elementos de esta transformación era, según él, el
hombre. " OCDE, 1980 advenimiento de un nuevo modo de producción, una edad
basada en bioquímica y en las diversas transformaciones de las
materias primas que permite.

2.Clasificación Consistiendo mayoritariamente en modificar los genes de estas


Distinguimos hoy dos categorías de biotecnología, a saber las últimas, la biotecnología verde es asimilada sobre todo al OGM o
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biotecnologías de primera generación y las dichas de última El organismo genéticamente modificado. Así gracias a la
generación. biotecnología verde, actualmente es posible pasarse sin abono y
sin plaguicidas, cultivar sobre suelos no sanos o irrigar con agua
1.Biotecnología tradicional: salada.
Las biotecnologías de primera generación, también 2.2.Biotecnología roja
calificadas de biotecnologías tradicionales, reagrupan a las En cuanto a la biotecnología roja, interviene en el sector de
técnicas que explotan a los agentes biológicos con el fin de la salud, para que sea humana o veterinaria. La biotecnología
disponer de un producto final que responde a las normas y las roja tiene como objetivo la comprensión del funcionamiento del
exigencias de los consumidores. Basadas en técnicas que no organismo, la búsqueda(investigación) causas de ciertas
necesitan la utilización de equipos modernos, la biotecnología enfermedades y sobre todo, la producción de nuevos
tradicional posee como campo de aplicación el sector de la tratamientos. Hay que saber que es en el sector de la salud que la
industria agroalimentaria(agroalimentario). Podemos citar entre biotecnología verdaderamente tiene su razón para estar debido a
otras cosas a las técnicas de vinificación, de planeación o de la las intervenciones genéticas y que es admitida por el gran
producción de cerveza a través de las levaduras. público. Podemos citar en calidad de ilustraciones de los
2.Biotecnología moderna: intereses, acciones y productos de la biotecnología en el dominio
En cuanto a las biotecnologías modernas o en cuanto a la de la salud, las culturas celulares, los anticuerpos monoclonaux y
última generación y como lo subraya su calificación, reposan en sobre todo, la producción del 15 % de los nuevos productos
la utilización de equipos sofisticados y tienen como sector farmacéuticos.
principal de aplicación la genética. Concerniendo a los 2.3.Biotecnología blanca
susodichos equipos, mayoritariamente son concentrados en los Por fin, concerniendo a la biotecnología blanca, hace
sectores de la nanotecnología y de la bioinformática. referencia a una utilización de estas técnicas en el
Actualmente, la biotecnología contemporánea decae en tres dominiocampo) industrial y utiliza de manera general las
grandes familias, a saber la biotecnología verde, roja y blanca. bacterias como los agentes biológicos. Hay que saber que la
biotecnología blanca disponga de un dominio(campo) vasto de
2.1.Biotecnología verde aplicación si se cita sólo los biocatalizadores, los procedimientos
Concerniendo a la primera categoría de biotecnología, se dichos enzimáticos, la modificación de genes o la fijación del
define como siendo la utilización de técnicas modernas por nitrógeno. Hay que anotar que en cierta medida, la
medio de agentes biológicos en el dominio(campo) agrícola con biotecnología roja se encuentra en la categoría blanca en este
el fin de obtener variedades de plantas excepcionales. sentido(dirección) que el dominio(campo) farmacéutico es la
aplicación industrial superior de la biotecnología.

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3.Historia
La historia de la biotecnología puede dividirse en cuatro
períodos.

El primero corresponde a la era anterior a Pasteur y sus Mujer egipcia


comienzos se confunden con los de la humanidad. En esta época, elaborando
cerveza
la biotecnología se refiere a las prácticas empíricas
de  selección  de  plantas  y animales y sus cruzas, y a la
fermentación como un  proceso  para preservar y enriquecer
el contenido proteínico de los alimentos. Este período se extiende
hasta la segunda mitad del siglo XIX y se caracteriza como la
aplicación artesanal de una experiencia resultante de la práctica
diaria. Era tecnología sin ciencia subyacente en su acepción
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moderna. 

La segunda era biotecnológica comienza con la


identificación, por Pasteur, de los microorganismos como causa
de la fermentación y el siguiente descubrimiento  por parte de Louis
Buchner de la capacidad de las  enzimas, extraídas de las Pasteur,
pionero de la
levaduras, de convertir azúcares en  alcohol. Estos desarrollos microbiología
dieron un gran impulso a la aplicación de las técnicas de
fermentación en la industria alimenticia y al
desarrollo  industrial  de productos como las levaduras,
los  ácidos  cítricos y lácticos y, finalmente, al desarrollo de una
industria química para la producción de acetona, "butanol" y
glicerol, mediante el uso de bacterias.

La tercera época en la historia de la biotecnología se


caracteriza por desarrollos en cierto sentido opuestos, ya que por
un lado la expansión vertiginosa de la
industria  petroquímica  tiende a desplazar los procesos Jardin de
pruebas,
biotecnológicos de la fermentación, pero por otro, el mais clasico
descubrimiento de la penicilina por Fleming en 1928, sentaría las e hibride
bases para la producción en gran escala de antibióticos, a partir
de la década de los años cuarenta. Un segundo desarrollo
importante de esa época es el comienzo, en la década de los años
treinta, de la aplicación de variedades híbridas en la zona
maicera de los  Estados Unidos  ("corn belt"), con espectaculares
incrementos en la producción por hectárea, iniciándose así el
camino hacia la "revolución verde" que alcanzaría su apogeo 30
años más tarde.

La cuarta era de la biotecnología es la actual. Se inicia con el


descubrimiento de la  doble  estructura  axial del ácido "deoxi-
ADN, soporte
ribonucleico" (ADN) por Crick y Watson en 1953, seguido por de la
los procesos que permiten la inmovilización de las enzimas, los herencia
primeros  experimentos  de ingeniería genética realizados por
Cohen y Boyer en 1973 y aplicación en 1975 de la técnica del
"hibridoma" para la producción de anticuerpos "monoclonales",
gracias a los trabajos de Milstein y Kohler.

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Proceso Productivo: Esquema general
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Existen 4 etapas bien diferenciadas, a saber:


3.Operaciones y proceso de separación y purificación
1.Propagación de cultivos: se realiza en el laboratorio y de los productos: estas etapas comprenden en forma general
comienza generalmente en un tubo de ensayo que contiene un y sucesivamente:
repique reciente del microorganismo o un tubo liofilizado o •s e p a r a c i ó n d e i n s o l u b l e s p o r fi l t r a c i ó n ,
congelado donde se conserva la cepa de interés o de una centrifugación, o decantación;
colonia del microorganismo previamente seleccionada. Este • separaciones primarias por extracción,
material microbiológico seleccionado constituye el punto de •absorción, adsorción, ultrafiltración;
partida con el cual se debe aumentar la cantidad del mismo •purificación por extracción líquido-líquido, o
mediante sucesivos pasajes en frascos de volúmenes crecientes extracción a dos fases acuosas, o cromatografía de
que son generalmente operados en agitadores de vaivén o afinidad
rotatorios en cámaras de cultivo. •aislamiento del producto.
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2.Fermentación: con el material obtenido anteriormente, 4.Tratamiento de efluentes: si bien no tiene una
se siembra el tanque de inoculo que puede tener un volumen relación directa con el producto, que es la razón de ser de la
de 50, 500 ó 1000 1 según la escala industrial posterior. Del industria de fermentación, representa una etapa imprescindible
tanque de inoculo se pasa posteriormente al fermentador porque es fundamental controlar la calidad del efluente que
industrial cuyo volumen, que varía de acuerdo al producto a sale de la fábrica y que es enviado generalmente a un curso de
obtener y a su concentración, está comprendido comúnmente agua, sea un canal, arroyo, un río o al mar.
entre 10,000 y 100,000 l. En algunos casos especiales, como en
la producción de proteína unicelular, los tanques de
fermentación pueden llegar hasta 1,000,000 l. Un proceso
esencial ligado a la producción es la preparación y
esterilización de los medios que se lleva a cabo también en esta
etapa (previamente a la inoculación) ya sea en el tanque de
inóculo o en el reactor industrial.

