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1.1.- Cromatografa y ciencia de materiales Separacin de compuestos relacionados con la sntesis de materiales Evaluacin de la actividad de materiales catalizadores y soportes slidos en sntesis orgnica. Desarrollo de nuevos materiales empleados en cromatografa Seguimiento de una sntesis
Fco. Javier Gonzlez Benito
SI NO
Es soluble? Es voltil?
Digestin
NO
Descompone trmicamente?
NO
Forma plasma?
NO
Otros mtodos
SI
SI GAS SI
SI SI SI
SI
DISOLUCIN SI
Cromatografa
NO
NO
3.1.- Mecanismos de separacin a) Separacin por adsorcin (cromatografa de adsorcin) Diferente afinidad de los componentes de la muestra sobre la superficie de un slido activo (componentes con polaridad baja o media) b) Separacin por reparto (cromatografa de reparto) Diferente solublidad en fases estacionaria y mvil (Componentes con polaridad media o alta)
Coeficiente de Reparto = K d =
3.1.- Mecanismos de separacin c) Separacin por tamao molecular (Cromatografa de permeacin de gel, de tamiz molecular o de exclusin por tamaos). Parmetros de columna - Intervalo de trabajo: intervalo de M que pueden ser separados - Lmite de exclusin: M mnimo a partir del cual las macromolculas no experimentan retencin.
Molculas pequeas Molculas grandes
Disolvente
Las molculas pequeas penetran en los poros de las partculas de gel, por lo que necesitan ms tiempo para salir al final de la columna. Las molculas grandes, en cambio, al no penetrar en las partculas de gel se mueven con el disolvente a una velocidad mayor de elucin y salen antes de la columna. Por tanto, a mayor masa molecular menor tiempo de elucin. Este mtodo permite separar por tamaos moleculares siendo posible obtener incluso distribuciones de masas moleculares a distintos tiempos de elucin.
La separacin se basa principalmente en la diferente afinidad para el intercambio de iones de los componentes de la muestra. + + + - + + + + Especies positivas Especies negativas
+ -
+ + +
+
+ -
Las especies cargadas negativamente se unen a la matriz slida cargada positivamente y son retenidas, mientras que las especies positivas son rechazadas. De esta manera en funcin de la carga las especies se eluyen a distintos tiempos dando lugar a la correspondiente separacin. La elucin de las especies retenidas se consigue cambiando el pH del disolvente hasta igualarlo a su punto isoelctrico o hasta invertir su carga neta.
+ + -
+
-
Disolvente
3.2.- Mtodos de anlisis cromatogrfico a) Anlisis por desarrollo (cromatografa en papel o capa fina) b) Anlisis por elucin (cromatografa de gases, cromatografa lquida) c) Anlisis frontal d) Anlisis por desplazamiento
Fase mvil
Fase Mvil
Sorbente
Anlisis frontal
Cromatograma
A + B
A + B + C
3.3.- Clasificacin de acuerdo con la forma del lecho cromatogrfico a) Cromatografa en columna - Columna empaquetada - Columna tubular abierta b) Cromatografa plana (o de lecho abierto) - Cromatografa en papel - Cromatografa en capa fina (TLC)
3.4.- Clasificacin de acuerdo con el estado fsico de la fase mvil a) Tcnicas cromatogrficas - GLC - GSC - LLC - LSC b) Cromatografa de gases (siempre en columna) c) Cromatografa Lquida (en columna o sobre plano) - Cromatografa Lquida de Alta Eficacia o de Alta Presin, HPLC d) Cromatografa con fluido supercrtico
3.5.- Tcnicas especiales a) Cromatografa con fase invertida b) Cromatografa con fase normal c) Anlisis isocrtico (composicin F. mvil constante) d) Elucin con gradiente (Composicin F. mvil cambia de forma continua) e) Elucin en etapas o escalonada (Composicin F. mvil cambia de
forma escalonada)
f) Cromatografa bidimensional (etapas adicionales de separacin)
3.6.- Parmetros bsicos en cromatografa a) Retencin = capacidad real de la fase estacionaria para retardar la salida de un componente. - si caudal constante v t - tM = tiempo muerto - tR = tiempo de retencin - tR = tiempo de retencin corregido = tR - tM
Figura tomada de: -ALBELLA, J.M.; CINTAS, A.M.; MIRANDA, T. y SERRATOSA, J.M.: "Introduccin a la ciencia de materiales". C.S.I.C., 1993.
3.6.- Parmetros bsicos en cromatografa b) Factor de capacidad (retencin de un compuesto con independencia del caudal)
t'R t R t M K'= = tM tM
c) Dispersin de bandas
Figura tomada de: -ALBELLA, J.M.; CINTAS, A.M.; MIRANDA, T. y SERRATOSA, J.M.: "Introduccin a la ciencia de materiales". C.S.I.C., 1993.
Figura tomada de: -ALBELLA, J.M.; CINTAS, A.M.; MIRANDA, T. y SERRATOSA, J.M.: "Introduccin a la ciencia de materiales". C.S.I.C., 1993.
tR n=
tR n = 16 Wb
Debe evitarse el ensanchamiento de bandas. Dependen de caractersticas de -Altura equivalente de un plato terico = L/n columna, velocidad de fase mvil, etc. (Para comparar columnas de diferente longitud)
Fco. Javier Gonzlez Benito
tR n = 5.545 W h
t 'R 2 = t 'R1
2t Rs = Wb1 + Wb 2
Sistema cromatogrfico
- Resolucin
Eficacia de columna
Figura tomada de: -ALBELLA, J.M.; CINTAS, A.M.; MIRANDA, T. y SERRATOSA, J.M.: "Introduccin a la ciencia de materiales". C.S.I.C., 1993.
