Clulas inmunocompetentes

Clulas y rganos del sistema inmune

F. Borrego, M. Frias, R. Aguado y J. Pea

Para que el sistema inmune acte se requiere la participacin de diferentes poblaciones celulares que son conocidas como clulas inmunocompetentes. Estas clulas, que mayoritariamente son leucocitos, circulan por la sangre y la linfa, adems se encuentran en todo el cuerpo: piel, mucosas, ganglios linfoides, etc. Esto hace que sea posible el encuentro de estas clulas con los antgenos y adems que sea posible la interaccin entre ellas, aspectos que son necesarios para el desarrollo de una respuesta inmune adecuada tanto innata como adaptativa. Los leucocitos conjunto son un

heterogneo

de clulas. Entre ellas destacan los neutrfilos, basfilos, linfocitos, otras. clulas clulas sea. conoce Todas derivan de madre eosinfilos, clulas estas por las CD34+

dendrticas, monocitos y

diferenciacin

presentes en la mdula Este proceso se como

hematopoyesis dando lugar a la formacin de todas las clulas de la sangre, tanto leucocitarias como no leucocitarias. En concreto mediante procesos de diferenciacin de las clulas madre pluripotentes, se forman dos tipos distintos de clulas, son los progenitores mielomonocticos y los progenitores de leucocitos o glbulos blancos. Estos procesos de diferenciacin no ocurren al azar, sino que estn estrechamente regulados por sustancias conocidas como factores estimuladores de colonias producidos por el estroma y macrfagos de la mdula sea. Los progenitores mielo-monocticos, se diferencian a su vez en siete lneas celulares que, tras diferentes grados de maduracin, terminan formando los eritrocitos, plaquetas, basfilos, eosinfilos, neutrfilos, monocitos y clulas dendrticas mielomonocticas. Por otra parte los progenitores linfocticos, se diferenciaran en linfocitos T (timo), B (mdula sea), clulas NK (timo y mdula) y ciertos tipos de clulas dendrticas (mdula) (Figura Hematopoyesis).

En este captulo estudiaremos:

Las caractersticas morfolgicas y fenotpicas de las clulas inmunocompetentes. La organizacin de los rganos linfoideos secundarios (ganglios linfticos, bazo y otros). La estructura de los rganos linfoideos primarios (timo y mdula) y de cmo en ellos maduran los leucocitos.........

Clulas inmunocompetentes
Entre las clulas inmunocompetentes destacamos:

Neutrfilos Eosinfilos Basfilos y mastocitos Monocitos y macrfagos Linfocitos B y T Clulas NK y NKT y Clulas dendrticas

Neutrofilos Estas clulas que pertenecen al grupo de leucocitos polimorfonucleares, se encuentran en continua renovacin debido a que su vida media es menor de 48 horas. Son clulas de gran tamao cuya caracterstica ms llamativa es la segmentacin del ncleo en varios lbulos y gran cantidad de grnulos en su citoplasma con enzimas ya de de lticas para destruir de un microorganismos (Figura: Leucocitos polinucleares). Tienen un origen similar a los macrfagos formadora funcin destruir que proceden precursor comn, la CFU-GM o unidad colonias la es la En granulocticosea. sangre Su y se de fagocitar la macrofgicas, mdula

principal

patgenos.

encuentran de trnsito hacia los tejidos donde ejercen su funcin prioritaria y representan 40-70% leucocitos en sangre. de todos los

Eosinfilos
Son polimorfonucleares recubiertos de IgE e IgG y con una funcin fagoctica muy reducida y muy ricos en grnulos repletos de histamina. Cuando se degralunan estas clulas y vierten al exterior la histamina producen una fuerte respuesta inflamatoria que puede daar la membrana de los parsitos debido a la propiedad que tienen de unirse a ellos (Figura: Leucocitos polinucleares).

