Anlisis de Tcnicas I) Primero se debe proceder a la preparacin de cromatoplacas y capilares adecuados para experimentacin.

Las cromatoplacas son una base (portaobjetos) que se preparan para soportar el adsorbente y eluyente que vamos a utilizar, as como la muestra que analizaremos. Para optimizar el proceso de preparacin y evitar el desperdicio de material se preparan dos cromatoplacas simultneamente. Se deben adherir dos cubreobjetos por medio de una gotita de agua, una vez juntos se meten el adsorbente empleado, en este caso la slica gel. El adsorbente se elige en funcin de la naturaleza de la muestra que se va a analizar. La slica gel es necesaria debido a que es una sustancia insoluble en el eluyente y gracias a ella se presentara un fenmeno de superficie llamado evidentemente adsorcin, el cual provoca interacciones electrostticas entre nuestra muestra y el adsorbente mencionado. Se dejan secar las cromatoplacas para que la slica se adhiera al portaobjetos correctamente. Ahora es necesario reducir el dimetro de los capilares, lo cual lograremos exponindolo al mechero y estirndolo un poco. Esto nos ayudara primeramente a colectar nuestra muestra, ya que esta ascender por capilaridad precisamente a nuestro delgado capilar para posteriormente colocar gotas muy finas en nuestras cromatoplacas. II) Debemos colocar en una cromatoplaca tres aplicaciones, en lnea, con diferente concentracin de muestra problema, se debe marcar dicha lnea en la que se colocan estas muestras ya que nos servir como referencia para calcular el factor RF de nuestro sistema. Posteriormente se coloca el portaobjetos en nuestra cmara hmeda con AcOEt. En la cmara se creara un ambiente hmedo debido a que se coloca un papel filtro en las paredes del recipiente y este absorbe las molculas voltiles del eluyente y crea un ambiente lo ms homogneamente posible. El Acetato de Etilo es un eluyente, y es necesario colocarlo debido a que, por efecto de capilaridad, este subir por el portaobjetos y de manera general arrastra la muestra problema en funcin de la polaridad que est presente. Se espera un rato y se marca la altura hasta la que subi el eluyente ya que tambin ser una referencia para calcular el factor RF. Para el revelado de la muestra se hacen dos procedimientos experimentales. El primero consiste en irradiar la muestra con luz ultra violeta de onda corta. Esto nos permite observar fluorescencia en la muestra debido a que la sustancia es capaz de captar la luz UV (generalmente debido a la presencia de dobles enlaces intramoleculares). De esta manera identificaremos la o las nuevas zonas en las que se localiza nuestra muestra. El otro mtodo es a travs de una cmara de yodo. Se utiliza esta cmara debido a que el yodo se sublima fcilmente (incluso a temperatura ambiente) lo cual propicia que los vapores desprendidos formen complejos coloridos (de caf a amarillo) en la muestra y sea fcilmente identificable.

