Dados para homologao de Tese

Autor: rica Soares Martins Ttulo da Tese: Estudo da atividade de protenas Cry, derivadas De Bacillus thuringiensis ativas para insetos-praga do algodoeiro Nome do Curso: Ps graduao em Biologia Molecular Data da defesa: 17/07/2009 Nome do Orientador: Bergmann Morais Ribeiro Palavras-chaves: Bacillus thuringiensis, protenas Cry, genes cry, Anthonomus grandis, Spodoptera frugiperda e algodo. Key-words: Bacillus thuringiensis, Cry proteins, cry genes, Anthonomus grandis, Spodoptera frugiperda and cotton.

RESUMO

Toxinas Cry de Bacillus thuringiensis (Bt) so protenas inseticidas utilizadas para controle de insetos. Elas agem por ingesto e so ativadas por proteases e interagem com receptores especficos localizados na superfcie da clula hospedeira, resultando na lise de clulas do intestino mdio. Este trabalho est dividido em quatro captulos. No primeiro, foi feita uma reviso sobre Bacillus, ecologia e modo de ao, e insetos-praga do algodo. O segundo captulo descreve a seleo e o estudo do contedo de genes cry de estirpes de B. thuringiensis com atividade para Anthonomus grandis. O terceiro captulo descreve a clonagem, sequenciamento e expresso da toxina Cry1Ba da estirpe S601 de B thuringiensis, que txica para A. grandis. A ligao da toxina Cry1Ba6 a protenas localizadas na borda escovada de clulas do intestino mdio de A. grandis foi analisada e descobriu-se que a protena Cry1Ba6 se liga a duas protenas (62 e 65 kDa) com atividade de fosfatase alcalina (ALP). Este trabalho o primeiro relato da localizao de receptores de toxina Cry em clulas do intestino mdio de A. grandis. Finalmente, o captulo quatro mostra como outras toxinas (Cry1Ia e Cry10A) expressas em Bt, com atividade j descrita para A. grandis interagem com BBMVs de A. grandis e S. frugiperda.

ABSTRACT

Cry toxins from Bacillus thuringiensis (Bt) are isecticidal proteins used for insect control. They actin by ingetion and are activated by host proteases and interact with specific receptors located on the host cell surface, resulting in midgut epithelial cells lysis. This work is divided in four chapters. In the first, a review was done o Bacillus, ecology and action mode, and cotton insect-pests. The second chapter describes the selection and study of the content of cry genes of B. thuringiensis strains with activity against nthonomus. grandis. The third chapter describes cloning, sequencing and expression of a cry1Ba toxin gene from the B. thuringiensis S601 strain which is toxic to A. grandis. The binding of Cry1Ba6 toxin to proteins located on the midgut brush border membrane of A. grandis was analyzed and it was found that Cry1Ba6 binds to two proteins (62 and 65 kDa) that showed alkaline phosphatase (ALP) activity. This work is the first report that shows the localization of Cry toxin receptors on the midgut cells of A. grandis. Finally, the chapter four shows how other toxins (Cry1Ia and Cry10A) expressed in Bt, which previously had activity described to A. grandis, interact with A. grandis and S. frugiperda BBMVs.