NORMAS E ROTINAS OPERACIONAIS DO LABORATORIO DE NALISES CLNICAS

Setor de Coleta e Recepo

Procedimento Operacionais Padres (POP)
1. CADASTRO E INFORMAES 1.1 Identificar o paciente

Ao chegar recepo do laboratrio, o paciente devera estar portanto requisio medica com os exames solicitados pelo seu medico, a recepcionista ento ir cadastra -lo, dando nfase ao nome, idade, sexo, endereo e/ou telefone. O cadastro do paciente acompa nha a identificao numrico controle do laboratrio.
1.2 Identificao de amostra

Cada cadastrado possui um numero de identificao, utilizando para etiquetas os recipientes de co leta. importante identificar sempre a parte lateral do frasco, e nunca a tampa, principalmente em frascos de urina e fezes para evitar trocas de material.
1.3 Identificaes dos exames a serem realizados

No laboratrio as amostras so registradas em fichas internas de seus respectivos setores, nestas fichas constam a identificao numrica, o nome e a idade do paciente ; em seguida as amostras e as fichas sero encaminhadas para os devidos setores.
1.4 Informaes ao paciente

Na recepo do laboratrio o paciente ir receber as instrues de como deve proceder para coleta das amostras. Para dosagem bioqumica o paciente orientado sobre o perodo de jejum, sendo tambm necessrio o conhecimento dos medicamentos que o paciente possivelmente esteja tomando. Quando a coleta de sangue, orienta -se o paciente quanto ao esforo fisico, o paciente deve vir ao laboratrio totalmente descansado para evitar qualquer alteraes nos resultados de seus exames.

2 COLETA DE SANGUE

O sangue colhido com o objetivo de estudar as freqncias alteraes dos seus componentes quando o organismo acometido pr doenas. No laboratrio so executados exames de vrios paciente ao mesmo tempo, torna se imprescindvel que uma sistematizao bem organizada de trabalho seja seguida, evitando-se os erros de um modo geral, a perda de tempo e, especialmente, a troca dos resultados. Cuidados tcnicos e de assepsia so tambm necessrios a fim de evitar a contaminao do paciente, do operador e do sangue colhido. A coleta feita de preferencia pela manha, c om o paciente em jejum. Muitos so os meios para obteno do sangue usado para o exame hematolgico, como pr exemplo, sangue o veneno, capilar, arterial, puno da medula ssea de ossos como o externo, tbia, ilaco e usado na maioria das vezes o venoso e o capilar.
2.1 Sangue Venoso

A sua obteno feita pela funo das veias mais acessveis. As que so mais facilmente funcionadas localizam-se nas regies do antebrao (veia mediana, ceflica e baslica), do pescoo (jugulares internas e externas) e ing uinais (femural). Na criana, tambm se realiza na regio da fontanela frontal (seio longitudinal). A veia a preferida nos exames rotineiros, pois apresenta freqentemente bom calibre e sua funo pouco dolorosa. Antes da puno, avalia-se a orientao do vaso pela visualizao ou pela palpao digital e fazer a agulha penetrar e aprofundar nessa direo.
2.2 Sangue capilar

freqente usado em crianas quando se empregam micrometodos ou em adultos para alguns exames como estudos de plaquetas, citolog ia e citoquimica celular. A coleta se faz aps puno da polpa digital dos dedos ou dos grandes artelho, na criana. Pode -se ainda utilizar a regies laterais do calcanhar, nos recem nascidos.

