Fisiologa Vegetal

Parte I: CRECIMIENTO Y DESARROLLO I/ Hormonas Vegetales:

Introduccin; Hormonas Vegetales:
Las hormonas vegetales funcionan como Reguladores del Crecimiento. Entre ellas podemos destacar: Auxinas (IAA), Giberelinas (GA), Citokininas (CK), cido abscsico (ABA) y Etileno. Tambin lo son cido Saliclico, Jasmonatos, Oligosacarinas A menudo estas hormonas han sido descubiertas estudiando patologas vegetales. Por ejemplo, las Oligosacarinas fueron descubiertas gracias a las enzimas hidrolticas que son secretadas para romper la pared celular vegetal (PC) durante una infeccin. Su sintesis tiene mltiples y variables localizaciones en funcion de cada hormona, pero las plantas carecen de glndulas y sintetizan las hormonas en tejidos como pices aereos y subterrneos u Hojas. Estos tejidos reciben el nombre de Fuente. Generalmente los tejidos jvenes presentan una alta capacidad de sntesis. Su mecanismo de accin es tambin de localizacin variable. Algunas veces tiene lugar en el propio tejido que sintetiza las hormonas, aunque generalmente tienen que ser translocadas hasta diversos rganos o tejidos diana. Estos tejidos reciben el nombre de Sumidero. Generalmente las hormonas vegetales se encuentran en muy bajas concentraciones, lo cual dificulta su estudio. El balance hormonal es decisivo en el mecanismo de accin fisiolgico que ejercen estas sobre el organismo; se trata de la interaccin que se produce entre las distintas hormonas. Adems, las distintas concentraciones de una hormona en tejidos distintos provoca respuestas diferentes.
Tabla 1; Actividad en funcin de la Concentracin de Hormona

2,5 2 1,5 1 0,5 0 0 -0,5

C1 C ptima C2

Respuesta en tejido

C1: Inapreciable; insuficiente para desencadenar el mecanismo de accin. C2: Concentracin Supraptima; Inhibe el mecanismo de accin.

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La sensibilidad diferencial es la respuesta distinta de una misma hormona en tejidos distintos.
Tabla 2; Sensibilidad Diferencial en Auxinas

3,5
3

2,5
2 Raz 1,5 1 0,5 0 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 Tallo

Por el balance hormonal y la sensibilidad diferencial, podemos afirmar que la correspondencia Una Hormona -> Un Mecanismo de Accin no es ms que una verdad parcial. Deberamos decir: Una Concentracin de Hormona en determinado Tejido -> Un Mecanismo de Accin. Adems, el conjunto de diferentes hormonas en un mismo tejido a menudo interraccionan entre ellas llevando a cabo un mismo proceso, como es el caso de la maduracin de las flores y los frutos.
Ejemplo: Concentracin de distintas hormonas en el tiempo durante el proceso de maduracin de un fruto:

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La translocacin de las hormonas desde la Fuente al Sumidero suele tener lugar a travs de Xilema, Floema (larga distancia) o Clulas acompaantes. Durante el transporte el mecanismo de accin debe quedar bloqueado para evitar prdida de eficacia en tejidos intermedios. Con tal fin, las hormonas sintetizadas en forma libre (muchas veces insoluble) deben formar complejos con un azcar o un aminocido quedando en forma inactiva e hidrosoluble, pudiendo ser translocadas en el medio acuoso. En el sumidero recuperan su forma libre activa. Al nivel molecular, los mecanismos de accin se desencadenan de manera similar a como sucede en animales; las hormonas deben unirse a su receptor especfico, de membrana o soluble citoplasmtico, en el sumidero. La unin del ligando al receptor desencadena la liberacin de un segundo mensajero que lleva a cabo la respuesta celular. Los ms comunes son, al igual que en animales, Ca2+-Calmodulina, cAMP e IPP (o IP3). La respuesta puede ser de dos tipos: De Accin Rpida: Est relacionada con mecanismos de control a nivel de la membrana plasmtica, cambiando sus propiedades de permeabilidad selectiva (Canales, Transportadores y Bombas). Los valores de carga y pH a ambos lados de la membrana son determinantes para el transporte transmembrana. Se trata del potencial elctrico (polarizacin/despolarizacin). De Accin Lenta: Se produce mediante modificacin de la regulacin de la expresin gentica. La respuesta es inducida por formacin de nuevas protenas, o por cese de su sntesis, e implica generalmente alteracin metablica.

Ejemplo; Respuesta de accin lenta:

Hormona

Receptor Especfico

ATP cAMP

AMP Kinasa-P Kinasa Cadena de Fosforilacin

mbr Adenilato Ciclasa

RESPUESTA

En el reino vegetal, es importante destacar que cloroplastos y mitocondrias presentan autonoma gentica. El papel del calcio tiene una cada vez mayor importancia en la fisiologa vegetal a nivel molecular. El agua difunde libremente a travs de la membrana celular, a favor de gradiente elecroqumico, pudiendo arrastrar ciertos iones a favor de este gradiente (y no del gradiente de concentraciones de dichos iones). Por ello debe producirse un transporte activo en contra del gradiente electroqumico, que implica gastos de ATP. Las protenas encargadas son Bombas ATPasas, Transportadores (antiportador Ca 2+/H+), y los Canales con puerta, selectivos y especficos, que slo pueden facilitar el tranporte a favor del gradiente. De tal manera la organizacin subcelular permite al calcio ejercer como segundo mensajero, activando a Calmodulina cuando aumenta su concentracin citplasmtica. El Reticulo Endoplsmico es un importante reservorio de Ca2+, que es liberado al citosol cuando se produce la unin de la Hormona con su Receptor.

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El movimiento de los protones H+ es tambin decisivo, pues determina el pH del medio. Cambiando el gradiente electroqumico puede desencadenar el movimiento de otros iones hacia un lado u otro de la membrana plasmtica.

Fisiologa Vegetal A/ Auxinas (IAA):

IAA fueron las primeras hormonas vegetales descubiertas (Darwin, 1880), como hormonas responsables de la orientacin de los rganos vegetales. Suele utilizarse para su estudio la gramnea Phalaris canariensis. Los primeros experimentos revelaron datos sobre el Fototropismo de los rganos aereos:
Figura 1: Respuesta a estmulos luminosos por el tallo:

Luz pice Tallo

No hay respuesta Caperuza opaca en el pice El tallo se orienta en direccin a la luz Control

Cortar el pice No hay respuesta

Posteriormente otros experimentos consistan en cortar el pice, pero volverlo a colocar sobre el tallo colocando entre ambas partes una lmina de agar, que permite el paso de la hormona; el tallo se orient hacia la luz. Adems, si primero colocaban el pice cortado sobre una lmina de agar, y posteriormente eliminando el pice colocaban la lmina sobre el extremo cortado del tallo, este se orientaba tambin hacia la luz, siendo su desplazamiento proporcional al tiempo de exposicin del pice y el nmero de pices en contacto con el agar. Esto demuestra que existe una hormona sintetizada en el pice que regulaba la orientacin del tallo. Un ltimo experimento confirm la teora (fig. B):

Figura 2: Curvatura del tallo en ausencia de estmulos luminosos:

Se corta el pice y se coloca en un lado

El tallo se curva hacia el lado contrario al del pice

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1.- Naturaleza qumica y Metabolismo: La primera IAA descubierta es el cido Indolactico, aunque actualmente se conocen ms de 12 auxinas distintas.
Figura 3: cido Indolactico:

