LABORATORIO CRIMINALISTICO PROTOCOLO DE PROCEDIMIENTO 1- FINALIDAD DEL LABORATORIO Proporcionar al investigador, datos obtenidos a travs del anlisis, de los

indicios que puedan orientar la investigacin. Estos datos ayudan a determinar el mecanismo del hecho o a esclarecer relaciones entre muestras, personas y/o lugares. Aportar pruebas cientficas para el esclarecimiento del hecho punible investigado, con resultados obtenidos en los diferentes trabajos periciales y en cumplimiento del objeto de pericia. 2- OBJETIVOS GENERALES DE LA PERICIA EN UN LABORATORIO QUIMICO FORENSE Obtener resultados que certifiquen naturaleza de los indicios (sangre, orina, pelos, etc.). Obtener resultados que establecen semejanza o diferencia entre testigos indubitados y los indicios (pelos, pintura, tinta, etc.). Investigar la presencia de sustancias especficas o grupos de ellas (drogas de abuso, residuos de disparo, semen, alcohol, etc. Los resultados obtenidos en su mayora tienen valor analtico de certeza, aunque para la investigacin pueden resultar de carcter orientativo. 3- METODOS UTILIZADOS FISICOS: basados en la observacin y determinacin de propiedades fsicas como el peso, color, forma, tamao, punto de fusin, punto de ebullicin, etc. QUIMICOS: involucran reacciones qumicas de topo tipo, que responden a las propiedades qumicas de la materia, siendo las ms comunes las reacciones calorimtricas, enzimticas y de formacin de cristales. INMUNOLOGICOS: de gran utilidad en la identificacin de sustancias, mediante la reaccin antigeno-anticuerpo. INSTRUMENTALES: son los anlisis que utilizan determinados instrumentales para su realizacin. Opticos: utilizacin de lupa, microscopio, microscopio de comparacin forense y el de barrido electrnico. Cromatogrficos: incluye los cromatgrafos lquido y de gas. Espectrofotometra: Basados en la medicin del espectro de luz o emisin de energa caracterstica para cada sustancia. 4- MUESTRAS DE ESTUDIO La metodologa general para el estudio de los indicios se basa en la comparacin, por lo que se deduce que deben disponerse de dos tipos de muestras.

TESTIGO, PATRON O INDUBITADO: Cuando se trata de una muestra de naturaleza conocida o inequvoca, por lo que servir de Standard o Control INDICIO, MATERIAL MUESTRA O DUBITADO: Es la sustancia, material u objeto levantado con relacin al hecho investigado, de cuya naturaleza no se tiene certeza. De acuerdo a su naturaleza estos son: FISICOS: armas de todo tipo (blancas, de fuego, contundentes, etc.), pigmentos (pintura, tintas. etc.), papel, vidrio, prendas de vestir. QUIMICOS: sustancias qumicas en general, medicamentos, drogas de abuso, polvos, lquidos. BIOLOGICOS: fluidos biolgicos que provienen de seres vivos o cadveres (sangre, semen, saliva, leche, humor vtreo, heces, meconio) y tejidos en general (huesos, pelos, piel, etc.) 5- CUIDADOS GENERALES CON LOS INDICIOS Teniendo en cuenta la naturaleza qumica o biolgica de los indicios, el manipuleo de los mismos debe ser cuidadoso, a fin de resguardar la salud del personal y evitar contaminaciones con materiales forneos que conduzcan a resultados errneos de laboratorio. Por lo tanto hay que aplicar las siguientes normas: Utilizar guardapolvos, guantes de ltex. gafas, gorros, tapabocas Fijar los indicios por mtodos adecuados. Si los indicios fsicos contienen muestras biolgicas, antes de ser embalados deben ser secados al aire libre, sin exponerlos al sol, como en el caso de prendas de vestir. Si se trata de sangre, orina u otros indicios biolgicos en su estado natural, es imprescindible su refrigeracin antes y durante su remisin al laboratorio. Remitir al laboratorio con el correspondiente pedido de pericia y la atencin de la cadena de custodia. El laboratorio dispone de formularios de recepcin de indicios donde se detallan datos del hecho a investigar, como ser la fecha y hora en que ocurri el hecho, la jurisdiccin a la cual corresponde, el nombre de la vctima, el nombre del supuesto autor, los indicios que son remitidos, el objeto de la pericia, la fecha y hora de recepcin del o los indicios, el nombre y la firma de la persona que recepciona y de la que entrega el indicio al laboratorio. Cada indicio debe ser verificado en el momento de su recepcin para corroborar si coincide con lo que figura en la nota de remisin del mismo. A cada indicio se le asigna una numeracin que empieza con el 01 al comienzo de cada ao, sucesivamente hasta el ltimo da cada ao, esa misma numeracin se le da al expediente que corresponde al caso y son guardados en biblioratos en la numeracin correspondiente.

 En un cuaderno de actas, se debe asentar el nmero del caso, los indicios recepcionados, el objeto de la pericia, el nombre de la persona que recepcion los indicios, para tener un registro rpido del laboratorio. Cada indicio debe ser correctamente numerado con el nmero que le corresponde. Distribuir los indicios numerados al rea que le corresponde para sus estudios correspondientes, por ejemplo al rea biolgica, al rea toxicolgica, al rea balstica, al rea industrial, etc. Si los indicios son biolgicos por ejemplo sangre, orina, contenido gstrico, vsceras, secrecin vaginal y/o anal, deben ser refrigerados en la heladera. En el caso de que los indicios sean prendas de vestir y si las mismas son recepcionadas hmedas o mojadas deben ser colocadas en la sala de secado de evidencias, sobre papel madera o papel diario en las mesadas correspondientes. Cuando los indicios recepcionados corresponden a restos de tejidos en los que deben ser investigados residuos de disparos de arma de fuego, deben ser dejado bajo campana de extraccin para su secado y posterior anlisis. En el caso de pelos ellos deben ser colocados en sobres de papel con la numeracin que les corresponden y luego colocados en cajas en forma correlativa de acuerdo a la numeracin. Las cintas que son remitidas para el estudio de residuos de disparos de arma de fuego deben ser colocadas en sobres de papel con la numeracin que les corresponden y luego colocadas en cajas en forma correlativa de acuerdo a su numeracin. 6- SOLICITUD DE PERICIA La solicitud de pericia es el punto de inicio para el trabajo del perito, pues en ella se har constar el objeto especfico de la pericia y por lo tanto ser la que demarque el contexto del trabajo qumico pericial. Es importante distinguir y asentar en ella las siguientes partes: - Datos generales: - Detalles del indicio: - Objeto de pericia: - Otros datos de inters 7- INFORME LABORATORIAL El Informe laboratorial, es la presentacin final de los resultados obtenidos y confrontados. Para su elaboracin es importante tener en cuenta, que la mayora de las veces, este informe est dirigido a profesionales y personas no relacionadas con las ciencias qumicas. Por ello es necesario que l mismo sea: Claro: al exponer los resultados obtenidos Concreto: para responder especficamente sobre los puntos de pericia. Conciso: para no divagar la atencin de la persona que tratar de entender y extraer datos de su inters. Los informes de las pericias practicadas deben poseer una cartula dirigida al Jefe de la Divisin criminalstica y firmada por la Jefa o la Sub Jefa del Laboratorio, a continuacin se adjunta el informe: debe tener el nmero del caso, la fecha del mismo, la descripcin de los indicios recepcionados, el objetivo de las pericias, los indicios estudiados, los mtodos utilizados, los resultados obtenidos, la conclusin y por ltimo la firma del profesional que lo realiz.