Figura tomada de: -ALBELLA, J.M.; CINTAS, A.M.; MIRANDA, T. y SERRATOSA, J.M.: "Introduccin a la ciencia de materiales". C.S.I.C., 1993.
4.2.- Cromatografa en capa fina La elucin se consigue por el movimiento capilar ascendente de la fase mvil a) aplicaciones analticas
Rf =
y x
Rx =
y x
Aplicacin
Aplicacin
y y x x x
b) aplicaciones preparativas
Figura tomada de: -ALBELLA, J.M.; CINTAS, A.M.; MIRANDA, T. y SERRATOSA, J.M.: "Introduccin a la ciencia de materiales". C.S.I.C., 1993.
Medidor de caudal
Fco. Javier Gonzlez Benito
Figura tomada de: -ALBELLA, J.M.; CINTAS, A.M.; MIRANDA, T. y SERRATOSA, J.M.: "Introduccin a la ciencia de materiales". C.S.I.C., 1993.
CARACTERSTICAS DEL DETECTOR IDEAL Adecuada sensibilidad Buena estabilidad y reproducibilidad Una respuesta lineal para los componentes que se extienda a varios rdenes de magnitud Intervalo trmico de trabajo (25 400)C Un tiempo de respuesta corto que lo haga independiente del caudal Alta fiabilidad y manejo sencillo Respuesta semejante para todos los componentes No destructivo
de
gases
(Gas-
Detectores DETECTOR DE IONIZACIN DE LLAMA - Componente + H2/aire + encendido elctrico iones + eDiferencia de potencial entre extremo de quemador y electrodo colector (se mide la corriente que pasa a su travs) - Iones producidos n tomos de carbono sensible a masa - C-OH; -C=O; -X; -NH2 pocos iones generan
Efluente de la columna
+ -
Aire
H2
- Insensible a: H2O; CO2; SO2 y NOx -Detector de los ms utilizados para el anlisis de compuestos orgnicos
Fco. Javier Gonzlez Benito
5.1.- Cromatografa de gases (Gas-Lquido) Detectores DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA - Cambios de conductividad trmica del gas portador por la presencia de analito. - Sensor = hilo de Pt, Au W calentado (a potencia elctrica cte) cuya T depende del gas circundante (su R cambia) - Caractersticas:
* Simple * Amplio rango dinmico lineal (~ 105) * Respuesta universal (especies orgnicas e inorgnicas) * Carcter no destructivo * Sensibilidad relativamente baja (~ 10-8 g de soluto/ml de gas portador)
5.1.- Cromatografa de gases (Gas-Lquido) Detectores DETECTOR TERMOINICO - Detector selectivo de compuestos orgnicos con P y N. - Efluente + H2 + llama gas caliente + bola de silicato de rubidio caliente (a 180V respecto colector) Iones Plasma (600 800C)
5.1.- Cromatografa de gases (Gas-Lquido) Detectores DETECTOR DE CAPTURA DE ELECTRONES - Detector selectivo de halgenos, perxidos, quinonas y grupos nitro. - Efluente + emisor iones (gas portador) + rfaga de electrones Corriente constante que vara en presencia de molculas capturadoras de e-
DETECTOR DE EMISIN ATMICA plasma de He que atomiza y excita el efluente emisin espectros de
5.1.- Cromatografa de gases (Gas-Lquido) Mtodos acoplados - GC/Espectrometra de masas - GC/espectroscopa IR 5.2.- Cromatografa de gases (Gas-Slido) H2S; CS2; NOx; CO; CO2; gases nobles (no se retienen en columnas Gas/Lquido)
5.3.- Cromatografa de lquidos de alta resolucin Instrumentacin para la cromatografa de lquidos - Recipientes para la fase mvil y sistemas para el tratamiento de disolventes (eliminacin de O2 y N2) - Filtracin de disolventes - Sistemas de bombeo - Sistemas de inyeccin de muestra - Columnas - Precolumnas -Termostatos - Detectores: i) responden a propiedad de fase mvil; ii) responden a propiedad del soluto.
Fco. Javier Gonzlez Benito
6.- Bibliografa
D.A. Skoog, J.J. Leary, Anlisis Instrumental, McGraw-Hill, Madrid (1996) H.H. Willard, L.L. Merritt Jr.,J.A. Dean, F.A. Settle Jr., Mtodos Instrumentales de anlisis, Grupo Editorial Iberoamericana S.A. de C.V., Mxico (1991). TECHNIQUES in liquid chromatography Simpson, Colin F. John Wiley & Sons (1984). Liquid chromatography column theory Scott, Raymond P.W. John Wiley & Sons (1992). Chromatography of polymers : characterization by SEC and FFF American Chemical Society (1993). Handbook of size exclusion chromatography Marcel Dekker (1995). Cromatografa de exclusin por tamaos [Vdeo] Prez Dorado, Angel, CEMAV, Universidad Nacional de Educacin a Distancia (1997). Manual de cromatografa Loro Ferrer, Juan Francisco Gobierno de Canarias, Direccin General de Universidades e Investigacin (2001).