Basfilos y Mastocitos
Los basfilos son circulantes

polimorfonucleras

mientras que los mastocitos esencialmente se encuentran en los tejidos. Ambos tipos celulares poseen receptores para el extremo Fc de las inmunoglobulinas y participan en la hipersensibilidad histamina y otros inmediata, liberando de sus grnulos son estimulados (Figura: Leucocitos polinucleares). inmunomediadores cuando

Monocitos y Macrfagos
Con el trmino de monocitos se engloban a clulas con caractersticas funciones similares, presentes en la sangre y tambin distribuidas en varios lugares del organismo. Los monocitos son clulas grandes con un solo ncleo, expresan CD14, poseen un aparato de Golgi muy desarrollado, gran cantidad de lisosomas muy ricos en enzimas de diferentes tipos, entre los que destacan proteasas, peroxidasas y lipasas. Cuando los monocitos se encuentran en los

tejidos, sufren ciertas modificaciones y se les conoce como macrfagos en general, aunque pueden recibir distintos nombres segn el tejido donde sangre). La funcin principal de estas clulas es la de fagocitar todos los cuerpos extraos que se introducen en el organismo, como las bacterias y sustancias de desecho de los tejidos, as como en ciertas circunstancias actuar como clula presentadora de antgenos y la de producir las citocinas proinflamatorias TNF-a, IL-1 e IL-6 cuando son activados. As mismo, estas clulas poseen capacidad de adherirse a los tejidos, de moverse sobre los mismos (quimiotaxis) y una vida media de varios meses (Figura: Macrfago). Tanto los monocitos como los macrfagos proceden de un precursor comn, la CFU-GM o unidad formadora de colonias granuloctico-macrofgicas, de la mdula sea. En una primera instancia aparecen como monocitos circulantes durante un perodo corto de tiempo para despus instalarse en diferentes tejidos y diferenciarse a macrfagos. se encuentra (Tabla: Leucocitos en

Linfocitos
Los linfocitos son clulas que poseen un ncleo muy voluminoso y sufren un proceso muy complejo de maduracin desde sus clulas madre progenitoras. En humanos, maduran bien en el timo (los linfocitos T) o bien en mdula sea (los linfocitos B)(Figura: Linfocito).

Linfocitos B
Los linfocitos B se caracterizan por la presencia de inmunoglobulinas en su membrana y las molculas CD19, CD35, MHC II y CD21. Cuando los linfocitos B se activan se transforman en clulas en clulas plasmticas que son ms grandes que los linfocitos, muy ricas en retculo endoplsmico y estn especializadas en la sntesis y secrecin de grandes cantidades de inmunoglobulinas. Adems, se forman clulas memoria preparadas para actuar en caso de una nueva entrada del agente causante de la activacin anterior (Figura: Clula plasmtica). Los linfocitos B se definen por su capacidad de producir inmunoglobulinas que pueden quedar unidas a la membrana donde actan como receptores especficos de antgenos o bien ser secretadas en cuyo caso actuaran identificando y destruyendo antgenos

Linfocitos T
Los linfocitos T se caracterizan por poseer receptores de clulas T (TCR) que reconocen pptidos antignicos unidos a protenas codificadas por las molculas de histocompatibilidad. Fenotpicamente se caracterizan por expresar la CD3, CD2 y CD7. Los linfocitos T son los responsables de la respuesta inmune celular. Los linfocitos T maduran en el timo, durante dicho proceso, los timocitos adquieren una serie de molculas nuevas en su superficie que despus tendrn aspectos funcionales de relevancia. En el proceso de diferenciacin de timocitos a linfocitos maduros se destruyen un gran nmero de clulas (aproximadamente el 97% de los timocitos), que son precisamente aquellas que presenta mayor capacidad autorreactiva. Esto se lleva a cabo por un proceso de seleccin tmica que se realiza en dos fases y est condicionado por el grado de afinidad del TCR con las molculas del MHC de las clulas epiteliales del timo. Los linfocitos T son una muy por

poblacin heterognea

celular formada

diferentes tipos de clulas y

representan alrededor de 40-60% de los linfocitos perifricos. Hay cuatro tipos de linfocitos T funcionalmente diferentes:

Linfocitos T de colaboracin (Th). Se caracterizan por su capacidad de producir

citocinas. En consecuencia participan en la iniciacin y el desarrollo de la respuesta inmune. Pueden ser de dos tipos Th1 y Th2. El tipo Th1 promueve la respuesta celular (IFN, IL-2 e IL12). El tipo Th2 promueven la respuesta humoral, (IL-4, IL-5, IL-6, IL-10). Fenotpicamente son CD3+ y CD4+ y reconocen MHC de tipo II.

