Nama Ni

l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

ANALI
SAPROSEDUR
Preparasial atdanmedi a
Mul a-mul asiapkanal atdanbahany angdi per lukan,ant aral ain36t abungr eaksi
dimana33t abungunt ukpept ondan3t abungunt ukmedi aPGYBgl ukosa2%,medi a
PGYBgl ukosa4%, danmedi aMRSB; 6er lenmey erdi mana3er lenmey erunt ukmedi a
PGYBgl ukosa2%,PGYBgl ukosa4%,danMRSBv olume50mLser ta3er lenmey er
untukmedi aPGYB gl ukosa2%,PGYB gl ukosa4%,danMRSB v olume200 mL;
ti
mbangananal it
ikunt ukmeni mbangmedi ay angdi butuhkan;al umuni um f oi
lunt uk
membungkusbubukmedi a;komporl istrikunt ukmemanaskanbahanagart erl
arut
sempur na;bul bdanpi petukur10mlunt ukmengambi laquadessebany ak5mL;
gelasukur100mLunt ukmengukuraquadessebany ak50mLdan200mLdan
sendokunt ukmengambi lbubukmedi a.Sedangkanbahany angdi butuhkany ai
tu
aquadessebagaipel arut,pept onunt ukpembuat anmedi ar acikPGYB danunt uk
pengencer an, gl
ukosa, dany eastext ractunt ukmembuatmedi aPGYBdanMRSB.
Selanjut nya,di l
akukan per si apan medi a MRSB dan PGYB.Per t
ama,unt uk
pembuat anmedi aMRSB, per hitunganmassat iapmedi ayangdi perl
ukany ai
tu:MRSB
5mL :5mLx52, 2/L=0, 261gr am ( 2x) ,MRSB50mL:50mLx52, 2/L=2, 61gr am
(2x),danMRSB200mL:5mLx52, 2/ L=10, 44gr am ( 2x).Kemudi an,ti
mbangbubuk
MRSB menggunakan t i
mbangan anal it
ik dan l et akkan al umuni um f oildiat as
ti
mbangananal it
iksebagaial asunt ukbahandi atast imbangan.Kemudi an,t i
mbang
bubuk MRSB sebany ak 0, 261 gr am l alul ar utkan ke dal am 5 mL aquades
menggunakant abungr eaksi .Kemudi ant imbangkembal ibubukMRSBmenggunakan
ti
mbangananal i
ti
ksebany ak2, 61gr am l al ul ar utkankedal am 50 mLaquades
didalam Er lenmey er,kemudi ant erakhi rt i
mbangkembal ibubukMRSBmenggunakan
ti
mbangananal it
iksebany ak10, 44gr am l alul ar utkankedal am 200 mLaquades
didalam er lenmey er.Kemudi anmasi ng- masi ngmedi atersebutdi panaskandi atas
komporl i
strikagarmedi at erlarutsempur na.Sel anj utnya,unt ukpembuat anmedi a
racikPGYB, perhi
tunganmassat iapmedi ay angdi per lukany ai
tu:
a.PGYB2%5mL b.PGYB4%5mL
2%Pept on:
(2/100)x5mL: 0,
1gr
am Pepton:(2/100)x5mL: 0,1gram
2%Glukosa:(2/
100)x5mL: 0,
1gram Glukosa:(4/100)x5mL: 0,2gram
1%yeastextr
act:(
1/100)x5mL:0,05 1%y eastextract
:(1/
100)x5mL: 0,
05
gr
am gram

c.PGYB2%50mL d.PGYB4%50mL
Pepton:(
2/ 100)x50mL:1gram Pepton:(
2/ 100)x50mL:1gram
Glukosa:(2/100)x50mL: 1gr
am Glukosa:(4/100)x50mL: 2gr
am
1% yeastext r
act:(
1/100)x50mL:0,
5 1% yeastext r
act:(
1/100)x50mL:0,
5
gram gram

e.PGYB2%200mL f
.PGYB2%200mL
Pepton:(
2/ 100)x200mL:4gr
am Pepton:(
2/ 100)x200mL:4gr
am
Glukosa:(2/100)x200mL:4gram Glukosa:(4/100)x200mL:8gram
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

Berdasar kanper hitunganmedi at ersebut ,pembuat anmedi aPGYB di bedakan

denganduaper l
akuany aitukonsent rasigl ukosa2%dan4%dandi buatdengant i
ga
volumey ang ber beday ait
u5 mL,50 mL,dan200 mL.Langkah per tamay ang
dil
akukany aitumeni mbangbubukpept onmenggunakant i
mbangananal i
tik.Pada
konsent rasigl ukosa2%dan4%v olume5mLpept ony angdi timbangy aitusebany ak
0,1gr am.Kemudi an,unt ukkonsent r
asigl ukosa2% dan4% padav olume50mL
bubukpept ony angdi ti
mbangy aitusebany ak1gr am danunt ukkonsent rasiglukosa
2% dan 4% pada v olume 200 mL di t i
mbang bubuk pept on sebany ak 4 gr am.
Selanjutny adi l
akukanpeni mbanganbubuky eastex tractmenggunakant imbangan
analit
ik.Padakonsent r
asigl ukosa2% dan4% v olume5mLy eastext racty ang
diti
mbangy aitusebany ak0, 05gr am.Kemudi an,unt ukkonsent rasigl ukosa2%dan
4% padav olume50mLy eastex tracty angdi ti
mbangy aitusebany ak0, 5gr am dan
untukkonsent rasigl ukosa2% dan4% padav olume200mLy eastext racty ang
diti
mbangy aitusebany ak2gr am.Ter akhi r,dilakukanpeni mbanganbubukgl ukosa
menggunakan t imbangan anal it
ik.Pada konsent rasigl ukosa 2% v olume 5 mL,
glukosadi timbangsebany ak0, 1gr am,sedangkanunt ukkonsent rasigl ukosa4%
volume5mL,gl ukosadi timbangsebany ak0, 2gr am.Kemudi an,unt ukkonsent rasi
glukosa2% v olume50mL,gl ukosadi t
imbangsebany ak1gr am,sedangkanunt uk
konsent rasigl ukosa 4% v olume 50 mL,gl ukosa di ti
mbang sebany ak 2 gr am.
Selanjutny a,unt uk konsent r
asigl ukosa 2% v olume 200 mL,gl ukosa di timbang
sebany ak4gr am, sedangkanunt ukkonsent rasigl ukosa4%v olume200mL, gl
ukosa
diti
mbangsebany ak8gr am.Sel anj utnya,semuabubukmedi ay angt el ahdi timbang
dimasukkankedal am wadah( t
abungr eaksiunt ukv olume5mLdaner lenmey er
untukv olume50mLdan200mL) .Set elahi tu,di tambahkanaquadessesuaidengan
volumepadaper hitunganmedi a,lal udi panaskandiat askomporl ist rikagarmedi a
danaquadesdapatt erlarutsempur na.Set elahi t
u,di l
akukanpeni mbanganpept on
untuk pengencer an dengan car a meni mbang pept on sebany ak 0, 35 gr am
menggunakan t i
mbangan anal i
tik.Kemudi an bubukpept on y ang t el ah di tmbang
dil
arutkanpada350mLaquades,l aludi pindahkankedal am tabungr eaksisebany ak
9mLmenggunakanpi petukur10mLdanbul b.Set elahpembuat anmedi asel esai,
l
angkahsel anj utny ayangdi lakukany aitumemper siapkanal atyanghar usdi steri
l
isasi
antaralain, 32cawanpet ri,
mi krotipbi r
uy angdi masukkandi dalam 4j ardan16buah
eppendor ft ube.Set elahi tu,bungkussemuaal aty angakandi st erili
sasidengan
menggunakanker taspay ung( ditutupdengankapast erlebihdahul uunt ukt abung
reaksidanEr l
enmey er)dankemudi andi ikatdenganmenggunakankar et.Set el
ahi tu,
masukkansemuaal atkedal am pl astikPEdanl akukanst erili
sasimenggunakan
autoklaf.

