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artigo Acesso estatsticas Citado por SciELO Similares em SciELO Traduo automtica Envie este artigo por e-mail Oficial da Sociedade Brasileira de Qumica Verso impressa ISSN 0103-5053 J. Braz. Chem. Soc. vol.10 no.6 So Paulo Nov. / dez. 1999 doi: 10.1590/S0103-50531999000600003 Artigo

Um Novo Isoflavona Isolada de Harpalyce brasiliana *

Graa Lcia da Silvaa, Maria Iracema Lacerda Machadoa, Francisco Jos de Abreu Matosa, e Raimundo Braz-Filhob ** aDepartamento de Qumica Orgnica e Inorgnica, Laboratrio de Produtos Naturais, Universidade Federal do Cear, CP 12200, 60,021-970 Fortaleza - Cear, Brasil bSetor de Produtos Naturais, LCQUI-CCT, Universidade Estadual do Norte Fluminense, 28015-620 Campos - RJ, Brasil

Uma nova isoflavona denominada harpalicina e quercetina foram isoladas das folhas e 3-hidroxi-4-isopentenil-8 ,9metilenodioxipterocarpano e cido betulnico das razes de Harpalyce brasiliana. As estruturas foram elucidadas usando mtodos espectromtricos, inclusive RMN bidimensional (2D) da nova isoflavona.

Uma nova chamada isoflavona harpalycine e quercetina foram isolados das folhas e 3-hidroxi-4-isopentenil-8 ,9-METHYLEnedioxypterocarpan e cido betulnico das razes de Harpalyce brasiliana. As estruturas foram elucidadas usando mtodos espectroscpicos, incluindo RMN 2D tcnicas da nova

isoflavona. Keyword: Harpalyce brasiliana, Leguminosae, flavonides, triterpeno

Introduo Harpalyce brasiliana Benth. (Leguminosae-Papilionoideae) um arbusto do Nordeste brasileiro, chamado de "raiz-decobra" (serpente raiz) e usado por pessoas para o tratamento da serpente bites1. Dois prenylated pterocarpans, cabenegrins AI (1) e A-II (2) 2, potentes antdotos contra o veneno de serpente, foram isolados e identificados a partir de um local bem conhecido anti-cobra morde medicamento chamado "especfico Pessoa", fabricado e vendido no norte e nordeste do Brasil e disponvel para plantio trabalhadores oral como um antdoto. A planta, comumente chamado de "Cabea de negro", que fornece o extrato utilizado na preparao deste remdio no tenha sido identificado, at agora, sendo mantida em segredo pelos fabricantes. H cerca de dez plantas com o nome "cabea de negro" na Amrica do Sul. Duas plantas reputado como anti-cobra morde medicamentos ocorrem na Ibiapaba regio do Nordeste do Brasil: Bredemeyera floribunda Willd (Polygalaceae), chamado "pacari", e Harpalyce brasiliana (Leguminosae-Papilionoideae). O primeiro contm como seu princpio ativo uma saponina, bredemeyeroside3. Neste trabalho relatamos o isolamento e caracterizao do novo isoflavona harpalycin (3) e as conhecidas flavonol quercetina (4), prenylated pterocarpan (5) eo triterpeno cido betulnico (6) a partir de folhas e razes de um espcime de Harpalyce brasiliana. Existem trs relatrios anteriores qumicas sobre este plant4-6.

Resultados e Discusso Separao cromatogrfica do extrato etanlico das folhas de Harpalyce brasiliana levou ao isolamento da nova isoflavona harpalycin (3), bem como o conhecido flavonol quercetina (4). Das razes, 3-hidroxi-4-isopentenil-8 ,9methylenedioxypterocarpan (5) e pentacclicos triterpenoid cido betulnico (6) foram isoladas. Os produtos naturais conhecidos quercetina (4, 5,7,3 ', 4'-

tetrahydroxyflavonol) e cido betulnico [6, 3b-hidroxi-20 (29)-lupen-28-ico], foram identificadas principalmente por seus 1H e 13C -espectros RMN e comparao com a literatura data7, 8. 3-Hidroxi-4-isopentenil-8 ,9methylenedioxypterocarpan (5), foi recentemente reported5, 6.

