Determinacin de la antioxidante en el aceite de los componentes de salvado de arroz extrado por microondas con ayuda de mtodos

IG Zigoneanu uno , L. Williams uno , Z. Xu b y CM Sabliov uno ,

un ,

LA Louisiana State University, Centro Agrcola, Departamento de BAE, Baton Rouge, 70803, Estados Unidos
b

Louisiana State University, Centro Agrcola, Ciencias de los Alimentos del Departamento de Baton Rouge, LA 70803, Estados Unidos Recibido el 8 de diciembre de 2006; modificada el 14 de septiembre de 2007; Aceptado 15 de septiembre de 2007. Disponible en lnea: 8 noviembre 2007.

Abstracto
Aceite de salvado de arroz se extrae por microondas con ayuda extraccin con isopropanol y el hexano con una proporcin de salvado de solvente a arroz de 3:1 (w / w). Los experimentos se realizaron por triplicado a los 40, 60, 80, 100 y 120 C, con un total extraccin de tiempo de 15 min / muestra.Los componentes del petrleo fueron separados por HPLC en fase normal y se cuantifica con un detector de fluorescencia. La capacidad de captacin de radicales libres del aceite ha sido probado con DPPH y se expres como mmol equivalente Trolox Antioxidante de actividad. El aumento de la vitamina E total, con temperatura de 40 a 120 C fue 59,63% de isopropanol y 342,01% para el hexano. Isopropanol fue el mejor disolvente para la extraccin de -tocoferol y -tocotrienol en comparacin con hexano para los dos microondas con ayuda y disolvente convencional extraccin. Isopropanol era mejor para el rendimiento de aceite extraccin a altas temperaturas. Muestras extradas con isopropanol a 120 C tuvieron mayor antioxidante actividad. No se observaron diferencias en el rendimiento de aceite, vitamina E total, y antioxidante del aceite de la actividad se observ entre los dos mtodos ( microondas con ayuda y el disolvente extracciones) , a 40 C. No hay degradacin de la -tocoferol se observ durante el proceso. Palabras clave: Antioxidante actividad, la degradacin; Extraccin por microondas , el aceite de salvado de arroz, la vitamina E

Esquema del artculo

1. Introduccin 2. Mtodos 2.1. Productos qumicos y materiales 2.2. salvado de arroz preparacin 2.3. Microondas con ayuda de disolventes de extraccin 2.4. solventes convencionales de extraccin 2.5. Determinacin de la vitamina E utilizando el mtodo de HPLC 2.6. El efecto de las microondas y el calor de -tocoferol degradacin 2.7. antioxidante actividad del extracto de salvado de arroz 2.8. Anlisis estadstico 3. Resultados y discusiones

3.1. Efecto de la temperatura, tipo de disolvente, y la extraccin de mtodo en la produccin de aceite de salvado de arroz 3.2. Efecto de la temperatura, tipo de disolvente, y la extraccin de mtodo en el rendimiento total de la vitamina E y la vitamina E, los componentes del aceite de salvado de arroz 3.3. Capacidad de enfriamiento gratuito radical de aceite de salvado de arroz extrado por disolventes convencionales y de microondas con ayuda delas extracciones 3.4. Estudio de la degradacin de la -tocoferol en el microondas sistema de extraccin a una temperatura elevada 4. Conclusin Referencias

1. Introduccin
El arroz es una buena fuente de caloras proporcionadas por su alto contenido de almidn y protenas de alto valor nutricional, es hipoalergnico y de fcil digestin (Mazza, 1998 ). Adems de la de su calidad nutricional del arroz, antioxidante propiedades tambin son excepcionales. El aceite de salvado de arroz antioxidantes son muy eficaces en la reduccin de las lipoprotenas de baja densidad y el colesterol srico total ([Hu et al., 1996] ,[Mazza, 1998],[Sugano y Tsuji, 1997] ,[Kim, 2005] y[Rukmini y Raghuram, 1991] ). Casi todo el aceite del grano de arroz se encuentra en el salvado y el germen (Kim et al., 1999 ). Aceite de salvado de arroz contiene aproximadamente 0.1-0.14% de componentes de vitamina E y 0.9-2.9% orizanol, las concentraciones pueden variar sustancialmente en funcin del origen del salvado de arroz ([Diack y Saska, 1994] ,[Lloyd et al., 2000] y[Hu et al., 1996] ). La vitamina E es un trmino genrico para un grupo de cuatro tocoferoles (, -, -y -) y cuatro tocotrienoles (, -, -y -), de los cuales -tocoferol tiene la mayor actividad biolgica ([Shin y Godber, 1993] ,[Duvernay et al., 2005] ,[Brigelius-Flohe y Trabet, 1999] y[Bramley et al., 2000] ). Estos componentes son lquidos viscoso de color amarillo que son insolubles en agua, pero son fcilmente solubles en disolventes orgnicos. Una serie de factores tales como el oxgeno, la luz, el calor, los minerales alcalinos, la deteccin y hidroperxidos pueden causar la descomposicin de la vitamina E CAV (Bramley et al., 2000 ). Todos los componentes de la vitamina E tiene una estructura anfiflica con una parte hidroflica (anillo cromanol) y una parte hidrofbica (cadenas laterales isoprenoides). Una serie de estudios demostraron que las funciones de la vitamina E como una cadena sin precedentes antioxidante que previene la propagacin de las reacciones de radicales libres ([Brigelius-Flohe y Trabet, 1999] ,[Becker et al., 2004] y[Huang et al., 2002] ). Debido a su eliminacin de radicales antioxidante propiedades, la vitamina E inhibe la peroxidacin lipdica in vitro e in vivo ([Niki y Noguchi, 2004] y[Kim et al., 1999] ). El otro antioxidante del aceite de salvado de arroz, orizanol es una mezcla de steres de cido ferlico con esteroles y alcoholes triterpnicos y tienen las mismas antioxidante propiedades con la vitamina E CAV (Shin et al., 1997 ). Entre los componentes orizanol se encuentra en el salvado de arroz, cicloartenol, -sitosterol, 24 de metileno cicloartanol, y campesterol (4-desmethysterols) son los ms frecuentes (Lloyd et al., 2000 ). La concentracin de orizanol en aceite crudo de salvado de arroz puede llegar al 2% (v / v) (Lloyd et al., 2000 ). Diferentes tcnicas utilizadas para extraccin, aislamiento y purificacin de antioxidantes del aceite de salvado de arroz se han descrito en la literatura (Shin, 1993;[Xu y Godber, 1999] ,[Rogers et al., 1993] y[Shen et al., 1997] ). Es comnmente aceptado que la prevencin de la oxidacin de los compuestos (Diack y Saska, 1994 ; Shin, 1997) es un paso importante en el proceso. Por ejemplo, si el salvado de arroz se mantiene a temperatura elevada despus de extraccin, la endgena antioxidantes pueden ser degradados por la temperatura, especialmente durante el almacenamiento a largo plazo. Por lo tanto, se recomienda que los siguientes extraccin de las muestras deben ser almacenados y utilizados en la temperatura ms baja posible (Shin, 1997).

