Beruflich Dokumente
Kultur Dokumente
HEMAGLUTINAO
HEMAGLUTINAO
LIMITAES DA HEMAGLUTINAO Dificuldade na fenotipagem de pacientes politransfundidos com transfuso recente Dificuldade na fenotipagem de hemcias cobertas com IgG Dificuldade na identificao de ags variantes Dificuldade na identificao de ags de baixa e alta frequncia Limitao dos estoques de antgenosnegativos Impossibilidade de determinar zigozidade
LIMITAES DA HEMAGLUTINAO
O que fazer!
Zoom no DNA
Genotipagem!!!
Resultados seguros nas situaes (AHAI) em que a hemaglutinao limitada
RHD D+/D-(D), D parcial, D fraco, Del, zigozidade RHD RHCE C/c, E/e, VS, variantes Rh C, E/e KEL K/k, Jsa/Jsb FY Fya/Fyb,GATA, Fyx
JK Jka/Jkb GYPB S/s; S-silencioso Dombrock Doa/Dob , HY, JO Diego Dia/Dib, Memphis II
PROTOCOLOS DE GENOTIPAGEM PARA UTILIZAO NA CLNICA Microarray- BeadChipTM , Bioarray Solutions Ltd
RHCE C/c, E/e KEL K/k FY Fya/Fyb,GATA, Fyx LW Lw a/Lw b CO Coa/Cob SC Sc1/2
JK Jka/Jkb GYPA M/N GYPB S/s, S silencing, Uvar DO Doa/Dob , Hy, Jo DI Dia/Dib LU Lua/Lub
Total de pacientes: 28
Em 28 pacientes a genotipagem auxiliou na deduo do perfil antignico (Rh, Kell, FY, JK, Ss) e consequentemente na seleo de sangue fentipo compatvel Em 8 pacientes foi possvel diferenciar alo de auto Em 11 pacientes foi possvel identificar aloanticorpos aps adsores alognicas 8 pacientes foram genotipados como FYB-33 e puderam receber sangue Fy(b+)
Paciente feminina descendente de Africanos, 52 anos Transfuses prvias? Diagnstico: AHAI, Hb 6.8 Solicitado 2 unidades de sangue TDA positivo (IgG1) PAI positiva 2+ em AGH Painel positivo 2+ em AGH com todas as clulas, Autocontrole positivo
Silencing FY
ChipName
Sample WarnMsg
Fyx[Fy(b+w) No No 1 No No No
HgbS
Jo(a)
LWb
LWa
Dob
Cob
Fya
Doa
Coa
Lub
Fyb
Lua
Sc1
Sc2
Jka
Jkb
Dia
Dib
Hy
Cmmnt
A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8
+ + + + + -
+ + +
+ + + + + + + +
+ -
+ + + + + + + +
+ + + + -
+ + -
+ + + + + + +
+ + + + + + -
+ + + + +
+ + + + + -
S + -
s + + + + + + + +
+ -
+ + + + + + + +
+ + + + +
+ + + + + + + +
+ + + + + + + +
+ + + + + +
+ + + + + + +
+ -
+ + + + + + + +
+ + + + + + + +
+ + + + + + + +
+ ++ +
No No 1 2 2 1
No No 2
Fentipo da paciente: KFy(a (aJk(a+b (a+b- M+NLu(a (aO, Ro, K-k+, Fy(a-b-), Jk(a+b-), M+N-S-s+, Lu(a- b+), Hy+, Jo(a+), Di(a (aCo(a+b- Sc1,Do(a+b+), Hy+, Jo(a+), Di(a- b+), Co(a+b-), Sc1,-2
antiPaciente com anti-E, -K, -Jkb, -S Confirmao sorolgica com adsores seletivas (E- K- Jk(b S(bTransfuso fentipo compatvel (E-, K-, Jk(b-), S-) Fy(b+) e Fy(b+) Aumento nveis de Hb de 6.8 para 8.6 aps transfuso
Paciente masculino caucaside 64 anos Portador de AHAI, politransfundido Solicitado 2 unidades de sangue TDA positivo (IgG3) positiva/Auto AutoPAI positiva/Auto-controle positivo anti- autoAnticorpos identificados no soro: anti-D, auto-IgG Fenotipagem: K- Fy(a+b+),Jk(a+b+) (a+b+),Jk Fenotipagem: R1R2, K-, Fy(a+b+),Jk(a+b+) Provas de compatibilidade: incompatveis
GATA
normal,
100 pb
RHDCc
100 pb
100pb
RH ee
K2K2
JK B/JK B
S+
100 pb
s+
