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Clin Chem Lab Med 2003; 41(11):1427 – 1434 © 2003 by Walter de Gruyter · Berlin · New York

Review

The Role of Genetic Factors in the Development of


Hyperhomocysteinemia

Jürgen Geisel*, Ulrich Hübner, Marion Bodis, Heike tions. En conclusión, el estudio sobre vegetarianos y ancianos
Schorr, Jean-Pierre Knapp, Rima Obeid and Wolfgang documenta interesantes interacciones entre el estilo de vida y el
Herrmann genotipo. Aunque las mutaciones TC y COMT influyen en el
metabolismo celular de la vitamina B12, este efecto no resultó en
Department of Clinical Chemistry, Saarland Medical School,
Homburg, Germany
una elevación manifiesta de la homocisteína. Clin Chem Lab Med
2003; 11 (41): 1427–1434
Key words: Genetics; Homocysteine; Polymorphism;
La hiperhomocisteinemia moderada se ha identificado como un Vegetarians.
nuevo factor de riesgo independiente de enfermedades
Abbreviations: BHMT, betaine-homocysteine methyl-
cardiovasculares y neurodegenerativas. Este hecho ha generado
transferase; CBS, cystathionine β-synthase; COMT, cat-
interés en el estudio de variantes genéticas implicadas en el
echol-O-methyltransferase; GCPII, glutamate carboxy-
metabolismo de la ho-mocisteína y su relación con la
peptidase II; holoTC-II, holotranscobalamin-II; MMA,
patogénesis. Recientemente, se estudiaron más de 15 genes
methylmalonic acid; MS, methionine synthase; MSR,
diferentes por su relación con los niveles de homocisteína en
methionine synthase reductase, MTHFR, 5,10-methyl-
plasma. Determinamos la influencia de variantes genéticas en
enetetrahydrofolate reductase; SAH, S-adenosylhomo-
cinco genes (5,10-metilentetrahidrofolato reduc-tasa (MTHFR)
cysteine; SAM, S-adenosylmethionine; SHMT, serine
677C → T, serina hidroximetiltransferasa (SHMT) 1420C → T,
hydroxymethyltransferase; RFC, reduced folate carrier;
timidilato sintasa (TS) 2R → 3R, catecol-O- metiltransferasa
TC, transcobalamin; TS, thymidylate synthase.
(COMT) 1947G → A y transcobalamina (TC) 776C → G) sobre
homocisteína plasmática, ácido fólico y parámetros del
metabolismo de la vitamina B12 en 111 vegetarianos (edad
Introduction
media: 46 ± 15 años) y 118 adultos mayores sanos (edad media:
82 ± 6,5 años). La concentración media de homocisteína en
El metabolismo de la homocisteína requiere la contribución de
plasma estuvo significativamente influenciada por los genotipos
una serie de enzimas y cofactores vitamínicos. Aunque se han
MTHFR en ambas poblaciones. En los vegetarianos, la mediana
identificado mutaciones raras que causan el fenotipo clínico de
del nivel de homocisteína aumentó en 8 µmol / l en individuos
la homocistinuria, el interés creciente se ha centrado en
homocigotos para la mutación en comparación con los
mutaciones más frecuentes con una influencia mínima sobre la
genotipos de tipo salvaje o heterocigotos (20,4 µmol / l frente a
homocisteína en el plasma (1, 2). Las mutaciones frecuentes se
12,9 y 12,7 µmol / l, respectivamente). Este aumento inesperado
localizan en enzimas directamente implicadas en el
se observó aunque los niveles de folato estaban en rangos medios
metabolismo de la homocisteína o participan en el metabolismo
a elevados. Nuestros resultados sugieren que los vegetarianos
de los cofactores vitamínicos. La homocisteína se metaboliza a
tienen una mayor demanda de fo-late para neutralizar el efecto
cistationina y cisteína (vía de transulfuración) o se remetila a
del genotipo. La deficiencia preclínica de vita-min B12 en
metionina (remetilación) (Figura 1) (3, 4). La cistationina β-
vegetarianos puede ser la causa de la remetilación alterada y la
sintasa (CBS) es la primera enzima involucrada en la vía de
trampa de folato. La homo-cisteína plasmática no se vio
transulfuración. La metionina sintasa (MS), metionina sintasa
significativamente influenciada por las mutaciones SHMT, TS,
reductasa (MSR), 5,10-metilenotetrahidrofolato reductasa
COMT y TC. Además, para la mutación de TC se observó una
(MTHFR), serina hidroximetiltransferasa (SHMT), timidilato
tendencia hacia la deficiencia de vitamina B12 celular. Los
sintasa (TS) y 5,10-metilentetrahidrofolato deshidrogenasa) son
niveles de ácido metilmalónico (MMA) estaban ligeramente
( involucrados en la vía de remetilación dependiente del folato.
elevados y los niveles de holotranscobalamina-II (holoTC-II)
Una vía de remetilación menor que trabaja independientemente
disminuyeron. En el grupo vegetariano se determinó una
del folato utiliza betaína-homocisteína metiltransferasa
relación significativa entre el genotipo COMT y la
(BHMT) (5). La cate-col-O-metiltransferasa (COMT) es una
concentración de holoTC-II en plasma, mientras que el genotipo
metiltransferasa que utiliza S-adenosilmetionina (SAM) como
COMT de alta actividad (G / G) resultó en niveles aumentados
donante para el grupo metilo (6). La glutamato carboxipeptidasa
(35 µmol / l frente a 21 µmol / l para genotipos heterocigotos y
II (GCPII) y la proteína portadora de folato reducida (RFC)
de baja actividad). Los niveles de MMA se correlacionaron
participan en la absorción intestinal de folato. GCPII hidroliza
inversamente con la concentración de holoTC-II.
poliglutamil folatos antes de su absorción (7). Esta hidrólisis es
necesaria porque solo