A anlise comparativa do hidrognio dissociado de banda larga (HBBD) e distortionless acessrio por polarizao transferncia (DEPT) 13C-NMR spectra9 de 3, em combinao com a RMN-1H (uma e duas dimenses 1Hx1H-COSY), IR [n 3420 (OH), 1660 (conjugated carbonyl), 1620 (conjugated ligao dupla), 1590 e 1500 cm-1 (anis aromticos)] e (massa m / z 382 ([M] +, 70%), 364 ([M -- H2O] +, 12%), 349 ([M - H2O Me.] +, 39%), 311 (3c, [M - C4H7O] +, 100%), 310 (3d, [M C4H8O] +, 45%) e 146 (3-E, 18%)) espectros permitida a deduo de uma frmula molecular C21H18O7, contendo onze carbonos quaternrio (dez sp2: um carbonilo (DC 180,08, C4), vinculado a cinco tomos de oxignio [dC 159,27 ( C-7), 159,09 (C-5), 155,19 (C-9), 147,70 (C-3 'e C-4')], quatro no-oxigenado [dC 121,71 (C-1 ') 124,47 (C - 3), 104,22 (C6 e C-10)] e um sp3 oxigenados [dC 79,03 (C-2''], seis methine [cinco sp2: dC 154,70 (CH-2), 122,57 (CH-6 ') , 109,42 (CH-2 '), 108,19 (CH-5') e 94,22 (CH-8); um sp3 vinculada ao oxignio: dC 66,80 (CH-3'')], duas metileno [dC 101,16 (3 ', 4'-OCH2O) e 25/02 (CH2-4'')] e dois grupos metilo [dC 25,25 (CH3-6'') e 21/07 (CH3-5'')]: (C) 10 (F) 4 (C = O) (CH) 6 (OCH2O) (CH2) (CH3) 2 = C21H16O7. Os restantes dois hidrognios (C21H18O7, m / z 382 [M] +, 70%) foram atribudos a dois grupos hidrxi: (C) 10 (F) 2 (C = O) (CH) 6 (OCH2O) (CH2) (CH3) (OH) 2 = C21H18O7. A presena dos dois grupos hidrxi foi confirmada pelo singlet sinais em dH 2,04 (ACO-3 ' ') e 2,43 (ACO-5) observados no espectro RMN-1H e dC 170,36 e 20,97 (ACO-3'') e de 169,12 e 21/08 (ACO-5), no espectro de RMN-13C a diacetiltartricos derivado 3b ( Tabela 1). Um chelatogenic hidroxil funo foi revelada por sinais a dH 13,20 e 13,13 (HO-5) nos espectros de 1H RMN-3 e monoacetyl derivados 3a, respectivamente. Estes dados e os sinais em dH 8,12 (H-2) e dC 154,70 (CH-2) foram utilizados para classificar esta como um produto natural contendo uma metilenodioxi isoflavonas e um monohydroxylated isoprenide agrupamento (Me2C-CHOH-CH2-) envolvidos em um 3,4-dihidro-3-hidroxi-2, 2 dimethylpyran-anel, juntamente com o grupo chelatogenic hidroxil em C-5 (dH 13,20).

A localizao do grupo hidroxi no tomo de carbono CH-3''do 3,4-dihidro-3-hidroxi-2 ,2-dimethylpyran agrupamento foi deduzida pelos sinais em dH 3,69 (dd, J = 6,8 e 5,6 Hz) e 5,12 (dd, J = 5,1 e 4,7 Hz), observada no espectro de 1HRMN 3 e 3a, respectivamente (Tabela 1), cuja atribuio foi confirmada por um longo intervalo heteronuclear correlao (spin-spin interaco) do sinal na DC 69,76 (CH-3'') e os sinais em dH 1,37 (3H-5'', 3JCH) e dH 1,32 (3H-6'', 3JCH), observada no 2D 13Cx1H-COSY nJCH (n = 2 e 3, COLOC) 10 espectro do monoacetyl derivados 3a (Tabela 2). Este espectro revelou tambm a correlao de sinais correspondentes ao hidrognio do grupo hidroxilado em C-5 (dH 13,13) e quaternria tomos de carbono C-5 (dC 160,11, 2JCH), C-6 (dC 102,72, 3JCH) e C - 10 (dC 105,39, 3JCH), como resumido na Tabela 2. Adicional de longo alcance heteronuclear correlaes observadas no 2D 13Cx1H-COSY-nJCH (n = 2 e 3, COLOC) espectro da 3a esto resumidas na Tabela 2, juntamente com o heteronuclear um vnculo directo engate revelado pela 2D 13Cx1H-COSY-1JCH espectro de 3a (Tabela 1). Assim, a completa atribuio dos deslocamentos qumicos dos tomos de hidrognio e carbono na 3a-1H e 13C RMN foi realizada por espectros 2D-COSY 1Hx1H e 13Cx1H-COSY nJCH (n = 2 e 3, COLOC), que confirmou a proposta de Estrutura 3 (Tabela 1 e 2). Estas misses foram facilitadas pela aplicao dos parmetros habituais turnos e os observados multiplicidades de signals9.

Assim, a estrutura da nova isoflavona, denominada harpalycine, isolado de Harpalyce brasiliana foi estabelecido como 3 * ,4-dihidro-3 ,5-diidroxi-7-(3,4metilenedioxifenil) -2,2-dimetil-2H, 6H-benzo [1,2-b :5,4-b '] dipyran-6-ona (3, 3''* ,5-diidroxi-2'', 2''-dimetil-3', 4'-metilenodioxi -6,7:6'', 5''-pyranoisoflavone). Relativamente poucos dihydrohydroxypyranoisoflavones tm sido descritos como naturais products11, 12.

