Efecto de la Insulina en el msculo El msculo en condiciones de reposo no depende de glucosa para obtener energa, sino de los cidos grasos.

Sin embargo existen dos situaciones en las cuales el msculo utiliza grandes cantidades de glucosa. Una de ellas es el ejercicio moderado o intenso, en donde las fibras musculares se hacen naturalmente permeables a la glucosa incluso en ausencia de Insulina, la segunda es a las pocas horas de una gran ingesta de hidratos de carbono, donde la concentracin de Insulina es suficientemente elevada para producir un rpido ingreso de glucosa al miocito. Si el msculo no se est ejercitando y este se encuentra bajo la accin de la Insulina , sta produce el almacenamiento de glucosa como glucogeno que es especialmente til para perodos cortos de gran consumo de energa. En sntesis podemos decir que, los efectos de la Insulina sobre el msculo son la captacin de glucosa en altas concentraciones y su almacenamiento como glucogeno. Mecanismo de Accin El primer paso de todas las acciones de la Insulina es su unin al receptor. ste es una glucoprotena formada por dos unidades simtricas unidas por un puente bisulfuro. Cada unidad est constituida por una subunidad a que se extiende hacia el espacio extracelular y una subunidad transmembrana que termina por un segmento intracelular con capacidad intrnseca de Tirosinquinasa. La Insulina se une a la subunidad a y activa al receptor; es la activacin de ste el que produce los efectos y no la Insulina. Tras la unin al receptor tienen lugar los siguientes sucesos: (Fig. 5) La estimulacin de la actividad tirosinquinasa intrnseca del receptor resulta en el aumento de la fosforilacin de la tirosina, tanto del propio receptor como de molculas de sealizacin. Este aumento en la fosfotirosina estimula la actividad de muchas molculas intracelulares tales como: GTPasa, Proteinquinasa y Lipidoquinasa, las cuales tienen la funcin de desempear ciertas acciones metablicas de la insulina. Existen dos vas de sealizacin actualmente descriptas. La activacin de la Lipidoquinasa y la IP 3quinasa generan nuevos lpidos de inositol que actan como segundos mensajeros. La activacin de la GTPasa y la protena RAS , estimula una cascada de proteinaquinasa que activan isoformas de la MAPquinasa (protena importante en la regulacin de la proliferacin y la diferenciacin celular). Podemos generalizar que: La Insulina es una hormona hipoglucemiante Promueve la captacin de la glucosa en todas las clulas del organismo, excepto: las c lulas del encfalo que son normalmente permeables a la glucosa y son capaces de utilizarla en ausencia de la insulina. Induce el almacenamiento de glucosa en forma de glucogeno en las fibras musculares y en el hepatocito. Estimula un externalizacin de un sistema especifico de transporte de glucosa hacia la membrana plasmtica de las clulas dianas, el GLUT4, que facilita la difusin de glucosa al citosol de los adipositos y miocitos.

REGULACIN DE LA GLUCOGENOLISIS MUSCULAR

El glucgeno del msculo esqueltico tiene como finalidad suministrar glucosa para que sea degradada oxidativamente y se pueda obtener ATP para la actividad muscular.

1) REGULACIN COVALENTE

POR

MODIFICACIN

Consiste en modificar la actividad de la glucgeno fosforilasa mediante fosforilacin: la fosforilasa B (poco activa) no est fosforilada, mientras que la fosforilasa A (muy activa) se encuentra FOSFORILADA. Esta regulacin est sometida a control hormonal.

ACTIVACIN POR FOSFORILACIN

Cuando se precisa realizar trabajo muscular, el SNC estimula la mdula adrenal, que segrega ADRENALINA. El segundo mensajero (celular) de la accin hormonal es el AMP CCLICO (cAMP), que es sintetizado por la adenilato ciclasa. La activacin (=fosforilacin) de la glucgeno fosforilasa se lleva a cabo mediante una serie de reacciones en cascada, que son: Unin adrenalina-receptor. Activacin de la adenilato ciclasa. Activacin de la protena quinasa. Activacin de la fosforilasa quinasa. - Activacin de la glucgeno fosforilasa.

