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PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRO ATIVIDADE: URINA ROTINA (UROFITA 10 DLU) RESPONSVEL: TCNICO DE LABORATRIO

Padro n: POP.LAB.009 Estabelecido em: Outubro/2011 N da Reviso: 00

I CONTROLE HISTRICO REVISO 00 DATA 20/10/2011 N PGINAS 09 HISTRICO ALTERAO Emisso Inicial ELABORAO Joelma Saraiva Mendes VERIFICAO Edmar APROVAO Joelma Saraiva Mendes

MATERIAL Tubos plsticos cnicos graduados Grades adequadas Ponteiras Pipetas Lminas Lamnulas Microscpio Centrfuga Ambiente limpo, organizado, arejado, com luminosidade adequada e mobilirio ergonmico SIGLAS MT: Mapa de Trabalho NA: No se Aplica POP: Procedimento Operacional Padro PELM: Programa de Excelncia Para laboratrios Mdicos TAREFAS

1- Sinonmia EAS, Rotina e Sumrio de Urina. 2- Preparo do Paciente Urina recente (jato mdio ou 1 urina da manh) ou que o cliente esteja com intervalo de no mnimo 4 horas sem urinar;

3- Tipo de Amostra Urina por mico espontnea: urina 1 jato ou urina jato mdio

Amostra aleatria (ao acaso) Cateterismo vesical. Puno supra pbica Amostras peditricas (coletores de plstico)

4- Coleta Proceder higienizao das mos e dos genitais, antes da coleta, da seguinte forma: fazer a assepsia do local com sabo e enxaguar bem. Secar com toalha limpa ou papel toalha; Colher jato mdio (2 jato), ou seja, desprezar uma amostra inicial (1 jato). Nos casos em que o mdico solicitar o exame em 1o jato, dever coletar a amostra inicial (1o jato) e desprezar o restante da mico; Colher a urina diretamente em um frasco estril fornecido pelo laboratrio ou adquirido em drogarias; Identificar o frasco com o nome completo;

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Entregar o material no laboratrio at no mximo em 2 horas aps a coleta. Em coletas infantis, o saco coletor dever ser trocado de 1em 1 hora, aps nova higienizao. Evitar colher a amostra em perodo menstrual (caso no seja urgncia). Volume Recomendvel 12,0 ml Conservao Pr-Analtica O mtodo de conservao mais usado a refrigerao. preciso deixar que a amostra volte temperatura ambiente antes da anlise qumica com fitas reativas.

4.1-

4.2-

4.3Preservao/Armazenamento Ps-Analtica Temperatura de 2 a 8C por 24 horas


5- Metodologia Densidade, pH, Protenas, Hemoglobina, Nitrito, Glicose, Corpos Cetnicos, Bilirrubina e Leuccitos: Tiras Reagentes. Sedimentoscopia: Analise Microscpica. 6- Princpio do Teste As tiras reativas constituem-se em pequenos quadriculados de papel absorvente impregnados com substncias qumicas presos a uma tira de plstico. A reao qumica que produz determinada colorao se d quando o papel absorvente entra em contato com a urina. As cores resultantes so interpretadas comparando-se com uma tabela de cores fornecida pelo fabricante. Nesta tabela aparecem vrias tonalidades de cor para cada substncia a ser testada. Comparando-se cuidadosamente as cores da tabela com a cor desenvolvida na tira, pode-se inferir um valor semi-quantitativo: traos, 1+, 2+, 3+ ou 4+. De acordo com o produto que se utiliza, estes permitem a deteco de glicose, bilirrubina, corpos cetnicos, hemoglobina, protena, nitrito, leuccitos e a determinao de pH e densidade da urina. 7- Reagentes / Controles / Padres / Calibradores 7.1- Reagentes/Controles/Padres/Calibradores Utilizados: Fitas reativas Urofita 10 DLU (Prodimol Biotecnologia) Reagentes para testes confirmatrios: cido sulfossaliclico 20%, Reagente de Fouchet, Cloreto de Brio 10%, Hidrxido de Sdio 2% e cido Actico 2%. Padres/Calibradores: NA Controles: Urinas do PELM 7.2- Preparo dos Reagentes: cido Sulfossaliclico cido Sulfossaliclico ..........20g H2O tipo II q.s.p ..............100mL Dissolver sob agitao e completar o volume de 100mL. Cloreto de Brio 10% Cloreto de Brio .................10g H2O tipo II q.s.p ............100mL Dissolver sob agitao e completar o volume de 100mL. Hidrxido de Sdio 2% Hidrxido de Sdio ............2g H2O tipo II q.s.p ..........100mL

PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRO ATIVIDADE: URINA ROTINA (UROFITA 10 DLU) RESPONSVEL: TCNICO DE LABORATRIO Dissolver sob agitao e completar o volume de 100mL. cido Actico 2% cido Actico pa .............2mL H2O tipo II q.s.p...........100mL

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7.3- Estabilidade e Conservao As tiras devem ser armazenadas no recipiente original que deve ser mantido bem tampado. As reas reagentes so estveis e mantm o desempenho especificado at a data de expirao indicada no rtulo quando o frasco mantido em temperaturas inferiores a 30 C. No armazenar em refrigerador. Reagente Sulfossaliclico: conservar em temperatura ambiente, protegido da luz, at por um ano. Reagente de Fouchet: conservar entre 15 e 30C em frasco mbar at a data de validade impressa no rtulo. Hidrxido de Sdio 2%: conservar em temperatura ambiente em frasco plstico por at um ano. Cloreto de Brio 10%: conservar em 15 e 25 C em frasco plstico por at um ano. cido Actico 2%: conservar em temperatura ambiente por at um ano. 8- Procedimento Tcnico 8.1- Inspeo Inicial e Registro Inspecionar a amostra e registr-la de acordo com o padronizado no setor. 8.2- Identificao das Amostras Identificar com o nmero do MP e nome completo do paciente. 8.3 Execuo: 8.3.1 Preparo da Amostra Homogeneizar a urina levemente por inverso. Amostras refrigeradas devem estar temperatura ambiente antes de serem testadas, uma vez que algumas das reaes qumicas da tira reagente so dependentes da temperatura. Transferir 10 mL de urina para um tubo cnico. Remover do frasco somente a quantidade de tiras necessria para uso imediato. No tocar nas reas de reao. Imergir a fita reativa e aps aproximadamente 60 segundos e proceder leitura (isto possvel realizando sempre, no mximo, 5 testes de cada vez). No realizar a leitura aps 120 segundos. Proceder leitura das reas reagentes e anot-las no mapa de produo/ficha de bancada. O resultado da pesquisa dos caracteres qumicos expresso em cruzes quando positivo, de acordo com a cor desenvolvida na rea reativa. Quando a reao negativa, o resultado zero (0). Para a pesquisa de nitrito liberado apenas positivo ou negativo. Para urinas hemorrgicas e/ou com cor que impossibilite realizao dos caracteres qumicos, os mesmos no devem ser liberados e no campo obs deve-se liberar: A densidade, pH e os elementos anormais foram prejudicados devido ao aspecto/cor da urina. Centrifugar por 5 minutos a 3000 (+/- 200) rpm. Desprezar o sobrenadante, deixando aproximadamente 0,5 mL. Homogeneizar levemente o sedimento e colocar uma gota em uma lmina de vidro. Percorrer todo o sedimento no aumento de 100X. Passar para o aumento de 400X, fazer a contagem e anotar os elementos encontrados. Registrar os resultados no MT ou ficha especfica para urina rotina/gram e caderno setorial. 8.4- Testes Confirmatrios A)- Protenas (cido sulfossaliclico 20%) Colocar 3,0 mL de urina em um tubo de ensaio. Colocar duas gotas do cido sulfossaliclico 20%.

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Resultado negativo: ausncia de turvao e resultado positivo: presena de turvao.