Experimental

Geral procedimentos experimentais Mps so uncorr. IR espectros foram registrados em um aparelho Perkin Elmer 1320 ou Nicolet 5ZDXFT-IR, em KBr. 1H [400 (3) e 270 (3a e 3b) MHz] e 13C [50 (3) e 67,5 (3a e 3b) MHz] RMN espectros foram registrados em um Bruker AC200 (1H: 200 MHz; 13C: 50 MHz) e WP-270 (1H: 270 MHz; 13C: 67,5 MHz) e Varian UN-400 (1H: 400 MHz; 13C: 100 MHz) Espectrmetros, em piridina-d5 (3, 1H-RMN), DMSO-d6 (3, 13C-NMR) ou CDCl3 (3a e 3b). EIMS (70 eV) espectros foram obtidos em um HP-5971 GC / MS instrumento. Material vegetal Harpalyce brasiliana Benth. folhas e razes foram coletadas em Guaraciaba do Norte, montanhas Ibiapaba, Cear, Brasil e identificada pelo Professor Afrnio Gomes Fernandes (Universidade Federal do Cear, Fortaleza). Um voucher espcime (n 14841) est depositada no Herbrio Prisco Bezerra do Departamento de Biologia da Universidade Federal do Cear. Extrao e isolamento dos constituintes das folhas E folhas secas em p (6 kg) foram extradas com ETOH na sala temperatura e do solvente removido sob vcuo para produzir 736 g de resduo. Este resduo foi chromatographed sobre uma coluna de slica gel e eluda com hexano sucessivamente, CHCl3, EtOAc, CHCl3-MeOH (1:1), MeOH e ETOH. O resduo (55 g), da frao eluda com CHCl3-MeOH (1:1) foi suspenso em ETOH-H2O soln e extrada com hexano, o resduo (23 g), assim obtida foi chromatographed sobre uma coluna de slica gel e eluda com hexano , CHCl3, EtOAc e MeOH; a frao eluda com CHCl3 (2 g) foi recristalizado de MeOH a pagar 3 (286 mg), a frao eluda com EtOAc (10 g) forneceu quercetina (4, 50 mg) aps vrias execues em um coluna de gel de slica. Extrao e isolamento dos componentes a partir de razes Os produtos naturais 5 e cido betulnico (6) foram isoladas a partir de razes, como descrito na ref. 6. Harpalycin (3) Mp 208-211 (MeOH). IV nmax (cm-1, KBr): 3420, 1620, 1660, 1590, 1500, 1190, 820. EIMS m / z (Rel. int.): 382 ([M] +, 70), 364 ([M - H2O] +., 12), 349 ([M - H2O - Me.] +, 39), 311 (3c, 100), 310 (3d, 45), 146 (3-E, 18), 145 ([3e - H.], 13). H1 (400 MHz, C5D5N) e 13C (50 MHz, DMSO-d6) RMN:

Tabela 1. Acetilao da harpalycin (3) Tratamento de harpalycin (3, 100 mg) com Ac2O (4 mL) na presena de piridina (1 mL), e at de trabalho habituais, produziu uma mistura de 3a (monoacetyl derivados) e 3b (diacetiltartricos derivados), que foram purificados sobre uma coluna de slica gel utilizando hexano e hexano contendo quantidade crescente de CHCl3 como eluentes. 3''-O-Acetylharpalycin (3a) Mp 212-213 . IV nmax (cm-1, KBr): 1730, 1650, 1620, 1590, 1500, 1190 e 800. EIMS m / z (Rel. int.): 424 ([M] +, 6), 364 ([M - AcOH] +, 8), 349 ([M - AcOH - Me.] +, 54), 146 ( 3e, 44), 145 ([3e - H] +, 46). 1H (270 MHz, CDCl3) e 13C (67.5 MHz, CDCl3) RMN: Tabela 1; 13C-1H COSY 1JCH e 13C-1H COSY nJCH (n = 2 e 3, COLOC) RMN (1H: 200 MHz; 13C: 50 MHz): Tabela 2. 3'',5-di-O-Acetylharpalycin (3b) Mp 203-204 . IV nmax (cm-1, KBr): 1730, 1620, 1590, 1500, 1190, 800. EIMS m / z (Rel. int.): 466 ([M] +, 6), 406 ([M - AcOH] +, 2), 364 ([M - AcOH - CH2 = C = O] +, 8) , 349 ([M - AcOH - CH2 = C = O - Me.] +, 100), 146 (3-E, 44). 1H (270 MHz, CDCl3) e 13C (67.5 MHz, CDCl3) RMN: Tabela 1.

Agradecimentos Os autores so gratos ao Professor Afrnio G. Fernandes (botnico, Departamento de Biologia, Universidade Federal do Cear) para a identificao de plantas, a CAPES, PADCT / FINEP e CNPq para o apoio financeiro e CNPq para uma bolsa de investigao (RB-F). Agradecemos ao Dr. Victor RUMJANEK para a leitura do manuscrito.

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Recebido: 31 de maio de 1999

* Este trabalho faz parte do Mestre Tese de Graa Lcia da Silva, apresentou no Departamento de Qumica Orgnica, Universidade Federal do Cear, Fortaleza, Cear, Brasil, 1995. 2009 Brazilian Chemical Society

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