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Índice
1. Introducción
2. El Microscopio
3. La parte mecánica del Microscopio
4. Sistema Óptico
5. Sistema de Iluminación
6. Campo del Microscopio
7. El Microscopio Electrónico
8. Mantenimiento del Microscopio
9. Conclusiones
10. Bibliografía
1. Introducción
En su afán de llegan siempre más lejos en la investigación de la naturaleza de lo que los límites
de sus órganos sensoriales le imponen, el hombre ha construido múltiples instrumentos que le
han permitido acceder allí donde los sentidos no podían penetrar.
Así como el telescopio abrió a la humanidad las puertas de lo infinitamente grande, el
microscopio hizo posible conocer los mundos de dimensiones ínfimas, entre ellos la célula,
base de la vida. Se contaban así las bases de las modernas ciencias biológicas que hasta bien
entrada la edad moderna se habían fundado en las observaciones directas.
Los microscopios son aparatos que, en virtud de las leyes de formación de imágenes ópticas
aumentadas a través de lentes convergentes, permiten la observación de pequeños detalles de
una muestra dada que a simple vista no se percibirían.
2. El Microscopio
El microscopio compuesto es un instrumento óptico que se emplea para aumentar o ampliar las
imágenes de objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio óptico común está
conformado por tres sistemas:
a. El sistema mecánico está constituido por una serie de piezas en las que van instaladas
las lentes que permiten el movimiento para el enfoque.
b. El sistema óptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de tal manera que
produce el aumento de las imágenes que se observan a través de ellas
c. El sistema de iluminación comprende las partes del microscopio que reflejan,
transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observación a través
del microscopio.
En los siguientes puntos describiremos cada uno de los sistemas nombrados, a fin de tener un
conocimiento completo del microscopio.
La parte mecánica del microscopio comprende: el pie, el tubo, el revólver, el asa, la platina, el
carro, el tornillo macrométrico y el tornillo micrométrico. Estos elementos sostienen la parte
óptica y de iluminación, además permite los desplazamientos necesarios para el enfoque del
objeto.
• El pie. Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general
forma de Y o bien es rectangular
• El tubo tiene forma cilíndrica y está ennegrecido internamente para evitar las molestias
que ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los oculares.
• El revólver. Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales se enroscan los
objetivos. Al girar el revólver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en
posición de trabajo, la cual se nota por el ruido de un piñón que lo fija.
• La columna, llamada también asa o brazo, es una pieza colocada en la parte posterior
del aparato. Sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo inferior se adapta
al pie.
• La platina. Es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación u objeto que
se va a observar. Presenta un orificio en el eje óptico del tubo que permite el paso de
los rayos luminosos a la preparación. La platina puede ser fija, en cuyo caso
permanece inmóvil; en otros casos puede ser giratoria, es decir, mediante tornillos
laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.
• Carro. Es un dispositivo colocado sobre la platina que permite deslizar la preparación
con movimiento ortogonal de adelante hacia atrás y de derecha a izquierda.
• El tornillo macrométrico. Girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del
microscopio, deslizándose en sentido vertical gracias a una cremallera. Estos
movimientos largos permiten el enfoque rápido de la preparación.
• El tornillo micrométrico. Mediante el movimiento casi imperceptible que produce al
deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y nítido de la preparación. Lleva
acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm que se utiliza para precisar
sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.
4. Sistema Óptico
• Los oculares. Los oculares están constituidos generalmente por dos lentes, dispuestas
sobre un tubo corto. Los oculares generalmente más utilizados son los de: 8X, 1OX, 12.5X,
15X. La X se utiliza para expresar en forma abreviada los aumentos.
• Los objetivos. Los objetivos producen aumento de las imágenes de los objetos y
organismos y, por tanto, se hallan cerca de la preparación que se examina. Los objetivos
utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersión.
• Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la
preparación. En la cara externa llevan una serie de índices que indican el aumento que
producen, la abertura numérica y otros datos. Así por ejemplo, si un objetivo tiene estos
datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es planacromático, su aumento 40 y
su abertura numérica 0,65, calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El número de
objetivos varía con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los
objetivos secos más frecuentemente utilizados son: 6X, 1OX, 20X, 45X y 60X.