Para que una molcula presente actividad auxnica debe tener las siguientes caractersticas estructurales bioqumicas: Uno o ms anillos aromticos con uno o varios dobles enlaces. Una cadena lateral terminada en COOH, con un carbono intermedio como mnimo. Una separacin entre las cargas COO- (cadena lateral) y NH2+ (anillo) de cmo mnimo 5,5 (0,55 nm). Los rganos areos son su primordial fuente. De hecho controlan el fenmeno de dominancia apical responsable del crecimiento primario. Al ser podado el pice disminuye la cantidad de auxinas, lo que facilita la proliferacin de las ramas laterales. Las hojas jvenes, primordios florales (anteras y ovarios) y semillas en formacin son tambin fuente de IAA, en menores cantidades. Despus de ser translocadas se encuentran en todos los rganos de la planta. Muchos organismo patgenos, durante una infeccin, son capaces de biosintetizar estas hormonas vegetales a partir de triptfano, para desencadenar el crecimiento incontrolado de los rganos infectados. En este caso el precursor es el triptfano:
Figura 4: Ruta biosinttica de Auxinas por organismos patgenos:

Triptfano

Indol-3-Acetamida
Hidrolasa

IAA

En el caso de los organismos vegetales, existen tres posibles rutas biosintticas diferentes. El precursor es siempre el Triptfano: Ruta del Indol Pirvico: Principal va de Sntesis. Ruta de la Triptamina: Semejante a la anterior. Propia de Tabaco, Tomate, Cebada Ruta del Indol-Acetaldoxina: Ruta especfica de Crucferas.
Figura 5: Ruta del Indol Pirvico:

Triptfano IAA
Aminotransferasa

cido Indol-3-Pirvico Indol-3-Acetaldehido

Descarboxilasa

Deshidrogenasa (NADH dep) oxidasa

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Figura 6: Ruta de la Triptamina:

Triptfano IAA
Descarboxilacin

Triptamina Indol-3-Acetaldehido
Desaminacin

Deshidrogenasa (NADH dep) oxidasa Figura 7: Ruta del Indol-Acetaldoxina:

Triptfano IAA
Descarboxilasa peroxiddasa Nitrilasa

Indol-3-Acetaldoxina Indol-3-acetonitrito
Hidrolasa

2.- Mecanismos de Translocacin: Se distinguen dos tipos de transporte: El transporte lateral hacia un lado u otro del coleoptilo o la raz, y el transporte longitudinal, a lo largo de la planta. El transporte longitudinal se caracteriza por ser un transporte polar y dirigido: es siempre baspeto (desde el pice hacia la base) en los rganos areos, y acrpeto (desde la base hasta el extremo) en los rganos bubterrneos. En este transporte intervienen el floema y las clulas acompaantes. Generlamente las hormonas son transportadas por el floema cuando el rgano diana se encuentra alejado de la fuente, y suele tener lugar en su forma inactiva.
Figura 8: Experimentos con un segmento subapical transporte de IAA: de coleoptilo que demuestran la polaridad en el

T B

T B

B T

B T

Se translocan IAA hasta el agar virgen

No hay translocacin

Se translocan IAA hasta el agar virgen

Agar con IAA Agar virgen

T: Parte superior del coleoptilo B: Parte basal del coleoptilo

El transporte lateral depende fundamentalmente de las clulas acompaantes, y es desencadenado por estmulos ambientales: Luz (el tallo presenta fototropismo +) y Gravedad (el tallo tiene gravitropismo y la raz tiene gravitropismo +). De hecho las IAA son responsables de los movimientos fototrpicos y gravitrpicos de los rganos vegetales. Estos movimientos son llevados a cabo mediante procesos de elongacin celular de determinadas clulas. Al igual que cuando en una barca reman ms rpido los de un lado que los del otro esta cambia de direccin, al alargarse ms las clulas de un lado del tallo o la raz estos se curvan orientndose hacia el lado opuesto. Un experimento consiste en situar un pice sobre un bloque de agar dividido por la mitad por una barrera impermeable. Al iluminar uno de los lados se detectaba una mayor concentracin de IAA en el bloque del lado contrario: IAA son translocadas lateralmente hacia el lado del coleoptilo en oscuridad. Una mayor concentracin de IAA desencadena el proceso de elongacin, de

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forma que el tallo se orienta en direccin hacia el sol, o la fuente de luz. Si separamos con la barrera impermeable tambin el pice, las concentraciones de IAA son iguales en ambos bloques. Por el contrario, ante un estmulo gravitacional, las IAA son translocadas lateralmente en el sentido de la fuerza gravitatoria, de manera que aumenta la concentracin de IAA en la regin ms cercana al centro de la tierra. En coleoptilos produce una elongacin de las clulas que se encuentran ms cerca del suelo (como en el caso anterior), produciendo gravitropismo -. En las races, sin embargo, las altas concentraciones de IAA inhiben la elongacin, mientras que las bajas concentraciones estimulan la elongacin, de manera que las races se orientan hacia el centro del planeta presentando gravitropismo +. Tanto el transporte longitudinal polar y dirigido mediado por las clulas acompaantes como el transporte lateral pueden explicarse por la accin y posicin de dos tipos de transportadores especficos de membrana: el transportador de IAAH y el transportador de IAA-. El transportador de IAA- transloca estas molculas desde el fitoplasma, cuyo pH=7 justifica su estado desprotonado, hasta el Periplasma, de pH=5,8, donde las IAA quedan protonadas, en su forma IAAH. El transportador de IAAH transloca estas hormonas desde el periplasma hasta el fitoplasma, donde de nuevo quedan desprotonados. La disposicin de los translocadores en la membrana es clave y determinante para los efectos fisiolgicos de IAA, ya que explica la polaridad del transporte longitudinal: Los transportadores IAAH se encuentran en la cara superior de todas las clulas, es decir, en la cara orientada hacia el pice en tallos, y en la cara orientada hacia la base en los rganos subterrneos. Los transportadores de IAA- estn generalmente en la cara opuesta. De tal manera, el transporte es acrpeto en races y baspeto en tallos. Las bombas de protones deben mantener los niveles de pH interno de las clulas, y presentan alta actividad. Por otro lado, los estmulos luminosos o gravitacionales producen la despolarizacin de la membrana y la modificacin de la disposicin de los translocadores de IAA-, e incluso el de los translocadores de IAAH. Sabemos que las concentraciones altas de IAA provocan elongacin celular en rganos areos, y las concentraciones bajas la provocan en rganos subterrneos. Los translocadores de IAA- tienden a desplazarse hacia la cara inferior a favor de la gravedad, y en contra del foco de luz, en la regin oscura.
Figura 8: Cambio de disposicin de los translocadores tanto en tallos como races, debidos a estmulos luminosos o gravitacionales: LUZ [IAAH] periplasma Clulas traslocador IAAH translocador IAAGRAVEDAD

La translocacin de las hormonas a travs de rganos que no van a consumirlas suele producirse en forma de Conjugados; las hormonas nunca se tranlocan en su forma activa ya que esto supondra prdida de eficacia en los rganos diana. Las IAA suelen conjugarse principalmente con azcares o aminocidos. Estas formas conjugadas sirven adems como sumidero, ya que