Esquema del
Proceso Productivo
en general

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Aplicaciones: Generalidades
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La biotecnología se aplica a diversos sectores industriales, siendo una disciplina de carácter horizontal que
combina conocimientos científicos y tecnológicos e implica la utilización de diversas técnicas, para poder solucionar
los diferentes problemas asociados a productos y procesos de los múltiples sectores de actividad: agropecuarios,
alimentos, textil, salud, celulosa y papel, medio ambiente, entre otros

Múltiples
aplicaciones de
BIOTECNOLOGÍA

la biotecnología
en la industria

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Aplicaciones: Agricultura
Las técnicas de ingeniería molecular aplicadas al ▫ Plantas con calidad nutricional mejorada: puede implicar
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mejoramiento de cultivos y las biotecnologías incorporadas al el mejoramiento de la calidad de la planta como alimento (por
manejo agrícola permiten un importante incremento en la ejemplo modificación en la proporción de nutrientes y
productividad y la extensión de las fronteras agrícolas de vitaminas), la reducción de alérgenos, la modificación del
manera ambientalmente sustentable. tiempo de conservación, de las características organolépticas,
Los aportes de la biotecnología al agro incluyen técnicas de etc.
cultivo y propagación; nuevas variedades (organismos Por ejemplo, el arroz dorado es una variedad de arroz a la
genéticamente modificados); bioherbicidas y biofertilizantes, que se le han introducido dos genes provenientes del genoma
métodos de detección de enfermedades y plagas, etc. del narciso y otro gen bacteriano. Estos genes codifican pasos
de la ruta de síntesis de la provitamina A, lo que las variedades
1.Técnicas de cultivo y propagación convencionales de arroz no tienen. Este arroz con provitamina
Se conoce como micropropagación al conjunto de A, permitiría paliar en gran medida los problemas de
técnicas y métodos de cultivo de tejidos utilizados para la avitaminosis.
multiplicación asexual de plantas. La micropropagación se ▫ Plantas con propiedades nuevas: desarrolladas para
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utiliza principalmente para multiplicar plantas nuevas (creadas trabajar como biofábricas produciendo fármacos, vacunas y
por ejemplo por ingeniería genética) o para obtener plantas plásticos. Por ejemplo, la producción de anticuerpos
libres de enfermedades. monoclonales humanos para combatir el virus de la hepatitis B
La multiplicación vegetativa puede realizarse por métodos (VHB) a partir de células transgénicas de la planta del tabaco.
relativamente sencillos como la propagación por gajos o por
técnicas más complejas como el cultivo in vitro o la 3.Biofertilizantes
propagación por apomixis (propagación por semilla sin Bacterias como Rhizobium (presente en los suelos
fecundación de la célula sexual femenina, dando lugar a agrícolas) son utilizadas como biofertilizantes para facilitar la
plantas genéticamente iguales a la planta madre) asimilación de nitrógeno en los cultivos de leguminosas. La
inoculación de las semillas antes de la siembra con bacterias y
2.Nuevas variedades de cultivos otros ingredientes permiten aumentar su población y, en
Tradicionalmente en el agro se han aplicado técnicas de consecuencia, la capacidad de fijación de nitrógeno
mejoramiento de cultivos: cruzamiento selectivo entre atmosférico. De esta manera se reduce la necesidad de aplicar
diferentes variedades vegetales para obtener nuevas variedades fertilizantes nitrogenados evitando la contaminación asociada.
de mayor rendimiento, hibridación. Hoy en día, las técnicas de
ingeniería genética permiten saltar las barreras entre especies y 4.Biocontrol
obtener plantas mejoradas en sus propiedades agronómicas, o Los métodos de control biológico de plagas y
en su calidad nutricional o industrial: enfermedades incluyen la utilización de microorganismos como
▫ Plantas tolerantes a herbicidas, de amplio espectro que Azotobacter, bacterias del género Bacillus y Streptomyces que
asociados a sistemas de siembra directa evitan las tareas de compiten por los nutrientes con los patógenos u otorgan
labranza que erosionan los suelos. resistencia a las plantas, por su capacidad de producir
▫ Plantas resistentes a enfermedades y plagas, como el sustancias con propiedades antimicrobianas. El Bacillus
algodón Bt y el maíz Bt a las que se les ha transferido el gen thuringiensis (BT) produce unos cristales constituidos por
que codifica para una toxina proveniente de Bacillus proteínas que tienen propiedades insecticidas. Estas
thurigiensis que provoca la muerte de las larvas de insectos. endotoxinas forman parte de formulaciones comerciales de
En el caso del maíz Bt la planta produce su propio bioinsecticidas
plaguicida, letal para un acárido llamado barrenillo del maíz.
▫ Plantas tolerantes a estrés abiótico que pueden sobrevivir
mejor en suelos salinos, a bajas temperaturas o en climas con
lluvias escasas.

Arroz blaco (izq.)


y arroz dorado
(dcha.)

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Aplicaciones: Industria Alimenticia
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1.Introducción Los alimentos prebióticos son alimentos funcionales,


La biotecnología relacionada con el sector de alimentos es definidos como ingredientes no digestibles que afectan
la más tradicional, los más conocidos son los procesos de beneficiosamente al organismo mediante la estimulación del
fermentación en productos panificados, bebidas alcohólicas crecimiento y actividad de una o varias cepas de bacterias en el
(vino, cerveza) y lácteos (quesos, yogures). colon, mejorando la salud.
Los probióticos son microorganismos vivos que se
Los cultivos microbianos asociados a estos tienen una larga adicionan a un alimento, permaneciendo activos en el intestino
tradición de utilización y pueden ser mejorados utilizando y ejerciendo importantes efectos fisiológicos. Ingeridos en
métodos de ingeniería genética. Estas modificaciones pueden cantidades suficientes tienen efectos muy beneficiosos, como
introducir cambios deseados en los productos mejorando por contribuir al equilibrio de la flora bacteriana intestinal del
ejemplo parámetros de calidad sensorial, la capacidad para huésped y potenciar el sistema inmunitario. Son capaces de
producir compuestos antimicrobianos, etc. atravesar el tubo digestivo y recuperarse vivos en las heces, pero
Hace ya unos años se lanzó al mercado los alimentos también se adhieren a la mucosa intestinal.
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“bio”, “prebio” y “probio”, que se promocionan como


beneficiosos para la salud humana.

2.Aplicaciones modernas de biotecnología patógenas frecuentes en los alimentos. En la actualidad, algunos


de estos péptidos se están utilizando en la conservación de
Yogurts anti-cáncer productos lácteos, cárnicos y vegetales poco procesados. Se
Se combina genéticamente la bacteria Lactococcus Lactis (la espera que un futuro reemplacen a los aditivos químicos, es por
cual se emplea en la industria láctea en la producción de eso que la biotecnología está desarrollando bacterias
fermentados como quesos o yogures) y la alfa-sarcina, una recombinantes que produzcan  mayores cantidades de estas
proteína tóxica producida por un hongo con una cierta sustancias para cubrir su demanda comercial.
especificidad por las células tumorales para la obtención de
yogures que permiten combatir tumores intestinales. •Mediante la prolongación de la vida útil.  Cuando se
obtienen frutas con vida útil prolongada se incide indirectamente
Conservación de alimentos en la seguridad alimentaria ya que, al tener inhibido el proceso
La biotecnología, además, se aplica a la conservación de de maduración,  son productos con menor contaminación
alimentos, básicamente de dos maneras: microbiana. Actualmente se están desarrollando plantas
transgénicas cuyos frutos tienen maduración retardada.  Los
•Mediante la producción de bacteriocinas. Las bacteriocinas científicos están logrando este objetivo a través de diferentes
son péptidos de origen bacteriano con capacidad antimicrobiana, estrategias: plantas con frutos con mayor resistencia física al
es por ello que tienen un gran potencial como agente ataque bacteriano, plantas con menor producción de etileno
conservante de alimentos. Las más conocidas son la nisina, (hormona responsable de la maduración), plantas con bloqueo
pediocina y la lactococcina. Estas sustancias son producidas por del proceso de senescencia que interviene en la maduración del
bacterias ácido-lácticas y atacan a bacterias relacionadas con la fruto antes y después de la cosecha.
cepa productora, entre las que se encuentran cepas alterantes y

Bacteria Alfa-Sarcina
Lactococcus
Lactis

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Aplicaciones: Aplicaciones Ambientales
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1. Plásticos Biodegradables Este tipo de plástico biodegradable se obtiene a partir del


almidón que es un polímero natural. El almidón puede ser
procesado y convertido en plástico, pero como es soluble en
Una de las aplicaciones de la biotecnología dentro de la
agua se ablanda y deforma cuando entra en contacto con la
preservación del medio ambiente, es la posibilidad de crear
humedad, limitando su uso. Este problema es solucionado
polímeros para la fabricación de plásticos biodegradables. modificando el almidón.
El metabolismo de las plantas brinda la posibilidad de usar Primero, el almidón se extrae del maíz, trigo o papa, luego
cultivos genéticamente modificados para sintetizar nuevos los microorganismos (Bacillus Delbrücki) los transforman en
polímeros con determinadas propiedades. Muchos alimentos se una molécula más pequeña (un monómero), el ácido láctico.
comercializan envasados en plástico. Estos envases protegen al Despúes este ácido láctico es tratado químicamente de manera
producto, son baratos y parecen durar indefinidamente. Sin
de formar cadenas o polímeros, los que se unen entre sí para
embargo, su durabilidad es un problema serio para el medio
formar el plástico llamado PLA.
ambiente. Además, los plásticos tradicionales se fabrican a
partir de derivados del petróleo, que son fuentes no renovables
BIOTECNOLOGÍA

Otra manera de hacer polímeros biodegradables es


de energía.
empleando bacterias que fabrican gránulos de un plástico
Un material es biodegradable cuando puede ser degradado llamado polihidroxialcanoato (PHA). Las bacterias pueden
a sustancias más simples por la acción de organismos vivos, y crecer en cultivo y el plástico ser extraído fácilmente. Los
de esta manera ser eliminado del medio ambiente. En el caso científicos identificaron los genes que llevan la información
de los plásticos derivados del petróleo, no son biodegradables para fabricar el PHA y los transfirieron al maíz, para poder
porque está compuesto por polímeros demasiado largos y fabricarlo a partir de este cultivo.
compactos como para ser atacados y degradados por los
organismos descomponedores.

