FOOD AND AGRICULTURE ORGANIZATION OF THE UNITED NATIONS

ESSAI DE GREEN MUSCLE SUR DES NYMPHES DE CRIQUET PELERIN DANS LA ZONE DE BENICHAB, OUEST DE LA MAURITANIE
Octobre-novembre 2006

Christiaan Kooyman, Wim C. Mulli et SidAhmed Ould Mohamed

Photo 1 : Cadavre dun criquet couvert de spores

ACRONYMS BCP CNLA FAO GM Biological Control Products (Pty.) Ltd. (producteur de Green Muscle) Centre National de Lutte Antiacridienne (Nouakchott, Mauritanie) Organisation des Nations Unies pour lAlimentation et lAgriculture Green Muscle

ESSAI DE GREEN MUSCLE SUR DES NYMPHES DE CRIQUET PELERIN DANS LA ZONE DE BENICHAB, OUEST DE LA MAURITANIE Octobre-novembre 2006

Executive summary
In October/November 2006, the FAO and the Mauritanian National Locust Control Centre (Centre National de Lutte Antiacridienne or CNLA) organised a field trial in Mauritania with the biological insecticide Green Muscle supplied by the South African company Biological Control Products (BCP). This product contains spores of the naturally occurring entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae var. acridum. The trial was financed by the International Fund for Agricultural Development and executed by a team of the CNLA under the technical supervision of an FAO consultant. The objective of the trial was to observe the effects of Green Muscle and natural enemies, like birds, lizards and rodents, on desert locust hopper bands. An FAO expert visited the site to make observations on the predation behaviour of birds and nocturnal predators on treated and untreated hopper bands. The team left for Benichab on 25 October and was shown the areas where hatching had been observed. At that time, the hoppers were in the 2nd instar and had congregated in bands of varying sizes. Most of these were in small valleys between sand dunes. While awaiting the arrival of the product, which was delayed during international transport, herders were assigned to the bands in order to keep track of them. Observers, who had been hired for the occasion, got the opportunity to familiarise themselves with the locusts and the observations that needed to be made. The product arrived on site on 1 November and the applications started the following day. Because of the uneven terrain, it was not possible to apply the product with a vehiclemounted sprayer, so it was decided to use Micron AU8000 motorised backpack sprayers. A total of 12 hopper bands were sprayed at 50 g a.i. per ha in plots varying in size from 0.25 to 8 ha, while 9 bands were kept untreated as controls. It had been evident almost from the start that the locusts were attacked by quite a number of predators. Five bands were even eliminated before the treatments took place. For that reason, the herders and observers were asked to keep a good distance from the hopper bands so as not to disturb the predators while at the same time trying to monitor the activities of the latter. All treated bands were eliminated in 4 to 8 days by the predators, especially golden sparrows, brown-necked ravens and jerboas. Out of the 9 control bands, only one was eliminated by ravens. The other bands were still intact 10 days after the treatments, when the trial was terminated. Samples were taken from all bands on day 2 after application. The hoppers were kept in cages of 30x30x30 cm placed in the shade of a tree. Each morning and evening, cadavers were removed and fresh food put in the cages. The cadavers were incubated under humid conditions to check whether death had been caused by the fungus. Mortality due to the fungus was high in most samples from treated bands and started on day 6 after application. However, five samples had low mortality, although the bands from which they had been taken were eliminated like the others. These were all rather small bands that did not stay long in the sprayed area. The hoppers had therefore not picked up many spores from the 3

vegetation and those that died in the cages were essentially those that had been directly hit. It is difficult to say whether this low percentage of infected hoppers significantly contributed to the elimination of these bands by predators, as even unsprayed bands can be eliminated in the presence of sufficiently large numbers of predators. At the end of the observations, total mortality in the treated cages varied from 5% to 82%, while it did not exceed 17% in the control cages except one with unexplained 48% mortality. Most of the mortality in the treated samples was caused by the fungus. Some cages containing untreated samples were contaminated causing some of the hoppers to die from infection. In a sample from one of the untreated bands, almost half of the hoppers died without sign of infection by the fungus. The most likely explanation for this is that the cage had been contaminated with pesticide, although the possibility of another pathogen cannot be excluded. Observations on the distance covered per day by the hopper bands and the numbers of grass clumps containing nymphs revealed strong fluctuations. Differences between treated and untreated bands became only evident during the last two days of the life of the treated bands. It can be concluded that Green Muscle was effective under the prevailing temperature conditions, which were rather favourable for the fungus. It was evident that though the product made the hoppers sick, they were finished off by the predators present in the area. This confirms the impression obtained from a previous trial in Algeria, where predation was shown to be an important mortality factor, especially in bands treated with Green Muscle. This trial highlights the effect of natural enemies on hopper bands in general (6 out of 14 untreated bands eliminated) and raises questions about the management of relatively small locust infestations.

Rsum excutif
En octobre/novembre 2006 la FAO et le Centre National de Lutte Antiacridienne (CNLA) ont organis un essai de terrain en Mauritanie avec linsecticide biologique Green Muscle qui avait t livr par la compagnie sud-africaine Biological Control Products (BCP). Ce produit contient des spores du champignon entomopathogne Metarhizium anisopliae var. acridum qui se trouve partout dans la nature. Lessai a t financ par le Fond International de Dveloppement Agricole et excut par une quipe du CNLA sous la direction technique dun consultant de la FAO. Lobjectif de lessai tait dobserver les effets de Green Muscle et des ennemis naturels, tels que les oiseaux, les lzards et les rongeurs, sur des bandes larvaires du criquet plerin. Un expert de la FAO a visit le site afin de faire des observations sur le comportement prdateur des oiseaux et des prdateurs nocturnes sur des bandes larvaires traites et non traites. Lquipe partit sur Bnichab le 25 octobre et les prospecteurs du CNLA leur montrrent les zones o des closions avaient t observes. A ce moment-l les larves taient en deuxime stade et staient rassembles en bandes de tailles varies. La plupart dentre eux se trouvaient dans des petites valles entre des dunes de sable. En attendant larrive du produit, qui avait t retard lors du transport international, des bergers furent affects aux bandes afin de les suivre. Des observateurs, qui avaient t engags pour cet essai, reurent loccasion de se familiariser avec les locustes et les observations qui devaient tre faites. Le produit arriva au site le 1 novembre et les pandages commencrent le lendemain. A cause du relief, il ntait pas possible dpandre le produit par moyen dun pulvrisateur 4

