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PERFIL LIPIDICO
El perfil lipdico lo constituye la cuantificacin analtica de una serie de lpidos que son transportados en la sangre por los diferentes tipos de lipoprotenas plasmticas. La determinacin de estos parmetros es un procedimiento analtico bsico para el diagnstico y seguimiento de enfermedades metablicas, primarias o secundarias. Este examen informa especficamente las fracciones principales del colesterol y triglicridos, indispensables para el funcionamiento adecuado de clulas del organismo y le permite evaluar el riesgo cardiovascular (infarto, derrame cerebral, angina de pecho)

LIPOPROTENAS PLASMTICAS
Los lpidos como: los triglicridos, los colesteroles y otros, no son solubles en el plasma, por lo que su transporte en l se realiza en forma de complejos moleculares llamados lipoprotenas, en las que el componente proteico se denomina apolipoprotena o apoprotena. Las lipoprotenas constituyen un sistema heterogneo de partculas de diferentes tamaos y funciones metablicas. Ellas poseen un ncleo hidrfobo que contiene los lpidos no polares (triglicridos y colesterol esterificado), mientras que la superficie externa est constituida por lpidos polares (colesterol no esterificado y fosfolpidos) y apoprotenas. Estas apoprotenas, adems de jugar un papel determinante en la estabilidad de la estructura de la lipoprotena, desempean diversas funciones en el metabolismo de esta. Los lpidos y las lipoprotenas se pueden clasificar segn su composicin. La clasificacin ms utilizada hoy incluye, adems, la densidad especfica de las lipoprotenas, y de esa manera las divide. Quilomicrones. Son las partculas de mayor tamao y menor densidad. Tienen un alto contenido en triglicridos, se originan en el intestino y trasportan los lpidos de la dieta. Cuando el plasma o suero contiene quilomicrones y se deja en reposo a temperatura de refrigeracin, se observa la formacin de un sobrenadante cremoso. Lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL). Son lipoprotenas que transportan triglicridos de origen endgeno y, en menor grado, colesterol. Se originan, sobre todo, en el hgado. En ausencia de quilomicrones, la mayor parte de los triglicridos plasmticos se encuentra en esta fraccin. El aumento de esta fraccin le confiere un aspecto lactescente al plasma. Lipoprotenas de densidad intermedia (IDL). Estn constituidas por partculas lipoproteicas de densidad intermedia entre las VLDL y las lipoprotenas de baja densidad (LDL), transportan triglicridos y, en menor grado, colesterol. Su metabolismo est dirigido por la apo E y alguna variante gentica de esta puede condicionar un aumento de estas lipoprotenas. Lipoprotenas de baja densidad (LDL). Son muy ricas en colesterol esterificado y se originan de la transformacin de las VLDL y de las IDL. Tienen la funcin de transportar colesterol hacia los tejidos perifricos. Los altos niveles de colesterol plasmtico dependen, sobre todo, del aumento de estas lipoprotenas. Estn identificadas como lipoprotenas aterognicas. Lipoprotenas de alta densidad (HDL). Son las lipoprotenas ms pequeas y densas. Son ricas en protenas y fosfolpidos y transportan colesterol esterificado. El papel de las HDL es transportar el colesterol desde los tejidos perifricos hacia el hgado. En la actualidad se les reconoce un papel protector contra la aterosclerosis. Lipoprotena (a) o Lp (a). Esta lipoprotena parece representar el vnculo entre el metabolismo de los lpidos y la fibrinlisis. La presencia de la Lp (a) en la placa aterosclertica y su capacidad de interferir la fibrinlisis sugieren un posible papel en la aterognesis. Apolipoprotenas. Las principales funciones de las apolipoprotenas resultan de inters, mientras que los defectos en el metabolismo de estas traen por resultado trastornos de los lpidos. Entre las principales funciones de las apolipoprotenas se han identificado: 1. Solubilizar los lpidos para su secrecin por las clulas.
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2. Servir de componente estructural para el ensamblaje de las lipoprotenas. 3. Activador de enzimas lipolticas. 4. Aceptar lpidos a travs de reacciones de intercambio en el plasma. 5. Unin a receptores de superficie celular especficos; mecanismo de captacin celular y degradacin de lipoprotenas. Los parmetros analticos que se pueden determinar estn: el colesterol total, el colesterol transportado por las LDL, el colesterol transportado por las HDL, los triglicridos totales, ciertas apoprotenas particulares etc. Colesterol total El colesterol es un esteroide sintetizado en muchos tejidos, especialmente en el hgado, la corteza supra-renal, en la pared intestinal, en las gnadas y la aorta. El colesterol origina de la alimentacin y de la sntesis endgena. Un aumento en la dieta de colesterol disminuye la cuota endgena. La cuota de colesterol intestinal est controlada por la concentracin en el intestino de las sales biliares. El colesterol, en relacin con la alimentacin, es estereficado desde las clulas intestinales. La cuota endgena es estereficada desde el hgado. Por medio de la liplisis, las lipoprotenas ricas en triglicridos (quilomicrones y VLDL) dan lugar a un grupo de compuestos intermedios: 1. Los remanentes de quilomicrones, que son captados por el hgado. 2. Las VLDL, que se convierten en LDL o son captadas por el hgado. 3. Las LDL, que transportan colesterol a los tejidos y por ltimo, son captadas por el hgado. 4. Las HDL, sintetizadas en el hgado y en el intestino, que captan lpidos desde los quilomicrones y las VLDL, a la vez que intercambian lpidos y apoprotenas con las VLDL. La determinacin del colesterol se hace en la patologa del metabolismo lipdico y lipoproteico. El colesterol circula en parte libre y en parte estereficado con cidos grasos. La estereficacin se cumple en el hgado. y El aumento del colesterol se encuentra en algunas enfermedades hereditarias y en la alimentacin no adecuada, en el hipotiroidismo, en el sndrome nefrtico, en la enfermedad de Cushing, en la diabetes mellitus, en la pancreatitis, en la glicogenosis tipo I, III, VI, y tambin en las glomerulonefritis. y La disminucin del colesterol se encuentra en el dficit de alfa lipoprotena, en la insuficiencia heptica, hipertiroidismo, caquexia, mala nutricin, uremia, septicemia, enfermedad de Addison. Preparacin del paciente Necesario ayuno al menos 6-8 horas, no tomar alcohol al menos 72 horas antes de la toma de muestra. Modalidad de la toma de muestra Evitar xtasis venosa porque provoca hemoconcentracin y la liberacin de colesterol tisular y, por consiguiente, un aumento de colesterol hemtico. Transporte Transportar a temperatura ambiente. Conservacin Centrifugacin y separacin del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 da a temperatura ambiente de 20-25C, y 5-7 das a + 4C, 2 meses a 20C. Mtodo de determinacin de colesterol total Para la determinacin de colesterol total se utilizan reactivos comerciales que incluyen las enzimas y sustratos necesarios para la cuantificacin de todas las formas de colesterol presentes en el suero. Las reacciones que tienen lugar son: Esteres de colesterol + H O
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Colesterol + Ac. Grasos