Procesos de
producción de
polímeros
biodegradables

2. Biorremediación inorgánicos (mercurio, plomo, cobre, cianuros, etc.) y gaseosos


(metanos, compuestos volátiles, etc.) del medio ambiente. A
partir de la modificación genética es posible incrementar su
Otra aplicación muy importante en cuanto al cuidado del
capacidad de degradación de los contaminantes
medio ambiente, es la biorremediación. Esto consiste en la
utilización de microotanismos, enzimas, hongos o plantas
especializados capaces de degradar deshechos peligrosos para
remover los contaminantes orgánicos (efluentes y residuos
sólidos domésticos e industriales, petróleo, pesticidas, etc.),

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Métodos de
biorremediación
de suelos
BIOTECNOLOGÍA

Degradación enzimática: consiste en el empleo de Fitorremediación: es el uso de plantas para limpiar


enzimas en el sitio contaminado con el fin de degradar las ambientes contaminados. Esto constituye una estrategia muy
sustancias nocivas. Dichas enzimas son previamente producidas interesante, debido a la capacidad que tienen algunas especies
en bacterias transformadas genéticamente. Esta aplicación de vegetales de absorber, acumular y tolerar altas concentraciones
la biotecnología lleva décadas en el mercado y hoy las de contaminantes, como metales pesados, compuestos
compañías ofrecen las enzimas y los microorganismos orgánicos y radiactivos, etc.
genéticamente modificados para tal fin.

Remediación microbiana: se refiere al uso de


microorganismos directamente en el foco de la contaminación.
Estos microorganismos pueden ya existir en ese sitio o pueden
provenir de otros ecosistemas, en cuyo caso deben ser
inoculados en el sitio contaminado. Cuando no es necesaria la
inoculación de microorganismos, suelen administrarse más
nutrientes con el fin de acelerar el proceso. Hay bacterias y
hongos que pueden degradar con relativa facilidad petróleo y
sus derivados, benceno, tolueno, acetona, pesticidas, herbicidas,
éteres, alcoholes simples, entre otros. También pueden degrar,
aunque parcialmente, otros compuestos químicos como el PCB,
arsénico, selenio, cromo. Los metales pesados como uranio,
cadmio y mercurio no son biodegradables, pero las bacterias
pueden concentrarlos de tal manera de aislarlos para que sean
aliminados más fácilmente. Estas características también
pueden lograrse por ingeniería genética.

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Aplicaciones: Otras aplicaciones
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1.Energía

Bioetanol: el bioetanol se obtiene a partir de la Biogás: es el gas producido por la digestión microbiana de
fermentación de la biomasa. Se ha empleado la ingeniería la materia orgánica en un biorreactor (o biodigestor) pueden
genética para obtener microorganismos más productivos y ser utilizado como fuente de energía térmica, eléctrica o
tolerantes al etanol, o capaces de fermentar diversas materias combustible para transporte automotor. El proceso
primas. Puede sustituir a la nafta. fermentativo se desarrolla sobre residuos rurales, agro
Biodiesel: este combustible se produce por la industriales, domésticos, municipales y sobre plantas. Una vez
transformación química de aceites vegetales. El biodiesel está finalizado el proceso de biodigestión, el biogas puede usarse
formado por ésteres (etílicos o metílicos) producidos a partir de directamente o almacenarse.
la reacción química entre aceites vegetales y el alcohol. El
biodiesel puede usarse sólo o mezclado con diesel convencional.
BIOTECNOLOGÍA

Proceso de
Obtención del
bioetanol

2.Salud Humana Diagnóstico


Una de las aplicaciones de mayor impacto de la tecnología
Producción de insulina del ADN es el desarrollo de nuevas técnicas para diagnóstico
Entre todas las aplicaciones de la biotecnología, el área de la clínico. Esto ha permitido contar con tecnologías más eficientes
salud humana se han producido los avances más importantes. para el reemplazo de las pruebas serológicas clásicas, y nuevos
Dentro de este sector se destacan el desarrollo de fármacos, métodos para el diagnóstico de enfermedades infecciosas y
reactivos para el diagnóstico de enfermedades y vacunas. genéticas. Entre éstas se encuentran:
Producción de insulina, la insulina es una hormona
producida por el páncreas, cuya función es regular la •Las técnicas de base inmunológica basadas en la reacción
concentración de glucosa en la sangre. antígeno-cuerpo. Los anticuerpos monoclonales tienen la
Con la biotecnología tradicional se obtenia insulina vacuna propiedad de unirse al antígeno de forma muy específica con lo
o porcina a partir del páncreas de dichos animales. cual los métodos de análisis y diagnóstico desarrollados a partir
Con la biotecnología moderna, a partir de la recombinación de ellos son muy precisos (técnica ELISA, citometría de flujo,
de la bacteria Escherichia Coli recombinada se puede obtener inmunofluorescencia, etc.)
insulina para uso humano, a través de un biorreactor.
•Las técnicas de base genética como la reacción en cadena
de la polimerasa (PCR) que permite amplificar pequeñas
fracciones de ADN para su posterior análisis.

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Vacunas: En las nuevas vacunas de ADN desnudo se utiliza una
La tecnología de ADN recombinante han permitido el porción de ADN purificado que codifique para la proteína que
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surgimiento de una nueva generación de vacunas: las vacunas estimula la respuesta inmune. El gen se introduce directamente
recombinantes y las vacunas de ADN. en el individuo y son las propias células del individuo las que
En las vacunas recombinantes, los genes que codifican sintetizan el antígeno.
para las proteínas que provocan la respuesta inmune (el
antígeno) son aislados y clonados y se introducen mediante También se aplican técnicas de ingeniería genética para
técnicas de ingeniería genética en un huésped alternativo no eliminar o inactivar selectivamente, los genes de virulencia de
patógeno (bacterias, levaduras o células de mamíferos) para que un agente infeccioso manteniendo la habilidad de provocar una
lo produzca en cantidad en el laboratorio. respuesta inmune.

Proceso de
Obtención de
Insulina
BIOTECNOLOGÍA

3.Industria Textil y del Papel •La reducción del uso de agentes químicos contaminantes en
la etapa de pre blanqueo. (xilanasas).
El uso de enzimas en la industria textil ha tenido un fuerte •Blanqueamiento de pulpa. (xilanasas; celulasas).
impacto en los procesos productivos, en la producción de hebra; •Reciclado de fibras. (endoglucanasas para mejorar la
el hilado, tejido; acabado y fabricación del producto. velocidad de drenaje de fibras recicladas; celulasas para
En la industria textil las enzimas se pueden aplicar tanto al incrementar la densidad de la hoja de papel y reducir su
tratamiento de fibras proteicas naturales (lana y seda), como en rusticidad; alfa amilasas para mejorar las propiedades del drenaje
fibras celulósicas (algodón, lino y cáñamo) y en fibras sintéticas. y para el destintado de fibras recicladas, etc.).
Algunas de las enzimas utilizadas son las amilasas, para el •La disminución de residuos y contaminantes en el proceso
tratamiento de la fibra, actúan extrayendo el almidón que la de reciclado. (esterasas para el control de stickies, amilasas y
recubre (proceso llamado desengomado), las pectinasas para proteasas para la remoción del lodo; lipasas para controlar la
extraer pectinas de la pared de las células primarias del algodón, acumulación de lodo).
las lipasas para el desgrasado de las fibras, las catalasas para •Modificación de fibras. (celulasas para incrementar la
descomponer en oxígeno y agua el peróxido de hidrógeno flexibilidad de las fibras, celulasas, xilanasas y lacasas para
residual después del blanqueo de las fibras de algodón, las incrementar la densidad de las hojas, etc.).
peroxidasa para eliminar los restos de peróxido de hidrógeno •Tratamiento de efluentes de la industria (enzimas y
utilizados en la etapa de blanqueo, las celulasas para hacer a los biodispersantes).(bacterias, levaduras o células de mamíferos)
tejidos más lisos y blandos, las lacasas para la oxidación de para que lo produzca en cantidad en el laboratorio.
colorantes fenólicos utilizados en la preparación de telas para En las nuevas vacunas de ADN desnudo se utiliza una
jeans. porción de ADN purificado que codifique para la proteína que
La utilización de tecnologías enzimáticas en la industria de estimula la respuesta inmune. El gen se introduce directamente
pulpa y papel tiene amplias perspectivas a futuro; en la medida en el individuo y son las propias células del individuo las que
que se avance en las investigaciones, su incorporación puede sintetizan el antígeno.
traer aparejado importantes beneficios en cuanto a mejoras en
productos y procesos; reducción de costos y disminución del También se aplican técnicas de ingeniería genética para
impacto ambiental (menores requerimientos de energía y eliminar o inactivar selectivamente, los genes de virulencia de un
químicos) agente infeccioso manteniendo la habilidad de provocar una
Las aplicaciones más frecuentes se dirigen a: respuesta inmune.

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4.Producción ganadera y Salud Animal
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Producción animal Salud animal


La ingeniería genética permite modificar genéticamente Técnicas biológicas aplicadas a ensayos de diagnósticos y
animales transfiriéndose genes de una especie a otra diferente, vacunas para patologías animales; suplementación con enzimas
integrarse a su genoma, ser funcional y transmitirse a la (amilasas, beta-glucanasas, xylanasas) para mejorar la
descendencia. La transgénesis animal puede tener objetivos digestibilidad de las mezclas nutricionales para animales, empleo
diversos como el estudio de enfermedades humanas; como fuente de fitasas exógenas para mejorar la biodisponibilidad de fósforo
de tejidos y órganos para trasplantes en humanos, el en las dietas.
mejoramiento del ganado (aumento de la tasa de crecimiento
corporal, modificación de la relación carne/grasa, resistencia a
enfermedades, etc.) o la producción de moléculas de interés para
diferentes industrias, como la farmacéutica, la alimenticia, la
química, etc.
BIOTECNOLOGÍA

Proteínas recombinantes de interés farmacológico se


obtienen a partir de la leche de animales transgénicos de granja
(ovejas, vacas, cerdos, cabras, etc.). De esta manera, las proteínas
se pueden producir en grandes cantidades, su purificación es
relativamente sencilla, su producción no interfiere con la biología
del animal y tanto su impacto ambiental como su costo es muy
bajo.

