CHAP V Les Plantes Trangéniques

CHAP V : Les plantes transgéniques
Introduction
1973 - Identification du plasmide Ti dans la bactérie Agrobacterium tumefaciens. Ce
plasmide permet d'accueillir le gène porteur d'un caractère recherché, qu'il est en
mesure d'introduire dans le génome d'une plante
1983 - Première plante transgénique (tabac)
Premier transfert de gène opérationnel réalisé chez un végétal, obtenu simultanément
par les équipes de Monsanto et Agrigenetics (USA).
L'équipe de Jeff Schell et Marc Van Montagu à Gand obtient des tabacs transgéniques
résistant à un antibiotique
1985 - Première plante transgénique résistante à un insecte
1987 - Première plante transgénique tolérante à un herbicide total
1988 - Première plante "pharmacienne"
Première céréale transgénique (maïs)
1994 - Premier légume transgénique commercialisé (aux États-Unis).
l'Administration des produits pharmaceutiques et alimentaires (FDA) autorise la mise sur
le marché d'une tomate transgénique. Dénommée FlavSavr, cette tomate se conserve
plus longtemps et a plus de goût que les tomates ordinaires.
1997 - Premier tabac producteur d'hémoglobine
France : première autorisation de la culture transgénique : maïs résistant à la pyrale.
1999 : 40 millions d’hectares de plantes transgéniques dans le monde.
2002 : 58,7 millions d’ha de plantes transgéniques cultivées dans le monde.
Les croisements classiques et la

transformation génétique. Lors d’un
croisement classique, tous les
caractères sont mélangés. Lors d’une
transformation génétique, seul un
caractère nouveau est apporté à la
plante.
A droite : la tomate sauvage (Lycopersicon pimpinellifolium). La tomate cultivée est

issue de cette espèce sauvage qui fait environ 1 cm de diamètre. Les premières
améliorations ont été réalisées par sélection et croisement génétique
Avant – 7000 ans : présence en Amérique du Sud de la téosinte

-7000 ans à 1494 : domestication du mais au Mexique. Apparition des premiers mais.
1494 à 1947 : introduction du mais en Europe par Christophe colon puis adaptation au climat
1947 à actuellement : extension des zones de culture. Apparition des premiers hybrides.
Introduction
I. Étude physiologique et génétique d’Agrobacterium
1) Description de la bactérie
Agrobacterium à la surface d’une

plante. L’adhésion est une étape
obligatoire pour le transfert du T-DNA.
Agrobacterium tumesfaciens
Galle du collet ou
crown gall
Introduction
2) Le matériel génétique de la bactérie
a) La découverte du support génétique
Agrobacterium
Introduction
b) Relation entre le plasmide et la galle du collet
Introduction
b) Relation entre le plasmide et la galle du collet
c) Structure du plasmide Ti
Région T-DNA
Région de
virulence (Vir)
Plasmide Ti en
microscopie
électronique
Plasmide Ti

Région spécifique à la
bactérie : origine de
réplication…
Région T-DNA
Région de
virulence (Vir)
Gène de catabolisme des opines

T-DNA
Cytokine
Opine
Auxine
Bordure
Bordure
droite
gauche
Le plasmide Ti
Opc :
catabolisme
des opines
Région Vir
Origine de
réplication
Plasmide Ti
Région T DNA
ISOPENTYL ADENINE TRYPTOPHAN

TRANSFERASE (IPT) MONOOXYGENASE NOPALINE SYNTHETASE
INDOLEACETAMIDE
HYDROGENASE
Synthèse des cytokines Synthèse de l’opine

(croissance végétale) ( seul Agrobacterium tumefaciens
possède les enzymes lui permettant
Synthèse de l’auxine d’utiliser l’opine comme source de
(croissance carbone et d'azote.
végétale)
La région du T-DNA
Introduction
3) L’infection de la plante
a) Stratégie de la bactérie
Introduction
3) L’infection de la plante
a) Stratégie de la bactérie
b) Les étapes de l’infection
La plante est Des composés Agrobacterium se

endommagée phénoliques sont dirige vers la
libérés par la « blessure » par
plante chimiotactisme
Les composés phénoliques libérés par les plantes blessée