mont sur une voiture. Par consquent, il a t dcid dutiliser des pulvrisateurs dos motoriss de modle Micron AU8000. Douze bandes larvaires ont t traites la dose de 50 g de m.a. par ha dans des parcelles qui varirent en taille de 0,25 8 ha, tandis que 9 bandes ont t laisses non traites en tant que des tmoins. Il tait vident ds le dbut que les locustes taient attaques par un grand nombre de prdateurs. Cinq bandes ont mme t limines avant que les traitements naient lieu. Pour cette raison, on a demand aux bergers et aux observateurs de garder une bonne distance des bandes larvaires afin de ne pas dranger les prdateurs tout en essayant de suivre les activits de ces dernires. Toutes les bandes traites ont t limines dans 4 8 jours par les prdateurs, surtout des moineaux dors, des corbeaux bruns et des gerboises. Parmi les 9 bandes tmoins, juste une seule fut limine par des corbeaux. Les autres bandes taient encore intactes 10 jours aprs les traitements, lorsque lessai fut termin. Des chantillons ont t prlevs dans toutes les bandes 2 jours aprs traitement. Les larves ont t gardes dans des cages de 30x30x30 cm qui avaient t places dans lombre dun arbre. Chaque matin et soir les cadavres ont t enlevs et de la nourriture frache mise dans les cages. Les cadavres ont t incubs sous des conditions humides afin de contrler si la mort avait t provoque par le champignon. La mortalit cause par le champignon tait leve dans la plupart des chantillons des bandes traites et commenait 6 jours aprs application. Cependant, cinq chantillons ont subis une mortalit rduite, bien que les bandes dans lesquelles ils avaient t prlevs, avaient t limines comme les autres. Elles taient toutes des bandes relativement petites qui nont pas rests longtemps dans les zones traites. Par consquent, les larves nont pas pu ramasser assez de spores de la vgtation et la quasitotalit de celles qui taient mortes dans les cages, avaient t touches directement. Il est difficile de dire si ce bas pourcentage de larves infectes a contribu dune manire significative llimination de ces bandes par les prdateurs, car mme des bandes non traites peuvent tre limines en prsence de nombres suffisamment grands de prdateurs. A la fin des observations la mortalit totale dans les cages des traites varia de 5% 82%, tandis quelle ne dpassa pas 17% dans les cages des tmoins, sauf dans une cage avec une mortalit inexplique de 48%. Presque toute la mortalit dans les chantillons de traites fut cause par le champignon. Quelques cages de tmoins avaient t contamines, ce qui a caus la mort par infection dun certain nombre de larves. Dans un chantillon dune des bandes non traites presque la moiti des larves mourut sans signe dinfection par le champignon. Lexplication la plus probable est que la cage avait t contamine par un insecticide, bien que la possibilit dune infection par un autre pathogne ne peut pas tre exclue. Des observations sur la distance parcourue par jour par les bandes larvaires et sur le nombre de touffes de gramines contenant des larves ont rvl des fortes fluctuations. Des diffrences entre les bandes traites et non traites ne sont devenues videntes que lors des deux derniers jours de la vie des bandes traites. Il peut tre conclu que Green Muscle fut efficace sous les conditions courantes de temprature, qui taient trs favorables au champignon. Bien que le produit rendait les larves malades, il tait vident quelles furent acheves par les prdateurs qui taient prsent dans la zone. Ceci confirme limpression obtenue lors dun essai prcdent en Algrie, o il fut dmontr que la prdation est un facteur de mortalit important, surtout dans les bandes traites au Green Muscle. Le prsent essai souligne leffet des ennemis naturels sur les bandes larvaires en gnral (6 bandes non traites dans 14 tant limines) et met en cause la gestion dinfestations relativement petites de locustes.

Introduction
Le biopesticide Green Muscle (ci-aprs appel GM) est dj disponible commercialement depuis 1998; pourtant ce produit base de spores du champignon entomopathogne Metarhizium anisopliae var. acridum est encore peu utilis dans la lutte antiacridienne. Il est reconnu que GM na presque pas deffets ngatifs sur la sant humaine et animale ou sur lenvironnement en gnral (e.g. FAO, 2002). Cependant les organismes responsables de la lutte antiacridienne se proccupent de la courte dure de viabilit sous stockage du produit formul compare celle des produits chimiques. Aussi ne sont-ils pas convaincus de son efficacit surtout sous des conditions de tempratures extrmes. Son cot lev la dose recommande rduit encore son acceptabilit. Ce qui manque, ce sont surtout des donnes sur leffet de GM sur le Criquet plerin. Parce que de bonnes populations de Criquet plerin ne sont pas souvent disponibles, peu dessais ont t mens sur cette espce. Pendant les annes 90, quelques essais petite chelle ont donn des rsultats prometteurs (Kooyman & Godonou, 1997, Langewald et al., 1997), mais aucun essai grande chelle et sous conditions oprationnelles na t men jusquen 2005. Un essai au Niger dbut 2003 a signal le problme de basses tempratures sur lefficacit de GM (Aston et al., 2004). Par souci de prserver lenvironnement et de promouvoir lutilisation de produits antiacridiens alternatifs, la FAO a essay plusieurs reprises dorganiser des essais de GM grande chelle afin de collecter des donnes relatives son efficacit et sa capacit sous des conditions oprationnelles. En consquence, la recrudescence du Criquet plerin en fin 2003 dans la rgion du Sahel a offert une opportunit au CNLA dorganiser un petit essai de GM en Mauritanie qui a donn des rsultats encourageants. En 2005, toutes les conditions taient runies pour mener un essai oprationnel en Algrie sur des bandes larvaires de stade L3/4 (Kooyman et al., 2005). Ces bandes traites ont disparues dans la semaine suivant le traitement mais aucun cadavre intact na t trouv sur le terrain. Bien que les bandes naient pu tre suivies de prs cause de contraintes de scurit, des observations ponctuelles de prdation ont dmontr quelles avaient t limines par des prdateurs. Limpact des prdateurs sur les insectes traits avec GM a t confirm une fois encore lors dun essai au Niger sur une population de criquets ails la mme anne (Ouambama et al., 2006). La dcouverte dun essaim de Criquet plerin en ponte en Mauritanie au mois doctobre 2006 offrit une nouvelle opportunit de faire un essai oprationnel sur des bandes larvaires. Lobjectif tait de suivre leffet de GM et des prdateurs sur les bandes traites en comparaison avec des bandes non traites. Lessai a t excut par une quipe du Centre National de Lutte Antiacridienne (CNLA) sous la supervision technique de deux experts de la FAO.

