Estudio morfológico y de cultivo de bacilos Gram+ y

negativos
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ASOCIACION PRIVADA UNIVERSIDAD SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE ENFERMERIA

Nombre: Vanessa Otero Yparraguirre

Curso: Microbiología y parasitología.
Tema: Estudio morfológico y de cultivo de
bacilos Gram+ y negativos.
Docente: Esther Valencia.
Aula: 29
Mesa: 2
Año: 2011

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INTRODUCCION

Clostridium y Bacillus:

Los clostridios son bacilos grandes móviles, Gram+, con esporas que deforman la célula bacteriana
y anaerobios.

Habitan en el suelo o en el intestino de los animales y el hombre en donde viven como Saprofitos,
osea, los saprofitos son organismos que se alimentan de materia orgánica muerta o detritos,
formados por materiales vegetales muertos.

Patógenos:

 Clostridium tetani

 Cl. Perfringens CONDICIONES ANAEROBIAS

 Cl. Botullinum

Especies de Bacillus antrhacis es una especie patógena causante del ántrax o carbunco en
animales como ovinos, bovinos, equinos, porcino y caprinos, incluye al humano.

En tejidos proliferan y forman capsulas.

BACILLUS SUBTILIS ESPECIE SAPROFITICA EXTREMADAMENTE PATOGENA.

MATERIAL

 Placas con agar nutritivo y agar sangre con Bacillus antrhacis.

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 Un tubo con caldo de tioglicolato o caldo de Robertson (caldo de carne) con Clostridium.

 Laminas coloreadas con GRAM, esporas y cápsulas de Bacillus y Clostridium.

PROCEDIMIENTO

 Observar las colonias en agar sangre. Bacillus anthracis no produce hemolisis, Bacillus
Subtilis si hay hemólisis.

B. Antrhacis (NO HEMOLISIS) B. Subtilis ( SI HEMOLISIS)

 Observar en agar nutritivo colonias grandes y rugosas.

Bacillus Antrhacis

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 Observar el crecimiento de Clostridium en el Medio de tioglicolato y Caldo de Carne en el

fondo del tubo (anaerobiosis).

 Observar al microscopio la morfología de los bacilos.

PROTOCOLO

Caracteristicas Agar Sangre Agar Tejidos ESPORAS GRAM

Hemolisis nutritivo Capsula
Colonias
Bacillus Festoneadas
antrhacis Irregulares X +
Turbidez en el
fondo.
Bacillus Aerobia.
subtilis Película
móvil.

Caldo carne ESPORAS GRAM

Clostridium Crecimiento de x Bacilos GRAM+
colonias sobre carne.

ESTUDIO MORFOLOGICO Y DE CULTIVO DE BACILOS GRAM NEGATIVOS

INTRODUCCION:

En el grupo de bacterias GRAM – es importante la familia ENTEROBACTERIACEAE sus especies

habitan en el tracto intestinal normal o enfermo del ser humano y los animales.

Forman parte de la flora normal intestinal Escherichia coli, Kiebsiella, Proteus y otras. Solo se
convierten en patógenas cuando afectan tejidos no intestinales.

Enterobacterias patógenas:

1. Serotipos de E. Coli

2. Shigella.

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3. Salmonella.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION:

 Se utilizan medios selectivos: Agar Mac Conkey que contiene lactosa y permite y las
clasifica en lactosas + (rosadas) y negativas (transparentes).

 Agar SS (salmonella- shigella)

OTROS BACILOS GRAM - :

Vibrio cholerae: Agente etiológico del cólera QUE PRODUCE diarreas profusas y deshidratación.

MATERIALES

 Placas con Agar Mac Conkey sembradas con E. Coli, Klebsiella, Salmonella y Shigella.

 Placas de Agar SS, Salmonella y Shigella.

 Laminás coloreadas con GRAM de E. Coli, Klebsiella, Salmonella y Shigella.

PROCEDIMIENTO

 Observar y describir las características de las colonias.

 Observación microscópica de las bacterias.

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Salmonella Shigella

LOS 2 SON LACTOSA NEGATIVA

LA SHIGELLA TIENE UNA MEMBRANA

TRANSPARENTE

 La E. COLI cuando ha metabolizado muestra un color amarillo. Su contenido es de citrato

negativo.

 La Shigella es citrato negativo y por la superficie muestra un color rojizo pero se atenúa en la
base y cambia a color mostaza.

Rojo por ser Lactosa Negativa. Mostaza por ser Lactosa Positiva.

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 La Salmonella dependiendo de la lactosa y el citrato.

Lactosa - Citrato+

COPROCULTIVO, UROCULTIVO Y HEMOCULTIVO

COPROCULTIVO:

Es una prueba diagnóstica utilizada para el aislamiento de bacterias, mediante el cultivo de

heces, permite conocer la causa de las gastroenteritis u otras infecciones intestinales, cuando el
microorganismo esta aislado se le hace un antibiograma.

Esta prueba se realiza a las personas manipuladoras de alimentos para saber si poseen agentes
infecciosos.

MATERIALES

 Placas con Agar Mac Conkey sembradas con muestras de heces.

 Pacas con Agar SS sembradas con muestras de heces.

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 Placas de Agar TCBS sembradas con muestra de heces.

 Caldo de enriquecimiento Slenito.

Placa de Agar TCBS:

PROCEDIMIENTO

HECES

Examen Coloración de
directo Gram

Diluir 5gr. En 3 ml de Salina

sembrar en placas de:

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Agar Mac Conkey Agar SS Agar Manitol Salado Agar TCBS Agar Sabouraud Caldo Selenito

Incubar a 37° C x 24 hrs.

SELECCIONAR COLONIAS SOSPECHOSAS

REALIZAR IDENTIFICACION EN MEDIOS DIFERENCIALES

ANTIBIOGRAMA

CONCLUSIONES

Los clostridios son bacilos grandes móviles, Gram+, con esporas que deforman la célula bacteriana
y anaerobios, pueden habitar en el mismo intestino tanto del hombre como de los animales.

El bacilo Subtilis es el que más riesgo patógeno posee.

Forman parte de la flora normal intestinal Escherichia coli, Kiebsiella, Proteus y otras. Solo se
convierten en patógenas cuando afectan tejidos no intestinales.

Medio selectivo para el aislamiento y cultivo de Vibrio cholerae, Vibrio parahemolyticus y otras
especies de Vibrio a partir de heces, agua y alimentos contaminados.
También es conocido como Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa, o como Agar Selectivo para
Vibrios.

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