SARS

Prof. Dr. José Raúl Oubiña

Dto. Microbiología
Ciclo lectivo 2004 www.mancia.com.ar
El inicio de una enfermedad
emergente
A FINES DE 2002
Provincia de Hong Kong
Guangdong ENFERMEDAD
China RESPIRATORIA Vietnam
FEBRIL SEVERA
Canadá

SARS
Severe Acute Respiratory Syndrome
MARZO 2003
Enfermedad

P. Incubación:. Habitualmente 2-7 (hasta 10) días

Síntomas (ordenados según frecuencia)
•Fiebre (mayor de 38ºC)
•Tos
•Mialgia
•Disnea
•Diarrea
SARS: laboratorio
•Leucopenia con linfopenia
•Trombocitopenia
•Aumento de TGP y TGO
•Aumento de LDH y CPK
•Proteína C reactiva: positividad asociada a casos
fatales
Detección del coronavirus (Co-V) asociado a
SARS (implicancias en la transmisión)

•Pulmón
•Tráquea
•Intestino delgado
•Riñón
•Glándulas sudoríparas
 POSTULADOS DE HENLE - KOCH

1.- El agente en cuestión puede ser cultivado (aislado)

a partir de las lesiones de la enfermedad
2.- El microorganismo puede crecer en medio puro de
cultivo
3.- Los microorganismos producen la enfermedad
cuando se los introduce en un huésped apropiado
4.- El microorganismo puede ser re-cultivado (aislado)
a partir de lesiones de del dicho huésped enfermo.
¿Qué buscar? ¿Dónde buscar?

PACIENTE CON SARS

¿Cómo buscar? ¿Cuándo buscar?

 ¿Qué buscar?

PATÓGENOS DEL TRACTO RESPIRATORIO BAJO:

BACTERIAS, CLAMIDIAS, RICKETTSIAS
y VIRUS (algunos ejemplos)
• Orthomyxoiviridae (Influenza)
• Mastadenoviridae (Adenovirus)
• Herpetoviridae
• Picornaviridae
• Bunyaviridae (Hantavirus)
• Arenaviridae
• Paramyxoviridae (Metapneumovirus)
 ¿Dónde
buscar?

SANGRE y SUERO
MATERIAL DE HISOPADO NASOFARÍNGEO
MATERIAL DE HISOPADO O LAVADO OROFARÍNGEO
TEJIDO DE ÓRGANOS DE AUTOPSIA
HECES (?)
 ¿Cómo buscar?
INOCULACIÓN EN :
CULTIVOS CELULARES
ANIMALES DE LABORATORIO (Primates
y –recientemente- ratones Balb por vía intra
nasal y oral
Emerging Infetious Diseases, 2004)

INFECTIVIDAD
Monocapa de células Vero
E6 infectada con la muestra
de un paciente con SARS:

A- Efecto citopático

B- Inmunofluorescencia
indirecta realizada con suero de
convalecientes
 Características
ultraestructurales del
coronavirus asociado al
SARS:

A- Partícula brotando del

RER y partícula envuelta

B- Tinción negativa de una

particula viral completa con
características morfológicas
de la familia Coronaviridae
Esquema de la partícula de Co-V asociado al SARS
 Características
ultraestructurales de una
célula infectada con
coronavirus en fluído de
lavado bronquioalveolar de
un paciente con SARS

Partículas virales intra y

extracelulares de 80 a 140 nm
 Detección genómica del Co-V asociado al SARS

RT-PCR
con cebadores
que hibridan en
regiones
conservadas del
gen de la
polimerasa de
otros
Coronavirus
humanos
conocidos se
pudo detectar el
RNA de un
nuevo virus
 RT-PCR

DIAGNÓSTICO TEMPLADO DE
EN MUESTRAS DE DNA para
PACIENTES CON SECUENCIACIÓN
SARS NUCLEOTIDICA
 Comparación del
Coronavirus
asociado al SARS
con otros
coronavirus:
humanos (HCoV-229E y
HCoV- OC43),
caninos, felinos,
porcinos, bovinos,
aviares, murinos y de
rata.
SUERO DE CONVALECIENTE
DE SARS - Ac
POS

EXTRACTO DE
ANTICUERPOS NEG CÉLULAS VERO E6
MONOCLONALES ELISA INOCULADAS
CONTRA DIFERENTES CON MUESTRA
VIRUS - Ac DE PACIENTE
CON SARS

NEG Ag

SUERO DE DONANTE DE
SANGRE - Ac
Histopalogía del pulmón
de un paciente con SARS:
A- Daño alveolar, infiltrado
inflamatorio, membrana
hialina
B- Células sinciciales
multinucleadas sin inclusiones
virales

Inmunohistoquímica
sobre células Vero E6
infectadas con
Coronavirus asociado al
SARS, tinción en
membrana y citoplasma
 ¿Cuándo buscar?

