Minibioreactores

Para um mais rpido desenvolvimento de bioprocessos

Pedro Fernandes

A questo central

Processos biocatalticos dependem de elevado nmero de variveis Avaliao do seu efeito no sistema em estudo tradicionalmente um processo laborioso e moroso Como tornar competitivo o desenvolvimento de um processo biocatalticos?

A soluo

Conceptualmente Incrementando o nmero de parmetros avaliados e reduzindo o correspondente lapso de tempo Em concreto Recorrendo a vasos reaccionais de pequena volumetria ( 100 ml)

Minibioreactores

Avaliao em paralelo de multiparmetros Reduo nas quantidades de consumveis Potencial para automatizao Rpida evoluo da bancada para escala piloto

Tipos de minibioreactores
Erlenmeyer

Tubos de ensaio

Tipos de minibioreactores
Microplacas

Microplacas
T a b e la 1 . C a r a c t e r s t ic a s r e le v a n t e s d e m ic r o p la c a s v u lg a r m e n t e u t iliz a d a s e m N m e r o d e p o os 4 6 8 1 2 2 4 4 8 9 6 b io c a t lise V o lu m e d e tr a b a lh o ( l) 1 0 0 0 a 2 0 0 0 2 0 0 0 a 5 0 0 0 2 0 0 0 a 4 5 0 0 7 0 0 a 18 0 0 4 0 0 a 10 0 0 3 0 0 a 60 0 2 5 0 1 9 0 3 0 0 9 6
*

1 0 0 0 2 0 0 0

3 8 4 3 8 4
* *

9 0 1 8 0

P o o s p r o fu n d o s

Tipos de minibioreactores
Reactor de membranas

Bioreactor miniatura

Garantias e requesitos
Garante Reduo de custos e ocupao mais racional do tempo Requer Definio do desenho experimental representatividade dos dados para assegurar a

Viso de engenharia dos bioreactores

Identificao de parmetros chave Caracterizao dos minibioreactores ao nvel da transferncia de massa

Permanecem constantes em qualquer escala Avaliao do efeito das condies operatrias em:
coeficiente de transferncia de massa rea especfica de transferncia de massa taxa de transferncia de oxignio mxima actividade cataltica/crescimento/metabolitos

Condies operatrias avaliadas

Tipo de agitao
Orbital Vai-vem
excentricidade, ngulo de vasos com a vertical

Mecnica/magntica
Tipo e geometria de agitador (hlice, turbina de Rushton)

Velocidade de agitao Caudal de arejamento Caudal de alimentao Volume de lquido

Modelao

Desenvolvimento de modelos matemticos para previso de parmetros chave

Modelos semi-empricos Redes neuronais

Validao

Comparao com resultados obtidos em maiores escalas Avaliao de paridade com ensaios em escala de bancada

Monitorizao
Oxignio dissolvido e pH Uso de sondas convencionais pouco vivel Mtodos espectrofotomtricos (qumicos ou enzimticos) Sondas de fibras pticas Corantes sensveis a oxignio

Aplicaes
Reactor Erlenmeyer (250 ml) Erlenmeyer modificados (250 ml, com sensores) Erlenmeyer modificados (250 ml, com sensores) Tubos de ensaio Processo Produo de xantano por Xanthomonas campestris Perfil da evoluo do teor de O2 dissolvido durante cresacimento de Pichia stipitis, Escherichia coli, Hansenula polymorpha, Saccharomyces cerevisiae e Botrytis cinerea Oxidao de glucose por Gluconobacter oxydans

Produo de IgG recombinante por clulas CHO; produo de celulose por by Acetobacter xylinum; crescimento de Hansenula polymorpha para produo de fitase Perfis de crescimento de Bacillus subtilis, Pseudomonas, Rhodococcus e Alcaligenes; crescimento de Pichia pastoris e caracterizao da acitvidade cataltica; produo de eritromicina por Aeromicrobium erythreum; produo de alcool isobutlico por Zygosaccharomyces rouxii Optimizao das condies de crescimento de Bacillus subtilis Oxidaes de Baeyer-Villiger por clulas de E. coli com actividade de monooxigenase Crescimento de clulas CHO Crescimento de E. coli

Microplacas de 96 poos

Microplacas de 48 poos Microplacas de 24 poos Microplacas de 12 poos Minibioreactor agitado (2ml e 6 ml)

Concluses
Minibioreactores Ferramenta til e verstil para caracterizao e modelao de bioprocessos Elevado potencial de evoluo

Size does not matter, what matters is what you do with it!