Linfocitos T citotxicas (Tc): Principales responsables de la citotoxicidad de la

respuesta inmune celular. Destruyen clulas infectadas por virus y clulas tumorales. Fenotpicamente son CD3 + y CD8+, reconocen MHC de tipo I. Tambin se les conoce como CTLs.

Linfocitos T reguladoras (Tr): Como su nombre indica, su funcin principal es la de

regular las actuaciones de las clulas T y suprimir las clulas T autorreactivas. Pueden ser de varios tipos, siendo las ms comunes CD4+, CD25+ FoxP3+. Estas clulas presentan una potente accin reguladora de la respuesta Inmune y tienen gran relevancia en los procesos de tolerancia y en el desarrollo de enfermedades autoinmunes.

Clulas NK
En la dcada de los aos 70 Herberman observ que ciertos linfocitos obtenidos de individuos sanos eran capaces de destruir clulas tumorales sin que existiera sensibilizacin previa. La citotoxicidad mediada por estas clulas se denomin citotoxicidad natural, y a las clulas encargadas de desarrollar esta actividad se las denomin natural killer (NK) o clulas asesinas naturales. Desde el punto de vista morfolgico la mayora de las clulas NK corresponden con los linfocitos granulares grandes (LGL) por su gran tamao y la presencia de abundantes grnulos citoplasmticos (Figura: Clula NK). La principal caracterstica de la clula NK es su capacidad para actuar frente al crecimiento de clulas tumorales impidiendo su expansin y la formacin de metstasis as como, contribuyen a la defensa frente a clulas infectadas por virus. Ello se debe a su capacidad destructora, directa) que o puede bien ser directa mediada (citotoxiciddad superficie del receptor CD16. Estas clulas representan aproximadamente el 10% de las clulas mononucleares de sangre perifrica y no poseen marcadores ni de los linfocitos T ni de los linfocitos B y corresponden con un tercer tipo de clulas linfoides. Las clulas NK se definen como linfocitos que no posen en su superficie ni inmunoglobulinas, ni TCR. Fenotpicamente las clulas NK se definen como linfocitos CD3-, CD56+, CD16+. Poseen adems en su superficie celular receptores reguladores de la citotoxiciddad de gran importancia funcional, entre los

por anticuerpos (citotoxicicdad mediada por anticuerpos), gracias a la presencia en su

que destacan

los KIRs (Killer immunoglobulins- like receptors) y los NCRs (Natural

citotoxicity receptors). Segn los niveles de expresin de CD56 se pueden diferenciar dos poblaciones NK, NKdim y NKbright las primeras con una funcin predominantemente citotxica y las segundas con ms capacidad de produccin de citocinas. Las clulas NK juegan un papel fundamental en el paso de una respuesta innata a una adquirida, ya que intervienen regulando otras poblaciones de clulas inmunocompetentes as como en la maduracin de las clulas dendrticas. Se cree que el proceso de maduracin de las clulas NK se efecta en parte dentro del timo y en parte fuera del mismo en rganos linfoides perifricos, desconocindose los procesos requeridos para que esta diferenciacin se produzca. Esto explica que no se afecten sustancialmente los niveles de clulas NK en animales atmicos y en inmunodeficiencia severa combinada observada tanto en animales como el hombre.

Clulas NKT
Las clulas NKT (Natural Killer T cells) son un tipo especial de linfocitos que desempean funciones parecidas tanto a las clulas T colaboradoras como a las T citotxicas. A diferencia de los linfocitos T clsicos, las clulas NKT reconocen glicolpidos presentados por la molcula Cd1d. Fenotpicamente se caracterizan por tener un receptor TCR con las cadenas Va24 y Vb11. Adems presentan marcadores especficos de clulas NK como CD161 y de clulas T como CD3. Constituyen el 0.2% de los linfocitos perifricos.