Pembuat
anStar
terAsam Lakt
atdanEt
anol
Mul
a-mul
asiapkanal
atdanbahany angakandi
gunakan.Al
aty
angdi
gunakan
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

ant aral ai nosel oopst erilyangdi gunakanunt ukmengambi lkul turL. lactisunt uk
pembuat anasam l akt atdankul turS.cerev isiaeunt ukpembuat anet anol ,duabuah
tabungr eaksiy angber isimedi aMRSBunt ukper bedaanper lakuansuhu30oCdan
37oCdanduabuaht abungr eaksiber i
simedi aPGYBunt ukper bedaankonsent rasi
2% dan4%,pi petv olumedanbul bunt ukmengambi lMRSB danPGYB,bunsen
sebagaisumberpanasunt ukmenj agasemuaal atdanbahant etapst er i
l,incubat or
o o
30Cdan37Cunt ukmengi nkubasikul tur.Sedangkanbahany angdi gunakanant ar a
l
ainkul urL.
t lact i
sy angakandi gunakansebagaikul turuj iunt ukmenghasi lkanasam
l
akt atdan kul tur S. cer evisiae y ang akan di gunakan sebagaikul turuj iunt uk
pembuat anet anol ,al kohol70% unt ukasept i
sdi ridanl ingkungan,MRSBsebagai
medi at umbuhunt ukL. l
act i
sdanPGYBsebagaimedi at umbuhunt ukS. cerev isiae.
Langkah per tama y ang di l
akukan y aitu mel akukan asept isl ingkungan dan
asept isdi ri
.Kemudi andi ambi lMRSBunt ukduat abungr eaksisebany ak5mlunt uk
masi ng-masi ngt abungdanbegi tupul aunt ukmedi aPGYB.Sel anjutny a,l akukan
ster i
lisasipadaosel oopdenganmencel upkanosekedal am al kohol70%kemudi an
dibakarmenggunakanbunsenhi nggamembar a.Lakukanst er il
isasisebany akt i
ga
kali.Kemudi anl akukani nokul asipadakul turL. l
act isdar iagarmi ringkedal am 5ml
MRSB sebany ak1osedenganmenggunakanosel oop.Set elahi tu,l akukanj uga
i
nokul asipadakul turS. cer evisiaedar iagarmi ri
ngkedal am 5mlMRSBsebany ak1
ose.Set elahi tumasi ng- masi ngt abungr eaksidi tutupdenganmenggunakankapas
dandi bungkusdenganker taspay ung,laludi kar et i
.Sel anj utny a,t abungr eaksiy ang
o o
ber i
sikul turL. l
act isdi i
nkubasikedal am incubat orpadasuhu30Cdan37Csel ama
24j am, sedangkant abungr eaksiy angber isikul turS. cer ev isi
aedi inkubasipadasuhu
o
30Csel ama24j am.Semual angkahker jadi l
akukandi dal am r uangl afdandi lakukan
dekatdenganBunsenagarbahany angdi gunakant etapst eri
lser taunt ukmencegah
kont ami nasi.
Scal eUpAsam Lakt atdanEt anol
Siapkan al atdan bahan y ang diper lukan.Al aty ang di per l
ukan ant aral ain
mi kropi petdanmi kr otipunt ukmengambi lkul turL. l
act isdanS. cerev i
siae,bunsen
sebagaisumberpanasunt ukmenj agasemuaal atdanbahant etapst er i
l,incubat or
o o
30Cdan37Cunt ukmengi nkubasikul tursel ama24j am.Sedangkanbahany ang
diper lukanant aral ainkul urL.
t l
actisyangber adadi dal am 5mlMRSBdankul tur
S.cer ev i
si aey angber adadi dalam 5mlPGYB,50mlMRSBdan50mlPGYBdi dalam
erlenmey er,alcohol 70%y angdi gunakanunt ukasept isdi ri danl ingkungan.
Langkahper t
amay angdi lakukanunt ukmel akukanscal eupy aitumel akukan
asept isl ingkungan dan asept i
sdi r
i.Kemudi an,di si apkan medi um MRSB 50 ml
didal am Er l
enmey ersebany akduabuahunt uksuhu30oCdan37oC, l
alusi apkanj uga
medi um PGYB50mldi dal am Er lenmey ersebany akduabuahunt ukkonsent r
asi2%
dan 4%.Set elah i tu,si apkan mi kropipetdan di asept ist er lebi h dahul u dengan
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