3. RECEPO AO PACIENTE

O paciente recebido com tranqilidade e segurana.

cortesia

e cordialidade;

explicando os

procedimentos aos quais ele vai ser submetido, de modo a transmitir -lhe A coleta chama o paciente para a coleta de sangue, e de acordo com seu cadastro, confirma o nome, a idade e os exames a sem realizados pelo paciente. A mesma separa e identifica, na frente do paciente os tubos que sero utilizados para o material.
3.1 Condies para a coleta

Sala bem iluminada e ventilada; Pia; Cadeira reta com bracadeira regulvel ou maca; Garrote; Algodo hidrfilo; lcool etlico a 70% ou lcool iodado a 1%; Agulhas e lancetas descartveis; Sistemas a vcuo: suporte, tubo e agulhas descartveis; Tubo de ensaio com tampa; Etiquetas para identificao de amostras; Caneta; Caixa descarpack; Jaleco e mascara; Luvas descartveis; Estantes para tubos.
3.2 Identificao da amostra

Identificam-se os tubos para colocao da amostra. Escreva na etiqueta os dados do paciente: nome, numero do registro, data da coleta.

3.3 Tecnica para Coleta de Amostra do Sangue Venoso

Coloca-se a agulha na seringa sem retirar a capa protetora. No tocando na parte inferior da agulha; Movimenta o embolo e pressione -o para retirar o ar; Ajusta o garrote e escolha a veia; Faz a anti-sepsia do local da coleta com algodo umedecido em lcool a 70%ou lcool iodatdo a 1%. No tocando mais o local desinfetado; Retira a capa da agulha e faz a puno; Introduz a agulha na veia mediana, basilica ou ceflica, atingida a veia, aspira o sangue; Coleta-se aproximadamente 10 ml de sangue. Em crianas coleta 2 A 5 ML; Retira o garote e em seguida a agulha; Comprime o local puncionado com algodo embebido em lcool; Retira a agulha da seringa e transfere o sangue para os tubos, quando for transferido para um tubo contendo anticoagulante. Agita suavemente para facilitar a mistura do sangue como anticoagulante; Ao transferir o sangue para um tubo de ensaio sem anticoagulante. Escorrer delicadamente o sangue pela parede do tubo. Este procedimento evita a hemolise da amostra. Descarta as agulhas e seringas nas caixas de descarpack; Orienta o paciente a pressionar com algodo a parte puncionada, mantendo o brao estendido, sem dobr-lo;
3.4Tecnica para coleta de amostra do sangue capilar

Faz assepsia da poupa digital com lcool iodado. Deixar secar. Puncionar com lanceta ou agulha descartavel, desprezando -se a primeira gota de sangue e absorvendo -a com papel de filtro ou algodo seco; Sangue deve fluir esponta neamente, exercendo-se leve presso somente quando necessrio; Direciona o tubo de capilar na gota para que o sangue flua ps capilaridade; Limpar o dedo com algodo e aplicar anti -sptico.

Anticoagulantes.

O sangue coletado com a proporo correta de Anticoagulantes utilizados. EDTA; 1 a 2 mg para cada ml de sangue. Heparina; 1 gota (5.000 U/ml) para cada ml de sangue. Oxalato de K; 1 a 2 mg para cada ml de sangue. Citrato de sdio; 0,5 ml para 4,5 ml de sangue.
3.6 Biossegurana na coleta

Todo cuidado pouco na manipulao de materiais biolgicos, tais como soro, sangue, secrees, fluidos orgnicos, tecidos, etc. Redobra -se as precaues, pois esses materiais so pote ncialmente infectantes e muitas vezes esto contaminados com agentes estiologicos diferentes do que se esta pesquisando, ou ainda desconhecidos. Usa-se sempre Equipamento de Proteo Individual (EPI): jaleco longo de mangas compridas e punho retratil, luvas descartveis evita a formao e disperses de aerossis so micro partculas solidas e liquidas com dimenses aproximadas entre 0,1 e 0,5 micra que podem, no caso de conter microorganismos, permanecer em suspenso e plenamente viveis pr varias horas. Jamais reencapa-se agulhas. Esse procedimento uma das principais causas da contaminao de profissionais de sade por microorganismos, existentes no sangue e em outros fluidos orgnicos, como por exemplo, o vrus da Hepatite B e o HIV. Aps a coleta descartado esse material diretamente em caixas descarpack. Reduz ao mximo o manuseio de resduos, em especial os pefurocortantes. Descarta o rejeito perfurocortante diretamente em caixas descarpack.
4. EMISSAO DOS LAUDOS DOS EXAMES LABORATORIAIS

Os laudos esto disponveis no prazo acertado com o paciente, se por algum motivo isto no for possvel, h uma justificativa e, sempre que possvel, o paciente informado no mais curto prazo possvel.