*E-mail of the corresponding author:


kchjgei@uniklinik-saarland.de

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1428 Geisel et al.: Genetics and hyperhomocysteinemia

Figure 1 Metabolismo de la metionina / homocisteína y las enzimas 5,10-metilentetrahidrofolato reductasa (MTHFR), metio-nueve sintasa
involucradas. Monofosfato de desoxiuridina (dUMP), monofosfato de (MS), metionina sintasa reductasa (MSR), vitamina B12 (B12), betaína-
desoxitimidina (dTMP), tetrahidrofolato (THF), dihidrofolato (DHF), homocisteína metiltransferasa (BHMT), S-adenosilmetionina (SAM), S-
timidilato sintasa (TS), serina hidroximetiltransferasa (SHMT), 5- adenosilhomocisos teína (SAH), catecol-O-metiltransferasa (COMT),
metiltetrahidrofo-latente, 5-MTHFolato (5,10-MTHFR), cistatio-nueve β-sintasa (CBS), γ-cistationasa (GCT), vitamina B6 (B6).

la forma de monoglutamato de folato se puede absorber en el En el presente estudio examinamos el efecto de estas cinco
intestino delgado. La absorción de folato en el intestino está mutaciones prometedoras en los genes de MTHFR (677C → T),
mediada por RFC (8). El RFC también se expresa en el tejido COMT (1947G → A), TS (2R → 3R), SHMT (1420C → T) y TC
periférico y es el portador preferido para el transporte celular de (776C → G ) como posibles determinantes genéticos de la
5-MTHF. La transcobalamina (TC) es el transportador de homocisteína plasmática en cohortes de adultos jóvenes sanos,
vitamina B12 en la circulación y entrega B12 a las células (9). adultos mayores sanos y un grupo de vegetarianos. Como se ha
demostrado de forma intensiva para la mutación MTHFR, el
En cualquiera de estos genes implicados en el metabolismo efecto de las mutaciones podría modificarse mediante el
de la homocisteína o de las vitaminas se caracterizan una o más suministro de vitaminas. A partir de este punto, son de interés
variantes genéticas (Tabla 1). En los genes de MTHFR, COMT y las cohortes en las que se encuentra con mayor frecuencia un
TS, se describieron mutaciones que resultan en una actividad aporte reducido de vitaminas implicadas en el metabolismo de
enzimática reducida (10-12). Por tanto, estas mutaciones son la homocisteína que en individuos adultos sanos. Debido a que
candidatos interesantes que posiblemente podrían influir en las la vitamina B12 está predominantemente presente en la carne, el
concentraciones de homocisteína en plasma. El SHMT depende pescado y los productos lácteos, los vegetarianos tienen un
de la vitamina B6 y juega un papel importante en la suministro más limitado de vitamina B12, y el 55% de los
competencia entre la síntesis de timidilato y adultos mayores tienen una deficiencia de una de las tres
metilentetrahidrofolato. Debido a que un nivel elevado de vitaminas involucradas en el metabolismo de la homocisteína
homocisteína en plasma es el biomarcador más importante para (17).
el metabolismo alterado del folato, podría ser posible una
relación con la mutación. En un informe reciente, el genotipo
Materials and Methods
CC del SHMT se asoció con una disminución de los niveles de
folato en los glóbulos rojos y en plasma, lo que resultó en un Subjects
aumento de los niveles de homocisteína (13). El efecto de
We studied 327 patients from three study populations differing
aumento de homocisteína de los portadores heterocigotos de la
in age and nutrition. The first study population consisted of
mutación 776C → G en el gen TC no fue confirmado por otros
vegetarians differing in their nutrition status (lacto-/lacto-ovo
(14, 15). Recientemente, se describió una relación de esta vegetarians and vegans; n = 111, median age: 46 ± 15 years).
mutación e indicadores más específicos del metabolismo de la The second group consisted of healthy seniors (n = 118; mean
vitamina B12, la holotranscobalamina-II (holoTC-II) y el ácido age: 82 ± 6.5 years). Additionally, a healthy younger control
metilmalónico (MMA) (16). group was considered for comparison of the results of the veg-
etarians (n = 98; mean age: 25 ± 8 years).

