Riscul contaminarii porumbului cu aflatoxine

Aflatoxinele contamineaza porumbul n timpul vegetatiei

-aflatoxinele sunt cei mai periculosi contaminanti biologici - actiunea oncogena este sinergica cu a altor oncoinductori!

Ciclul de viata al ciupercilor toxigene din grupul Aspergillus section flavi

Vnt si insecte Supravetuire ca scleroti (3 ani) si Conidii (1 an) n sol si n resturile vegetale

t n v

e ct se in

A. flavus
matase

Boabe infectate

Temperatura Umiditate

miceliu

scleroti

suprafata sol

boabe

stiuleti

resturi vegetale

Principalele specii producatoare de aflatoxine

Aspergillus parasiticus

Aspergillus nomius Aspergillus flavus

Factorii care favorizeaza contaminare porumbului cu aflatoxine produse de ciupercile toxigene din grupul Aspergillus section flavi

1. Infectia
Are loc prin matasa galben/ bruna = germinare si colonizare Favorizata de temperaturile ridicate si de umiditate redusa a solului (avantaj competitiv pentru ciupercile toxigene din grupul Aspergillus section flavi; cresterea numarului de spori n aer)

2. Colonizarea Favorizata de atacul de insecte

Distrugerea barierelor fizice faciliteaza raspndirea infectiei pe stiulete Distrugerea pericarpului favorizeaza infectia intriorului boabelor Descresterea umiditatii boabelor <35% A. flavus avantaj competitiv fata de alte ciuperci microscopice(e.g. Fusarium spp.)

3. Producerea de aflatoxine
Temperaturi ridicate Precipitatii reduse stress hidric al plantelor Alte factori limitativi ai plantelor cu boabe n curs de formare Prolina, factor semnal de stress n plantele de porumb induce sinteza aflatoxinelor n tulpinile toxigene

Identificare
1. Aspergillus flavus

Ciuperci care produc spori verde maslina

Modelarea contaminarii porumbului cu aflatoxine

Schimbarile climatice si riscul Schimbarile climatice si riscul contaminarii porumbului cu contaminarii porumbului cu aflatoxine n timpul vegetatiei aflatoxine n timpul vegetatiei

viru

le nt a ciu pe r cilo r

Parametrii modelarii

tu as lpin pe a rg d e ilii d in ul or l sf so fo um i s o dita lu t e lu a i

ai i me ma r ul ui noc

ra tu ra i pe lu m lu te so

Tulpina de Aspergillus flavus

Aspergiiile aflatoxigene sunt specii cu n multire exclusiv asexuata Toate populatiile sunt monoclonale Exista tulpini atoxigene (scleroti mici) si nalt toxigene (scleroti mari) Analiza geostatisitica

Click to edit Master title style

Interpolarea probabilistica de tip kriging estimeaz valorile necunoscute folosind o combina ie linear a probelor disponibile:

Eroarea de estimare i (ri) este diferen a dintre valoarea estimata si valoarea efectiv determiant pentru acea lo

Valoarea medie a erorilor unui set de estimate k este:

Eroare variantei este:

% izolate

Lumina solara ATMOSFERA

Caldura radianta este captata de CO2 si de alte GHG

Tab. 1 Poten ialul de nclzire global a diferitelor gaze cu efect de ser

Gaze cu efect de ser CO2 (dioxid de carbon) CH4 (metan) N2O (protoxid de azot) HXC-uri (hidrohalogenocarburi) PFC-uri (perfluorocarburi) SF6

GWP pentru 100 de ani 1 21 310 140-11700 6500-9200 23900

Fotografii NASA care arata extinderea minima a calotei artice n 1979 (stnga) si n 2003. Datele indica o reducere cu 3% a extinderii calotei artice.

Experimente cu porumb n atmosfera mbogatita cu CO2

CO2 Productie (ton/ha) 9.4 11.8

370ppm 550ppm

Uribelarrea et al., 2003

370ppm

550ppm

PROJECT TO INTERCOMPARE REGIONAL CLIMATE SIMULATIONS

t ext

[CO2]

Schimbari climatice
Efecte primare

Precipitatii Intensitate Volum Taer and Tsol Schimbari ale calitatii luminii Cresterea concentratiei de CO2

