Ao del Centenario de Machu Picchu para el Mundo

FACULTAD DE MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIN HUMANA

ASIGNATURA

: Bioqumica Nutricional

TEMA

: Determinacin de Fe en sangre - Laboratorio N 7

DOCENTE

: Mg. Minaya Galarreta, Anglica

INTEGRANTES

: Cieza Tovar, Mercedes Hurtado Parisaca, Mara Morales Ramos, Gissel

AULA

: 303

CICLO

V Semestre.

2011
LIMA PER

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Prctica N 5

DETERMINACIN DE FE EN SANGRE

I. OBJETIVOS
Conocer las funciones del fierro en el organismo que se encuentran suspendidas en el plasma sanguneo. Identificar las diferentes patologas debido al nivel elevado o disminucin del fierro en suero.

II. MARCO TEORICO

Determinacin de fe en sangre Es una determinacin analtica en la que se mide el hierro que hay en la sangre, y poder diagnosticar los casos de ANEMIAS principalmente la ferropnica o microctica. El hierro se utiliza por el organismo principalmente como parte de la hemoglobina que es la protena transportadora de oxgeno a los tejidos. Por ello el 70 % del hierro del organismo se encuentra en esta protena el 30 5 restante se encuentra depositado en forma de ferritina y de hemosiderina para su posible utilizacin. El hierro es captado por la transferrina partir de su ingesta en la dieta.

La determinacin del hierro srico nos indicar la cantidad de hierro unido a la transferrina. El cuerpo de un adulto contiene 4 gramos de hierro. El 70% est concentrado en la hemoglobina que transporta el oxgeno desde los pulmones al resto del cuerpo. Este metal conforma la mioglobina de los msculos y es parte de numerosas enzimas. 2

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Nuestro cuerpo no absorbe el total del hierro de los alimentos, tan slo alcanza en promedio un 10% del total ingerido y este porcentaje vara an ms entre alimentos. El hierro que proviene de animales es ms absorbido que el procedente de fuentes vegetales. Hasta los 6 meses de edad se requieren 7 miligramos de hierro. Este requerimiento aumenta con la edad alcanzando los 18 miligramos en adolescentes y hasta 22 miligramos en la madre lactante. Entre las etapas de adolescencia y la adultez, la mujer requiere ms hierro que el hombre debido a la menstruacin, gestacin y lactancia.

Absorcin del hierro

Favorecen su absorcin Las protenas animales. Los cidos orgnicos (cido ctrico, cido lctico). La vitamina C Los azcares como el sorbitol y la fructosa. Dificultan su absorcin

Los taninos: sustancias presentes en el t, el caf, el vino, etc. Los oxalatos: presentes en espinacas, chocolate amargo, remolacha, t, etc. Los fitatos: en la cubierta de granos de cereal. La carencia de vitaminas. El exceso de ciertos minerales (fsforo, calcio, cinc, cobalto, cadmio, manganeso, plomo...) que compiten con los mecanismos de transporte del hierro. El dficit de cobre. Una dieta pobre en protenas.

Consideraciones especiales

Los medicamentos que pueden aumentar el hierro incluyen:

Los medicamentos incluyen: - colestiramina, - cloramfenicol, - colchicina, - deferoxamina, - meticilina, - alopurinol - testosterona.

que

pueden reducir el

hierro

- cloramfenicol, - estrgenos, - anticonceptivos orales - metildopa.

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III. MATERIALES Y METODOS

3.1 MATERIALES

Micropipetas Tubos de ensayo Tubos Gradilla Piceta Mandil Jeringa Ligadura Algodn Alcohol 70 Plumones o lapiceros marcadores Cmara

Muestras Sangre H20 St (Muestra estndar) M.P. (Muestra Problema) Muestra blanco

Sustancias qumicas Reactivo de color Rvo. Buffer

Equipos y Aparatos Centrfuga Espectrofotmetro

3.2 METODOS 3.2.1. Prueba del mtodo colorimtrico - determinacin de Fe en sangre. 4

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IV. DIAGRAMA DE FLUJO

Determinacin de Fe en sangre

Tres tubos

Rotular

Agregar

M.P. (Muestra Problema)

M.P. 500ml Agregar a c/tubo

Agregar

ST (Muestra estndar)

St 500ml

Rvo. Buffer 2ml

Agregar

B (Muestra Blanca)

Agua H2O 500ml

Luego agregar 1 gta. Luego Leer a 560 nm Espectrofotmetro Incubar 15min a o T ambiente Rvo. Color

Calcular por frmula

Buscar Clasificacin y anotar resultados

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V.- PROCEDIMIENTO

Para la Determinacin de Fe en sangre y para poder hallar la concentracin de M.P. (Muestra Problema) realizamos lo siguiente: a) Conseguir la muestra de sangre con mucho cuidado y con supervisin del docente encargado. Luego procedemos a extraer sangre.

b) Despus conseguimos 3 tubos, rotulamos (B, St, MP). A continuacin agregamos para el tubo blanco 500ml de H2O. Para el tubo St agregamos 500ml de St. Y 500ml de MP para el ltimo tubo de ensayo.