Clulas Dendrticas
Las clulas dendrticas una serie (CD) de por son las clulas est

presentadoras de antgenos (APCs) ms potentes. Comprenden ampliamente leucocitos todos que los distribuidos tejidos,

especialmente en aquellos que estn situados en la interfase de distintos medios. Las clulas dendrticas derivan de progenitores de la medula sea y circulan por la sangre como precursores inmaduros hasta que migran a los tejidos donde maduran y se diferencian activndose, mediante capturando y presentando Con una antgenos adecuada molculas MHC.

estimulacin migran a las tejidos linfoides secundarios donde presentan los Ag a las clulas T e inducen una respuesta inmune (Figura: Clula dendrtica). Las CD se dividen en dos tipos segn su origen: DC mieloides (CD11+, CD123+ CD33+) provocan respuestas T de tipo Th1 y requieren GM-CSF para sobrevivir; las CD plasmacitoides (CD11C+, CD123+) inducen respuestas T de tipo Th2 y al contrario que las mieloides requieren IL-3 para sobrevivir. Las DC regulan los mecanismos involucrados tanto en la respuesta innata como en la adquirida por lo que son foco de inters debido a su papel clave en las respuestas anti-cncer y anti-virus, de ah su uso potencial en el desarrollo de vacunas, as como, por su participacin en los mecanismos tanto de tolerancia inmunolgica como en el desarrollo de enfermedades por autoinmunidad.

rganos linfoideos
Las clulas que componen el sistema linfoide se agrupan en rganos discretamente encapsulados o bien en acmulos difusos que reciben en su conjunto como sistema linfoide. Estos rganos desde le punto de vista funcional se dividen en primarios, en los que se produce la diferenciacin de los linfocitos y secundarios en los que se agrupan clulas de diferentes tipos para desarrollar la respuesta inmune.

rganos linfoides primarios

Los rganos linfoides primarios son la mdula sea y el timo donde los linfocitos sus B y T respectivamente adquieren autoantgenos, que maduros. receptores

especficos y tambin aprenden a discriminar entre sern tolerados y antgenos extraos en cuya destruccin colaborarn una vez

Mdula sea
La mdula sea est formada por un tejido esponjoso de color rojizo que se encuentra en el interior de los grandes huesos y posee en adultos un promedio 2.6 kgs. Aqu se albergan una gran cantidad de clulas madre y es de donde se originan las restantes clulas de la sangre y entre ellas los leucocitos.

Linfopoyesis B
Es el proceso madurativo de los linfocitos B, que se realiza en la mdula y que es

independiente de los estmulos antignicos. Durante este proceso, que se inicia a partir de las clulas progenitoras (CFU-B), se van formando progresivamente clulas pre-pre-B, clulas pre-B, clulas B inmaduras y linfocitos B maduros cada una de ellas con diferentes caractersticas y expresin de distintas molculas (CDs) en su superficie (Figura: Linfopoyesis B).

Ya en las clulas pre-B se detecta la presencia de la cadena pesada mu intracitoplasmtica, adquirindose en la siguiente fase madurativa la capacidad de sintetizar las cadenas ligeras y pesadas de las inmunoglobulinas IgM e IgD. Posteriormente estos linfocitos, mediante un proceso de reordenamiento gnico, se especializarn en la produccin de una sola clase de las inmunoglobulina de los isotipos IgG, IgA, IgM, IgD o IgE. Muchos de estos marcadores de diferenciacin de las clulas B estn siendo utilizados para clasificar las enfermedades originadas por alteraciones en el proceso de diferenciacin de los mimos (leucemias y linfomas).

Timo
El timo es un rgano situado en la parte superior del mediastino anterior y es donde maduran los linfocitos T. El timo presenta su mximo desarrollo en el feto, donde aparece a partir del tercer mes de gestacin, y en el nio adolescente. A partir partir de los 15 aos comienza un proceso atrfico y degenerativo con gran invasin grasa, de tal forma que en las personas mayores de 65 aos slo quedan residuos funcionales del mismo (Figura: Evolucin tmica). El timo est constituido por una malla de clulas epiteliales rellena de clulas, denominadas timocitos y se organiza formando lobulillos tabicados por trabculas conjuntivas. Dentro de cada lobulillo se puede distinguir una zona externa o corteza, que contiene la gran mayora de los timocitos, y una zona interna o medular que es pobre en timocitos. El estroma del timo est constituido por una malla de clulas epiteliales, de clulas dendrticas interdigitadas, que actan como clulas presentadoras de antgenos (Figura: Folculos tmicos).

