ORIGINAL

Efecto de la conservacin sobre los resultados del hemograma.

Med Vet 2002; vol. 19 (6): 96-98.

A. Loste, T. Sez, M.C. Marca. Dpto. de Patologa Animal. Facultad de Veterinaria. Miguel Servet, 177. 50013 Zaragoza.

RESUMEN Se ha estudiado el efecto de la conservacin sobre los resultados obtenidos en el anlisis hematolgico de muestras caninas. En el estudio se incluyeron 33 perros y los anlisis se realizaron en sangre con EDTA-K3 inmediatamente y 8 y 24 horas despus de recogidas las muestras. Se han obtenido algunas diferencias estadsticamente significativas en el volumen corpuscular medio (VCM) y en la concentracin de hemoglobina corpuscular media (CHCM), diferencias que no se consideran importantes desde el punto de vista prctico. Palabras clave: Perro Hematologa Conservacin.

1. INTRODUCCIN En los ltimos aos, las posibilidades diagnsticas en medicina de pequeos animales han experimentado un notable desarrollo en todos los campos y, concretamente en el de los anlisis clnicos. Esto ha sido posible gracias a la adaptacin e incorporacin de nuevas tcnicas y equipos para el anlisis de muestras animales, lo que ha permitido ampliar la oferta de pruebas disponibles para el clnico, mejorando en consecuencia su capacidad diagnstica. 96

No cabe duda de que el hemograma es una de las pruebas ms comnmente solicitadas ya que de su correcta interpretacin podemos obtener informacin muy valiosa no slo para conocer el estado sanitario del animal, sino tambin para diagnosticar o controlar la evolucin y respuesta al tratamiento de diversos procesos patolgicos (5). En algunos casos, es el propio veterinario quien realiza el hemograma en su clnica, pero otras veces lo remite a un laboratorio. En cualquier caso, para obtener resultados
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de calidad, adems del empleo de una metodologa adecuada, es necesario utilizar la muestra correcta (sangre con EDTA, preferiblemente) y que el anlisis se lleve a cabo, a ser posible, inmediatamente despus de recogida la muestra, con objeto de evitar modificaciones en las clulas que podran inducir cambios ms o menos significativos en los resultados finales. El objetivo de este trabajo es evaluar, desde un punto de vista prctico, el efecto que el retraso en el anlisis de las muestras puede ejercer sobre los resultados del mismo.

tracin de hemoglobina corpuscular media (CHCM) y frmula leucocitaria. En cada tanda de anlisis se incluyeron los correspondientes controles de calidad (Eightcheck-3 niveles). La evaluacin de la frmula leucocitaria se realiz manualmente , tras la tincin de las extensiones con panptico rpido e identificacin al microscopio (con objetivo de inmersin) de los distintos tipos leucocitarios. Una vez obtenidos los resultados se sometieron a estudio estadstico aplicando un anlisis de varianza (ANOVA).

2. MATERIAL Y MTODOS Se incluyeron en el estudio un total de 33 perros, de distintas edades, razas y sexo, atendidos en el Servicio de Medicina Interna de Pequeos Animales de la Facultad de Veterinaria de Zaragoza. Las muestras de sangre se obtuvieron por puncin en las venas yugular o ceflica y se recogieron en tubos con EDTA K3 como anticoagulante. Las muestras se conservaron en refrigeracin (4C) y se analizaron inmediatamente despus de su recogida (A), 8 horas despus (B) y 24 horas despus (C). Los anlisis se llevaron a cabo en el laboratorio de nuestro Servicio, utilizando el analizador Sysmex F-800. Se trata de un sistema semiautomtico que mide la resistencia elctrica de las clulas al pasar a travs de la apertura de un transductor y que est adaptado para trabajar con sangre animal. En el estudio se incluyeron los siguientes parmetros: recuento de glbulos rojos y blancos, hemoglobina, valor hematocrito, volumen corpuscular medio (VCM), hemoglobina corpuscular media (HCM), concenA Glbulos rojos ( 106/mm3) Hemoglobina (g/dl) Hematocrito (%) VCM (fl) HCM (pg) CHCM (g/dl) Glbulos blancos ( 103/mm3) Neutrfilos ( 103/mm3) Linfocitos ( 103/mm3) Eosinfilos ( 103/mm3) Monocitos ( 103/mm3) 7,45 17,88 45,58 61,25 24,02 39,24 10,91 7,51 2,32 0,48

3. RESULTADOS En la Tabla I se resumen los resultados medios obtenidos en el anlisis de cada uno de los parmetros incluidos en el estudio. As mismo, en dicha Tabla se presenta tambin la existencia o no de diferencias estadsticamente significativas entre los grupos.