Muchos estudios fueron publicados en la literatura relacionada con el efecto de diferentes disolventes en el extraccin de aceite de salvado de arroz utilizando mtodos tradicionales de calentamiento ([Hu et al., 1996] y[Proctor y Bowen, 1996] ). Microondas con ayuda de disolventes extraccin es relativamente nuevo extraccin mtodo que puede ser utilizado como alternativa para extraccin de aceites. El sistema est especialmente diseado para funcionar a temperaturas y presiones elevadas controlado por una sonda de temperatura de fibra ptica y un brazo de control de la presin lateral, respectivamente (Carro et al., 2000 ). El nmero de parmetros necesarios para la optimizacin de extraccin por microondas es ms bajo y ms fcil de configurar, en comparacin con fluidos supercrticos extraccin. Las desventajas de los fluidos supercrticos extraccin de solventes y acelerado extraccin son ms altos los costos de los equipos y los bloqueos en los sistemas como consecuencia de la presencia de agua en la muestra (Camel, 2000 ). Los parmetros estudiados por lo general para la optimizacin de microondas con ayuda de extraccin son la presin o la temperatura, extraccin del tiempo, microondas de energa, composicin del disolvente, volumen de disolvente, y las caractersticas de la matriz incluyendo el contenido de agua ([Camel, 2000] , [Eskilsson y Bjorklund, 2000] y[Bum et al., 2000] ). La seleccin del disolvente es un paso importante para la obtencin de ptimos extraccin de los resultados. El mejor disolvente para microondas con ayuda extraccin debe presentar una alta selectividad para el analito, buen disolvente de matriz de interaccin y de alta microondas propiedades de absorcin (Eskilsson y Bjorklund, 2000 ). La ms alta constante dielctrica del disolvente proporciona energa trmica y por lo tanto un rpido calentamiento. Una constante dielctrica baja solvente como el hexano, que no absorba microondas de energa y por lo tanto, no se calienta, se utiliza como una manera de prevenir la degradacin de los componentes termolbiles ([Eskilsson y Bjorklund, 2000] , [Camel, 2000] y[Ondruschka y Asghari, 2006] ), en este caso slo la matriz de la muestra se calienta y el soluto se libera en el disolvente fro. En microondas con ayuda extraccin, el analito migra hacia fuera de la matriz, mientras que a travs del solvente en el clsico solvente extracciones se difunde el disolvente en la matriz de la muestra y solubiliza el analito (Camel, 2000 ). Los beneficios de la microondas con ayuda de disolventes de extraccin consiste en que se puede completar en cuestin de minutos, solventes polares o no polares puede ser utilizado, una precisin basada en el software de control de todos los parmetros de la extraccin se puede lograr una recuperacin de analito superior se puede obtener en comparacin con otros mtodos, y bajas cantidades de disolvente son necesarios. La microondas con ayuda de mtodo tiene ventajas adicionales, como el hecho de que es reproducible, el disolvente se puede calentar en su punto de ebullicin que resulta en el aumento de la extraccin de la eficiencia y velocidad, y el anlisis simultneo de muestras se puede realizar ([Ondruschka y Asghari, 2006] y[Eskilsson y Bjorklund, 2000] ). Microondas con ayuda extraccin se inform a ser til en la extraccin de los contaminantes orgnicos persistentes, pesticidas, fenoles, metales, polmeros, productos farmacuticos y productos naturales (Eskilsson y Bjorklund, 2000 ). Eficacia comparable y reproducibilidad de convencionales extraccin de los mtodos se han obtenido en estos estudios informaron. Microondas con ayuda extraccin de tanshinones de las races de Salvia miltiorrhiza Bunge (Pan et al., 2002 ) y de flavonoides a partir de clulas cultivadas de Saussurea medusa Maxim (Gao y Liu, 2005 ) demostr ser la tcnica ms eficaz en comparacin con el extraccin de estos compuestos por el reflujo de calor extraccin, por ultrasonidos extraccin Soxhlet extraccin, y la extraccin a temperatura ambiente (Pan et al., 2002 ). Mejor extraccin de la eficiencia en un corto perodo de tiempo de los polifenoles del t y la cafena del t se obtiene por microondas con ayuda extraccin en comparacin con el reflujo de ultrasonidos, calor y extraccin a temperatura ambiente (Pan et al., 2003 ).Duvernay et al. (2005) encontr que extraccin por microondas de aceite de salvado de arroz fue comparable a la de disolvente extraccin y sugieren que una proporcin de disolvente a salvado de las temperaturas de 3:1 y secundaria aument la cantidad de aceite y la cantidad de antioxidantes extrados con isopropanol a partir de salvado de arroz mediante el uso de microondas de extraccin. El propsito de este estudio fue extraer y cuantificar los componentes de la vitamina E a partir de salvado de arroz y para determinar la antioxidante actividad del aceite de salvado de arroz como una funcin de