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Geisel et al.: Genetics and hyperhomocysteinemia 1429

Table 1 Genetic variants studied for their relationship with plasma homocysteine.

Gene Genetic variant Amino acid Effect on plasma Reference


substitution homocysteine

MTHFR 677C→T A226V + (25% ↑) 10


1298A→C E433A 0 2
CBS 844ins68 – 0 2
14037 31 bp VNTR – + 1
699C→T Y233Y 0 1
1080C→T A360A 0 1
MS 2756A→G D919G 0 2
MSR 66A→G I22M 0 2
BHMT 595G→A G199S 0 1
716G→A Q239R 0 1
1218G→T Q406H 0 1
SHMT 1420C→T L474F ± 13
TC 67A→G I23V ± 1
280G→A 94G→S 0 1
776C→G P259R ± 14
1043C→T S348F 0 1
1196G→A R399Q 0 1
TS 2R/3R – ± 12
COMT 1947G→A V158M ± 20
GCPII 1561C→T H475Y ± 7
RFC 80G→A R27H ± 8

+, clear association; ±, possible association; 0, no association.

Biochemical parameters percentiles of homocysteine, folate, vitamin B12, holo-TC-II


and MMA concentrations were determined for TC and COMT
Fasting blood from participants was collected by venipunc-
genotypes, respectively. Concentrations of the different geno-
ture and immediately placed on ice. After centrifugation
types were tested for statistical significance using the Kruskal-
serum or plasma aliquots were stored at – 70 °C until analysis.
Wallis test. To test the multivariate independent influence of
Total homocysteine was measured in plasma using HPLC (Im-
confounders of homocysteine concentration, we performed
mune Diagnostics, Bensheim, Germany). Folate and vitamin
statistical analysis by multifactorial ANOVA testing. The as-
B12 were analyzed with enzyme immunoassays (Bayer Diag-
sessment of sample size was performed by a priori Power
nostics, Fernwald, Germany). The holoTC-II concentration
Analysis. To detect a 25% difference between genotype
was determined with the use of a radioimmunoassay (Axis-
groups, a sample size of 93 individuals is necessary under
Shield, Oslo, Norway). The MMA measurements were con-
consideration of the standard deviation of the control group.
ducted in our laboratory with gas chromatography in combi-
All statistical analyses considered p < 0.05 to be statistically
nation with mass spectrometry (Hewlett-Packard, Waldbronn,
significant.
Germany) as previously described elsewhere (18, 19).

Mutation detection
Genomic DNA from whole blood was extracted using a Roche Results
kit (Roche, Penzberg, Germany). The mutations in the MTFHR,
SHMT, COMT and TC genes were detected by PCR, restriction Influencia del genotipo en la concentración plasmática
digestion and separation of PCR fragments by agarose gel de homocisteína
electrophoresis. PCR and electrophoresis were performed us-
ing the conditions described previously (2). The size length Analizamos los cinco genotipos diferentes en muestras aisladas de
polymorphism of the TS repeat was analyzed by electro- 111 vegetarianos y 118 adultos mayores. Además, se estudió un
phoresis on a 3.5% agarose gel (NuSieve GTG Agarose, grupo de control más joven para analizar el efecto MTHFR en los
Biozyme, Oldendorf, Germany). All primer sequences and the vegetarianos. Las frecuencias de los genotipos mutantes para las
restriction enzymes used were previously published (10, 12, cinco variantes genéticas fueron muy altas (MTHFR, genotipo
13, 14, 20). TT: 15%; SHMT, genotipo TT: 9%; TS, genotipo 2R2R: 14%;
COMT, genotipo AA: 26% y TC, genotipo GG: 15%). Las
Statistics frecuencias de alelos y las distribuciones de genotipos para las
Statistical calculations were performed using SPSS statistical cinco variantes no difirieron significativamente entre los dos
software 11.0 (Chicago, Illinois, USA). Medians, 5th and 95th grupos. Una tendencia