Una vez obtenido el animal transgénico, éste puede ser


clonado para obtener una descendencia importante
genéticamente idéntica que producirá también la nueva molécula
de interés.
Entre los animales transgénicos utilizados para la
producción de proteínas de interés farmacológico se encuentran
ovejas transgénicas que producen la proteína alfa1proteinasa así
como los factores de coagulación VII y IX y vacas que producen
la hormona de crecimiento humano.
Algunos ejemplos de la producción de animales son, vacas
que producen más leche, ovejas que producen más lana, peces
con mayor tasa de crecimiento, etc.

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Proceso Productivo: Fermentación (Biorreactores)
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1.Introducción •Minimizar los gradientes de concentración de nutrientes.


Los biorreactores o fermentadores son contenedores que •Suministrar oxígeno a una velocidad tal que satisfaga el
son usados para sintetizar productos por medio de reacciones consumo.
químicas, en la mayoría de los casos el metabolismo de las •El diseño debe ser tal que permita mantener el cultivo
células es explotado para convertir los substratos en productos puro; una vez que todo  el sistema ha sido esterilizado y
deseados. Los microorganismos sólo crecen y se reproducen posteriormente sembrado con el microorganismo
bajo condiciones óptimas, los biorreactores proveen a los deseado.
microorganismos con las cantidades correctas de substratos
para evitar cambios metabólicos no deseados. Un Biorreactor Los hay de muy diversos tamaños, desde los pequeños a
debe cumplir con las siguientes tareas: escala de laboratorio hasta los más grandes destinados a la
•Mantener las células uniformemente distribuidas en todo producción industrial de 1000m3. Debe notarse que, debido a
el volumen de cultivo a fin de prevenir la sedimentación o la delicadeza inherente a los procesos biológicos, mientras
la flotación. mayor sea el reactor que estemos utilizando, mayor será la
BIOTECNOLOGÍA

•Mantener constante y homogénea la temperatura. dificultad para controlar todas las variables necesarias y
obtener las condiciones deseadas.

Biorreactores a
escala de
laboratorio (izq.)
e industrial
(dcha.)

2.Clasificación Son aquellos en que la biomasa forma una película sobre


Hay varios criterios para la clasificación de los biorreactores. algún tipo de empaquetamiento y se encuentra, por lo tanto, fija.
En este tipo de Biorreactores se hacen más fáciles los procesos de
1.Distribución de la Biomasa transferencia. Se suelen utilizar para aquellas instalaciones en
1.1.Biorreactores de crecimiento suspendido. que la producción debe hacerse bajo condiciones más
Son aquellos en que la biomasa se encuentra suspendida en controladas con una calidad constante, como en la industria
el seno del biorreactor. Por esta razón los procesos de farmacéutica. Consisten en un empaquetamiento de elevada
transferencia se vuelven mas dificultosos y es necesario superficie específica sobre la cual se establece una película donde
generalmente la utilización de sistemas de agitación para lograr la biomasa crece. Los hay de tres tipos básicos.
condiciones mas homogéneas. Existen dos tipos de agitación: 1.2.1.Reactor de empaquetamiento.
1.1.1.Agitación mecánica. Este tipo de reactores suele tener la desventaja del
Son los más utilizados por su versatilidad, aunque poseen un taponamiento y la dificultad en la esterilidad. Sin embargo es útil
consumo relativamente elevado de potencia. Se utilizan en la producción continua y de altas velocidades de reacción.
serpentines o camisas para realizar el intercambio de calor. 1.2.2.Reactor de cilindro rotatorio. (ver imagen)
1.1.2.Agitación neumática. 1.2.3.Reactor de lecho fluidizado.
Se utiliza gas a presión pasando a través del biorreactor para Puede utilizarse pelets de carbón activado o plástico como
producir la agitación y en caso de ser aire, al mismo tiempo material portador. Suele usarse un sistema recirculador, mediante
proveer de oxígeno al sistema en caso de tratarse de un reactor el cual partículas todavía activas del lecho se retornan al reactor
aeróbico. Los existen de diversos tipos, aquí se ilustra solamente aumentando así el tiempo de retención de lodos (una de las
uno de ellos, el más común, llamado Air-lift. variables operativas mas importantes). Tiene un gran uso en los
1.2.Biorreactores de biofilm. procesos anaeróbicos.

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3.1.Reactores aeróbicos.
2.Modo de operación Los procesos aeróbicos son los más comúnmente utilizados
Industrias y Servicios I

2.1.Reactores discontinuos (modo Batch). debido a que pueden ser hasta 10 veces más rápidos que los
La característica particular de estos reactores es que una procesos anaerobios reduciendo considerablemente los costos
vez finalizada la operación son vaciados completamente para de construcción y mantenimiento ya que pueden permanecer
separar el producto de la biomasa o enzima utilizada. abiertos a la atmósfera.
•Reactores de tanque agitado tipo batch Su principal desventaja es que gran parte del substrato (es
decir, los nutrientes agregados al reactor) se utilizará para el
2.1.Reactores continuos. En este tipo de crecimiento de biomasa a una tasa 4 veces más rápida que en
reactores, la biomasa permanece en el interior los organismos anaerobios.
mientras que se extrae el producto. 3.2.Reactores anaeróbicos.
•Reactores de tanque agitado y flujo continuo. Cuando existen ciertas necesidades especiales, como por
•Reactores de lecho empaquetado. ejemplo para el tratamiento de residuos peligrosos o la
•Reactores de lecho fluidificado. producción de biogás, los anaeróbicos presentan ventajas sobre
•Reactores de fibra hueca. los aeróbicos. Son sin embargo más complicados en su
BIOTECNOLOGÍA

operación para mantener las condiciones anaeróbicas.


3.Aeróbicos o anaeróbicos
Los distintos microorganismos necesarios para obtener el
resultado deseado pueden ser aeróbicos, es decir que necesitan
la presencia de oxígeno para sus actividad metabólicas, o
anaeróbicos.

Biorreactor con Biorreactor


agitación Air-Lift
mecánica

Biorreactor de Biorreactor de
empaquetamiento cilindro
rotatorio

Biorreactor de
lecho fluidizado

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Proceso Productivo: Separación y Purificación
Industrias y Servicios I

Una de las partes más difíciles de la producción es la Como podemos observar, la economía de los procesos
separación del producto y su purificación. Este proceso biotecnológicos depende en gran medida de las operaciones de
depende absolutamente del producto final que se quiera bioseparación que involucran, de tal manera que la correcta
obtener y por lo tanto es muy específico de cada proceso. En la selección de estas operaciones tiene un fuerte impacto en el
imagen presente abajo se listan algunas actividades utilizadas éxito del proceso.
para la separación y purificación del producto.

Actividades de
separación y
purificación
BIOTECNOLOGÍA

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Caso de estudio: Biorremediación de suelos
Industrias y Servicios I

1.Introducción microorganismos para la degradación de compuestos peligrosos; esto


sin embargo puede solo lelvarse a cabo en el caso de compuestos
Un área muy importante en el uso de la biotecnología es la de orgánicos como BTEX (siglas de Benceno, Tolueno, Eteno Xyleno),
tratamiento de efluentes y remediación de sitios contaminados. PAH (siglas de Hidrocarburos poli-halogenados) y demás.

Como sitio contaminado se define aquél que como resultado de La primer instancia es la de laboratorio; se toma una muestra del
la actividad humana ha sido alterado de alguna manera y representa suelo y agua del sitio y se la coloca en un reactor pequeño. Primero
por ello un peligro. Los contaminantes mas comunes se detallan en el debe probarse que la degradación es posible. Una vez superada esta
gráfico a continuación. etapa se evaluarán las condiciones del caso específico para determinar
las condiciones óptimas a lograr para la degradación más rápida.
La remediación de estos sitios contaminados puede llevarse a
cabo de diferentes formas, pero nos centraremos sobre la Una vez que se ha determinado las condiciones óptimas debe
biorremediación. La biorremediación consiste en la utilización de seleccionarse el tipo de biorremediación a utilizar. Los modos
operativos se describen a continuación.
BIOTECNOLOGÍA

Principales
contaminantes del
suelo

Fuente: LfU Baden-


Württemberg

Tratamiento de
BTEX usando Fe(III)
como aceptor de
electrones. A la
derecha se
encuentra la
muestra original y
en el extremo
izquierdo luego de 5
semanas de
actividad.

2.Biorremediación ex situ El método más utilizado es el de biopila, esquematizado a


continuación
Como su nombre lo indica, esta técnica requiere la excavación
Pueden usarse bien microorganismos contenidos en el suelo
total del suelo contaminado para su tratamiento. Naturalmente esto
como cepas especiales creadas u obtenidas para el fin específico.
aumenta considerablemente el costo de la operación, pero también se
aumenta la velocidad de la remediación así como también su
efectividad.

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Industrias y Servicios I

Proceso de biopila
BIOTECNOLOGÍA

3.Biorremedación in situ Bio slurping. Se instala una tubería de succión hasta la zona
saturada. Se combina con la succión de aceite, de modo que la zona
Este método no requiere la remoción del suelo contaminado sino saturada es parcialmente tratada.
que se trata en su propia ubicación. Los tipos disponibles son:
Bio Sparging. Inyección de aire dentro del acuífero, debajo del
Bio aumentación. Se agregan microorganismos específicos que punto de contaminación. Además de la degradación de los
degraden las sustancias contaminantes, previamente asegurándose que compuestos, se facilita la eliminación de ellos por favorecer la
estos organismos no puedan representar un peligro biológico. volatilidad. Suelen instalarse tuberías de succión adicionalmente.