Lieu dexprimentation
Lessai a eu lieu prs de Bnichab (19 26 N et 15 22 W), environ 220 km au nord-nordest de Nouakchott, dans la partie ouest de la Wilaya de lInchiri (Fig. 1). La zone est caractrise par des cordons dunaires sableux spars par des plaines et des valles interdunaires (Photo 1). La vgtation tait domine par des touffes de Panicum turgidum Forssk. et des taches de Boerhavia repens L. avec dautres espces plus faible densit comme Heliotropium ramosissimum (Lehm.) DC., Indigofera argentea L.,

Fig. 1a : Carte de Mauritanie

Fig. 1b : Position du site de lessai

Acacia tortilis raddiana (Savi) Brenan, Capparis decidua (Forssk.) Edgew. et Maerua crassifolia Forssk. La faune aviaire tait essentiellement compose doiseaux chanteurs comme des moineaux (Passer luteus (Lichtenstein) et P. simplex (Lichtenstein), des traquets (Oenanthe oenanthe Linnaeus), O. hispanica (Linnaeus), O. deserti (Temminck) et O. isabellina (Temminck)), des alouettes (Alaemon alaudipes (Desfontaines), Calandrella brachydactyla (Leisler) et Eremopterix nigriceps (Gould)) et des corbeaux (Corvus ruficollis Lesson). Les oiseaux non chanteurs taient essentiellement des courvites (Cursorius cursor (Latham)). Dautres vertbrs taient prsents dans la zone: des lzards (Acanthodactylus dumerilii Milne-Edwards et une espce de gecko), des rongeurs (Jaculus jaculus Linnaeus, Gerbillus sp. et autres) et des chats sauvages (Felis silvestris libyca Forster). Lentomofaune tait reprsente par des sauteriaux (e.g. Acrotylus longipes (Charpentier), Sphingonotus savignyi Saussure, Ochrilidia geniculata (I. Bolvar) et Diabolocatantops axillaris (Thunberg)), des mantes (surtout Eremiaphila sp.), des gupes, des fourmis, des mouches et des coloptres (Anthia sexmaculata (Fabricius) et Pimelia angulata Fabricius). Lactivit conomique principale dans la zone tait llevage de dromadaires et de petits ruminants. Un essaim avait pondu dans de petites valles interdunaires du cot sud-est du cordon, ce qui a rsult en beaucoup de taches larvaires assez petites et isoles les unes des autres. Au moment o lquipe est arrive, les nymphes taient toutes au stade L2 et en phase transiens. Leur comportement tait bien grgaire et les bandes denses et cohsives. Cependant, un vent fort du NE soufflait, qui a continu pendant quatre jours. Ce vent a entran la dsintgration des bandes, probablement parce que la phromone des nymphes tait emporte et donc difficile sentir par les individus. Ce fractionnement a t renforc par les nombreuses valles interdunaires qui ont rendu plus difficile la communication olfactive entre les taches larvaires.

Matriels et mthodes
Application du biopesticide Le produit Green Muscle de Biological Control Products (BCP) a t livr comme une formulation concentre miscible lhuile (OF) dans des bidons plastiques de 20 litres (500 g m.a./L). Ceux-ci ont t transports par avion Nouakchott et reus par le CNLA sans dlai important. Par contre, les bidons sont rests laroport de Paris pendant plus dune semaine cause dune accumulation de fret chez Air France. Aprs sa rception par le CNLA, le produit a t stock pendant 48 heures 20C dans une chambre climatise avant son utilisation afin dviter une perte de viabilit des spores cause de tempratures leves. Cette viabilit a t value au CNLA par un test de germination qui a donn un taux denviron 98%. Afin de raliser les traitements, un seul bidon de GM a t transport Bnichab le 01/11/06 par un vhicule station wagon climatis. Ce bidon a t ouvert le mme jour et on a constat quau moins 1 kg de spores avait dj sdiment formant, sur le fond, une pte caoutchouteuse qui ne pouvait pas tre remise en suspension par simple agitation. Par consquent, la totalit du contenu du bidon a t dilue dans un ft de gasoil (200 L) pour obtenir une concentration correcte de 50 g de spores par litre. Des chantillons prlevs le lendemain (dbut des traitements) avaient un taux de germination denviron 95%. Au moment o le produit est arriv au campement, il y avait 12 bandes larvaires disponibles pour un traitement avec GM. La majorit des nymphes tait en phase transiens avec la prsence dindividus solitaires. A quelques kilomtres de la zone traite, 9 taches larvaires ont t identifies comme tmoins non traits. Ltat de desschement et la dominance des touffes de Panicum turgidum ont incit les larves sy percher pendant la majeure partie de la journe. Le terrain tant trop accident pour des traitements par voiture, il a t dcid dappliquer le produit avec des appareils motoriss dos Micronair AU8000. La taille des parcelles traites a vari en fonction du nombre de touffes de Panicum occupes par des nymphes et de la superficie de la valle dans laquelle se trouvait la bande. Le tableau en annexe 1 montre les tailles des parcelles et les conditions mtorologiques pour chaque bande. Les traitements ont t effectus par une ou deux personnes selon la taille de la parcelle. Le dbit des appareils avait t rgl 80 ml/min pour arriver une dose volume d1 L/ha avec une distance de 10 m entre les passages et une vitesse de 80 m/min. Comme la concentration tait de 50 g/L, la dose en matire active tait donc de 50 g/ha. Pour vrifier les paramtres de traitement, surtout la largeur de landain (10 m), des gouttelettes du produit ont t collectes sur des papiers olosensibles numrots et attachs verticalement des piquets mtalliques 30 cm au-dessus du sol. Les piquets ont t placs sous le vent selon 5 lignes de 50 m de longueur pour recueillir le produit mis lors du passage effectu par lapplicateur. Observations mtorologiques Compte tenu de limportance du rle jou par la temprature ambiante sur la vitesse daction de Metarhizium, celle-ci a t mesure chaque heure (sauf en pleine nuit) avec un thermomtre simple.