extraccin de parmetros. El efecto de disolvente y la temperatura en los componentes de la vitamina E y el rendimiento de aceite se ha estudiado. Los objetivos de esta investigacin fueron: (1) extraccin de aceite de salvado de arroz a partir de salvado de arroz por microondas con ayuda de mtodo, (2) la cuantificacin de tocoferoles y tocotrienoles en el aceite extrado, (3) determinacin de antioxidante actividad del aceite de salvado de arroz, y (4) estudio del efecto del disolvente y la temperatura en la -tocoferol degradacin.

2. Mtodos
2.1. Productos qumicos y materiales
El salvado de arroz que se usa en el extraccin de los estudios se obtuvo de Cypress arroz proporcionada por la Estacin de Investigacin del Arroz (Crowley, LA). Metanol grado HPLC, el hexano y acetato de etilo fueron ordenados de Merck Chemicals (EMD Chemicals Inc., Gibbstown, NJ), y 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) fue adquirido de ScienceLab.com (ScienceLab.com, Inc ., Houston, TX). cido alfa-tocoferol, y 6hidroxi-2 ,5,7,8-tetramethylchromane-2-carboxlico (Trolox) fueron adquiridos de Sigma-Aldrich (St. Louis, MO), isopropanol de productos qumicos Mallinckrodt (Mallinckrodt Baker, Inc. , Phillipsburg, Nueva Jersey), y el cido actico a partir de Fisher Scientific (Fisher Scientific, Springfield, NJ).

2.2. Preparacin de arroz salvado

El arroz se muele con un piloto Satake cascarilla de arroz (Satake Ingeniera, Co., Tokio, Japn), ubicado en el Departamento de Agricultura Biolgica y en la Universidad Estatal de Louisiana, el molino estaba equipado con dos unidades operativas: Unidad de bombardeo (Modelo GPS300A, Satake Ingeniera , Co., Tokio, Japn) y el blanqueamiento de la unidad (modelo VAF10AM, Satake Ingeniera, Co., Tokio, Japn). Despus de la molienda, salvado de arroz se mantuvo en el congelador a -20 C.

2.3. Microondas con ayuda de disolventes extraccin

Con el fin de obtener el aceite crudo de salvado de arroz, el siguiente procedimiento se sigui. Las muestras de 20 g de salvado de arroz fueron pesados en cada uno de los tres tubos de tefln de presin controlada de la E Ethos Microondas de extraccin del sistema (Milestone, Inc. Monroe, CT). Los tubos de tefln estn diseados para resistir presiones elevadas produce a temperaturas por encima del punto de ebullicin del disolvente.Como solventes para la de extraccin, un disolvente polar (isopropanol) y un solvente no polar (hexano) fueron utilizados. La proporcin de salvado de solvente a arroz fue de 3:1 w / w. Una barra de agitacin magntica, se aadi en cada buque. Los tres buques fueron sellados y colocados en el Microondas de extraccin del sistema. La Microondas de extraccin del sistema se cre para operar en dos etapas. En primer lugar, la temperatura aumenta gradualmente con el conjunto extraccin de la temperatura durante 5 minutos, con un nivel de energa de 800 W como mximo. Al final del perodo de 5 minutos de la extraccin de la temperatura se alcanz. El segundo paso fue diseado para guardar las muestras durante un periodo total de 15 minutos a la extraccin de la temperatura mediante el uso de un nivel de energa de 500 W como mximo. Cinco extraccin de las temperaturas, 40, 60, 80, 100 y 120 C, respectivamente, fueron utilizados para microondas con ayuda extraccin. El control de la temperatura de la muestra dentro de los vasos se llev a cabo mediante una sonda de fibra ptica conectada al sistema de control. Despus de un perodo de ventilacin de 20 minutos en los que las muestras se enfriaron, los vasos se revelaron y cada muestra fue transferida al dispositivo de filtracin. Una bomba de vaco (Thomas Compresores y bombas de vaco, Skokie, IL) fue utilizado para filtrar la mezcla de disolventes y aceite a travs de un papel de filtro Whatman = 47 mm. Despus de la filtracin, la mezcla del aceite que se extrae y el disolvente se midi en un cilindro graduado y el volumen recuperado para cada muestra se registr. Dos mililitros de cada muestra se colocaron en un tubo de prueba de tapa de rosca previamente pesado.Dos tubos de ensayo con 2 ml de mezcla fueron preparados para cada muestra. Estos tubos fueron colocados en un evaporador de centrfuga de vaco (CentriVap consola Labconco, Kansas City, Missouri) y se mantuvieron durante la noche para que se evapore el disolvente. El aceite residual de cada muestra se

pesaron para determinar la extraccin de rendimiento. Uno de los tubos de ensayo para cada muestra se utiliz inmediatamente despus de la evaporacin para determinar la CAV con vitamina E por HPLC. El otro tubo de ensayo fue flasheado con nitrgeno para mantener una atmsfera inerte y para evitar la posible degradacin del aceite antioxidantes y se coloc en el congelador en condiciones de oscuridad para ms antioxidante anlisis.