Lors du processus d’infection d’une plante par Agrobacterium tumefaciens, diverses molécules
« signal » sont libérées par le tissu végétal blessé. Ces molécules sont, soit des composés
phénoliques, soit des oses et osides, produites par le tissu végétal. Ces molécules peuvent
jouer le rôle de chimioattractants et/ou d’inducteurs de gènes de virulence chez la bactérie
A - acetosyringone
B - coniferyl alcohol
C - coniferin
D - ethyl ferulate
E - bromoacetosyringone
Des composés phénoliques vont activer la protéine membranaire de

la bactérie VirA. Cette activation se fait par auto-phosphorylation
La protéine VirA activée va activée la protéine VirG par

phosphorylation
La protéine VirG activée va induire la transcription des autres

gènes Vir
La protéine VirG activée va induire la transcription des autres

gènes Vir
Les protéines VirC et virD sont des endonucléases. Elles vont

couper le TDNA (un seul brin)
Le brin de T-DNA est pris en charge par des protéines VirE. Une
protéine VirD se fixe à l’extrémité de l’ADN
Les protéines VirB forment un canal entre la bactérie et la

plante. Le complexe VirE-VirD-tDNA pénètre dans la cellule
végétale par ce canal
Les protéines VirB forment un canal entre la bactérie et la

plante. Le complexe VirE-VirD-tDNA pénètre dans la cellule
végétale par ce canal
Le complexe VirE-VirD-tDNA se dirige vers le noyau de la cellule

Le t-DNA est inséré dans l’ADN de la plante

Les oncogènes provoque la multiplication de la cellule végétale il

y a production des opines.

Principales étapes de l’infection d’une plante par Agrobacterium



Région T-DNA
ADN génomique
Région de virulence
de la plante
(Vir)
Région T- Région T-DNA intégrée

DNA à l’ADN de la plante
Plasmide Ti
Région spécifique à la bactérie :

origine de réplication… Région T-DNA intégrée
à l’ADN de la plante
Multiplication cellulaire Synthèse des opines

Infection d’une plante

 : Agrobacterium
« infecte » la cellule
végétale. Elle transfert
son ADN-T
   : l’ADN-T s’intègre
dans l’ADN génomique
de la plante
 : il y a multiplication
anarchique des cellules.
Formation de la galle du
collet


Introduction
II. Utilisation d’Agrobacterium en génie génétique
Introduction
1) Les contraintes lors de la transformation de la
plante
Le gène est présent

Infection par
uniquement dans les
Agrobacterium
cellule de la galle du
(recombinant ou non
collet
recombinant)…
Production d’une cellule transgénique par infection naturelle de

la plante
Infection par
Infection par
Agrobacterium Agrobacterium d’une
cellule végétale
Culture des cellules sur

milieu nutritif
Suspension de cellules
végétales Call
Formation de call (amas
de cellules
indifférenciées)
Développement de cellules Culture des cellules sur

différenciées milieu nutritif +
hormones végétales
Développement d’une
plante
Production d’une plante transgénique


Au laboratoire

On cherche à obtenir des plantes
entièrement transformées (pas
seulement quelques cellules) et
par un gène bien précis

 : on insère dans l’ADN-T un
gène bien précis
 : le vecteur recombinant est
  réintroduit dans Agrobacterium
: Agrobacterium « infecte » la
cellule végétale. Elle transfert
son ADN-T
: on induit une multiplication
des cellules (par apport
d’hormones végétales) = culture
in vitro
: il y a formation de cal
: à partir des cals, on
développe des plantes entières

 


Introduction
plante
2) Les modifications du plasmide Ti

Des gènes "marqueurs" sont associés au transgène, afin de permettre la mise en évidence des
tissus végétaux dans lesquels ce transgène a été introduit. Ces gènes marqueurs peuvent
conférer à la plante la résistance à un facteur de sélection (par exemple la résistance aux
antibiotiques), ou lui apporter une caractéristique facilement identifiable dans une expérience de
laboratoire. L'utilisation de gènes marqueurs permet d'identifier le tissu dans lequel le transgène
a été introduit et qui a permis de régénérer des plantes entières, permettant ainsi de réduire les
coûts de production et la quantité de travail nécessaires

Les zones bleues démontrent que le gène 'marqueur' introduit (transgène), s'exprime dans des
embryons de riz

Introduction
plante
3) La transformation du végétal
Introduction
plante
4) Les nouvelles stratégies
a) La technique par recombinaison
Technique par recombinaison

