PRCTICA No.

7 CUANTIFICACION DE TRIGLICERIDOS (GPO-POD) OBJETIVO Cuantificar, hacer la interpretacin clnica, anormalidades & fisiologa de los triglicridos mediante una muestra de sangre. INTRODUCCION Los triglicridos y los lpidos comnpuestos forman parte de estructuras celulares como las membranas celular, nuclear & mitocondrial. El tejido es particularmente rico en fosfolpidos. Al igual que los hidratos de carbono, los lpidos alimenticios deben transformarse antes de pasar a las clulas. Estas transformaciones se inician con la digestin, proceso que tiene la finalidad de facilitar su absorcin intestinal. Su transporte sanguneo tiene algunas particularidades ya que por ser materiales no polares son insolubles en agua (plasma sanguneo); los lpidos o sus componentes viajan por la sangre unidos a protenas o en forma de quilomicrones. La incorporacin a las clulas inicia su metabolismo. Los triglicridos de la dieta forman los quilomicrones posprandiales; por la accin de una lipoprotena lipasa que se activa por heparina e insulina al llegar al adipocito. Se desdoblan en glicerol & acidos grasos de cadena larga, de mas de 16 carbonos; previa unin a CoA, los acidos grasos se unen al fosfato de glicerol (que proviene del metabolismo hidrocarbonado) para formar triglicridos que son almacenados en estas clulas. La glucosa que escapa a la calptacion de los otros tejidos se incorpora al adipocito, por influencia de la insulina, en donde una parte se almacena como

glucgeno & la mayor proporcin en forma de triglicridos de cadena larga saturados (neolipogenesis) MATERIAL 1 jeringa de 3 o 5 ml gradilla centrifuga torundas con alcohol ligadura espectrofotmetro cubetas de 1,0 cm de paso de luz pipeta serolgica 5 tubos de ensaye agua destilada tubo rojo (sin anticuagulante) METODO 1.- Extraer 2-3 ml de sangre venosa, esperar a que coagule y centrifugar para obtener el suero 2.- Separar el suero con una pipeta y colocarlo en un tubo aparte. 3.- En un tubo se coloca un ml de reactivo de trabajo, en otro el patrn & en otro la muestra 4.- Se le agregan a los tubos las cantidades y los reactivos siguientes:

RT (ml) Patrn (L) Muestra (L)

Blanco 1.0 -

Patrn 1.0 10 -

Muestra 1.0 10

5.- Al tubo con un ml de muestra de agrega 1ml de reactivo de trabajo de colesterol y se incuba 5 minutos a 37 C o bien 15-25 C 6.- Vaciar esta muestra a una cubeta & ponerla en el espectofotometro (se debe poner en 0s con agua destilada) checar que este en ceros & colocar la muestra 7.- Leer la absorbancia (A) de la muestra, el color estable de los triglicridos es de 30 minutos. CALCULOS (A)Muestra (A)Patrn RESULTADOS .266 0.051 DISCUSION CUESTIONARIO 1.- Explicar el fundamento de esta prueba 2.- Ejemplificar con formulas la reaccin qumica entre triglicridos, H2O & lipoprotena lipasa y sus productos 3.- Ejemplificar con frmulas la reaccin qumica entre glicerol, ATP Y glicerol quinasa X200= 1043.13 mg/dL de triglicridos en la muestra X200 = mg/dL de triglicridos en la muestra

4.- Ejemplificar con formulas la reaccin qumica entre G3P, O2, glicerol-3oxidasa 5.- Ejemplificar con formulas la reaccin qumica entre H2O2, 4 AF, pClorofenol POD y sus productos 6.- Tres enfermedades que se diagnostican con esta prueba 7.- Esquematizar las formulas de algunos triglicridos importantes 8.- Con esquemas ejemplificar la tcnica y el color del cormogeno 9.- Valores normales, resultados e interpretacin de la prueba & operaciones de la prueba 10.- Explicar los rganos y sustancias que regulan la concentracin de triglicridos en la sangre 11.- Que aprendi de la practica & que utilidad le dar CONCLUSION BIBLIOGRAFIA -Quimica Clnica Farias M, Guillermo