B)- Bilirrubinas (Reagente de Fouchet) Colocar quatro gotas de urina no papel filtro e impregnado com cloreto de brio e uma gota do reagente de fouchet. Resultado positivo: aparecimento de cor verde e resultado negativo: aparecimento de outra cor. C)- Confirmao do Material (Urina) Colocar uma gota de cloreto de brio 10% em 0,5 ml de urina. Se houver turvao, o material urina. D)- Identificao de Cristais Hidrxido de sdio 2% usado para dissolver urato amorfo e cido actico 2% usado para dissolver fosfato amorfo e diferenci-los de flora bacteriana. 8.5- Padronizao do Resultado da Sedimentoscopia da Urina Rotina A) Picitos e Hemcias: Raros: menos de 1 por campo; N : menos de 25 p/c; Numerosos: acima de 25 p/c. B) Epitlios Raros: menos de 1 por campo; N: menos de 15 p/c; Numerosos: acima de 15 p/c. C) Cilindros Contar em aumento de 100X. Liberar n por lmina para contagem at 09 e por campo quando superior a 09. Especificar tipo: Hialinos, Granulosos e Granulosos Largos, Hemticos, Hemoglobnicos, Leucocitrios, Creos, Graxos e Epiteliais. D) Muco Escasso; Moderado; Abundante. E) Cristais Presente: identificar o cristal e Ausente. F) Flora Bacteriana Escassa; Ligeiramente aumentada; Aumentada; Muito aumentada. 8.6 Consideraes A presena de mais de 7 clulas epiteliais escamosas p/c de pequeno aumento (100X) indicativo de contaminao por secreo vaginal nas mulheres. Reao de nitrito negativa no exclui o diagnstico de infeco urinria. Densidade menor que 1010 e/ou pH maior que 7,5 em geral destroem os elementos figurados. Para pH acima de 9,0 deve-se recoletar amostra. O termo raros utilizado quando se encontra menos de 10 (dez) elemento figurado por lmina. O sedimento urinrio pode conter Trichomonas (especificar vaginalis para o sexo feminino e sp para sexo masculino), espermatozides (relatados apenas quando for do sexo masculino) e clulas leveduriformes. Este achados so descritos na observao. Outros dados, quando presentes, tambm devem ser descritos: presena de aglomerados de picitos, parasitas (ovos de helmintos, caros, etc.) e outros. 8.7- Clculos Densidade acima de 1,030: deve ser feita diluio (1:2) da urina com gua destilada. Multiplicar os dois ltimos

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dgitos do valor da leitura por 2 para obter a densidade real. Por exemplo, se o valor para a diluio de 1.026, a densidade da urina ser de 1.052. 9- Calibrao da Metodologia NA 10- Controle de Qualidade 10.1- Controle Interno da Qualidade Comparativo Interno Controle dirio com urina do PELM 10.2- Controle Externo da Qualidade Controle peridico do PELM 10.3 Registro do Controle de Qualidade Em planilhas prprias arquivadas no setor

11- Limitaes do Mtodo (Interferentes)


Vrios fatores so capazes de interferir nos mtodos analticos empregados na tira reagente e o conhecimento destes fundamental para a correta interpretao dos resultados. Dentre estes fatores interferentes, destacamse agentes de limpeza e desinfetantes, medicamentos e cido ascrbico em concentraes elevadas na urina. Qualquer medicamento novo deve ser considerado, a princpio, como fonte potencial de interferentes. Homogeneizao inadequada da amostra. Tempo de centrifugao e velocidade de rotao incorretos. Coleta inadequada da amostra. Conservao inadequada das tiras reativas. Ressuspeno incorreta do sedimento. Urina em excesso na tira reativa pode mover o cido do tampo do reagente da protena vizinha sobre a rea do pH e mudar a leitura do pH para um pH cido, embora a urina sendo testada originalmente neutra ou alcalina. Isto chamado fenmeno Run-over.

11.1- Fatores interferentes A)- Sangue Concentraes menores que 40 mg/dL de cido ascrbico no influenciam o resultado. Reaes falso positivas podem ser causadas por resduos de produtos de limpeza que contenham oxidantes, tais como hipoclorito. B)- Urobilinognio O teste inibido por grandes quantidades de formaldedo. Exposio da urina luz por perodos prolongados de tempo pode levar oxidao do urobilinognio e conseqente reduo do resultado ou mesmo obteno de falso negativo. Resultados muito altos ou falso positivos podem ocorrer na presena de corantes usados com fins teraputicos ou diagnsticos. Grandes quantidades de bilirrubinas produzem colorao amarela. C)- Bilirrubina Alguns componentes de urina podem produzir colorao amarela na fita. cido ascrbico e nitrito em altas concentraes inibem o teste. Exposio da urina luz por perodo prolongado pode levar a resultado falso negativo ou a valores muito baixos. Resultados muito altos ou falso positivos podem ocorrer na presena de corantes usados com fins teraputicos ou diagnsticos.