meny empr ot kanal coholpadabagi anbawahmi kropi petdankemudi andi lap,l alu
dipasang mi krotip.Sel anj utny a,di ambi lkul tur L. lact i
s dengan menggunakan
mi kropi petdankemudi andi i
nokul asi kankedal am 50mlMRSB( 30oC)dan50ml
MRSB( 37oC)masi ng- masi ngsebany ak1, 5mlkul tur.Set alahi t
u,lakukani nokul asi
pul aunt ukkul urS.
t cerev i
si ae kedal am 50mlPGYB ( 2%)dan50mlPGYB ( 4%)
o
masi ng- masi ngsebany ak1, 5mlkul tur.Kemudi andi inkubasipadasuhu30Cdan
o
37Cunt ukEr lenmey ery angber i
sikul turL. lact i
sdani nkubasipadasuhu30oCunt uk
Erlenmey ery angber isikul turS. cer ev i
siaemasi ng- masi ngsel ama24j am.Semua
l
angkahker jadi l
akukandi dal am r uangl afdandi l
akukandekatdenganBunsenagar
bahany angdi gunakant et apst eri
l ser taunt ukmencegaht er j
adinyakont ami nasi .
ProduksiAsam Lakt atdanEt anol
Siapkanal atdanbahany angakandi gunakan.Al aty angakandi gunakanant ar a
l
ain,mi kropi petdan mi kr otip unt uk mengambi lkul turL. lacti
s dan S. cer ev isiae,
bunsensebagaisumberpanasunt ukmenj agasemuaal atdanbahant et apst er il
,
o o
shakerwat er bat hdengansuhu30Cdan37Cunt ukmengi nkubasi kul tur.Sedangkan
bahany angdi perlukanant aral ainkul urL.
t l
act isy angber adadi dal am 50mlMRSB
o o
(30Cdan37C)dankul turS. cer ev isiaey angber adadi dalam 50mlPGYB( 2% dan
o o
4%) ,200mlMRSBdi dalam Er lenmey ersebany ak2buah( 30Cdan37C)dan200ml
PGYB di dal am Er l
enmey ersebany ak 2 buah ( 2% dan 4%) ,al cohol70% y ang
digunakanunt ukasept isdi ri danl ingkungan.
Langkah per tama y ang di lakukan y aitu mel akukan asept i
sl ingkungan dan
asept is di ri.Kemudi an,di siapkan medi um MRSB 200 mldi dal am Er lenmey er
o o
sebany akduabuahunt uksuhu30Cdan37C,l alusi apkanj ugamedi um PGYB200
mldi dal am Er lenmey ersebany akduabuahunt ukkonsent rasi2%dan4%.Set el ahi tu,
siapkanmi kr opipetdandi asept ist er l
ebihdahul udenganmeny empr ot kanal cohol
pada bagi an bawah mi kr opi pet dan kemudi an di l
ap,l alu dipasang mi krot i
p.
Sel anj utny a,di ambi lkul turL. lactisdenganmenggunakanmi kropipetdankemudi an
o o
diinokul asi kankedal am 200mlMRSB ( 30C)dan200mlMRSB ( 37C)masi ng-
masi ngsebany ak10ml .Set alahi tu,l akukani nokul asipul aunt ukkul urS.
t cer ev i
si ae
kedal am 200mlPGYB( 2%)dan200mlPGYB( 4%)masi ng-masingsebany ak10ml .
o o
Kemudi andi inkubasipadasuhu30C dan37C sel ama36j am unt ukEr lenmey er
o
yang ber isikul turL. lactis dan i nkubasipada suhu 30C sel ama 72 j am unt uk
Erlenmey ery angber isikul turS. cer ev isi
ae.Semual angkahker jadi lakukandi dalam
ruangl afdandi lakukandekatdenganBunsenagarbahany angdigunakant et apst eril
ser taunt ukmencegaht erjadi ny akont ami nasi .Set elahdi dapatkanhasi l,masi ng-
masi nghasi lpr oduksiasam l akt atdanet anolakandi anal isatotalpHdant ot algul a
DNSt iap12j am unt ukasam l akt atdant iap24j am unt uket anol.Kemudi andi lakukan
anal isat ot alasam dant ot alBALt i
ap12j am padahasi lpr oduksiasam l akt at ,ser ta
dilakukanpul aanal i
sat ot alet anoldenganmenggunakanet anolmet erpadaj am ke
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

72padahasi lpr oduksi etanol .

Anal isa
Anal isaTot alBALunt ukAsam Lakt at
Siapkan al atdan bahan y ang di perlukan.Al aty ang di perlukan ant aral ain
mi kropi petdan mi krotip unt uk mengambi lkul tur,t abung r eaksisebagaiwadah
pept onpadasaatmel akukanpr osespengencer an,v ortexunt ukmenghomogenkan
pept ondankul turunt ukpr osespengencer an,er lenmey ery angber i
simedi aMRSA,
cawan pet ri sebagai wadah unt uk menumbuhkan kul t
ur ,i nkubat or unt uk
mengi nkubasikul turpadasuhut er
tent u.Sedangkanbahany angdi perl
ukanant ara
l
ain kul turL. lactis dal am 200 mlMRSB,pept on y ang di gunakan unt uk pr oses
pengencer an,medi aMRSA sebagaimedi apadatunt ukmenumbuhkanBAL,ser ta
ker t
aspay ungunt ukmembungkuscawanpet ri
.
Langkahper t
amay angdi lakukany ai t
umel akukanasept i
sdi ridanl i
ngkungan.
Kemudi an dibuatmedi a MRSA unt ukmenumbuhkan sampelpada cawan pet r i
.
Namun,sebel umny adi lakukanpengencer ant er l
ebi hdahul udenganmenggunakan
o
pept on.Per tama,di ambi lkul tur L. lact i
s 30C sebany ak 1 mL menggunakan
mi kropi petdanmi krot i
pkemudi anpi ndahkankedal am t abungr eaksiy angber isi
-
1
pept onpengencer an10 .Lal u, tabungr eaksidiv or texagarhomogendanpi ndahkan
-1 -
2
1mLl arutanpept onpengencer an10 kedal am pept onpengencer an10 kemudi an
divor tex.Lakukanl angkahy angsamahi nggadi per olehpept ondenganpengencer an
-
6
10 . Setelahi tu,di ambi l4pengencer ant erakhirunt ukdi tumbuhkankul turBALpada
medi aMRSAdenganmet odepourpl at e.Per tama, di ambi l1mLpept onpengencer an
-
3
10 kemudi anpi ndahkankedal am cawanpet ridanset el ahi tut uangkanmedi a
MRSA kedal am cawan pet r
i,l alu dir atakan kul turdi dal am medi a dengan car a
mengger akkan cawan pet rimengi kut ipol a angka del apan.Set elah itu,cawan
dibungkusdenganmenggunakanker taspay ungdandi kar eti
,l al
udi i
nkubasipada
o
suhu 37C sel ama 24 j am.Lakukan haly ang sama unt uk pept on dengan
-
4 -5 -
6
pengencer an10 , 10 , dan10 .Langkahker jadiat asdi l
akukanj ugaunt ukkul turBAL
o
padaper lakuansuhu37C.Set elahdi inkubasi ,kemudi ant ot alBALdi hitungdengan
menggunakanmet odeSPC.Pengamat anunt ukT0 di l
akukanpengencer anhany a
-6
sampaipengencer an10 , sedangkanunt ukpengamat anpadaT12, T24danT36, harus
-9
dil
akukanpengencer anl agihi ngga10 kar enaj uml ahBALy angt umbuhsangat
bany ak.

1.AnalisaTotalGulaReduksiDNS
Padaanali
satotalgul
ar eduksiDNSasam lakt
atdanetanol,
alatdanbahany ang
diperl
ukanantaralainmi kr
opipetdanmi kr
otipuntukmengambi lkul
tur,eppendorf
tubesebagaitempatsampelunt uksent
ri
f ,cent
ugasi r
if
ugeuntukmemi sahkanpel l
et
dansuper nat
antpadasampel ,t
imbangananali
ti
kuntukmenimbangeppendor ft ube
yangber i
sisampel,botolsampl i
ngsebagaiwadahunt uksampelhasilsentr
ifugasi
,
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

l
abuukur100mlunt ukpengencer ansampel100x ,pipetv olumedanbul bunt uk
mengambi lsampeldanr eagenDNS,bunsensebagaisumberpanasunt ukmenj aga
agarbahantetapsteril
,al
umuni um foi
lunt
ukmenutupt abungy angberi
si sampeldan
reagen DNS agart idakmenguap,spekt rof
otometerunt ukmengukurabsor bansi
sampeluji,t
abungr eaksisebagaitempatmereaksikansampeldenganr eagenDNS,
kuvetdigunakan t
empatunt uk sampelpada spektrofotomet erdan gelas beker
sebagaiwadahunt uksampel .Sedangkanbahanyangdi per
lukanantaral ai
nkul t
ur
L.l
acti
sdanS. cer
ev i
siae,reagenDNSunt ukmenent ukankadargul apereduksidan
aquadesyangdigunakanunt ukpengencer
ansampel.

