FISIOLOGA

GENERAL
Jess Merino Prez y Mara Jos Noriega Borge

VIAS METABLICAS DE DEGRADACIN GLCIDOS

INTRODUCCIN La molcula de glucosa es el principal combustible para la mayora de los organismos, y en el metabolismo ocupa una de las posiciones centrales ms importantes. Cuando esa reaccin transcurre en el interior de las clulas mediante rutas metablicas, da lugar a la obtencin de energa metablica. La glucosa es el nico combustible para unas pocas clulas especializadas (como las neuronas del cerebro, mdula renal, crnea, eritrocitos, espermtidas), resultando por lo tanto imprescindible para las mismas, y determinando que varios de los principales tejidos del cuerpo trabajen para asegurar un suministro adecuado de este combustible. La glucosa puede ser almacenada en forma de glucgeno en algunas clulas o bien, puede ser degradada mediante oxidacin. Tambin puede servir como precursor de mltiples biomolculas, coenzimas, nucletidos, esqueleto carbonado de los aminocidos, etc. Las rutas que se consideran en este captulo son rutas catablicas, analizndose las rutas de polimerizacin y despolimerizacin de glucosa, o formacin y degradacin del glucgeno, junto con el resto de las rutas anablicas.

GLUCLISIS La gluclisis o glicolisis (del griego glykys dulce y lysis rotura) es una ruta metablica formada por una secuencia de 10 reacciones catalizadas enzimticamente, que transforma la glucosa en piruvato obtenindose en el proceso un pequeo desprendimiento energtico. En clulas animales es la nica ruta que proporciona ATP en ausencia de oxgeno, es, por tanto, un proceso que puede desarrollarse de forma anaerobia, y de ah, que se le denomine tambin gluclisis anaerobia. El piruvato puede continuar su degradacin a lactato mediante la fermentacin lctica, o bien a etanol recibiendo en este caso el nombre de fermentacin alcohlica. El trmino de fermentacin es muy amplio en el sentido que designa degradacin anaerobia de los nutrientes orgnicos para obtener ATP; en los dos casos mencionados el nutriente utilizado es la molcula de glucosa. La gluclisis tiene lugar en el citoplasma de las clulas, encontrndose las enzimas que participan en la ruta en estado disuelto en el citosol.

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Jess Merino Prez y Mara Jos Noriega Borge Etapas de la gluclisis Dentro de esta ruta se pueden diferenciar dos fases:

1 Fase o fase preparatoria en la que se produce un consumo de energa, formada por las cinco primeras reacciones y una, 2 Fase o fase de degradacin, formada por las cinco ltimas reacciones y en la que se produce la obtencin de energa. A lo largo de la primera fase se producen las siguientes reacciones: 1) La glucosa es fosforilada en el OH de su carbono 6 pasando a glucosa-6-fosfato (G6P). 2) La glucosa-6-fosfato se isomeriza a fructosa-6-fosfato (F6P). 3) La fructosa-6-fosfato se fosforila a nivel del carbono 1 pasando a fructosa, 1,6-bisfosfato 4) La fructosa1,6-bisfosfato se rompe (lisis) dando dos molculas de tres tomos de carbono la dihidroxiacetona-fosfato (DHAP) y el gliceraldehdo-3-fosfato (G3P). 5) La dihidroxiacetona-fosfato se isomeriza a gliceraldehdo-3-fosfato. A lo largo de esta etapa se produce un consumo de ATP, ya que es el dador de los fosfatos en ambas fosforilaciones, elevando la energa libre de cada uno de los metabolitos intermediarios.