2.4. Disolvente convencional extraccin

Isopropanol y hexano fueron los disolventes utilizados para el disolvente convencional extraccin. Veinte gramos de salvado de arroz fue pesado en un matraz Erlenmeyer y el volumen de disolvente correspondiente a la 3:01 w / w solvente a salvado de relacin se aadi. Cada frasco fue tapado con un tapn de goma y cada muestra se agit bien para una mejor mezcla de salvado y solvente. Cada solvente extraccin con isopropanol y hexano, se realiz por triplicado. Los frascos fueron colocados en un bao de 40 C el agua con agitacin durante 15 min. Las muestras se dejan enfriar durante 20 minutos y se filtra a travs del dispositivo de filtro se ha descrito anteriormente. Adems, las muestras fueron procesadas y se recoge para su posterior anlisis como se describe anteriormente.

2.5. Determinacin de vitamina E por el mtodo HPLC

Despus de la evaporacin se complet, 2 ml de hexano se aadi a cada tubo que contiene el aceite de salvado de arroz y cada muestra se agit durante 10 s. Los tubos de ensayo se coloca en una centrifugadora Hermle Labnet de alta capacidad (Denville Scientific Inc., South Plainfield, NJ) y se centrifuga durante 20 minutos a 3500 rpm. Un mililitro de sobrenadante se transfiri a un vial de HPLC y 25 l se inyectaron en el sistema HPLC. La cantidad de los componentes de la vitamina E en las muestras se determin por HPLC en fase normal. El sistema HPLC consisti de Waters (Waters, Milford, MA) 510 de la bomba, un inyector de 715 ultra WISP, y un detector de fluorescencia 470. Veinticinco microlitros de cada tubo se inyecta en una de 25 cm x 4,6 cm de dimetro de 5 micras Supelcosil LC-Si (Supelco, Bellefonte, PA) de la columna. La fase mvil tiene la siguiente composicin: 98,4% de hexano, un 0,8% acetato de etilo, y el 0,8% de cido actico y el caudal fue de 1,5 mL / min. El eluyente se controlar mediante el detector de fluorescencia con una longitud de onda de excitacin 290 nm y 330 nm de longitud de onda de emisin. Cromatogramas fueron registrados y procesados utilizando las aguas del Milenio software de cromatografa. Cuatro componentes de la vitamina E, -y -tocoferol y y tocotrienol, respectivamente, se determin y se expres como el salvado de ug / g de arroz dulce, utilizando una curva estndar determinado en las mismas condiciones. El contenido total de vitamina E se expresa como la suma de los cuatro CAV.

2.6. El efecto de la microondas y el calor de -tocoferol degradacin

Dos muestras de un volumen de 750 ml de -tocoferol en una concentracin de 0,10 g / L se prepar en isopropanol y n-hexano. Un volumen de 1 ml de -tocoferol en hexano se tomaron muestras y 25 l fueron inyectados en el sistema HPLC como control. Las muestras de 2 ml para ambos disolventes se colocan en dos tubos de ensayo y se evaporaron durante la noche en un evaporador de centrfuga de vaco. Despus de la evaporacin se complet, 2 ml de hexano se aadi a los dos tubos de ensayo, agitaron durante 10 s, y se analizaron por HPLC para evaluar la degradacin durante el proceso de evaporacin. Para estudiar el efecto de microondas y el calor de -tocoferol degradacin, 50 ml de muestra se colocaron en los vasos de tefln de la E Ethos Microondas de extraccin del sistema y se mantuvo a cinco temperaturas diferentes, 40, 60, 80, 100 y 120 C. Los experimentos se realizaron por triplicado. Las muestras fueron procesadas, recopilados y analizados como se describe en la Seccin 2.3 .

2.7. Antioxidantes del extracto de la actividad de salvado de arroz

Determinacin de la antioxidante actividad del aceite de salvado de arroz se llev a cabo utilizando el mtodo de barrido radical DPPH (Oufnac et al., 2007 ). Los experimentos se realizaron por triplicado. Una cantidad de aceite de 0,01 g de cada muestra se disolvi en 500 l de metanol y vortex durante 10 s. Tres diferentes volmenes de esta solucin (40, 80 y 120 l) se aadieron a 2 ml de 25 mg / ml de solucin de DPPH en metanol. La disminucin de la absorbancia se monitoriz a 515 nm utilizando un UV-Visible

Beckman Coulter espectrofotmetro (Beckman Coulter, Fullerton, CA). Las lecturas se realizaron a tiempo cero, despus de que el aceite se mezcla con el metanol se agrega a DPPH, y despus de 30 min de incubacin a temperatura ambiente. El porcentaje de inhibicin se expresa mediante la siguiente ecuacin:(1) % De inhibicin = (Abs t = 0- Abs t = 30 minutos ) / ABS t = 0 100Abs donde t = 0 es la absorcin de DPPH en el momento cero y Abs t = 30 min fue la absorcin del DPPH despus de 30 minutos de incubacin . El porcentaje de inhibicin se represent frente a cada uno la cantidad de una solucin de aceite de salvado de arroz para obtener una lnea de regresin.Trolox (0,5 mM) disuelto en metanol se utiliza como estndar para expresar la capacidad de inhibicin de la solucin de aceite de salvado de arroz en equivalente de Trolox. La relacin entre las pendientes de las lneas de regresin de una solucin de aceite de salvado de arroz y la solucin de Trolox se expres como mmol equivalente Trolox Antioxidante de actividad.

