Tcnica Para El Virus De Inmunodeficiencia Humana

Introduccin La investigacin de anticuerpos especficos frente al VIH-1 es la metodologa ms ampliamente utilizada para detectar a las personas infectadas por este virus. Aunque la muestra que se puede analizar puede ser de diferente naturaleza, en la actualidad lo ms frecuente es el empleo del suero o del plasma obtenido de una extraccin sangunea del sujeto; pero tambin pueden emplearse diferentes lquidos orgnicos, especialmente orina y saliva, con los que tambin pueden realizarse pruebas confirmatorias, y que pueden ser tiles en cribados de amplios grupos poblacionales, en los sujetos que no desean someterse a una extraccin de sangre, adems de que no suponen un riesgo adicional para el sujeto que realiza la extraccin (puncin accidental).

Campo de aplicacin El campo de aplicacion de este estudio es para aquellas personas que quieran saber si poseen este tipo de enfermedad(VIH). Metodologa Materiales Equipo Goteros calibrados Partculas sensibilizadas Mircoplaca en forma de U Partculas sensibilizadas Dilutor Agitador vibrador Visor de placas Mtodo 1. Prueba cualitativa 1) Coloque 3 gotas de diluyente de suero en pocillo 1, y una gota en los pocillos 2, 3 y 4 con un gotero calibrado. 2) Con una micropipeta , agregue 25 ul de la muestra en el pocillo 1. Mezcle los contenidos del pocillo 1 llenado y descargando la micropipeta 6 o 7 veces. Despus, transfiera 25 ul de la solucin diluida del pocillo 1 al pocillo 2 con la micropipeta. Repita la operacin de transferencia-mezcla para los pocillos 2, 3 y 4 para obtener una serie de soluciones en duplicado. Finalmente, mezcle los contenidos del pocillo 4 y deseche 25 ul de la solucin remanente en la pipeta. Reactivos Diluyente del suero Solucin de no constitucin Control positivo

3) Coloque 1 gota de partculas no sensibilizadas en el pocillo 2, 1 gota de partculas sensibilizadas HIV-1 en el pocillo 3 y 1 gota de partculas sensibilizadas HIV-2 en el pocillo 4 con el gotero suministrado con el equipo. 4) Mezcle bien los contenidos de los pocillos con un agitados vibrador. Si no tiene un agitador vibrador disponible, el procedimiento puede realizarse manualmente, golpeteando los 4 bordes de la microplaca varias veces para mezclar bien. Luego, cubra la placa y djela en reposo a temperatura ambiente durante 2 horas antes de la lectura. 2. Prueba de control positivo 1) Confirme que la reaccin de cada muestra con las partculas no sensibilizadas sea negativa. 2) Confirme que la reaccin del diluyente de suero con las partculas sensibilizadas y las no sensibilizadas sea negativa en todos los ensayos (control reactivo). 3) Confirme que el titulo del control positivo sea 1:128+- 1 duplicando la dilucin (en la dilucin final) para las partculas sensibilizadas HIV-1, y 1:256 +- 1 duplicando la dilucin (en la dilucin final) para las partculas sensibilizadas HIV-2 en cada equipo de ensayo.

Resultados Partculas concentradas en forma de botn en el centro del pocillo con un contorno externo redondeado y liso. Partculas concentradas en forma de anillo compacto con un contorno externo redondeado y liso. Anillo grande bien definido, con un contorno irregular y aglutinacin perifrica. Partculas firmemente aglutinadas extendidas cubriendo uniformemente el fondo del pocillo.

Interpretacin de los resultados Los diferentes resultados se pueden interpretar como: Negativa No concluyente Positiva

Medidas de seguridad 1) Las muestras estn potencialmente infectadas por HBV, HIV u otros microorganismos peligrosos y deben manipularse con mucho cuidado. 2) Todos los equipamientos y accesorios utilizados, soluciones residuales, deben descontaminarse con solucin de hipoclorito de sodio. 3) A pesar de que el antgeno viral sensibilizado con las partculas no es infeccioso, se debe tratar cuidadosamente, como el virus HB. 4) Este equipo contiene azida sdica como antisptico para los reactivos. Los residuos desechados en el drenaje deben lavarse con una gran cantidad de agua, como medida de seguridad. Validez de la prueba

PELONCHAS FALTA ESTO WE!!!!

Bibliografa http://www.ctv.es/USERS/fpardo/vih4.htm