Langkahper t
amay angdi lakukany aitumengasept islingkungandanasept isdi ri.
Selanjutnyahasi lpr oduksiasam l aktatdanet anoldi ambilsebany ak10 mldan
dipindahkankedal am eppendor ftubedenganmenggunakanmi kropi
pety angt elah
diaseptissebel umny a.Langkahker jater sebutdi l
akukandekatdenganBunsenunt uk
mencegahkont ami nasi .Set elahi tu,eppendor ft ubey angber i
sisampeldi timbang
dengan menggunakan t imbangan anal iti
k.Kemudi an,dar idua sampely ang
o o
diti
mbang( asam l aktat30Cdan37C,et anol2% dan4%)di ambi lhasiltimbangan
yangpal i
ngkeci lunt ukmeni mbangaquadesy angakandi masukkanj ugakedal am
eppendor ft ube unt uk mel akukan pr oses sent rif
ugasi . Set elah itu, sampel
disentri
fugasidengan kecepat an 6000 r pm sel ama 10 meni tpada suhu 4oC.
Kemudi andi ambi lsuper natantdandi pindahkankedal am bot olsampl i
ng.Kemudi an
dil
akukanpengencer andenganmengambi lsampelsebany ak1mldandi pindahkan
kedalam l abuEr lenmey er100mldenganmenggunakanpi petv olumedankemudi an
ditambahkanakuadessampait andabat as, l
aludigojoghi nggahomogen.Set el
ahi tu,
sampel di pindahkan kedal am gel as beker . Sel anjutnya sampel di ambi l dan
dipindahkankedal am t abungr eaksidenganmenggunakanpi petv olumesebany ak2
ml .Kemudi an,diambi lr eagenDNSdandi t
ambahkankedal am t abungr eaksiy ang
ber i
sisampel .Kemudi ant abungdi tutupdenganmenggunakanal umuni um f oilagar
reagenDNSt idakmenguapsaatdi panaskan.Sel anj
ut nya,disiapkanpenangasai r
dan di panaskan hi ngga ai rmendi di
h.Set elah airmendi dih,masukkan t abung
kedalam penangas ai rdan di panaskan sel ama 10 meni t
.Set el
ah i tu,di ukur
absor bansi sampel padapanj anggel ombang540nm, laludicatathasi lpengukur an.

2.AnalisaTotalAsam
Padaanali
sat ot
alasam padahasi lproduksiasam l akt
at,al
atdanbahany ang
diperl
ukanantaralai
nmi kr
opipetdanmi krot
ipunt ukmengambi lkul
tur,eppendorf
tubesebagaitempatsampelunt uksent
ri
fugasi,centr
if
ugeunt ukmemi sahkanpel l
et
dansuper nat
antpadasampel ,timbangananali
t i
kuntukmeni mbangeppendor ft ube
yangber i
sisampel,botolsamplingsebagaiwadahunt uksampelhasi lsentr
ifugasi
,
l
abuukur100mlunt ukpengencer ansampel100x ,pipetvolumedanbul bunt uk
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

mengambi lsampeldanr eagenDNS,bunsensebagaisumberpanasunt ukmenj aga

agarbahant et
apst eri
l
,pipettetesyangdigunakanunt ukmengambi li
ndikatorPP,
Erlenmeyersebagait empatsampelunt ukmel akukant i
trasi
,bur
etsebagait empat
unt uk l
arutan sekunder( NaOH)unt uk pr oses tit
rasi.Sedangkan bahan y ang
diperl
ukanant aralainkulurL.
t lact
isdanS. cerevi
siae,akuadesuntukpengencer an
sampel danNaOHy angdigunakansebagailar ut
ansekunderpadapr osesti
trasi.

Langkahper tamay angdi lakukany ai

tumengasept i
sl ingkungandanasept isdiri.
Selanj ut
nyahasi lpr oduksiasam l aktatdi ambi lsebany ak10mldandi pindahkan
kedal am eppendor ft ube dengan menggunakan mi kropi pety ang telah di asept i
s
sebel umny a. Langkah ker jat er sebut di l
akukan dekat dengan Bunsen unt uk
mencegahkont ami nasi.Set elahi tu,eppendor ftubey angber isisampeldi ti
mbang
dengan menggunakan t imbangan anal i
tik.Kemudi an,dar idua sampely ang
o o
dit
imbang( asam l aktat30Cdan37C)di ambilhasi lt imbangany angpal i
ngkeci l
unt ukmeni mbangaquadesy angakandi masukkanj ugakedal am eppendor ftube
unt ukmel akukan pr osessent rifugasi .Set elah it
u,sampeldi sent ri
fugasidengan
o
kecepat an6000r pm sel ama10meni tpadasuhu4C.Kemudi andi ambi lsuper natant
dandi pi
ndahkankedal am bot olsampl ing.Kemudi andi l
akukanpengencer andengan
mengambi lsampelsebany ak2mldandi pindahkankedal am labuEr lenmey er100ml
denganmenggunakanpi petv olumedankemudi andi tambahkanakuadessampai
tandabat as,l al
udi gojoghi nggahomogen.Set elahi tu,sampeldi t
uangkedal am
Erlenmey erdan kemudi an di t
ambahkan 2 t et
es i ndi katorPP sebagaii ndikator
per ubahanwar napadasaatmel akukant i
trasi.Kemudi an,di masukkanNaOH0, 1M
kedal am bur ety angber fungsisebagail arutansekunderdandi l
ihatv olumeNaOH
sebel um dilakukant itr
asi.Set elahi tu,dil
akukant i
trasihi nggasampelber ubahwar na
menj adimer ahmuda.Set el
ahi tudi li
hatv olumeakhi rNaOH.

3.Anal isaTotalpH
Alatdanbahany angdigunakanpadaanal isatotalpHant aralai
nmi kropipetdan
mi kr
otip untukmengambi lkul t
ur,eppendorftubesebagait empatsampelunt uk
sentri
fugasi,centri
fuge untukmemi sahkan pell
etdan super natantpadasampel ,
ti
mbangan anal i
ti
kunt ukmeni mbang eppendor ftube y ang beri
sisampel ,botol
sampl ingsebagaiwadahunt uksampelhasi lsentr
ifugasi,bunsensebagaisumber
panasunt ukmenjagaagarbahant etapsteri
l
,pHmet erunt ukmengukurpHsampel .
Sedangkanbahany angdiperlukanantaralai
nkulturL.lacti
sdanS. cerevi
siae,buff
er
pH4danbuf f
erpH7y angdi gunakanuntukmengkal ibrasipHmet er,akuadesy ang
digunakanunt ukmengasept isprobepadapHmet er.