 La elaboracin de los informes de las pericias practicadas son elaborados por los profesionales que lo han realizados apoyados por personal de secretara. Los informes finalmente son entregados a la ayudanta de la Divisin Criminalstica de donde son retirados por personal del Ministerio Pblico. PERICIAS REALIZADAS POR AREA PROTOCOLO DEL AREA BIOLOGICA INTRODUCCIN La naturaleza de los indicios es muy variada, para los cual se realiza una clasificacin conforme a su naturaleza. Biolgicos: Fluidos biolgicos que provengan de seres vivos o cadveres (semen, saliva, leche, sangre, orina, heces, calostro, meconio, unto sebceo, etc.) y tejidos en general (huesos, pelos, piel, etc. Los fluidos en general pueden presentarse de dos formas: Seca o mancha: entindase por mancha toda modificacin de una superficie, sea por alteracin de color o por depsito de sustancia extraa a la misma.

Lquida: cuando se encuentra los fluidos en su forma natural o tal como se los encuentra en el cuerpo.

Fsicos: Restos o muestras de pinturas, papel, armas, vidrio, prendas de vestir, etc. Qumicos: Sustancias qumicas en general, medicamentos en general, drogas de abuso, polvos, lquidos, agua, etc. Estos indicios con excepcin de muestras de agua, no se remiten para estudios serolgicos 1. DESCRIPCIN El peritaje de un indicio comienza con una descripcin escrita o gravada de lo que va ha ser analizado, en general la descripcin deber abarcar desde caractersticas comunes hasta los detalles que pueden poner de manifiesto la particularidad de un indicio. Se deben atender a caractersticas como color, tamao, seas particulares (como adherencias, manchas con sus caractersticas propias, orificios, desgarraduras, sobre todo en prendas, indicando la posicin exacta de ellas en el soporte investigado), volumen, dimensiones, olor, etc. Indicios biolgicos 1. Todos los indicios de naturaleza biolgica deben ser descritos antes que los dems. 2. Debe mencionarse el estado en el que son remitidos (mancha, lquidos, costras, etc.). 3. Describir el color en el caso de las manchas.. 4. Identificar el lugar del que fue levantado o extrado. 5. Siempre hacer una observacin si se recepcionan materiales en mal estado. Indicios fsicos

Todos los indicios fsicos deben estar secos antes de su descripcin. En el caso de prendas de vestir deben encontrarse contenedores separados, si las mismas son remitidas en mojadas y en un mismo embalaje, no se realizaran los anlisis de individualizacin (grupo sanguneo). Prendas de vestir La importancia y trascendencia que desde el punto criminalstico tiene el examen de prendas de vestir se justifica ante todo porque un testigo ocular quiz reconozca mejor una prenda que la cara de un sospechoso, y por la gran cantidad de vestigios que los vestidos suelen contener.
1. En el caso de camisas, remeras, etc .: Mencionar siempre la longitud de las

mangas, si tiene cuello en el caso de las remeras, destacar el color pudiendo mencionar la tonalidad (clara u oscura). No adjudicar marcas a las prendas, slo limitarse a describir similitud; anotar inscripciones, bordados, etiquetas u otro tipo de adorno que presente y el talle de la prenda. Luego se procede a describir los detalles particulares como manchas, adherencias, orificios, desgarros, etc. Identificar siempre la porcin que ser analizada.
2. En el caso de pantalones, short, etc.: Describir si es de vestir, jeans, con bolsillos

(en el caso de bermudas); destacar el color pudiendo mencionar la tonalidad (clara u oscura). No adjudicar marcas a las prendas, slo limitarse a describir similitud; anotar inscripciones, bordados, etiquetas u otro tipo de adorno que presente y el talle de la prenda. Luego se procede a describir los detalles particulares como manchas, adherencias, orificios, desgarros, etc. Identificar siempre la porcin que ser analizada. Observacin: se debe hacer mencin si las prendas son masculinas y femeninas, as como tambin el estado en el que fueron remitidas.
3.

Prendas interiores: Describir el tipo de prenda ntima (less, anatmico, sostn, etc.), as como tambin si la misma es talle infantil, destacar el color pudiendo mencionar la tonalidad (clara u oscuro). No adjudicar marcas a las prendas, slo limitarse a describir similitud; anotar inscripciones, bordados, etiquetas u otro tipo de adorno que presente y el talle de la prenda. Luego se procede a describir los detalles particulares como manchas, adherencias, orificios, desgarros, etc. Identificar siempre la porcin que ser analizada

4. Calzados: Identificar el tipo de calzado (deportivo, zapatillas, etc.), si se

recepciona el par del calzado o slo uno, destacar el color pudiendo mencionar la tonalidad (clara u oscura). Anotar inscripciones, bordados, etiquetas u otro tipo de adorno que presente y el talle de la prenda. Luego se procede a describir los detalles particulares como manchas, adherencias, orificios, desgarros, etc. identificar siempre la porcin que ser analizada. Armas blancas Describir el tipo del arma blanca si se trata de un pual, un cuchillo de mesa, de caza, de cocina, destornillador, etc., las inscripciones presentes en la hoja no adjudicando marcas,

detallar la longitud total del arma, as como las longitudes de la hoja o cuerpo metlico y del mango; anotar el color y tipo de material del mango. Luego se procede a describir los detalles particulares como las manchas, adherencias o accesorios. Identificar siempre la porcin que ser analizada.

Armas de fuego Se describe el tipo de arma (revolver, pistola, rifle, etc.), color, calibre, marca y nmero de serie. Luego se procede a describir los detalles particulares como las manchas, adherencias, etc. identificar siempre la porcin que ser analizada. Otros Como existe una diversidad muy grande de indicios para todos debe aplicarse siempre la misma regla, describirlos primeros por sus caractersticas generales y luego los detalles como manchas, adherencias, etc. que es la parte que ser de inters para el anlisis. 2. LEVANTAMIENTO Y PREPARACIN DE MUESTRAS El levantamiento de una muestra para anlisis consiste en general en tomar una parte de la muestra, dejando: Una porcin o parte para eventuales repeticiones o confirmacin interna de resultados, pasando a un soporte ms estril (lo que significa utilizacin de la muestra a corto plazo).

Una parte, para eventual contra peritaje, siempre y cuando el medio del laboratorio lo permita, pues como la mayora de las muestras son de carcter biolgico (por ejemplo vsceras, sangre lquida, vmitos etc.), para guardarlas es necesario contar con un freezer especial.