En la unin corticomedular se hallan tambin existen, formados macrfagos macrfagos. adems, por En la de de mdula Hassal y forma unas estructuras epiteliales

denominadas

corpsculos clulas dispuestos

concntrica. Las clulas

epiteliales del

timo, tanto de la corteza como de la mdula, expresan altas cantidades de molculas de histocompatibilidad, imprescindibles para el reconocimiento de autoantgenos por los linfocitos T.

Linfopoyesis T
El proceso de maduracin de los linfocitos T en el timo o linfopoyesis T comienza con la llegada de los precursores de los linfocitos T, que durante el proceso de maduracin intratmica, reciben el nombre de timocitos. Durante este proceso mueren muchos timocitos, aproximadamente el 95 % de ellos. Se eliminan aquellos timocitos que reconocen los antgenos propios del organismo mientras que el resto abandonarn el timo, va sangunea, como linfocitos T maduros. Todo ello se realiza mediante un doble proceso conocido como seleccin positiva y negativa que estudiaremos en el captulo del receptor de los linfocitos T. Estos linfocitos colonizan los rganos linfoideos secundarios, situndose en la zona paracortical de los ganglios linfticos y vainas paracorticales linfocticas del bazo. Se han identificado algunos factores de transcripcin que son imprescindibles para la diferenciacin de los linfocitos a lo largo de la linfopoyesis (Figura: Seleccin tmica).

Durante el proceso de maduracin intratmico, los timocitos adquieren una serie de molculas nuevas en su superficie. Estas molculas van apareciendo secuencialmente en los diferentes estados de maduracin intratmica as como, en general, en todos los procesos de maduracin y diferenciacin hematopoyticos. Posteriormente estas clulas, ya en el timo, maduran distinguindose varios estados diferenciativos con la presencia de diferentes marcadores de superficie. As en los timocitos inmaduros aparecen los marcadores CD7 y CD2, aadindose en un estado posterior de maduracin (timocito comn), el marcador CD1. Ya en el timo va a ocurrir una especializacin funcional, distinguindose dos subpoblaciones de timocitos maduros: Una es aquella que expresa en su superficie el marcador CD4 y que ser el precursor inmediato de los linfocitos T colaboradores y los linfocitos T reguladores que aparecen en sangre perifrica.

La otra expresa en la superficie el marcador CD8 y dar origen a los linfocitos T citotxicos/supresores circulantes. En ambas subpoblaciones se pierde la expresin de la molcula CD1. Los timocitos ms inmaduros no expresan CD3, CD4 ni CD8, por lo que son conocidos como clulas triples negativas. A medida que van madurando, en estas clulas se produce la reorganizacin del TCR como CD4-CD8+ o como CD4+CD8-. Por ltimo, hemos de decir que a lo largo de la vida, debido fundamentalmente a estos cambios tmicos, en el ser humano van cambiando las proporciones de linfocitos. Por ejemplo en los primeros meses hay un predominio de las clulas vrgenes, mientras que la proporcin de linfocitos memoria aumenta en los ltimos aos. Tambin se observa un aumento progresivo de clulas CD8 a lo largo de la vida y un leve descenso de CD4 (Figura: Ratio) (Figura: Niveles linfocitos T). y expresan CD3 y las molculas CD4 y CD8 conjuntamente (clulas dobles positivas), para despus perder una u otra quedando bien

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rganos linfoides secundarios

Entre los rganos linfoides secundarios que encuentran el bazo, los ganglios linfticos y MALT (mucosal associated lymphoid tissue) (amgdalas, placas de Peyer del intestino y acmulos linfoides del tracto urogenital), proporcionan el medio idneo en el que las clulas del sistema inmune (macrfagos, clulas presentadoras de antgeno, linfocitos T y B) pueden interaccionar entre s y con el antgeno. Una vez que los linfocitos B y T abandonan los rganos primarios donde han madurado, pasan al torrente circulatorio, a travs del cual se mueven por todos los tejidos del organismo, y alcanzan de nuevo los ganglios linfticos, y as sucesivamente.