Langkahpert
amay angdil
akukanyait
umengasept
isli
ngkungandanasept
isdi
ri.
Sel
anjutnyahasi
lproduksiasam lakt
atdanetanoldiambi
lsebanyak10 mldan
di
pindahkankedal
am eppendorftubedenganmenggunakanmi kr
opi
petyangtel
ah
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

diaseptissebel umny a.Langkahker jatersebutdi l

akukandekatdenganBunsenunt uk
mencegahkont ami nasi.Set elahitu,eppendor ftubey angber isisampeldi timbang
dengan menggunakan t i
mbangan anal iti
k.Kemudi an,dar idua sampely ang
o o
diti
mbang( asam l aktat30Cdan37C,et anol2%dan4%)di ambi lhasilt i
mbangan
yangpal ingkeci lunt ukmeni mbangaquadesy angakandi masukkanj ugakedal am
eppendor ft ube unt uk mel akukan pr oses sent rifugasi. Set elah i t
u, sampel
disentrifugasidengan kecepat an 6000r pm sel ama 10 meni tpada suhu 4oC.
Kemudi andi ambi lsupernatantdandi pindahkankedal am bot olsampl i
ng.Set elahi tu,
pH met erdi kali
br asidenganmember sihkanpr obet erlebi
hdahul umenggunakan
aquadesdanl apmenggunakant isu.Set elahitu,masukkanpr obekedal am buf ferpH
7 dan t unggu hi ngga muncult ulsan cf
i m pada bagi an at as bar u di lakukan
pember sihankembal ipadapr obemenggunakanaquadesdanl apmenggunakant i
su.
Dilanj
ut kandenganmemasukkanpr obekedal am buf ferpH 4dant unggukembal i
hinggamuncult ul san cf
i m padabagi anat as,laludi lakukanpember sihanpr obe
kembal idenganaquadesdanl apmenggunakant i
su.Set elahdi kal
ibrasi,l akukan
per hi
tunganpH denganmemasukkanpr obekedal am wadahsampel( etanol2%,
o o
etanol 4%, asam lakt at37C, danasam l akt at30C)dancat athasilperhitunganny a.

4.Anal isaTotalEtanoldenganEt anol met er

Disi
apkanal atdanbahany angdi perlukanant aral aingel asukursebagaiwadah
untuksampel ,etanol meterunt ukmengukurkadarat aut otalet anolpadasampel ,
mikropipetdanmi krotipuntukmengambi lkul tur,eppendor ft ubesebagait empat
sampelunt uksent ri
fugasi,cent ri
fuge unt ukmemi sahkan pel letdan super natant
pada sampel ,t i
mbangan anal iti
k unt ukmeni mbang eppendor ftube yang ber isi
sampel ,botolsampl i
ng sebagaiwadahunt uksampelhasi lsent ri
fugasi
,bunsen
sebagaisumberpanasunt ukmenj agaagarbahant etapst eri
l.Sedangkanbahan
yangdi perl
ukanant ar alai
nkul urL.
t lacti
sdanS. cerev i
si ae.
Langkahper tamay angdi l
akukany aitumengasept islingkungandanasept isdir i
.
Selanjutnyahasilpr oduksietanoldi ambi lsebany ak10mldandi pindahkankedal am
eppendor ftubedenganmenggunakanmi kropipety angt elahdi aseptissebelumny a.
Langkah ker j
a t ersebut di lakukan dekat dengan Bunsen unt uk mencegah
kontami nasi
.Set elah i t
u,eppendor ft ube y ang ber isisampeldi t
imbang dengan
menggunakant imbangananal i
tik.Kemudi an, dariduasampel yangdi t
imbang( etanol
2% dan4%)di ambi lhasiltimbangany angpal i
ngkeci lunt ukmeni mbangaquades
yang akan di masukkan j uga kedal am eppendor ft ube unt uk mel akukan proses
sentri
fugasi.Setelahi tu,sampeldi sent ri
fugasidengankecepat an6000r pm sel ama
o
10meni tpadasuhu4C.Kemudi andi ambi lsuper nat antdandi pindahkankedal am
botolsampl i
ng.Sel anjut
nya sampeldi masukkan ke dal am gel as ukur100 ml .
Kemudi anbat anget anolmet ersebel um di gunakandibi last erlebihdahuludengan
menggunakanakuades.Set elahi tu,bat anget anolmet erdi masukkankedal am gel as
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

ukury angber
isisampel
.Di
li
hatskalapadaet anolmeter.Jikaterdapatkandungan
etanolpadasampel,makaetanolmeterakantenggelam sesuaiskalany
a.Ujietanol
di
lakukanpadajam ke72.Kemudianhasilyangdidapatkandicatatpadadat ahasil
prakti
kum.
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

Lapor
anPr
akt
ikum

Prakt
ikum Pr
oduksiEt
anol
Tabel:DataPri
mer
Perl
akuankonsent
rasigl
ukosa
Hasi
lPengamat
an
Konsent
ra Wakt
u
Tot
algul
areduksi
sigula pengamatan Kadar
(v/
v) (j
am) pH Absor
bans Konsent
ra et
anol
i si(
ppm)

0 6,
37 0,
196 12594

24 6,
33 0,
266 16968,
75
2%
48 4,
84 0,
023 1781,
25

72 4,
25 -
0,016 -
656,
25 0

0 6,
05 0,
929 58406,
25

24 6,
43 0,
342 21718,
75
4%
48 3,
8 0,
044 3093,
75

72 4,
4 0,
009 906,
25 0

PERHI
TUNGAN
Kur
vaSt
andarr
eagenDNS:
y=0,
0016x–0,
0055
Konsent
rasiGul
a2%

 Waktupengamatan( 0)  Waktupengamat
an(48jam)
y =0, 0016x-0,
0055 y =0,
0016x-0,
0055
0,
196 =0,0016x-0,0055 0,
023 =0,
0016x-0,
0055
0,
2015 =0,0016x 0,
285 =0,
0016x
125,
94x100 =x 17,
8125x100=x
12594 =x 1781,
25 =x

 Waktupengamatan(
24jam)  Waktupengamat
an( 72j
am)
y =0,0016x-0,
0055 y =0,0016x-0,
0055
0,
266 =0,0016x-
0,0055 -
0,616 =0,0016x-0,
0055
0,
2715 =0,0016x -
0,0105 =0,
0016x
169,
6875x100=x -
6,5625x100=x
16968,
75 =x -656,25 =x
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

Konsentr
asiGul
a4%
 Waktupengamat
an(0)  Waktupengamatan( 48j
am)
y =0,
0016x-0,
0055 y =0,0016x-0,
0055
0,
929 =0,
0016x-
0,0055 0,
044 =0,0016x-0,
0055
0,
9345 =0,
0016x 0,
0495 =0, 0016x
584,
06,25x100=x 30,
9375x100 =x
58406,
25 =x 3093,
75 =x

 Waktupengamatan(24jam)  Waktupengamat
an(72jam)
y =0,0016x-0,
0055 y =0,
0016x-0,
0055
0,
342 =0,0016x-0,
0055 0,
009 =0,
0016x-0,
0055
0,
3475 =0,0016x 0,
0145 =0,
0016x
217,
1875x100=x 9,
0625x100 =x
21718,
75 =x 906,25 =x

Tabel:DataSekunder(Dar
ikel
ompokl
ain)
Kel
ompokQE
Perl
akuankonsentr
asigl
ukosa
Hasi
lPengamat
an
Konsent
ra Wakt
u
Tot
algul
areduksi
sigula pengamatan Kadar
(v/
v) (j
am) pH Absor
bans Konsent
ra et
anol
i si(
ppm)

0 6,
38 0,
342 21718,
75

24 4,
53 0,
751 47281,
25
2%
48 3,
76 0,
701 44156,
25

72 3,
7 0,
421 26656,
25 0

0 6,
38 0,
220 14093,
75

24 4,
68 0,
231 14781,
25
4%
48 3,
84 0,
051 3531,
25

72 3,
7 0,
54 34093,
75 0

Konsent
rasiGul
a2%

 Waktupengamat
an(0)  Waktupengamat
an(48jam)
y =0,
0016x-0,
0055 y =0,
0016x-0,
0055
0,
342 =0,
0016x-
0,0055 0,
701 =0,0016x-0,
0055
0,
3475 =0,
0016x 0,
7065 =0,0016x
217,
1875x100=x 441,
5625x100=x
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