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D)- Protenas Resultados falso positivos so possveis em amostras alcalinas com pH acima de 9. O mesmo pode ocorrer quando o paciente estiver em uso de medicamentos contendo quinino, aps infuso com polivinilpirrolidona, ou quando o frasco usado para coleta da amostra contiver resduos de desinfetantes. A colorao do teste pode ser mascarada pela presena de corantes de uso mdico, tais como azul de metileno, ou pigmentos provenientes de certos alimentos. E)- Nitrito Resultados falso negativos podem ser produzido por altas doses de cido ascrbico, por terapia antibitica, ou por concentraes muito baixas de nitratos na urina, ocasionadas por dieta pobre em nitratos ou por alta diluio da amostra por diurese. Resultados falso positivos podem ocorrer pela presena de corantes de uso diagnstico ou teraputico. F)- Cetona Fenilcetonas em altas concentraes interferem com o teste, produzindo cores variadas. Compostos ftalenicos interferem produzindo colorao vermelha. cido hidroxibutrico no detectado. G)- Glicose Grandes quantidades de cido ascrbico que podem estar presentes na urina aps ingesto aumentada de vitamina C podem levar a uma reduo na reao ou resultado falso negativo. Efeito inibitrio tambm produzido pelo cido gentsico. Reaes falso positivas podem ser causadas por resduos de produtos de limpeza que contenham oxidantes, tais como hipoclorito. H)- Densidade A natureza qumica do teste pode causar pequenas diferenas entre os resultados determinados em fita e outros mtodos, principalmente quando presentes certos constituintes em quantidades elevadas. Por exemplo, a elevao na densidade que ocorre na dependncia da concentrao de glicose, no possvel ser determinada em fita quando a concentrao desse constituinte for superior a 1000 mg/dL. Leituras elevadas de densidade podem ocorrer na presena de quantidades moderadas de protenas. Urinas alcalinas altamente tamponadas podem apresentar resultados relativamente baixos. I)- Leuccitos Uma reao fraca pode ser esperada no caso de proteinria acima de 500 mg/dL e concentrao de glicose acima de 2000 mg/dL, assim como no caso de pacientes em uso de cefalexina ou gentamicina. A presena de formaldedo como preservativo pode levar a resultado falso positivo. Excreo de bilirrubina, nitrofurantona ou outro componente de colorao forte pode mascarar a cor da reao. Corrimentos vaginais podem levar a resultados falso positivos.

12- Valores de Referncia


Existem diversos valores de referncia. A maioria das fontes utiliza uma faixa de referncia de pH entre 5 e 6, densidade entre 1010 e 1025, de raros epitlios p/c (400X), de 0-5 eritrcitos p/c (400X), 0-5 leuccitos p/c (400X), de muco escasso, de cilindro e flora ausentes. 13- Linearidade / Limite de Deteco Bilirrubina: 0,5 a 1,0 mg de bilirrubina/dL Cetona:10 mg/dL de cido acetoactico ou 50 mg/dL de acetona Densidade: linear at 1030 Glicose: limite de deteco de 50 mg/dL Leuccitos: entre 10 e 25 leuc/L Nitrito: 0,05 a 0,1 mg de nitrito/dL

PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRO ATIVIDADE: URINA ROTINA (UROFITA 10 DLU) RESPONSVEL: TCNICO DE LABORATRIO pH: entre 5,0 e 9,0 Protenas: limite de deteco de 10 mg/dL Urobilinognio: limite de deteco de 0,1 mg/dL Hemcias ntegras: 5 a 10 hem/L Hemoglobina livre: 0,015 mg/dL de urina