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1430 Geisel et al.: Genetics and hyperhomocysteinemia

Se observó una mayor frecuencia del genotipo COMT en tres terciles de folato, y en cada tercil se midió la
homocigoto para la mutación en las personas mayores (32% frente concentración plasmática de ho-mocisteína en relación con el
a 22% en vegetarianos) (Tabla 2). Entre los vegetarianos y los genotipo (Figura 2). Estos resultados para individuos
adultos mayores hubo una relación fuerte y significativa entre la vegetarianos se compararon con los del grupo de control
presencia de la mutación MTHFR y las concentraciones joven. En cada tercil de folato, el nivel medio de folato fue
plasmáticas de homocisteína (Tabla 2). En el análisis ANOVA más alto en el grupo vegetariano. Aunque el suministro de
multifactorial, esta relación siguió siendo significativa (Tabla 3). folato pareció ser suficiente en los vegetarianos, en cada
Para las mutaciones SHMT, TS, COMT y TC no se encontró grupo de genotipo los niveles de homocisteína plasmática
interacción entre los genotipos y la homocisteína plasmática. fueron más altos que en los controles. En individuos de
control en los terciles de folato más alto y medio, se
midieron niveles de homocisteína casi idénticos sin una
influencia del genotipo. En el grupo vegetariano, ya se
Interacciones gen-nutrición para la mutación MTHFR
observó un efecto distinto del genotipo en individuos en el
Se informó que la asociación entre la variante MTHFR 677C → rango medio de folato. Este efecto fue sorprendente, porque
T y concentraciones elevadas de homocisteína existía el suministro de folato fue suficiente. En comparación con los
principalmente en individuos con bajo nivel de folato (21). El controles, la mediana de la tercila de folato fue 4,4 ng / ml
grupo de 111 vegetarianos se distribuyó más alta en vegetarianos que en con-

Table 2 Genotype frequency and relationships between MTHFR, SHMT, TS, COMT and TC genotypes
and fasting homocysteine (median and 5th to 95th percentile).

Mutation Collective Genotype frequency/homocysteine (µmol/l) p

MTHFR (677C→T) Seniors 0.36 (C/C) 0.49 (C/T) 0.15 (T/T)


13.9 18.0 18.4 0.04
(7.2 – 27.1) (8.8 – 36.4) (10.4 – 27.6)
Vegetarians 0.44 0.43 0.13
12.9 12.7 20.4 0.002
(6.1 – 36.1) (6.2 – 41.9) (10.3 – 64.3)
SHMT (1420C→T) Seniors 0.50 (C/C) 0.41 (C/T) 0.09 (T/T)
16.6 16.3 18.8 0.60
(9.4 – 32.5) (7.7 – 34.9) (7.1 – 49.7)
TS (2R→3R) Seniors 0.14 (2R/2R) 0.53 (2R/3R) 0.33 (3R/3R)
17.8 16.4 14.9 0.33
(7.6 – 35.8) (9.1 – 40.8) (7.9 – 22.6)
COMT (1947G→A) Seniors 0.20 (G/G) 0.58 (G/A) 0.22 (A/A)
16.0 18.0 16.3 0.90
(11.0 – 32.3) (8.1 – 32.3) (10.0 – 50.2)
Vegetarians 0.18 0.50 0.32
11.9 13.3 13.4 0.30
(6.1 – 66.3) (6.4 – 50.3) (6.4 – 38.5)
TC (776C→G) Seniors 0.39 (C/C) 0.43 (C/G) 0.18 (G/G)
16.3 16.6 16.5 0.98
(7.9 – 50.2) (7.7 – 34.8) (9.1 – 38.9)
Vegetarians 0.26 0.62 0.12
12.8 13.5 13.2 0.48
(6.0 – 56.0) (7.6 – 48.0) (4.9 – 27.6)

Table 3 Confounders of plasma homocysteine levels in multifactorial analysis.