Bio ventilación. Se instalan cañerías de succión de aire que


llegan hasta la zona insaturada.

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Bioventilación
Industrias y Servicios I
BIOTECNOLOGÍA

Bio-slurping

Bio-sparging

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Caso de estudio: Producción de semillas transgénicas
Industrias y Servicios I

1.Introducción 200.000 hectáreas, en 1996 se pasó a 1,7 millones de hectáreas, en


1997 a 11 millones, en 1998 se cultivaron 27,8 millones, en 1999 se
En 1983 se creó la primera planta transgénica, y en 20 años los plantaron 39,9 millones, 43 millones en 2000, 52,6 millones en 2001,
cultivos transgénicos, impulsados por unas pocas multinacionales, 58,7 millones en 2002 y en el año 2003 se alcanzaron los 67,7
pasaron de la nada a más de 67,7 millones de hectáreas en el año millones de hectáreas, con un crecimiento mundial del 15%).
2003, sin que aún se conozcan sus consecuencias sobre la salud y el Argentina ocupa el segundo puesto, luego de los EE.UU. en la
medio ambiente, y en contradicción con el más elemental principio de produccion de agrícola transgénica.
precaución. Según el Servicio Internacional para la Adquisición de
Las plantas transgénicas son mayoritariamente resistentes a los
Aplicaciones Agrobiotecnológicas (ISAAA), el área mundial de
herbicidas, y se venden formando parte de un “paquete de
cultivos transgénicos se multiplicó por 40 desde 1996.
tecnología” que incluye la semilla transgénica y el herbicida al que es
La progresión ha sido espectacular, desde el primer cultivo resistente. Los dos productos más difundidos actualmente son el
transgénico de tabaco en 1992 en China, y las primeras plantaciones “Roundup Ready” de Monsanto que tolera su herbicida
comerciales en Estados Unidos en 1994. En 1995 se cultivaron apenas “Roundup” (glifosato), y el “Liberty Link” de AgrEvo que tolera su
herbicida “Liberty” (glufosinato).
BIOTECNOLOGÍA

2.Proceso Productivo genética. Para ello, primero debe identificarse el gen de interés en
algún organismo que presente la carcterística deseada. Se aisla
mediante el uso de enzimas de restricción y se integran al tejido
a. Producción de la primera planta (en laboratorio) celular de la planta. Para ésto, una de las técnicas más utilizadas es la
de disparar a las células con microproyectiles metálicos recubiertos del
La producción de una planta transgénica en laboratorio consta
ADN que penetran en la célula e integran el nuevo ADN en su
de dos etapas fundamentales denominadas transformación y
genoma. Una vez que una célula vegetal ha sido transformada, es
regeneración.
necesario regenerar la planta entera a partir de ella.
Se denomina transformación al proceso de inserción del gen que
Este proceso se realiza en el laboratorio, cultivando los
se pretende introducir (también llamado transgén) en el genoma de
fragmentos de tejido vegetal que han sido inoculados con
una célula de la planta a transformar.
Agrobacterium o disparados con microproyectiles en medios de
La regeneración consiste en la obtención de una planta completa cultivo que favorecen la regeneración de nuevas plantas.
a partir de esa célula vegetal transformada. Para introducir el nuevo
Es importante que en este paso sólo se regeneren las células del
gen en el genoma de la célula vegetal se utilizan fundamentalmente
tejido que han sido transformadas. Esto se consigue introduciendo
dos métodos.
junto con el transgén un gen adicional (gen marcador) que confiera
El más común utiliza una bacteria del suelo, Agrobacterium, que una característica selectiva. Por ejemplo, se han utilizado genes de
en condiciones naturales es capaz de transferir genes a las células resistencia a antibióticos para que sólo las células modificadas sean
vegetales. capaces de sobrevivir en presencia del antibiótico. Estos genes
responsables de caracteres selectivos estarán presentes posteriormente
El método alternativo consiste en la introducción directa de los en todas las células de la planta transgénica regenerada o pueden ser
genes en el núcleo de la célula vegetal, un proceso de construcción eliminados por diversos procedimientos.

Proceso de
producción de
construcción
genética en
laboratorio

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Industrias y Servicios I

b. Proceso productivo de semillas (en planta de acción de una corriente de aire que separa los componentes “ligeros”
producción) de los “pesados”. Posteriormente el cribado, en el que las semilla
sucia se hace pasar a través de cribas dotadas de orificios y aberturas
Una vez obtenida la planta transgénica se realizan plantaciones, de distintas formas y tamaños para separar los componentes
se cosecha, y se procesan las semillas según el siguiente “grandes” de los “pequeños”. Por último la separación por longitud
procedimiento: en la que se separan los componentes “cortos” de los “largos”.

Recepción: pesaje, toma de muestra, sustracción de los diversos Tratamiento: El tratamiento de semillas es la aplicación de
lotes de semilla. El prealmacenamiento pueden hacerse a granel, en técnicas y agentes biológicos, físicos y químicos, que proveen a la
contenedores o en sacos semilla y a la planta protección frente al ataque de insectos y
enfermedades transmisibles por semilla así como frente a aquellas
Secado: El exceso de humedad luego de realizada la cosecha es una que atacan en etapas tempranas del cultivo y que provocan
de las causas principales de pérdidas importantes en la producción de consecuencias devastadoras en la producción de los cultivos cuando
los semilleros. De ahí que el objetivo inmediato a la cosecha, será no son controladas. En el caso de semillas transgénicas estos
lograr el contenido adecuado de humedad de las semillas. El secado tratamientos son en general menores o inexistentes.
debe iniciarse en el campo, inmediatamente después de la colecta y/
BIOTECNOLOGÍA

o de la extracción de las semillas. Las semillas se pueden secar con Envasado: Cuando todos los posibles materiales inertes y semillas
ayuda de equipos que permiten la circulación de aire a diferentes de hierbas u otros cultivos han sido removidos, las semillas están listas
temperaturas o con gel de sílice, un método fácil y efectivo. Existen para envasarse. Algunas veces se aplica un tratamiento de fungicida o
secadores electrónicos que permiten programar los ciclos de secado, insecticida antes de ser envasadas. Las semillas pueden enseguida
la temperatura, el flujo y la velocidad del aire de secado. El tiempo envasarse directamente a otras compañías de semillas o ser
total que consume el secado depende del porcentaje de humedad conservadas en el almacén hasta que se necesiten. Las semillas de
inicial de la semilla, de la velocidad de secado y del porcentaje de plantas de cultivo que se producen, limpian y venden en grandes
humedad final deseado. volúmenes, se envasan al final de la cadena de limpieza. La semilla,
generalmente tratada, se acumula en un silo-tolva colocado sobre
Limpieza: Se eliminan contaminantes como paja, granza y semillas una balanza automática de la que cuelga un saco de papel; una vez
de malezas. Las técnicas de limpieza se basan en las diferencias entre vaciada en el saco, automáticamente, la cantidad correspondiente al
distintos caracteres físicos de las semillas tales como tamaño, peso elegido, el saco se suelta y cae en una cinta transportadora que
longitud, forma, peso, textura superficial, color, afinidad por los lo conduce hasta la cosedora manual.
líquidos y conductividad. las principales operaciones de limpieza son:
En primer lugar el aventado, en el que la semilla sucia se somete a la

Esquema
del
proceso Recepción Secado Limpieza Tratamiento Envasado
productivo

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Caso de Estudio: Producción de inoculantes
1.Introducción 2.Proceso Productivo
Industrias y Servicios I

La técnica de inoculación consiste en el uso de Por un lado se realiza en laboratorio el cultivo del
microorganismos benéficos para reducir la necesidad de microorganismo y se realiza la multiplicación del mismo en un
aplicación de fertilizantes químicos en la producción agrícola. bioreactor obteniendo un caldo del microorganismo.
Por otro lado se realiza la extracción y procesamiento de la
Un inoculante es un concentrado de bacterias específicas, turba, que será el sostén de los microorganismos y provee una
que aplicado convenientemente a la semilla poco antes de su alta tasa de aereación y permeabilidad. Los yacimientos de
sembrado, mejora el desarrollo del cultivo. Su empleo es una donde se extrae la turba usada en el país se encuentran
práctica agronómica reconocida en el mundo por sus beneficios pricipalmente en Tierra del Fuego. La turba, en bruto (turba
productivos y económicos (principalmente en gramíneas y virgen), es procesada (secado, molienda y envasado).
leguminosas), a tal punto que desde hace algunas décadas se Posteriormente, las bolsitas con turba no estéril son
lleva a cabo en países de los cinco continentes (México, esterilizadas por radiación con una dosis mínima de 5 Mrad.
Holanda, Brasil, Japón, Bulgaria, Colombia, Australia, A continuación se inyecta el caldo con el microorganismo.
BIOTECNOLOGÍA