Photo 2 : Soins des cages dchantillons. Observations et chantillonnage Le Criquet plerin Dix ouvriers bergers ont t recruts pour suivre les bandes larvaires et les localiser pendant toute la journe. Par contre, les observations sur le comportement et les activits des nymphes ont t faites par six ingnieurs recruts pour la dure de lessai. Au dbut des activits et avant les traitements, il a t recommand aux observateurs de suivre de prs les insectes qui taient dans leurs zones dobservation. Cette approche a influenc la prsence des prdateurs des criquets, surtout les oiseaux, qui ont t gns par les mouvements de nos agents, ce qui na pas permis de quantifier leur effet de prdation sur la population. Par consquent, il a t demand aux agents de rester par la suite une bonne distance des bandes larvaires sauf en cas dobservations requises sur la fiche de suivi (trois fois par jour). Les observations faites sur les bandes larvaires figurent en annexe 2. Des chantillons de nymphes ont t collects dans toutes les bandes (traites ou non) au 2ime jour aprs les traitements et encore une fois trois jours plus tard dans les bandes encore existantes. Ces chantillons ont t mis dans des cages de 30x30x30 cm places lombre dun arbre Capparis decidua. Un observateur (Ingnieur) a t charg du suivi des cages, du tri de cadavres et de la mise de nourriture frache dans les cages (Photo 2). Les cadavres ont t incubs dans des conditions humides pour vrifier si leur mortalit tait due laction du champignon ou non. Lorsque les observations ont pris fin sur le terrain le 13/11/06, les cages ont t transfres au CNLA Nouakchott o les observations ont continu jusquau 26/11/06.

Les prdateurs Des observations relatives la prdation, au cannibalisme et aux activits des charognards ont t conduites ds larrive de lquipe sur le terrain. Ces observations taient gnrales et qualitatives cause du rgime des observations dune part (voir paragraphe prcdent) et dautre part de larrive tardive du consultant responsable des observations sur les oiseaux. Par consquent, peu de sries dobservations ont pu tre faites avant les traitements mais une liste de tous les prdateurs et charognards a t dresse, qui inclut quelques espces rencontres lors de quelques visites aux bandes pendant la nuit. Aprs les traitements, des observations ont t faites afin de quantifier si possible le rle des divers prdateurs sur les nymphes. En ce qui concerne les oiseaux, la prdation par les moineaux dors a t observe laide dun tlescope. Une des bandes larvaires traites et une bande tmoin ont t choisies au hasard et le nombre de moineaux prsents ainsi que les individus capturant des nymphes compts. Des observations supplmentaires ont t faites pour estimer le nombre de nymphes captures par des corbeaux bruns.

Rsultats
Qualit des traitements Lanalyse du dpt des gouttelettes sur les papiers olosensibles montre que le pic se situe entre 4 et 14 m, ce qui justifie le choix dun andain de 10 m (voir Figure 2 et Annexe 3). Il reste noter quun seul traitement a t suivi avec des papiers olosensibles. Les observations visuelles faites pendant les autres traitements nont montr aucune anomalie et puisque tous les traitements ont t excuts par les mmes personnes, la qualit des tous les traitements est considre comme satisfaisante.
70

60

Nombre de gouttelettes (n/cm)

50

40

30

20

10

0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50

Distance (m)

Figure 2 : Distribution de gouttelettes sur les papiers olosensibles en fonction de la distance.

10

50 45 40 35

Temprature

30 25 20 15 10 5 0
11 /1 1/ 20 06 10 /1 1/ 20 06 12 /1 1/ 20 06 20 06 20 06 20 06 20 06 20 06 20 06 20 06 20 06

T 1,5 m T 5 cm

2/ 11 /

3/ 11 /

4/ 11 /

5/ 11 /

6/ 11 /

7/ 11 /

Temps

Figure 3 : Tempratures ambiantes enregistres 1,5 m et 5 cm du sol.

Conditions mtorologiques pendant lessai La figure 3 prsente lvolution de la temprature 5 cm et 1,5 m au-dessus du sol partir du jour du premier traitement et jusqu la fin de lexprience. Le champignon se dveloppe assez bien quand la temprature interne de linsecte se situe entre 20 et 35C, surtout entre 25 et 30C. En moyenne, les tempratures ambiantes furent hors de cette gamme pendant environ 8 heures et demi par jour. En se chauffant au soleil, les nymphes infectes peuvent ajouter un maximum de 2 heures et demi de tempratures dfavorables au champignon. Donc le champignon a pu se dvelopper assez bien pendant au moins 13 heures par jour.

Survie des bandes larvaires La plupart des individus qui constituaient les bandes traites ont disparu entre quatre et huit jours aprs leurs traitements respectifs. Cinq bandes ont disparu en quatre jours et les autres en 5 8 jours. Dans les quelques touffes de Panicum contenant encore des nymphes, le nombre dindividus tait toujours infrieur dix. Par contre, les bandes non traites sont restes intactes jusqu la fin de lessai sauf une (C02) qui a t limine par des corbeaux. La survie des bandes est rsume en figure 4. La disparition des bandes traites a certainement t cause par les prdateurs prsents dans la zone.

11

8/ 11 /

9/ 11 /

G1 G2 G3 G4 G5

Bandes larvaires

G6 G6' G7/7' G8 G9/10 C1 C2 C3/9 C4/8 C5/6 C7 0 2 4 6 8 10 12

Elimine par des corbeaux

Survie aprs traitement (jours)

Figure 4 : Survie des bandes larvaires aprs les traitements. Les barres vertes reprsentent des bandes traites et les barres jaunes des bandes non traites. Une flche signifie que la bande tait intacte le jour des dernires observations. Les numros doubles (p.e. G9/10) signifient que deux bandes ont fusionns.

Distance parcourue par les bandes larvaires La distance moyenne marche par jour par les bandes larvaires est prsente en figure 5. Les bandes traites ont t divises en bandes de courte (5 jours) et de longue survie (>5 jours). Il ny a pas de diffrence significative entre les distances moyennes parcourues par les bandes traites et tmoins, sauf les 6 et 7 novembre entre les bandes de courte et longue survie et les 8-10 novembre entre les bandes de longue survie et les tmoins. A partir du 8 novembre, il y
400 350 Tmoins Longue survie Courte survie

Distance moyenne parcourue (m)

300 250 200 150 100 50 0 -5 -4 -3 -2 -1 0 1 2 3 4

Jours aprs traitement

Figure 5 : Distance moyenne marche par jour par les bandes larvaires traites (longue et courte survie) et tmoins.