La preparacin de la muestra consiste en pasar el material contenida en el soporte a un medio lquido (solucin fisiolgica al 0,9%), para su anlisis (macerado), esta preparacin se realiza en tubos de hemlisis cortos de plstico: Lquida: se le agrega alcuotas de solucin fisiolgica para retrasar un poco la coagulacin.

Cogulos: se le agrega gotas de solucin fisiolgica, se macera para romper el coagulo y recuperar parte del material. Hisopados: se coloca solucin fisiolgica la cantidad necesaria para cubrir la cabeza de algodn del hisopo, se procede al macerado. Cortes: se coloca la cantidad necesaria para cubrir el pedazo de soporte, se procede al macerado.

3. ANALISIS REALIZADOS SANGRE

Las principales interrogantes que el laboratorio de criminalstica debe resolver con relacin a muestras de sangre son: 1. Diagnstico genrico: es decir demostrar la naturaleza sangunea de la mancha.
2. Diagnstico especfico: especie animal a la que corresponde la sangre. 3. Diagnstico individual: el grupo sanguneo al que corresponde la muestra.

Notas: - Una vez que el diagnstico genrico es positivo, se procede a manchar seis telas de 1 x 1 cm, blanca, de algodn y esterilizada. Cuatro de las manchas sern utilizadas para grupo sanguneo y los dos restantes sern guardadas para examen gentico. Slo se realizara Diagnstico individual a las manchas con coloracin.

Diagnstico Genrico Para determinar la naturaleza sangunea se emplea dos tipos de pruebas, las de orientacin, que a falta de su especificidad oponen una gran sensibilidad, y pruebas de certeza absolutamente especficas. PRUEBAS DE ORIENTACIN Se basan en la presencia en la sangre de peroxidasas que son capaces de descomponer un perxido desprendiendo oxgeno naciente que se oxida. Sangre (enzima) + H2O2 H2O + O Tcnica de Kastle Meyer Se lleva a cabo en tubo de hemlisis corto de vidrio, limpio y seco o con papel de filtro, se toma una gota del macerado se le agrega primeramente una gota de fenolftalena reducida se espera al menos 5 segundos y luego H2O2 al 3%. Se espera unos segundos para el viraje del color (fucsia). Se realiza control del reactivo con solucin fisiolgica. Sensibilidad 1:1000000 Reactivos - Fenolftalena reducida Solucin stock: se pesan 2 g de fenolftalena, 20 g de hidrxido de potasio y 20 g de polvo de zinc. Se coloca en un baln de fondo plano y se le agrega 100 ml de agua, se calienta a reflujo hasta decoloracin de la solucin. Una vez frio de guarda en heladera en frasco de plstico oscuro, con 20 g de fenolftalena. Solucin de trabajo: se toma 2ml de la solucin stock y se le agrega 8 ml de etanol absoluto, dejar en reposo unos minutos para que desaparezca la turbidez. Guardar en heladera. Solucin de agua oxigenada al 3%: se realiza una dilucin tomando 3ml de agua oxigenada de 10 volmenes y llevar hasta 10 ml con agua destilada. Esta solucin se guarda en heladera.

Bluestar Forense

Fundamento: La caracterstica quimioluminescencia del Luminol (3Aminophthalhydrazide) se debe a la presencia de un agente que oxida en contacto con la sangre segn lo descubierto accidentalmente en 1928 por el qumico alemn H.O. Albrecht, y primero fue utilizado en una escena de crimen en 1937 en Alemania. La reaccin qumica-luz que produce ocurre cuando Luminol entra en contacto con la molcula rica del heme del hierro encontrada en la sangre. Los productos BLUESTAR FORENSE se comportan de manera similar al Luminol tradicional; sin la degradacin del ADN segn se divulg en la literatura cientfica disponible. BLUESTAR FORENSE es recientemente una de las alternativas aceptadas al Luminol tradicional y puede mezclarse de una manera menos complicada y posee una quimioluminescencia superior que es visible sometindolo a diferentes condiciones de luz. Esto es aconsejable para su uso en respuesta a la escena de crimen. Preparacin del reactivo: dos (2) tabletas de BLUESTAR FORENSE (una beige/una blanca), son agregadas a 175ml del agua destilada en una botella plstica de aerosol. La botella del aerosol se cierra con el inyector en la posicin abierta para la ventilacin. La solucin se mezclada suavemente con un movimiento circular por aproximadamente tres (3) a cuatro (4) minutos hasta que las tabletas se disolvieran totalmente. Procedimiento: rociar la zona investigada con el BLUESTAR FORENSE. Interpretacin del resultado. Reaccin genrica para sangre: Positiva (Quimioluminiscencia blanco azulada) Negativa (sin quimioluminiscencia)

PRUEBAS DE CERTEZA Tcnica cristalogrfica se basa en la existencia de ciertos derivados de la hemoglobina que tienden a cristalizar. Los ms importantes son las sales halogenadas de la hematina y el hemocromgeno. El primer cristal de halgeno de hematina fue descrito por Teichman en 1853, el fundamento de esta reaccin, consiste en tratar en caliente con cido orgnico, la hemoglobina, la hemoglobina se desdobla en hem y globina, a la vez se oxida el hierro del hem. En presencia de una sal halogenada de Cl, Br e I se forman los cristales de clorhidrato, bromhidrato o yodhidrato de hematina respectivamente. Formacin de Cristales de Teichman Se procede a fabricar una costra depositando el macerado gota a gota sobre un porta objeto calentando en una plancha a 60 C en este proceso hay que evitar un calentamiento excesivo que puede coagular las protenas. Una vez obtenida la costra, se coloca un cubre objeto y se le adiciona por capilaridad unas gotas de cido actico glacial. La preparacin se calienta hasta que se inicie la ebullicin del cido actico, en ese momento se retira, se deja enfriar y se aade otra gota de cido actico, repitiendo la operacin. Normalmente con tres ebulliciones aparecen los cristales; si tras 4 a 5 ebulliciones no aparecen los cristales es resultado es negativo. Notas: 1. No se realiza el agregado de la sal halogenada por que el macerado se realiza con solucin fisiolgica. 2. Esta prueba se realiza en el laboratorio slo cuando la tcnica de Kastel Meyer, no pueda ser utilizada por contaminacin del material.

Diagnstico especfico Tcnica de la Inhibicin de la Anti Inmunoglobulina humana - Se coloca 200 l del macerado en tubos de hemlisis cortos de vidrios, limpios y secos. Se preparan tambin controles humano y blanco. Se agrega 50 l de la solucin 1:4 de Anti- IgG Humana. Se lleva a bao mara por 30 minutos a 37C Se retira del bao y se le agrega 50 l de glbulos rojos sensibilizados al 5% a cada tubo. Se coloca en bao mara 15 minutos a 39C. Se retira de bao mara, se centrifuga, se procede a la lectura e interpretacin.