Colesterol + O2 + H2O

CHOD

Colestenona + H2O2

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Quinona + H2O Interferencias Suero ictrico con bilirrubina > 25.0 mg/dl. Hemlisis hemoglobina > 7.0 g/L. Lipemia: triglicridos > 2500.0 mg/dl. cido ascrbico, algunos anticoagulantes (oxalato, citrato, fluoruro) pueden interferir y dar resultados falsamente bajos. Valores de referencia Deseable 189 200mg/dL Limite alto 200 239mg/dL Alto >240mg/dL HDL colesterol El colesterol HDL constituye la parte de las lipoprotenas de alta densidad (High Density Lipoproteins), formadas por el 50.0% de protenas (de las cuales el 90.0% apoA); el 18.0%, colesterol; el 2.0%, triglicridos; y el 30.0%, fosfolpidos. El colesterol HDL es producido en el hgado. El colesterol que se encuentra en las clulas est inmerso en las secreciones biliares y, a travs de la bilis, es eliminado en el intestino. El control del colesterol HDL es importante en la determinacin del diagnstico del riesgo de aterosclerosis. El aumento de la concentracin del colesterol HDL tiene un efecto protector en las cardiopatas coronarias, mientras la disminucin en particular con un aumento de los triglicridos puede comportar un aumento del riesgo de enfermedad cardiovascular. Las indicaciones principales son: diagnstico de riesgo aterosclertico, en el diagnstico de la disfuncin del metabolismo lipdico y lipoproteico. Preparacin del paciente Necesario ayuno, al menos 6-8 horas; no tomar alcohol, al menos 72 horas antes de la toma de muestra. Modalidad de la toma de muestra Evitar xtasis venosa porque provoca hemoconcentracin y la liberacin de colesterol tisular. Transporte Transportar a temperatura ambiente. Conservacin Centrifugacin y separacin del suero; la muestra se puede conservar por 1 da a temperatura ambiente de 20-25oC, 5-7 das a + 4oC y 2 meses a 20oC. Sin embargo, es mejor evitar la congelacin porque puede alterar los contenidos lipdicos y apolipoproteicos. Mtodo de determinacin de HDL-colesterol Para la determinacin del colesterol presente en las principales lipoprotenas que lo contienen como HDL (lipoprotenas de alta densidad) y LDL (lipoprotenas de baja densidad), es necesario: Primero, la separacin selectiva de la lipoprotena correspondiente con agentes precipitantes. Segundo, la cuantificacin del colesterol presente en dicha lipoprotena como se indic anteriormente. Entre estos reactivos precipitantes estn el cido fosfotungstico y magnesio que precipitan a las LDL y VLDL (lipoprotenas de muy baja densidad) mientras que las HDL permanecen en solucin. Interferencias: Hemlisis: con Hb 7.0 g/l. Ictrico: bilirrubina 25.0 mg/dl. Lipemia: triglicridos 1000.0 mg/dl. cido ascrbico, algunos anticoagulantes (oxalato, citrato, EDTA) pueden dar valores falsamente bajos.
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H2O2 + Fenol + 4-AP

