IMPLEMENTACIN DE METODOLOGAS ANALTICAS PARA DETERMINAR EL NIVEL DE DEGRADACIN DE LA CELULOSA EN SOPORTE PAPEL POR PROCESOS DE OXIDO REDUCCIN O HIDRLISIS.

DETERMINACIN DE GLUCOSA POR EL MTODO DNS La determinacin de la degradacin de la celulosa en soporte papel se realizo por el mtodo del cido 3,5-dinitrosalicilico (DNS), el cual se basa en la reduccin del DNS (de color amarillo) por la glucosa al cido 3- amino-5-dinitrosalicilico de color rojo previo calentamiento durante 10 minutos a 100 OC, cuya presencia se detecto por la lectura de la absorbancia en un espectrofotmetro determinada a travs de un barrido con una solucin patrn de glucosa de 10 mM (mg/ml) a diferentes longitudes de onda y empleando agua como blanco. Luego se prepararon soluciones patrn de glucosa de diferentes concentraciones en un rango de 0 hasta 40mM con el objeto de obtener la curva de calibracin y as determinar con esta curva los miliequivalentes de glucosa formados por la degradacin del soporte papel. Se determino el error fotomtrico del instrumento haciendo lecturas con una solucin La curva de calibracin del mtodo, se prepararon soluciones de glucosa de diferentes concentraciones a partir de una solucin patrn de 40 mM (mg/ml) y se aforo a un volumen de 50 ml con agua destilada, tal como se indica en la tabla 1. Tabla 1. Preparacin de soluciones de glucosa concentraciones a partir de una solucin patrn 40 mM Tubo Blanco 1 2 3 4 5 6 7 Concentracin mM de glucosa 0 2 4 6 8 10 20 40 Agua ml 50 47,5 45 42,5 40 37,5 25 0 de diferentes

destilada Glucosa 40 mM (ml) 0 2,5 5 7,5 10 12,5 25 50

CONCLUSIONES Y DISCUSIN DE RESULTADOS - Determinacin de la longitud de onda de absorcin del producto de reduccin del DNS.

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La longitud de onda de absorcin del producto obtenido de la reduccin de la glucosa con el DNS se realizo desde una longitud de onda de 500 a 700 nm. La Longitud de onda de mayor absorcin del producto fue obtenida por interpolacin de la curva obtenida del espectro de absorcin del complejo, que dio como resultado 570 nm. Esta longitud de onda es la empleada para la lectura de las dems soluciones patrn de glucosa a diferentes concentraciones.

Curva de calibracin para patrones de glucosa por el mtodo de DNS. La curva de calibracin obtenida para el mtodo de cuantificacin de GLUCOSA por el mtodo de DNS, presenta una tendencia lineal donde se aplica a la Ley de Beert que representa la relacin entre la absorbancia y la concentracin del complejo obtenido por la reduccin de la glucosa con el DNS directamente proporcional. El coeficiente de correlacin de esta curva de calibracin encontrado es de 0,9972, este valor nos indica que los datos se ajustan a una lnea recta. La pendiente de la grafica relaciona el coeficiente de extincin molar la sensibilidad del mtodo analtico, se expresa en unidades de concentracin y est asociado cambio mnimo de glucosa que puede detectar el instrumento, este valor corresponde a 0,0934 mg/ml. El lmite de deteccin calculado para el mtodo es de 0,5390 mg/ml que es la concentracin mnima detectable de glucosa detectable por este mtodo y un lmite de cuantificacin mximo de glucosa de 1,7669 mg/ml.

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Posteriormente de haber sido evaluada la curva de calibracin, se construy la respectiva curva de Ringbom, obtenindose un intervalo lineal en todo el rango de concentraciones de las soluciones preparadas entre 1 a 10 mM para una longitud de onda de 570 nm, esto indica que es el intervalo optimo que se puede determinar glucosa por el mtodo de DNS.

Es necesario adaptar este mtodo en pruebas de soporte papel de tipo indsutrial y manual con y sin envejecimiento. BIBLIOGRAFA 1. Skoog, D.; West, D. Qumica Analtica. Sexta edicin. Mxico. 1995. p 68-69,78-83, 550-559. 2. Clavijo, A. Fundamentos de Qumica Analtica. Equilibrio Inico y Anlisis Qumico. Universidad Nacional de Colombia sede Bogota. Primera edicin. Bogota, 2002. p. 58-60. 3. Miller, J. J, Miller. Estadstica y Quimiometra para Qumica Analtica. Cuarta Edicin. Prentice Halll. Madrid. 2002. p 125.

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4.

Thompson M (2002). Harmonized Guidelines for Single Laboratory Validation of Methods of Analysis. Pure Appl. Chem. 74 (5): 835-855. 5. Vessman J (2001). Selectivity in analytical chemistry. Pure Appl. Chem. 73 (8): 13811386. 6. Taylor J K (1983). Validation of Analytical Methods. Anal Chem.55 (6): A601 A608. 7. Moreno R, Maas J. Mtodos y estrategias para el muestreo de contaminantes qumicos Consejo Colombiano de Seguridad, Bogota, 1989. 8. http://www.uco.es/dptos/bioquimicabiolmol/pdfs/31%20INVERTASA%20ENSAYO.pdf

ANEXO 1

PREPARACIN DE REACTIVOS
7 4 2 7

Reactivo de DNS. Acido 3,5-dinitrosaliclico (C H N O ; PM 228,1) al 0,1 % (p/v), tartrato sdico potsico [NaK(COO) (CHOH) 4H O; PM 282,23] al 30 % (p/v) en NaOH
2 2 2

(PM 40) 0,4 M. Disolver 1 g de cido 3,5-dinitrosaliclico y 300 g de tartrato sdico potsico en 200 ml de hidrxido sdico 2 M (16 g de NaOH en 200 ml de agua destilada) y diluir hasta 1000 ml con agua destilada. El reactivo debe guardarse en bote oscuro (color topacio), siendo estable durante varias semanas.

Solucin de glucosa (C H O , PM 180) 40 mM en agua destilada. Disolver 1,8 g

6 12 6

deglucosa en 250 ml de agua destilada. La solucin, cuando no se est utilizando, se guardar en fro.

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