Ingeniera Gentica

Gua N1

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(1) La base de la informacin biolgica reside en los genes. Y como sabemos, esa informacin
est sujeta a modificacin y transmisin entre generaciones de una especie, y potencialmente entre organismos de especies diferentes. Revisando sus conocimientos de gentica trate de completar los siguientes tems. a) Encuentre una definicin adecuada al concepto de gen. b) Esquematice los elementos constitutivos de un posible gen procariota cuyo producto final sea un tRNA. c) Esquematice los elementos constitutivos de un posible opern procariota cuyo producto final sean tres protenas. d) Esquematice los elementos constitutivos de un posible opern procariota cuyo producto final sean tres protenas. Tenga en consideracin que el mismo puede generar transcriptos diferenciales de acuerdo a las condiciones fisiolgicas de la bacteria. e) Esquematice los elementos constitutivos de un posible gen eucariota con capacidad de realizar splicing alternativo. f) Si usted pretende producir una protena humana en bacterias, qu recaudos debe tener en cuenta al armar el gen quimrico correspondiente?

(2)

La biodiversidad es un producto de la interaccin del ambiente con la materia viva. El

entendimiento de dicho concepto involucra las definiciones de gen y evolucin. Revisando sus conocimientos previos, trate de completar los siguientes tems. a) De una explicacin posible a la proposicin biolgica: GENOTIPO + AMBIENTE = FENOTIPO b) Explique, utilizando los conceptos de seleccin natural, por qu en una terapia antiviral (por ejemplo contra el HIV) es mejor utilizar un cocktail de drogas que slo una. c) Considerando una clula diploide con 2 cromosomas autonmicos diferentes y 2 sexuales, indique: i) Los brazos p y q, la regin centromrica y las regiones telomricas de los cromosomas si la clula est en estado diploide y los cromosomas condensados. Considere que uno de los cromosomas autosmicos es submetacntrico y que el otro ms los cromosomas sexuales son acrocntricos. Grafique una clula masculina y otra femenina. ii) Una posible segregacin de los alelos correspondientes a tres loci, A y B, por un lado, y A y C, por otro, durante el proceso de meiosis. Para tal fin, contemple la posibilidad de heterocigocis para cada locus en estudio y que los
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loci se ubican en tres escenarios diferentes: en cromosomas diferentes, en el mismo cromosoma pero alejados y en el mismo cromosoma pero muy cercanos.

(3) Las enzimas son las herramientas utilizadas en Ingeniera Gentica para manipular el DNA.
Conociendo la actividad de las ms utilizadas, plantee posibles caminos para satisfacer las siguientes premisas. a) Considere las molculas de dsDNA de la figura:

i) Sabiendo que ER 1 es A/GCGCT, ER 2 GGATC/C, ER 3 /AGCT y ER 4 TTGC/AA, esquematice las secuencias en formato dsDNA indicando el corte para cada una de ellas. ii) Proponga un esquema donde acote el tamao del sector negro. iii) Proponga un esquema para insertar la molcula lineal de la figura en el sitio ER 3. iv) Suponiendo que entre los sitios ER 3 y ER 4 (direccin ER 4-ER 3) existe un promotor viral, plantee la manera de generar un transcripto in vitro del fragmento insertado en el punto anterior.

(4)

Los plsmidos son las plataformas utilizadas en ingeniera gentica para realizar

construcciones quimricas con diferentes fines (clonado molecular, produccin de protenas recombinantes, vectores de transferencia para transgnesis, vacunas a DNA, etc). a) Esquematice un plsmido mnimo fundamentando el por qu de cada elemento. b) Esquematice los elementos necesarios para desarrollar un vector de clonado molecular. c) Esquematice los elementos necesarios para desarrollar un vector de anlisis de terminadores de transcripcin. d) Esquematice los elementos necesarios para desarrollar un vector til en el reemplazo de un gen x contenido en una lnea celular eucariota por uno y.
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(5)

En la figura se muestra el resultado de una electroforesis en matrz de agarosa 0,8 % teido

con Bromuro de etidio y utilizando Buffer de corrida TAE 1X. Las muestras sembradas corresponden a minipreps a) Indique cules son las distintas formas topolgicas sealadas en la fotografa (a/e). b) Indique una posible causa de la lnea vertical sealada como f. c) Ordene de mayor a menor los plsmidos de acuerdo a su longitud en pares de bases. d) Explique las causas de la aparicin de la forma superenrrollada positiva.

(6)

En cualquier experimento cientfico los controles son indispensables para sacar conclusiones

significativas. Por ello, la ausencia de los mismos invalida todo el proceso. Dadas las siguientes situaciones, plantee cules seran los controles correspondientes y cul sera su significado. a) Usted quiere evaluar la efectividad de una droga anti tumoral. Para tal fin cuenta con un modelo animal (100 ratones enfermos y 100 ratones sanos) y suficiente cantidad de droga para hacer los ensayos. b) Usted purific un plsmido y pretende digerirlo con dos enzimas de restriccin diferentes. c) Usted purific el genoma de un virus y desea determinar el tipo de molcula que lo compone.