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SUMMARY.- In the present work we nave studíed the contractile behaviour of the
dactylopodite closer muscle frcm Procambarus olark-íi. (Girard, 1852), after elec
trie stimulation of its motor nervous pathways.
Stimulation at frecuencies as low as l/30s and l/60s, produces progressive di-
minution of the amplitude of the registered contractions.
A supraumbral pulse at short time intervals produces a drastic diminution in
the contractions amplitude. At longer intervals the decrease is slower but stil
evident.
High frecuency pulse produce a short term potenciation of the registered con-
trac tion.
After tetaniaation the muscle shows spontaneous recuperations in time of fati-
gue.
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INTRODUCCIÓN
El músc-ulo adductor del dactilopodito de Procambarus clavk-ii (Girard) ,
presenta : fibras musculares fásicas de contracción rápida, adaptadas a cortos
periodos de actividad; y fibras musculares tónicas de contracción lenta y gra-
dual, capaces de desarrollar tensión durante periodos de tiempo mayores . Las
fásicas, inervadas por un axón excitador rápido, se contraen ante un único es-
tímulo ( JAHROMI y ATWOOD, 1971) , mientras que las tónicas , inervadas por un
axón excitador lento, requeiren una frecuencia de estimulación de 10-100 estí-
mulos/s (GOVIND y ATWOOD, 1982). Por el contrario el músculo abductor del dactl
lopodito solo presenta fibras tónicas inervadas por un axón excitador de tipo
lento. Ambos músculos, abductor y adductor, están regulados por un único axón
inhibidor común (GOVIND y ATWOOD, 1982).
La estimulación repetida de una preparación neuromuscular , produce una
diSmin-uCión "de la 'amplitud ;d¿l potencial . de ...plac.a motora (THJES, 1965; BETZ,
.
CZTERNASTY y BRUNER ( 1975 ; 1980 ) estudiaron las respuestas del músculo
•flexor abdominal rápido de Procambarus clark-ii ante distintas frecuencias de
estimulación. JACOBS y ATWOOD ( 1981 ) , realizaron estudios similares en el mús-
culo abductor . del dactilopodito del mismo animal.
• El.fenóm-eno de la facilitación, definido como el resultado de algún pro-
ceso que produce el aumento de la probabilidad de liberación de transmisor •
durante frecuencias de estimulación elevadas o durante un tren de estímulos,
fue estudiado por ATWOOD (1967) .en el músculo extensor de Pachygrapsus , y por
DUDEL y KUFFLER (1961) en el músculo abductor del dactilopodito.
Sin embargo, no se conocen suficientemente el comportamiento contráctil
del músculo adductor del dactilopodito. En el presente trabajo se estudia el
efecto de la variación de la frecuencia -de estimulación, la potenciación muscu-
lar y los fenómenos de tetanización, en el músculo adductor del dactilopodito
de Prooambarus clark-ii.
MATERIALES Y MÉTODOS
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A/ Aplicación de trenes de estímulos de distintas frecuencias (50, 75
y 100 Hz) de duración fija 3s.
B/ Aplicación de uno, dos o tres estímulos a elevada frecuencia (lOOHz)
con una duración fija de Is cada uno de ellos y a intervalos, asimismo, de un
segundo.
C/ Aplicación de un tren de estímulos de elevada frecuencia (lOOHz)
durante un tiempo variable (1, 2 ó 3 segundos).
En cada una de ellas, en primer lugar se obtuvo una contracción como
respuesta a un único estímulo de intensidad suprahumbral que servía de referen-
cia (contracción control), para la comparación de una segunda contracción obte-
nida con un estímulo del mismo orden, después del tratamiento experimental A,
B y C anteriormente descritos.
Finalmente, se estudiaron los registros quimográficos del músculo en
fase de tetanización, empleándose frecuencias de estimulación de 50, 75 y 100
Hz.
Para la cuantificación de los resultados, se midieron todas y cada una
de las contracciones registradas, y su valor en mm., se transformó porcentual-
mente con respecto al valor de la amplitud de la contracción inicial del regis-
tro experimental.
1 estímulo/min
225
300 600
Tiempo (seg.)
Figura 1.
Amplitud de las contracciones obtenidas con estímulos a distintos intervalos
de tiempo.
En ordenadas aparece el logaritmo de las amplitudes medias porcentuales,
respecto a la inicial.
A m p l i t u d (73)
600
500
400
300
200 •
100 •
10 300 900
Figura 2.
Amplitud de las contracciones obtenidas con estímulos a distintos intervalos
de tiempo, tras la tetanización y consiguiente fatiga.
