LABORATORIO N 5 DIVERSIDAD CELULAR II.

CLULAS EUCARIOTAS (ANIMALES ESTRUCTURA Y DIVERSIDAD Y PROTOZOOS)

Actividad: Experimental

1. INTRODUCCIN Los organismos vivientes estn formados por unidades bsicas llamadas clula. Las caractersticas asociadas con la vida dependen de las actividades que ocurren dentro de las clulas. Algunos organismos unicelulares; pequeos se componen de una sola clula, llamados organismos unicelulares y los que estn formados por muchas clula reciben el nombre de Multicelulares. Las actividades de los organismos multicelulares se dividen entre sus diversas clulas. La mayora de las clulas tienen tamao microscpico, de aqu que el descubrimiento y estudio de estas, no se realiz y perfeccion hasta que se invent el microscopio; convirtindose en uno de los instrumentos ms importantes en la historia de la Biologa. El termino clula se debe al cientfico ingls R. Hooke, quien observ celdas de un corte fino de corcho a Las que llam clulas. Despus Antn Van Leeuwenhoek observ clulas sanguneas y en 1.833, Robert Brown al observar clulas vegetales

descubri una estructura central, la que actualmente se llama ncleo. Los resultados de muchas investigaciones principalmente las de M Schieiden (1838), T.H. Schwamn (1839) y R Virchow (1858) fundamentaron la base de la teora celular. LA TEORA CELULAR se puede resumir en estas afirmaciones: 1. Todos los organismos vivos estn formados por una o ms clulas. 2. La clula es la unidad funcional de un ser vivo. 3. Las clulas nuevas provienen de clulas preexistentes. 4. Todas las clulas contienen su informacin hereditaria. Esta teora se ha convertido en una de las ms importantes en la Biologa y ha servido para que los bilogos busquen nuevos conocimientos acerare las clulas y sus propiedades. A pesar de la diversidad celular en cuanto a tamao, forma y funcin; las clulas poseen caractersticas generales como su capacidad de existencia independiente que es el resultado de poseer limite fsico (La membrana celular que permite el

intercambio de sustancias con el medio), una maquinaria metablica que hace posible obtener energa y realizar transformaciones qumicas y un material gentico que dirige y controla la actividad celular. 2. OBJETIVOS 1. Observar algunos componentes estructurales que hacen parte de las clulas eucariotas. 2. Comparar las caractersticas morfolgicas y estructurales de las clulas animales y protistas. 3. Establecer algunas semejanzas y diferencias entre los diversos tipos de clulas observadas. 4. Diferenciar la diversidad celular en cuanto a forma y tamao. 5. Adquirir destreza en el uso y manejo del microscopio. 3. MATERIALES. 1. De Laboratorio: Microscopio, cubre y porta objeto, cuchilla nueva, lanceta, pipetas, goteros, palillos de dientes, algodn estril, pinzas, cajas petri, aguja de diseccin, papel o toallas absorbentes, guantes, frasco lavador, mechero. 2. Reactivos Azul de metileno (0,2%), solucin buffer de Wright, alcohol absoluto, agua destilada, agua en Bolsa, sudan III, formol, hematoxilina, eosina, rojo neutro, rojo congo, cido ascrbico o un citrato, etc. Placas histolgicas fijas.

3. Biolgicos Clulas de la mucosa bucal, sangre, un pedazo de hgado de cerdo u otro animal, un pedazo de rin, una muestra de esperma (semen), agua de charca, tocino o grasa animal, rana. 4. PROCEDIMIENTO PARTE A. OBSERRVACIN DE CLULAS DE LA MUCOSA BUCAL Previamente lvese la boca con agua y usando un palillo de dientes, raspe cuidadosamente el interior de la mejilla. 1. Colocar una gota de agua en el portaobjeto y luego dispersar el raspado en forma de zig-zag evitando pasar ms de un vez por el mismo sitio, lo cual asegura la separacin de la clula facilitando la observacin. 2. Calentar a la llama del mechero sin que llegue a quemar el portaobjeto sobre el dorso de la mano. 3. Colocar el porta objeto sobre el soporte para tensin y agregar unas gotas de azul de metileno, dejando actuar el colorante 2 o 3 minutos. 4. Verter el colorante sobrante y lavar la preparacin hasta que no suelte color. 5. Colocar un cubre objeto de forma adecuada, evitando la formacin de burbujas. 6. Dibujar forma y arreglo de las clulas y algunas estructuras celulares como membrana, ncleo, citoplasma, grnulos citoplasmticos y otros).