MP

Blanco

St

c) Enseguida agregamos 1 gta. de Reactivo de color a cada tubo. Incubamos 15 min a T ambiente. Luego leer 560 nm al espectrofotmetro.

d) Finalmente realizamos el clculo por medio de la frmula para la concentracin de muestra problema y Analizamos los resultados. MP = Abs. x MP X Abs. x St St

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VI. RESULTADOS

Presentamos los resultados con los valores correspondientes, dados en la prctica realizada. Analizaremos por criterio personal el resultado de la muestra.

ST = 100ug/dL Valor de referencia

St = 0.034

MP = 0.075

St (Muestra estndar) M.P. (Muestra Problema)

VII. CLCULOS Para la concentracin de muestra problema utilizamos la frmula luego anotamos y analizaremos los resultados.

MP =

Abs. x MP Abs. x St

St

i) Reemplazando valores:

MP =

0.075 nm 0.034 nm

100ug/dL

MP = 220.58 ug/dL 7

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VIII. DISCUSIONES Y RECOMENDACIONES

Los resultados en relacin al nivel de concentracin de la persona presento una

elevada concentracin de Fe en sangre con 220.58ug/dL, siendo la referencia para Valores Normales en mujeres entre 50- 170 ug/dL.

Puede ser que hubo alguna falla en el proceso al momento en agregar algn
reactivo para la prctica.

Para este tipo de mtodo es necesario que la persona se encuentre en ayunas. Si falta el hierro en el organismo se disminuye la formacin de hemoglobina y por
ello los glbulos rojos aparecen pequeos, plidos, que es lo define una anemia microctica o hipocroma.

Los

niveles

aumentados

de

Hierro

pueden

indicar:

Hemocromatosis,

Hemosiderosis, Anemia hemoltica, Hepatitis, Saturnismo, Cncer, Intoxicacin por hierro.

Los niveles disminuidos de Hierro pueden indicar: Anemia ferropnica, Prdida de

sangre crnica, Dietas sin hierro, Desnutricin, Embarazo, Cncer, Hematuria, Hipermenorrea crnica.

Se es necesario el uso de un laboratorio para poder realizar mejor la prctica.

Cualquier duda o consulta acercarse al encargado de laboratorio o docente.

Dejar todo limpio y ordenado terminada la prctica.

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VIII. CONCLUSIONES

La determinacin de Fe nos ayuda a medir la concentracin de hierro que hay en la

sangre, y as poder diagnosticar los casos de anemias.

El hierro es muy importante porque se utiliza por el organismo principalmente como

parte de la hemoglobina que es la protena transportadora de oxgeno a los tejidos.

La falta de hierro en el organismo se puede deber a la falta de su consumo en la

dieta, la alteracin en su absorcin intestinal, aumento en su consumo (nios en crecimiento, mujeres embarazadas), o por un aumento de prdidas (hemorragias, menstruacin, perdidas gastrointestinales ocultas, etc.)

En los valores puede haber ciertas diferencias por la tcnica o por criterios

de normalidad propios de laboratorios concretos, a veces en el rango de valores y otras veces por las unidades a las que se hace referencia. A veces las unidades se ofrecen en mol/l unidades SI.

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IX. CUESTIONARIO

1. Qu sucede cuando los valores de Fierro estn elevados y que cuando estn disminuidos?

Valores Normales Niveles normales de Hierro en adultos hombres de 80 a 180 g/dl Niveles normales de Hierro en adultos mujeres de 60 a 160 g/dl. Niveles normales de Hierro en nios menores de 1 ao de 100 a 250 g/dl. Niveles normales de Hierro en nios de 50 a 120 g/dl En estos valores puede haber ciertas diferencias por la tcnica o por criterios de normalidad propios de laboratorios concretos, a veces en el rango de valores y otras veces por las unidades a las que se hace referencia. A veces las unidades se ofrecen en mol/l unidades SI.

VALORACIN DE RESULTADOS ANORMALES Los niveles aumentados de Hierro pueden indicar:

Hemocromatosis Hemosiderosis Anemia hemoltica

Los niveles disminuidos de Hierro pueden indicar:

Anemia ferropnica Prdida de sangre crnica Dietas sin hierro Desnutricin

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2. Menciones otras tcnicas de determinacin de fierro.