INACTIVACIN POR DESFOSFORILACIN

La desfosforilacin de las enzimas fosforiladas provoca su inactivacin. En el msculo la fosfoprotena fosfatasa-I (PP1) desfosforila las enzimas fosforiladas de la cascada metablica y, por tanto, detiene la glucogenolisis. La PP1 tiene, adems, un inhibidor especfico, el cual se une a la enzima, y la inhibe, cuando est fosforilado. La PP1 acta nicamente cuando se encuentra unida al glucgeno, a travs de su subunidad G. Cuando la cascada metablica cAMPdependiente se encuentra activada, dicha subunidad se encuentra fosforilada y no posee afinidad por la PP1. Con ello, la PP1 es inactiva. Cuando cesan el impulso del SNC y la accin hormonal, disminuye la actividad fosforilasa quinsica y el balance quinasas/fosfatasas comienza a decantarse hacia stas ltimas, y el sistema se desfosforila y se detiene la glucogenolisis.

2) REGULACIN ALOSTRICAS

POR

INTERACCIONES

La glucgeno fosforilasa posee, adems, un sistema de regulacin alostrica que responde inmediatamente a las condiciones celulares en las que existe una baja carga energtica, y que es independiente de la respuesta hormonal. El control alostrico se explica segn el modelo alostrico concertado MWC.

El msculo esqueltico juega un rol central en la regulacin del metabolismo de la glucosa de todo el cuerpo. Debido a su masa, el msculo esqueltico es el principal tejido responsable del clearence de glucosa dependiente de insulina, explicando ms del 80 % de la captacin de glucosa de todo el cuerpo. Bajo condiciones de ayuno, cuando la insulina esta baja, el msculo es responsable de menos del 10 % de la captacin de glucosa de todo en cuerpo, ya que el sistema nervioso central se vuelve el ms importante consumidor de glucosa sangunea. Sin embargo, cuando la glucosa circulante se incrementa, el msculo se vuelve cuantitativamente el tejido ms importante implicado en el metabolismo de la glucosa. A pesar de los altos niveles de captacin de glucosa que ocurren en el msculo, la concentracin intracelular de glucosa libre no cambia. Esto indica que la glucosa es rpidamente metabolizada por el msculo, y que el transporte de glucosa a travs de la membrana celular es el paso limitante de la velocidad de utilizacin de glucosa. Las rutas metablicas usadas para apoyar el metabolismo del msculo esqueltico dependen del tipo y funcin de las fibras presentes en el msculo. Por ejemplo, el msculo esqueltico blanco tiene pocas mitocondrias, se contrae muy rpido, pero puede sostener contracciones repetitivas por corto tiempo. Este tipo de msculo depende de la gluclisis como fuente principal de ATP, y la velocidad del transporte, estimulado por la insulina es baja. El msculo rojo, de otro modo, es rico en mitocondrias, deriva la mayora de sus molculas de ATP a partir del metabolismo oxidativo, y tiene una velocidad relativamente alta de captacin de glucosa, en respuesta a la insulina. El msculo en reposo contiene el equivalente de un 1 % de su peso en forma de glucgeno, y el mismo constituye una fuente significativa de ATP para la contraccin muscular, especialmente bajo condiciones anaerbicas. Sin embargo, a diferencia del hgado, el tejido muscular no es capaz de proveer de glucosa a la circulacin sangunea, debido a la ausencia de la enzima glucosa-6fosfatasa. Durante el tiempo entre la alimentacin y el ayuno de corta duracin, la glucosa sangunea permanece dentro de lmites normales debido, en parte, a la habilidad de los msculos de proveer sustratos para el hgado, el cual los puede convertir en glucosa, es decir, sustratos energticos como lactato, piruvato, y alanina. Bajo ciertas condiciones metablicas, el msculo rojo (fibras tipo I y IIA), pueden remover el lactato de la sangre y oxidarlo para la produccin de energa, mientras que el msculo blanco (fibras tipo IIB) puede tener la capacidad de sintetizar glucosa a partir del lactato. Los msculos contienen enzimas necesarias para la sntesis de glucgeno, la gluclisis y la oxidacin de la glucosa. La regulacin de enzimas metablicas en el msculo esqueltico ocurre como respuesta a cambios en la demanda de ATP, la disponibilidad de sustratos, y en repuesta a la estimulacin hormonal y neural. Los principales reguladores hormonales de la actividad enzimtica en el msculo esqueltico, son la insulina, la cual permite la captacin de glucosa y su posterior conversin a glucgeno, y la epinefrina, que estimula la produccin de AMP cclico (cAMP) y por esto activa una cascada enzimtica que conduce al catabolismo del glucgeno. La actividad enzimtica est controlada alostericamente por las concentraciones de ATP, AMP, Ca++, acetil-CoA y citrato. As, las rutas metablicas que regulan el catabolismo de los carbohidratos en el msculo esqueltico estn influenciadas por una