Introduction
plante
4) Les nouvelles stratégies
a) La technique par recombinaison
b) Technique du vecteur binaire
Système binaire
SYSTEME BINAIRE
PLASMIDE POSSEDANT LA PETIT PLASMIDE

REGION VIR
Région T-DNA
Responsable du transfert du T-
DNA localisé sur le petit Origine de Origine de Gène de
plasmide réplication réplication chez résistance à
chez E. coli Agrobacterium un
antibiotique
Multiplication
Marqueur de du plasmide Multiplication du Sélection des
transformation Cassette de chez Coli plasmide chez bactéries
de plante clonage Agrobacterium transformées
par le plasmide
Sélection de la
plante Permet d’insérer le
transformée gène dans la région T-
par le T-DNA DNA
Système binaire
Gène Marqueur de sélection

d'intérêt chez la plante
Bordure droite
Bordure gauche
ADN-T
Marqueur de Vecteur binaire

sélection bactérien
Origine de réplication Origine de réplication

Coli Agrobacterium
Système binaire
RégionVir
Utilisation
de la
nopaline
Plasmide Ti
désarmé
Origine de
réplication
Système binaire
Système binaire
Introduction
III. Les autres techniques de transformation de plantes
1) Les vecteurs viraux
Les caulimovirus sont des virus phytopathogènes transmis de plante à plante par les
aphides (pucerons) selon un mode non circulant, en utilisant la stratégie "facteur d'aide à
la transmission", FAT. Les virions ne sont pas ingérés par l'insecte, mais restent fixés à la
cuticule qui recouvre les pièces buccales et l'appareil digestif antérieur. La liaison virus-
vecteur est assurée par une ou plusieurs protéines virales n'appartenant pas à la capside
du virion.
Le virus de la mosaïque du chou-fleur (CaMV), est le plus connu des caulimovirus
Les systèmes viraux

Les geminivirus
Les geminivirus : suivi de l’infection d’une plante à l’aide d’un

geminivirus portant le gène GFP
Introduction
2) La voie des protoplastes
Obtention d’un protoplaste

Introduction

2) La voie des protoplastes
3) La biolistique

Transformation des
cellules végétales des
explants
Sélection d’une plante traditionnelle pour Culture des cellules

fabriquer des explants transformées (call)
Plantes transgéniques
Introduction
IV. Importance de la transgénèse végétale
1) Les domaines d’applications de la transgénèse
végétale
a) Dans le domaine agronomique
La pyrale

La pyrale est actuellement l'insecte nuisible au maïs le plus
fréquemment rencontré.

A l'état adulte, la pyrale du maïs est un papillon de 25 mm d'envergure
qui dépose généralement sa ponte à la face intérieure des feuilles
encore rassemblées en cornet.
La durée d'incubation des oeufs varie de 5 à 15 jours suivant la
température ambiante.

Après leur éclosion, les chenilles "vagabondent" sur la plante en
cherchant à entrer à l'intérieur du cornet. Elles s'alimentent alors du
limbe des jeunes feuilles encore repliées, ce qui provoque des
perforations régulières symétriques par rapport à la nervure médiane.

La présence des larves de pyrale provoque l'échaudage des épis du
fait de l'affaiblissement de la plante et des difficultés de circulation de
la sève : il en résulte des difficultés de récolte, des pertes de temps et
des chutes d'épis. Par ailleurs, les orifices de pénétration favorisent le
développement d'agents pathogènes responsables de pourritures.
La pyrale en France est responsable de pertes de rendement de l'ordre
de 3 à 7% /ha, même avec un traitement chimique.
Fiche d’identité de Bacillus thuringiensis

Le nom Bacillus thuringiensis (Bt) a été introduit en 1911 par le
biologiste allemand E. Berliner, pour décrire la bactérie pathogène
trouvée dans des pupes d'insectes familiers des silos à grains en
Thuringe. Cette bactérie avait déjà été identifiée en 1901 par le
japonais S. Ishiwata comme étant l'agent responsable d'une maladie
touchant les élevages de vers à soie ( Bombyx mori).