Cohort Variable without Variable with p < 0.05


significant influence significant influence

Vegetarians TC776C→G, TS2R→3R, COMT1947G→A, MTHFR677C→T 0.002


SHMT1420C→T, age, creatinine Sex 0.004
vitamin B6, folate Vitamin B12 < 0.001
Seniors MTHFR677C→T, TS2R→3R, TC776C→G, Folate < 0.001
COMT1947G→A, SHMT1420C→T, Vitamin B12 < 0.001
sex, age, vitamin B6 Creatinine < 0.001

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Geisel et al.: Genetics and hyperhomocysteinemia 1431

amin B12, but the homocysteine increase was more ag-


gravated in the case of vitamin B12 deficiency.

Polimorfismo TC y estado celular de vitamina B12


Dado que TC es el transportador de vitamina B12 a las células,
se estudió el efecto de la mutación 776C → G en el gen TC sobre
los parámetros del metabolismo de la vitamina B12 (holoTC-II,
MMA, vitamina B12 y homocisteína). Los estudios se realizaron
en vegetarianos y adultos mayores. Los vegetarianos a menudo
tienen una deficiencia preclínica de vitamina B12, y el efecto de
la mutación posiblemente podría agravarse en estos individuos
(Tabla 4). No se observaron diferencias en las concentraciones
medias de homocisteína y vitamina B12 entre los genotipos. Se
ha sugerido que MMA y holoTC-II son parámetros del
metabolismo de la vitamina B12, que posiblemente sean más
adecuados para demostrar un efecto de esta mutación. Pero
nuevamente, no se observó una asociación significativa de los
genotipos con los niveles de MMA y holoTC-II. Aunque la
relación no fue significativa, se mostró una tendencia hacia
niveles más bajos de MMA y niveles elevados de holoTC-II para
Figure 2 Homocysteine concentrations in plasma according el genotipo CC.
to MTHFR 677C→T genotypes in different folate tertiles. Con-
trols and vegetarians were compared applying the
Mann-Whitney U-test: *p < 0.05, **p < 0.01, ***p< 0.001. Genotipos COMT y efectos sobre el metabolismo de
la vitamina B12
El polimorfismo genético da como resultado una diferencia de 3
a 4 veces en la actividad de COMT (22). Una alta actividad
enzimática utiliza SAM como donante de metilo y produce S-
adenosilho-mocisteína (SAH), que se convierte rápidamente en
homocisteína. Sin embargo, ni en el grupo vegetariano ni en el
de adultos mayores se encontró una asociación entre la actividad
enzimática y los niveles de homocisteína. En los vegetarianos se
identificó una relación significativa entre el genotipo y el
holoTC-II, se observó una tendencia en la misma dirección en el
grupo de personas mayores y, al analizar el grupo completo en
conjunto, el efecto siguió siendo significativo. Como era de
esperar, los niveles de MMA estaban inversamente
correlacionados con los valores de holoTC-II, pero sin ser
significativos (Tabla 4).

Discussion

Figure 3 Homocysteine plasma concentrations in vegetari- El interés se centra en las variaciones genéticas comunes para
ans according to MTHFR 677C→T genotypes in different MMA
predecir la hiperhomocisteinemia. El uso de métodos de cribado
tertiles. Genotypes within MMA tertiles were compared ap-
genéticos de alto rendimiento permitiría el cribado de un gran
plying the Kruskal-Wallis test: *p < 0.05. Lowest MMA tertile
median: 378 nmol/l; medium MMA tertile median:
número de mutaciones de una manera sencilla y rentable.
587 nmol/l; highest MMA tertile median: 969 nmol/l. Detrás del análisis genético está el objetivo de predecir el
fenotipo bioquímico y posiblemente clínico de manera más
eficiente que mediante la medición de la homocisteína
trol. Además del folato, la vitamina B12 tiene un efecto sobre los plasmática sola. Ya se han descrito numerosas variaciones en
niveles plasmáticos de homocisteína. MMA es un indicador de genes que implican el metabolismo de la homocisteína (Tabla
una deficiencia intracelular de vitamina B12. Por lo tanto, en 1). La mutación MTHFR 677C → T, descrita por primera vez en
nuestros estudios preferimos el MMA a las mediciones de 1995, es la variación genética más estudiada (10). Además de
vitamina B12 en plasma. En la Figura 3 se demuestra el efecto de la esta mutación, examinamos las variantes en los siguientes genes:
deficiencia de vitamina B12 celular para cada genotipo. Los SHMT, TS, COMT y TC (11-14). Estos genes codifican enzimas
niveles de homocisteína aumentaron con la deficiencia de que no están directamente involucradas en la vía de
vitamina B12 celular para cada genotipo. Sin embargo, en el caso remetilación o transulfuración, pero son de gran importancia en
del genotipo TT, los niveles de homocisteína fueron más altos. la generación de productos intermedios.
Esta observación es independiente del suministro de vit-