Em caso de laudo que possa oferecer perigo iminente vi da do paciente, o laboratrio informa ao mdico assistente e/ou ao responsvel pelo paciente. O laudo datado e assinado por profissional legalmente habilitado com o seu nome completo e legvel, e o nmero do registro no conselho profissional.
4.1 Exames

Nome do exame; Material utilizado; Mtodo; Intervalo de referencia com as respectivas unidades e valores de alerta; Informaes necessrias interpretao dos resultados, quando indicada; Concluses, quando indicadas.
EXAMES DE SANGUE

Acido rico Capac. Total de lig. do ferro Albumina Cetonemia Colesterol fracionado: HDL LDL VLDL Aldolase Cloretos Ferro colher pela amanh Amilase Creatinina Triglicrides Bilirrubinas Eletroforese de protenas Uria

Clcio Fosfatase acida Colesterol ( sem fracionamento) Fosfatase alcalina CPK total Fsforo CK MB Frutosamina Gama GT Glicose Hemoglobina glicosilada Lipase Potssio Magnsio Sdio Mucoproteinas Transaminases: TGO/AST; TGP/ALT Velocidade de hemossedimentao (VHS) Hemograma Curva de fragilidade osmtica Plaquetas Tempo de protrombina Tempo de tromboplastina parcial ativada PTTa Reticulocitos Eletroforese de hemoglobina Pesquisa de drepancitos Alfa 1 Glicoprotena acida Fator reumatoide Grupo sangneo e fator Rh VDRL Protenas C reativa AntiHBs Anticorpos antireoidianos: -antireoglobulina

-antimicrossomal Antiestreptolisina O - Monoteste - Paul BunnellDavidsohn - Epstein Baar (IFI ou ELISA) - Anti VCA IgG e/ou IgM Fan HbeAg Toxoplasmose IgG/IgM - ELISA - IFI HAI HbsAg (Antigenoaustralia) Chagas (T. Cruzii): - IFI HAI ELISA HAV IgG/ IgM AntiHbe Citomegalovrus IgG/IgM HIV1e2
EXAMES DE URINA ROTINA

1) Entrega ao paciente um frasco etiquetado com o nmero de registro do mesmo. 2) Da as seguintes instrues ao paciente: 2.1 -Colher a primeira urina da manh 2.2 -Antes de colher a urian, fazer um asseio com gua e sabo na genitlia externa. 2.3 Desprezar as primeiras pores da urina e colher o restante no frasco coletor recebido do Labortorio. 2.4 -Trazer imediatamente para o Laboratorio dentro do laboratrio dentro do horrio previsto para recebimento de material ( 7:30 s 10:00 hs, manh ). Obs: Paciente Os sexo feminino no devem colher urina no perodo menstrual. 3) - Paciente feminino no deve coletar a uri na no dia em que fizer Exame de Contedo vaginal, pois a paciente dever estar sem asseio e para a coleta de urina ter que assia -se antes.

EXAMES PARASITOLGICO FEZES

1) Entrega ao paciente um frasco etiquetado com o numero de registro do mesmo. 2) Colher o material e trazer para o Laboratorio no horrio estipulado ( 7:30 s 10:00 hs). 3) Se houver dificuldade de colher o material pela manha no dia do exame marcado, pode colher na vspera e colocar na geladeira o frasco coletor.
EXAMES DE SECREO VAGINAL E SECREO URETRAL

1) Se a paciente tambm tiver que realizar exame de URINA, o exame de Secreo devera ser realizado no outro dia. 2) Para fazer exame de Secreo Vaginal a paciente deve vir ao Laboratorio sem tomar banho ou sem realizar qua lquer tipo de asseio. 3) No manter relao sexual 24 hs antes da realizao do exame, abstinncia sexual de 24 hs.
5. ENTREGA DE RESULTADO