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Jess Merino Prez y Mara Jos Noriega Borge A travs de esta segunda etapa: 6) El gliceraldehdo-3-fosfato es oxidado y fosforilado por fosfato inorgnico del medio, y no por ATP, pasando a 1,3-bisfosfoglicerato. La energa libre de la xido-reduccin se conserva en forma de energa de enlace del fosfato. 7) El 1,3 bisfosfoglicerato realiza una transferencia del grupo fosfato al ADP para formar ATP, sta es la primera reaccin de obtencin de energa, mediante fosforilacin a nivel de sustrato, pasando el 1,3 bisfosfoglicerato a 3-fosfoglicerato. 8) El 3-fosfoglicerato transfiere internamente en la molcula el fosfato al carbono 2, formndose 2-fosfoglicerato. 9) El 2-fosfoglicerato se deshidrata formando un doble enlace (enol) y convirtindose en fosfoenolpiruvato. 10) El fosfoenolpiruvato transfiere el grupo fosfato al ADP, obtenindose ATP como en la reaccin 7 por una fosforilacin a nivel de sustrato y liberndose el producto final de la va, el piruvato. De forma resumida la gluclisis es una ruta metablica en la que se produce: 1) Rotura y oxidacin de la molcula de glucosa (6 Carbonos) a dos molculas de piruvato (3 Carbonos). 2) Formacin neta de ATP. 3) Transferencia de tomos de hidrgeno cedidos en la oxidacin de la glucosa al NAD+ formando NADH + H+. Una caracterstica importante de la va glucoltica es que todos los metabolitos intermediarios son molculas fosforiladas. La presencia de este grupo fosfato permite, en primer lugar, que estas molculas tengan una carga negativa, y siendo por lo tanto polares no pueden atravesar la membrana celular, quedando atrapadas en el citoplasma. Adems, la transferencia de un enlace de alta energa aporta a la molcula un incremento de energa libre, que le dar una mayor energa de activacin, facilitando el curso de las reacciones.

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Jess Merino Prez y Mara Jos Noriega Borge Rutas del piruvato. Fermentaciones

El piruvato formado en la gluclisis puede seguir diferentes rutas catablicas, dependiendo del organismo o de la clula analizada. En los organismos aerobios, o en clulas en condiciones aerbicas, la gluclisis constituye el primer paso en la oxidacin de la molcula y el piruvato continua su degradacin hasta la oxidacin total en la que los tomos de carbono formarn CO2 y los hidrgenos (hidrogeniones y electrones) formarn H2O. Para llegar a estos productos de desecho se habrn de utilizar otras rutas catablicas como la del cido ctrico y la fosforilacin oxidativa. Las otras posibles rutas del piruvato son: 1) Fermentacin lctica. Es un tipo de va metablica se utilizada por parte de algunos tejidos del organismo cuando se incrementa su actividad, y sus necesidades de oxgeno para el primer tipo de degradacin no son satisfechas. En este caso de dficit de oxgeno, el piruvato se reduce a lactato, tal como ocurre en el msculo esqueltico cuando se requiere una fuerte contraccin muscular. 2) Fermentacin alcohlica. En esta ruta el piruvato se degrada a alcohol liberando CO2, es un proceso que desarrollan algunos microorganismos como la levadura de cerveza.

Balance global de la gluclisis Glucosa + 2ATP + 2 NAD+ + 4 ADP + 2Pi 2 Piruvato + 2 ADP + 2 NADH + 2 H+ + 4 ATP + 2 H2O La ecuacin global de la gluclisis sera: Glucosa + 2 NAD+ + 2ADP + 2 Pi 2 Piruvato + 2 NADH + 2 H+ + 2 ATP De toda la energa producida en la degradacin de la glucosa a piruvato, 35 Kcal/mol, se aprovecha slo una parte en forma de energa metablica, 14,6 Kcal/mol, lo que supone un rendimiento de aproximadamente un 42 %, el resto se disipa como energa calrica y sirve, al igual que muchas otras reacciones, para mantener la temperatura corporal.