2.8. El anlisis estadstico

Los medios y las desviaciones estndar de la extraccin de rendimiento, el total de la vitamina E, los componentes de la vitamina E, la capacidad de recoleccin de residuos DPPH, y la degradacin de la tocoferol se inform de las determinaciones por triplicado para cada muestra. ANOVA de dos vas con Proc Mixed factorial 2 x 5 (SAS sistema, SAS Institute Inc., Cary, NC) se utiliz para probar diferencias significativas entre las temperaturas (40, 60, 80, 100 y 120 C) y solventes (isopropanol y hexano) para microondas con ayuda del mtodo. ANOVA de dos vas con Proc Mixed 2 2 factorial se utiliz para probar diferencias significativas entre los disolventes (isopropanol y hexano) y extraccin de los mtodos ( microondas con ayuda y disolvente convencional extracciones) a 40 C. Pruebas de comparaciones mltiples se realizaron utilizando el ajuste de Tukey para determinar las diferencias significativas entre tratamientos. La significacin estadstica fue declarado en P <0,05.

3. Resultados y discusiones
3.1. Efecto de la temperatura, tipo de disolvente, y extraccin de mtodo en la produccin de aceite de salvado de arroz
El salvado de arroz rendimiento de aceite extrado con isopropanol y el hexano por disolvente convencional extraccin a 40 C, y por microondas con ayuda extracciones a los 40, 60, 80, 100 y 120 C se presenta en la figura. 1 . El rendimiento de aceite por microondas con ayuda extraccin a 40 C fue de aproximadamente el 10% del salvado de arroz dulce para isopropanol, y aproximadamente el 14% de hexano. Por el aumento de la extraccin de la temperatura a 120 C, la cantidad de petrleo extrado fue de 50% superior al isopropanol fue utilizado como un extraccin con disolventes (Tabla 1 ). De hexano, un cambio significativo en la cantidad de petrleo extrado fue notado por el aumento de la extraccin de temperatura de 40 a 120 C (Tabla 1 ). Parece que a temperaturas ms altas de la solubilidad del aceite de salvado de arroz aument en isopropanol y componentes tal vez ms polares se extrajeron como las protenas solubles en alcohol e hidratos de carbono, aumentando la cantidad de crudo del aceite extrado a estas temperaturas. Los resultados son similares a los encontrados porDuvernay et al. (2005) , que mostr un incremento del 54% en la produccin de petrleo mediante el aumento de la temperatura de 80 a 140 C por microondas con ayuda de mtodo que usa alcohol isoproplico extraccin de solventes. A 40 C hexano extrae una cantidad significativamente mayor de aceite (0,14 g aceite / g de salvado de arroz dulce), en comparacin con isopropanol (0,10 g aceite / g de salvado de arroz dulce) por microondas de datos con ayuda de mtodo, de forma similar con los resultados encontrados porHu et al. (1996) . A temperaturas ms altas (100 y 120 C) isopropanol demostr ser significativamente mejor disolvente para el extraccin de aceite de salvado de arroz, en comparacin con hexano.

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Fig. 1. Aceite de rendimiento obtenido por disolvente convencional y microondas con ayuda de los mtodos que utilizan isopropanol y hexano como extraccin de solventes (I = isopropanol, H = hexano, ME = microondas con ayuda extraccin, SE = disolvente convencional extraccin) n = 6.

Tabla 1. rendimiento de aceite, el total de la vitamina E, vitamina E, los componentes, la capacidad de recoleccin de residuos DPPH en funcin de la temperatura con microondas con ayuda la extraccin y el tipo de disolvente

Tem pera tura ( C)

Sol Aceit ve eA nte

La tocot vitami tocof tocof rieno na EB erolB B erolB l

toco trien olB

Trolo x equiv alente

C

40

Yo

0,10 95,41 u 0,01 2,38 a,

na b, c

43,89 8,19 5,37 37,9 33,61 6 a u b, 2,23 0,19 0,16 1,21 7,35 un
,b na c, d c, d a

60

Yo

0,12 97,46 a, 0,01 1,76 a,

b b, c

43,83 8,27 5,44 39,9 34,40 3 a u b, 2,30 0,66 0,09 0,50 1,80 un
,b na c, d, e c, d a

80

Yo

124,56 59,16 15,31 6,33 43,7 45,49 0,14 6 0,0 13,26 12,67 1,72 u 0,07 c, 1,47 6,13 a, c, d 0 a, b, c b na d, e d b, c 0,14 137,80 22,74 6,90 43,4 51,11 64,69 8 0,03 c, 15,47 0,99 u 0,98 d, 5,34 3,75 b, 9,26 b na d b, c e d c 47,79 54,50 42,7 0,15 152,31 7,29 59,85 3 3,83 a 4,17 u 3,68 0,04 d 11,35 c , b 0,50 e d 6,41 c na 0,14 56,22 0,01 b, 28,15
c, d una

100

Yo

120

Yo

40

26,54 9,07 3,25 17,3 41,38 6 15,23 3,11 u 1,11 u 8,74 3,93 a,
una na na una b

Tem pera tura ( C)

Sol Aceit ve eA nte

La tocot vitami tocof tocof rieno B B na E erol erolB lB

toco trien olB

Trolo x equiv alente

C

60

0,14 81,49 b, 0,01 7,62 a,

c, d b, c

34,86 12,90 4,42 29,3 42,58 1 u u a, 6,28 1,25 0,17 0,67 1,45 a,
na na b b, c b

80

0,13 66,40 0,00 a, 10,67

b, c, d a, b

26,04 14,90 3,44 22,0 38,84 1 4,45 u 2,18 u 0,75 u 3,62 9,45 a,
na na na a, b b

100

0,12 98,19 0,01 a, 14,80

b a, b, c

27,49 45,99 3,71 21,0 39,02 0 7,20 u 5,44 u 1,03 a, 4,64 4,64 a,
na na b a, b b

120

0,12 248,50 35,49 183,7 4,77 24,4 43,55 6 9 0,00 a, 78,11 3,62 u 72,70 0,41 a, 3,10 2,73 a,
b, c d na b b, c a, b b