C'est une bactérie Gram-positive qui fait partie du groupe des bactéries
à endospores.
Bt est très proche phylogénétiquement de B. cereus et B. anthracis, et
certains auteurs pensent qu'il s'agit de 3 variétés d'une seule espèce.
Les souches de Bt sont classées en sous-espèces (= variétés de Bt) en
fonction de la nature des antigènes des flagelles des cellules
végétatives (sérotype flagellaire).

Elle est très commune dans les sols et on la rencontre
occasionnellement à la surface des feuilles ce certaines plantes. Elles se
rencontre très fréquemment dans les greniers et les silos à grains (dans
lesquels les conditions climatiques stables, l’obscurité et l’abondance de
larves d’insectes sont des facteurs favorables à sa multiplication).
Cycle de multiplication de Bacillus thuringiensis

2 phases :

Végétative : multiplication des cellules de manière exponentielle
stationnaire : phase durant laquelle il peut y avoir différenciation

cellulaire (sporulation). C’est durant cette phase qu’est produite la
toxine sous forme de cristaux
Mode d’action de la toxine
Les toxines produites par Bacillus thuringiensis sont appelées protéines Cry ou d-endotoxine. A
retenir :
• Chaque toxine possède un spectre d’insecte cibles spécifiques
• Une bactérie peut produire une à cinq toxines différentes
• Des souches différentes peuvent produire les mêmes types de toxine
• Les souches de même sérotype flagellaire peuvent produire des toxines différentes
• Les gènes codant pour ces toxines sont localisés le plus souvent sur des plasmides de grande taille.
Ces plasmides sont conjugatifs. Le gène codant pour la synthèse de la toxine peut donc être transféré
dans d’autres souche de Bt. De plus, on a constaté que certains de ces gènes étaient intégrés dans le
génome de la bactérie par suite d’évènements de transposition.
• Ces endotoxines sont des protoxines : elles doivent être activées dans le tube digestif de l’insecte
par des protéases.
Crystal Dissolution du crystal et activation Fixation de la toxine sur des

de la toxine récepteurs de l’épithélium intestinal
δ Endotoxine
Pro-toxine
Récepteur Perforation
Spore
Toxine activée
Germination des spores et prolifération

des bactéries
Utilisation de Bacillus thuringiensis comme biopesticide

Le biopesticide issus de Bacillus thuringiensis est constitué d’un mélange de spores et de cristaux
protéiques. Ce mélange est obtenu après mise en culture, croissance et sporulation dans un fermenteur. Ce
biopesticide est surtout utilisé dans le Nord des USA (globalement, il ne représente que 2 % des
insecticides totaux).
Ce produit offre de nombreux avantages par rapport aux produits phytosanitaires :
- Aucune menace pour l’environnement, le consommateur et le producteur
- Coûts de développement réduits
- Taux de découverte de nouvelles souches élevé
- Homologation de nouveaux produits simple, rapide et peu coûteuse

Il existe quelques désavantages ou contraintes :
- Le fait que la bactérie sporule peut paraître comme néfaste pour certains pays (Allemagne,
Japon). Par génie génétique, on cherche à créer des bactéries non sporulantes
- Certaines cellules végétatives synthétisent une toxine à large spectre pouvant être toxique pour
l’homme
- Une trop forte spécificité d'hôte posant problème pour les cultures attaquées par divers
ravageurs et pour la rentabilité de l'industriel
- Une durée de vie trop faible car les toxines sont rapidement dégradées par les UV
- Une dégradation par les micro-organismes du sol
- La difficulté d'atteindre certains insectes qui se nourrissent au niveau des racines, de la sève, ou
qui se développent à l'intérieur des tissus de la plante.
Implication du génie génétique

Le problème principal de l’utilisation de Bt en tant que biopesticide est que la toxine produite sous forme de cristal
est rapidement détruite dans l’environnement. Le pesticide biologique est donc efficace mais très peu de temps. De
plus, la présence de spores peut présenter des risques pour la santé. Plusieurs voies de recherche sont en cours :

- Transgénèse chez des bactéries non sporulantes (genre Pseudomonas) : afin de lutter contre certains
ravageurs foliaires ou racinaires, des Pseudomonas ont été transformés pour produire des toxines protégées en
quelque sorte de l'environnement, mais les Etats Unis n'ont pas autorisé la libération de ces micro-organismes
transgéniques; ces Pseudomonas sont donc tués avant utilisation et forment une espèce de capsule protectrice
pour la toxine.