Cuando

estas

clulas

se

extravasan, llegan a los tejidos y son recogidos por los vasos perifricos linftico. Si en un determinado momento se analiza la cantidad de linfocitos en cada uno de los compartimentos se observa que la mayor parte de los linfocitos se encuentran en linfoides una mientras los rganos que en de la los del sistema

sangre y el bazo se encuentra proporcin baja mismos linftica) (Figura: Circulacin

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Esto hace que por su gran importancia en el desarrollo de la defensa del organismo estudiemos brevemente cada uno de estos rganos.

El Bazo
Se trata de un rgano situado en el hipocondrio izquierdo, detrs del estmago y cerca del diafragma. Su superficie externa se compone de una cpsula fibrosa con algunas fibras musculares lisas y penetra profundamente en el parnquima del rgano. Bsicamente, en el bazo se distingue la pulpa roja que es un reservorio de hemates y la pulpa blanca que contiene el tejido linfoide, el cual se dispone alrededor de una arteriola central, presentando reas ms ricas en linfocitos T y otras en linfocitos B. Las reas se disponen ms prximas y alrededor de la arteriola central, mientras las reas B se disponen exteriores a la misma. Tambin son frecuentes las clulas reticulares dendrticas y macrfagos en el

centro germinal, as como macrfagos especializados en la zona marginal

(rea que rodea a los folculos linfoides) que junto a las clulas foliculares dendrticas de los folculos primarios (folculos no estimulados sin centro claro germinal) se ocupan de la presentacin del antgeno al linfocito B (Figura: Bazo).

Ganglios linfticos

Los ganglios linfticos conforman, junto a los vasos linfticos, una compleja red corporal cuya funcin es filtrar los antgenos procedentes del espacio extracelular y la linfa durante su circulacin desde la periferia hasta el conducto torcico. Los ganglios linfticos, en el humano, son redondeados u ovoides y presentan un hilio donde los vasos sanguneos entran y salen respectivamente. Bsicamente, se distingue un rea B denominada crtex, un rea T

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denominada paracrtex y un rea medular central (Figura: Ganglio). La corteza contiene agregados de linfocitos B dispuestos formando folculos primarios y secundarios, segn que posean centros geminares o no en funcin de que hayan recibido estmulos antignicos. La paracorteza, contiene linfocitos T y abundantes clulas presentadoras de antgeno (clulas dendrticas) quienes presentan abundantes antgenos MHC clase II en superficie. La zona medular presenta algunos cordones linfoides separados por espacios vasculares (senos medulares) que contienen la mayor parte de las clulas plasmticas y los macrfagos sinusales de los ganglios linfticos.

Tejido linfoide asociado a mucosas (MALT)

Acmulos dispersos de tejido linfoide no encapsulado se observan frecuentemente en reas submucosas gastrointestinales, respiratorias y urogenitales a los que se les conoce de manera genrica como tejido linfoide asociado a mucosas (MALT) (Figura: Tejido MALT) . En el intestino, se observan difusos germinal de estos en en la las Los elementos linfoides linfoides centro placas

submucosa del rgano formando folculos con denominadas Peyer.

antgenos pueden atravesar los epitelios de las mucosas transportados por las clulas dendrticas y a travs de las clulas M. En sentido contrario, se trasporta la IgA secretora producida por las clulas plasmticas muy abundantes en los tejidos MALT (Figura: Mucosa Intestinal). En humanos, adems se encuentra abundante tejido linfoide con centros germinales en las amgdalas farngeas y tambin en paredes bronquiales y a lo largo del tracto urogenital.

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Circulacin linfocitaria
Los rganos linfoides que es donde residen mayoritariamente las clulas inmunocompetentes se comunican entre s a travs de la circulacin sangunea y linftica que es por donde circulan estas clulas de unos lugares a otros. Esta circulacin implica el trnsito de clulas desde los rganos linfoideos primarios donde se forman, hasta los rganos linfoideos perifricos que es donde se almacenan para ejercer su funcin inmune. Tambin las clulas activadas o las clulas memoria salen de estos rganos linfoideos secundarios para distribuirse por los tejidos y ejercer all su funcin de defensa. Despus, por el sistema linftico vuelven a los ganglios e incluso se pueden incorporar a la circulacin sangunea (Figura: Circulacin linftica). En captulos posteriores se analizar este aspecto de la circulacin y los factores que en ello intervienen.

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