Completo tamao de la tabla I = isopropanol; H = hexano. Un rendimiento de aceite se expresan en g / g de salvado de arroz dulce. B Total de vitamina E y los componentes de la vitamina E se expresaron como mg / g de salvado de arroz dulce. C Barrido capacidad de DPPH se expres como Equivalente Trolox mmol / g de salvado de arroz dulce. Diferencias significativas ( P <0,05) de aceite, vitamina E, los componentes de la vitamina E, y la compactacin de la capacidad de DPPH en la misma columna se indican con letras diferentes a, b, c, d, e n = 3.

El disolvente convencional extraccin a 40 C para isopropanol produjo aproximadamente 12% de aceite de salvado de arroz fresco, no muy diferente a la del petrleo producido por microondas con ayuda extraccin en las mismas condiciones. La cantidad de aceite extrado con hexano disolvente convencional extraccin fue de aproximadamente 14%, lo que fue similar a la cantidad de aceite extrado con hexano por microondas con ayuda extraccin. Estos valores fueron cerca de 14,95% el rendimiento de aceite extrado de salvado de arroz tradicional por solventes extraccin con hexano como disolvente a temperatura ambiente por Proctor (1996).Hu et al. (1996) report que aproximadamente el 19% de aceite de salvado de arroz dulce se extrajo por el hexano a 40 y 60 C, mientras que extrae isopropanol 17% y 18% a los 40 y 60 C, respectivamente. Las pequeas diferencias en el rendimiento de aceite entre los diferentes datos reportados en la literatura y los encontrados en este estudio se explica por una serie de factores incluyendo el tipo de arroz, almacenamiento, molienda, la estabilizacin de salvado de arroz, y extraccin de las condiciones.

Extraccin por microondas era comparable al disolvente convencional extraccin para las condiciones estudiadas, 15 min extraccin a 40 C, lo que sugiere que extraccin por microondas fue una solucin alternativa a extraccin de los materiales bioactivos. Se prev que para la extraccin de menos de 15 minutos los tiempos, extraccin por microondas puede funcionar mejor que solvente extraccin, debido a las tasas de calentamiento ms rpido.

3.2. Efecto de la temperatura, tipo de disolvente, y extraccin de mtodo en el rendimiento total de la vitamina E y los componentes de la vitamina E del aceite de salvado de arroz
La cantidad total de vitamina E se expresa como la suma de los cuatro componentes analizados, -tocoferol, -tocotrienol, -tocoferol, -tocotrienol. Al aumentar la temperatura de 40 a 120 C, la vitamina E total vari entre 95,41 y 152,31 mg / g de salvado de arroz dulce al isopropanol se utiliz como una diferencia de disolvente, que no se encontr estadsticamente diferentes (Tabla 1 ). Cuando hexano se utiliza como disolvente para la extraccin por microondas de la vitamina E, los componentes, el total de la vitamina E aument, pero no de forma significativa desde 56,22 hasta 98,19 mg / g de salvado de arroz dulce al aumentar la temperatura de 40 a 100 C (Tabla 1 ). Un nuevo aumento de la temperatura a 120 C, siempre un aumento significativo de la vitamina E un total de 248,50 mg / g de salvado de arroz dulce. El promedio total extrado de vitamina E fue significativamente mayor en hexano se utiliza como disolvente en comparacin con isopropanol, para extracciones realizadas a 120 C. La vitamina E total obtenida por disolvente convencional extraccin a 40 C fue 87,46 mg / g de salvado de arroz dulce para isopropanol y 52,64 g / g de salvado de arroz dulce para el hexano.Estos valores son similares con la cantidad total de vitamina E extrados en las mismas condiciones por microondas con ayuda extraccin de mtodo ( Fig. 2. ).

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Fig. 2. Total de la vitamina E extrados por solventes convencionales y microondas con ayuda de los mtodos que utilizan isopropanol y hexano como extraccin de solventes (I = isopropanol, H = hexano, ME = microondas con ayuda extraccin, SE = disolvente convencional extraccin) n = 3.

Las variaciones de la cantidad de cada componente de la vitamina E con la temperatura para microondas con ayuda extraccin se presentan enTabla 1 y de disolvente convencional extraccin de los datos se presentan enTabla 2 . Para microondas con ayuda extraccin de un aumento de la temperatura de 40 a 100 C produce un aumento de 47,4% en el extraccin de -tocoferol (no significativo). De hexano, no se observaron diferencias significativas en el microondas con ayuda extraccin de -tocoferol por el aumento de la temperatura ( Fig. 3. ). A 80 y 100 C, isopropanol extrado mucho ms -tocoferol en comparacin con hexano, 127,18% y 135,32% ms de -tocoferol, respectivamente (Tabla 1 ). No hubo diferencias significativas entre los solventes y extraccin de los mtodos se observaron en relacin con -tocoferol extrado (Tabla 2 ). Tabla 2. rendimiento de aceite, el total de la vitamina E, vitamina E, los componentes, la capacidad de recoleccin de residuos DPPH en funcin del tipo de disolvente con microondas con ayuda y disolvente convencional extracciones a 40 C

Sol ven te

Trolo M La x Aceit tocot tocot tod A vitami tocofe tocof equiv e rieno rienol B B B o na E rol erol B alente lB C 95,41 43,89 8,19 5,37 un un u 2,38 2,23 0,19 0,16
a a na a, b

