SUEROS HEMOCLASIFICADORES ANTI - A, ANTI - B

INDICACIONES AL CONSUMIDOR Garanta de Calidad del Producto GT laboratorio elabora y comercializa productos para Diagnstico de uso IN VITRO habiendo certificado Normas de Buenas Prcticas de Fabricacin ( O.M.S / W.H.O. Technical Report Series 908 / 2003, C.E.E. Resolucin 91 / 536 y A.N.M.A.T. Disposicin 3623 / 1997; ISO 9001 / 2008 e ISO 13485 : 2003. Los trminos y condiciones de calidad son absolutos dentro de la competencia de responsabilidades que correspondan a GT lab.

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Necochea 3274 (s2001QXL) Rosario - Argentina T el/fax: ++54 (341) 481 - 1002 y rot. www.gtlab.com.ar
FUNDAMENTO DEL METODO El mtodo est basado en el principio de aglutinacin. Cuando los glbulos rojos de la muestra de sangre del paciente se ponen en contacto con el Reactivo Anti D (Rho), se producir una aglutinacin visible macroscpicamente si en la superficie de los eritrocitos existe el antgeno en estudio. REACTIVOS Reactivo Anti D (Rho): solucin de anticuerpos Monoclonales IgM/IgG obtenidos a partir de hibridomas de ratn. CONSERVACION Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS Conservar en refrigerador 2-8 C. La estabilidad alcanza la fecha de vencimiento indicada en la caja y/o frascos. PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS SOBRE EL USO DE LOS REACTIVOS Turbidez de las soluciones puede indicar contaminacin. En tal caso no usar. Los reactivos son para USO IN VITRO. MUESTRA Glbulos rojos o sangre entera. No se necesita preparacin especial del paciente antes de la toma de la muestra. La sangre puede ser recogida con o sin anticoagulantes. Los anticoagulantes recomendados son: EDTA, heparina, citrato. Puede analizarse sangre obtenida por puncin digital por la tcnica en placa. Para evitar la coagulacin de la sangre al utilizar esta tcnica, se la debe mezclar rpidamente con el antisuero a ensayar. Para los ensayos con sangre de cordn, los G.R. se deben lavar previamente con S.F . Estabilidad y conservacin de las muestras Preferentemente, las muestras deben ensayarse inmediatamente. Si el ensayo se demora, conservar en refrigerador a 2-8 C. La viabilidad de los glbulos rojos limita el tiempo de almacenamiento. ENSAYO I: TECNICA EN PLACA Procedimiento: Temperatura de trabajo para Muestras y Reactivos: 20- 25 C. 1. Preparar una suspensin de glbulos rojos al 40- 50% en solucin fisiolgica, en suero compatible o en su propio suero o plasma. 2. En una placa de vidrio limpia, colocar una gota de antisuero Anti D (Rho). 3. Agregar una gota de la suspensin de G.R. 4. Mezclar las gotas, utilizando palillos descartables.

SUEROS HEMOCLASIFICADORES
ANTI - D (RHO)
ENSAYO III: METODO DE ANTIGLOBULINA INDIRECTA PARA EXPRESIO NES DEBIL ES DEL ANTIG ENO D- TECNICA EN TUBO Procedimiento: Temperatura de trabajo para Muestras y Reactivos: 20- 25 C. 1. Lavar los G.R. 3 veces con solucin fisiolgica fresca. 2. Preparar una suspensin de G.R. al 5% en solucin fisiolgica. 3. A un tubo de hemlisis agregar una gota del antisuero Anti D (Rho). 4. A un segundo tubo, agregar una gota de Albmina Bovina al 30%. 5. Agregar a cada tubo, una gota de suspensin de G.R. 6. Incubar ambos tubos 15 minutos a 37 C. 7. Lavar los G.R. tres veces con solucin fisiolgica, descartando el sobrenadante del ltimo lavado. 8. A cada tubo agregar 2 gotas de Suero Anti- Humano poliespecfico. Mezclar. 9. Centrifugar 20 segundos a 3400 rpm o 1 minuto a 1000 rpm. 10. Agitar ligeramente los tubos observando la presencia o ausencia de aglutinacin.

