U.B.

A
Universidad de Farmacia y Bioquímica

Trabajo practico Nº 8
Electricidad

Fecha de entrega:

Integrantes: Amaya Lucas

Salas Cintia
Commisso Florencia
Lescano Ayelen
Carneiro Matías
Larra Sofía
Massoni Julieta

Comisión: 1C

Grupo: 5

Docentes: Idoyaga Ignacio

Meseri Emiliano
Objetivos.

Realizar una serie de controles al espectrofotómetro para asegurar el buen

funcionamiento del mismo. Los controles a realizar son:
• Control de luz espuria
• Control de volumen mínimo
• Control de cubetas
• Control de centro de banda
• Control de linealidad
• Control de veracidad.

Materiales y métodos:

Ver guia de Tp fisica 2010

Fundamentos.

Los espectrofotómetros miden la absorción molecular y transmitancia de una solución.

Si se hace incidir luz sobre una solución que contiene un soluto absorbente, la
intensidad de la luz (I0), luego de atravesar dicha solución, se vera atenuada (It). La
transmitancia es la relación entre la intensidad de la luz incidente y la luz transmitida:

T = It
I0
La absorbancia se define como:

A = - log T

La ley de Lambert-Beer expresa la relación directa que existe entre absorbancia y

concentración de una solución diluida en estudio:

A = a.l.cc

Siendo a la absortividad (ml/g.cm), l el paso óptico de la cubeta (cm.) y cc la

concentración (g/ml).
Para verificar el buen funcionamiento del espectrofotómetro, los controles a realizar se
basan en:
• Control de la luz espuria: La luz espuria es la luz que llega al detector sin
atravesar la muestra. Se mide en porcentaje de transmitancia, y debe ser menor al 1%
para que los resultados que arroje el aparato sean aceptables. De lo contrario, se
producen desviaciones negativas de la ley de Lambert-Beer, afectando, sobre todo, la
linealidad en zonas de alta absorbancia y en el extremo UV del aparato.
Para detectar la luz espuria utilizamos una cubeta de obstrucción de paso de luz en
los rangos habituales de trabajo.
• Control de volumen mínimo: Toda la luz debe pasar por la solución y no por
arriba o por el menisco, ya que esto produciría resultados erróneos.
• Control de cubetas: Permite comprobar las cualidades ópticas y de construcción
de las cubetas. Para ello se mide la absorbancia de las cubetas llenas de solución
diluida de colorante, tomando una como referencia y verificando las desviaciones de
las demás. La diferencia no debe ser mayor al 1%
• Control de centro de banda: Indica la correlación entre la longitud de onda leída
en el selector y la real. De existir una diferencia entre estas, se debe realizar la
correlación correspondiente. Esta desviación se traduce como un desplazamiento de
la longitud de onda y se mide en nm. Este control se realiza con el método del punto
isosbéstico, es decir, la longitud de onda a la cual dos formas isoméricas de la misma
sustancia (en nuestro caso rojo fenol alcalino y rojo fenol acido), en concentraciones
equivalentes, tienen igual absorbancia. Cuando el punto isosbéstico experimental
coincide con el teórico, sabemos que el aparato trabaja a las longitudes de onda
indicadas en el selector.
• Control de la linealidad: Indica la linealidad de respuesta del sistema y, por lo
tanto, el rango de utilidad para cada longitud de onda. Para realizar este control
leemos soluciones de concentraciones crecientes de colorante que se sabe que
cumple con la ley de Lambert-Beer, es decir, que presenta un comportamiento lineal
entre absorbancia y concentración.
• Control de la veracidad: Contrastando los datos obtenidos con los de una
solución patrón de absorbancia conocida, se estudia la veracidad del equipo.
Resultados:

Parte 1: Control de espuria.

λ = 550 nm
T % = 100 a 584nm
Cubeta de obstrucción: T % = 0

Parte 2: Control de volumen mínimo.

λ = 550 nm

Tabla nº1: Valores correspondientes para el gráfico de Absorbancia en función del

volumen agregado.

Vol agregado (X ± 0.5)ml Absorbancia (X ± 0.001)

0,5 0,079
0,7 0,081
1 0,086
2 0,282
2,5 0,273
3 0,263
3,5 0,252
4 0,242
4,6 0,239

Gráfico nº1: Absorbancia en función del volumen agregado de Fenol Básico.

0,3

0,25

0,2
Abs.

0,15 Serie1

0,1

0,05

0
0 1 2 3 4 5
Vol. agregado de Fenol Básico (ml)

Volumen mínimo: 4 ml
 Parte 3: Control de cubetas.

Cubeta de referencia: T % = 60,7

Otra Cubeta: T % = 59,8

Parte 4: Control de centro de banda.

Tabla nº2: Valores correspondientes para el gráfico absorbancia en función de la

longitud de onda.

λ Absorbancia (X ± 0.001)
Ácido Básico
400 0,326 0
410 0,341 0
420 0,375 0
430 0,387 0
440 0,372 0
450 0,329 0,023
460 0,266 0,062
470 0,194 0,109
472 0,18 0,12
474 0,163 0,13
476 0,147 0,143
478 0,133 0,154
480 0,117 0,165
482 0,103 0,178
484 0,088 0,191
486 0,077 0,207
488 0,062 0,221
490 0,051 0,237
500 0 0,329
510 0 0,448
520 0 0,572
530 0 0,702
540 0 0,849
550 0 1,005
560 0 1,036
570 0 0,797
580 0 0,379
590 0 0,091
600 0 0
 Gráfico nº2: Absorbancia en función de la longitud de onda.

Punto isosbéstico = 476 nm

Parte 5: Control de linealidad fotométrica.

Parte6: Control de veracidad.

λ = 560 nm

Medidas Absorbancia (X ± 0.001)

1 0,522
2 0,522
3 0,525
4 0,524
5 0,517
6 0,520
7 0,520
8 0,521
9 0,520
10 0,517

X = 0.5208
SD: 2,616188916*10 −3
2SD: 5,232377832*10 −3