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las hormonas vegetales sintetizadas pueden ser almacenadas en esta configuracin hasta que puedan ser tiles. Por unin peptdica las IAA pueden conjugarse con oligopptidos, Asp, Gly, Ala, Val y Lys. Mediante un enlace Ester, las IAA pueden conjugarse con Arabinosa, Glucosa, Mioinositol y Glucano (1,4). Las IAA son molculas muy lbiles. Tanto la fotooxidacin por la luz ambiental como la oxidacin debida a enzimas oxidativos celulares son sus principales fuentes de degradacin contnua. Los carotenoides facilitan la persistencia de las IAA sintetizadas ya que protege a las clulas vegetales de los radicales libres. Existen de hecho diversos procesos que facilitan la activacin o inhibicin del catabolismo de las IAA: Los Cofactores Mg2+, Monofenoles, H2O2, que en altas cantidades facilitan la degradacin de la enzima slo en su forma libre. Los activadores de la degradacin de rganos, como el Etileno, considerado como hormona gaseosa, que bloquea los mecanismos de accin de las IAA. De hecho la tasa de crecimiento de los rganos puede ser medida como la relacin de concentraciones de IAA y Etileno. Los inhibidores del catabolismo que protegen a las hormonas de los enzmas oxidativos, como son las hormonas Giberelinas y Citokininas, o tambin Cumarinas, Polifenoles, cido Ascrbico, Glutatin o el aminocido Cistena. 3.- Mecanismos de Accin: El mecanismo de accin depende de la unin de la Hormona con su Receptor Especfico. En este caso el receptor presenta dos puntos de anclaje separados exactamente por 5,5 . Para que se desencadene el mecanismo de accin, una nica IAA debe unirse a un receptor en los dos puntos de anclaje. Esto explica que si la distancia entre las cargas es superior o inferior a la distancia entre los puntos de anclaje del receptor, las molculas anlogas de hormonas no pueden llevar a cabo su mecanismo de accin. La inhibicin del crecimiento por concentraciones de hormona supraptimas se explica en este caso por la saturacin de hormonas a las que se someten los receptores. Tales concentraciones son responsables de que en cada receptor no se une una sino dos hormonas, una en cada punto de anclaje, y el mecanismo de accin no puede llevarse a cabo. De hecho los niveles de concentraciones ptimas y supraptimas de hormonas dependen de la cantidad de receptores especficos disponibles en cada tejido, lo cual explica la sensibilidad diferencial, y los distintos tropismos de rganos areos y subterrneos. Existen muchos anlogos estructurales de las IAA. El ms destacable es 2,4-D, una hormona de sntesis de muy bajo coste de produccin y altsima actividad hormonal. Muchas veces se utilizan anlogos estructurales que solo pueden unirse a un punto de anclaje de su receptor especfico como Herbicidas. Se pueden utilizar anlogos de sntesis cuya distancia entre las cargas es distinta de 0,55nm, o anlogos en los que se elimina o reemplaza una carga (por ejemplo se puede eliminar el NH (cambindolo por un carbono) o cambiar el NH por Cloro. Estas molculas con actividad antiauxnica son utilizadas como herbicidas evitando el crecimiento vegetal. Cuanto mayor es su semejanza con las IAA, menor es el dao que causan, ya que pueden ser metabolizadas. En caso contrario se acumulan en el medio y resultan contaminantes. Las IAA presentan dos mecanismos de accin, ambos dirigidos a una misma finalidad; el control de la elongacin celular. Se trata del mecanismo de accin lenta y del mecanismo de accin rpida.

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Los mecanismos de accin rpida son lgicamente los primeros en hacer efecto. Su efecto se lleva a cabo a nivel de la membrana celular, cuando la hormona se liga a su receptor especfico y se libera el segundo mensajero. Se trata de la activacin de las bombas de protones, que exportan los protones al periplasma. El aumento del pH periplasmtico conlleva la activacin de enzimas hidrolticos que van a llevar a cabo la degradacin de la Pared Celular, proceso indispensable para la elongacin de las clulas. El aumento de la Presin de Turgor debida a la entrada de un flujo de agua a la clula conlleva, con una Pared Celular reblandecida, un incremento del volumen celular. Se conocen tres mecanismos de activacin de estas bombas de H +: 1. Por la unin directa de la IAA sobre la ATPasa de protones de la membrana, quedando la ltima activada. 2. Por la unin directa de la hormona a una bomba H+/K+ (sistema semejante) que exporta protones e importa Potasio, facilitando el flujo de agua al interior celular por osmosis. 3. Los segundos mensajeros activan la excrecin de protones del retculo endoplasmtico por Picnocitosis. Los mecanismos de accin lenta tienen lugar a nivel de cidos nuclicos, y su accin se basa en la sntesis de protenas y enzimas importantes en los procesos de sntesis de nueva pared celular. Estos nuevos componentes de la pared se incorporan cuando la clula ya termina su crecimiento y la pared recupera as su rigidez. A grandes rasgos, los principales efectos a nivel fisiolgico de las Auxinas son: Control del crecimiento celular por divisin celular en los meristemos; control de la mitosis (Crecimiento de tallos, Rizognesis, Actividad Cambium, Expansin hojas). Control del Crecimiento celular por elongacin celular, control del crecimiento de la PCV. Reproduccin. Control de Abscisin (Etileno/IAA). Control de la Dominancia Apical (divisin celular). Tropismos (crecimiento por elongacin celular). Induccin de la sntesis de Etileno. Tejido joven + sntesis Etileno

Auxinas - mecanismo de accin Giberelinas, Citokininas

Abscisin del tejido maduro

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Fisiologa Vegetal B/ Giberelinas (GA):

Las GA juegan un papel de segundo grado como reguladores del crecimiento. Fueron descubiertas en 1920 por Kurosawa y col., en Japn. Este equipo de investigadores trabaj con infecciones de hongos sobre plantas de arroz, y observ el crecimiento desmesurado de las plantas. El responsable era efectivamente el hongo, al que llamaron Giberella fugikuori, aunque actualmente recibe el nombre de Fuserium maniliforme. Al suplementar el medio de cultivo fngico detectaron la produccin de compuestos qumicos responsables del gigantismo, y de la enfermedad Bakanae (planta loca). Durante la dcada de 1960 se descubri la estructura qumica de la sustancia responsable del gigantismo del arroz, que heredando el nombre del hongo fue llamado cido Giberelnico, para despus cambiar a cido Gibrico y finalmente quedarse con su nombre actual; cido Giberlico. Esta sustancia es una de las Giberelinas (en concreto GA 3), un grupo de hormonas que llevan a cabo un papel fundamental en el crecimiento de las plantas. Varios experimentos con GA mostraban el efecto fisiolgico de esta sustancia qumica. Trabajos con mutantes vegetales que presentan enanismo (respecto a un experimento control) fueron tratadas con suplementos de GA 1 (tambin fueron tratadas con esta hormona plantas control, no mutantes). Todas las plantas tratadas con hormonas eran normales, por lo que se dedujo que las plantas enanas carecan de GA. Otros experimentos fueron realizados con col. Las coles estaban sometidas a un fotoperiodo de da largo. Estas plantas formaban tallos largos y flores. Las plantas que fueron sometidas a fotoperiodos de da corto no desarrollaban sin embargo estos rganos, y se limitaban a formar una roseta basal de hojas. Otras plantas de col fueron sometidas a fotoperiodo de dia corto con suplementos de GA; formaron tallos largos y flores, por lo que se dedujo que la cantidad de GA sintetizado, responsable del crecimiento y la floracin de estas plantas, depende del fotoperiodo. Utilizando GA para experimentar se observo que suplementando esta hormona, las parras de uvas producan frutos de mayor tamao. 1.- Naturaleza qumica y Metabolismo: El ncleo Giberelano (Ent-Giberelano), formado por cuatro anillos aromticos, es el esqueleto estructural de todas las GA (fig 2). El Kaureno (EntKaureno) es de hecho su precursor directo, y se diferencia por carecer del grupo carboxilo (COOH) caracterstico del grupo Giberelano en posicin 7. Actualmente se conocen 125 molculas de estructura qumica similar, y con los grupos funcionales y el mecanismo de accin propios de las Giberelinas. Estas hormonas se dividen en dos grandes grupos, en funcin de su nmero de Carbonos (fig 3,4): 19 Carbonos: Estas GA se caracterizan por formar un puente Lactona entre los carbonos 10 y 19. 20 Carbonos: En este grupo existen subdivisiones en funcin del grupo unido en posicin 20 (Aldehdo, Metilo, Hidroximetilo, Carboxilo). Las diferencias entre ambos grupos se deben tanto a la disposicin y nmero de grupos hidroxilo como a la de saturaciones. Las GA19 (19 carbonos) presentan mayor actividad que las GA20, ya que estas ltimas adems de tener un carbono de ms, tienen ms grupos metilo y carboxilo. La sntesis metablica de estos compuestos se encuentra integrada en el metabolismo central de los vegetales. Se trata de una ruta relacionada con la biosntesis de Carotenoides, las Citoquininas y el cido Abscsico: La Ruta del Acetato-Mevalonato.