combinacin de factores, incluyendo la disponibilidad de sustratos, la concentracin de enzimas reguladoras y sus niveles de actividad, y el estado energtico del msculo. Resumen:
La informacin cientfica disponible acerca de la regulacin de la entrada de glucosa a la clula muscular es amplia y ha crecido exponencialmente en los ltimos aos debido a las nuevas tcnicas de estudio. Hasta hace poco tiempo, se pensaba que este mecanismo dependa exclusivamente de la insulina y su receptor en la membrana. Hoy se sabe que el ejercicio puede estimular el transporte de glucosa hacia el interior de la clula muscular por una cascada de activacin diferente que el de la insulina, y sin su presencia (durante el ejercicio y por un determinado tiempo postejercicio). Esto es sumamente importante, no slo a tener en cuenta como recurso teraputico para las personas que padecen diabetes, sino tambin para los deportistas que dependen de sus reservas de glucgeno muscular para posponer la fatiga. Qumica y clasificacin de los transportadores de glucosa: Los Gluts son una familia de protenas con una secuencia determinada, codificada por diferentes genes. Todos los Gluts tienen una estructura en comn de 12 zonas hidrfobas que permanecen en contacto con una membrana (citoplasmtica o del Sistema retculo endoplasmtico) de las clulas, mientras que las terminaciones amino en un extremo y carboxi en otro extremo son intracitoplasmticas. Se han identificado 12 Gluts. Se numeran segn su orden de descubrimiento. El primero (Glut1), se identific en 1985. Algunos se ubican en todas las clulas, mientras que otros slo en algunos tejidos u rganos. Los ms relacionados con el ejercicio son el Glut1 y Glut4. GLUT1: Se encuentra en todas las clulas . Tienen una elevada afinidad por la glucosa, aunque tambin por la galactosa. Su funcin principal sera la de mantener la glucosa basal en la clula y posibilitar la entrada de glucosa en reposo. No aumenta en el msculo con el entrenamiento, ni consumiendo carbohidratos durante y posterior al entrenamiento. Tampoco lo aumenta el ayuno. Aumentan su expresin en las hipoglucemias por lo que tratara de proteger al cerebro de las mismas (se encuentra disminuido en algunas epilepsias refractarias al tratamiento en nios con glucemias normales pero reduccin de la glucosa cerebroespinal). El glut1 y glut2 se han hallado en cerebros de fetos de 10 a 21 semanas (etapas tempranas del desarrollo) con lo que se sugiere que interviene en el desarrollo del SNC (10). La insulina estimula el Glut4 que se halla en tbulos transversos para que se dirijan a la membrana celular y as captar glucosa (2). Sin embargo, no parecera alterar la posicin o distribucin de los Glut1 ya presentes en el sarcolema. La glucosa, una vez dentro del msculo, se queda para unirse a un fosfato, y luego, depositarse como glucgeno. Otro estudio demuestra que el Glut1 aumenta tras 31 das (no antes ) de ejercicio aerbico (2 hs, al 60% del Vo2 mximo) a diferencia del Glut4 que, como veremos mas adelante, aumenta en slo 5 das (53). GLUT4: Se expresa en tejido adiposo y en el msculo (cardaco y esqueltico). Estara relacionado a la incorporacin de glucosa mediada por insulina, que afecta los tbulos transversos en la fibra muscular, pero muchos estudios prueban que existe un mecanismo no insulino dependiente, como veremos ms adelante. El Glut4 est presente en vesculas intracitoplasmticas. Ante la ingesta de alimentos se dirigen a la membrana celular donde se fusionan ,quedando expuesto al