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1432 Geisel et al.: Genetics and hyperhomocysteinemia

Table 4 Plasma homocysteine, folate, vitamin B12, holoTC-II and MMA (median and 5th to
95th percentile) according to TC and COMT genotypes.

Vegetarians Seniors

TC gene C/C C/G GG C/C C/G GG

Homocysteine 12.8 13.5 13.2 15.3 16.3 18.0


(µmol/l) (6.0 – 60.0) (7.6 – 48.0) (4.9 – 27.6) (7.6 – 42.3) (7.2 – 35.0) (8.8 – 35.5)
Folate 14.5 13.2 12.9 6.4 6.5 7.3
(ng/ml) (5.0 – 28.7) (6.9 – 33.1) (7.8 – 53.5) (1.8 – 21.2) (2.9 – 22.3) (4.2 – 24.2)
Vitamin B12 270 260 261 409 371 348
(pg/ml) (154 – 442) (159 – 600) (147 – 489) (187 – 937) (235 – 1152) (180 – 775)
MMA 311 366 362 228 224 291
(nmol/l) (162 – 1590 (145 – 2761) (143 – 2036) (235 – 1152) (115 – 953) (114 – 1918)
HoloTC-II 32 20 24 55 45 53
(µmol/l) (2 – 69) (2 – 105) (4 – 122 (4 – 110) (16 – 252) (8 – 186)

COMT gene G/G G/A A/A G/G G/A A/A

Homocysteine 11.9 13.2 13.4 17.5 16.4 16.4


(µmol/l) (6.1 – 66.3) (6.4 – 50.3) (6.4 – 38.5) (11.0 – 28.5) (7.4 – 29.8 (10.0 – 44.5)
Folate 14.9 13.9 12.9 7.2 6.9 6.3
(ng/ml) (7.1 – 66.9) (6.5 – 33.2) (7.8 – 34.8) (2.7 – 17.3) (3.9 – 23.2) (1.8 – 20.0)
Vitamin B12 287 260 227 358 370 330
(pg/ml) (155 – 928) (166 – 479) (140 – 416) (226 – 1008) 204 – 829) (181 – 495)
MMA 235 435 368 223 236 294
(nmol/l) (121 – 1767) (145 – 2278) (166 – 3072) (99 – 772) (114 – 748) (123 – 986)
HoloTC-II 35* 21 21 70 43 49
(µmol/l) (4 – 266) (2 – 97) (2 – 53) (17 – 158) (9 – 271) (13 – 96)

*p < 0.05.