• El objetivo de inmersión está compuesto por un complicado sistema de lentes. Para
observar a través de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre
el objetivo y la preparación, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite
de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 1 OOX y se distingue por uno o dos
círculos o anillos de color negro que rodea su extremo inferior.
5. Sistema de Iluminación
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la
preparación u objeto que se va a observar en el microscopio. Comprende los siguientes
elementos:
o El espejo. Tiene dos caras: una cóncava y otra plana. Goza de movimientos en
todas las direcciones. La cara cóncava se emplea de preferencia con
iluminación artificial, y la plana, para iluminación natural (luz solar).
Modernamente se prescinde del espejo en la fabricación de microscopios, ya
que éstos traen incorporada una lámpara colocada en el eje del microscopio.
o Condensador. El condensador está formado por un sistema de lentes, cuya
finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparación. El
condensador se halla debajo de la platina. El condensador puede deslizarse
sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo que determina su
movimiento ascendente o descendente.
o Diafragma. Generalmente, el condensador está provisto de un diafragma-iris,
que regula su abertura y controla la calidad de luz que debe pasar a través del
condensador.
• Poder separador. También llamado a veces poder de resolución, es una cualidad del
microscopio, y se define como la distancia mínima entre dos puntos próximos que
pueden verse separados. El ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando su
distancia es menor a una décima de milímetro.
Se denomina "campo del microscopio" al círculo visible que se observa a través del
microscopio. También podemos definirlo como la porción del plano visible observado a través
del microscopio.
Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es
inversamente proporcional al aumento del microscopio. Para medir el diámetro del campo del
microscopio con cualquiera de los objetivos se utiliza el micrómetro, al que se hará referencia
en el siguiente punto.
Tipos de Microscopios
Existen diversas clases de microscopios, según la naturaleza de los sistemas de luz, y otros
accesorios utilizados para obtener las imágenes.
• El microscopio compuesto u óptico utiliza lentes para ampliar las imágenes de los
objetos observados. El aumento obtenido con estos microscopios es reducido, debido a
la longitud de onda de la luz visible que impone limitaciones. El microscopio óptico
puede ser monocular, y consta de un solo tubo. La observación en estos casos se hace
con un solo ojo. Es binocular cuando posee dos tubos. La observación se hace con los
dos ojos. Esto presenta ventajas tales como mejor percepción de la imagen, más
cómoda la observación y se perciben con mayor nitidez los detalles.
• Microscopio estereoscópico. El microscopio estereoscópico hace posible la visión
tridimensional de los objetos. Consta de dos tubos oculares y dos objetivos pares para
cada aumento. Este microscopio ofrece ventajas para observaciones que requieren
pequeños aumentos. El óptimo de visión estereoscópica se encuentra entre 2 y 40X o
aumento total del microscopio.
• Microscopio de campo oscuro. Este microscopio está provisto de un condensador
paraboloide, que hace que los rayos luminosos no penetren directamente en el
objetivo, sino que iluminan oblicuamente la preparación. Los objetos aparecen como
puntos luminosos sobre un fondo oscuro.
• Microscopio de fluorescencia. La fluorescencia es la propiedad que tienen algunas
sustancias de emitir luz propia cuando inciden sobre ellas radiaciones energéticas. El
tratamiento del material biológico con flurocromos facilita la observación al microscopio.
• Microscopio de contraste de fases. Se basa en las modificaciones de la trayectoria de
los rayos de luz, los cuales producen contrastes notables en la preparación.
7. El Microscopio Electrónico
Con estos poderosos instrumentos, que utilizan el flujo de electrones y las radiaciones
electromagnéticas así como la aplicación de técnicas histoquímicas y bioquímicas, además del
empleo de marcadores radiactivos, se han logrado grandes avances en la biología celular.
Además se utiliza un micrómetro ocular que lleva una escala graduada en décimas de
milímetros. Se coloca el micrómetro objetivo sobre la platina y se enfoca el microscopio hasta
que las líneas de la escala graduada aparezcan nítidas. Luego se hace superponer la escala
del ocular y se toma como referencia las primeras divisiones en que una línea del micrómetro
objetivo y una línea del micrómetro ocular coincidan o se superpongan exactamente.