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Jess Merino Prez y Mara Jos Noriega Borge Regulacin de la gluclisis De todas las reacciones que tienen lugar en la va glucoltica, son tres las catalizadas por enzimas que presentan un alto nivel de control en su actividad. Las enzimas reguladoras o alostricas de la va glucoltica son la hexoquinasa (HK), la fosfofructoquinasa(PFK1) y la piruvatoquinasa (PK), existiendo algunas diferencias en esta regulacin dependiendo del tejido analizado. - Reaccin 1 catalizada por la enzima hexoquinasa: Es una enzima con una alta afinidad por la glucosa, que es inhibida alostricamente por el producto de la reaccin, la glucosa-6-fosfato. De esta forma es posible mantener el equilibrio entre la velocidad de formacin de la glucosa-6-fosfato con su velocidad de utilizacin. La inhibicin de la enzima por el producto de su reaccin, garantiza adems que no se agote el fosfato inorgnico de la clula en la formacin de hexosas fosforiladas. Los mamferos tienen varias isozimas de la hexoquinasa, en las clulas hepticas se denomina glucoquinasa, cuyas propiedades cinticas son muy diferentes del resto de isozimas. El funcionamiento de esta isozima determina el mantenimiento de un equilibrio entre la [glucosa] en el interior de la clula con la [glucosa] que hay en sangre, permitiendo al hgado utilizar la glucosa en la va glucoltica a una velocidad significativa, slo cuando los niveles de glucosa sangunea son altos, y as estas clulas pueden actuar como un sistema tamponadora. - Reaccin 3 catalizada por la enzima fosfofructoquinasa. La fosfofructoquinasa es la enzima clave o limitante de la velocidad de la ruta glucoltica en la mayora de los tejidos, es una enzima sometida a una compleja regulacin alostrica. El ATP es un inhibidor alostrico mientras que ADP y AMP actan como activadores, otros compuestos como el citrato, metabolito intermediario de la degradacin aerobia del piruvato, acta inhibiendo la enzima. El hecho de que sea esta enzima la limitante y no la primera, se apoya en que hasta este punto todava no hay compromiso en firme para la degradacin glucoltica, ya que el precursor bien sea fructosa-6-fosfato o su ismero glucosa-6-fosfato, puede ser utilizado en la mayora de las clulas para ser almacenado o para degradarle a travs de otras vas. - Reaccin 10 catalizada por la piruvatoquinasa, esta enzima es inhibida por [ATP] elevada, o bien por acetil-CoA; ste ltimo est presente en elevadas concentraciones cuando se produce la degradacin de otros combustibles metablicos, constituyendo una seal de excedente energtico y de desvo para potenciar rutas anablicas.

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Jess Merino Prez y Mara Jos Noriega Borge RUTA DE LAS PENTOSAS FOSFATO Una ruta secundaria de la degradacin de la glucosa, que no persigue como objetivo la formacin de ATP, es la ruta de las pentosas-fosfato o del fosfogluconato. Su fin es obtener pentosas-fosfato, como la D-ribosa, necesarias para la biosntesis de cidos nucleicos, y NADPH, que constituye un transportador de energa metablica en forma de poder reductor necesario para los procesos biosintticos. La degradacin de la glucosa a travs de esta ruta es necesaria en algunos tejidos concretos (tejido adiposo, corteza adrenal, hgado, etc.) donde las reacciones biosintticas son elevadas.

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Jess Merino Prez y Mara Jos Noriega Borge Es una ruta citoplasmtica y las enzimas que catalizan las correspondientes reacciones se encuentran en solucin en el citosol. Consta de dos fases: 1) Fase oxidativa o irreversible en la que se produce la oxidacin de la glucosa-6-fosfato hasta 6-fosfogluconato, la eliminacin de un tomo de carbono (decarboxilacin) en forma de CO2 y como producto final, una molcula de pentosa. El balance de esta primera fase ser: 3 Glucosa-6-P + 6 NADP+ + 3 H2O 3 Ribosa-5-P + 3 CO2 + 6 NADPH + 6 H+ 2) Fase no oxidativa o reversible, en la que se produce una serie de interconversiones entre monosacridos de 3,4,5 y 6 tomos de carbono para obtener dos metabolitos intermediarios de la va glucoltica, la fructosa-6-fosfato y el gliceraldehdo-3-fosfato.