 Wakt upengamat
an( 24jam)  Waktupengamatan(72jam)
y =0,0016x-0,
0055 y =0,
0016x-0,
0055
0,751 =0,0016x-0,0055 0,
421 =0,
0016x-0,
0055
0,7565 =0,0016x 0,
4265 =0,
0016x
472,8125x100=x 266,
5625x100=x
47281,25 =x 26656,
25 =x

Konsentr
asiGul
a4%
 Waktupengamatan(0)  Waktupengamatan(48jam)
y =0,0016x-0,
0055 y =0,0016x-0,
0055
0,
220 =0,0016x-0,0055 0,
051 =0,0016x-0,
0055
0,
2255 =0,0016x 0,
0565 =0,0016x
140,
9375x100=x 35,
3125x100=x
14093,
75 =x 3531,
25 =x

 Waktupengamatan(24jam)  Waktupengamat
an(72jam)
y =0,0016x-0,
0055 y =0,0016x-0,
0055
0,
231 =0,0016x-0,0055 0,
054 =0,
0016x- 0,
0055
0,
2365 =0,0016x 0,
5455 =0,
0016x
147,
8125x100=x 340,
9475x100=x
14781,
25 =x 34093,
75 =x

1.Buat
lahkur
vahubunganant
arawakt
u,pH,
kadargl
ukosadanj
elaskansecar
a
si
ngkat
!

2.Bandi
ngkan dan Bahas dat a dalam kel ompok, mengapa t
erj
adi
per
bedaan/
per
samaandat
aser
tabandi
ngkandenganl
i
ter
atur
!

3.Bandingkandanbahasdatay angandaperolehdengandatadarikelompokl
ain
(dengankadargl
ukosayangsama) !mengapater
jadiper
bedaan/
persamaandata
sertabandi
ngkandenganl
it
eratur
!
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

4.Bandingkandanbahasdat ayangandaperol
ehdengandatadarikel
ompoklai
n
(dengankadarglukosayangber beda)
!mengapat
erj
adiperbedaan/
per
samaan
datasertabandi
ngkandenganli
terat
ur!

Pr
akt
ikum Pr
oduksiAsam Lakt
at

Tabel:DataPri
mer
Perl
akuanSuhu
Hasi
lPengamat
an
Suhu Waktu
Tot
algul
areduksi
(
Celci
us pengama Total
) tan(j
am) pH Tot
alBAL
Asam Absor
ba Konsent
r
nsi asi(ppm)

0 5,
55 0,
45% 0,
206 13218,
75 16,
7

12 4,
73 1,
035% 0,
270 17218,
75 54x107
30
24 4,
55 1,
125% 0,
250 15968,
75 52x107

36 4,
14 0,
855% 0,
091 6031,
25 64x107

0 5,
54 0,
45% 0,
230 14718,
75 204x106

12 4,
54 0,
855% 0,
222 14218,
75 68x108
37
24 4,
45 0,
945% 0,
217 13906,
25 97x106

36 4,
57 1,
125% 0,
088 5843,
75 5x106
726,

Kur
vaSt
andarr
eagenDNS:
y=0,
0016x–0,
0055
PadaSuhu30
 Waktupengamatan( 0)  Waktupengamatan( 24jam)
y =0, 0016x-0,
0055 y =0, 0016x- 0,
0055
0,
206 =0,0016x-0,0055 0,
250 =0,0016x- 0,0055
0,
2115 =0,0016x 0,
2555 =0,0016x
132,
1875x100=x 159,
6875x100=x
13218,
75 =x 15968,
75 =x

 Wakt
upengamat
an(
12j
am)  Wakt
upengamat
an(
36j
am)
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

 Waktupengamatan(12jam)  Waktupengamat
an(36jam)
y =0,0016x-0,
0055 y =0,
0016x-0,
0055
0,
222 =0,
0016x-0,0055 0,
088 =0,
0016x-0,
0055
0,
2275 =0,0016x 0,
0935 =0,
0016x
142,
1875x100 =x 58,
4375x100 =x
14218,
75 =x 5843,
75 =x

Hi
tunganCawanTot
alBAL
 PadaSuhu30  PadaSuhu37

1 1 1
- T0 ( -5 x219) - T0
=( -6 x36): =( -6 x204)
10 10 10

=16,
7 =204x106

1 1
- T12 =( -7 x54) - T12 =( -9 x68)
10 10

=54x107 =68x109

1 1
- T24 =( -7 x52) - T24 =( -6 x97)
10 10

=52x107

1
- T36 =( -7 x64)
10
=64x107

Tot
alasam
(
vol
NaOH-
vol
blanko)
×NNaOH×FP×100×BM
Tot
alasam =
W ×1000

 T0  T24
o 30OC o 30OC
(1,
75-
1,25)
×0,1×1×100×90 (2,5-
1,25)
×0,1×1×100×90
Tot
alasam = Tot
alasam =
1×1000 1×1000
=1,125
O
o 37C
(
2,3- 25)
1, ×0,
1×1×100×90
Tot
alasam =
1×1000
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

=0,
45
O
o 37C
(1,
75-
1,25)
×0,1×1×100×90
Tot
alasam =
1×1000
=0,
45
 T12
o 30OC
(
2,4-
1,25)
×0,
1×1×100×90
Tot
alasam =
1×1000
=1,
035
o 37OC
(
2,25-
1,25)
×0,1×1×100×90
Tot
alasam =
1×1000
=0,
855
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

Tabel:DataSekunder(
Dar
ikel
ompokl
ain)
Kel
ompokQE
Perl
akuansuhu
Hasi
lPengamat
an
Suhu Waktu
Totalgul
areduksi
(
Celci
us pengama Total
) tan(j
am) pH Tot
alBAL
Asam Absorba Konsentr
nsi asi( ppm)

0 5,
87 0,
18% 0,
388 24593,
75 >300

1644x106)
(

12 4,
59 0,
63% 0,
203 13031,
25 >300

30 1609x109)
(

24 4,
65 0,
09% 0,
146 9468,
75 <30

5x108)
(

36 4,
61 0,
765% 1,
003 63031,
25 5x106
726,

0 5,
79 0,
09% 0,
193 12406,
25 79x106

12 4,
88 0,
81% 0,
204 13093,
75 198x106
37
24 4,
57 0,
27% 0,
162 10468,
75 159x106

36 4,
51 0,
765% 1,
200 75343,
75 4x108
19,

Konsent
rasit
otalgul
areduksi30oC

 Waktupengamat
an(0)  Waktupengamat
an(12jam)
Y =0,
0016x-
0,0055 Y =0,
0016x-
0,0055
0,
388 =0,
0016x-
0,0055 0,
203 =0,
0016x-
0,0055
0,
3935 =0,
0016x 0,
2085 =0,
0016x
245,
9375x100 =x 130,
3125x100 =x
24593,
75 =x 13031,
25 =x