- Transgénèse chez une bactérie Clavibacter xyli subsp. cynotontis : ce pathogène qui envahit les tissus
conducteurs de la plante y libère la toxine, il peut s'agir d'une manière de transformer la plante lorsque d'autres
méthodes échouent.

- Transgénèse chez des algues unicellulaires et cyanobactéries : afin d'améliorer la survie de Bt dans
l'eau et son maintien dans la zone superficielle où s'alimentent les larves de moustiques, on peut envisager de
transformer ces organismes qui vont être consommés par ces larves

- Transgénèse chez une plante supérieure : celle-ci serait capable de produire dans toutes ses cellules une
substance la protégeant d'un ravageur. Le pesticide devient donc systémique : il protège la plante entière et les
ravageurs sont exposés à la toxine dès les stades où ils y sont le plus sensible. Il s’agit du maïs transgénique.
L’information génétique codant pour la toxine est introduite dans une cellule végétale Agrobacterium tumefaciens,
biolistique…).
Lignées de maïs sont actuellement autorisées à la mise en culture en France :
Le maïs 176 (société Novartis) résistant à la pyrale (insecte ravageur). C'est celui-ci qui a été cultivé en
France sur 1 965 hectares en 1998
Le maïs MON 810 (société Monsanto) résistant à la pyrale et à la sésamie (2 insectes ravageurs)
Historique de l’utilisation de Bacillus thuringiensis en tant que biopesticide
1911 : identification de la bactérie comme agent entomopathogène par Berliner

1928 : lancement d’un projet en Europe afin d’utiliser Bacillus thuringiensis comme biopesticide contre le
pyrale du maïs
Année 60 : plusieurs formulations industrielles sont produites aux USA et en URSS
1970 : H Dulmage et C. Beegle assemblent la première collection de souches de Bt, comprenant
notamment la souche HD-1, très utilisée par la suite comme biopesticide
1977 : isolement de la première souche de Bt toxique envers des moustiques, alors qu'on ne connaissait
jusque là que des souches toxiques pour les Lépidoptères
1981 : clonage du premier gène codant pour une protéine Cry
1983 : isolement d'une souche de Bt toxique envers certains Coléoptères. La découverte de nouvelles
souches de Bt actives sur d'autres cibles que les Lépidoptères a favorisé la mise en place de programmes de
screening : prospection de souches et recherche des couples souche-cible(s)
1991 : on estime à 40 000 le nombre de souches de Bt isolées ; arrivée sur le marché des premières
plantes transgéniques synthétisant des toxines
Le blé résistant aux maladies fongiques

Pour diminuer les pertes dues aux attaques fongiques sur les céréales, on
utilise :

- La résistance naturelle des plantes
- La variation des pratiques culturales
- Les traitements antifongiques
- L’ingénieurerie génétique

Dans ce denier cas, on intègre au patrimoine génétique de la
plante une nouvelle information lui permettant de développer
une résistance vis-à-vis d’une maladie fongique.
Tilletia tritici
Ex : pour diminuer l'impact d'une maladie fongique appelée charbon du
blé et causé par le champignon Tilletia tritici. Leur idée a été d'intégrer,
dans le génome du blé, le gène d'un virus infectant les
champignons. Ce gène code pour la protéine KP4 (Killing Protein 4) qui
inhibe le développement fongique. La transformation a abouti à la
production de molécules antifongiques dans toute le plante. L'activité
antifongique est stable au cours des générations et et permet de réduire
de manière significative les attaques.
Augmentation du rendement

Dans la mesure où un important accroissement des surfaces cultivées en riz demeure peu probable, puisqu'au mieux les
surfaces vont plutôt diminuer du fait de l'urbanisation et de l'industrialisation, de nouvelles stratégies de création de
variétés de riz à plus fort rendement en grain sont considérées comme de la plus grande importance par l'Institut
International de Recherche sur le Riz (IRRI). Par ailleurs, les programmes mondiaux de recherche sur le riz suggèrent
que l’on s’approche des limites d'accroissement du rendement par des méthodes conventionnelles, et montrent que tous
les efforts visant à un accroissement de la productivité par sélection classique se heurtent à de sérieuses difficultés.