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14- Critrios Para Liberao do Laudo 14.1- Critrios para Repetio do Teste (Mesma Amostra) O teste deve ser repetido quando houver discordncia entre a sedimentoscopia e a pesquisa dos elementos anormais e quando aplicvel, com a clnica do cliente. 14.2- Critrios para Solicitao de Recoleta pH acima de 9,0 Amostra insuficiente. Resultados incompatveis com os dados clnicos ou conforme avaliao pr-analtica. Frascos inadequados, amostras contaminadas com fezes, sangue menstrual, cremes, pomadas, etc e amostras colhidas fora do laboratrio, quando no se sabe o horrio da coleta . 14.3- Valores para Notificao Especial Resultados qualitativos: avaliar individualmente glicosria e cetonria (Comunicar quando aplicvel). Presena de cristais patolgicos em quantidade significativa (1+ ou mais): Cristais de Cistina, Cristais de Leucina e Cristais de Tirosina. 15- Aplicaes Clnicas / Interpretao Bilirrubina: Ictercias obstrutivas e hepatocelulares. Cetonas: Diabetes Mellitus no controlado, alcoolismo, jejum prolongado, desidratao, vmitos, diarria e febre. Densidade: est elevada nos casos de desidratao, eclmpsia, cirrose heptica e insuficincia cardaca; diminuda com ingesto de grande quantidade de lquidos, alterao na capacidade de concentrao da urina e uso de diurtuicos. Glicose: leso tubular, glicemias acima de 180 mg/dL e leses no sistema nervoso central. Leuccitos: Pielonefrite, cistites, uretrites, tumores, lupus e glomerulonefrites. Nitrito : O teste do nitrito indica presena de bactrias na urina que so capazes de converter nitrato em nitrito podendo auxiliar no diagnstico da infeco urinria. Bactrias que convertem nitrato em nitrito incluem, principalmente, bactrias gram-negativo como Escherichia coli, Proteus, Klebsiella, Citrobacter, Aerobacter, Salmonella, alm de algumas cepas de Pseudomonas e raras de Staphylococcus e Enterococcus. pH: Urina alcalina freqentemente indica que a amostra foi mantida temperatura ambiente por mais de 2 horas, entretanto, quando colhida e armazenada adequadamente, pode sugerir infeco urinria, alcalose respiratria, vmitos repetidos e dietas ricas em frutas e legumes. Urina cida indica diarrias severas, acidose metablica e respiratria. Protena: Leso da membrana glomerular, mieloma mltiplo, pr-eclmpsia, doenas renais causadas por diabetes mellitus, reabsoro tubular deficiente, proteinrias transitrias, ortostticas e lupus. Hematrias: Pr-renal: coagulopatias, anticoagulantes, anemia falciforme e talassemia.; Renal (Glomerular): glomerulonefrite, nefrite lpica e hematria familiar benigna; Renal (No glomerular): infarto renal, tuberculose renal, pielonefrite, tumores, trauma, abuso de analgsicos e doena renal policstica; Ps-renal: clculo, cistites, prostaites, corpos estranhos, uretrites e endometriose.

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Hemoglobina: Hematria: litases, glomerulonefrites, pielonefrites, tumores e traumas; Hemoglobinria: anemia hemoltica, infeces graves, exerccios e transfuses; Mioglobinria: trauma vascular prolongado e convulses. Clulas Epiteliais: Tubulares: recm-nascidos, pielonefrites, rejeio renal e necrose tubular aguda; Transio: cateterizao urinria e carcinoma renal; Pavimentosas ou Escamosas: provinientes do revestimento da vagina, uretra feminina e pores inferiores da uretra masculina. Cilindros Hialinos: exerccio fsico intenso, febre e desidratao. Cilindros Hemticos: glomerulonefrite, nefrite lpica, infarto renal e endocardite bacteriana sub-aguda; Leucocitrios: pielonefrite, glomerulonefrite e nefrite lpica. Cilindros Epiteliais: infeces virais, exposio a substncias nefrotxicas. Cilindros Granulosos: exerccios rigorosos, doena renal glomerular ou tubular, xtase do fluxo urinrio e rejeio a transplante renal; Creos: insuficincia renal crnica, hipertenso maligna, nefropatia diabtica, rejeio de transplantes, xtase do fluxo urinrio, inflamao e degenerao tubular. Cilindros de Corpos Graxos: sndrome nefrtica, lupus e intoxicao por mercrio. Cristais sem significado patolgico: Urato amorfo, fosfato amorfo, fosfato triplo, cido rico, oxalato de clcio, carbonato de clcio e fosfato de clcio. Cristais com significado patolgico: Cistina (Cistinose), tirosina e leucina (leses hepticas graves), colesterol (obstruo do fluxo linftico).

16- Biossegurana Vide POP.LAB.002- Boas Prticas de Biossegurana CONTINGNCIA AO CORRETIVA Riscos Relacionados: Assistencial, financeiro, ocupacional, civil e ambiental Contingncia: Vide POP.LAB.016-Plano de Contingncia Ao corretiva: Vide POP.LAB.019-Controle do Produto No Conforme REGISTROS MT Ficha vida dos aparelhos utilizados Controle interno da qualidade Controle externo da qualidade (PELM) Check-list dos aparelhos utilizados Sistema PLERES (Sistema de Informtica) Lanamento de Resultados INDICADORES Taxa de recoletas Pesquisa de satisfao do cliente Nmero de acidente institucional Taxa de adequao do PELM

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS Laboratrio Clnico - Richard Ravel, 5 edio Informativo Tcnico Labtest Fitas reativas Informativo Tcnico Prodimol Biotecnologia UROFITA 10 DLU Uroanlise e Fluidos Corporais Susan King Strasinger, 3 edio

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