 Wakt
upengamat
an(
24j
am) y =0,
0016x
-0,
0055
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

0,
146 =0,
0016x-
0,0055 y =0,
0016x
-0,
0055
0,
1515 =0,
0016x 1,
003 =0,
0016x
-0,
0055
94,
6875x100 =x 1,
0085 =0,
0016x
9468,
75 =x 630,
3125x100 =x
63031,
25 =x
 Waktupengamatan(36jam)
Konsent
rasit
otalgul
areduksi37oC
 Waktupengamatan(0)  Waktupengamat
an(12jam)
y =0,
0016x-0,
0055 y =0,
0016x-
0,0055
0,
193 =0,
0016x-0,
0055 0,
204 =0,
0016x-
0,0055
0,
1985 =0,
0016x 0,
2095 =0,
0016x
124,
0625x100 =x 130,
9375x100 =x
12406,
25 =x 13093,
75 =x

 Waktupengamat
an(24jam)  Wakt
upengamat
an(36jam)
y =0,
0016x-
0,0055 y =0,
0016x-
0,0055
0,
162 =0,
0016x-
0,0055 1,
200 =0,
0016x-
0,0055
0,
1675 =0,
0016x 1,
2055 =0,
0016x
104,
6875x100 =x 753,
4375x100 =x
10468,
75 =x 75343,
75 =x
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

Tot
alBAL
1 1
T0=30oC SPC=1644x -6 T0=37oC SPC=79x -6
10 10
-3 -3
10 =4225 =1644x106 10 =3936 =79x106
10-4=2076 >300 10-4=2112
10-5=1853 10-5=552
10-6=1644 10-6=79

1 1
T12=30oC SPC=1609x -9 T12=37oC SPC=198x -6
10 10
-6
10 =3607 =1609x10 9
10-6=198 =198x106

10-7=2963 >300 10-7=TBUD

10-8=2128 10-8=3
10-9=1609 10-9=0

1 1
T24=30oC SPC=5x -8 T24=37oC SPC=159x -8
10 10
-6
10 =3902 =5x10 8
10-6=159 =159x108

10-7=2584 >30 10-7=4

10-8=5 10-8=0
10-9=564 10-9=578

1 1
T36=30oC SPC=145x -6 T36=37oC SPC=194x -6
10 10
10-6=145 =145x106
10-6=194 =194x106

10-7=15 10-7=28
10-8=7 10-8=3
10-9=5 10-9=2
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

1.Buatl
ahkur v
ahubunganant
arawakt
u,pH,
tot
alasam,
kadargul
a,t
otalbaldan
j
elaskansecarasi
ngkat
!

2.Bandi
ngkan dan Bahas dat a dalam kel ompok, mengapa t
erj
adi
per
bedaan/
per
samaandat
aser
tabandi
ngkandenganl
i
ter
atur
!

3.Bandingkandanbahasdat ayangandaperol
ehdengandatadarikel
ompoklai
n
(dengansuhu y angsama)!mengapaterj
adiper
bedaan/
persamaandatasert
a
bandingkandenganli
ter
atur
!

4.Bandingkandanbahasdat ay angandaper
olehdengandatadarikel
ompoklai
n
(dengansuhuy angberbeda)
!mengapaterj
adiper
bedaan/
persamaandatasert
a
bandingkandenganli
terat
ur!
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

Per tanyaandan
Tugas
1.
Bagai manamekani smepembent ukanet anol?Jelaskan!
Prosesf erment asial koholterdir
idariduar eaksi ,yai
tur eaksigl
i
koli
sisdan
reaksiy angmenghasi l
kanNAD+dar iNADHkepi r uv
atmel aluitr
ansf
erelektron.
Reaksiy angper tama, 1mol ekulglukosaakandi pecahmenj adi2molekulpiruvat
mel aluiprosesgl i
kolisis,kemudianCO2 dar ipir
uv atakandi l
epaskandandi ubah
menj adi aset al
dehi d ber karbon dua. Sel anj
ut nya NADH akan mer eduksi
aset aldehidy angt erl
aht er
bentukmenj adiproduket anol
.Ber i
kutgambarreaksi
yangt erj
adi (
Musl i
hah, 2012):

(
Musl
i
hah,
2012)
.

2.Bagai
manamekani
smepembent
ukanasam l
akt
at?Jel
askan!

Asam l aktat dapat di hasil

kan dar iproses
fermentasiol ehmi kroorganismedenganbahan
baku gul a at au ami lum. Pada mekani sme
pembent ukanasam l aktat,dapatdihasilkanasam
l
akt atdal
am juml ahy angbesarmel aluiEmbden-
Mey erhofpathwaypadahomof erment ati
velacti
c
acid.Reaksiy ang pertama,1 mol ekulgl ukosa
akandi pecahmenj adi2mol ekulpiruv atmelalui
prosesgl i
koli
sisdenganmer ubah2ADP dan2
NAD+membent uk2ATPdan2NADH.Kemudi an
2NADHakandi ubahkembal imenjadiNAD+dar i
asam pi r
uv atdanmenghasi l
kanpr odukber upa

3.Sebutkandanj elaskanfakt
or-
fakt
oryangmempengaruhihasilf
erment
asiasam
l
aktat
!
Faktor
-faktoryangmempengar uhihasi
lfer
ment
asiasam l
aktatmeli
put
i
(Manfaati,
2010) :
1.Aerasi:Lajuaer asiy
angrendah(denganper
bandi
nganmedi afer
mentasicai
r
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

terhadap v ol
ume er lemey er200/ 500 dan 250/ 500)akan meni ngkatkan
produksiasam l akt at,namun t ingkataer asiy ang t i
nggiakan memacu
pembent ukanspor a
2.pH:Konsent rasiionhi dr ogenmempengar uhipeny er apannut ri
sidanakt i
fi
tas
fi
siologis mi kroba sehi ngga mempengar uhiper tumbuhan bi omassa dan
pembent ukanpr oduk.Bakt er imemi li
kipH opt imum padar ent ang6, 5-7, 5.
Penur unan konsumsigl ukosa dan pr oduksiasam l aktatt erjadipada pH
kurangdar i2.Unt ukmencegahpenur unanpHdi lakukanpenambahanCaCO3
secar aberkala
3.Jenis dan j uml ah mi kr oba: Sel eksi j enis mi kroba di l
akukan unt uk
mendapat kanmi krobay angmamput umbuhdengancepatdanser t
amampu
menghasi l
kanasam l akt atdal am j uml ahy angbany ak.Cont ohnyabakt eri
Lactobaci l
lusdel br eucki imer upakanbakt erihomof erment atify angmampu
menghasi l
kanasam l akt atdal am juml ahcukupbesar .Semaki nbany akj umlah
i
nokul um, makasubst raty angakant erkonv ersimenj adiprodukakansemaki n
bany akpul a.
4.Suhu: Kecepat an r eaksi enzi mat i
k dar i mi kroba sebandi ng dengan
o
meni ngkatny asuhuf erment asi.Set iappenambahansuhu10Cmenuj usuhu
optimalper t
umbuhan,l ajuper t
umbuhanakanmeni ngkat2xl ipat.Sebal i
kny a
j
ikaber adadiat assuhuopt imalper t
umbuhanmakal ajuper tumbuhanakan
berkurangdankemat i
anaki batt ermal mungki nsaj at erjadi
.
5.Medi a f erment asi: Medi a di gunakan sebagai t empat hi dup, tumbuh,
berkembangbi akser tasi nt esispr odukbagimi kroba.Medi af erment asiharus
mengandungnut risiy angdi perlukany ait
uber upamakr onut ri
en( C,N,S,P,
2+
Mg danK)danmi kronut rien( Zn,Cu,Mn,Fe,Ca,v it
ami n).Semaki nbany ak
gula,makapr odukasam l akt atyangdi hasil
kanakansemaki nt i
nggi.