Le rendement en grains est la résultante de deux processus: la photosynthèse, qui produit les hydrates de carbone, et le
partage des allocations qui détermine la quantité d'hydrates de carbone emmagasinés dans le grain.
Les principales approches utilisées pour pallier à ces difficultés sont les suivantes:

• Modification du niveau des hormones endogènes (auxines et cytokinines, connues pour jouer un rôle
déterminant dans le remplissage du grain chez les céréales), en introduisant par la technique Agrobactérium des gènes
codant pour les enzymes qui contrôlent la biosynthèse de ces hormones. Le développement du grain est associé à des
flux successifs d'hormones : une vague de cytokinine provoque un accroissement rapide du nombre de cellules du jeune
grain et une vague d'auxine entraîne une accumulation massive d'hydrates de carbone et de protéines.
• Retarder le vieillissement (la sénescence) des feuilles, en introduisant des gènes codant des protéines de
la voie de biosynthèse des cytokinines, afin d'augmenter la teneur en hormones dans les feuilles à un stade où
ordinairement elles commencent à flétrir. Ainsi, en prolongeant la durée de production d'hydrates de carbone
dans les feuilles par photosynthèse, on accroît la quantité de ces molécules accumulées dans le grain.
« Parmi les gènes introduits dans le maïs transgénique de Novartis, autorisé à la culture en France,
se trouve un gène de résistance à un antibiotique commun, l'ampicilline. Ce gène est un marqueur,
c'est-à-dire qu'il permet d'identifier les plantes ayant intégré les gènes d'intérêt (de synthèse de la
toxine Bt dans le cas du maïs). Ce gène n'a ensuite plus aucune fonction, mais Novartis n'a pas
jugé utile de l'extraire des plantes transgéniques. Les études menées par l'OMS (Organisation
Mondiale de la Santé) sur les antibiotiques montrent que ceux-ci deviennent de moins en moins
efficaces, les bactéries qui y sont soumises devenant insensibles au bout d'un certain temps. De
nombreux scientifiques craignent que la dissémination de gènes de résistance aux antibiotiques à
partir des plantes génétiquement manipulées n'accélère ce processus entraînant l'apparition de
bactéries pathogènes contre lesquels les antibiotiques seraient impuissants » Michael Curti et
Luca Willig
Introduction

végétale

b) Dans le domaine alimentaire
La tomate traditionnelle
La tomate de Flavr Savr doit être moissonnée
mûrit sur le plant- ayant tandis qu'elle est encore
pour résultat une plus verte et ferme de sorte
grande saveur. Elle est qu'elle ne soit pas écrasée
modifiée de sorte sur le chemin au
qu'elle reste ferme supermarché.
après récolte.
La tomate traditionnelle
est pulvérisée avec
l'éthylène après
l'expédition pour induire
la maturation.
Amélioration de la qualité de l’huile de Colza

L'introduction de gènes de désaturases dans les plantes oléagineuses permet d'augmenter la proportion
d'acides gras insaturés, particulièrement recherchés en alimentation humaine pour diminuer les risques
cardio-vasculaires

• L’introduction d’une copie antisens du gène de la ∆9 désaturase dans le colza permet l’hybridation de
l’ARN messager sens de l’enzyme avec l’ARNm antisens codé par le gène introduit artificiellement.
L’expression du gène natif est ainsi inhibée et l’huile produite sera enrichie en acide stéarique (35% au lieu
de 1%).
• La production d’acide gamma linolénique a été obtenue chez le colza par introduction du gène codant
pour la ∆6 désaturase de la bourrache.
Introduction
végétale
c) Dans le domaine industriel
Introduction
végétale
c) Dans le domaine industriel
d) Dans le domaine de la santé
La pomme de terre vaccin

Afin de lutter contre les maladies virales, il est courant de produire des antigènes de surface du virus par
des levures modifiées ce qui permet d’obtenir des quantités suffisantes pour élaborer un vaccin (exemple
contre l’hépatite B qui infecte actuellement deux milliards de personnes dans le monde). Malheureusement,
le système enzymatique des levures catalysant les modifications post-traductionnelles ne permettent pas
une production de l’antigène sous sa forme native (il est nécessaire de compléter la maturation de la
protéine par des réactions chimiques).

