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Torico 3
Replicacin viral II
Estrategias de replicacin de RNA y DNA VIRUS
26/03/2010
1- Adsorcin 2.- Penetracin 3.- Desnudamiento 4.- Sntesis de protenas virales y cidos nucleicos virales 5.- Ensamble 6.- Maduracin 7.- Liberacin de la progenie viral
Lugar de replicacin
- Ncleo -citoplasma
RNA VIRUS
ORF nico (RNAm traducido como poliprotena) RNAm subgenmicos Fragmentacin RNA genmico
RECORDAR.
mRNA es siempre la cadena positiva (+) DNA de polaridad equivalente es la cadena (+) RNA y DNA complementarios de las cadenas positivas son las cadenas negativas (-) mRNA es ledo en el ribosoma celular y puede ser traducido en protena No todos los RNA (+) pueden funcionar como RNAm
Supresin de la terminacin
1.- Procesamiento del pre-RNAm 1.1. Adicin del CAP en extremo 5. 1.2. Adicin del poliA en el extremo 3 1.3. Splicing del pre-mRNA viral. 1.4. Edicin del mRNA viral. 2.- Exportacin de los RNAm celulares y virales
RNA virus
DNA VIRUS
RNA VIRUS
Genoma de RNA son copiados de un extremo al otro sin prdida de secuencias nucleotidicas Produccin de los mRNAs virales que pueden ser eficientemente traducidos por la maquinaria de sntesis proteica celular.
Seales cis-acting de replicacin y empaquetamiento. Cambio (switch ) de templado genomas defectivos, DI, RNA satlites.
RNA VIRUS
Identificacin de las RNA polimerasas Ensayos: extractos celulares incubados con dNTPs Sntesis de RNA citoplasmtico resistente a Actinomicina D en clulas infectadas con poliovirus. Polimerasa viral descubierta en el virin de los RNA (-) Estructura conformacional por difraccin de rayos X (3Dpol, HCV NS5B, RT HIV )
No requieren cebadores (primers) (excepcin VPg en picornavirus, oligonucletidos del mRNA cel. para transcripcin y sntesis de RNA es de novo (virus influenza) Edicin transcripcional.???
RNA Virus
Influenza virus. Sintesis del RNA Sintesis del mRNA es inhibida por -amanitina, inhibidor de la RNAp/DNAd por lo tanto se requiere sntesis de primer. Bunyavirus mRNAs utilizan como primers cap tomados de mRNA celulares. No es inhibido por -amanitin Durante la sintesis del RNA de Influenza en el ncleo celular ocurre el splicing en Bunyavirus no requieren splicing para la obtencin de los RNAm
RNA (+) genmico es un RNAm que nunca es utilizado RNA genmico (+) sirve de molde para la snteis del DNA doble cadena por la RT.
DNA doble cadena se inserta en el cromosoma celular como
provirus
DNA VIRUS
1. DNA ds >>> DNA ss 2. No fragmentados 3. Tamao del genoma (1.8 kb-800 kb) capacidad de codificacion 4. 5. 6. 7. 8. Promotores y secuencias enhancers Factores de transcripcin viral RNA polimerasa II celular Preparacin de la clula para la replicacin viral. Replicacin del DNA.
Centros de Replicacin
Contienen templado DNA protenas de replicacin Se forman en sitios discretos Protenas virales y celulares(pol, pol, pol, ligasa, topoisomerasa I y II) Alta concentracin local de protenas de replicacin y orgenes de replicacin del DNA Facilita el reclutamiento del producto de un ciclo de replicacin como templado para el siguiente.
Replicacin de SV40