1) Os exames de paciente particulares e SUS ficam no arquivo colocados em ordem alfabtica. 2) Os exames de paciente atendidos pelo hospital so entregues ao mesmo colocados no pronturio. 3) Observa-se o nome completo, idade do paciente. 4) Confere se o nome do paciente no exame com o nome que est na requisio. 5) Retira-se o resultado e entrega ao paciente
6. EXAMES INCOMPLETOS

1)O exame s ser liberado quando o paciente trouxer o restante do material para complementar os tipos de exames que constam da requisio mdica. 2)Solicitamos ao paciente que traga no mximo ate 48 hs. Aps as analises efetuadas, o exame liberado normalmente

Setor de Lavagem e Esterilizao

PROCEDIMENTO OPERACIONAIS PADRES (POP)

importancia

de

uma

boa

descontaminao

de

materiais

(ESTERILIZAO) pea imprescindvel para um melhor desempenho dos trabalhos a serem executados em um laboratrio de analises clinicas. O processo de esterilizao o comeo de tudo, sem a mesma os resultados no sero satisfatorios. Faremos uma descrio dos mtodos que so utilizados para a esetrilizao dos materiais do laboratorio.
1 OBJETIVOS 1.1 Gerais

Tomar conhecimento dos cuidados na manipulao de materiais contaminados. Devemos tambem ter o conhecimeto de lavagem, secagem empacotamento e esterilizao de materiais reaproveitaveis.
1.2 Especificos

Uns dos objetivos mais importantes, o conhecimento de como se deve usar as maquinas, como:AUTOCLAVE, ESTUFA DE SECAGEM E ESTERILIZAO E TAMBM O DEIONIZADOR.
2. EQUIPAMENTO BSICOS

Autoclave Estufa de secagem Estufa de esterilizao Deionizador OBS: H de se destacar tambm os materiais usados no processo de lavagem. So estes: Sabao Hipoclorito 1%

3 METODO PARA ESTERILIZAR MATERIAIS:

1. O 1 passo colocar o material contaminado (cogulos e urina) so colocados em frascos plsticos contendo hipoclorito a 1%, pr duas horas vida mdia do hipoclorito. 2. 2 passo os materiais reutilizveis ex: vidrarias so colocados no hipoclorito a 1% pr 30 minutos,3. 3 passo sabo dextran pr mais 30 minutos, 4. 4 passo lava-se em gua corrente pr 30 minutos, 5. 5 passo mais 30 minutos de molho em gua deionizada, 6. 6 passo so colocados na estufa de secagem.
Matrias da microbiologia

1.Os materiais contaminados so colocados na autoclave pr 45 minutos 121C 2.Depois que sair do autoclave, devemos seguir os mesmos passos a partir do 3 descrito acima; 3.Aps a secagem, leva o material para o balco de empacotamento e l, definitivamente separado. Ex: plstico, vidro, etc. 4.Depois de separado, o material colocado na estufa de auto preciso para esterilizao com fita teste. Deve-se salientar que materiais plsticos no devem ir para a estufa de esterilizao, pois a mesma os danifi car, devido sua alta temperatura que gira em torno de 180C. O temo que o material deve ficar na estufa de esterilizao de 2 hs. E com relao ao material plstico este e embalado e colocado na autoclave de 15 a 20 minutos.
OBS: Para identificarmos um material autoclavado devemos verificar a fita

teste, esta deve estar com listras queimadas. Com todos esses passos, ns faremos uma boa esterilizao, pois a mesma os danificar, devido sua alta temperatura que girar em torno de 180C. O tempo que o mat erial deve ficar na estufa de esterilizao de 2 hs. E com relao ao material plstico este e embalado e colocado na autoclave de 15 a 20 minutos.

 importante compreender a importancia da esterilizao em todo o processo de trabalho em Laboratorio, b em como o uso de equipamentos essenciais (AUTOCLAVE, materiais.
4. DESCARTE DE MATERIAL CONTAMINADO

ESTUFA

DE

ESTERILIZAO

SECAGEM

DEIONIZADOR), e procedimentos de lavagem e descontaminao de

Deve haver POP para o descarte de material contaminado gerado no laboratorio, que so aqueles despejos em estado slido, semi -solido, liquido ou pastoso, apresentando caractersticas de toxidade e/ou atividade biologica, que podem afetar direta ou indireta mente os seres vivos ou causar contaminao das aguas, do ar e do solo.
Procedimento para com os materiais.

