UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO

FACULTAD
TEMA:

DE CIENCIAS BIOLOGICAS

FAMILIA CAMPYLOBACTERIACEAE

CURSO:

BACTERIOLOGIA.

DOCENTE:

M.Sc. OLGA FRANCIA ARANA.

ALUMNA:

LLANOS OLIVERA CINTHYA J.

CODIGO:

055507- K

Lambayeque, AGOSTO del 2009.

Familia: Campylobacteriaceae

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INDICE

FAMILIA CAMPYLOBACTERIACEAE
I.INTRODUCCION----------------------------------------------------------------------------II. III.
IMPORTANCIA-----------------------------------------------------------------------CARACTERIS TICAS

GENERALES----------------------------------------------------

IV.

CLASIFICACION TAXONOMICA ------------------------------------------------------

V. GNERO Campylobacter
-----------------------------------------------------------------

1. MORFOLOGIA
-

-------------------------------------------------------------------

2. FISIOLOGIA ----------------------------------------------------------------------3. ESTRUCTURA ANTIGENICA

-------------------------------------------------

4. DETERMINANTES DE PATOGENICIDAD-------------------------------5. INMUNIDAD

----------------------------------------------------------------------

6. IDENTIFICACION EN EL LABORATORIO
-------------------------------

ANEXOS
a. Tratamiento:----------------------------------------------------------------------b. Pruebas de Aglutinacin del Latex para la identificacin de especies de Campylobacter. -------------------------------------------------

c. Sondas de cidos Nucleicos-------------------------------------------------d. Prueba de ureasa en Biopsia (CLOTEST) --------------------------------

BIBLIOGRAFIA

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FAMILIA CAMPYLOBACTERIACEAE
I. INTRODUCCION El aislamiento inicial del gnero Campylobacter en 1909 se clasific como Vibrio fetus, debido a su morfologa. Se creo un nuevo gnero el Campylobacter cuando se reconoci que no estaba relacionado con la familia Vibrionaceae sobre la base de su diferente composicin de bases nucleotdicas, as como la incapacidad para utilizar los azcares de forma oxidativa o fermentativa. En 1947, se reconoci el primer caso de infeccin humana y luego se aisl C. fetus y otros microorganismos del gnero Campylobacter de: la sangre, lquido cefalorraqudeo y las heces. II. IMPORTANCIA Las infecciones causadas por campilobacterias tienen gran inters debido a las serias perdidas econmicas que se experimentan como resultado de los abortos y la infertilidad de los bovinos y los ovinos infectados. Reservorios de los cuales se aislan: C. jejuni C. coli C. fetus C. lari III. aves de corral, perros, gatos, ovinos, bovinos porcinos ovinos y bovinos gaviotas Reservorios de infeccin humana

CARACTERISTICAS GENERALES a. Forma: son bacterias Gram negativas, de forma helicoidal o de vibriode. Sin esporas. b. Metabolismo respiratorio: son microaerfila; requieren menor cantidad de oxgeno y capnfilas; requieren mayor cantidad de CO2. c. Movilidad: son mviles por medio de un flagelo no envainado nico, polar.

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d. Hbitat: la mayora de las especies se hallan como comensales en el tracto intestinal, rganos reproductores y cavidad bucal de gran cantidad de animales salvajes y domsticos. e. Contenido de G + C(%mol): 30 - 38 f. Hidratos de carbono: no fermentados ni oxidados. g. Oxidasa y catalasa: positivas y Ureasa: negativa. h. Obtienen la energa de la utilizacin de aminocidos e intermediarios de cuatro y seis carbonos del ciclo de Krebs. i. Existe gran diversidad fenotpica y genotpica aun dentro de las especies actualmente reconocidas como Campylobacter. IV. CLASIFICACION TAXONOMICA: Segn El Manual Determinativo de Bacteriologa de Bergey CATEGORIA 1: EUBACTERIAS GRAM - NEGATIVAS QUE TIENEN PARED CELULAR. GRUPO 2: BACTERIAS GRAM NEGATIVAS AEROBIAS O MICROAEROFILAS, HELICOIDALES O VIBRIODES MOVILES Segn EL Manual Sistemtico de Bacteriologa de Bergey Se encuentra en el Volumen II: Proteobacterias Seccin XIX: Dominio Phylum Clase Orden Familia Gnero Especie : : : : : : : Bacteria Proteobacteria. Epsilonproteobacteria class. nov. Campylobacteriales ord. nov. Campylobacteriaceae Campylobacter Campylobacter jejuni Campylobacter fetus Campylobacter coli ( 9na edicin)