III) El siguiente paso es comprobar la polaridad de dos muestras problemas utilizando 3 eluyente. Es necesario preparas 3 cromatoplacas y agregar en cada una de ella la sustancia 2 y 3. Se marca con lpiz la lnea donde se ubican y una placa se coloca en una cmara con hexano, otra en AcOEt y otra en metanol. Se deja eluir y se saca la placa de la cmara, se marca con lpiz la lnea a donde llego el eluyente (es necesario hacerlo con lpiz ya que el grafito no se disuelve en el eluyente, si se marcara con pluma, la tinta se disolvera y abra un margen de error). Se revela con luz UV y con cmara de yodo. IV) Para comprobar la pureza de una sustancia, se prepara una placa y se le coloca la sustancia 4 y 5 (es necesario recordar que se deben marcar las lneas correspondientes ya que sern una referencia). La placa se coloca en una cmara con AcOEt se deja eluir, se deja secar y luego se revela con luz UV y con cmara de yodo. V) Para comprobar que la cromatografa se puede utilizar como criterio de identificacin se sustancias primero se debe colocar en una cromatoplaca una muestra de la sustancia 6A, al centro una mezcla de la sustancia 6A y 6B, y en el otro extremo la sustancia 6B, se eluye en AcOEt 1 vez. Esta muestra nos servir como punto de comparacin para contrastarla con la cromatoplaca que se describe a continuacin. Se debe preparar otra cromatoplaca en la que se colocara la sustancia 6A y 6B como se coloc en la anterior y se debe eluir con la misma sustancia, solo que esta vez se efectuaran 9 eluciones, dejando secar el eluyente entre cada elucin. Se deben comparar las cromatoplacas de esta experimentacin. d) En el procedimiento de identificacin, Cul de las dos formas de elucin permiti mayor separacin de la mezcla? La mayor separacin de la mezcla se llev a cabo en la cromatoplaca donde se efectuaron 9 eluciones Por qu? Esto se debe a que una de las sustancias era ms polar que la otra, en este caso la ms polar fue la sustancia B, debido a que fue capaz de ser arrastrada, una mayor distancia con respecto al origen, por el eluyente, en comparacin con la sustancia A. Al ser eluida en repetidas ocasiones, el eluyente la arrastraba cada vez ms y ms, lo cual propicio que se separara del otro componente debido a que el otro no era tan fcilmente arrastrado o no corra tan fcil. e) que significa que una sustancia tenga 1.- Rf<5 el eluyente es de muy baja polaridad para la separacin. 2.- Rf=5 el eluyente es ideal para la separacin. 3.- Rf>5 el eluyente es de muy alta polaridad para la separacion.

f) Por qu se dice que la ccf es un criterio parcial y no total de identificacin? Por qu nicamente nos dice que una muestra contiene sustancias diferentes, ya que para empezar se separan, y al separarse recorren una distancia diferente, adems no nos dice concretamente cual es la sustancia con la que trabajamos. Aunque se utilice un patrn de referencia (una sustancia que recorra la misma distancia que la que recorre la muestra a analizar), no implica que se trate de la misma sustancia que se utiliza como patrn, solo puede indicar las similitudes entre las polaridades de las sustancias. g) Cules seran los errores en cromatografa en capa fina? 1.- Aplicacin de solucin muy concentrada Si bien la concentracin no afecta la distancia que recorre una muestra, resulta que una sustancia muy concentrada tendera a expandirse en la cromatoplaca, por lo cual podra mezclarse con otra muestra que pueda aplicarse en esta misma cromatoplaca. 2.- Utilizar eluyente de alta polaridad Si se desconoce la polaridad de la muestra problema, e hipotticamente esta fuese no polar, no se observara corrimiento de la muestra, por lo cual no habra resultados para analizar, por eso es recomendable utilizar un eluyente de mediana polaridad. 3.- Emplear gran cantidad de eluyente en la cmara de cromatografa El eluyente cubrir una mayor parte de la cromatoplaca y se tendr que colocar las muestras a ese nivel, dando poco espacio para que la muestra corra, por lo cual podra ser nula la separacin de una mezcla o abra un gran error en la determinacin del factor Rf.

Conclusiones La cromatografa de capa fina es una tcnica eficiente para la separacin de los componentes de una mezcla, sin embargo se debe ser muy cuidadoso a la hora de seleccionar el eluyente ideal empleado. Para la decisin de dicho eluyente es preciso realizar pruebas de corrimiento de la muestra, las cuales nos darn un factor para esa muestra asociado al eluyente utilizado; si dicho factor tiene un valor de 0.5, este es ideal para la separacin. Dicho factor est en funcin de la polaridad de la muestra as como de la polaridad del eluyente. La concentracin es un factor que no afecta en los resultados obtenidos. La cromatografa tiene varios propsitos fundamentales, los cuales consisten en: -Establecer si dos compuestos son iguales o diferentes entre si -Determinar el nmero de impurezas (componentes) de una muestra -Servir como criterio parcial para la identificacin de una muestra.

Para la separacin de una mezcla resulta bastante eficaz realizar diversas eluciones, ya que se reduce el margen de error al separar las sustancias que componen la mezcla. En nmero de eluciones echas para una muestra se va determinando conforme se vea el avance en la separacin de las sustancias entre cada elucin.