Agulhas (e capilares de hematcrito): Uma vez terminada a coleta do sangue-amostra so desprezadas em caixas descarpack Seringas: Aps o termino da coleta do material, tambem so descartaveisem caixasescarpack. Algodao, gaze, papeis e material afins : Apos o uso devem ser descartados em sacos de lixo branco e reforados para posterior coleta pr servio especializados. Swabs, especulos, espatulas, abaixadores de lingua, etc.: Proceder da forma descrita acima. Urina: Acrescentar uma parte de soluo de hipoclotito de sodio a 1%. Deixa emcontatoo pr 2 horas descarta no esgoto sanitario. Os frascos devem ser descaratados em sacos de lixo brancos reforados para posterior coleta pr servios especializados. Fezes: descarta em saco de lixo reforados. Sangue, coagulos e semelhantes: colocar todo o sangue e seus derivados em um recipiente de plastico resistente. Adicionar soluo de h ipoclorito de sdio. Deixar em contato pr 2 horas. Devido decomposio do hipoclorito em contato com o sangue, deve-se adicionar mais hipoclorito, at no haver qualquer formao de espuma.

 Meios de cultura e despejos e bactriologicos: Dispensa o material o, a esterilizao em autoclave e descartar em lixo especial. Lminas e lamnulas: No so descartas. Ao recuper-las so submetidas a um tratamento hipoclorito de sdio a 1% pr 30 minutos. Apos o processo, proceder a lavagem e recuperao

PROCEDIMENTO DE ROTINA HEMATOLOGIA MANUAL

HEMATOLOGIA

A hematologia compreende o estudo das celulassanguineas e coagulao.Normalmente, os constituintes do sangue (hemacias, leuccitos e plaquetas)permanecem em equilibrio sempre constante devido ao sistema hematopoitico,comfuno de formao hemoltica ou de destruio das clulas sanguineas. (O. LIMA,1992)
OBJETIVOS

O estudo no Laboratrio de hematologia consiste em analisar clulas sanguineas e a coagulao atraves de exames hematolgicos, podendo assim qualificar e diferenciar as clulas sanguineas.Esses testes realizados possibiltam um diagnostico mais conclusivo, auxiliando clnico no tratamento de uma patologia prdeficienciahematologica.
HEMATCRITO

Consiste em determinar em porcentagem a concentrao de eritrcitos em dados volume de sangue no coagula. a razo entr o voluemdeeritrcitos em relaoao volume do sangue total. (O. LIMA, 1992) . MATERIAIS E MTODOS -Tubo capilar -Bico de Bunsen -Centrfuga para microhematcrito -Tabela para microhematcrito

 O tubo de microhematcrito preenchido por capilaridade at da capacidade docapilar. A extremidade vazia vedada pela chama do bico de bunsen. Colocaroscapilares na centrifuga para mic rohematcrito, com o cuidado de coloca a parte abertacontra o apoio de borracha para evitar quebras e extravasamentos. A ponta selada ficavoltada para fora. recomendvel um centrifugao a 3.000 RPM/5 minutos.Aps a centrifugao, o tubo apresenta uma coluna de sangue, incluindo o plasma e uma coluna de eritrcitos. Devem ser medidos com o auxlio da tabela.
HEMOGLOBINA (Hb)

o principal componente dos eritrcitos. um conjugado de protenas que serve como transporte de O2 e CO2. (O. LIMA, 1992) MATERIAIS E MTODOS -Tubos para centrfuga -Padro (HiCN Cianetohemoglobina) -Reagente de Drabkin Tomar 3 tubos e proceder da seguinte maneira:
B Padro Amostra Reag. deDrabkin 5 L P 20 L 5 L A 20 L 5 L