ucts directamente implicados en el metabolismo de la homocisteína. La comparación con los vegetarianos. Obviamente, en los
mutación MTHFR reduce la actividad enzimática al 30%. También se vegetarianos es necesaria una mayor demanda de folato para
describe una pérdida de aproximadamente el 75% de la actividad compensar el efecto del genotipo. Teniendo en cuenta los datos
enzimática para la mutación COMT, mientras que el alelo TS 3R tiene
de la Figura 2, es necesario un nivel medio de 20,3 ng / ml para
una actividad aumentada (22, 23).
compensar el efecto del genotipo en los vegetarianos, mientras
El efecto de la mutación en el gen MTHFR está bien que en el grupo de control un nivel medio de folato de 7 ng / ml
establecido y los portadores homocigotos tienen un aumento es suficiente para la compensación. La mayor demanda de folato
aproximado de homocisteína de 2 a 3 µmol / l. En el presente en los vegetarianos es obviamente causada por la deficiencia de
estudio observamos en los vegetarianos un claro aumento de la vitamina B12 (25). El 5-metiltetrahidrofolato es el donante del
homocisteína media de 8 µmol / l. En el grupo de adultos grupo metilo en la vía de remetilación, mediada por la EM, que
mayores, el aumento de la homocisteína media fue de 4 µmol / requiere vitamina B12 como cofactor. Por lo tanto, en
l. El claro aumento de la homocisteína dependiente del vegetarianos con deficiencia de vitamina B12, la homocisteína
genotipo en el grupo vegetariano fue inesperado considerando puede no ser remetilada de manera eficiente y, por lo tanto, se
los datos recientemente publicados (24). La asociación con la acumula en asociación con la captura de folato reducido en
mutación MTHFR se encuentra universalmente, aunque se forma de 5-metiltetrahidrofolato, la llamada trampa de folato
informó que esta asociación existe principalmente en (26). La trampa de folato conduce a concentraciones
individuos con bajo contenido de folato (21). Sin embargo, no plasmáticas de folato normales o incluso elevadas. Sin embargo,
se encontró deficiencia manifiesta de folato (folato sérico <6 como consecuencia de la deficiencia de vitamina B12, el folato
ng / ml) en ningún sujeto vegetariano. En el análisis ANOVA no puede participar en la vía de remetilación. Por tanto, la
multifactorial se confirmó que el folato no es un factor de demanda de ácido fólico es mucho mayor en el caso de
confusión de la homocisteína plasmática, lo que puede deficiencia de vitamina B12 que en la situación con suficiente
explicarse por el estado basal relativamente alto de folato. Sin suministro de vitamina B12.
embargo, cuando se investigó la interacción folato-genotipo No se observaron diferencias en la concentración plasmática
con más detalle, se hizo evidente un efecto genotipo distinto. de homocisteína entre los genotipos TC. Este resultado
Este efecto ya estaba presente en el tercil medio y se incrementó contrasta con un hallazgo previo de que el genotipo
en el tercil más bajo. Sin embargo, debe mencionarse heterocigoto está asociado con niveles elevados de homocisteína
nuevamente que no hubo deficiencia de folato. En el grupo de (14). Otros informes no encontraron ninguna asociación (15), y
control más joven no se observó ningún efecto de los genotipos en un informe reciente, el alelo G se asoció con niveles
en cada tercil de folato, aunque el tercil de folato mediano fue reducidos de homocisteína solo en combinación con niveles
menor en elevados de vitamina B12