En ordenadas, logaritmo de las amplitudes medias porcentuales respecto a la
inicial.
Nótese que la contracción obtenida a los 30 min es similar a la correspondiente
a la de 30 segundos.
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Los resultados obtenidos tras la aplicación de estimulación a elevada
frecuencia (75Hz), se representan en la Figura 2, donde aparecen los valores
medios de elongación de varias preparaciones experimentales (n=6) que corres-
den a valores absolutos de 100 ± O ; 300 ±10; 340 ±10; 450 ±30 ; 470+ 30; 500± 50;
440+60; 320±20; 290±30.
Como se puede observar, la amplitud máxima se consigue después de 9
minutos. Dicha amplitud disminuye progresivamente hasta que a los 30 minutos,
se obtiene una elongación similar a la registrada inmediatamente después de
la fatiga muscular.
Fatiga muscular tras la tetañízacion.
Al estimular la preparación experimental con 50 y 75 Hz, no en todos
los casos se producía la tetanización total, por lo que únicamente se contem-
plaron los registros obtenidos con una frecuencia de estimulación de lOOHz.
Frente al típico comportamiento muscular ante la aplicación de un tren
de estímulos a elevada frecuencia (tetanización del músculo y consiguiente
fase de fatiga), en nuestras experiencias aparecieron "anomalías" caracteriza-
das por la recuperación espontánea de la contracción muscular en plena fase
de fatiga.
Esta recuperación se observa más o menos repetida a lo largo del tiem-
po y siempre antes del agotamiento (Figura 3a).
En algunos casos la recuperación llega a ocasionar una contractura,
cuya amplitud. alcanza a la que se presenta durante la fase de tetanización
(Figura 3b). Este fenómeno se acentúa cuando en la fase de fatiga existe una
recuperación, que conduce a un estado de contracción con una tensión muscular
del mismo nivel que la provocada durante la tetanización, y que se mantiene
durante cierto tiempo (Figura 3c).
Rejspuesta del músculo tras estimulación a elevada frecuencia.
En las experiencias del grupo A, y en el caso de la estimulación a
a lOOHz, la contracción registrada tras la estimulación, fue, en la mayoría
de los casos, de mayor amplitud que la contracción control.
El aumento de la amplitud de las contracciones, tras la estimulación,
no fue tan evidente cuando se utilizaron frecuencias de 50 y 75Hz.
En el grupo de experiencias B, la comparación de la amplitud de la con-
tracción segunda con la amplitud control, dio como resultado que, en ninguno
de los tres casos (1,2 ó 3 trenes de impulsos), se apreció un aumento en la
fuerza de la contracción, sino que, en la mayoría de los casos, se observa
una disminución. Sin embargo, cuando la estimulación aplicada era de 3 trenes
de duración Is, la disminución no era apenas evidente.
Cuando se aplicó trenes de estímulos de elevada frecuencia (lOOHz)
durante tiempos variables de 1,2 y 3 segundos (experiencia C), se obtuvo una
disminución de la amplitud de las contracciones registradas en relación con
la contracción control, cuando la duración de la estimulación fue de Is. Dicha
disminución fue del 20%.
Cuando la duración de la estimulación fue de 2s, la amplitud de la con-
tracción obtenida fue similar a la de la contracción control. En el caso de
la estimulación a lOOHz durante 3s se obtuvieron contracciones cuya amplitud
media fue superior a la correspondiente a los controles (25% de aumento).
DISCUSIÓN
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disminución con frecuencias de estimulación de 1/1 min.
Otros autores, (CZTERNASTY y BRUNNER, 1975,1980; CZTERNASTY y cois..
1980), utilizando el músculo anterior oblicuo del abdomen de Procanibarus
clark-í-i (flexor fásico), se obtiene una disminución de más del 50% en el poten-
cial de placa motora, cuando se aplica un segundo estímulo tras uno condicio-
nante o control. Tal rapidez en la fatiga es característico de músculos que
solo son requeridos en momentos excepcionales. En estos casos el axón excitador
rápido se mantiene eléctricamente "callado" en la mayor parte del tiempo y
es solo utilizado en ocasiones de rápida actividad, sobre todo en respuestas
de escape (ATWOOD, 1981).
Al someter al músculo a una situación repetida, con intervalos de tiempo
entre estímulos de O.5s, se produce una drástica disminución en la amplitud
de las contracciones registradas, lo que indica una fatiga rápida que sí pode-
mos explicar por un agotamiento en los niveles de neuro transmisor de la moto-
neurona rápida.