medio extracelular y capturando la glucosa. Esto ocurre por la fosforilacin de la tirosina presente en la subunidad beta del receptor insulnico lo cual sera la seal que la insulina unida al receptor provoca para que el Glut4 capte glucosa , pero est probado que con el ejercicio la seal sera otra (47). El ejercicio aumenta la expresin de glut4 permitiendo este mecanismo de traslacin hacia la membrana celular y aumentando la captacin de glucosa an sin insulina (2). El msculo denervado tiene menor concentracin de Glut4, lo que sugiere una relacin directa del Glut4 con la actividad neuromuscular. La estimulacin elctrica de stos msculos denervados (10 Hz, 8 hs/d por 20 das) aumentan su contenido de Glut4 y tambin de la citrato sintetasa . La estimulacin por 30-40 das no aumenta ms los Glut4 pero s contina aumentando la citrato sintetasa. A los 60-90 das se encuentra el plateau de la citrato sintetasa. Esto sugiere que el Glut4 y la citrato sintetasa aumentan con la actividad neuromuscular, aunque su vida media sea diferente (17). Algunos estudios recientes demuestran que el ejercicio aumenta la transcripcin gentica del Glut4 dependiente de la concentracin de energa intracelular y la concentracin de calcio (31). Sera la disminucin en la concentracin de ATP intramuscular inducida por el ejercicio, lo que estimula el aumento de Glut4 y de la enzima Citrato sintetasa (enzima que transforma la Acetyl CoA en citrato, precursor de cidos grasos en el ciclo de Krebs). Ciertos cidos grasos no esterificados tambin inhiben a la citrato sintetasa (12). El ejercicio a travs del AMP, activado por la proten kinasa trasladara a los Glut4 a la membrana (32). La AMPK (AMP kinasa, isoforma alfa 2 ) aumenta entonces la traslocacin del Glut4 y aumenta tambin la oxidacin de cidos grasos (57). Tambin el ejercicio mejora la distribucin de las vesculas reclutndolas en la superficie celular. En la DBT tipo 2 estara fallando este mecanismo de traslocacin .No la cantidad de glut4 muscular, sino su mecanismo (la transduccin de la insulina con su receptor estara dependiente del sustrato 1-fosfatidil-inositol 3-kinasa que s estara alterado en la DMNID (26)(29). Tambin se hallaron anomalas genticas en la expresin del Glut4 del tejido adiposo, pero el ejercicio fsico modifica la proten kinasa asociada al aumento de la transcripcin del Glut4 en el tejido muscular(27). Se han hecho estudios de lo que sucede con la clula adiposa ante el ejercicio en ratas, y se lleg a la conclusin que el ejercicio aumenta la traslacin insulinodependiente del Glut4 en la clula adiposa, (aunque el tamao del adipocito disminuye por uso de su reserva de sustrato) (45). En adipositos se ha encontrado que los AGL reducen la expresin gentica del Glut4 (56). Quizs este sea el mecanismo por el cual ante la presencia de AGL , disminuye la captacin de glucosa a nivel celular (a travs de inhibir a su transportador pero por su mecanismo insulino dependiente). Un estudio demuestra que el lactato disminuye la utilizacin de la glucosa en fibras tipoI (pero no en las tipo II). Y se hall una disminucin correlativa de Glut4 RNAm. O sea que acta a nivel gnico. El lactato tambin aument la PDH (piruvato dehidrogenasa) y su RNAm tambin. O sea, que el lactato declinara la utilizacin de glucosa a travs de su transportador, sin embargo, aumenta el glucgeno muscular. No se sabe an si por accin directa sobre la hexoquinasa o por aumento de la gluconeognesis heptica (56). Algunos estados patolgicos como la diabetes y la obesidad que cursan con hiperlactacidemia crnica, podran ser una causa fisiopatolgica mas de la insulino resistencia (56). Aparentemente, el ayuno postejercicio aumenta el RNAm del Glut4, pero es la disponibilidad de glucosa la que aumenta la expresin de Glut4 en la membrana. Los dos mecanismos regularan la captacin muscular de glucosa y protegeran al msculo contra la hipoglucemia postejercicio (11)Las fibras lentas poseen una mayor respuesta de deplecin ante ejercicios aerbicos, y una mayor replecin post ejercicio. Esta