CICLO DEL CIDO CTRICO A nivel citoplasmtico la ruta glucoltica termina con la formacin del piruvato, a partir de aqu y dependiendo del tejido y del estado metablico del mismo, el piruvato puede tener diferentes destinos. Como hemos visto las condiciones anaerobias determinan su conversin bien en lactato o etanol, y en condiciones aerobias dependiendo de las necesidades energticas de la clula, puede ser utilizado en rutas biosintticas, o continuar el proceso degradativo mediante oxidacin hasta CO2 y H2O, recibiendo este ltimo proceso el nombre de respiracin celular. La primera fase del proceso oxidativo (la va glucoltica para los glcidos) produce un compuesto ms oxidado que sus precursores, pero todava con una gran reserva de energa extrable, y a travs de esta etapa III del catabolismo (ciclo del cido ctrico y fosforilacin oxidativa) permitir formar productos de desecho en su estado ms oxidado posible (CO2 y H2O).

Formacin del acetil-CoA La entrada del piruvato citoplasmtico a la matriz mitocondrial se realiza a travs de un sistema de transportadores mitocondriales. La primera reaccin que tiene lugar en el camino catablico aerbico del piruvato es su descarboxilacin oxidativa por un complejo enzimtico situado en la matriz mitocondrial: el complejo piruvato deshidrogenasa, que cataliza la siguiente reaccin: Piruvato + NAD+ + CoA-SH Acetil-CoA + CO2 + NADH + H+ G= - 8 Kcal/mol

Debido a la gran variacin de energa libre, la reaccin es esencialmente irreversible, siendo sta la causa que justifica la incapacidad de convertir lpidos en glcidos y la facilidad para convertir glcidos en lpidos.

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Jess Merino Prez y Mara Jos Noriega Borge Cada uno de los productos de la reaccin permanece en el complejo unido de forma covalente, para ser procesado enzimticamente sin abandonarle. En los mamferos no existen las enzimas del ciclo del glioxilato, que en otros organismos permite revertir la reaccin de la piruvato deshidrogenasa, y por lo tanto formar piruvato de acetil-CoA. En este caso la reversibilidad metablica entre glcidos y lpidos no existe, ya que los glcidos s pueden formar el precursor biosinttico de los lpidos (acetil-CoA) acumulando su exceso bajo esta forma de reserva energtica pero los lpidos NO pueden pasar a glcidos. La regulacin de la piruvato deshidrogenasa es un proceso clave para el control del flujo catablico, y se lleva a cabo de varias formas: a) Modificando su estado de actividad entre una forma activa desfosforilada y otra inactiva fosforilada, interconvertibles entre s por accin de las correspondientes enzimas protena-quinasas y protena-fosfatasa, controladas a su vez por hormonas. b) Las concentraciones elevadas de acetil-CoA y NADH inhiben alostricamente a la enzima, mientras que las concentraciones altas de CoA o NAD+ funcionan como activadores alostricos. c) La carga energtica elevada incrementa el estado inactivo de la enzima.

Ciclo del cido ctrico El ciclo del cido ctrico (de Krebs , o de los cidos tricarboxlicos) existe en todos los organismos aerobios, y desde el punto de vista evolutivo es ms reciente que la gluclisis.

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Jess Merino Prez y Mara Jos Noriega Borge A travs de este ciclo se producir la oxidacin total de la molcula de acetilo hasta CO2 y H2O. Se desarrolla en la matriz mitocondrial y est constituido por una secuencia de ocho reacciones catalizadas enzimticamente, que son: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Condensacin del acetil-CoA y oxalacetato para formar citrato. Isomerizacin del citrato a isocitrato. Oxidacin y descarboxilacin del isocitrato para dar -cetoglutarato y CO2. Oxidacin y descarboxilacin del -cetoglutarato para dar succinil-CoA y CO2. Conversin del succinil-CoA en succinato con formacin de un enlace fosfato de alta energa. Oxidacin del succinato a fumarato. Hidratacin del fumarato a malato. Oxidacin del malato a oxalacetato, recuperndose el compuesto inicial del ciclo.