Canadá, Estados Unidos, República Checa, Argentina, etc.). Es El material esterilizado es inyectado con caldo puro de en
otro de los principales productos biotecnológicos producidos en forma aséptica, identificado y almacenado en cámaras
el país. especiales para la verificación de su calidad por muestreo
estadísticamente representativo de cada lote por estirpe.
Inoculante para soja Sólo cuando el laboratorio de control de calidad verifica la
Para cada leguminosa existe una bacteria determinada aptitud de un lotes) se procede a colocar las dos bolsitas con las
para que nodule, con la que establece naturalmente una estirpes separadas dentro del sobre de inoculante con su
estricta dependencia fisiológica como respuesta funcional para identificación correspondiente.
sobrevivir: una simbiosis. La bacteria específica para la Finalmente se utilizan máquinas inoculantes para realizar
inoculación en soja es el Bradyrhizobium japonicum. la inoculación de la semilla. En éstas se introducen las semillas,
Gracias al proceso de la simbiosis se genera una buena adhesivos, aditivos y finalmente el inoculante. Es sencillamente
nodulación en la raíz de una leguminosa, lográndose un buen un recipiente en donde se controla la temperatura y el tiempo
follaje para ser usado como alimento para animales o un necesario para la transferencia de nutrientes hacia las semillas.
óptimo rendimiento de grano.
Esquema
Ventajas de su uso del
Obtención de Procesamiento
Las principales ventajas de la inoculación en cultivos de proceso
productivo microorganismo de Turba
soja, extensivas a todas las otras leguminosas, son:
• Asegura una temprana formación de nódulos que
garantizan un adecuado abastecimiento de nitrógeno para el
cultivo durante todo su ciclo de crecimiento.
• Aporta a la leguminosa más del 70 % del nitrógeno
necesario; el resto lo proporcionan el suelo y el fertilizante Cultivo y obtención
complementario. del caldo Esterilización
• Aumenta los rendimientos.
• Al mejorar el tenor de proteínas en pastos y granos, mejora
la calidad de la cosecha.
• A través de la Fijación Biológica del Nitrógeno, enriquece el
suelo en nitrógeno que queda en raíces y restos de cosecha,
que se incorpora en el laboreo para su descomposición. Inyección del caldo en turba
• Asegura un excelente abono orgánico que aumenta la
fertilidad del suelo y los rendimientos de los cultivos siguientes.
• Contribuye a preservar el medio ambiente, no
contaminando aguas ni aire.
• Es económico, pues permite ahorrar inversiones en
equipamiento y mano de obra. Una correcta inoculación Inoculación de semillas
proporciona un elevado retorno por peso invertido.

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Caso de estudio: Producción de levaduras vínicas transgénicas
Industrias y Servicios I

1.Introducción La glucosa, durante la fermentación, es degradada en una serie


de compuestos que incluyen el Etanol, el Glicerol y el ácido acético.
Se trata de un proyecto de aplicación biotecnológico a cargo del Éstas transformaciónes se realizan mediante una serie de reacciones
Dr. Iván Ciklic, del INTA. Se busca la obtención en laboratorio de de Reducción-Oxidación en delicado equilibrio. Dado que el Glicerol
una cepa de levadura Saccharomyces cerevisiae que produzca en la otorga elementos beneficos al vino ( como un mejor sabor, textura más
fermentación del mosto un nivel de alcohol inferior al que producen acabada y mayoir cuerpo) se buscó desviar la transformación de
las levaduras actuales, con el fin de facilitar la comercialización de glucosa en Etanol hacia una mayor proporción de glicerol.
vinos en el exterior.

2.Fundamentos y conclusiones Posteriormente se buscó la mutagénesis (transformación) del


Gen. Algunos efectos indeseables comenzaron a aparecer como la
BIOTECNOLOGÍA

producción excesiva de ácido acético o de anhídrido carbónico.


Se logró identificar el gen PDC2 cómo el responsable de la Hasta el momento no se ha encontrado la mutación justa que
transformación de la fracción de glucosa en etanol. produzca los efectos deseados pero se continúa la investigación y
los pronósticos son alentadores
En base a ésto, se realizaron una serie de experimentos. En
primer lugar se logró la eliminación del Gen PDC2. El resultado
fue la producción nula de alcohol, lo cuál no es deseado
evidentemente.

Metabolismo anaerobico de glucosa en


S. cerevisiae y disponibilidad de NADH/NAD+

Aquí podemos
apreciar el complejo
equilibrio entre los
dintintos productos
de la fermentación
Adaptado de D. Kutina et al., 2010

vínica

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Contextualización: Biotecnología en América Latina
1.Estructura de la bioindustria Sin embargo, la Biotecnológica aún no ha llegado a
Industrias y Servicios I

despegar en forma sostenida en esta zona del mundo,


debido en parte a la falta de políticas nacionales coherentes
En comparación con otras regiones del mundo, el
que incentiven la innovación, la transferencia de tecnología
desarrollo de la biotecnología moderna en el sector
y a la comercialización.
empresarial en América Latina, empezó relativamente
tarde, a finales de los años 80. Hacia 1996 existían cerca de 500 empresas
biotecnológicas en América Latina. Sin embargo, sólo una
Pero, desde finales de los años 90, muchas empresas decena de firmas estaba involucrada en actividades de
innovadoras en el área de biotecnología se han biotecnología moderna, es decir aquellas que utilizan
multiplicado y algunas han logrado desarrollar
técnicas de biología molecular e ingeniería genética en sus
productos importantes y comercializarlos a nivel mundial.
principales procesos industriales.
BIOTECNOLOGÍA

Nº de empresas
biotecnológicas por
país

Las actividades biotecnológicas más voluminosas de la muestran un más alto progreso en la aplicación de la
región son la comercialización de semillas transgénicas y la biotecnología moderna en el sector empresarial.
micropropagación de plantines, las aplicaciones en el sector
de la salud y animal (principalmente en Argentina, Brasil y Y por otra parte mencionar que solamente en Brasil y
Cuba), así como también, las aplicaciones alimentarias e Cuba se puede hablar de la presencia de una industria
industriales y en el sector ambiental en el tratamiento debiotecnológica dinámica, debido a la existencia de clústers
efluentes. que agrupan centros de investigación y producción
especializados con altos niveles de cooperación entre sí: en
Es importante destacar que los países con capacidades Brasil, el clúster de Minas Gerais, y en Cuba, el Polo
universitarias de I+D mayores (Argentina, Brasil, México) Biotecnológico del Oeste de La Habana.

2.Políticas e incentivos biotecnología en América Latina provienen de fuentes


públicas.
Casi todos los países de América Latina cuentan con
Por otra parte, la infraestructura de investigación y
algún programa nacional de promoción, orientación,
desarrollo biotecnológico en América Latina es
priorización y financiación de la actividad biotecnológica o esencialmente de carácter público, pero varía mucho de
científico-tecnológica con especial énfasis a todas las país a país.
actividades que se refieren a biotecnología.
En todo caso, en biotecnología agrícola, en el campo
En casi todos los países existen, además, incentivos de salud humana, salud animal, alimentos y medio
tributarios para donaciones o inversiones en ciencia y
ambiental, la mayoría de los países latinoamericanos
tecnología. Y es de destacar que las mayores inversiones en
cuenta, al menos, con una institución sólida.

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Contextualización: Biotecnología en Argentina
1.Economía y bioindustria desarrollo de la industria biotecnológica en el país durante
Industrias y Servicios I

los próximos años. Se establecieron una serie de objetivos


de cumplimiento a largo plazo, y que dieron lugar a un
La situación económica argentina denota una notable
conjunto de acciones, actividades y medidas para poder
mejoría desde que se impusiera el “corralito” a finales de
llevarlos a la práctica. El Plan Estratégico Nacional de
2001. Así, en los últimos años, la economía del país ha Biotecnología Industrial (PENBio) es el instrumento
alcanzado incrementos del PIB cercanos al 8-9%. mediante el cual el Estado argentino actúa como elemento
El Gobierno argentino diseñó un Plan de Acción aglutinante de los diversos sectores y agentes que
2005-2007 que pretendió ser una guía que impulsara el conforman la industria biotecnológica.

2.Aplicaciones Biotecnológicas 1.Sector agrícola


El mercado de semillas argentino tiene un volumen
El país centra gran parte de sus exportaciones en el anual de unos U$S 670 millones, e involucra a más de 22
sector agropecuario. Las distintas aplicaciones de la empresas que desarrollan actividades de mejoramiento
BIOTECNOLOGÍA

biotecnología en ese campo podrían suponer un genético, micro-propagación vegetal, protección frente a
importante revulsivo a la economía del país. Y así está herbicidas e insecticidas y desarrollo de inoculantes.
ocurriendo. Argentina entró en la era de los OGM inicialmente con
Argentina es en la actualidad el segundo productor la comercialización de semilla de soja transgénica Round
del mundo de cultivos transgénicos, sólo superado por los Up Ready que representa resistencia al glifosato.
EE.UU. El 98% de la soja cultivada, el 50% del maíz y el Actualmente se comercializan otras variedades
9% del algodón proceden de cultivos OGM. La desarrolladas además de la soja resistente a lepidópteros
apuesta clara por la biotecnología verde se ha basado en (Bt), algodón resistente a lepidópteros (Bt) y maíz resistente
diferentes factores: una legislación tolerante, una aceptación a glufosinato de amonio (LL). En Entre Rios se está
por parte de la opinión pública y la existencia de innovando con la plantación de una variedad de arroz
multinacionales dispuestas a realizar importantes creada por mutagénesis de lata calidad y resistencia a
inversiones. herbicidas.
La suma de todos estos factores ha permitido que, en
los momentos difíciles por los que atravesaba el país, la Es importante resaltar que el 70% de la producción de
biotecnología haya acudido en auxilio de su maltrecha soja se industrializa a través del complejo sojero constituido
economía. por 54 plantas aceiteras con una capacidad de molienda
En el sector ganadero destaca la producción de vacunas instalada de 93 mil tons/día. El complejo sojero argentino
recombinantes y la utilización de animales como es responsable de un total de exportaciones por U$S 4.979
biofactorías (primeros ejemplares en el mundo de ganado millones durante la campaña 2001/02, con una
bovino modificados genéticamente para la producción de participación del 26% del mercado mundial, de cuyo
hormona de crecimiento humana por la empresa Biosidus). volumen el 63% corresponde a harinas (pellets), 23% grano
Por otro lado, la industria farmacéutica y de diagnóstico y 14% aceite. Los principales compradores son la UE
argentina es una de las más desarrolladas de Latinoamérica (harinas), China (grano) e India (aceite). Cinco empresas
y con una gran vocación exportadora. (Cargill, Bunge, Dreyfus, AGD y Vincentín) son
responsables del procesamiento del 70% de la cosecha.