Hogenizar. Descansar em temperatura ambiente por 5 minutos. Leitura a 540 nm no espectrfotmetro. Zerar com o Branco.
ESFREGAO

O exame de esfregao sangneo uma parte importante da avaliao hematolgica. Para obter esfregaos satisfatrio, indispensvel que se tome certas precaues: -lminas devem estar limpas e desengorduradas; -a gota de sangue no deve ser muito grande. Quanto maior a gota, mais espesso o esfregao. O ideal uma gota de 20uL;

O esfregao deve ser feito rapidamente, antes que ocorre a coagulao. (O. LIMA, 1992)
MATERIAIS E MTODOS

-Lminas limpas e desengorduradas -Lminas de extenso (extensora) Colocar uma gota de sangue no final de uma lmina apoiada em uma superfcie plana. Com o polegar e o indicador, segura -se o final da lmina de extenso contra a superfcie da primeira lminas. Empurra -se a lmina de extenso a uma velocidade moderada para frente at que o sangue tenha sido espelhado em um esfregao moderadamente delgado. As lminas devem ser secas a temperatura ambiente e depois corada para anlise ao microscpio. conveniente confeccionar vrios esfregaos ao mesmo tempo. Marcar sempre os esfregaos usando agulha ou lpis dermogrfico com o nome do paciente e a data sobre a superfcie do mesmo.
COLORAO

Os corantes de anilina usados em esfregaos sanguineos so de duas classes gerais: -corantes bsicos, como o azul de metileno; -corantes cidos, como a eosina. O ncleo das clulas toma as cores bsicas, como o azul de metileno, enquanto que os corantes bsicos agem sobre os elementos citoplasmticos. Pertencem a este grupo os corantes de Romanowsky. Os derivados mais usados do corante primitivo de Romanowsky so: Giemsa. Leishman, Wrigth entre outros. Nesse setor foi usado o corante Leishman. (O. LIM A, 1992)
MATERIAL E MTODOS

-Suporte para lminas - Corante de Leishman Colocar a lamina sobre o suporte. Verter 20 gotas do corante sobre a lamina ou o suficiente para cobri-la. O lcool metilico (metanol) da soluo corante fixa o esfregao.

Deixar corar durante 15-20 minutos. Lavar em gua corrente e deixar secar. Observar ao microscpio com objetiva de imerso.
CONTAGEM GLOBAL

A contagem dos elementos morfolgicos do sangue (eritrcitos, leuccitos e plaquetas deve ser efetuado pala manh . Consiste em trabalhar com material aferido com a finalidade de determinar o nmero dos elementos morfolgicos. Para isso, necessrio diluir volume conhecido de sangue com determinada quantidade de lquido diluidor. Conta -se as clulas na rea reticula da da cmara destinada para cada tipo de clulas (ver Anexos) (O. LIMA, 1992)
MATERIAL E MTODOS

-Cmara de Contagem (Camara de Neubauer) -Lquidos diluidores (hayem, Turk, Oxalato de Amnia 1%) -Pipetas graduadas e automticas -Lamnulas Contagem Global de Leuccitos Valores de Referencia: 5.000 10.000 mm3 -0.38 mL do lquido de Turk -20uL sangue -Diluio = 1/20 Depois de homogeneizar o lquido de Turk com o sangue, umedecer a cmara de lquido de Turk com o sangue, baixo da lamnula, inserir com auxlio da pipeta automtica pequena quantidade da soluo diluda. Cuidado para evitar presena de bolhas. Esperar 5 minutos a fim de que os glbulos se depositem. Observar ao microscpio primeiramente com a objetiva de menor aumento e em seguida numa objetiva de 40X. Fazer a contagem nos quadrantes destinados a leuccitos.
Contagem Global de Plaquetas