4.Sebutkandanj elaskanf aktor-

faktory angmempengar uhihasilferment asietanol!
Fakt
or -f
aktory angmempengar uhihasilfer
ment asiet
anol mel i
puti(Muslihah,
2012):
1.pH:pH mempengar uhief ekti
vi
tasenz i
m y angdi hasil
kanmi kroorganisme
dalam membent ukkompl eksenz i
m substrat.pH optimum f erment asiy ai
tu
ant ara4,5-
5.PadapH3kecepat anf ermentasiakanber kurang.
2.Jeni sdanj uml ahmi kroba:Seleksij eni
smi krobadi l
akukanunt ukmendapat
mi kroba y ang mampu t umbuh cepatdan memi l
ikit ol
eransit erhadap
konsent rasigul ati
nggiser tamampumenghasi lkanal koholdal am juml ah
yangbany akdant ahant erhadapal koholsebagaiday at ol
akumpanbal ik.
Semaki n bany ak juml ah inokulum,maka subst raty ang akan t er
konv ersi
menj adiprodukakansemaki nbany akpula.
3.Suhu:Kecepat anreaksienzi matikdar imikrobaakanmeni ngkatsebandi ng
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

denganmeni ngkatnyasuhuf erment asi

.Halt ersebutterj
adikarenasubst rat
akan ber t
umbukan dengan si siakt iflebih sering keti
kamol ekultersebut
bergeraklebihcepat.
4.Wakt u:Lamaf er
ment asimempengar uhipr oduksigasCO2 padasaatet anol
diproduksi.Gasi nidapatmenggangguv iabili
tasseldanmenur unkankadar
al
kohol .Semaki nlamaf ermentasi,makakadaral koholyangdihasi
lkanakan
semaki nti
nggi.
5.Sumbernut r
isi
:Medi adigunakansebagait empathi dup,t
umbuh, berkembang
biaksertasintesisprodukbagimi kroba.Mi krobamemer l
ukansumberkar bon
untuk meni ngkatkan energidan bi osintesis,sedangkan sumberni trogen
digunakanunt ukmemper cepatper t
umbuhanseldal am fermentasi
.Semaki n
bany akgula,makapr oduketanoly angdihasi l
kanakansemaki nt i
nggi

5.Dal am suat upr osespembuat anet anolt erkadangt i

dakdi dapat kanet anolat au
kadaret anol sangatr endah.Sebut kandanJel askanpeny ebabper istiwat ersebut !
Masal ahy angt imbulket i
kamel akukanf ermentasiadal aht erjadi
ny ai nhibisi
pada pr oduk et anol.Aki batny a adal ah r usakny a st r
ukt urmembr an pl asma
mikroba ser t
at erjadidenat ur asipr ot ein.Halt ersebutdapatmenghambat
pertumbuhan mi kroba penghasi l et anol sehi ngga akan menur unkan
produkt ivit
aset anol.Ter jadinyai nhi bisipr oduket anoli nidapatdi atasidengan
pengambi l
anpr oduket anolsecar at er usmener usdar iferment or ,yaitudengan
menj alankanf erment asipadakondi siv akum.Dengankondi siv akum,t i
tikdidih
etanolakant urunsehi nggasebagi anet anolhasilf erment asiakant eruapkan
(Supr i
yant o,2010) .Sel aini tu,sel eksij enis mikr oba j uga pent i
ng unt uk
mendapat kan mi kroba y ang mampu t umbuh cepatdan memi li
kit ol
eransi
terhadap konsent rasigul ay ang t inggi ,mampumenghasi lkanal koholdal am
j
uml ahbany akdant ahant erhadapal koholsebagaiday at olakumpanbal ik.
Kemudi an,f ermentasiet anolmembut uhkanwakt uy angl ama.Semaki nsi ngkat
wakt uf erment asi,makakadaret anoly angdi hasil
kanakansangatr endahat au
mungki nt i
dakber hasildidapat kan( Musl ihah, 2012).

6.Dalam suat upr osespembuat anasam l aktatt erkadangt i

dakdi dapatkanasam
l
aktatat aukadarasam l akt
atsangatr endah.Sebut kandanJel askanpeny ebab
peristi
wat ersebut !
Jenismi krobay angdigunakanunt ukpr oduksiasam l akt
atmempengar uhi
kadarasam l akt aty ang t
erbentuk.Bakt eriy ang digunakan mungki n bukan
ter
golongbakt er ihomof er
ment at
ifsehinggakadarasam l akt
aty angdi hasil
kan
j
ugal ebihsedi kitkar enamenghasi l
kanpr oduksampi ngan.Kemudi ant i
ngkat
aerasiyangt i
nggi ,denganperbandinganv olumemedi afer
ment asicairterhadap
vol
umeer lemey er100/ 500dan150/ 500)akanmenghasi l
kankonsent rasispora
 Nama Ni
l
am Ay
uLar
ashat
i

NI
M 165100501111021

Kel
as Q

Kel
ompok Q4

yangtinggidanproduksiasam lakt
atyangsemakinrendah.Sel
anj
utnyaapabi
la
konsentrasigl
ukosater
lal
ut i
nggiakanmenurunkanper t
umbuhankarenat
erj
adi
penghambat anpert
umbuhanol ehsubstr
at(
Manf aat
i,2010)
.

7.Jelaskanpr i
nsip, perbedaan, keunt
ungandankel emahanpenggunaanet anol
met erdibandingkanGCpadaanal i
saet anol !
Prinsipet anolmet ery aitupengukur ankadaret anolber dasarkanber atjenis
campur an ant araal koholdengan ai r.Car anyadengan memasukkan al kohol
met erdalam gel asukury angpanjangny amel ebihietanolmet erdandal am gelas
ukurt ersebutt elahber isicairanetanoly angakandi ukur .Etanolmet erakan
tenggelam danbat ascai r
anny aakanmenunj ukkanber apakandunganet anol
dalam larutanter sebut(Mai l
ool,2012).
Etanolmet erlebi hbay akdi gunakanpadaskal aindust r
i,sedangkanGC l ebih
bany akdi gunakanpadaskal alaboratori
um.Et anolmet ermemi li
kikentungan
darisegioper asi ,dimanaet anolmet erdapatdi operasikandenganmudahdan
mur ah.Akan t etapi
,et anolmet ermemi li
kikel emahan pada kemampuan
penukur an.Et anolmet erhany a dapatmembaca kadaret anoly ang besar,
sedangkanGCmampumembacakadaret anoly angsangatr endah

KESI
MPULAN
Pri
nsip
Tuj
uanpr akt
ikum
Berdasar
kandatayang.
.huwek

Tangga Ni
lai Par
af
l Asi
sten