antiAcs identificados no soro do paciente: anti-D, Jka KSangue selecionado para a transfuso: rr, K-, Jk(a Fy(b (a(bJk(a-), Fy(b-) autoAvaliao do significado clnico do auto-ac antes da transfuso
Paciente transfundido a cada 3 semanas com 2 unidades de concentrado de hemcias Histria de anti-c, -E, -K Servio de Hemoterapia do Hospital relata reatividade adicional Suspeita:anti-Jka
Laboratrio de referncia confirma anti-c, -E, -K Autoanticorpo IgG tambm detectado Fenotipagem demonstra campo misto Por segurana o hospital seleciona unidades de hemcias c, E, K, Jk(a)
Genotipagem: RHD+, RH*C/C, RH*e/e, KEL*2/2, FY*A/B, JK*A/B Fentipo deduzido: R1R1, K-k+, Fy(a+b+), Jk(a+b+) Paciente no desenvolver aloanti-Jka 1 em 6 unidades so c, E, K 1 em 25 unidades so c, E, K, Jk(a)
Paciente com sinais e sintomas de hemlise Transfundido com 2 unidades de concentrado de hemcias Identificado: anti-Jka; Jk(a+CM) Interpretao: reao transfusional [recebeu hemcias Jk(a+) em outro hospital] Genotipagem: JK*A/JK*A Interpretao: Jk(a+), autoanti-Jka (IgG3 hemoltico)
Paciente com AHAI, O RhD+, TDA+ Histria transfusional:? Ac identificado no eluato e soro: anti-D Auto ou alo? Genotipagem: D fraco tipo 1 Interpretao: auto-anti-D (IgG1 no hemoltico) Sangue selecionado para transfuso: O RhD+
Paciente (O RhD-negativo) admitido no hospital com Hb de 4.5 g/L, 6 dias aps cirurgia e transfuso TDA positivo com C3; eluato negativo PAI: ac com fraca reatividade em PEG e LISSCoombs e reativo em papana Transfundido com hemcias O, Jk(b), Le(a) Hemlise aps transfuso
Nenhum anticorpo contra drogas detectado Teste de Donath Landsteiner negativo Interpretao hemlise foi um resultado da transfuso! Fentipo deduzido do gentipo:S+s+, K, Fy(ab+), Jk(a+b) Campo misto na fenotipagem Fya demonstrou sobrevida de hemcias do doador na circulao do paciente
GENOTIPAGEM NA CLNICA
Genotipagem de grupos sanguneos na clnica requer: Conhecimento em grupos sanguneos Experincia na interpretao das reaes de PCR utilizadas Obteno dos achados sorolgicos e da histria clnica do paciente antes de interpretar os resultados da genotipagem Conhecimento dos genes que codificam os antgenos de GS e suas formas variantes (fentipos e gentipos podem no correlacionar) na populao estudada
HEMOCENTRO UNICAMP
Laboratrio de Biologia Molecular de Grupos Sanguneos
19991999-Lab pesquisa protocolos moleculares na Imunohematologia clnica uso rotineiro quando resultados sorolgicos so questionveis ou duvidosos, duvidosos, fenotipagens no disponveis, disponveis, genotipagem pode auxiliar na recomendao da (auto/alo alo) conduta transfusional (auto/alo) integra o Consortium for Blood Group Genes (CBGG) participa de testes de proficincia (ISBT e NYBC)
Fenotipagem eritrocitria
Vantagens
Tcnica simples e rpida No requer equipamento sofisticado Sensibilidade e especificidade
Desvantagens
Valor limitado em pacientes recentemente transfundidos ou que apresentam teste direto da antiglobulina positivo 4+ (Auto IgG + C)
Genotipagem eritrocitria
Vantagens Resultados seguros nas situaes (AHAI) em que a hemaglutinao limitada
Imunohematologia
Fentipo Fen Gentipo Gen
+
aglutinao DNA