12

a surtout eu une rduction marque de la distance parcourue par jour par les bandes de longue survie, ce qui correspond au moment o les nymphes commenaient montrer des signes de maladie et o la pression prdatrice est devenue intense. Autour des 2/3 et 7/8 novembre, les distances parcourues par toutes les bandes ont t relativement courtes car les nymphes ont mu ces jours-l, dabord de L3 L4 et ensuite de L4 L5.

Nombre des touffes de Panicum occupes par les nymphes Le nombre de touffes de Panicum occupes par des nymphes a beaucoup fluctu (Fig. 6). Gnralement, les nymphes ont occup moins de touffes au milieu de la journe compar au matin et au soir. Cest la raison pour laquelle seules les donnes du matin et du soir sont utilises. La bande C02, qui a t limine par des corbeaux, est exclue des donnes. La figure montre une rduction du nombre de touffes occupes par les bandes traites aprs les traitements, tandis que ce nombre fluctue autour de la mme valeur chez les bandes tmoins.
80

Nombre moyen de touffes occupes

70 60 50 40 30 20 10 0
-3S -2M -5M -4S -3M -5S -4M -2S -1M

Tmoins Longue survie Courte survie

7S

4S

6S

3S

0S

1S

2S

5M

7M

4M

6M

0M

1M

-1S

Jours aprs traitement

Figure 6 : Nombre moyen de touffes occupes par des nymphes le matin (M) et le soir (S).

Survie et sporulation dans les cages La figure 7 montre les pourcentages de survie et les taux de sporulation dans les cages. La mortalit dans les chantillons prlevs des bandes G01, G03, G04, G05 et G06 tait exceptionnellement faible et est montre sparment (courbe vert clair). Par contre, la mortalit dans le deuxime chantillon de G06 tait plus leve (50% la fin des observations). Les chantillons des bandes C01 et C09 ont t contamins lors des manipulations et sont aussi montrs sparment (courbe bleu clair). Un autre chantillon dune bande non traite (C02) a subi une mortalit assez leve mais sans aucun signe dinfection par le champignon (courbe turquoise).

13

3M

2M

9M

8M

9S

5S

8S

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 GM haute mort. GM basse mort. GM 2me ch. mort. Tmoin mort. Tmoin cont. mort. Tmoin haute mort. GM haute spor. GM basse spor. GM 2me ch. spor. Tmoin spor. Tmoin cont. spor. Tmoin haute mort. spor.

Jours aprs traitement

Figure 7 : Survie et sporulation dans les chantillons de nymphes dans les cages.

Limpact des prdateurs Une liste des prdateurs et charognards observs lors de lessai se trouve en annexe 4. Les prdateurs peuvent tre classs en deux groupes selon leur priode dactivit : diurnes et nocturnes.
Tableau 1 : Espces doiseaux observes sur les sites dexprimentation et information sur leur comportement et leur importance comme prdateurs de nymphes du Criquet plerin. Nom vernaculaire
Faucon crcerelle Courvite isabelle Ganga sp. Grand-duc dEurope Huppe fascie Sirli du dsert Alouette calandrelle Moinelette front blanc Hirondelle rousseline Traquet motteux Traquet oreillard Traquet du dsert Traquet isabelle Fauvette tte noire Fauvette passerinette Fauvette lunettes Pie-griche mridionale Corbeau brun Moineau blanc Moineau dor

Nom scientifique
Falco tinnunculus Cursorius cursor Pterocles sp. Bubo bubo ascalaphus Upupa epops Alaemon alaudipes Calandrella brachydactyla Eremopterix nigriceps Hirundo daurica Oenanthe oenanthe Oenanthe hispanica Oenanthe deserti Oenanthe isabellina Sylvia atricapilla Sylvia cantillans Sylvia conspicillata Lanius meridionalis Corvus ruficollis Passer simplex Passer luteus

Comportement
I PG PG S I T G T, N I T T T T I I I T G PG G

Sporulation (%)

Survie (%)

Prdateur des criquets

? ++ 0 0 ? + ? + 0 + + + + 0 0 0 + +++ + +++

S solitaire, I individus, PG petits groupes, G grands groupes, T territoriale, N- nidification ? inconnu, 0 pas de prdation observ, + - prdateur modeste, ++ - prdateur important, +++ - prdateur trs important

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Les prdateurs diurnes Oiseaux - Le Tableau 1 rsume les observations sur le comportement des oiseaux observs. Parmi les oiseaux les plus importants comme prdateurs figurent le Corbeau brun Corvus ruficollis et le Moineau dor Passer luteus. Quelques groupes de Courvites isabelles Cursorius cursor ont t observs plusieurs fois, surtout dans la zone des bandes non traites. Bien que prdateurs importants, ils ne sont pas rests assez longtemps pour avoir un impact important. Le Moineau blanc Passer simplex, la Moinelette Front blanc Eremopterix nigriceps et quatre espces de traquets (Oenanthe oenanthe, O. hispanica, O. deserti et O. isabellina) ont t observs attrapant des nymphes mais leur effet tait faible en raison de leur comportement territorial. Des observations comparatives ont t faites sur le comportement de groupes de moineaux dors sur une bande larvaire traite et une bande tmoin. Le 9 novembre, un groupe denviron trois cent moineaux dors a t suivi pendant ses activits sur une bande larvaire traite de stade L4. Les moineaux faisaient des sorties en groupe partir dun acacia situ en bord de valle. Leur activit principale consistait se nourrir avec des graines de P. turgidum mais, ds que les nymphes attiraient leur attention, ils descendaient des pis de Panicum pour les capturer. Aprs 10 20 minutes, ils retournaient vers larbre et rptaient, plus tard, la mme opration. Le 10 novembre, des observations similaires ont t faites sur une bande larvaire tmoin. Dans ce cas, environ 150 moineaux dors ont montr le mme comportement partir dun C. decidua situ en bord de valle o se trouvait la bande larvaire. Les rsultats des observations se trouvent dans le tableau 2.
Tableau 2 : Dure de fourrager (calibre pour le temps) de moineaux dors Passer luteus se nourrissant de nymphes du criquet plerin (stade L4) dans une bande larvaire traite avec Green Muscle et dans une bande tmoin. Traitement Dure des observations (minutes)
GM Tmoin 24 96

Dure de fourrager (minutes corr.)