4. DISCUSIN El analizador hematolgico Sysmex F-800 ha sido adaptado para el anlisis de muestras animales y evaluado para su utilizacin en el anlisis de sangre de distintas especies (2, 3). As mismo lleva varios aos utilizndose en nuestro servicio de anlisis, permitiendo la obtencin de resultados de calidad aceptable. Respecto al estudio diferencial de leucocitos, debemos sealar que el Sysmex F-800 nicamente es capaz de diferenciar 2 poblaciones leucocitarias: linfocitos por un lado y monocitos ms granulocitos por otro. Es por sto que nosotros siempre reaB 7,58 18,33 47,19 62,43 23,95 38,29
** (A vs C)

C 7,57 18,33 48,44 64,78 24,07 37,02 11,24 7,58 2,33 0,46 N.S. N.S. N.S.
* ** * (B vs C) (A vs C)

N.S.
(B vs C)

11,19 7,99 2,25 0,40

N.S. N.S. N.S. N.S.

A: inmediatamente despus de la extraccin; B: 8 h post extraccin; C: 24 h post extraccin. N.S.: No significativa; * (p < 0,05); ** (p< 0.01).

Tabla I. Resultados del hemograma en distintos momentos despus de la obtencin de la muestra.

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lizamos el estudio de la frmula leucocitaria directamente en el microscopio, tal y como hemos sealado en Material y Mtodos, y son stos los resultados que presentamos en este trabajo. Del estudio de los resultados recogidos en la Tabla I se desprende que los cambios experimentados a lo largo del tiempo son mnimos para todos los parmetros y que en la mayor parte de los casos carecen de significacin estadstica. El valor hematocrito aumenta ligeramente desde 45,58% hasta 48,44%, pero esta diferencia no llega a ser estadsticamente significativa. No obstante, este incremento en el valor hematocrito, explica los cambios que se producen en los dos ndices hemticos en los que interviene este valor (VCM y CHCM), los cuales aumentan y descienden respectivamente conforme se retrasa el anlisis de la muestra, dando lugar a diferencias estadsticamente significativas (p< 0,05) o muy significativas (< 0,01). Estos incrementos en el valor hematocrito y VCM tambin han sido detectados por otros autores utilizando un equipo similar al nuestro, tanto en el anlisis de sangre canina como de otras especies (2, 3).

Por lo que respecta al recuento de glbulos blancos y, a diferencia de lo sealado por lo autores anteriormente citados, no encontramos modificaciones importantes a lo largo del tiempo y los resultados son prcticamente similares (10,91, 11,19 y 11,24 103/mm3 respectivamente). Finalmente, y en relacin con la frmula leucocitaria, los cambios registrados son mnimos y carecen de significacin. No obstante, queremos sealar nuestra observacin personal de que en los frotis realizados con sangre conservada durante 24 horas, se apreciaban ligeras deformaciones y cambios en la coloracin de las clulas en varias de las muestras analizadas. Los resultados obtenidos utilizando otros equipos analticos son prcticamente similares a los nuestros (1, 4). A la vista de estos resultados podemos concluir que la conservacin de la sangre entera durante 24 horas a 4C no induce cambios importantes en el resultado del hemograma. No obstante, recomendamos que el anlisis se realice lo antes posible, sobre todo en lo que respecta al estudio de la frmula leucocitaria.

SUMMARY A study about the effect of storage on results obtained in hematological analysis of canine samples has been proposed. A total of 33 dogs have been included in the study. Analysis were performed on blood samples obtained in K3-EDTA tubes immediately and 8 and 24 hours after that they were sampled. Significant differences in mean corpuscular volume (MCV) and mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) have been reported. However these differences are not important from a point of view of clinical practice. Key words: Dog Hematology Storage.

5. BIBLIOGRAFA 1. Lubas G, Pasqun A, Gavazza A, Gughucci B. Determination of haematology and fibrinogen values in the dog, cat and horse using the QBC R Vet Autoread TM System. Vet Cremona 1999; 13 (6): 43-55. 2. Pastor J, Cuenca R, Velarde R, Vias L, Lavin S. Evaluation of a hematology analyzer with canine and feline blood. Vet Clin Pathol 1997; 26 (3): 138-147. 3. Pastor J, Cuenca R, Velarde R, Marco I, Vias L, Lavin S. Evaluation of a haematological analyzer (Sysmex F-800) with equi98

ne blood. J Vet Med (A) 1998; 45 (2): 119126. 4. Pastor J, Cuenca R, Darnaculleta F, Vias L, Lavin S. Evaluacin del analizador hematolgico de impedancia elctrica Baker 9120+ con sangre de perro y gato. Clin Vet Peq Anim 1998; 18 (4): 207-220. 5. Tvedten H. The complete blood count and bone marrow examination: general comments and selected techniques. En: Willard MD, Tvedten H, Turnwald GH. Small Animal Clinical Diagnosis by Laboratory Methods. W.B. Saunders Company. Philadelphia, 1989, pp: 14-35.
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