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(27). Esto indica que los determinantes incontrolados del nivel 4. Herrmann W. The importance of hyperhomocysteinemia
de homocisteína, como el sexo, la edad, la función renal, etc., son as a risk factor for diseases: an overview. Clin Chem Lab
la posible causa de estos resultados inconsistentes. Además de la Med 2001; 39:666 – 74.
homocisteína, se midieron holoTC-II y MMA en plasma. Pero 5. Heil SG, Lievers KJ, Boers GH, Verhoef P, den Heijer M, Tri-
jbels FJ, et al. Betaine-homocysteine methyltransferase
nuevamente, considerando estos dos parámetros sensibles de
(BHMT): genomic sequencing and relevance to hyperho-
una deficiencia preclínica de vitamina B12, no se hizo evidente
mocysteinemia and vascular disease in humans. Mol
ninguna diferencia significativa. Sin embargo, se observó una Genet Metab 2000; 71:511 – 9.
tendencia hacia la disminución de las concentraciones de MMA 6. Zhu BT. Catechol-O-Methyltransferase (COMT)-mediated
en el caso del genotipo CC en los vegetarianos y los ancianos. Los methylation metabolism of endogenous bioactive cate-
valores de holoTC-II estaban, como se esperaba, inversamente chols and modulation by endobiotics and xenobiotics: im-
correlacionados con los niveles de MMA. En una publicación portance in pathophysiology and pathogenesis. Curr Drug
reciente, Miller et al. describir hallazgos comparables (16). A Metab 2002; 3:321 – 49.
partir de estos resultados, podríamos concluir que esta mutación 7. Devlin AM, Ling EH, Peerson JM, Fernando S, Clarke R,
influye en la liberación de B12 tisular y el estado funcional de Smith AD, et al. Glutamate carboxypeptidase II: a polymor-
phism associated with lower levels of serum folate and hy-
B12, pero estos efectos son muy pequeños y sin consecuencias
perhomocysteinemia. Hum Mol Genet 2000; 9:2837 – 44.
sobre los niveles séricos de vitamina B12 y homocisteína.
8. Chango A, Emery-Fillon N, de Courcy GP, Lambert D, Pfis-
ter M, Rosenblatt DS, et al. A polymorphism (80G->A) in
La homocisteinemia leve podría deberse a un aumento de la the reduced folate carrier gene and its associations with fo-
reacción de metilación. Las células de hepatoma de rata late status and homocysteinemia. Mol Genet Metab 2000;
transfectadas con la fosfatidiletanolamina N-metiltransferasa 70:310 – 5.
secretan más homocisteína que las células de tipo salvaje (28). En 9. Seetharam B, Li N. Transcobalamin II and its cell surface
los seres humanos, la COMT metaboliza la levodopa. El aumento receptor. Vitam Horm 2000; 59:337 – 66.
de la actividad de metilación da como resultado una 10. Frosst P, Blom HJ, Milos R, Goyette P, Sheppard CA,
homocisteína plasmática elevada (29). La mutación COMT Matthews RG, et al. A candidate genetic risk factor for vas-
cular disease: a common mutation in methylenetetrahy-
reduce la actividad enzimática a casi un 25% y, por lo tanto, es un
drofolate reductase [letter]. Nat Genet 1995; 10:111 – 3.
candidato interesante para realizar correlaciones genotipo-
11. Lachman HM, Papolos DF, Saito T, Yu YM, Szumlanski CL,
fenotipo. Sin embargo, los niveles de homocisteína en los Weinshilboum RM. Human catechol-O-methyltransferase
individuos estudiados fueron casi idénticos. El efecto que falta pharmacogenetics: description of a functional polymor-
sobre la homocisteína indica que, en condiciones básicas, la phism and its potential application to neuropsychiatric dis-
reacción de metilación provocada por COMT es demasiado orders. Pharmacogenetics 1996; 6:243 – 50.
pequeña para ejercer un efecto de genotipo. El aumento de la 12. Kawakami K, Omura K, Kanehira E, Watanabe Y. Polymor-
concentración de homocisteína en combinación con la terapia phic tandem repeats in the thymidylate synthase gene is
con levodopa podría deberse a la expansión de esta vía associated with its protein expression in human gastroin-
metabólica en condiciones terapéuticas. Un hallazgo inesperado testinal cancers. Anticancer Res 1999; 19:3249 – 52.
13. Heil SG, Van Der Put NM, Waas ET, den Heijer M, Trijbels
fue la asociación entre los genotipos COMT y MMA y holoTC-
FJ, Blom HJ. Is mutated serine hydroxymethyltransferase
II. El alelo de alta actividad se asoció con un MMA más bajo y un
(SHMT) involved in the etiology of neural tube defects?
holoTC-II elevado. Mol Genet Metab 2001; 73:164 – 72.
14. Namour F, Olivier J, Abdelmouttaleb I, Adjalla C, Debard R,
En conclusión, entre las variantes de 15 genes implicados en el Salvat C, et al. Transcobalamin codon 259 polymorphism
metabolismo de la homocisteína, el MTHFR 677C → T es el in HT-29 and Caco-2 cells and in Caucasians: relation to
principal determinante del nivel de homocisteína en plasma. En transcobalamin and homocysteine concentration in blood.
nuestro estudio, este efecto fue más evidente en los vegetarianos. Blood 2001; 97:1092 – 8.
En los vegetarianos, la deficiencia de vitamina B12 aumentó la 15. McCaddon A, Blennow K, Hudson P, Regland B, Hill D.
susceptibilidad de hiperhomocisteinemia en los portadores de Transcobalamin polymorphism and homocysteine. Blood
2001; 98:3497 – 9.
mutaciones. El efecto de la mutación TC da como resultado una
16. Miller JW, Ramos MI, Garrod MG, Flynn MA, Green R.
forma de deficiencia celular moderada sin efecto de la
Transcobalamin II 775G>C polymorphism and indices of
homocisteína plasmática. La relación entre el metabolismo de vitamin B12 status in healthy older adults. Blood 2002;
vita-min B12 y los genotipos COMT fue inesperada. En estudios 100:718 – 20.
posteriores, este efecto debe dilucidarse. 17. Herrmann W, Quast S, Ullrich M, Schultze H, Bodis M,
Geisel J. Hyperhomocysteinemia in high-aged subjects:
relation of B-vitamins, folic acid, renal function and the
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Br Med J 2002; 325:1202. Corresponding author: Prof. Dr. J. Geisel, Department of
25. Herrmann W, Schorr, H, Obeid R, Geisel J. Vitamin B12 sta- Clinical Chemistry, Saarland Medical School, 66421 Homburg
tus, particularly holotrans-cobalamin II and methylmalonic Phone: + 49 6841 1623057, Fax: + 49 6841 1623109,
acid concentrations, and hyperhomocysteinemia. Am J E-mail: kchjgei@uniklinik-saarland.de
Clin Nutr 2003; 78:131 – 6.

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