Comparación
\ del
área cultivada con
AGM en los últimos
años

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Industrias y Servicios I

Superficie
\
sembrada con
transgénicos
BIOTECNOLOGÍA

2.Alimentación la aplicación de la tecnología de ADN recombinante. Los


Se producen enzimas de uso industrial, algunas de ellas principales productos se venden en Asia, Oriente y
mediante el uso de técnicas de la biotecnología. Estas Latinoamérica. En el 2000 se exportaron cerca de U$S 30
enzimas son utilizadas en procesos de fermentación, millones en productos para el área de salud obtenidos por la
principalmente en la producción de jarabe de maíz de alta técnica de ADN recombinante.
fructosa y jarabe de glucosa. También se observan en En la actualidad en Mendoza se está desarrollando un
industrias productoras de productos lácteos, alimentos y microemprendimiento para la fabricación de neurotoxinas
bebidas. Si bien se muestra interés en las técnicas de la botulínicas para el uso medicinal, mediante técnicas de
biotecnología, solo un bajo porcentaje de industrias las biotecnología.
utilizan.
La principal aplicación de la biotecnología en 4.Salud animal
Mendoza es la fermentación de vinos. Se utilizan levaduras La industria farmacéutica veterinaria ha ido
naturales para vinos de alta gama, y comerciales para el evolucionando desde los cultivos en líneas celulares al
resto. Estas últimas en la actualidad son importadas, desarrollo de antígenos vacunales producidos mediante
principalmente de Francia y Australia. Se desarrollaron en tecnología de ADN recombinante. El sector productor de
laboratorio cepas locales, que son específicas para los vinos vacunas veterinarias representa un mercado de $158
de la región. Estas no son producidas a nivel industrial en la millones anuales. Se destaca la producción de vacunas
provincia, si no que se vendió la patente a empresas contra la diarrea neonatal del bovino y contra la aftosa.
internacionales para su desarrollo. También hay un
proyecto de desarrollo de levaduras que reduzcan el 5.Medio ambiente
contenido alcohólico del vino, que permitirían la entrada a En la Argentina la aplicación de técnicas
nuevos mercados. biotecnológicas destinadas al medioambiente se encuentran
poco desarrolladas. Se puede mencionar el desarrollo de
3.Salud humana plantas y bacterias para la biorremediación (limpieza) de
La aplicación industrial de la biología ha tenido su suelos contaminados con metales pesados (cadmio) y
mayor impacto local en el sector de la industria petróleo, respectivamente. En Mendoza se investiga la
farmacéutica, la que representa aún el 50% del total de lo utilización de microalgas destinadas a la captura de CO2 y
comercializado en el marcado en relación a la producción de biocombustibles.
biotecnología. La mayoría de los productos son resultado de

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3.Fondos de financiación
Industrias y Servicios I

Financiación pública FONTAR: Financia proyectos de empresas,


instituciones públicas o privadas destinados a promover la
FONCyT: innovación o modernización tecnológica. A su vez, apoya
Apoya proyectos y actividades cuya finalidad son la proyectos con diferente nivel de riesgo mediante el uso de
generación de nuevos conocimientos científicos y modalidades de financiación en función de dicho riesgo.
tecnológicos –tanto en investigación básica como
aplicada– desarrollados por investigadores pertenecientes a Financiación privada
instituciones públicas y privadas sin fines de lucro radicadas La inversión privada es más bien escasa. Esta
en el país. La financiación de proyectos se concreta a través constituida principalmente por “fondos ángeles” destinados
de fondos no reintegrables (subsidios) cuya adjudicación se a inversiones de riesgo y convenios con bancos
realiza por convocatorias públicas, en las que las internacionales, como es el caso del convenio BID-
propuestas presentadas se evalúan siguiendo criterios de Credicop.
transparencia, calidad y pertinencia de los proyectos a
BIOTECNOLOGÍA

financiar.

Fondos
\ de
financiación

4.Polos Biotecnológicos, Parques dinámica de creación de polos, parques e incubadoras de


empresas, ha favorecido el desarrollo de un reducido
Industriales e Incubadoras de empresas
número de nuevas firmas en el campo de la biotecnología.
Se destaca el caso de empresas instaladas en los
Las incubadoras de empresas son consideradas una
Parques de Innovación Tecnológica INTA y las creadas
pieza clave del desarrollo económico, ya que apuntan a por los alumnos de la carrera de Licenciatura en
producir negocios exitosos que resulten viables y Biotecnología de la Universidad Nacional de Quilmes.
autónomos desde el punto de vista financiero, tras un El último estudio realizado en 2005, señaló la
tiempo acotado de incubación o desarrollo. existencia de 58 incubadoras de empresas, centros de
Tienen por objeto proveer las condiciones adecuadas innovación, parques y polos tecnológicos concentrados en la
para que los emprendedores que se radiquen en ese espacio
ciudad de Buenos Aires y en las provincias de Buenos Aires,
físico puedan llevar a cabo de manera exitosa la creación de
Santa Fe, Córdoba, Entre Ríos y Mendoza, Misiones, Río
una nueva empresa. De ese modo, la incubadora brinda el
Negro y San Luis. Se destacaron 9 empresas de base
lugar físico y el tiempo necesario para que el germen de una
biotecnológica albergadas, 5 en la incubadora de empresas
idea pueda crecer hasta convertirse en un producto
de la Universidad Nacional de Quilmes, 2 en la del
comercializable, facilitando además todas las herramientas Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires y 2 en el Parque
de gerenciamiento para que esa idea se constituya en un Tecnológico del Litoral del Centro SAPEM (Santa Fe).9%
buen negocio. del algodón proceden de cultivos OGM. La apuesta
En Argentina, y desde la SeCyT se está trabajando clara por la biotecnología verde se ha basado en diferentes
para aumentar los incentivos fiscales destinados a las factores: una legislación tolerante, una aceptación por
empresas que aporten capital de riesgo al desarrollo de estos
parte de la opinión pública y la existencia de
proyectos.
multinacionales dispuestas a realizar importantes
Además, existen varias empresas en el área de
inversiones.
biotecnología vegetal que cuentan con sus propios
La suma de todos estos factores ha permitido que, en
laboratorios de I+D. Si bien el advenimiento del uso de la
los momentos difíciles por los que atravesaba el país, la
biotecnología en los procesos productivos de cada sector ha biotecnología haya acudido en auxilio de su maltrecha
sido una consecuencia de las mejoras productivas economía.
desarrolladas por las empresas, en los últimos años la

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Industrias y Servicios I

Análisis
\ FODA de la
biotecnología en
Argentina
BIOTECNOLOGÍA

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Informe de visita: Laboratorio Biotecnológico del INTA
Industrias y Servicios I

Los equipos que observamos en el laboratorio que administra el Dr. Iván Ciklic son los siguientes.
Campana para trabajar con gases tóxicos
Este equipo posee una compuerta corrediza
verticalmente, se baja y tiene un tope dejando un espacio
que nos permite ingresar las manos para poder manipular
el instrumental dentro de él. En la parte superior tiene un
ventilador, que al activarlo, succiona el aire circundante y
nos permite manipular los gases tóxicos, ya que estos
ascienden.
Los gases que usan frecuentemente son el cloroformo,
bromuro de etidio, formaldehido, etc.
BIOTECNOLOGÍA

Termociclador
Este equipo permite realizar los ciclos de temperatura
necesarios para una reacción en cadena de la polimerasa de
amplificación de ADN.
El sistema consiste en un bloque de resistencia eléctrica
que distribuye a través de una placa una temperatura
homogénea durante tiempos que pueden ser programables,
normalmente con rangos de temperatura de 4°C a 96°C.
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una
técnica cuyo objetivo es obtener un gran número de copias
de un fragmento de ADN particular, partiendo de un
mínimo, lo que se llama amplificación del ADN. Su utilidad
es que tras la amplificación resulta mucho más fácil con una
muy alta probabilidad virus o bacterias causantes de una
enfermedad, identificar personas o hacer investigaciones
científicas con el ADN amplificado, donde el último es el
uso que le dan en este laboratorio.
Esta técnica se fundamenta en la propiedad natural de
las ADN polimerasas para replicar hebras de ADN, para lo
cual emplea ciclos de altas y bajas temperaturas alternadas
para separar las hebras de ADN recién formadas entre sí
tras cada fase de replicación y, a continuación, dejar que
vuelvan a unirse.
Para llevar a cabo la reacción se debe preparar lo que
se llama Mix de reacción, que se introducirá al
termociclador, y esto necesita:

•Los desoxinucleotidos, que es el sustrato para polimerizar


el nuevo ADN, esto vendría a ser las “piezas” necesarias
para llevar a cabo la reacción. Contiene 4 bases adenina,
guanina, timina y citosina.
•ADN polimerasa que contiene la enzima que va a realizar
las funciones de corte y adhesión.
•ADN molde, contiene la región del ADN que se va a
amplificar.
•Buffers, tienen una cierta cantidad de sales y detergentes,
que mantiene el pH adecuado para el buen funcionamiento
de la polimerasa.
•Primers (cebadores), esto es una pequeña parte del ADN
normalmente de doble cadena, que actúa como punto de
inicio para la adición de nucleótidos con el fin de copiar la
hebra molde.