5.75 8.08

N oiseaux N oiseaux observs avec des nymphes

179 239 42 17

% fourrager calibr

24.0 8.4

Reptiles Plusieurs espces de reptiles ont t observes, telle que la vipre Cerastes cf. vipera, le Varan du Dsert Varanus griseus et le lzard Acanthodactylus cf. dumerilii, ainsi quune espce de gecko non identifie et de nombreuses traces du poisson des sables Scincus scincus. Le varan du dsert est connu comme prdateur des acridiens (Schleich et al., 1996). Les acanthodactyles ont t observs capturant des nombres considrables de nymphes (Photo 3).
Photo 3 : Un Acanthodactylus mange Arthropodes Lactivit des gupes une nymphe L5. (Sphecidae : deux ou trois espces) tait trs leve. Les gupes prenaient surtout des nymphes des stades L3 et L4 mais mme des L5 taient capturs. Pourtant, les stades gs taient souvent trop lourds pour les gupes. Dans ce cas, la gupe abandonnait sa proie aprs

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lavoir paralyse. Le coloptre Anthia sexmaculata a t observ attrapant des nymphes mais son impact est considr comme assez faible car il ne prenait que de petites nymphes jusqu L3. Les prdateurs nocturnes Mammifres - Ces prdateurs sont actifs pendant la nuit et attaquent les nymphes lorsquelles sont perches dans les touffes. Lors des visites nocturnes aux bandes larvaires, de nombreux rongeurs ont t observs. Les plus abondants appartenaient une espce de gerbille, Gerbillus cf. gerbillus, et une espce de gerboise, probablement Jaculus jaculus (Photos 4). Quelques gerbilles ont t observes sautant pour attraper des nymphes accroches des tiges Photo 4 : Une gerboise fourrage la nuit. de Panicum. Pour sassurer que les gerboises consomment aussi des criquets, un exemplaire a t attrap et mis dans une cage. Aprs un jour dacclimatation, il commenait consommer les nymphes introduites dans la cage. Un chat sauvage dAfrique, Felis silvestris libyca, a t aperu plusieurs fois et ses traces ont souvent t trouves le matin autour des touffes de Panicum contenant des nymphes. De nombreuses autres traces ont t trouves autour des touffes, certaines faites par des oiseaux, lzards, gerboises et gerbilles et dautres par des acteurs inconnus. Arthropodes De nombreux scorpions ont t observs pendant la nuit. Un individu captur mis dans une cage avec une nymphe L5 la attaque et paralyse immdiatement, confirmant que les scorpions sont aussi des prdateurs de criquets.

Les charognards Les nymphes paralyses par des gupes mais abandonnes en raison de leur poids trop important ont t enleves par des charognards gnralement le jour mme, de mme que les morceaux de cadavres laisss par les oiseaux. Les principaux charognards taient deux espces de fourmi; le coloptre Pimelia angulata a jou un moindre rle.

Discussion
Le rsultat du prsent essai peut tre considr comme concluant car toutes les bandes traites ont t limines compar une seule parmi les neuf bandes non traites. Malgr la prsence des mmes prdateurs dans les deux zones, une diffrence de pression prdatrice a t mesure avec trois fois plus de prdation par les moineaux dors sur une bande larvaire traite par rapport une bande tmoin. Les observateurs ont constat un changement de comportement chez les nymphes traites : quatre jours aprs les traitements, elles sont devenues beaucoup plus lentes et donc plus faciles attraper. Etant donn que la moiti des bandes traites avaient dj t limine par les oiseaux ce moment-l, il est fort probable que dautres facteurs ont jou un rle, parmi lesquels trs probablement leur petite taille. Des

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petites bandes nont pas le mme effet effrayant sur les prdateurs que celles de grande taille, mme si les nymphes sautent tous ensembles. Lors des observations sur les moineaux dors, il a galement t constat que ces oiseaux avaient plus de difficult attraper une larve dans une bande tmoin que dans une bande traite. Bien que cela nait pas t quantifi chez toutes les bandes, les observations quantitatives sur les deux bandes suivies suggrent que les groupes de moineaux dors ont concentr leurs efforts sur les bandes traites, probablement parce que les nymphes taient affaiblies par le GM. Cependant, on ne peut pas tre sr que toutes les bandes traites auraient survcu sans traitement, surtout celles de petite taille qui pourraient tre limines par les prdateurs sans laide du champignon. Cinq bandes ont t limines avant les traitements et une bande non traite aprs. Aussi, la mortalit dans les chantillons prlevs dans cinq bandes traites (G01, G03, G04, G05 et G06) tait trs faible avec peu ou pas de sporulation sur les cadavres. Apparemment, les larves ont quitt assez vite le lieu de traitement avant de collecter suffisamment de spores dans la vgtation. Toutes ces bandes taient assez petites et pourraient donc tre limines pour la seule raison de leur taille. Le cas de G06 est curieux parce que cette bande a survcu le plus longtemps. Bien que la mortalit dans son premier chantillon ft faible, le deuxime chantillon a montr de bonnes mortalit et sporulation. Une analyse des mouvements des bandes montre que G06 et G06 ont t trs proches lune de lautre pour quelque temps avant la prise du deuxime chantillon. Il est donc probable quune partie de la bande G06 a rejoint la bande G06. Une autre petite bande, G08, a reu une bonne dose de GM parce quelle na presque pas boug aprs le traitement. Elle tait pige dans une petite valle avec une seule sortie troite. La direction prfre de mouvement tait vers la dune mais chaque fois que les nymphes ont tent de la traverser, il y avait des corbeaux qui les ramassaient et les chassaient vers la valle, o elles se cachaient de nouveau dans des touffes de Panicum. Elles ont fini par tre pratiquement limines en 4 jours. Le champignon a probablement acclr ce processus vers la fin. Ce sont les plus grandes bandes qui ont survcu le plus longtemps, et cest chez ces bandes o leffet du champignon tait le plus vident. Les nymphes sont devenues sensiblement plus lentes et faciles attraper. On les a aussi vu se chauffer au soleil au milieu de la journe, ce qui est un comportement caractristique de criquets malades. Ces bandes ont aussi offert une occasion dtudier la prdation par les oiseaux. On a fait des efforts pour estimer les nombres de nymphes dans les bandes. Cette estimation est la plus facile quand toutes les nymphes dune bande sont descendues de leurs perchoirs. Il faut beaucoup dexprience pour estimer le nombre de nymphes dans un arbuste ou une touffe de Panicum et mme les estimations des experts varient souvent beaucoup. Dans le cas du prsent essai, une large proportion de nymphes tait toujours perche dans des touffes de Panicum. Compte tenu du fait que les observateurs taient relativement inexpriments et que le nombre de touffes estimer tait assez important, il a t dcid de ne pas essayer destimer le nombre de nymphes. A la place, on supposait que le nombre de touffes occupes par des nymphes serait proportionnel au nombre total de nymphes et pourrait donc servir comme mesure de la taille dune bande. En ralit, le nombre de touffes occupes par une seule bande a beaucoup fluctu et pas seulement au cours dune journe mais aussi dun jour lautre. Une raison ce phnomne tait probablement la variation du nombre de touffes disponibles aux bandes au cours de leurs dplacements. Mais il y avait au moins deux autres raisons. On a constat que les nymphes