Parametrii agroclimatici

Ap = incidenta infectiei cu fungi potential toxigeni a porumbului (procente) Ab = severitatea contaminarii cu aflatoxina B1 (ng/g) Amt = media temperaturii minime din august Imu = media umiditatii maxime din iulie S32t = numarul saptamnilor din t impul perioadei de vegetatie n care media temperaturii maxime saptamnale a depasit 32C Imt = media temperaturii maxime din iulie Imu = media umiditatii minime din iulie S90u = numarul de saptamni din t impul perioadei de vegetatie n care media saptamnala a umiditatii maxime a depasit 90% D1 = variabila compensatorie indicnd localitatile cu 0 - 5 saptamni n care temperatura saptamnala maxima a depasit 32C D2 = variabila compensatorie indicnd localitatea cu 11 - 15 saptamni n care temperatura saptamnala maxima a depasit 32C C = constanta functiei lineare S95u = numarul de saptamni din t impul perioadei de vegetatie n care media saptamnala a umiditatii maxime a depasit 90% S38t = numarul de saptamni din timpul perioadei de vegetatie n care media saptamnala a temperaturii maxime a depasit 38C S21t = numarul de saptamni din timpul perioadei de vegetatie n care media saptamnala a temperaturii minime a depas it 21C S55u = numarul de saptamni din t impul perioadei de vegetatie n care media saptamnala a umiditatii minime a depas it 55 %

Dreapta de regresie (determinata prin metoda celor mai mici patrate) care stabileste corelatia dintre incidenta infectiei cu ciuperci potential toxigene si parametrii agrometeorologici
Variabila independenta Coeficient estimat Eroarea standard Coeficient T

Ecuatia 1: Ap = f (A mt . IMu . D1 . D2 . S32t) r2 = 0,8896 C Amt IMu D1 D2 S32t - 272,312 - 21,495 6,828 37,232 - 93,496 20,502 154,2 5,7 2,1 22,9 25,1 4,4 - 1,77 - 3,79 3,26 1,63 - 3,72 4,66

Ecuatia curbei de regresie (determinata prin metoda celor mai mici patrate) care stabileste corelatia dintre severitatea contaminarii cu aflatoxine n timpul vegetatiei - exprimata prin continutul de aflatoxine la recoltare (ng/g) si parametrii agrometeorologici
Variabila independenta Coeficient estimat Eroarea standard Coeficient T

Ecuatia 3: Ab = f (IMt . Amt . IMu . Imu . D1 . S90u) r2 = 0,8198 C IMt Amt IMu Imu D1 S90u 54,659 17,409 - 61,635 13,864 - 14,597 - 70,318 14,439 1077,7 16,9 16,7 8,3 6,1 66,1 7,2 0,51 1,03 - 3,69 1,55 - 2,39 - 1,06 1,99

Obsah vody v pde [cm] Continutul de apa 10 11 12 3 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016 2017 2018 2019 2020 2021 2022 2023 2024 2025 4 5 6 7 8 9 Jn, pdna vrstva 0-30 cm Iunie, strat sol GISS98 Masurat MERAN Linear (CCCM2000) CCCM2000 Linear (GISS98)

Obsah vody v pde [cm] Continut de apa

10 11 12 3 4 5 6 7 8 9 Jl, pdna vrstva 0-30 cm Iulie, strat sol

1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016 2017 2018 2019 2020 2021 2022 2023 2024 2025

GISS98 MERAN Masurat Linear (CCCM2000) CCCM2000 Linear (GISS98)

Continut apa v pde [cm] Obsah vody sol

10 11 12 3 4 5 6 7 8 9

strat vrstva 0-30 cm August, pdnasol

1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016 2017 2018 2019 2020 2021 2022 2023 2024 2025

GISS98 MERAN Masurat Linear (CCCM2000) CCCM2000 Linear (GISS98)

Obsah vody apa Continut de v pde [cm]

10 11
Septembrie strat sol September, pdna vrstva 0-30 cm 12

1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016 2017 2018 2019 2020 2021 2022 2023 2024 2025

GISS98 Masurat MERAN Linear (CCCM2000) CCCM2000 Linear (GISS98)

t ext

[CO2]

Fosfor
Preluare Eroziune Spalare Levigare Mineralizare Precipitare Adsorptie Complexare

t ext

Component

Input t

Pierdere

[CO2]
Recoltare Resturi animale Depuneri atmosferice Ingrasaminte minerale Resturi vegetale

Fosfor organic Microbian Resturi vegetale Humus

Mi ne

Im
r al i za

D ez ag

Preluare plante
ob i li z ar e

Minerale primare (apatite)

ti e
tio n

Spalare si eroziune Minerale de suprafata (argile, oxizi de Fe si Al, carbonati)

re

ga r

orb Ads

re

Levigare (amplificare)

Solutia solului fosfor HPO4-2 H2 PO4-1

o rp D es

Dizolvare Precipitare

Compusi secundari
(CaP, FeP, MnP, AlP)

Marirea riscului de contaminare a porumbului cu aflatoxine cu aprox.12%

Pierderi semnificative
Peste 10% din porumbul Romniei va fi contaminat cu aflatoxine peste limita maxima admisibila