Reaccin positiva: aglutinacin Interpretacin: sangre no humana. Reaccin negativa: no aglutinacin Interpretacin: sangre humana. Reactivos - Glbulos rojos sensibilizados al 5%: se utiliza sangre o pool de sangre 0 Rh Positivo a) Se lava la sangre con solucin fisiolgica a 4C, agregando el doble de volumen de la muestra de sangre, se centrifuga a 2000 rpm por 5 minutos. b) Se retira el sobrenadante y se vuelve agregar la solucin fisiolgica, este procedimiento se repite hasta que el sobrenadante este lmpido. c) Una vez terminado los lavados, se retira todo el sobrenadante. Se toma 0,5 ml del paquete globular y se le agrega 1ml de solucin 1:4 de anti D. d) El preparado se incuba 1 hora a bao mara a 39C. e) Se retira del bao mara y se prepara la solucin tomando 250 l del preparado y se le agrega 4,75 ml de solucin fisiolgica. Solucin 1:4 de Anti-Inmunoglobulina humana: se toma 1 ml de Anti IgG humana y se le agrega 3 ml de solucin fisiolgica, est preparado se realiza en un frasco de vidrio de 10 ml de capacidad. El preparado se guarda en heladera. Solucin de anti-D 1:4: se toma 1ml de Anti D y 3 ml de solucin fisiolgica, est preparado se realiza en un frasco de vidrio de 10 ml de capacidad.

Nota: en el caso de restos seos, se macera la muestra con solucin fisiolgica por una noche y se procede de la misma forma.

Tcnica de Inmunocromatografa cualitativa para la investigacin de Hemoglobina humana Los cassettes contienen una regin (T) con una membrana cubierta con Anticuerpos anti Hemoglobina humana y otra regin (C) cubierta con Anticuerpos de ratn como control negativo. Cuando la hemoglobina humana est en la muestra, tras la migracin de la misma se forma una lnea visible de formacin del complejo antgeno anticuerpo con la hemoglobina, en la regin T. - Se coloca una gota del macerado en el pocillo correspondiente. Se espera 5 minutos para dar lugar a la migracin de la muestra. Se procede a la interpretacin de los resultados.

Positivo: dos lneas rosada en la regin T y C. Negativo: la lnea rosada aparece slo en la regin C. Invalido: cuando no aparece lneas en ningunas de las regiones. Diagnstico Individual El diagnstico individual no individualiza, sino agrupa dentro de una clase. De los mltiples mtodos existentes para este diagnstico, se puede resaltar: 1. Mtodos basados en la investigacin de aglutingenos; 2. Mtodos basados en la investigacin de grupos plasmticos; 3. Grupos enzimticos eritrocitarios; 4. Grupos leucocitarios. Investigacin de aglutingenos Se fundamenta en la propiedad de las aglutininas de fijarse especficamente sobre sus aglutingenos. En el caso de manchas la reaccin antgeno anticuerpo, se evidencia por mtodos ms utilizados para la tipificacin de manchas es el Test de absorcin Elucin. El test de Absorcin Elucin se basa en que las aglutininas se fijan especficamente sobre su aglutingeno que se encuentra en la mancha, tras 24 horas de incubacin se retiran por lavado todas las aglutininas no fijadas especficamente sobre la mancha y luego esta unin se deshace por calentamiento. Las aglutininas liberadas sern las que estaban unidas de modo especfico, su identificacin establece el diagnstico del grupo de la mancha problema.
ETAPAS Elucin

Absorcin

Identificacin

Tcnica Absorcin - Elucin - Se disponen de las telas de 1 cm de lado, de algodn, esterilizada y manchadas con la muestra.

Las telas se colocan en tubos de ensayo por cada grupo a determinar (una para el grupo A y otra para el grupo B). A cada tubo con la tela, se le adiciona dos gotas solucin fisiolgica fra, seguida de una gota del anticuerpo correspondiente. Eso se deja en heladera toda la noche. Se retira la solucin fisiolgica y el anticuerpo en exceso, y se lava seis veces con solucin fisiolgica fra. Entre cada lavado se deja reposar de 15 a 20 minutos, despus del ltimo lavado se retira toda la solucin fisiolgica. Para la elucin se adicionan dos gotas de solucin fisiolgica, cuidando que el lquido cubra la mancha, se introduce en bao mara a 56 C durante 15 minutos, debe agitarse de vez en cuando. Se sacan las manchas de los tubos y se le agrega una suspensin de hemates al 0,5%. A cada tubo se le agregara los hemates apropiados segn el grupo que tratamos de determinar. Se deja en heladera una hora y se centrifuga a 1500 rpm durante 5 minutos. Interpretacin de los resultados:

B Interpretacin: Grupo A

+
A

Interpretacin: Grupo B

Reactivos - Anticuerpos A y B: sensibilidad 1/1024 Solucin de hemates A al 5%

a) Se lava la sangre con solucin fisiolgica a 4C, agregando el doble de

volumen de la muestra de sangre, se centrifuga a 2000 rpm por 5 minutos. b) Se retira el sobrenadante y se vuelve agregar la solucin fisiolgica, este procedimiento se repite hasta que el sobrenadante este lmpido. c) Una vez terminado los lavados, se retira todo el sobrenadante y se prepara la solucin tomando 250 l del preparado y se le agrega 4,75 ml de solucin fisiolgica. Solucin de hemates B al 5%

a) Se lava la sangre con solucin fisiolgica a 4C, agregando el doble de volumen de la muestra de sangre, se centrifuga a 2000 rpm por 5 minutos. b) Se retira el sobrenadante y se vuelve agregar la solucin fisiolgica, este procedimiento se repite hasta que el sobrenadante este lmpido. c) Una vez terminado los lavados, se retira todo el sobrenadante y se prepara la solucin tomando 250 l del preparado y se le agrega 4,75 ml de solucin fisiolgica. Solucin fisiolgica: solucin de cloruro de sodio al 0,9% pH 7.

PELOS Los pelos son filamentos cornificados que se forman por invaginacin de la piel y se desarrollan en la epidermis. Estn compuestas por protenas, queratina y melanina. Su longitud varia de entre unos milmetros hasta ms de un metro y se distribuyen con densidad variable por toda la piel, excepto en los labios, las palmas de las manos, las plantas de los pies, las caras inferiores y laterales de los dedos de la mano y del pie.