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Entre los principales metabolitos intermediarios destacan el cido Mevalnico, que resulta de la condensacin de tres molculas de Acetil-CoA y su posterior reduccin por NADPH. Tambin destaca Isoprenil Pirofosfato (IPP), que participa tambin en la formacin de Citokinas, y que resulta de la condensacin del Mevalonato con Metileritritol-P. Otro intermediario destacable es Geranilgeranil pirofosfato (GGPP), intermediario comn con las rutas de carotenoides y clorofilas. Estas rutas suceden en el interior de los plastos, y facilitan la formacin del ent-Kaureno (fig 5,6). El enzima Kaureno sintetasa es un enzima fundamental para la sntesis de GAs, y presenta dos tipos de actividad, de tal manera que primero transforma el GGPP en Coparil pirofosfato (CPP) y porteriormente transforma el CPP en ent-Kaureno. El ent-Kaureno abandona los pastos y sale al citosol donde es transformado en GA12-aldehdo y posteriormente en Giberelinas, por accin de varios enzimas, mediante interconversiones. Las interconversiones permiten la formacin de todas las GA naturales conocidas a partir de GA12. Por ejemplo, GA3, conocido como cido Giberlico, puede perder sus propiedades por interconversiones con GA 13, aunque este cambio es reversible. Los rganos Fuentes de GA son muy diversos. Incluyen pices areos y radiculares, hojas jvenes, anteras y ovarios de las formaciones florales, semillas inmaduras y embriones durnate la germinacin. Tambin son capaces de sintetizar GA algunos hongos, bacterias y algas. Algunos productos de laboratorio destinados a la ingeniera agrnoma estn suplementados con inhibidores del crecimiento, y son utilizados para impedir la aparicin de plantas forneas (autctonas) en campos de cultivo. Estos inhibidores bloquean la sntesis de GA impidiendo el paso de GGPP a entKaureno. Entre estas sustancias se encuentran AMO 1618, FOSFON D, CCC o B9995. 2.- Mecanismos de Translocacin: A diferencia de las IAA, las GA no presentan translocacin polar y dirigida. Adems son molculas menos lbiles que las IAA, y tienen catabolismo. Por ltimo, se diferencian en el proceso de sensibilidad diferencial ya que en concentraciones supraptimas no se produce una accin antihormonal o deletrea en GA como sucede con IAA, aunque en concentraciones superiores a la concentracin ptima el mecanismo de accin se hace menos efectivo. La formacin de conjugados con azcares y aminocidos es an as normal durante la translocacin de estas hormonas por varias causas. Aunque no tanto como IAA, son molculas lbiles y la formacin de conjugados favorece su proteccin ante la degradacin por enzimas hidrolticos. Adems permite el transporte de la hormona en forma inactiva desde la Fuente hasta el sumidero de tal manera que no se desencadene el mecanismo de accin en los rganos de trnsito. De hecho, la formacin de estos conjugados se caracteriza por su triple funcin: Forma hidrosoluble para el transporte a travs de Xilema y Floema. Forma inactiva para evitar prdida de actividad durante el transporte (por catabolismo o mecanismo de accin). Forma de almacenamiento sin prdida de actividad, en los rganos sumidero, de forma que en momentos de alta necesidad la planta puede disponer de GA en muy corto tiempo, casi instantneamente.

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Hoy en da se conocen diversos papeles asociados a GA en los distintos rganos vegetales, entre los que destacan el control de la formacin, el desarrollo y la germinacin de las Semillas. Durante este proceso las formas conjugadas tambin desempean un importante papel: Las GA se mantienen en forma conjugada (unida generalmente con azcares por fuertes enlaces Eter y Ester) durante las etapas de desarrollo de la semilla, mientras que durante la germinacin se encuentran en su forma libre insoluble en agua. 3.- Mecanismos de Accin: Las GA fueron descubiertas como reguladores del crecimiento, ya que plantas mutantes que carecan de esta hormona presentaban enanismo. Actualmente se reconoce un amplio bagaje de efectos fisiolgicos relacionados con las GA, entre los que destacan el control del desarrollo y la germinacin de las semillas. El papel fundamental de las GA es activar o inducir en la semilla los enzimas hidrolticos que liberan los nutrientes de reserva del endospermo o coleoptilo. Entre estos enzimas se encuentran las -amilasas, que movilizan el Almidn transformndolo en glucosa. Esta va hidroltica de catabolismo del almidn slo es utilizada durante la germinacin y ante carencia de enzimas fosfatasas. La glucosa debe ser posteriormente fosforilada a expensas de ATP. La va central de degradacin del glucgeno es la va Fosforoltica, en la que actan las fosfatasas y cuyo resultado es directamente Glucosa-P. Las plntulas etioladas (carentes de cloroplastos funcionales, con tejidos blancos) son incapaces de realizar la fotosntesis por lo que el ATP debe ser tambin acumulado en la semilla. GA presentan doble mecanismo de accin en la clula: a nivel de membrana y a nivel de sntesis proteica por induccin (expresin de genes) o activacin (de protenas preexistentes) de los enzimas hidrolticos. En cuanto al mecanismo de accin molecular existen dos hiptesis (clsica y nueva), aunque probablemente ambas pueden ser correctas conjuntamente. La Hiptesis Clsica sostiene que las GA libres e insolubles se unen a transportadores extracelulares, y atraviesan as la membrana, por procesos de permeabilidad selectiva. La respuesta a nivel de induccin o activacin de protenas (mayoritariamente los enzimas hidrolticos) depende del calcio como segundo mensajero. En el interior celular la GA es traspasada del transportador especfico hasta el Receptor Especfico Calcio-dependiente que activa la sntesis y activacin proteica. La respuesta a nivel de la membrana es una reorganizacin de la misma, la apertura de canales y el aumento de la permeabilidad selectiva que facilita la excrecin de los enzimas hidrolticos al exterior celular. Se detecta en las clulas un aumento de Lecitina (fosfolpido de membrana) responsable del incremento de permeabilidad, adems de la formacin de polisomas, gran cantidad de ribosomas y aumento del volumen del Retculo Endoplsmico, explicable por la expresin gnica. Segn la Hiptesis Nueva las GA son reconocidas por receptores transmembrana asociados a protenas G, de manera que la seal se transduce por liberacin de la subunidad alfa. En el interior celular se produce una seal calcio-dependiente a nivel de las membranas celular y del retculo endoplsmico, de forma que se facilita la liberacin de las protenas por exocitosis. Otro segundo mensajero, probablemente GMPc penetra en el ncleo celular e induce la expresin de los genes por inactivacin de Represores de los Operones.