La recuperación se consigue con una pausa en la estimulación de un
tiempo no inferior a 1 min, tiempo suficiente para que se produzca el restable-
cimiento de la normalidad en la membrana presináptica.
Por otra parte, se puede apreciar una disminución lenta y progresiva
en la amplitud de las contracciones cuando se estimula la preparación a inter-
valos de tiempo creciente 2.5, 5 y 10 minutos, lo que da idea de una especie
de "agotamiento" a largo que debe ser producido por otros mecanismos distintos
a la falta de vector transmisor (ZUCKER y BRLWER, 1977).
Se sometió a la preparación a una estimulación de elevada frecuencia,
capaz de provocar un estado de tetanización, y, tras la consiguiente fatiga,
se aplicaron estímulos a distintos intervalos de tiempo. Se observa una recupe-
ración (respuesta máxima), en un tiempo alrededor de 10 min — que paradójica
mente es el tiempo que tarda la preparación experimental en demostrar
un agotamiento a largo plazo — para después fatigarse lentamente y tras 30
minutos obtenerse una contracción de amplitud similar a la obtenida a los 30
segundos tras la fatiga que sucede a la tetanización.
Para conseguir la tetanización del músculo adductor del dactilopodito
de Proccmbapus cta^k-ii- , es necesario el empleo de frecuencias de estimulación
de lOOHz. No es extraño que no se consiga tetanización con frecuencias de
estimulación del orden de 50Hz, pues la salida de quanta de neurotransmisor
en cada impulso es pequeña. Incluso en las fibras musculares que alcanzan
amplios potenciales sinápticos, la salida de neurotransmisor no excede a 10
quanta por impulso. En la mayoría de las sinapsis la salida es mucho menor
(GOVIND y ATWOOD, 1982).
Las anomalías que aparecen durante la fase de fatiga tras tetanización,
pueden deberse al comportamiento del axón inhibidor. ATWOOD (1973) dice que
puede ser empleado en los movimientos rápidos para aumentar la velocidad de
respuesta de la musculatura. GOVIND y ATWOOD (1982) admiten que el inhibidor
puede ser empleado para aumentar la frecuencia de respuesta muscular. Es de
destacar que la prolongada estimulación a elevada frecuencia provoca una fatiga
transitoria en la transmisión inhibidora {WIERSMA, 1961).
Por ello se puede argumentar que, tras la estimulación a elevada fre-
cuencia (lOOHz) de las vias nerviosas (axón lento e inhibidor), se provocará
la contracción mantenida de las fibras tónicas, aunque seguramente durante
este proceso se verán inhibidas por la actuación de los terminales nerviosos
inhibidores. Al prolongarse la estimulación, se fatigan transitoriamente las
sinapsis inhibidoras (tal vez por agotamiento en los niveles de neurotransmisor
inhibidor), lo que se traducirá en una aparente recuperación de la tensión
por parte de las fibras tónicas y por lo tanto del músculo adductor. Esto expli
caria las oscilaciones que se observan en los registros obtenidos.
La facilitación es un gradual incremento en la liberación de neurotrans
misor por sucesivos impulsos nerviosos (WIERSMA, 1961). Existen dos tipos de
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facilitación en crustáceos: Facilitación a largo plazo, o progresivo aumento
en la contracción ante la estimulación con frecuencias de 5-20 Hz durante
10-20 min, que siempre es un efecto lento y progresivo (ATWOOD y cois., 1975),
y Facilitación a corto plazo, o aumento en la respuesta contráctil por parte
del músculo ante un estímulo después de la aplicación de un tren de elevada
frecuencia durante cortos periodos de tiempo (GOVIND y ATWOOD, 1982).
En nuestro caso, se obtiene la facilitación utilizando frecuencias de
estimulación de lOOHz mantenida durante 3s, lo que indica que el fenómeno
correspondería a una facilitación a corto plazo.
m^iimnWm
(íáfijfoiF*.- ?s; r^/íüj^g/./'{i1 ¡' /;/: tÍ/://H/ffi
Figura 3 a b y £.
Tetañízaciones y fases de fatiga del músculo objeto de nuestro estudio.
Estimulación de 100 Hz.
a.- Obsérvese, en la parte central del registro, la recuperación espontánea
en la fase de fatiga.
b_.- Obsérvese la con trac tur a en la fase de fatiga que alcanza la tensión de
tétanos.
c.- Obsérvese que en la fase de fatiga más o menos anómala, se obtiene de nuevo
el mismo nivel de tensión muscular provocado durante la fase de tetanización.
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