- Proteobacterias

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Campylobacter lari V. GNERO Campylobacter 1. MORFOLOGIA El nombre del gnero Campylobacter deriva de la palabra Campylo, que significa curvado. Son bacilos gram negativos helicoidalmente curvados y delgados; miden 0,2 a 0,5 m de ancho y de 0,5 a 5 m de longitud. Se han informado diversas formas morfolgicas de Campylobacter: Formas en espiral: abundantes en tejidos jvenes. Formas en S Forma en ala de gaviota: bacilos tpicos en frotis de heces teidas con tincin de Gram. Forma de coma: cuando se ven en los tejidos infectados. Formas cocoides o filamentosas: despus del aislamiento en el laboratorio. Predominan en cultivos viejos. En paricular despus de que las colonias fueran expuestas al aire ambiental. La mayora de especies presenta flagelo unipolar o bipolar; sin vaina; los microorganismos tienen un tipo de motilidad distintivo en sacacorchos rpido; con un solo flagelo polar. 2. FISIOLOGIA Las bacterias son microaerfilas requieren baja tensin de O 2 (3 a 15%) y un nivel aumentado de CO2 (3 a 5%) para su proliferacin. Son sensibles al peroxido de hidrogeno y a los iones superoxido que aparecen en los medios de cultivo cuando se exponen al aire y a la luz. Las campilobacterias son incapaces de utilizar los azucares de forma oxidativa o fermentativa. 3. ESTRUCTURA ANTIGENICA

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 Los estudios acerca de la configuracin antignica del genero Campylobacter se han encontrado en estructuras de superficie de C jejuni. Esta especie es antignicamente diversa como lo indica la demostracin de: o 50 serotipos termoestables sobre la base del LPS. o 36 serotipos sobre la base de los antgenos flagelares. Candidatos para inclusin de vacunas contra campilobacterias. o Protena de superficie en cepas de variedad de serotipos termolbiles. o OMP principal relacin antignica con OMP principales de diversos serotipos de campilobacterias; es probable que esta protena sea una molcula de porina ya que es una protena transmembrana y se asocia con el peptidoglucano. Diferencias entre la estructura de superficie de C. fetus y C. jejuni. C. fetus Microcpsula o capa S Antgeno proteico compuesto por formaciones proteicas irregulares tienen cristalino, celular. La capa es antifagoctica y desempea un papel central en la patogenia de C. fetus. Protena S Da resistencia al efecto del suero humano o de conejo normal o inmune. Familia: Campylobacteriaceae 6/14 Es sensible forma curen de la enrejado superficie Puede sobrevivir a ingestin por fagotitos mononucleares , lo que representa mecanismo de supervivencia. C. jejuni.

Es

una

protena de la

de

APM capsula

constituyente superficie. Impide

bacteriana y de las protenas de fijacin del C3b,

conduciendo a una opsonizacin defectuosa. Lipopolisacrido De tipo liso en general se asocia resistencia al suero. Antgeno O Posee cadenas constituidas por el polisacrido y tienen y tienen longitud intermedia, todas que son son homogneas a diferencia de las enterobacterias heterogneas. Flagelos El anlisis inmunoqumico Los son de la se de de la flagelina revela la presencia de eptopes en la superficie flagelos importantes antgenos superficie, jejuni diferencia C. fetus. El LPS es del tipo LOS de BPM y parece antignicament e diferente lo cual explicar el gran numero de serotipos.

flagelina de C.

Tipificacion La serotipificacin del C. jejuni y el C. coli es til para estudios de epidemiologa. Dos mtodos: o Mtodo de Penner Antgenos termoestables solubles

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Tcnica de hemoaglutinacin indirecta. o Mtodo de Lior Antgenos termolbiles Tcnica de aglutinacin en portaobjetos. 4. DETERMINANTES DE PATOGENICIDAD Se han identificado tres propiedades potencialmente patognicas del C. jejuni. 4.1. La invasividad Para la colonizacin son cruciales los flagelos que incrementan la adherencia y que en virtud de su motilidad permiten que los microorganismos atraviesen la capa mucosa que cubre la superficie del intestino. 4.2. La produccin de enterotoxina Las cepas de Campylobacter aisladas de pacientes con diarrea acuosa producen una enterotoxina termolbil. La toxina causa una diarrea secretora por la estimulacin de la actividad de la adenilato ciclasa en la mucosa intestinal y por la alteracin del transporte normal de los iones en los enterocitos. 4.3. La produccin de citotoxina. Por algunas cepas de C. jejuni y C. coli, esta citotoxina lesiona una variedad de clulas de los mamferos. 5. INMUNIDAD 5.1. Los pacientes con deficiencia de Ig A pueden experimentar recurrencias de la enfermedad causada por C. jejuni. 5.2. Despus del episodio agudo, las personas normales presenta ttulos en aumento de los anticuerpos de IgG, IgM e IgA, medidos por el inmunoensayo (ELISA). 6. IDENTIFICACION EN EL LABORATORIO CULTIVO