ltima respuesta se ve aumentada con la suplementacin con carbohidratos durante y post ejercicio. Y es proporcional a la concentracin de glut4 (en ambas fibras). Sin embargo, la suplementacin con carbohidratos parece disminuir el RNAm, por lo que el aumento del gut4 y del glucgeno muscular cuando se suplementa, estara determinado por un mecanismo insulino dependiente que optimiza la traslocacin del RNAm. Se deduce que el aumento de Glut4 tiene dos controles: 1)Pretraslacin (dependiente del RNAm ) que se estimula con el ejercicio, pero no con el ayuno o la suplementacin con carbohidratos sola. 2) Traslacional: la suplementacin optimiza la traslacin del Glut4 solo con el ejercicio (a pesar de disminuir el RNAm) comparado con el ejercitado en ayunas (20). Los patrones de resntesis de glucgeno muscular postejercicio tienen 2 fases. La primera fase rpida es insulino-independiente, (es la primera hora post-ejercicio) sta es seguida por una fase ms lenta insulino-dependiente. Por otro lado parecera que el aumento de glucgeno muscular, autolimita su sntesis, como un mecanismo de autorregulacin que protegera al msculo de la hipercompensacin contra niveles dainos para la misma fibra muscular. Los mecanismos ntimos an se desconocen, pues la actividad de sntesis de glucgeno disminuye (si el glucgeno muscular est aumentado), aunque aumente el Glut4 y la hexoquinasa postejercicio. Posiblemente tenga que ver con la disminucin de la sensibilidad a la insulina (6) con las molculas de proglucgeno (75%) mas utilizable y las de macroglucgeno (25%), menos utilizables y ms unidas a las vesculas de Glut4 (hiptesis de Adam, Tarnopolski,98). Y no existiran diferencias entre sexo masculino y femenino en la proporcin de pro y macroglucgeno (s en la cantidad total de glucgeno que es menor en la mujer slo por menor ingesta calrica) (54). Sin embargo recin se prob la corta vida media del glut4 con el trabajo de Helen Host, John Holloszi y col. (19) Ellos entrenaron 2 grupos, uno por 5 das y otro por 5 semanas. (6 hs por da = dos veces 3 hs separadas por 45 minutos de descanso) y los compararon con controles no entrenados. El glut4 aument un 90% (inesperadamente ms que en los trabajos anteriores), la citrato sintetasa un 23%, y la hexoquinasa un 28% en los que entrenaron por 5 das (respecto de los controles) y valores similares a los que se entren 5 semanas (aument 2,5 veces la glut4). Se midi el glut4 por anticuerpos monoclonales y luego por densitometra . Pero 40 hs post ejercicio los valores de glut4 ya eran similares a los del grupo control, tanto en los que entrenaron 5 das como 5 semanas. La hexoquinasa y la citrato sintetasa a las 40 hs an estaban aumentadas. Esto significa que la vida media del glut4 oscila de 8-10 hs, a diferencia de la vida media de la citrato sintetasa que es de 7 das. El ejercicio aumenta el glut4 por corto tiempo, y aumenta la sensibilidad a la insulina por ms tiempo, lo que aumenta el glucgeno muscular an cuando los glut4 descendieron a niveles de reposo. Esta sensibilidad se revierte proporcionalmente a la supercompensacin de glucgeno, producida al ingerir carbohidratos durante y postejercicio) por mecanismos ntimos an no muy estudiados. Conclusiones: El estmulo elctrico aumenta el glut4 La fase temprana post-ejercicio: es independiente de la insulina (aumenta el RNAm del glut4 y su sntesis) La insulina estimula glut4 especialmente en la fase tarda (5 a 24 hs postejercicio) La suplementacin con carbohidratos durante y postejercicio aumenta los niveles de glucgeno muscular (aunque disminuye el RNAm del glut4). Cuando el glucgeno muscular es muy alto, su sntesis no aumenta postejercicio

aunque aumente el Glut4 y la hexoquinasa, posiblemente por aumento de la sensibilidad a la insulina El glut4 tiene una vida media breve (importante la ejercitacin diaria para DBT II) El ejercicio reduce la posibilidad de desarrollar DBT II (39) La creatina ayuda a que el Glut4 no disminuya a causa de una inmovilizacin y se recupere mas rpidamente el glucgeno muscular tras 3 semanas de rehabilitacin.