Tcnicas analticas El aporte de hierro y los depsitos deben ser evaluados por mtodos

directos e indirectos, pero no existe un nico indicador ideal para valorar el estado del hierro en cualquier circunstancia clnica. Las medidas directas incluyen la flebotoma, el aspirado de mdula sea y la biopsia, la biopsia heptica acompaada de la medicin cuantitativa de la concentracin de hierro no-hemo. Estos mtodos permiten la determinacin de los depsitos de hierro de manera cuantitativa, especfica y sensible, sin embargo, tienen la desventaja de ser mtodos traumticos. Los mtodos indirectos son fciles y prcticos, pero son objeto de posibles interferencias y fallan

en aspectos como la especificidad, sensibilidad o ambos. Estos mtodos incluyen la medicin ferritina. del hierro srico, la transferrina, los receptores de transferrina y la

Mtodo colorimtrico (fenantrolina) Mtodo de plasma de acoplamiento inductivo Determinacin de hierro al estado de xido frrico Espectrofotometra determinacin de hierro Determinacin de hierro (Mtodo AOAC 944.02) Mtodo colorimtrico para la determinacin de hierro srico sin desproteinizacin. Mtodo Ferene Determinacin de hierro en fase solida por espectrofotometra derivada de segundo
orden.

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3. Mencione alguna tcnica no colorimtrica de deteccin de fierro. Mtodo espectromtrico de absorcin atmica

Es un mtodo instrumental que est basado en la atomizacin del analito en matriz lquida y que utiliza comnmente un nebulizador pre-quemador (o cmara de nebulizacin) para crear una niebla de la muestra y un quemador con forma de ranura que da una llama con una longitud de trayecto ms larga, en caso de que la transmisin de energa inicial al analito sea por el mtodo "de llama". La niebla atmica es desolvatada y expuesta a una energa a una determinada longitud de onda emitida ya sea por la dicha llama, una Lmpara de Ctodo hueco construida con el mismo analito a determinar o una Lmpara de Descarga de Electrones (EDL). Normalmente las curvas de calibracin no cumplen la Ley de Beer-Lambert en su estricto rigor. La temperatura de la llama es lo bastante baja para que la llama de por s no excite los tomos de la muestra de su estado fundamental. El nebulizador y la llama se usan para desolvatar y atomizar la muestra, pero la excitacin de los tomos del analito es hecha por el uso de lmparas que brillan a travs de la llama a diversas longitudes de onda para cada tipo de analito. En AA la cantidad de luz absorbida despus de pasar a travs de la llama determina la cantidad de analito existente en la muestra. Hoy da se utiliza frecuentemente una mufla de grafito (u horno de grafito) para calentar la muestra a fin de desolvatarla y atomizarla, aumentando la sensibilidad. El mtodo del horno de grafito puede tambin analizar algunas muestras slidas o semislidas. Debido a su buena sensibilidad y selectividad, sigue siendo un mtodo de anlisis comnmente usado para ciertos elementos traza en muestras acuosas (y otros lquidos). Otro mtodo alternativo de atomizacin es el Generador de Hidruros.

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4. Es necesario realizar ayuno para determinacin de fierro. Por qu? Para la mayor parte de los perfiles bioqumicos, como es el caso de la determinacin de fierro en sangre el paciente debe estar en ayunas de 12 a 14 horas, lo que significa que puede cenar entre las 6 y 7 pm del da previo a la determinacin y acudir al laboratorio entre las 7:30 y 8 am. La razn especfica del por qu se debe tomar en ayunas est en que los nutrientes ingeridos tardan ms o menos 12 horas en llegar a su destino. Si se toman durante el perodo de no ayuno se van a medir los que estn viajando en la sangre causando interferencia en la prueba, falseando los resultados. Ayunar significa que la muestra no debe tomarse antes de transcurridas 12 horas de haber ingerido la ltima comida el da anterior.

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IX. FUENTES BIBLIOGRFICAS

INSTITUTO

NACIONAL DE SALUD CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIN Y NUTRICIN DIRECCIN EJECUTIVA DE VIGILANCIA ALIMENTARIA Y NUTRICIONAL.

http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/artrevista/pdf/rpmesp2010.v27.n2.a6.pdf http://www.ins.gob.pe/ http://bvs.minsa.gob.pe/local/MINSA/1102_MINSA1014.pdf http://www.alimentacionsana.com.ar/Portal%20nuevo/actualizaciones/saludhier http://www.tuotromedico.com/temas/hierro_en_sangre.htm http://www.scielosp.org

http://dx.doi.org/10.1590/S1726-46342010000200006

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