POD

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Valores elevados de inmunoglobulinas pueden provocar valores falsamente elevados de HDL. Valor de referencia Hombre: > 55.0 mg/dl Mujer: > 65.0 mg/dl Relacin Colesterol total/HDL Otro dato muy til para analizar en conjunto los valores obtenidos es la relacin colesterol total/HDL, conocido como ndice de Castelli o ndice aterogncio. Est relacin nos muestra, por decirlo as, si los niveles de HDL son suficientes para "manejar" la carga total de colesterol y directamente nos seala la concentracin de LDL y VLDL. Esto es til cuando el HDL parece ser el adecuado pero el colesterol total est muy alto. Diferentes estudios han demostrado que las mujeres manejan niveles de HDL mayores que el hombre pero con el mismo riesgo. Por lo tanto, a la hora de valorar a las mujeres sus niveles de HDL deseables deben ser mayores a 35 mg/dl, por eso la relacin colesterol total/HDL colesterol deseable para mujeres es menor. Riesgo de enfermedad coronaria asociado con el ndice de Castelli Hombre Mujer Riesgo coronario < 3,5 < 3,4 Mitad del promedio 3,5 - 5,0 3,4 - 4,5 Promedio 5,1 - 9,6 4,5 - 7,1 Dos veces el promedio 9,7 - 24 7,2 - 11 Tres veces el promedio Aunque se han utilizado muchos ndices tratando de valorar el riesgo de coronariopatas, no se recomienda su uso como nica variable a valorar, ya que cada una de las lipoprotenas es un factor independiente de cardiopata coronaria. LDL Colesterol Para obtener la concentracin de LDL colesterol tambin hay tcnicas, sin embargo tambin se aplica una frmula que es:        VLDL Colesterol De igual manera que el LDL la concentracin se obtiene aplicando la siguiente frmula Triglicridos Los triglicridos estn compuestos de un alcohol trivalente (glicerol) y de tres cadenas largas de cidos grasos. Son absorbidos, una parte, con la alimentacin y, la otra parte, es sintetizada desde el hgado. Los triglicridos alimenticios son transportados por los quilomicrones, mientras el transporte de la cantidad endgena a los tejidos se hace con las VLDL. Los triglicridos son utilizados en los tejidos con la intervencin de la lipasa lipoproteica. El 95.0% del tejido adiposo est constituido por triglicridos. La determinacin de los triglicridos se emplea en los distintos dismetabolismos: alterado metabolismo lipdico, diabetes mellitus, sndrome nefrtico y muchas enfermedades endgenas. Se puede encontrar hipertrigliceridemia por: y Falta de lipasa proteica. y Exgena (introduccin excesiva de alcohol, glcidos y lpidos). y Endgena (congnita). Preparacin del paciente Es necesario el ayuno, al menos de 6-8 horas. No consumir alcohol, al menos 72 horas antes de la toma de muestra. Transporte Transportar a temperatura ambiente.
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Conservacin Centrifugacin y separacin del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 da a temperatura ambiente de 20-25C, 5 das a + 4C. No se debe congelar la muestra para la determinacin, ya que los triglicridos precipitan Mtodo de determinacin de triglicridos Para la determinacin de triglicridos en suero se utilizan reactivos comerciales que incluyen las enzimas y sustratos necesarios para la cuantificacin por espectrofotometra visible. Las reacciones que tienen lugar son: Triglicridos + H O
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Lipasa

Glicerol + Ac. Grasos

GK Glicerol + ATP Glicerol-3-P + ADP GPOD Glicerol-3-P + O Dihidroxiacetona + H O 2 2 2 POD H2O2 + p-clorofenol + 4-AP Quinona + H2O

Interferencias Las interferencias ms significativas son: Hemlisis: con Hb 6.0 g/l. Ictericia: con bilirrubina 27.0 mg/dl. El acido ascrbico puede interferir con valores falsamente bajos. Valores de referencia 70-200 mg/dl BIBLIOGRAFIA y Gonzlez de Buitrago JM, Arilla Ferreiro E, Rodrguez-Sedade M, Snchez Pozo A (1998): Bioqumica Clnica Editorial McGraw-Hill.-Interamericana, Madrid. y Manual de procedimientos de laboratorio en bioqumica clnica y control de calidad Managua-Nicaragua 2005 y http://www.geosalud.com/Nutricion/colesterol.htm