Valores de Referncisa: 150.000 400.000 mm3

-0.38 mL oxalato de amni 1% -20uL sangue -Diluio = 1:20 Depois de homogeneizar o oxalato de amnia 1% com o sangue, umedecer a cmara de Neubauer e cobri-la com lamnula. Pr baixo da lamnula, inserir com o auxilio da pipeta automtica pequena quantidade da soluo diluda. Cuidado para evitar presena de bo lhas. Esperar 10 minutos a fim de que as plaquetas se depositem. Esperar em cmara mida. Observar ao microscpio primeiramente com a objetiva de menor aumento e em seguida numa objetiva de 40X. Fazer a contagem nos quadrantes destinados a plaquetas, que s o os mesmo para contagem de eritrcitos.
VELOCIDADE DE HEMOSSEDIMENTAO (VHS)

a velocidade com o qual os glbulos vermelhos vo para o fundo do tubo. Os glbulos vermelhos que sedimentam porque a sua densidade maior que a doplasma. A velocidade com que eles sedimentam porque a sua densidade maior quea do plasma. A velocidade com que eles sedimentam varia, direta ou indiretamente comvrios fatores. (O. LIMA, 1992)
MATERIAIS E MTODOS

-Tubo de Westergren -Estante de westergren O mtodo de Westergren modificado produz os mesmos resultados que o mtodo de Westergren original, mas emprega sangues na coagulado com EDTA ao invs de citrato. Isso permite que o VHS seja realizado com a mesma amostra de sangue que os outros estudos h ematolgicos. 2mL de sangue com EDTA bem misturados so diludos em 0.5 mL de cloreto de sdio a 0.85% ou 0.5 mL de citrato de sdio a 3.8%. Uma pipeta de Westergren completada at a marca 0 (zero) e colocada exatamente na vertical na estante temperatura ambientem, sem vibraes ou exposio direta luz

solar. Aps exatamente 60 minutos, a distancia do topoo da coluna registrda em molmetros como o valor da VHS. Se a demarcao entre o plasma e a coluna de clulas vermelhas distinta, o nvel lido onde a densidade total aparece primeiro.
Valores de Referncia:

Homens: 3-15 mm Mulheres: 3-20 mm Crianas: 3-12 mm

CLULAS LE (Lupus Eritematoso)

Um anticorpo presente na frao globulina gama do soro dos pacientes de LES, o chamado fator LE, reage com a nucleoprotena dos ncleos dos leuccitos. O ncleo do fagcito acha -se comprimido na periferia da clula. A maior parte da regio protoplasmtica ocupada pela massa nuclear transformada. O citoplasma reduz-se estreita faixa na periferia do leuccitos. Na clulas LE, a estrutura da cromatina substituda pr massa arredondada, homognea, de colorao prpura, de tamanho varivel, mas usualmente maior que a hemcia. O fagcito pode englobar mais de ncleo. (O. LIMA, 1992)
MATERIAL E MTODOS

-Banho Maria a 37C -Toma-se o sangue sem anticoagulante e coloca -se em Banho Maria a 37C/2hs. Depois realiza-se o esfregao e observa-se ao microscopio. Deve-se sempre realizar o exame FAN junto com o exame de clulas LE.
CONTAGEM DE RETICULCITOS

Os reticulcitos so clulas vermelhas imaturas no nucleadas que contm RNA e continuam a sintetizar hemoglobina aps a perda do ncleo. O sangue incubado rapidamente em uma soluo de azul cresil brilhante ou azul metileno. No RNA precipitado como um complexo corante ribonucleoprotenas. O complexo aparece microscopicamente como uma rede

azul escura ou grnulos azuis escuros que permitem a identificao e contagem de reticulcitos. (O. LIMA, 1992)
MATERAIS E MTODOS

-Esfregao sangneo Conta-se o nmero de reticulcitos em 10 campos diferentes. O esfregao feito a partir de 100uL de sangue + 1 gota de azul cresil brilhante.
Valores de Referncias:

0.5 - 2.0% 10 campos = total / 10 = nmero %

COAGULOGRAMA

Tempo de Sangria (TS) o tempo necessario para a cessao da hemorragia, ocasionando por pequena inciso, de dimenso padronizada, praticada artificialmente. (O. LIMA, 1992) MATERIAL E MTODOS -Equipamento para puno digital -Papel de filtro -Cronmetro Faz-se a assepsia da polpa digital ou do lbulo da orelha com a lanceta, fazer a inciso e deixar o sangue fluir espontaneamente. Marcar no cronometro o incio no momento do aparecimento da primeira gota. Com o papel de filtro absorver de 30 em 30 segundos a gota de sangue formada sem tocar a inciso. Quando cessar o fluxo de sangue, parar o cronmetro. Quando cessar o fluxo de sangue, parar cronmetro. O intervalo decorrido entre o aparecimento da primeira e da ultima gota representa do tempo de sangria.
Valores de referncia:

1 6 minutos

Tempo de Protrombina Ativada (TAP)

a prova de escolha para investigao do sistema extrnseco da coagulao sangnea. uma prova de grande valor na demonstrao de deficincia dos fatores de coagulao I, II, V, VII, X. (O. LIMA, 1992)
MATERIAL E MTODOS

-Plasma citratado do paciente -Soluo de tromboplastina -Banho Maria a 37C -Tubos de ensaio -Soluo de cloreto de clcio a 0.025M Coloca-se 100uL do plasma citratado do paciente + 100uL da suspenso de tromboplastina no tubo de ensaio. Homogeneiza, adicionar rapidamente 100uL da soluo de cloreto de clcio. Neste instante, acionar o cronmetro. Retirar o tubo do BM e agit-lo suavemente, de 2 em 2 segundos, at o aparecimento do cogulo, parando simultaneamente o cronmetro. O tempo consumido em segundos constitui o TAP.
Valores de Referncia:

11 13 segundos
Tempo de Tromboplastina Parcial Ativada (TTP A)

a melhor prova para investigar as alteraes do mecanismo da coagulao sangnea. Fatores que participam do sistema intrnseco esto envolvidos, com exceo das plaquetas e do fator XIII, bem como do fator VII, do sistema extrnseco. (O. LIMA, 1992) MATERIAL E MTODOS -Plasma citratado do paciente -Soluo de tromboplastina parcial -Banho Maria a 37C -Cronmetro -Tubos de ensaio

-Soluo de cloreto de clcio a 0.025 M Coloca-se 100uL de cefalina + 100uL plasma citratado do paciente. Homogeneiza e encuba em Banho Maria a 37C/3 min. Aps esse tempo, adicionar rapidamente 100uL da soluo de cloreto de clcio. Neste instante, acionar o cronmetro. Agit - lo suavemente, de 5 em 5 segundos. Ao fim de 30 segundos, retirar o tubo do BM e agit-lo suavemente, observando o aparecimento do cogulo, parando simultaneamente o cronmetro. O tempo consumido em segundos constitui o TTPA.
Valores de Referncia:

35 45 segundos
CONTAGEM DIFERENCIAL DE LEUCCITOS

Consiste em determinar a proporo existente entre as distintas variedades de leuccitos. A contagem diferencial de leuccitos dos mais valiosos mtodos entre os exames citolgicos do sangue. (O. LIMA, 1992) MATERIAL E MTODOS -Esfregaos corados Deve-se observar a lmina prximo cauda o esfegao onde quase no se encontra roleaux e facilita a contagem. Total de 100 clulas.
FIBRINOGNIO

MATERIAIS E MTODOS -Tubo capilar -Plasma -Microcentrfuga -Tabela de Hct -Banho Maria a 56 Aspira-se o plasma no tubo capilar e encuba-se em Banho Maria a 56C/15 minutos. Leva-se centrfuga para microhematcrito por 5 minutos / 3000 RPM. Faz -se a leitura na tabela para Hct e multiplica o resultado por 92.

Valores de Referncia:

200 400 mg/dL INDCES HEMATIMTRICOS VC M= Hc t / He mx 10 0u3 HC M=Hb /He mx 10 0pg CHCM = Hb / 100%