1. ANATOMIA Y MORFOLOGA DE PELOS Anatmicamente presenta una punta que es el extremo distal del mismo, un tallo que representa al cuerpo y un bulbo o raz. Morfolgicamente de afuera para dentro presenta una cutcula que es la cubierta externa encargada de dar estabilidad y resistencia al pelo, la misma es de suma importancia para la identificacin de la especie a la que pertenece la muestra en estudio. La corteza se encuentra debajo de la cutcula y contiene los granos de melanina que son los pigmentos encargados de dar la coloracin al pelo y estos constituyen puntos de comparacin entre las muestras. Por ltimo la mdula es la parte ms interna del pelo. 2. UTILIDAD DEL ESTUDIO FORENSE DE PELOS El anlisis de pelos ayuda en el proceso investigativo de la siguiente manera: a- Coloca al sospechoso en la escena del crimen. b- Identifica la escena del crimen. c- Identifica el arma o el instrumento utilizado para cometer el delito. d- Identifica un vehculo participante en el cometido del hecho o en acciones relativas a l. e- Corrobora el testimonio del testigo. 3. APORTE DEL LABORATORIO CRIMINALISTICO EN EL ESTUDIO FORENSE DE PELOS

El Laboratorio Criminalstico de la Polica Nacional puede dar los siguientes aportes en relacin al anlisis pericial de pelos: a- Relaciona a un/unos individuos con un hecho determinado. b- Establece identidad a travs de las caractersticas morfolgicas estudiadas. c- Determina si es animal o humano, u otra fibra de origen sinttico o vegetal. d- Puede establecer si hubo un acto violento y el lugar donde ocurri el hecho. e- El rea del cuerpo de la cual proviene. f- Si ha sido alterado con colorantes o tintes. 4. BUSQUEDA DE MUESTRAS EN LA ESCENA DEL CRIMEN Como norma general se buscar minuciosamente en los siguientes lugares: a. En la victima y sospechoso (manos, prendas de vestir, etc.) b. En los instrumentos o herramientas utilizadas para la agresin. c. En el tubo can y salientes de las armas de fuego, especialmente en casos de suicidios. d. En peines, cepillos, suelo y en lugares relacionados con el hecho. 5. COLECCIN DE LAS MUESTRAS 5.1 Coleccin de muestras en el lugar del hecho. abcdNo se deben recoger directamente con la mano, utilizar pinzas de plstico. Trasladar preferentemente los pelos en su soporte original. Utilizar aspiradora para la bsqueda en vehculos o muebles. Arrancar las muestras y en cantidad suficiente, nunca cortarlas. e- Para pelos testigos arrancar muestras de cada zona de la cabeza (frontal, parietal, occipital y temporal). Adems se pueden levantar muestras de otras zonas del cuerpo como pubis, extremidades, axilas, barba, cejas, etc. f- Tomar muestras siempre de la vctima y del sospechoso, y de las mismas zonas o regiones. g- Los pelos levantados deben ser remitidos preferentemente en sobres de papel, en bolsas de plstico con cierre hermtico o en tubos de ensayos limpios y con tapa. Nunca utilizar cintas o papeles adhesivos para sujetar los pelos.

h-

5.2. Tcnica para la coleccin de muestras de la vctima. a- Cada espontnea: se peina la zona pilosa seleccionada y se colecta los pelos que caen. b- Extraccin con pinzas: tomar con pinzas de plstico de la zona ms prxima a la raz para evitar cortes. c- Nunca se debe cortar las muestras de pelo. 6. PROCEDIMIENTO ANALITICO PARA EL ESTUDIO FORENSE DE PELOS. 6.1. Estudio morfolgico del pelo. Se realiza el estudio de los caracteres morfolgicos del pelo utilizando microscopio ptico y microscopio ptico comparador.

6.2. Parmetros morfolgicos estudiados. a. Medidas: se realiza la medicin del largo total del/los pelo/os, dimetro total, dimetro medular. b. ndice Medular: se halla de la relacin entre el dimetro medular y el dimetro total del pelo. c. Tallo: orienta sobre la zona del cuerpo donde proviene la muestra. d. Mdula: Indica la especie a la que pertenece la muestra. Puede estar presente o no y de diferentes formas en un mismo individuo. e. Tipo de pelo: orienta sobre la regin donde pertenece el pelo o caractersticas particulares del individuo. f. Cutcula: indica la especie a la que pertenece el pelo. La cutcula humana es de tipo escamosa. En los animales puede ser alongada, acuminada, aserrada, etc. g. Corteza Color: en la corteza se encuentra la melanina que son los pigmentos que dan la coloracin al pelo y son un punto muy importante de comparacin. h. Punta: determina el tiempo de corte. i. Bulbo: presenta clulas que poseen la informacin para la determinacin del sexo de la muestra siempre que se encuentre en estado antagnico. j. Adherencias: estos pueden aportar datos a la investigacin y orientarle segn la naturaleza de ellas, por ejemplo sobre la distancia del disparo, la violencia del hecho, elementos relacionados a delitos sexuales, sustancias fisicoqumicas, etc.

ESTUDIO MORFOLGICO DE PELOS N de muestra Largo (cm) Tallo Mdula Dimetro total promedio (mm) Dimetro medular (mm) ndice medular Canal medular Tipo de pelo Color/tonalidad Cutcula Corteza Punta Bulbo

Cilndrico Aplanado Otro: Ausente / Continua / Interrumpida / Fragmentada

Central/Excntrico Otro: Lacio / Crespo / Ondulado / Lig. Ondulado Humana/Animal Pigmentada / Apigmentada / Hiperpigmentada ( ) Aguzada / Cortada / Rota / Roma Otra: Telognico / Otro

Adherencias Otros

Silceas(

)Otras: (

SEMEN Llamado tambin esperma o lquido seminal, es el producto de secrecin del aparato genital masculino, que aparece en el hombre despus de la madurez sexual. Est compuesto por: - Espermatozoides (que son las clulas del semen) - Plasma seminal (que es el lquido en el cual se mueven los espermatozoides) El plasma seminal contiene diversas sustancias que se hallan disueltas en l como: electrolitos, glucosa, urea y algunos de ellas en cantidades importantes como la enzima fosfatasa cida, y otros como la espermina, colina. MUESTRAS PARA ESTUDIOS: CARACTERISTICAS: varan de acuerdo al soporte donde se depositan a) Si el soporte es absorbente: las manchas se presentan de un color grisceoamarillento b) Si el soporte es flexible: ejemplo telas; estas se vuelven acartonadas o apergaminadas al tacto. c) En soportes no absorbente o impermeables, cuando la superficie es: - Rugosa: el semen al secarse, deja costras o escama ms o menos grande de color blanquecino transparente - Lisa: el esperma se extiende en una mancha grande, delgada, transparente y poco visible sobre fondo oscuro. BUSQUEDA - En la vctima - Sobre los diversos tipos de soportes hallados en el lugar de los hechos, ejemplos: alfombras, prendas de vestir, ropa de cama, tapizados, pisos, etc. LOCALIZACION: Su localizacin se facilitar utilizando luz ultravioleta sobre superficie varias del lugar del hecho, mediante la cual es posible observar que muestras sospechosas presentan fluorescencia ante esta luz, con una coloracin amarillo verdosa; que aunque no resulta especifica, ayuda a seleccionar las zonas para estudio. En tanto que en la victima, comnmente se localiza en su forma liquida en la cavidad vaginal o anal, aunque pueden tambin ser localizados en otras partes del cuerpo, como la boca o en forma de mancha blanquecina, principalmente en la regin pbica y cara interna de los muslos. LEVANTAMIENTO Y TRATAMIENTO: Las muestras se recogen de acuerdo a como se las encuentran y el lugar de su localizacin, atendiendo tambin a los cuidados generales del tratamiento de los indicios; as:

a- En soportes flexibles y absorbentes: como prendas de vestir, ropas de cama, toallas. etc es preferible remitir los mismas como tal y en caso de que ellos se encuentren hmedas, secarlas en corrientes de aire sin exponerlos al sol, si el soporte es muy grande y no puede ser transportados hasta el laboratorio, se recomienda (previa autorizacin pertinente) remitir un corte de por lo menos 4 cm2 de la parte afectada y otra de la no afectada con las mismas dimensiones. b- Si el soporte es no absorbente: se proceder a levantar las caractersticas escamas, por medio de la tcnica del raspado, colectando las mismas en tubos de ensayos limpios c- En el caso de extraccin de muestras a victimas de delitos sexuales: esta debe ser realizada por personal idneo, utilizando para ello preferentemente hisopos secos y estriles. Si el material deber ser sometido posteriormente a estudios gentico, es preferible tomar dos muestras y colocar los hisopos una vez seco, cada uno9 por separado en un tubo limpio, seco y estril. Pueden tambin ser tiles, laminas de vidrio con extendido de exudado vaginales o anales. Cuando se trata de tomar muestras de otra parte del cuerpo, utilizar un hispo embebido en solucin salina y proceder a frotar la mcula.