0,10 Isopro ME panol 0,01

una

37,96 1,21 u
na

33,61 7,35 un
a

0,14 Hexa ME no 0,01

b

56,22 28,15
a, b

26,54 15,23
una

9,07 3,25 17,36 3,11 u c 1,11 8,74 b na 40,54 1,89 u

na

41,38 3,93 un
a

Isopro SE panol

0,12 0,01
a, b

87,46 7,41 a,
b

32,50 8,48 5,94 5,03 un 0,45 u 0,13

a na una

33,86 3,52 un
a

Hexa SE no

0,14 0,02
b

52,64 9,08 b

20,73 8,31 3,93 7,30 un 0,99 u 0,64

a na b, c

19,68 3,30 b

41,64 5,04 un
a

Completo tamao de la tabla Un rendimiento de aceite se expresan en g / g de salvado de arroz dulce. B Total de vitamina E y los componentes de la vitamina E se expresaron como mg / g de salvado de arroz dulce. C Barrido capacidad de DPPH se expres como Equivalente Trolox mmol / g de salvado de arroz dulce. Diferencias significativas ( P <0,05) de aceite, vitamina E, los componentes de la vitamina E, y la compactacin de la capacidad de DPPD en la misma columna se indican con letras diferentes a, b, c, n = 3.

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Fig. 3. El alfa-tocoferol extrados por solventes convencionales y microondas con ayuda de los mtodos que utilizan isopropanol y hexano como extraccin de solventes (I = isopropanol, H = hexano, ME = microondas con ayuda extraccin, SE = disolvente convencional extraccin) n = 3.

Variacin de la -tocotrienol con la temperatura y el disolvente se presenta en la figura. 4 . Cuando isopropanol se utiliza como disolvente en la microondas con ayuda extraccin de un aumento de la temperatura de 40 a 120 C produce un aumento en la extraccin de la cantidad de -tocotrienol 8,19 a 54,50 mg / g de salvado de arroz dulce, que estadsticamente no es significativamente diferente

(Tabla 1 ). Para el hexano, el extraccin de la cantidad de -tocotrienol no aument significativamente entre 40 y 100 C (9,07 a 45,99 mg / g de salvado de arroz dulce) y un aumento de la temperatura a 120 C aument significativamente la cantidad de -tocotrienol a 183,76 mg / g salvado de arroz dulce (Tabla 1 ). Hexano extrae mucho ms -tocotrienol en comparacin con isopropanol a 120 C. No hubo diferencias significativas entre los solventes y extraccin de los mtodos se cuenta para la extraccin de -tocotrienol (Tabla 2 ).

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Fig. 4. Alfa-tocotrienol extrados por solventes convencionales y microondas con ayuda de los mtodos que utilizan isopropanol y hexano como extraccin de solventes (I = isopropanol, H = hexano, ME = microondas con ayuda extraccin, SE = disolvente convencional extraccin) n = 3.

Para -tocoferol, un cambio significativo con la temperatura se observ cuando se utiliz isopropanol, desde 5,37 hasta 7,29 mg / g de salvado de arroz dulce para 40 y 120 C, respectivamente ( Fig. 5. ). Cuando hexano se utiliza como extraccin de solventes ningn cambio significativo en la cantidad de -tocoferol se observ como una funcin de la temperatura (Tabla 1 ). En trminos de la extraccin de mtodo, a 40 C, tanto para microondas con ayuda y disolvente convencional extracciones, isopropanol extrae mucho ms tocoferol en comparacin con hexano (Tabla 2 ). Adems, para microondas con ayuda extraccin realizada en el rango de temperatura de 80-120 C, isopropanol demostr ser significativamente mejor extraccin de disolvente para -tocoferol en comparacin con hexano (Tabla 1 ).

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Fig. 5. Gamma-tocoferol extrados por solventes convencionales y microondas con ayuda de los mtodos que utilizan isopropanol y hexano como extraccin de solventes (I = isopropanol, H = hexano, ME = microondas con ayuda extraccin, SE = disolvente convencional extraccin) n = 3.

La cantidad de -tocotrienol no vari significativamente con la temperatura cuando isopropanol fue utilizado como un extraccin de solventes. Cuando se utiliz hexano, un aumento significativo en tocotrienol se observ al aumentar la temperatura en el rango de 40-60 C, 17,36 a 29,31 mg / g de salvado de arroz dulce ( Fig. 6. ). A 40 C, tanto microondas con ayuda y disolvente convencional extraccin con isopropanol extrae mucho ms -tocotrienol en comparacin con hexano (Tabla 2 ). La extraccin realizada en el rango de temperatura de 80-120 C microondas con ayuda de mtodo con

isopropanol fue probado para extraer mucho ms -tocotrienol en comparacin con microondas asistida con hexano (Tabla 1 ).

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Fig. 6. Gamma-tocotrienol extrados por solventes convencionales y microondas con ayuda de los mtodos que utilizan isopropanol y hexano como extraccin de solventes (I = isopropanol, H = hexano, ME = microondas con ayuda extraccin, SE = disolvente convencional extraccin) n = 3.

El ptimo microondas con ayuda extraccin de -tocoferol se llev a cabo en un extraccin de la temperatura de 100 C cuando se utiliz isopropanol como disolvente. Microondas con ayuda extraccin a 120 C con hexano produjo un rendimiento muy elevado de -tocotrienol. El aumento en la cantidad de tocotrienol extrados con hexano a estas altas temperaturas, no se observ cuando se utiliz isopropanol, podra indicar que la alfa-tocotrienol fue liberado preferentemente a partir de la matriz de salvado de arroz muy caliente en el fro, solvente no polar.