6.1. Especie: Campylobacter jejuni 6.1.1. Aislamiento: muestra material obtenido del recto y materia fecal.

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6.1.2. Medios selectivos apropiados: medios de plaqueo de Butzler, de Skirrow (contiene Vancomicina, polimixinaB, trimetropim para inhibir el crecimiento de otras bacterias) y Campy BAP. Los medios selectivos son adecuados para el aislamiento de C. jejuni a 42 C; cuando el medio Skirrow se incuba de 36 a 37 C se puede aislar otras campilobacterias. Se crearon varios medios selectivos que permiten el aislamiento de C. jejuni a partir de muestras de materia fecal.

Formulas de medios selectivos para el aislamiento de Campylobacter jejuni Medio Base Aditivos Agar(3%) Sangre de carnero(10%) Bacitracina(25,000UI/L) Novobiocina(5mg/L) Medio tioglicolato Colistina(10,000UI/L) Cefalotina(15mg/L) Medio Selectivo de Butzler lquido Actidiona(50mg/L) Sangre lisada de caballo(7%) Vancomicina(10mg/L) Polomixina B(2,500UI/L) Agar Sangre de Skirrow Agar sangre Trimetropina(5mg/L) Sangre de carnero(10%) Vancomicina(10mg/L) Trimetropina(5mg/L) Polomixina B(2,500UI/L) Cefalotina(15mg/L) Agar base Medio de Blaser Brucella AnfotericinaB(2mg/L) 5% de sangre de caballo lisada con saponina Trimetropina(10g/mL) Medio Selectivo Polomixina B(5UI/mL) para Rifampicina(10g/mL) Campylobacter de Preston Caldo nutritivo Cicloheximida(100g/mL) Carbn bacteriolgico Desoxicolato de sodio Medio libre de Sulfato ferroso sangre Piruvato de sodio para Hidrolizado de casena Campylobacter de Preston Caldo nutritivo Cefoperazona(32mg/L) Sangre de carnero desfibrinada Cefoperazona(15mg/L) Rifampicina(10mg/mL) Medio Colistina(10,000UI/L) para vibriones Agar base de Butzler Columbia AnfotericinaB(2mg/L) Medio de Caldo nutritivo 7% de sangre desfibrinada de caballo

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Preston modificado

Medio selectivo a base de carbon, libre de sangre.

Agar base Columbia

Cefoperazona(32mg/L) AnfotericinaB(2mg/L) Suplemento para desarrollo de Campylobacter Carbn activado Hematina(0,032g/L) Piruvato de sodio(0,1g/L) Vancomicina(20mg/L) Cefoperazona(32mg/L) Cicloheximida(100mg/L)

Merino y col. Encontraron que el medio para Campylobacter de Preston, libre de sangre y con cefaperazona, proporcionaba la mayor cantidad de aislamientos de C jejuni.

Karmali y col. Hallaron que un medio selectivo libre de sangre basado en carbn (CSM), con una base de agar Columbia, con carbn activado, hematina, piruvato de sodio, cefoperazona, vancomicina y cicloheximida, es mas selectivo que el medio Skirrow.

El carbn activado, la hematina, el sulfato ferroso y el piruvato de sodio funcionan como sustitutos de la sangre en los medios de desarrollo para campilobacterias.

La

casena

se

agrega

para

estimular

ciertas

cepas

de

campilobacterias termfilas resistentes al cido nalidxico que se encuentran como microorganismos ambientales. 6.1.3. Incubacin de placas inoculadas: a temperaturas elevadas de 42C (C. jejuni puede proliferar a 37C pero a temperaturas elevadas puede inhibir la flora intestinal). El desarrollo de colonias es de 24 a 48 horas. 6.1.4. Atmsfera de incubacin adecuada, con 5% de O2 , 10% CO2 y 85% de N2. No se recomienda el uso de estufas de CO2 para el cultivo de campilobacterias debido a que en la atmsfera resultante slo se desarrollan las cepas muy aerotolerantes.