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Reactivo para la determinacin cualitativa de los antgenos eritrocitarios D (Rho)

5. Balancear la placa continuamente durante 2 minutos. 6. Observar macroscpicamente los resultados obtenidos dentro de los 2 minutos de producidas las mezclas (NOTA 1). ENSAYO II: TECNICA EN TUBO Procedimiento: Temperatura de trabajo para Muestras y Reactivos: 20- 25 C. 1. Lavar los G.R. 3 veces con solucin fisiolgica fresca. 2. Preparar una suspensin de glbulos rojos al 5% en solucin fisiolgica, en suero compatible o en su propio suero o plasma. 3. En un tubo de hemlisis colocar una gota de antisueros Anti D (Rho). 4. Agregar a cada tubo una gota de la suspensin G.R. M ezclar. (NOTA 2). 5. Centrifugar 15- 20 segundos a 3400 rpm o 1 minuto a 1000 rpm (NOTA 3). 6. Agitar ligeramente el tubo observando la presencia o ausencia de aglutinacin. INTERPRETACION DE LOS RESUL TADOS Presencia de aglutinacin para cualquiera de las tcnicas ensayadas, indica reaccin POSITIVA o Rh D positivo. Si no hay aglutinacin, los G.R. debern ensayarse para el antgeno D dbiles. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Expresin dbil del antgeno D El trmino Du se ha utilizado para describir la expresin dbil del antgeno D de los glbulos rojos. (NOTA 4): Los ensayos de control de calidad y validacin del producto Reactivo Anti D (Rho), han indicado que ms de un 80% de los glbulos rojos clasificados anteriormente como Du, muestran aglutinacin franca al utilizar este producto, ya que los anticuerpos que lo componen, provienen de clones celulares especialmente seleccionados para ofrecer resultados de fcil interpretacin. Reacciones de aglutinacin dbil suelen presentarse en prematuros, recin nacidos o individuos con un bajo grado de expresin del antgeno D. En patologas que cursan con desrdenes sanguneos, o en los casos de utilizacin de algunas drogas teraputicas, pueden presentarse errores en la interpretacin de los resultados. En estos casos, puede utilizarse el Mtodo de Prueba para D dbiles. CONTROL DE CALIDAD INTERNO El control de Calidad Interno pueden efectuarse ensayando glbulos rojos con fenotipo conocido.

GM
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ciales (6 categoras reconocidas). La categora D VI (la menos inmunognica) es detectada mediante este antisuero. 5. La aglutinacin en el tubo con Albumina (sin anti D) indica sensibilizacin de los G.R. ( coombs Directa o Aglutinacin Directa Positiva). Por tal razn, los G.R. no pueden ser analizados con exactitud para el antgeno D.

PRESENTACION Cd. 367010: Hemoclasifi cador Anti D (R ho): Frasco x 10 ml. Cd. 367005: Hemoclasificador Anti D (Rho): Frasco x 5 ml. BIBLIOGRAFIA 1. T echnical Manual of the American Association of Blood Banks. 8 th ed. 1981: Chapter 9.

INTERPRETACION DE LOS RESUL TADOS Tubos con Anti- D (Rho) + + ALBUMINA + RESULTADOS Rh POSITIVO Rh NEGATIVO Prueba no vlida para D dbiles (NOTA 5)

INDICACIONES AL CONSUMIDOR Garanta de Calidad del Producto GT laboratorio elabora y comercializa productos para Diagnstico de uso IN VITRO habiendo certificado Normas de Buenas Prcticas de Fabricacin ( O.M.S / W.H.O. Technical Report Series 908 / 2003, C.E.E. Resolucin 91 / 536 y A.N.M.A.T. Disposicin 3623 / 1997; ISO 9001 / 2008 e ISO 13485 : 2003. Los trminos y condiciones de calidad son absolutos dentro de la competencia de responsabilidades que correspondan a GT lab.
INFORMACION PARA CONTACTARSE e-mail: infoprofesional@gtlab.com.ar Producto Aprobado por MS y AS Certificado N 3567 Dir. T Daniel Gazzola. Bioqumico ec: Elaborado por: GT Laboratorio s.r.l. Industria y Tecnologa Argentina. Cdigo y fecha de revisin: 36790000/10

NOTAS 1. La aglutinacin es habitualmente visible macroscpicamente con una intensidad de (++) a (+++). 2. A temperatura de 37- 40 C, aumenta la sensibilidad en reacciones dbiles. 3. La fuerza centrfuga aplicada en este proceso debe ser bien controlada. Un exceso de centrifugacin puede formar un botn demasiado adherido al fondo del tubo, que al tratar de resuspenderlo vigorosamente, disperse reacciones de aglutinacin dbiles. Una centrifugacin por defecto puede dar reacciones falsamente negativas. 4. Actualmente, el uso de reactivos monoclonales ha permitido reconocer G.R. que podran tener todos los epitopes del antgeno D pero cuantitativamente en ms baja densidad, de aquellos G.R. con epitopes cualitativamente diferente (variantes de D) y que se denominan D par-