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Los mecanismos de accin a nivel fisiolgico son amplios. Suelen estar relacionados con procesos de crecimiento o expansin por divisin clulas (no elongacin). El balance hormonal (de unas y otras hormonas) es sin embargo decisivo para los efectos producidos: Crecimiento de Internodos de rganos areos. Crecimiento de pices: Estimula la formacin de hojas, floral, de frutos y de semillas. Expansin foliar: Estimula el aumento de la superficie de las hojas jvenes. Crecimiento de yemas laterales. Germinacin de las semillas. El papel estrella de las GA es su efecto en el desarrollo y la germinacin de las semillas. Cuando estas se disponen a germinar los enzimas hidrolticos deben ser sintetizados en la capa de la aleurona y liberados al endospermo en monocotiledneas o a los cotiledones en dicotiledneas, que son los tejidos de almacen de nutrientes. Despus de la hidratacin de la semilla se inicia la sntesis de GA en el Eje Embrionario y su transporte hasta la capa de la aleurona donde ejerce su mecanismo de accin. Los enzimas hidrolticos (Fosfatasas, Amilasas, RNAasas Proteasas) inducidos y activados atraviesan la membrana de las clulas de la aleurona y se desplazan hasta los tejidos de reserva, donde movilizan los nutrientes polimerizados; protenas, RNA, lpidos, azcares... Los primeros enzimas activados son las proteasas, ya que el aporte de aminocidos es necesario para la sntesis proteica en la aleurona. La regulacin de los niveles de GA es indispensable para el correcto funcionamiento del organismo vegetal respecto a su crecimiento. Existen distintos niveles de control: Fotocontrol: Relacionado con el Fitocromo. La luz es resppnsable de un aumento en los niveles de GA. Control por la temperatura: La germinacin, el crecimiento y la floracin dependen de la temperatura ambiental en muchas especies. Este proceso es llamado estratificacin en fro y se utiliza para almacenamiento de semillas. Por ejemplo los cereales deben ser sembrados en otoo ya que la temporadada de fro es indispensable para su germinacin y desarrollo (vernalizacin). Esta puede ser suplida por tratamientos exgenos de GA en laboratorio. Cuando la temperatura es baja se induce la sntesis de GA. Citoquininas: Estas hormonas protegen a las GA frente a la degradacin. Son hormonas de retardo del envejecimiento. cido Abscsico: Impide la liberacin de GA modificando la permeabilidad de las membranas.

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Fisiologa Vegetal C/ Citokininas (CK):

La Kinetina (K) es un artefacto que resulta del sometimiento de cidos Nuclicos a altas temperaturas en Autoclave, y que presenta actividad hormonal. Trabajando con segmentos internodales de plantas de tabaco, Nicotiana tabacum, Skoog y col. (1950) cultivaron estos fragmentos en un medio mineral con vitaminas, sacarosa y IAA. Observaron que se produca crecimiento por divisin celular. A continuacin eliminaron el tejido vascular y cultivaron los fragmentos en el mismo medio, observando en este caso que se produca un crecimiento por aumento del volumen celular, pero no divisin celular. Al reponer la mdula la divisin celular se reactivaba. Dedujeron que algn compuesto deba ser sintetizado en la mdula del internodo y promover la divisin mittica. Al cultivar los internodos sin mdula en el mismo medio con un aporte suplementario de Kinetina, que lograron purificar por primera vez, observaron que se produca divisin celular. Algn factor natural, similar a las kinetinas sintticas, deba ser el responsable de promover la divisin mittica. Skoog llam a estos supuestos anlogos de la kinetina Quininas. Posteriormente su existencia fue confirmada por mltiples experimentos y su nombre evolucion a Fitokinas, despus a Citokinas. Actualmente este conocido grupo de hormonas es conocido con el nombre de Citokininas. 1.- Naturaleza qumica, Metabolismo y Mecanismos de Translocacin: Todas las CK son muy similares a la base nitrogenada Adenina (constituyente tanto del ADN como del ARN), y la mayora son derivadas de esta Purina. Sin embargo algunas CK naturales y muchas sintticas artificiales son derivadas de la Fenilurea. Las CK derivadas de Adenina pueden encontrarse en forma libre o ligadas tRNA. Los sutituyentes que aparecen sobre la base de adenina, R 1, R2, R3 y R4, son los que diferencian a unas CK de otras. El sustituyente R 1 es el que determina el nivel de actividad hormonal de la molcula. Este sustituyente puede tener hasta 6 o 7 carbonos, y cuantos ms tenga mayor es su nivel de actividad. La cantidad de insaturaciones de R 1 tambin influye; cuanto mayor es esta, menor es la actividad hormonal. Estas CK pueden estar ligadas a molculas de tRNA cuyo anticodn presente Uracilo (U) como nucletido inicial. La hormona se ancla en el bucle del anticodn pero sin bloquear el propio anticodn y por lo tanto la actividad traductora del tRNA. Se trata de los tRNA para Phe, Tyr, Trp, Ser, Lys y Leu. Entre las CK derivadas de Adenina destacan Zeatina (1965) (Z), Isopreniladenina (IP) y Benziladenina (BA), esta ltima siendo sinttica artificial. Las CK derivadas de Fenilurea son mayoritariamente molculas artificiales con actividad hormonal (o antihormonal). Entre ellas se encuentran Clorofenil-fenilurea y Nitrofenil-fenilurea (fig. 8). La fuente de CK son los pices radiculares. Una vez sintetizadas las CK se pueden encontrar activas en su forma libre, o en forma conjugada, generalmente inactivas aunque algunas pueden presentar actividad. Suelen conjugarse con azcares, nuclesidos, nucletidos y aminocidos (fig. 5, 14, 16). Son translocadas a travs del Xilema (donde se encuentra en altas concentraciones) desde las races hasta los rganos sumidero, siempre en su forma libre (fig. 19). Las CK ligadas a tRNA se encuentran en todas las clulas con actividad gentica, pero su origen est en los cloroplastos. Las CK cloroplsticas son distintas de las CK citoslicas, y son adems semejantes a las CK bacterianas, reforzando la teora evolutiva sobre el origen bacteriano de los Cloroplastos de

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clulas eucariontes. Estas CK son sintetizadas en cloroplastos de clulas con actividad transcripcional y desencadenan su mecanismo de accin en la misma clula, sin ser translocadas. La localizacin de las CK es muy variable (fig. 9). La presencia de CK en pices radiculares es muy elevada ya que es el rgano donde son sintetizadas. Durante la reproduccin vegetativa (esquejes), la aparicin de nuevas races en el tallo es fundamental para que la planta pueda sintetizar CK y promover su crecimiento, por ello los esquejes se dejan en agua hasta que enrazan, antes de plantarlos en macetas. Tambin es muy importante su presencia en otros tejidos jvenes con alta actividad metablica y alta tasa de divisin celular, como hojas jvenes, yemas, y yemas florales. Hay presencia de CK en estados de la planta en los que no son translocables. Por ejemplo, la presencia de CK en la capa de la aleurona de la semilla es fundamental para la divisin celular y el desarrollo de la plntula, pero no pueden ser sintetizados en el Eje embrionario. Las CK aparecen por accin de las RNAasas de la aleurona, que hidrolizan los cidos nucleicos liberando las hormonas ligadas a tRNA preexistentes y acumuladas, mayoritariamente IP. La unin de CK a tRNA en una forma de reserva inactiva de hormonas. La sntesis de CK cloroplsticas ligadas a tRNA son el resultado de la confluencia de dos rutas metablicas caractersticas del interior del Cloroplasto (fig. 11): La Ruta del Acetato-Mevalonato (con intermediarios comunes con GA), basada en la sntesis de IPP a partir de Acetil-CoA, y la ruta de sntesis de tRNA. IPP queda unido a Adenina en el extremo 3 del anticodn, perdiendo su grupo Pirofosfato (PPi) formando IP, posteriormente modificada para formar Zeatina ligada a tRNA funcional. La sntesis de CK citoslicas libres tienen tambin su origen en la confluencia de dos rutas metablicas que tienen lugar en el Citosol (fig. 12): De nuevo la Ruta del Acetato-Mevalonato, y la ruta de sntesis de Bases Nitrogenadas Purnicas, en concreto de Adenina. La enzima CK sintetasa presenta capacidad para formar a partir de IPP y Adenosina Monofosfato (AMP) Isoprenil-adenosina-P. Esta molcula ser desfosforilada por una nucleotidasa, y el azcar de la adenosina ser liberado por Adenosina Nucleotidasa, formando finalmente una CK libre. Si Isoprenil-adenosina-P es hidroxilada en el extremo del radical 1 formar IP. Si adems las saturaciones son reducidas formar Z. Las CK sintetizadas (especialmente Z) estn sujetas a mltiples interconveriones en nucletidos y Nuclesidos (fig. 13) y otras (fig. 15). Tambin pueden producirse interconversiones entre las CK conjugadas, entre N-Glucsidos y O-Glucsidos. La autorregulacin de hormonas activas es realizada mediante diversos procesos, entre los que se encuentran la regulacin de biosntesis/degradacin, las interconversiones N/O-Glucsidos (N son estables e inactivos, O son activos) y otras interconversiones, y la conjugacin con aminocidos. La degradacin es facilitada cuando es necesaria por la hormona CK oxidasa (fig. 17), que separa la base nitrogenada y el Radical R 1. Esta ruta oxidativa depende de FAD +, que es reoxidado posteriormente por Flavina. 2.- Mecanismos de Accin: Sus mecanismos de accin y sus efectos fisiolgicos son muy variados y en general dependen del balance hormonal general. Entre sus efectos, destacan los de aceleradores mitticos, controlando el ciclo celular y activando procesos de Divisin Mittica y de Diferenciacin Celular (fig. 28), los