Luego, por simple regla de tres, se calcula el valor en mieras de cada división ocular. Veamos
un ejemplo. Si 9 divisiones del micrómetro objetivo (0,09mm) equivalen a 30 divisiones del
micrómetro ocular, cada división del ocular equivaldrá a:
0,09 = 0,003 mm = 3 micras
30
Quiere decir que para el objetivo calibrado y el ocular utilizado, cada división del micrómetro
ocular equivale a 3 micras. Una vez obtenido este dato para cada objetivo en la forma que
hemos expuesto, teniendo el microscopio ocular podrían hacerse todas las mediciones que se
deseen. Para medir, por ejemplo, un Paramecium de una preparación, procedemos así:
haremos coincidir los extremos del microorganismo con las divisiones del micrómetro ocular. Si
la longitud del organismo es de 75 divisiones del micrómetro ocular, y cada división equivale a
3 mieras, la longitud del Paramecium será 75x3= 225 mieras. También se pueden efectuar
mediciones en el microscopio con cámara clara y utilizando una regla. En realidad, estas
medidas no son tan exactas como cuando se utilizan micrómetros por errores que se
introducen superponiendo imágenes.
• El microscopio debe estar protegido del polvo, humedad y otros agentes que pudieran
dañarlo. Mientras no esté en uso debe guardarse en un estuche o gabinete, o bien
cubrirlo con una bolsa plástica o campana de vidrio.
• Las partes mecánicas deben limpiarse con un paño suave; en algunos casos, éste se
puede humedecer con xilol para disolver ciertas manchas de grasa, aceite de cedro,
parafina, etc. Que hayan caído sobre las citadas partes.
• La limpieza de las partes ópticas requiere precauciones especiales. Para ello debe
emplearse papel "limpiante" que expiden las casas distribuidoras de material de
laboratorio. Nunca deben tocarse las lentes del ocular, objetivo y condensador con los
dedos; las huellas digitales perjudican la visibilidad, y cuando se secan resulta
trabajoso eliminarlas.
Para una buena limpieza de las lentes puede humedecerse el papel "limpiante" con éter y luego
pasarlo por la superficie cuantas veces sea necesario. El aceite de cedro que queda sobre la
lente frontal del objetivo de inmersión debe quitarse inmediatamente después de finalizada la
observación. Para ello se puede pasar el papel "limpialentes" impregnado con una gota de xilol.
Para guardarlo se acostumbra colocar el objetivo de menor aumento sobre la platina y bajado
hasta el tope; el condensador debe estar en su posición más baja, para evitar que tropiece con
alguno de los objetivos. Guárdese en lugares secos, para evitar que la humedad favorezca la
formación de hongos. Ciertos ácidos y otras sustancias químicas que producen emanaciones
fuertes, deben mantenerse alejados del microscopio.
9. Conclusiones
El Microscopio es: cualquiera de los distintos tipos de instrumentos que se utilizan para obtener
una imagen aumentada de objetos minúsculos o detalles muy pequeños de los mismos.
El microscopio simple o lente de aumento es el más sencillo de todos y consiste en realidad en
una lupa que agranda la imagen del objeto observado. Las evidentes limitaciones de este
sistema, conocido desde la antigüedad, y el desarrollo de la óptica y de la construcción de
lentes hizo que surgieran en el siglo XVII los microscopios compuestos, diestramente utilizados
por el holandés Antonie van Leewenhock en el estudio de la microfauna de los estanques y
charlas. Estas observaciones, unidas a las de Robert Hooke, establecieron la microscopia
como poderosa herramienta científica.
Dos lentes convexas bastan para construir un microscopio. Cada lente hace converger los
rayos luminosos que la atraviesan. Una de ellas, llamada objetivo, se sitúa cerca del objeto que
se quiere estudiar. El objetivo forma una imagen real aumentada e invertida. Se dice que la
imagen es real porque los rayos luminosos pasan realmente por el lugar de la imagen. La
imagen es observada por la segunda lente, llamada ocular, que actúa sencillamente como una
lupa. El ocular está situado de modo que no forma una segunda imagen real, sino que hace
diverger los rayos luminosos, que al entrar en el ojo del observador parecen proceder de una
gran imagen invertida situada más allá del objetivo. Como los rayos luminosos no pasan
realmente por ese lugar, se dice que la imagen es virtual.
Bibliografía