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Ciclo de amplificación: el proceso de PCR por lo
general consiste en una serie de 20 a 35 cambios de
Industrias y Servicios I

temperatura llamados ciclos, cada ciclo suele consistir de 2


a 3 pasos diferentes de temperaturas. Las etapas del ciclo
son:

1.Inicialización, esta etapa es sólo necesaria para aquellas


ADN polimerasas que requieran activación por calor, y
consiste en llevar la reacción hasta una temperatura de
94-96°C que se mantiene durante 1 a 9 minutos.

2.Desnaturalización, en esta etapa se separan las dos


hebras de las cuales está constituido el ADN, a esto se le
llama desnaturalización del ADN, para ello es necesario
una temperatura de 94-96°C.
BIOTECNOLOGÍA

3.Alineamiento – Unión del cebador, en esta etapa el


cebador se unirá a su secuencia complementaria en el
ADN molde. Para ello es necesario bajar la temperatura a
40-68°C durante 20-40 segundos, según sea el caso,
permitiendo así el alineamiento. La polimerasa es la que se
encarga de unir la cadena del ADN molde con el cebador.

4.Extensión – Elongación de la cadena, actúa el ADN


polimerasa, tomando el ADN molde para sintetizar la
cadena complementaria y partiendo del cebador como
soporte inicial necesario para la síntesis de nuevo ADN. La
temperatura para este paso depende del ADN polimerasa
usada como de la longitud del fragmento de ADN que se
va a amplificar.

5.Por último, estos ciclos se vuelven a repetir,


amplificándose exponencialmente el producto.

Incubadora termo regulable Micro centrifuga

Es un equipo cerrado que permite controlar la Es una máquina que pone en rotación los tips puntas
temperatura, humedad y otras condiciones necesarias para para separar por fuerza rotatoria sus componentes o fases,
el desarrollo de un cultivo microbiológico. en función de su densidad.
La temperatura de cultivo más común que usan es de
36°C a 37°C.

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Thermomixer
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El equipo se usa para poder regular la temperatura


entre 0°C y 100°C, y también se puede regular la
agitación, se puede regular por pequeños periodos o se
puede regular para que este agitando constantemente a
ciertas revoluciones.

Esto se usa para reacciones de biología molecular, por


ejemplo, para reacciones de restricción (digestión del
ADN), es decir que agarramos el ADN y lo cortamos con
enzimas de restricción. Estas son enzimas que se aíslan de
bacterias y que cortan el ADN en determinadas secuencias
específicas de corte, esto depende de que enzima de
restricción usemos. Esto es muy útil para los análisis de
BIOTECNOLOGÍA

restricción, que sirve para saber si la secuencia del ADN es


realmente la que uno quiere o comparar la secuencia de
ADN con un patrón que se sabe. Si cortas con tales
enzimas te da un patrón específico de corte para esa
secuencia.
Se realiza la reacción a 37°C, algunas reacciones se
realizan a otra temperatura pero en general es a 37°C, y
luego se aumenta la temperatura a 70°C a 75°C para
desactivar la enzima, luego el ADN se corta para analizar
el gen y así analizamos el patrón de bandas. Se somete el
ADN cortado a un campo eléctrico y va a ir migrando
distintos fragmentos y de acuerdo al tamaño van a migrar
más o menos. De acuerdo al patrón de bandas podemos
sacar mucha información. Por ejemplo el estudio del ADN
se basa en esta técnica de patrón de bandas. Este tema lo
llevan a cabo en el laboratorio de geles.

Micro pipetas y puntas Autoclave eléctrica

Las micro pipetas es un instrumento de laboratorio Este dispositivo sirve para esterilizar el material de
empleado para absorber y transferir pequeños volúmenes laboratorio, utilizando vapor de agua a alta presión y
de líquidos y permitir su manejo adecuadamente. temperatura (2 atm y 120°C).
Los volúmenes captables por estos instrumentos varían El fundamento del autoclave es que coagula las
según el modelo, por ejemplo, se pueden captar 20 ul, 200 proteínas de los microorganismos debido a la presión y
ul y 1000 ul. temperatura.
Las micro pipetas permiten emplear distintos líquidos El laboratorio del INTA esteriliza los medios de
sin tener que lavar el aparato, para ello, se emplean puntas cultivos, todo el material de vidrio, como pipetas, tips
desechables de plástico, que son estériles. puntas, probetas, etc.

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Laboratorio de Electroforesis
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En este laboratorio se realiza el análisis de bandas, de


los fragmentos de ADN que obtuvimos en la reacción de
restricción con el thermomixer.
Primero se prepara la mezcla de agarosa con buffer, la
agarosa es un polisacárido que forma una matriz inerte y
no tóxica que nos permite separar fragmentos de ADN
mediante electroforesis.
Esta mezcla se pone a calentar, agitándose
frecuentemente hasta que llegue al punto donde comienza
a hervir.
Una vez enfriada la mezcla se vierte con cuidado en
una bandeja y se deja solidificar.
BIOTECNOLOGÍA

Una vez que solidifica el gel se pone en la cuba de


electroforesis. Estas cubas tienen dos polos, un ánodo y un
cátodo, que se conectan con la fuente que genera el campo
eléctrico. Se hacen unos pocillos (huecos) al gel donde se
carga el ADN, y además el bromuro de etidio, este químico
se engancha en las bases del ADN y es fluorescente a luz
ultravioleta.
Gracias a esto podemos marcar el ADN, por así
decirlo, con un color. Al aplicar el campo eléctrico se
puede observar cómo van migrando los fragmentos. Una
vez que corrió lo suficiente, dependiendo del tamaño de la
banda, también depende de la concentración de agarosa
en el gel, mientras más agarosa tenga menos poroso es el
gel y más dificultoso es para el ADN migrar por él (mala
solución del gel).
Luego se lleva la cuba a un equipo que realiza la foto
documentación, este equipo tiene incorporado una cámara
arriba de él que saca fotos a la cuba, donde se registra y se
guarda en la computadora, en esta proceso entra en juego
el bromuro de etidio, se excita con rayos UV, uno puede
hacer visible la banda y después se hace el análisis
correspondiente. Para este análisis se usan unos
marcadores de tamaño, estos marcadores tienen las bandas
marcadas de un tamaño que ya está estandarizado que
sirve como referencia, donde se sabe el tamaño y la
concentración. Junto con las muestras y el marcador se
puede sacar información valiosa.
El bromuro de etidio es una sustancia fuertemente
mutagénica y es irritante a los ojos, piel, mucosas y el
tracto respiratorio. Se sospecha que puede ser cancerígeno
y teratogénico por su cualidad de mutagenicidad. Si se
ingiere, se inhala o se absorbe por la piel, esta sustancia
puede tener efectos nocivos. El bromuro de etidio se meten
en los espacio del ADN donde se unen las dos bases,
dentro de allí puede generar mutaciones, o sea, que es
altamente cancerígeno, tanto para el contacto como la
inhalación.

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Heladeras de conservación

Estas heladeras se usan para guardar placas donde


crecen los microorganismos, bacterias y cepas que
incuban. A la temperatura que trabajan estas heladeras
permiten mantener estos microorganismos, de tal forma
que desarrollo bacteriológico es mínimo. A 4°C las
bacterias duran hasta dos meses, en cambio las levaduras
duran hasta 1 año en estas condiciones.
También tienen un freezer que esta a -20°C, acá se
guarda todo lo que se necesita que este congelado, por
ejemplo, reactivos y muestras de ADN y enzimas. La idea
BIOTECNOLOGÍA

es evitar la degradación, y el ADN es muy sensible a la


degradación, por lo tanto si o si hay que tenerlo a esta
temperatura de -20°C. En caso de que queramos
mantener por más tiempo estas muestras, podemos tener la
temperatura a -80°C, pero en este caso tenemos que
preparar el cultivo de las células en un medio de glicerol,
porque el glicerol protege a las células de los efectos del
congelamiento, ya que a -80°C las células pueden tener
consecuencias fatales.
Hay que tener especial cuidado con las enzimas, ya
que si las tenemos a temperatura ambiente en un par de
días quedan totalmente en inactividad, y son muy caras
además. Un tubo de polimerasa sale $800.

Cámara de flujo laminar

Una cámara de flujo laminar es un receptáculo en


forma generalmente prismática (forma parecida a la
campana para gases) con una única cara libre (la frontal)
que da acceso al interior, donde se localiza la superficie de
trabajo. La esterilidad de la zona de trabajo se consigue
porque se hace circular a través del interior de la cámara
una corriente de aire que previamente ha sido
microfiltrada para eliminar toda partícula extraña. Para
evitar que el aire del exterior pueda entrar en la cámara de
flujo sin pasar previamente por los filtros se procura que la
presión interior sea ligeramente superior a la presión
exterior, con lo cual el aire siempre circula de dentro hacia
fuera y nunca al revés. Existen dos tipos de cámaras de
flujo laminar según sea la forma en la que se hace circular
el aire: cámaras de flujo horizontal y cámaras de flujo
vertical

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