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de protectores contra la senescencia o envejecimiento, y los de reguladores de la morfognesis (fig. 20). Tambin juegan otros papeles como la regulacin de la dominancia apical donde CK (inhiben dominancia apical a favor de yemas laterales) tienen el efecto antagnico al de las IAA, control de la germinacin o control de la sntesis de pigmentos fotosintticos en relacin con el Fitocromo. Algunas relaciones de balance hormonal y sus efectos fisiolgicos aparecen en la siguiente tabla (fig. 21, 22, 23, 24): COCIENTE NIVELES EFECTOS FISIOLGICOS Diferenciacin morfolgica en brotes areos (control ciclo celular). Diferenciacin morfolgica en pices radiculares. Crecimiento y diferenciacin en paso de plntula etiolada a planta. Engrosamiento de las hojas. Inhibicin de crecimiento y diferenciacin de la plntula etiolada. Hojas dbiles.

CK brindan una proteccin bsica contra la senescencia dificultando los procesos de degradacin por oxidacin de radicales libres de clorofilas y protenas. Cuando se produce la degradacin de los pigmentos fotosintticos cloroflicos por ausencia de CK protectoras, desaparece el color verde de los rganos quedando colores amarillos y rojizos debidos a los carotenoides. Posteriormente se produce la abscisin y cada de dichos rganos. Tambin protegen ante la senescencia facilitando la transpiracin por apertura de los estomas.

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Fisiologa Vegetal D/ Etileno:

Esta sustancia fue descubierta por Neljubow (1901) contemporneamente con las IAA, pero no fue considerada como hormona sino como contaminante producido por las farolas. Las bombillas que funcionan por combustin de queroxeno (gas carbn) producen etileno, por ello los rboles pierden sus hojas en las ramas ms prximas a los focos de las farolas, y muestran conductas de crecimiento extraas (fig. 2). Se trata de una hormona muy especial debido a su naturaleza gaseosa; su translocacin es facilitada a travs de la atmsfera, por lo que no se habla de translocacin sino de difusin. Durante los aos 60, contemporneo al descubrimiento del cido Abscsico, se descubri que el Etileno es en realidad una hormona que controla el desarrollo de los rganos vegetales, en particular los procesos de maduracin, senescencia y abscisin de hojas flores y frutos, y el crecimiento de la radcula durante la germinacin. Las frutas tambin maduran en presencia de Etileno, de tal forma que si colocamos una fruta madura al lado de una fruta verde, la madura va a inducir su maduracin por produccin y difusin de las hormonas. Algunas bombillas de queroxeno utilizadas para calentar graneros son responsables de la putrefaccin prematura de la fruta. En las floristeras utilizan absorbentes de Etileno para evitar el marchitamiento de ramos de flores. Muchas personas aplican aspirinas en las macetas de plantas con flores para prolongar su vida: el cido Saliclico es tambin una hormona vegetal que bloquea las rutas de sntesis de Etileno. En algunos casos especiales el Etileno puede tambin funcionar como antihormona, y ser til en determinadas especies para superar condiciones adversas. Por ejemplo las plantas de arroz y otras especies con afinidad por terrenos encharcados deben sobrepasar rpidamente la capa fretica durante la germinacin para obtener oxgeno; la regulacin de la sntesis de Etileno facilita el rpido crecimiento meristemtico. 1.- Naturaleza qumica y Metabolismo: El Etileno es un hidrocarburo formado por dos tomos de carbono unidos por un doble enlace. Su naturaleza gaseosa permite su difusin a travs del aire alrededor del rgano que lo sintetiza. No difunden a grandes distancias y su sitio de accin es prximo al de sntesis. Esta molcula de elevada simplicidad estructural presenta actividad biolgica efectiva a muy bajas concentraciones. Se trata de una Fitohormona muy comn, sintetizada por organismos diversos; bacterias, hongos, algas, brifitos, pteridfitos, gimnospermas y angiospermas. Su velocidad de sntesis es generalmente muy baja, pero se dispara ante factores estresantes como carencia de agua, bajas temperaturas, depredacin por hevboros, lesiones o patgenos, dependiendo de las especies. Por ejemplo la presencia de organismos patgenos en la raz desencadena como respuesta sntesis de Etileno en las hojas, ya que dejan de producir cido Saliclico: la planta puede morir. Puede interpretarse como mecanismo altruista para impedir la propagacin de infecciones en comunidades vegetales. Los estatus hdricos causantes de estrs desencadenan el cierre de los estomas en las hojas, y un descenso de la transpiracin y prdida de agua. El potencial hdrico ( ) es la diferencia en contenido de agua de las distintas fases desde el vegetal hasta su ambiente. El gradiente de agua debe mantenerse en equilibrio por el siguiente orden para el funcionamiento correcto del organismo vegetal:

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> > > > > Si existe un dficit (sequa) o un exceso (inundacin y anoxia) de agua en el suelo el vegetal se ve sometido a estrs. Si se prolonga la situacin se incrementar la produccin de etileno y la planta morir. Bajadas drsticas de la temperatura tambin son responsables de incrementos en la sntesis de Etileno. En fanerfitos de hoja perenne este proceso es natural y controlado. Sin embargo, cuando se producen intensas rachas de fro durante una primavera los cultivos se ven afectados. El fro no es directamente responsable de la congelacin y muerte de las hortalizas cultivadas (ya que las clulas disponen de soluciones tampn osmticas con propiedades anticongelantes), sino que inducen la sntesis de Etileno y alcanzan la senescencia, indirectamente debido a la bajada de temperatura. La enzima de sntesis de esta hormona, ACC oxidasa, funciona a temperaturas moderadas, entre 10 oC y 35 oC. Por ello la produccin de Etileno comienza despus de la temporada de fro intenso, y las hojas jvenes mueren cuando se recupera el clima ms clido. Sucede lo mismo con los frutos verdes de rboles frutales.
35 30 25 20 15 10 5 0 0 1 2 3 4 5 Temperatura [Etileno]

La biosntesis de Etileno est relacionada con el Ciclo de la Metionina (fig. 6) principalmente en la raz. En esta ruta, la Metionina sufre una serie de transformaciones; en primer lugar forma en S-Adenosyl-Metionina (SAM) por accin de la enzima SAM sintetasa, a expensas de ATP. A continuacin se produce una ruptura en la molcula, formando por un lado Metiltioadenosina, compuesto que permanecer en el ciclo para volver a formar metionina, y por otro cido Aminociclopropano Carboxlico (ACC). Esta reaccin es facilitada por la enzima ACC sintasa. El enzima ACC sintasa es un enzima fundamental en el Ciclo de la Metionina, propio de la raz. ACC sintasa es un enzima citoslica que se encuentra en muy bajas concentraciones. Tiene una alta afinidad por su sustrato (SAM), y depende de su cofactor, Piridoxal-P. Su vida media es muy baja, y se oxida fcilmente por factores ambientales. Su sntesis est codificada por una familia multignica divergente, y el control de su expresin depende de estmulos en los tejidos (fig.7): Es inducida por factores adversos como presencia de metales pesados y contaminantes, estrs hdrico, aerosoles, fuerte radiacin ultravioleta, bajadas drsticas de temperatura, o suplementos de IAA. Su actividad es inhibida por AVG y AOA (fig. 9). El ACC formado en el pice radicular es posteriormente transportado a travs del Xilema hasta los rganos areos, donde se forma el Etileno.