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se dispersaient lors dune forte pression des prdateurs et que la mme chose se passait quand il y avait un troupeau de chameaux paissant sur les touffes de Panicum. Avec du recul, on aurait d refuser aux chameliers de faire patre leur btail parmi les bandes larvaires. Nanmoins, on a constat une rduction nette du nombre de touffes occupes par les bandes traites contrairement aux tmoins. Le nombre de touffes occupes a rarement diminu jusqu 1 ou 2. Vers la fin dune bande, il y avait parfois encore plus de dix touffes avec des nymphes mais leur nombre par touffe tait toujours faible. La distance parcourue par jour ntait pas trs diffrente entre les bandes traites et non traites. Les bandes courte survie se sont dplaces assez loin jusqu la fin. Parce que les prdateurs ont limin ces bandes dans un dlai de 4 5 jours, les nymphes ne sont pas devenues trs malades. Par contre, les bandes longue survie nont pas boug beaucoup pendant les deux derniers jours de leur vie, c'est--dire 6 8 jours aprs leur traitement. Normalement la mortalit au terrain commence aprs environ une semaine; donc ces bandes ont d avoir une large proportion de nymphes trs malades vers la fin.

Rfrences
Aston et al. (2004) Medium scale field trial with the insect pathogenic fungus Metarhizium anisopliae var. acridum (Green Muscle) against the Desert Locust (Schistocerca gregaria) in Niger. FAO report. FAO (2002) Report of the expert consultation and risk assessment on the importation and large-scale use of mycopesticides against locusts. Rome, 2-7 December 2001: 35 pp. Kooyman, C. & Godonou, I., (1997). Infection of Schistocerca gregaria (Orthoptera: Acrididae) hoppers by Metarhizium flavoviride (Deuteromycotina: Hyphomycetes) conidia in an oil formulation applied under desert conditions. Bulletin of Entomological Research 87: 105-107. Kooyman, C. et al. (2005) Essai de Green Muscle sur des nymphes du criquet plerin dans la Wilaya dEl Oued, nord-est de lAlgrie. FAO report: 23 pp. Langewald, J. et al. (1997) Field treatment of Desert Locust (Schistocerca gregaria Forskl) hoppers in Mauritania using an oil formulation of the entomopathogenic fungus Metarhizium flavoviride. Biocontrol Science and Technology 7, 603-611. Ouambama, Z. et al. (2006) Essai du biopesticide Green Muscle sur des adultes du criquet plerin dans la valle dAgheliough Arlit au Niger. FAO report: 22 pp. Schleich, H.H. et al. (1996) Amphibians and reptiles of North Africa. Koenigstein, Germany, Koeltz Scientific Books: 630 pp.

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Annexe 1. Donnes des applications du Green Muscle dans la rgion de Bnichab, Mauritanie

Traitements de bandes larvaires de Schistocerca gregaria

Pays: Mauritanie Mthode: voie terrestre Vitesse: 80 m/min Buse: no. 2 Dbit: 80 ml/min Volume: 1 l/ha Bande G01 Wilaya: Daira: Commune: Village: Benichab Pulvrisateur: Micronair AU8000 Hauteur mission: 1 m RPM : 4500 Andain: 10 m Dose m.a.: 50 g/ha (2.5*10E12 spores/ha) Date: 02/11/06 19 26' 23'' N 15 22' 08'' W Superficie: 0.25 ha Temps traitement: Dbut: 08.05 Vitesse vent: Dbut: 2.9 m/s Temprature: Dbut: 26C Date: 02/11/06 19 26' 43'' N 15 21' 53'' W Superficie: 1.5 ha Temps traitement: Dbut: 08.40 Vitesse vent: Dbut: 1.6 m/s Temprature: Dbut: 29.5C Date: 02/11/06 19 26' 43'' N 15 22' 00'' W Superficie: 0.5 ha Temps traitement: Dbut: 09.25 Vitesse vent: Dbut: 2.9 m/s Temprature: Dbut: 33C Date: 02/11/06 19 26' 36'' N 15 21' 53'' W Superficie: 0.9 ha Temps traitement: Dbut: 10.05 Vitesse vent: Dbut: 3.2 m/s Temprature: Dbut: 36.5C Date: 02/11/06 19 26' 40'' N 15 21' 33'' W Superficie: 0.5 ha Temps traitement: Dbut: 17.15 Vitesse vent: Dbut: 2.3 m/s Temprature: Dbut: 41.5C Date: 02/11/06 19 26' 47'' N 15 21' 50'' W Superficie: 2 ha Temps traitement: Dbut: 17.50 Vitesse vent: Dbut: 1.6 m/s Temprature: Dbut: 38C Date: 02/11/06 19 26' 42'' N 15 21' 40'' W Superficie: 0.25 ha Temps traitement: Dbut: 18.30 Vitesse vent: Dbut: 0.9 m/s Temprature: Dbut: 34C