ESTUDIOS REALIZADOS A LAS MUESTRAS Y PROCEDIMIENTOS: Cuando las muestras se encuentran secas o sobre soportes absorbentes, se proceder a la maceracin (con solucin salina, o extraccin del soporte con acido sulfrico al 80 % (que no destruye los espermatozoides). DIAGNOSTICO GENERICO: (Para determinar naturaleza) En la investigacin la presencia de semen, es necesario confirmar su naturaleza. Se emplean los siguientes mtodos: Mtodo ptico: el hallazgo de al menos un espermatozoides. Otorga un valor analtico de certeza absoluta para naturaleza. En cuanto el valor pericial, estar sujeto al tipo de hechos investigado.

Procedimiento analtico: Colocar una gota del macerado de las muestras sobre lamina, cubrir con cubre objeto y observar al microscopio 10x y 45x. Los preparados pueden ser directos o sometidos a previa tincin con hematoxilina, eosina, azul de metileno, eritrosina amoniacal, safranina. Se puede tambin concentrar la cantidad de espermatozoides sobre todo en macerados provenientes de prendas y otros soportes, centrifugando el mismo para observar el pellet al microscopio. Mtodos Qumicos: basados en lo bsqueda de los componentes del plasma seminal, mediante reacciones de tipo enzimticos. Reacciones Enzimticas: consiste en la identificacin de la fosfatasa cida del plasma seminal, cuya concentracin en l es de 40 a 400 veces mas que en otros lquidos biolgicos. El valor analtico de certeza para la prueba, se lograra cuando se cuantifica la

reaccin, a razn de la concentracin de fosfatasa mas arriba citada. Un cualitativo no implica certeza de naturaleza.

anlisis

DETERMINACION DE PAS (ANTIGENO PROSTATICO ESPECIFICO): Es segregado por la prstata en el comnmente conocido como lquido lubricante, por lo que su hallazgo resulta an positivo en aquellos atentados en los que no se ha llegado a la cpula o eyaculacin. Limitaciones de la pericia de semen: La pericia de semen por si sola, no puede identificar a un individuo. A los efectos de determinar si la muestra de semen pertenece a un individuo especifico, se deber recurrir al anlisis de ADN. PRESENTACION DEL INFORME Presencia de Espermatozoides: (Mtodo Microscpico) Presencia de Plasma Seminal: (Mtodo Qumico enzimtico) NEGATIVO/ POSITIVO. NEGATIVO/ POSITIVO .

Presencia de Antgeno Prosttico Especfico: NEGATIVO/POSITIVO (Mtodo inmunolgico) AREA TOXICOLOGIA FORENSE La toxicologa es la ciencia encargada del estudio de los txicos y los estados ocasionados por estos. A continuacin se aborda unas series de conceptos importantes para el rea forense en su relacin con el laboratorio TOXICO: es cualquier sustancia capaz de generar una reaccin adversa, total o no, en un organismo vivo. Desde el punto de vista de la toxicologa en particular se considera toxico a todo agente qumico que ingiriendo en el organismo, altera elementos bioqumicas fundamentales para el normal desarrollo de la vida. INTOXICACIN: Conjunto de trastornos fsicos y o bioqumicas observados en un organismo vivo a consecuencia de la presencia de un toxico DROGAS DE ABUSO: Son todas aquellas sustancias que producen dependencia y que se emplean voluntariamente para provocarse determinadas sensaciones o estados squicos no justificados teraputicamente. CLASIFICACION SEGN LOS EFECTOS QUE PRODUCEN A NIVEL DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL.

Depresoras del sistema nervioso central o Psicolpticos: inhiben el funcionamiento del sistema nervioso central, el enlenteciendo la actividad nerviosa y el ritmo de las funciones corporales. Entre los efectos que producen se encuentran relajacin, sedacin, somnolencia, sueo, analgesia e incluso coma.

Ejemplos: alcohol etlico, opiceos, psicofrmacos (benzodiacepinas, barbitricos), cannabis y derivados. Estimulantes o Psicoanalticos: producen una activacin general del sistema nervioso central, dando lugar a un incremento de las funciones corporales. Se establece una distincin entre estimulantes mayores (tales como la cocana o las anfetaminas) y menores (como la nicotina o las xantinas: cafena, tena y teobromina). Alucingenos o Psicodislpticos: tambin conocidos como perturbadores. Produce un estado de conciencia alterado, deforman la percepcin y evocan imgenes sensoriales sin entrada sensorial. Ejemplos de estas sustancias lo constituiran el LSD o las drogas de sntesis (que por los efectos que producen seran ms bien consideradas como sustancias mixtas estimulantes-alucingenas). LA TOXICOLOGIA FORENSE: Se encarga de establecer la etiologa toxica de un determinado crimen a travs del estudio del cadver, el medio ambiente, el toxico en particular, actividad laboratorio, etc. Desde el punto de vista de la toxicologa forense nos ocuparemos de las intoxicaciones y segn su etiologa, ellos son: a- Intoxicacin criminal: cuando se emplea el toxico con fines criminales, entre los que se citan el homicidio, abortos, perdida momentnea de la conciencia, entre las mas comunes. b- Intoxicacin voluntaria: comprende el suicidio y la drogadiccin. c- Intoxicacin accidental: se distingue los alimenticios, por picaduras de animales, accidentales, medicamentosos y profesionales. MUESTRAS PARA ESTUDIO: Siempre que se sospeche de la accin de un toxico; el lugar el lugar de los hechos es sin duda el principal lugar para iniciar la bsqueda, se menciona los hallazgos mas frecuentes en el; cuando existe una intoxicacin de tipo criminal o voluntaria en sus dos aspectos: El lugar del hecho: - Ausencia de violencia - Hallazgos de frascos, recipientes con contenido o restos de naturaleza desconocida o dudosa - Jeringas y agujas - Pastillas, comprimidos, capsulas o lquidos La vctima, en la que se deber buscar: - Un cadver sin lesiones traumticas graves nivel externo y/o con signos caractersticos como ser coloraciones especificas; por ejemplo: el rojo vino en la intoxicacin por monxido de carbono, espumas por las vas reas superiores o por la boca. - Pinchazos en vasos de los antebrazos o piernas LEVANTAMIENTO, TRATAMIENTO Y ENVIO AL LABORATORIO:

Los hallazgos o indicios encontrados en el lugar de los hechos, debern recogerse segn los cuidados generales para la recoleccin de indicios. Son de inters en este caso: pastillas, polvos, pldoras, lquidos desconocidos, etc. En cuanto a muestras provenientes de la victima, se puede sistematizar en general, las muestras que sern de utilidad, atendiendo al estudio toxicolgico solicitado y el estado de la victima Vsceras: Divididas en: - Estmago, su contenido y una porcin proximal del yeyuno ileon de aproximadamente 60 cm. - rganos parenquimatosos: hgado, rin y encfalo. Fluidos biolgicos: Orina: es la muestra de eleccin por la practicidad para obtenerla, por la concentracin de la droga y sus metabolitos en ella Sangre: de 10 a 50 ml con fluoruro de sodio o mejor aun sin anticoagulante, es til particularmente para determinar el consumo reciente de drogas. No se recomienda la toma de sangre de cavidades abiertas. Las sangre total y el plasma son las muestras mas representativas Bilis: es la muestra de especial inters en los casos de muerte por narcticos. Todo lo que se pueda extraer por puncin de la vescula Humor vtreo: es muy utilizada por su estabilidad ante el proceso de putrefaccin, especialmente recomendada para la investigacin de alcohol etlico obtenindose, mediante puncin de la cmara posterior del ojo, con una aguja gruesa y aspirado suave Muestras adicionadas: para casos en los que se sospecha de un toxico, podrn recogerse adems: a- Pulmn (cadmio) b- Ventrculo (digital) c- Colon: 60 cm. (mercurio) d- Grasas y msculo esqueltico: (insecticidas rgano clorados) e- Pelos arrancados y uas de pies, manos (arsnico) f- Lavado gstrico (cuando la victima es auxiliada por personal medico o paramdico) g- Vmitos MUESTRAS PARA ESTUDIO DE TOXICOLOGIA -Utilizar frascos adecuadamente etiquetados, preferentemente de vidrio con boca ancha, tapa de rosca y perfectamente limpios. -En lo posible evitar la cmara de aire llenndolos por completo. -Queda prohibido mezclar los fluidos biolgicos entre s o con las dems muestras. -El nico conservante permitido para determinacin de alcoholemia es el fluoruro de sodio. -Si se tratan de muestras sospechosas o confirmadas de estar contaminadas con Hepatitis, SIDA u otras enfermedades contagiosas deben colocarse etiquetas de advertencia.

TODAS LAS MUESTRAS DEBEN ESTAR PERFECTAMENTE ROTULADAS ESPECIFICANDO: FECHA, HORA Y CONDICIONES EN LAS QUE FUERON TOMADAS. REMITIRLAS REFRIGERADAS. METODOLOGIA DE TRABAJO Mtodo analtico cualitativo: TLC Cromatografa en capa fina. Limitaciones: - Escasa sensibilidad - Necesidad de contar con patrones de Referencia - Imposible cuantificar los resultados. PROCEDIMIENTO ANALITICO: Mtodo de Fassi modificado y adaptado: (Cuidar de procesar por separado el estmago y su contenido; de las dems vsceras) TECNICA DE EXTRACCION 1- Triturar las muestras con procesadora y separar aproximadamente 50 gr. de muestra. 2- Agregar a las muestras separadas acido tartrico (cantidad suficiente para reaccin cida) y sulfato de sodio (cantidad suficiente para secar) 3- La muestra seca se coloca en una ampolla de decantacin, se aade ter de petrleo, y se deja en contacto por 24 horas. 4- Extraer la fase etrea, rotulas (Fase 1) y evaporar a sequedad. 5- A la muestra contenida en la ampolla de decantacin se aade ter etlico. 6- Agitar por espacio de 30 min. , dejar en contacto por 24 horas. 7- Separar, rotular (Fase alcalina) y evaporara a sequedad a temperatura ambiente. DETECCION E IDENTIFICACION: por cromatografa en capa fina. Es un mtodo cromatogrfco en el cual una fase mvil se mueve por capilaridad a travs de una fina pelcula de fase estacionaria finamente dividida (adsorbente) ligada a una placa. Procedimiento: 1- Retomar la muestra en solvente adecuado formando un extracto lquido. 2- Sembrar pequeas alcuotas del extracto en placas de slica gel utilizando micro capilares. En la misma placa se siembran testigos (patrones conocidos de la sustancia a identificar). 3- Revelar bajo luz UV (ultra violeta) observndose las manchas a la misma altura (Rf) si se trata de la sustancia semejante, tambin se utilizan diferentes reveladores. INFORME Cualitativo: Detectable/ No detectable ANALISIS DE DROGAS DE ABUSO EN ORINA

Test Inmunocromatogrfico para la deteccin cualitativa de metabolitos de drogas en orinas. Principio del Test El test consiste en un ensayo inmunocromatogrfico para deteccin en orina humana de los siguientes metabolitos a partir de un nivel de concentracin que a continuacin se muestra:
DROGAS DE ABUSO 1.- COCAINA 2.- MARIHUANA 3.- BENZODIAZEPINAS 4.- ANFETAMINAS 5.- MORFINA SENSIBILIDAD DEL METODO 150 ng/mL 50 ng/mL 300 ng/mL 300 ng/mL 300 ng/mL

Este ensayo suministra un resultado analtico preliminar. Para un resultado ms especfico, se deber de emplear otros mtodos qumicos alternativos a fin de poder confirmar el resultado analtico. La espectrofotometra de masa o la cromatografa de gases son los mtodos confirmatorios preferiblemente utilizados para consideraciones clnicas o judiciales y deberan ser aplicados, especialmente cuando se obtienen resultados positivos preliminares. Recogida de muestra y Preparacin La muestra de orina deber de ser recogida en un contenedor limpio y seco. Puede emplearse muestras de orina tomadas en cualquier momento del da. Centrifugar y filtrar toda muestra de orina que presenten precipitados visibles o bien permitir sedimentar para obtener una muestra clara para el ensayo. Las muestras de orina pueden ser almacenadas a 2 -8 0C si van a ser ensayadas en las primeras 48 h restantes. Para muestras que no van a ser ensayadas dentro de ese tiempo, congelar a 20C. Este tipo de muestras, debern ser descongeladas y homogeneizadas antes del ensayo Procedimiento - Dejar atemperar las muestras a temperatura ambiente (15-30C) - Dejar atemperar el sobre conteniendo el test antes de su uso - Abrir el sobre precintado y utilizar el test lo antes posible. - Situar el dispositivo sobre una superficie limpia y nivelada. - Aadir 2- 4 gotas de orina en el pocillo correspondiente. - Situar el dispositivo sobre una superficie plana, poner el cronmetro en marcha y esperar a la aparicin de la/las lnea/as antes de 10 minutos. Interpretacin de Resultados Negativo: Aparecer dos lneas. Una roja sobre la zona Control (C) y otra lnea roja sobre la zona Test (T) junto a cada parmetro. Este resultado negativo indica que la concentracin de metabolitos de la droga en la muestra de orina se encuentra por debajo del nivel dete4ctable asignado por el cut-off del parmetro afectado. Positivo: Una lnea roja aparecer en la zona Control (C) y no aparecer en la zona de Test (T) junto a cada parmetro. Este resultado positivo indica que la concentracin de metabolitos de la droga en la orina excede de los niveles de cut-off del parmetro afectado.