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Finalmente ACC oxidasa, o Enzima formadora de Etileno (EFE), formar Etileno a partir de ACC. Este ltimo enzima solo funciona en condiciones aerbicas, ya que gasta O2, y solo presenta actividad a temperaturas no extremas (entre 10 y 35 oC), en ausencia de contaminantes como Cobalto o Plata, y en ausencia de luz debido al Fitocromo activo (Pfr). El cido saliclico y similares inhiben tambin su accin. Cuando no es necesaria la sntesis de Etileno, ACC se une con Malonil-CoA formando Malonil-ACC, proceso necesario para la detoxificacin y eliminacin de ACC en exceso. 2.- Mecanismos de Accin: Los mecanismos de accin del Etileno a nivel molecular y celular son relativamente sencillos. Sus Receptores Especficos de membrana son receptores tipo Proten-kinasa, que son fosforilados y forman dmeros al unirse el ligando. La respuesta celular es la expresin de genes en el ncleo (fig. 23, 25). Aunque el Etileno inhibe el mecanismo de accin de IAA, concentraciones muy elevadas de Etileno no lo inhiben y pueden inducir la sntesis de IAA incrementando su efecto. Adems IAA a su vez activa al enzima EFE. Bloqueo de IAA

[Etileno] De esta manera los vegetales suelen morir en suelos encharcados, por inundacin; bajo el nivel fretico se dan condiciones de anaerobiosis y EFE es inactiva, de tal manera que no se puede formar Etileno en rganos areos y la sntesis de IAA es inhibida, llevando al organismo a la muerte. Las plantas adaptadas a estos sustratos presentan crecimiento masivo en las primeras etapas hasta alcanzar el nivel fretico, donde EFE puede funcionar. Tambin esto explica la reaccin de las plantas a temperaturas extremas. Cuando la temperatura disminuye drsticamente, se induce la sntesis de ACC sintasa y se forman grandes cantidades de ACC, pero EFE es inactiva y no hay sntesis de Etileno. ACC se acumula en el xilema y los rganos areos durante la racha de fro. Cuando la temperatura supera de nuevo los 10 oC, EFE se activa, y debido a las concentraciones de ACC acumuladas se forman grandes cantidades de Etileno y se produce senescencia y abscisin de rganos verdes. Entre sus efectos fisiolgicos (fig. 11-21) destaca su papel durante la germinacin.Estimula la germinacin, controla la apertura de la testa, la salida de la radcula y la apertura del gancho epicotilar. Durante los primeros estados de la plntula, el extremo del epictilo se encuentra curvado hacia abajo para

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proteccin del meristemo apical mientras atraviesa el sustrato edfico. En ausencia de luz las clulas de la plntula comienzan la formacin de Etileno, que bloquea el crecimiento de la elongacin de las clulas de una cara del epictilo, formando la curvatura. Cuando la plntula recibe luz se prod uce el bloqueo de la enzima EFE, y cesa la sntesis de Etileno. La plntula recupera su forma natural por fototropismos y gravitropismos. Influye del mismo modo, por ejemplo, en el cierre de las amapolas durante la noche. Este tipo de curvaturas se incluyen dentro de la triple respuesta de los epictilos y tallos ante presencia de Etileno: Reduccin de la elongacin. Incremento del grosor por crecimiento secundario. Cambio en la orientacin del desarrollo, con prdida de respuestas gravitrpicas. Estos cambios en la orientacin del desarrollo dependen de la inhibicin de la elongacin celular; estn relacionados con el crecimiento de la Pared Celular Vegetal. Sus componentes son sintetizados en el Citosol y polimerizan en la matriz extracelular. Los depsitos de celulosa estn orientados por medio de Microtubulos que penetran en la pared formando rupturas, donde se incorporan las nuevas celulosas. Generalmente estos microtbulos generan rupturas transversales al tallo, de forma que la elongacin celular tiene como resultado el alargamiento de los entrenudos. En presencia de Etileno los microtbulos aparecen longitudinalemente y la elongacin celular provoca crecimiento en grosor. Tiene efectos similares en las radculas y races, donde adems promueve la formacin de races laterales, adventdicas y de pelos radiculares. Las especies adaptadas a hipoxia, que viven en sustratos edficos inundados, presentan alta capacidad de sntesis de Etileno, y alta sensibilidad, de manera que induce un crecimiento rpido del tallo. Se puede lograr el mismo resultado con especies normales a las que se les aporta un suplemento extra de Etileno. Por supuesto el Etileno encuentra su papel estrella en la maduracin y abscisin de varios rganos, como hojas, frutos y flores. Al eliminar el Etileno (por absorbentes de etileno o cido saliclico) se retrasa la maduracin de frutos y la prdida de flores. Al suplementar etileno las frutas verdes maduran a mayor velocidad.

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Fisiologa Vegetal E/ cido Abscsico (ABA):

Esta hormona conserva un nombre que no es consecuente con su verdadera funcin, ya que no es responsable de la abscisin (como sabemos, es el Etileno). En Inglaterra Wareing y col. trabajaron con Acer pseudoplatanus, y descubrieron una sustancia responsable de la dormicin de las yemas a la que llamaron Dormidina (nombre ms adecuado para la hormona). En Estados Unidos Addicott y col. Realizaron trabajos sobre la abscisin de las cpsulas del algodn, Yossipium hyrsitum, y nombraron Abscisina a la sustancia que creyeron responsable. En 1970 se realizaron pruebas qumicas que determinaban que se trataba de la misma sustancia, ABA. Su papel es fundamentalmente el control de la dormicin (letargo) de las yemas y semillas durante la estacin desfavorable para la vida. Su acumulacin en estos tejidos impide su desarrollo antes de tiempo, lo que sera letal. Tambin es responsable del nivel de estrs de las plantas y del control de la apertura y cierre de los estomas. Cuando se producen estmulos estresantes el nivel de ABA aumenta, y se cierran los estomas bloqueando los mecanismos de transporte activo. En algunos casos el estrs intenso o prolongado puede acelerar la abscisin por acumulacin del Etileno. En cuanto el estrs disminuye, los niveles de actividad de ABA disminuyen drsticamente, y su inactivacin facilita la apertura de los estomas. 1.- Naturaleza qumica y Metabolismo: La estructura del ABA es similar a un fragmento de Carotenoide (fig. 2). Su biosntesis est tambin relacionada con la ruta del Acetato-Mevalonato. Su aparicin ante situaciones de estrs es casi inmediata. Los carbonos 1 (ciclo) y 2 presentan isomera ptica y geomtrica, por lo que pueden diferenciarse ismeros Cis y Trans (2), y enantimeros L (levgiro) y D (dextrgiro) (1). Existen por lo tanto en total cuatro formas posibles para ABA (fig. 3). Su precursor, el Mevalonato (cido Mevalnico) forma IPP (intermediario comn con GA, CK, y Carotenoides. Se forma por Va Directa, por ciclacin del Farnesil Pirofosfato (fig. 5). Tambin puede ser sintetizada por Va Indirecta, por fotlisis (fotooxidacin) de una Xantfila; Neoxantina, derivada de la ruta de los Carotenoides. (fig. 6, 7). La Va Indirecta es la utilizada en tejidos etiolados. Su pKa es de 4,5 por lo que ABA puede aparecer protonada (ABAH) o ionizada (ABA- + H+) en funcin del pH del medio en que se encuentra. 2.- Mecanismos de Translocacin: Los tejidos Fuente son muy diversos, y presentan capacidad de accin inmediata (fig. 10). Los tejidos de mayor demanda de ABA son las semillas en desarrollo, las yemas apicales y las races El transporte va Xilema y va Floema son el mtodo ms rpido y eficaz a larga distancia. Es el utilizado para el transporte del ABA desde rganos areos hasta las yemas y semillas en desarrollo. En las races el movimiento es polar y baspeto. ABA puede ser tranportado a corta distancia entre los compartimentos subcelulares (fig. 11). Se acumula en compartimento alcalinos (pH>7) donde se encuentra ionizado en forma libre (Cloroplastos, pH=7,5 sin luz, 8,5 con luz). Es muy escaso en las vacuolas (pH=4,5=pKa) y se encuentra en bajas concentraciones en el citosol, protonado (pH=6,5). Se distribuye ms fcilmente por el Floema (pH=8). ABA puede formar conjugados inactivos con Glucosa en una reaccin reversible. Estos conjugados permiten un descenso de la actividad de la hormona en el vegetal. Adems facilitan su transporte reduciendo la prdida de eficacia, y facilitan su acmulo en las Vacuolas en su forma inactiva. Otro