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Tampoco son adecuadas las jarras con extincin de vela, debido a que el nivel de oxgeno(12% al 17%) es demasiado alto para el desarrollo ptimo de las campilobacterias. 6.1.5. Las Colonias: tienden a ser incoloras o de color gris; pueden ser acuosas y extenderse o redondas y convexas, y ambos tipos de colonias pueden aparecer en las placas de agar. 6.1.6. Caractersticas del crecimiento: C. jejuni y otras campilobacterias patgenas para humanos son: o Oxidasa y catalasa positivas o No oxidan ni fermentan carbohidratos Para clasificacin de especies se emplea: o Reduccin del nitrato o Produccin de H2S o Prueba de hipurato (hidrolizan el hipurato a acido benzoico y glicina) o Sensibilidad a antimicrobianos (Prueba de resistencia al cido nalidxico diferencia al C. jejuni del C. laridis). 6.2. Especie: Campylobacter fetus 6.2.1. Es un patgeno oportunista involucrado con infecciones gastrointestinales. 6.2.2. Los cultivos de sangre o lquidos corporales deben hacerse en placas de agar sangre no selectivas o medios de cultivo liquidos con sangre. 6.2.3. Incubar en condiciones microaerfilas, a temperatura de 25 C porque alguna cepas de C. fetus no proliferan a 42 C. 6.2.4. El cultivo debe hacerse en medio de cultivo sin cefalosporinas en pacientes con sntomas diarreicos. 6.2.5. Otros medios selectivos tienen Cefalotina, cefoperazona y compuestos inhibidores, debido a su contenido de cefalosprina C.fetus y otras especies de campilobacterias no crecern en estos medios, por lo tanto deben emplearse medios sin cefalotina incubar entre 36 a 37 C.

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Propiedades de las especies de Campylobacter que son patgenas humanas impotantes

Ureasa Oxidasa Catalasa Proliferacin a: 25C 37C 42C Sensibilidad a la cefalotina Sensibilidad al cido nalidxico Hidrlisis de hipurato Proliferacin anaerbica a 37C Reduccin de nitrato Motilidad en la placa de agar.

C. jejuni + + + + R S + + + +

C. coli + + + + R S + + +

C. fetus + + + + S R + + +

ANEXOS
e. Tratamiento: i. casi todas la cepas de C. jejuni son sensibles in Vitro a la eritromicina, los aminoglucosidos, tetraciclina y el cloramfenicol. El tratamiento con eritromicina acorta la excrecin fecal.

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f. Pruebas de Aglutinacin del Latex para la identificacin de especies de Campylobacter. Meritec Campy (jcl) (Meridian Diagnostics, Cincinnati, OH) es una prueba de aglutinacin de ltex utilizada para la identificacin de de aislamientos en cultivo, de los cuatro Campylobacter patgenos principales, es decir C. jejuni, C coli, C. lari y C. fetus. g. Sondas de Acidos Nucleicos: para la identificacin de especies de Campylobacter. El Accu- Probe Campylobacter Culture Identification Test; es una prueba basada en sondas de DNA para la identificacin rapida de C. jejuni, C coli y C. lari, directamente de las colonias. La sonda no es radiometrica y est marcada con un ster de acridina quimioluminiscente. Las reacciones se leen en un fotmetro. H. pylori Tienen ramillete de flagelos polares que estn envainados. No se observan filamentos axiales. Pared celular es lisa y contiene acidos grasos inusuales. Muy alta actividad de ureasa y catalasa Ausencia metilada de la quinona Campylobacter Tienen un solo flagelo polar desenvainado. Pared celular en C. jejuni tiene aspecto arrugado.

respiratoria menaquinona 6 -

BIBLIOGRAFIA
_ _ JOKLIK, W. H. WILLETT, D. AMOS. 1,994.Microbiologa de Zinsser. 20a. ed. Edit. Panamericana. Buenos Aires. KONEMAN, E. S. ALLENS, W. JANDA, W. WINN 1997. Diagnstico Microbiolgico. 5. ed. Edit. Mdica Panamericana. Madrid Espaa.

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PRESCOTT, L. J. HARLEY, D. KLEIN 2004. Microbiologa. 5a. ed. Edit. McGRAW HILL- INTERAMERICANA DE ESPAA, S.A.U. Madrid.

MADIGAN, M, J. MARTINKO, P. PACK. 2003. Brock. Biologa de los Microorganismos 8a. ed. Edit. Prentice Hall. Madrid. 1011.

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