¿Qué buscar?

AGENTE RESPUESTA INMUNE

MÉTODO MÉTODO
DIRECTO INDIRECTO
SARS: el inicio de una virosis emergente

Lancet 361: 17879-85, 2003.

 Existencia de al menos 2 Genogrupos del
Coronavirus asociado al SARS

Las secuencias nucleotídicas de las

cepas de Beijing (BJ; China) y
Hong Kong (HK) se agrupan
separadamente de las de Toronto (TOR)
Singapur (Sing) y la prototipo
URBANI.
Epidemiología (I)

Diseminación por microgotas y posiblemente aerosoles

provenientes de individuos infectados.
En el primer semestre de 2003 hubo:
8422 casos
908 muertes
29 países afectados
Se desconoce el reservorio, aunque se encontraron
coronavirus similares al agente etiológico del SARS en
humanos, en civetas (palm civets) y perros mapaches
(raccoon dogs).
Civeta
 Racoon dog (perro mapache)

調査分析 データ解析
•分布調査 •個体群解析
•個体数調査 •行動圏解析
•生息環境調査 •生息環境解析
•食性調査 •ＧＩＳを用いた各種解析
•ラジオテレメトリー調査
野生動物管理に関わるｺﾝｻﾙﾃｨﾝｸﾞ
•標識装着のための生体捕獲
•狩猟・駆除個体分析 普及活動
•年齢査定
•パンフレット作成
•繁殖状況調査
•博物館等企画・展示
•遺伝分析
•講演
•被害調査
•被害防除試験
•調査・解析手法の開発
Epidemiología (II)

Co-V SARS en suspensión: viable hasta 9 días

(vs 6 del HCoV 229E)
Co-V SARS desecado: viable hasta 6 días
(vs 1 día del HCoV 229E)
 Epidemiología (III) Medidas de precaución

• Un estudio de caso-control realizado en 5 hospitales de Hong

Kong incluyó 241 miembros del staff no infectado y 13 infectados,
todos los cuales tuvieron una exposición documentada a 11
pacientes índice con SARS. Se monitoreó en todos los participantes
la utilidad del uso de máscara, guantes, camisolín y lavado frecuente
de manos.

• Los 69 miembros del staff que reportaron la observancia de las 4

medidas no se infectaron, mientras que todo el personal infectado
reportó la omisión de al menos una medida (p= 0,0224).

Lancet, 2003
 SARS 2004: vacunas en
experimentación

•Vacuna inactivada con beta propiolactona (induce Acs. en

ratones).

•Vacuna a DNA con calreticulina (aumenta expresión de

HLA-I) y proteína N de SARS.
•Vacuna a DNA codificante de proteína de espícula de CoV –
asociado al SARS (induce Acs e Inmunidad celular en ratones).
•Vacuna de Parainfluenza atenuada heteróloga y quimérica
(Bovine Parainfluenza Virus 3) conteniendo espícula de Co-V
asociado al SARS (en monos, inhibe diseminación del Co-V SARS).
 SARS 2004: Tratamiento para el Co-V
asociado al SARS

•No hay aún consenso.

•Parecerían promisorios los ensayos iniciales con:

Interferón alfa PEG (en primates Cynomolgus)
Nelfinavir (inhibidor de proteasa para HIV; in vitro)
siRNA (small interferring RNA; in vitro)
Estudios de patogénesis experimental

Ratones Balb infectados por vía intranasal y oral con

CoV-asociado al SARS
Desarrollan menor ganancia de peso, se detecta en
ellos RNA viral y anticuerpos específicos.
Utilidad para estudios de: profilaxis
terapéutica
(Emerging Infectious Diseases Julio 2004)