alcohol absoluto y dejar que el alcohol se evapore para fijar la preparacin. 5. Cubrir con unas gotas de hematoxilina y dejar actuar durante 15 minutos. Evitar la desecacin del colorante agregando ms liquido. 6. Lavar la preparacin y aadir unas gotas de eosina dejndola actuar 1 minuto. 7. Volver a lavar hasta que no queden restos de colorante. 8. Dejar secar aireando el portaobjeto o bien al calor muy lento de la llama mechero. 9. Observar al microscopio. Espacio para dibujar lo observado Descripcin:_________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ _______________________ PARTE B. OBSERVACIN SANGUNEAS DE CLULAS 1. Linfocitos: de tamao aproximado al de los glbulos rojos, tienen un solo ncleo que ocupa casi todo el glbulo. 2. Monocitos: son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente ncleo grande, redondo, son los ms mviles y su funcin principal es la fagocitosis. 3. Polimorfonucleares: ncleo fragmentado o arrosariado. Pueden ser eosinofilos, con abundantes granulaciones teidas de rojo por la eosina, neutrofilos y basfilos. Las plaquetas no son visibles ya que precisan una tcnica especial de tincin. Al microscopio se ver con un dominio predominante los glbulos rojos, hemates o eritrocitos teidos de color rojo por la eosina. No tienen ncleo y son ms delgados por el centro que por los bordes. Los glbulos blancos o Leucocito; se identifican fcilmente por la presencia del ncleo, teido de morado por la hematoxilina hay varias clases de leucocitos:

1. Con la lanceta estril realizar una puncin en el dedo ndice. (Figura 5. 1). 2. Depositar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos y realizar un extendido. 3. Colocar el portaobjetos como lo indica la figura 5.2. Deslizarlo sobre toda la superficie del porta de manera que se pueda obtener una fina pelcula de sangre. El porta absorbe la gota y la arrastra, pero sin pasar nunca por encima de ella para no daar los hemates. 4. Colocar el frotis de sangre sobre la cubeta de tincin y aadir unas gotas de

Para lo anterior utilice el lente de inmersin (repase procedimiento) Realice los respectivos esquemas y la descripcin de lo observado con sus propias palabras.

2. Localizar estructuras, esquematice y describa lo observado. Montar una placa histolgica de testculo y comparar PARTE D. OBSERVACIN DE CLULAS ADIPOSAS 1. Con ayuda de un bistur, cortar una finsima capa de grasa. 2. Colocar el corte en un porta y cubrir con unas gotas de formol. 3. Dejar actuar 4 minutos. 4. Lavar la muestra con agua y cubrir con unas gotas de Sudn III. 5. Dejar actuar unos 5 minutos.

Espacio para dibujar lo observado Descripcin:_________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ _______________________ Montar una placa histolgica de sangre y comparar. ___________________________________ ___________________________________ _____________________________ PARTE C. OBSERVACIN REPRODUCTORAS DE CLULAS

6. Volver a lavar la preparacin con agua, cubrir con un cubreobjetos y observar al microscopio.

Espacio para dibujar lo observado Descripcin:_________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________

1. Elaborar un montaje con la muestra de esperma (una gota) y observe con menor y mayor aumento.

___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ _________________ Montar una placa histolgica de tejido adiposo (grasa) y comparar ___________________________________ ___________________________________ _____________________________ PARTE E. OBSERVACIN HEPTICAS DE CLULAS

Descripcin:_________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ _______________________ Montar una placa histolgica de sangre y comparar. ___________________________________ ___________________________________ _____________________________ PARTE F. OBSERVACIN DE CLULAS RENALES

1. Tomar un pedazo de hgado y realizar un corte transversal y luego un raspado superficial sobre ste con un palillo y dispersarlo sobre un porta objeto en forma de zig-zag. 2. Realizar la misma tincin que aplico para las clulas sanguneas; esquematice todo lo observado con su descripcin.

1. Realizar el mismo procedimiento con las clulas del rin.

Espacio para dibujar lo observado Descripcin:_______________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________

Espacio para dibujar lo observado

Montar una placa histolgica de rin y comparar ___________________________________ ___________________________________ _____________________________ PARTE G. OBSERVACIN DE CLULAS SANGUNEAS Y FROTIS DE EPIDERMIS DE RANA. 1. Extraer sangre a una rana y depositar una gota en la parte central de un portaobjetos. 2. Proceder como en B 3-Anotar sus observaciones. 4. Para la observacin de clulas de piel de rana tome un palillo de dientes y frtelo sobre la piel de la rana y colquela en un pota-objetos y tala con azul de metileno. Observe con diferentes aumentos y dibuje. PARTE H OBSERVACIN DE MICROORGANISMOS DE AGUA DULCE (PRINCIPALMENTE (PROTOZOOS) PROTISTAS) 1. Depositar una o dos gotas de agua de charca sobre un porta objeto. 2. Colocar el cubreobjeto encima de la muestra y examinar el montaje con los diferentes objetivos. 3. Identificar los organismos que seguramente encontrar y los diferentes detalles estructurales como cilios, flagelos,

cloroplastos, observar.

vacuolas,

etc.

que

logra

4. Esquematizar y describir lo observado. 5. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS 1. Realice un cuadro comparativo con cada una de los diferentes tipos de clulas que observ, excepto las sanguneas. (Solo observaciones). 2. Realice un cuadro comparativo con las observaciones que realiz acerca de las muestras de sangre de humanos y de rana. 3. Caracterice morfolgica y fisiolgicamente los diferentes tipos de clulas observadas. 4. Indique la taxonoma para los protistas y caracterice cada grupo. 5. Las clulas epiteliales estn unidad estrechamente entre s formando una estructura continua. Las clulas de la mucosa bucal (el interior de la mejilla), sin embargo, estn separadas a qu atribuye usted esta condicin?. 6. Para qu se agrega hematoxilina?

Figura 5.1. Puncin en el dedo para obtener una muestra desangre.