3.3. Capacidad de enfriamiento libre radical de aceite de salvado de arroz extrado por disolventes convencionales y microondas con ayuda extracciones
Los resultados sobre la capacidad de enfriamiento libre radical del aceite de salvado de arroz antioxidantes obtenidos por disolvente convencional y microondas con ayuda extracciones se presentan en la figura. 7 . Cuando isopropanol se utiliza como disolvente, la capacidad de enfriamiento radical libre aument significativamente al aumentar la temperatura de microondas con ayuda extraccin, 33,61 a 59,85 mmol Trolox equivalente por gramo de salvado de arroz dulce para 40 y 120 C, respectivamente. La capacidad de enfriamiento radical libre no ha cambiado significativamente para el aceite extrado con hexano por microondas con ayuda extraccin, a pesar de que una mayor cantidad de vitamina E fueron extrados (Tabla 1 ). El cambio en la antioxidante actividad del aceite de salvado de arroz siguieron una tendencia similar a la de la cantidad de petrleo extrado en funcin de la temperatura. Esto sugiere que la cantidad de compuestos fenlicos totales extrados, que son solubles en metanol, se puede correlacionar con la antioxidante actividad. A 120 C, el aceite de salvado de arroz extrado con isopropanol present una significativa mayor capacidad DPPH basura en comparacin con el aceite de salvado de arroz extrado con hexano. Esto puede ser explicado por la mayor miscibilidad de isopropanol con el aceite de salvado de arroz a temperaturas ms altas, lo que llev a ms antioxidantes extrados a temperaturas elevadas. Desde orizanol es soluble en alcohol, tal vez isopropanol a temperatura ms alta extrae ms componentes orizanol en el aceite de salvado de arroz, que proporcionan un aumento en la antioxidante del aceite de la actividad. No hay capacidad significativa DPPH diferentes barrido se observ entre los dos solventes cuando ambos microondas mtodos solventes asistida convencional y se compararon (Tabla 2 ). Es importante tener en cuenta que el radical DPPH capacidad de barrido se determin en metanol por lo que slo la antioxidante de la capacidad de los componentes solubles en metanol fue probado (los componentes insolubles se separaron por filtracin antes del anlisis DPPH).

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Fig. 7. Capacidad de recoleccin de residuos DPPH radicales libres (Equivalente Trolox mmol / g de salvado de arroz dulce) a partir de salvado de arroz extrado por disolventes convencionales y microondas con ayuda de mtodos de isopropanol y hexano como extraccin de solventes (I = isopropanol, H = hexano, ME = microondas con ayuda extraccin, SE = disolvente convencional extraccin) n = 3.

3.4. Estudio de la degradacin de la -tocoferol en el microondas extractor del sistema a una temperatura elevada
Los resultados sobre la degradacin de -tocoferol mantiene a temperatura elevada en el microondas extractor del sistema se presenta en la figura. 8uno de -tocoferol se disolvi en isopropanol y 8 b de tocoferol se disolvi en hexano. Ningn cambio significativo en la cantidad de -tocoferol durante el proceso de microondas calentamiento y evaporacin se not. Estos resultados estn de acuerdo con los estudios sobre la degradacin de los tocoferoles y tocotrienoles expuestos a las condiciones ambientales (Mazza et al., 2002 ). extraccin por microondas y el proceso de evaporacin se realizaron en condiciones de oscuridad y en la presencia de una cantidad limitada de oxgeno para microondas de extraccin de mtodo, y al vaco durante el proceso de evaporacin, la exposicin de las muestras a la luz y el oxgeno es mnima. El factor ms importante en ambos procesos ( microondas calentamiento y evaporacin al vaco) es la temperatura elevada. Estos resultados mostraron que durante todo el extraccin proceso de -tocoferol no se degrada.

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Fig. 8. Estudio sobre la degradacin de -tocoferol en el microondas extractor del sistema a elevar la temperatura ( un = isopropanol, b = hexano). Valor de C = control, Ev = efecto de evaporacin, y MeV = microondas y el efecto de evaporacin. Las barras de error representan la desviacin estndar de 3 repeticiones.

4. Conclusin
Para microondas con ayuda extraccin, hexano result ser un mejor solvente para el aceite de salvado de arroz extraccin en comparacin con isopropanol para extracciones realizadas a 40 C; hexano aceite extrado aproximadamente un 40% ms de isopropanol. Mientras que al aumentar la temperatura, el hexano no extraer una cantidad significativamente mayor de petrleo, isopropanol aceite extrado aproximadamente un 25% de salvado de arroz a 120 C de hexano en las mismas condiciones. A mayor temperatura, isopropanol demostr ser un mejor extraccin de solventes para el aceite de salvado de arroz. Hexano extrae gran cantidad de -tocotrienol a 120 C, mientras que el aumento de la temperatura de isopropanol fue ms beneficiosa para el extraccin de -tocoferol. Por otra parte, isopropanol a temperatura ms alta parece extraer ms hidroflico antioxidantes que se dieron a conocer en el aumento del 78% de la capacidad de DPPH barrido por el aumento de la temperatura de 40 a 120 C.

No hubo diferencias significativas en el rendimiento de aceite, vitamina E total, y antioxidante del aceite de la actividad de salvado de arroz se observ entre los dos extraccin de mtodos, convencionales y solvente microondas con ayuda extracciones, a 40 C, en tiempos ms cortos, se espera que extraccin por microondas puede funcionar mejor que solvente extraccin, debido a las tasas de calentamiento ms rpido. Los resultados mostraron que durante todo el extraccin proceso de -tocoferol no se degrada.