Les plantes possèdent deux gros avantages :

- Un arsenal enzymatique permettant toutes les modifications post traductionnelles
- Une consommation orale du vaccin directement via la plante

On a donc modifiées génétiquement des plants afin que les Ag de surface de l’hépatite B soient
exprimés à la surface de la pomme de terre. Des souris ayant consommés périodiquement cet OGM
ont développé une réponse immunitaire anti-virus hépatite B.
L'immunisation orale semble résulter de l'activation des tissus lymphoïdes dans l'intestin. Lors de ces
administrations orales, des adjuvants sont souvent ajoutés afin de réduire la dégradation des protéines
d'intérêt. Dans le cas de la pomme de terre, il semble que le tubercule puisse servir à l'avenir d'adjuvant
puisqu'il contient des inhibiteurs de protéinases
Introduction
végétale
2) Le marché des OGM
Superficie mondiale d’OGM. Répartition par caractère génétiquement modifié
Superficie en millions d’hectare

Pays
96 97 98 99
Caractère qualité < 0,04 < 0,1 < 0,1 < 0,1
Résistance aux insectes et tolérance aux herbicides 0 < 0,1 0,3 2,8
Résistance aux insectes 1,05 4 7,7 8,8
Tolérance aux herbicides 0,65 7 19,8 28,4

Carte OGM
1998
Carte OGM
1999
Carte OGM
2000
Carte OGM 2000 Carte OGM 2000

version non version
gouvernementale gouvernementale

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CHAP V : Les plantes transgéniques

CHAP V : Les plantes transgéniques

Les croisements classiques et la

A droite : la tomate sauvage (Lycopersicon pimpinellifolium). La tomate cultivée est

Avant – 7000 ans : présence en Amérique du Sud de la téosinte

Agrobacterium à la surface d’une

Gène de catabolisme des opines

ISOPENTYL ADENINE TRYPTOPHAN

Synthèse des cytokines Synthèse de l’opine

La plante est Des composés Agrobacterium se

Les composés phénoliques libérés par les plantes blessée

Des composés phénoliques vont activer la protéine membranaire de

La protéine VirA activée va activée la protéine VirG par

La protéine VirG activée va induire la transcription des autres

La protéine VirG activée va induire la transcription des autres

Les protéines VirC et virD sont des endonucléases. Elles vont

Les protéines VirB forment un canal entre la bactérie et la

Les protéines VirB forment un canal entre la bactérie et la

Le complexe VirE-VirD-tDNA se dirige vers le noyau de la cellule

Le t-DNA est inséré dans l’ADN de la plante

Les oncogènes provoque la multiplication de la cellule végétale il

Principales étapes de l’infection d’une plante par Agrobacterium

Principales étapes de l’infection d’une plante par Agrobacterium

Région T- Région T-DNA intégrée

Région spécifique à la bactérie :

Multiplication cellulaire Synthèse des opines

Principales étapes de l’infection d’une plante par Agrobacterium

Infection d’une plante

Principales étapes de l’infection d’une plante par Agrobacterium

Le gène est présent

Production d’une cellule transgénique par infection naturelle de

Culture des cellules sur

Développement de cellules Culture des cellules sur

Production d’une plante transgénique

Production d’une plante transgénique

Production d’une plante transgénique

Production d’une plante transgénique

Production d’une plante transgénique

Production d’une plante transgénique

Technique par recombinaison

PLASMIDE POSSEDANT LA PETIT PLASMIDE

Gène Marqueur de sélection

Marqueur de Vecteur binaire

Origine de réplication Origine de réplication

Les systèmes viraux

Les geminivirus : suivi de l’infection d’une plante à l’aide d’un

Obtention d’un protoplaste

Sélection d’une plante traditionnelle pour Culture des cellules

Fiche d’identité de Bacillus thuringiensis

stationnaire : phase durant laquelle il peut y avoir différenciation

Mode d’action de la toxine

Crystal Dissolution du crystal et activation Fixation de la toxine sur des

Germination des spores et prolifération

Historique de l’utilisation de Bacillus thuringiensis en tant que biopesticide

1911 : identification de la bactérie comme agent entomopathogène par Berliner

Superficie mondiale d’OGM. Répartition par caractère génétiquement modifié

Superficie en millions d’hectare

Résistance aux insectes 1,05 4 7,7 8,8

Tolérance aux herbicides 0,65 7 19,8 28,4

Carte OGM 2000 Carte OGM 2000

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