Fin: 08.10 Fin: 2.4 m/s Fin: 27C

Bande G02

Fin: 09.00 Fin: 1.0 m/s Fin: 32C

Bande G03

Fin: 09.35 Fin: 3.3 m/s Fin: 33C

Bande G04

Fin: 10.20 Fin: 3.3 m/s Fin: 37C

Bande G05

Fin: 17.25 Fin: 2.1 m/s Fin: 40.5C

Bande G06

Fin: 18.20 Fin: 1.3 m/s Fin: 35C

Bande G06

Fin: 18.35 Fin: 0.7 m/s Fin: 33.5C

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Annexe 1. Donnes des applications du Green Muscle dans la rgion de Bnichab, Mauritanie

Traitements de bandes larvaires de Schistocerca gregaria

Pays: Mauritanie Mthode: voie terrestre Vitesse: 80 m/min Buse: no. 2 Dbit: 80 ml/min Volume: 1 l/ha Bande G07 Wilaya: Daira: Commune: Village: Benichab Pulvrisateur: Micronair AU8000 Hauteur mission: 1 m RPM : 4500 Andain: 10 m Dose m.a.: 50 g/ha (2.5*10E12 spores/ha) Date: 03/11/06 19 27' 01'' N 15 21' 40'' W Superficie: 8 ha Temps traitement: Dbut: 08.30 Vitesse vent: Dbut: 0.9 m/s Temprature: Dbut: 29.5C Date: 03/11/06 19 27' 05'' N 15 21' 41'' W Superficie: 4.3 ha Temps traitement: Dbut: 09.30 Vitesse vent: Dbut: 2.8 m/s Temprature: Dbut: 32.5C Date: 03/11/06 19 27' 06'' N 15 21' 36'' W Superficie: 0.66 ha Temps traitement: Dbut: 10.05 Vitesse vent: Dbut: 1.4 m/s Temprature: Dbut: 35.5C Date: 04/11/06 19 27' 05'' N 15 21' 09'' W Superficie: 1.1 ha Temps traitement: Dbut: 09.25 Vitesse vent: Dbut: 2.9 m/s Temprature: Dbut: 33.5C Date: 04/11/06 19 26' 57'' N 15 21' 05'' W Superficie: 0.8 ha Temps traitement: Dbut: 09.50 Vitesse vent: Dbut: 3.6 m/s Temprature: Dbut: 33.5C

Fin: 09.20 Fin: 2.8 m/s Fin: 32C

Bande G07

Fin: 10.00 Fin: 2.1 m/s Fin: 35C

Bande G08

Fin: 10.15 Fin: 1.6 m/s Fin: 36C

Bande G09

Fin: 09.45 Fin: 3.2 m/s Fin: 34.5C

Bande G10

Fin: 10.05 Fin: 3.4 m/s Fin: 36C

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Annexe 2. Exemple dune fiche de donnes pour lessai du Green Muscle dans la rgion de Bnichab, Mauritanie

Code bande Date Heure Position (GPS) N W Stade larvaire N W N W N W

Nombres de buissons/touffes avec criquets Taille (circonfrence) Densit moyenne Nombre de bords prenant le devant Activits (%) Reposer lombre Exposer au soleil Prise de nourriture Marcher Nombre de moribonds Nombre de morts (compter les capsules cphaliques) Fusion avec dautres bandes Fraction de la bande

% % % %

% % % %

% % % %

% % % %

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Annexe 3. Dpt de gouttelettes sur des papiers olosensibles.

Distance (m) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 12 14 16 18 20 25 30 35 40 45 50 Nombre de gouttelettes par 0.5 cm 2 3 4 5 0 2 1 1 3 3 2 4 7 10 6 8 14 12 10 17 21 21 20 17 21 18 9 12 26 19 20 19 23 32 37 39 19 31 26 27 32 24 19 23 15 10 9 16 13 21 12 13 8 10 6 10 10 6 5 4 4 7 0 5 2 3 10 2 3 0 0 6 0 1 3 1 1 1 0 2 0 0 1 0 0 1 0 0

1 1 4 6 12 14 24 30 24 18 30 14 7 14 8 11 0 1 0 1 1 0

Mean 1 3.2 7.4 13 18.6 16.8 22.8 31 24.2 25.6 12.8 13.2 9.6 6.6 5.4 3.4 2 1 1 0.4 0.2

d/cm 2 6.4 14.8 26 37.2 33.6 45.6 62 48.4 51.2 25.6 26.4 19.2 13.2 10.8 6.8 4 2 2 0.8 0.4

Pulvrisateur : Dbit : RPM : Vitesse : Hauteur mission : Vitesse vent :

Micronair AU8000 80 ml/min 4500 80 m/min 1m 2-3 m/s

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Annexe 4. Liste des prdateurs confirms et souponns. Prdateurs confirms : Corvus ruficollis Passer luteus Passer simplex Cursorius cursor Eremopterix nigriceps Oenanthe oenanthe Oenanthe hispanica Oenanthe isabellina Acanthodactylus dumerili Jaculus jaculus Gerbillus sp. Anthia sexmaculata Vespidae sp. 1 Vespidae sp. 2 Vespidae sp. 3 Prdateurs souponns : Alaemon alaudipes Calandrella brachydactyla Felis silvestris libyca Eremiaphila sp. (moreti ?) Mantodea sp. Charognards : Pimelia angulata globosa Formicidae sp. 1 Formicidae sp. 2

Corbeau brun (Aves, Corvidae) Moineau dor (Aves, Passeridae) Moineau blanc (Aves, Passeridae) Courvite isabelle (Aves, Glareolidae) Moinelette Front blanc (Aves, Alaudidae) Traquet motteux (Aves, Muscicapidae) Traquet oreillard (Aves, Muscicapidae) Traquet isabelle (Aves, Muscicapidae) Acanthodactyle de Dumril (Reptilia, Lacertidae) Gerboise du Dsert (Mammalia, Dipodidae) Gerbille (Mammalia, Muridae) (Coleoptera, Carabidae) gupe (Hymenoptera) gupe (Hymenoptera) gupe (Hymenoptera)

Sirli du Dsert (Aves, Alaudidae) Alouette calandrelle (Aves, Alaudidae) Chat sauvage (Mammalia, Felidae) Mante terrestre (Insecta, Mantodea) Mante religieuse (Insecta, Mantodea)

(Coleoptera, Tenebrionidae) Fourmi (Hymenoptera) Fourmi (Hymenoptera)

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