Divergentele dintre agricultura Romniei si agricultura tarilor UE

Agricultura Romniei: -Etapa extensiva / preintensiva; -Obiective legate de asigurarea securitatii alimentare -Conditii climatice temperat continentale Agricultura tarilor UE: -Etapa postintensiva / postindustriala - Obiective legate de asigurarea sigurantei alimentului de la furca la furculita - Conditii climatice temperat oceanice

80

70

60

50

40

30

20

precipitatii temp. max. nflorit aflatoxine totale

10

0 UE Romnia SUA aflatoxina B1

Utilizarea porumbului contaminat cu afaltoxine pentru industrializare producerea de bioetanol, biocombustibil cu utilizare tot mai extinsa

Produsele tehnologiei de macinare uscata

Fiecare kg de porumb produce PRODUSE CANTIT. APROX. 0.32 kg 0.28 kg 0.30 kg

ETANOL BIOXID DE CARBON CO-PRODUSE

Amidon

Etanol

Proteina

O treime din bobul de porumb se transforma prin procesarea n etanol n co-produse solubile de distilerie

Bioxid de carbon

co-produse solubile de distilerie (CPSD)

Co-produsele solubile de distilerie sunt utilizate de obicei ca furaje

 In co-produsele solubile rezultate de la procesarea porumbului contaminat cu aflatoxine n etanol se regaseste peste 50% din ncarcatura initiala de micotoxine

Substrat Porumb: Amidon

Fermentare
Amilaze Drojdii

Produs

Glucoza

Etanol

Glucoza Porumb Amilaze infectat: Amidon aflatoxine

Amoniac Amoniac

Produsi de degrare ai aflatoxinelor

Drojdii

Etanol

Procedeu biotehnologic de conversie concomitenta a porumbului contaminat n bioetanol i biopreparate de uz agricol

Testarea antagonismului unor drojdii fata de fitopatogeni

Tulpini de:
Saccharomyces cerevisiae (L30) Metschnikowia pulcherrima (L28, L29) Saccharomyces boulardii (L31)

Antagonismul drojdiilor fata de ciupercile t fitopatogene

A fost evidentiata o tulpina de Saccharomyces cerevisiae (L30) care a manifestat o ac iune de inhibare fa de Aspergillus flavus izolat de pe boabe de porumb;

Porumb

Amidon

Glucoza

Influenta aflatoxinelor asupra hidrolizei enizmatice a amidonului din porumb

Solubilizarea amidonului (alfa-amilaza termostabila) Zaharificarea amidonului solubilizat (glucoamilaza)

10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 0 15 30 45 60 75 90 10 5 120 135
0 20 40 80

% grupari reducatoare

min

Influenta aflatoxinelor asupra fermentatiei alcoolice

2 ADP+ 2 2 ATP Glicoliza

2 CO2 eliberati

2 NAD+ Glucoza 2 acid piruvic + 2 H+

2 NAD+ 2 Alcool etilic

Fermentatia alcoolica

16
0

14 12 conc. alcool (%) 10 8 6 4 2 0 0

20 40 80

12

24 ore

36

48

60

Fabricarea concomitenta de bioetanol si biopreparate din porumb contaminat cu aflatoxine

Apa Alfa-amilaza termostabila
Liquefaction

Glucoamilaza
Saccharification

Drojdie

Distilare alcool

Fermentation Distillation

Solubilizare amidon

Zaharificare amidon

Fermentatie alcoolica

porumb contaminat

macinare

coproduse

Distilare

biopreparat

Co-produsele solubile ale procesarii proumbului n bioetanol pe calea macinarii uscate porumbului biopreparate pentru combaterea fitopatogenilor

Porumb contamin at cu aflatoxine

macinare macinis

alfa-amilaza bacteriana solubilizare amidon

plam ada

glucoamilaza fungica zaharificare

plamada zaharificata

amelioratori de sol

drojide antagonista fermentare

biomasa de drojdii antagoniste

conditionare

alcool etilic

distila re

Bioetanol

Experimentari ulterioare

Fermentator
control

pompa

Laborator

Statie pilot

Scara industriala

Valorificarea superioara a bioetanolului din porumb contaminat cu aflatoxine

Reducere impact bioxid de carbon

Producerea de amestec motorina etanol

Beneficii
Re zultate reprezentative
EPA/CARB No.2 Diesel vs. No.2 O2Diesel (7.7vol% etanol)

CO 2028%

NO x 2-6%

PM 34-46%

BHP -1/+2%

Matricea de testare
Cod produs Aditiv Comb. cert. 7.7% Mix 10% Mix 15% Mix

6081H 6081H 6081H 6081H 6068H 6068H 6068H 6068H 6125H 6125H 6125H 6125H

Nu A B C Nu A B C Nu A B C

X X X X X X X X X X X X