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mtodo de control de los niveles de ABA activo es su oxidacin en cido Farseico y Dihidrofarseico, que tambin pueden conjugarse con glucosa (fig. 13). 3.- Mecanismos de Accin: ABA es responsable de procesos de inhibicin de crecimiento por divisin celular en funcin del balance hormonal con las otras hormonas vegetales reguladores del crecimiento. Funciona como antihormona bloqueando la accin de las IAA. Tambin controla el crecimiento en condiciones adversas. Ante sequas moderadas inhibe el crecimiento del tallo favoreciendo a la raz para optimizar la bsqueda de agua. Ante sequas intensas inhibe tambin el crecimiento de estas. En plantas semiacuticas adaptadas a la hipoxia la concentracin de ABA es muy pequea en los entrenudos, lo que acelera su crecimiento en longitud. Las altas concentraciones de ABA en las semillas en desarrollo evita el viviparismo y en general la germinacin antes de que se complete el proceso de maduracin de la semilla (fig. 16). En los mutantes ABA- donde se produce viviparismo la semilla aborta. Estn implicadas en el mantenimiento de la dormicin durante el periodo de maduracin y latencia de la semilla y en la induccin de la sntesis de protenas LEA y protenas de reserva (Respuesta Lenta). Las protenas LEA, ricas en Gly y Lys brindan proteccin frente a la desecacin en las membranas, y mantienen el estatus de las clulas protegindolas ante los posibles daos de una desecacin extrema durante su desarrollo, por lo que est muy implicada en la viabilidad de la semilla. Al disminuir los niveles de ABA despus de la dormicin se produce la rehidratacin de la semilla. ABA tambin protege a la planta del estrs hdrico a corto plazo, mediante el cierre de los estomas disminuyendo la transpiracin (mecanismo de accin rpido) (fig. 17) y a largo plazo modificando la tolerancia de la planta al estrs hdrico, muy importante para adaptaciones a ambientes con cambios drsticos de humedad (fig. 18). La transpiracin es el proceso de prdida de agua en forma de vapor. En las plantas la transpiracin es esencial para garantizar el arrastre de los nutrientes minerales hasta los rganos areos en contra de la gravedad, y tiene lugar a travs de los estomas. Los gradientes de potencial hdrico determinan el sentido del flujo de agua, que generalemente va del sustrato a la raz, de la raz a los rganos areos, y de estos ltimos a la atmsfera. Cuando el potencial hdrico de la atmsfera desciende drsticamente, la cantidad de agua perdida por los estomas es mayor, y el gradiente queda descompensado, llevando a la planta a una situacin de estrs hdrico. En estos casos se dispara la sntesis de ABA, que desencadena el cierre inmediato de los ostiolos de los estomas hasta que se recupera el gradiente. Tambin se desencadena el cierre de los estomas en ausencia de luz, por control del Fitocromo. El mecanismo de cierre y apertura del Ostiolo est controlado por la entrada de agua y el hinchamiento de las dos Clulas Oclusivas que lo rodean, que lo mantienen abierto. Al disminuir la presin de turgor de estas clulas, el ostiolo queda cerrado. Estas presentan una pared engrosada alrededor del Ostiolo. La respuesta rpida de cierre estomtico se inicia cuando ABA se une a su receptor de membrana en las clulas oclusivas, pudiendo actuar a travs de dos rutas distintas; la ruta ROS o la ruta cADPR, IP3 (fig. 24, 25). Los protones del interior de la clula suelen ser exportados al exterior por medio de bombas ATPasas de membrana. Aparecen mayoritariamente en la ruta de degradacin del Almidn:

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ALMIDN

PEP CO2

Malato

Malato- + H+

En condiciones normales los protones son exportados por ATPasas al exterior celular, y el cido mlico es acumulado en las vacuolas de las clulas, transportado tambin por bombas ATPasas. Se produce un transporte retrgrado de cloro y potasio para compensar el gradiente electroqumico, y por lo tanto se produce un flujo de entrada de agua a la clula que mantiene elevada su presin de turgor, quedando el ostiolo abierto. Ante condiciones de estrs hdrico los niveles de ABA pueden aumentar hasta 40 veces. En presencia de ABA se produce un bloqueo de las bombas de protones, que son causantes de la bajada de pH, y un aumento de la concentracin de protones citoslicos. El cmulo de Malato- en el citosol conlleva el bloqueo de PEP carboxidasa (transforma PEP en Malato), y la acumulacin de CO2 en el citoplasma. La bajada del pH induce la retroalimentacin negativa o feed-back sobre las rutas de hidrlisis del Almidn. Aunque las clulas epiteliales no tienen capacidad fotosinttica, las clulas oclusivas del Estoma si tienen. La bajada del pH produce una despolarizacin a nivel de la membrana, de forma que los canales inicos se invierten, cerrando las puertas de entrada y abriendo las de salida para cloro y potasio: se activa el transporte de cloro y potasio hacia el exterior de la clula. La bajada de sus concentraciones en el interior de las clulas es responsable de una disminucin considerable de la presin osmtica, y un aumento del potencial osmtico y del potencial hdrico. La diferencia de potencial hdrico en comparacin a la matriz extracelular es responsable del establecimiento de un flujo de agua que se dirige hacia el exterior de la clula. Por otro lado ABA desencadena la entrada masiva de calcio al citosol desde las vacuolas y la matriz extracelular. Esto desestabiliza el potencial electroqumico de la clula y conlleva la salida masiva de los iones. Las clulas oclusivas pierden as presin de turgor, y se deshinchan, de manera que el ostiolo se cierra impidiendo el intercambio gaseoso hasta que se recupera el estatus hdrico. [ABA] [H+], [Ca+] [K+], [Cl-]

Cada de la Presin de Turgor

Flujo de agua hacia el exterior

Cuando el estatus hdrico no est establecido, no se produce fijacin de CO2. Los ostiolos se cierran sacrificando no slo la transpiracin sino tambin la actividad fotosinttica, hasta que se recupera el estatus hdrico normal, o hasta la muerte de la planta. La cada de los niveles de ABA desencadena: Apertura de los canales de puertas de entrada de iones. Activacin de bombas ATPasas. Apertura de los Estomas. Activacin de las rutas de degradacin del almidn. Actividad fotosinttica. Las plantas de metabolismo C3 son las peor adaptadas al estrs hdrico. Las plantas de metabolismo CAM (Crasulceas, Cactceas) son capaces de mantener abiertos los estomas durante la noche y ante condiciones de estrs.

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