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Gentechnik

Gentechnik = gezielte, knstliche Vernderung der Erbanlagen eins Lebewesen Erbanlagen werden ausgeschaltet Erbanlagen werden eingeschaltet Erbanlagen werden von auen in die Zelle gebracht bertragung in andere Lebewesen: 3 Schritte Gengewinnung Gentransfer Vermehrung DNA aus Spenderzelle Gen muss isoliert werden Restriktionsenzyme zerschneiden DNA an bestimmten Basensequenzen gute Methode fr Baktierengene Probleme bei Mosaikgengen (gestckelten Gene) RNA in DNA mit reverser Transkripptase umkopieren keine Introns knstliche Herstellung der DNA mit genetischem Code Aminosureabfolge wird in DNA umgerechnet erfolgt maschinell Vektoren = Mechanismen, die Gene bertragen knnen bertragungseinheit eigentliches Gen muss bestckt werden mit Start- und Stop-Codons (Start-und Stop-Signale) Marker Marker ermglicht es zu erkennen, welche Zellen das Gen aufgenommen haben frher: Antibiotikaresistenzgen heute: Farbreaktionen, Mangelmutanten, die bestimmte Nhrstoffe brauchen

Gengewinnung

Gentransfer

bertragungsmglichkeiten direkter Gentransfer Zielzellen werden mit Genen verrhrt --> manche werden aufgenommen und eingebaut Wahrscheinlichkeit: sehr gering Gene-Gun Goldkgelchen werden mit Genen umhllt, im elektrischen Feld beschleunigt und auf die Zielzellen geschossen manche Gene landen im Kern und werden eingebaut besonders gut geeignet bei Eucaryonten Plasmide =zustzliche DNA-Ringe auerhalb des Hauptchromosoms des Bakteriums Restriktionsenzyme schneiden den DNA-Doppelstrang auf gewnschtes Gen wird hinzugefgt Plasmide bauen das Gen dann ein

Phagen = Viren, die Bakterien befallen Spezialisten fr Geneinschleusung (arbeiten gezielter)

Vermehrung Mikroorganismen (Bakterien, Hefe) werden in Bioreaktoren vermehrt

Anwendungsgebiete
Grne Gentechnik Pflanzen Rote Gentechnik Wirbeltiere Weie/Graue Gentechnik Industrie/Abfallwirtschaft Pflanzen sollen neue Eigenschaften / Tiere neue Fhigkeiten erhalten Pflanzen, Tiere, Mikroorganismen sollen bestimme Stoffe herstellen (Lebensmittel, Medikamente, Enzyme) Gentherapie soll Fehler am Menschen behben GVO: gentechnisch vernderte Organismen Bsp.: transgene Sojabohnen --> Resistenz gegen Ruond-up

Medikamentenherstellung
Impfstoff gegen Hepatitis B Herstellung auf klassischem Weg nicht mglich (Viren lassen sich nicht zchten) gentechnisch vernderte Hefezellen erzeugen Eiwei der Virushlle (enthlt keine Viruserbanlagen; daher nicht infektis) Krper produziert gegen das Eiwei ein Antigen, welches dann das echte Virus bekmpft, sollte es einmal kommen Ansteckung mit Heptatits B: meist Blutkontakt (mehrmaliges Verwenden von Injektionsnadeln, piercen, ttowieren) Therapie ist langwierig, nicht immer erfolgreich Somatostatin Wachstumshormon, das in Bakterien hergestellt wird gleiche Wirkung, wenn es von auen oder vom Krper kommt EPO wird von Nieren und Leber erzeugt steigert Bildung von roten Blutkrperchen wird in gentechnisch vernderten Lebewesen (z. B. Hamster) hergestellt fr Nierenpatienten bei Nierenkranken stark verringerte Produktion --> Mdigkeit, Antriebslosigkeit Eigenbluttransfusion mehrere Tage vor OP Blutspende EPO wird verabreicht Blut wird rasch nachgebildet fr die OP steht eine Blutkonserve zur Verfgung Dopingmittel

Knock-out-Lebewesen
Gen wird stillgelegt

Folgeerscheinungen knnen erforscht werden anstatt der Forschung am Menschen Medikamente werden in GVOs hergestellt Milchdrsen produzieren Eiweie Schweine: Faktor VIII fr die Blutgerinnung Schafe: Medikamente gegen Lungenemphysem (Lungenblhung; weniger Blschen passen in die Lunge) erstes knstliches Enzym: Lab-Ferment (Milchgerinnung bei der Kseherstellung) Enzyme fr Abflussindustrie, Textilindustrie, Lederverarbeitung auch in Bakterien herstellbar (aber teurer)

Gene-Pharming

Gentechnisch hergestellt Enzyme


Gentherapie
Keimbahntherapie Lebewesen wird repariert und man lsst es erwachsen werden DNA der befruchteten Eizelle wird verndert und dann an Nachkommen weitergegeben derzeit nicht sinnvoll somatische Gentherapie auerhalb des Krpers Zellen entnommen defektes Gen durch gesundes ersetzt Zellen vermehrt gesunde Zellen werden wieder eingesetzt im Krper gesunde Gene werden mit Vektoren verabreicht (z.B. durch Inhalieren) Antisense-Therapie komplementre m-RNA wird als Medikament verabreicht strt die Produktion eines falschen Eiweies

Polymerase Kettenreaktion PCR


Ausgangsmaterial enthlt DNA (darf nur wenige 1000 Basen lang sein) Einzelnukleotide Primer Polymerase Ablauf 1. Denaturieren (Erhitzen auf 94) Doppelstrnge trennen sich in Einzelstrnge 1. Abkhlen auf 50-60 Primer setzt sich auf DNA 1. Erhitzen auf 72 Taq-Polymerase verdoppelt vom Primer weg die Kette 1. wieder 1 Ergebnis: nach 25 Durchgngen mehrere Millionen Kopien Nachteil: Verdopplungsfehler werden nicht korrigiert Anwendung: HIV-Test, Vaterschaftstest, Forensik