Los tipos de reacciones que tienen lugar quedan reducidas a: Descarboxilaciones (eliminacin de tomos de carbono en forma de CO2), reacciones de oxidacin de los sustratos, y transferencia de un enlace de alta energa. El balance global de la ruta es: Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2 H2O 2 CO2 + 3 NADH + FADH2 + GTP + 2 H+ + CoA En cada vuelta del ciclo se oxida un residuo acetilo a 2 molculas de CO2, se origina un ATP por fosforilacin a nivel de sustrato (a travs de GTP) y se obtienen como producto de las reacciones cuatro coenzimas reducidas, 3 NADH + H+ y 1 FADH2, que sern reoxidadas en la fosforilacin oxidativa generando ms enlaces fosfato de alta energa. Aunque el O2 molecular no participa directamente en el ciclo de Krebs, ste no se desarrolla en condiciones de ausencia de O2, es por lo tanto estrictamente aerbico, porque la regeneracin de las coenzimas a su forma oxidada, necesaria para la continuidad del ciclo, slo se realiza por transferencia al O2 molecular.

Importancia del ciclo del cido ctrico Analizado de forma somera el diseo de esta ruta metablica parece excesivamente complejo y costoso, ya que una secuencia de ocho reacciones para llevar a cabo la oxidacin de tan slo dos tomos de carbono parece un despilfarro, entrando as en contradiccin con la ley de mxima economa que rige el metabolismo celular. Sin embargo, el papel del cido ctrico no queda restringido a este proceso oxidativo de obtencin de energa, sino que se articula como el primer elemento de una va que constituye el ncleo central del metabolismo intermediario. Mediante su estructura muchos productos finales de 4 y 5 tomos de carbono entran para continuar su proceso oxidativo utilizando no la puerta principal que es el acetil-CoA, sino la multitud de puertas laterales que son los metabolitos intermediarios de esta ruta, de esta forma existe un aprovechamiento mximo de combustibles.

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Jess Merino Prez y Mara Jos Noriega Borge En segundo lugar, estos mismos metabolitos pueden ser extrados de la ruta e introducidos en rutas biosintticas, tanto para glcidos, como para aminocidos y nucletidos. De todo lo mencionado puede deducirse, que el ciclo del cido ctrico es una va mixta o anfiblica que participa tanto en el catabolismo como en el anabolismo, y aunque el punto de vista que gua su descripcin en este tema sea ms bien catablico que anablico, debe observarse el amplio papel que desarrolla en todo el metabolismo celular. La importancia central de esta va queda an ms realzada cuando se examina la existencia de las reacciones anaplerticas. Estas reacciones estn destinadas a reponer el dficit de algunos de los intermediarios del ciclo, retirados para procesos sintticos, evitando que se produzca un descenso en la velocidad global del ciclo.

Regulacin del ciclo Uno de los factores ms limitantes en los seres humanos para determinar la velocidad con que opera el ciclo es la cantidad disponible de oxalacetato. Teniendo en cuenta las concentraciones medidas de oxalacetato y el consumo de O2 en la cadena de transporte electrnico, se ha estimado que el ciclo opera unas 100 veces por minuto lo que permitir una formacin de uno 70 kg de ATP/da. La regulacin que permite un cambio de la velocidad con que se desarrolla el ciclo depende de la disponibilidad de sustratos, de la inhibicin por productos acumulados y de la retroinhibicin alostrica de algunas de las enzimas. En condiciones normales las velocidades de la gluclisis y del ciclo del cido ctrico estn perfectamente acopladas para conseguir que slo se metabolice la cantidad de glucosa necesaria para suministrar el combustible adecuado al ciclo del cido ctrico, y de esta forma queden cubiertas las necesidades energticas.

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