Nulo / Invlido: Ausencia de la lnea control. Las razones ms comunes para la ausencia de la lnea control es una cantidad insuficiente de muestra o una incorrecta realizacin del ensayo. Revisar el procedimiento y repetir el test usando un nuevo dispositivo. Si el problema persiste, se deja de utilizar el lote. INFORME DE RESULTADOS
DROGAS DE ABUSO 1.- COCAINA 2.- MARIHUANA 3.- BENZODIAZEPINAS 4.- ANFETAMINAS 5.- MORFINA RESULTADOS SENSIBILIDAD DEL METODO 150 ng/mL 50 ng/mL 300 ng/mL 300 ng/mL 300 ng/mL

POSITIVO / NO DETECTABLE POSITIVO / NO DETECTABLE POSITIVO / NO DETECTABLE POSITIVO / NO DETECTABLE POSITIVO / NO DETECTABLE

ALCOHOL EN SANGRE El etanol es un depresivo del sistema nervioso central. Es una de las sustancias ms usadas como drogas de abuso, es rpidamente absorbido por el tracto gastrointestinal. Los mximos niveles son alcanzados entre los 40 y 70 minutos despus de la ingestin. Sus efectos varan dependiendo de su concentracin en sangre. Mtodos: MICRODIFUSION CONWAY. CUALITATIVO La microdifusin se realiza en cmaras de Conway que poseen en el compartimiento externo muestra y agente liberador (CO3Na2) y en el Interno el agente atrapante Cr2O7K2 + H2SO4 0.01 N. Expresin del Resultado: Investigacin de alcoholemia: POSITIVO / NO DETECTABLE. Mtodo: Cualitativo - Micro difusin de Conway LIMITACIONES: No es especfica para un solo tipo de alcohol. Limite de deteccin: 1,5 g de etanol/litro de sangre MTODOS BIOQUMICOS - CUANTITATIVO Los Mtodos bioqumicos permiten la dosificacin del alcohol en la sangre u otros fluidos biolgicos a efectos de inferir la impregnacin alcohlica del organismo. Entre ellos se encuentran los mtodos enzimticos (Mtodo de la alcohol deshidrogenada ADH). El etanol es oxidado a acetaldehdo en presencia de la enzima alcohol deshidrogenasa ADH por nicotina mida/ adenina di nucletido (NDA).

INFORME: Se expresa en mg/dL la cantidad de Etanol presente. PASTILLAS Y OTROS MEDICAMENTOS Consistente en medicamentos generalmente utilizados como tranquilizantes, sedantes y drogas de abuso (benzodiacepinas, barbitricos, analgsicos, cocana o marihuana) METODO DE ESTUDIO a) Mtodo ptico: A simple vista: describir los caracteres organolpticos de las muestras como color, olor, brillo. b) Mtodo Analtico (TLC): Cromatografa en capa fina: Procedimiento: 1- Disolver la muestra en solvente adecuado formando un extracto lquido. 2- Sembrar pequeas alcuotas del extracto en placas de slica gel utilizando micro capilares. En la misma placa se siembran testigos (patrones conocidos de la sustancia a identificar). 3- Revelar bajo luz UV (ultra violeta) observndose las manchas a la misma altura (Rf) si se trata de la sustancia semejante, tambin se utilizan diferentes reveladores.

AREA QUMICA BALSTICA Los residuos de disparo del arma de fuego, escapan en dos sentidos llamados en referencia, cono anterior y cono posterior: Cono anterior, se hallan: Nitrito (plvora combustionada), acorta distancia, en los puntos de impacto. Nitratos (plvora sin combustionar) a corta distancia en los puntos de impacto. Plomo a corta distancia micro proyectiles y a larga distancia en orificios de entrada producidos por balas de plomo desnudo. Otros: quemaduras y chamuscamientos en heridas y puntos de impacto de corta distancia; otros metales componentes del encamisado o cobertura de proyectiles como el cobre y el zinc, estos ltimos en los orificios de entrada, desde cualquier distancia. Cono posterior, se hallan: Nitrito (plvora combustionada), en manos del tirador. Nitratos (plvora sin combustionar) en manos del tirador.

Plomo (componente del mixto fulminante) en manos del tirador. Bario (componente del mixto fulminante) en manos del tirador.

MUETRA PARA ESTUDIO Levantamiento y tratamiento: segn el objeto o cuestionamiento pericial, las muestras pueden recolectarse de: a) Manos del tirador: para el levantamiento de estas muestras se utilizan cintas levantadoras (DERMOTEST). En caso de no disponer de estas cintas, se pueden utilizar cintas para embalajes de tipo transparente y colocarlas sobre un soporte contenedor preferentemente de plstico. Las cintas deben ser colocadas sobre el dorso de la mano, en la zona comprendida entre el dedo ndice y el dedo pulgar. b) Prendas de vestir: de la vctima o del tirador en el caso que el mismo use ropas de mangas largas o haya utilizado arma larga. La prenda debe ser remitida al laboratorio. c) Punto de impacto: se pueden utilizar las cintas levantadoras y si son prendas de vestir en las que se debe buscar orificios de entrada, remitirlas hasta el laboratorio. d) Herida: utilizar para el levantamiento cintas levantadoras, cuidando de no limpiar la herida antes del procedimiento, ya que se pueden arrastrar las partculas de inters analtico. En caso de tratarse de heridas producidas a boca jarro, tomar las muestras por dentro de la herida ya que los gases en este caso ingresan al interior del cuerpo, produciendo la caracterstica herida en forma de estrella, muchas veces con ausencia de los caractersticos signos de tatuaje y/o quemaduras. Con ayuda del mdico forense puede obtenerse un corte de piel o tejido circundante al orificio de entrada, en cuyo caso la muestra ser remitida al laboratorio sin el agregado de ningn conservante.Las muestras obtenidas deben ser remitidas al laboratorio con los cuidados pertinentes: si son prendas y estn impregnada de sangre u otros lquidos, secarlas previamente antes de embalarlas, cuidando de no doblar las prendas en la zona aledaa a los posibles orificios; las armas al igual que las cintas se remiten como tal, rotuladas indicando la mano o herida a que corresponde. ELEMENTOS A INVESTIGAR. A) componentes del mixto fulminante: el mixto fulminante de mayor difusin, est compuesto por sales de plomo, bario y antimonio, siendo las sales de plomo las que se encuentran en mayor proporcin. B) Componentes de la plvora: Nitratos. La plvora sin humo a ms de los estabilizadores, mayormente est compuesta de nitratos. Pero hoy en da la plvora prcticamente combustiona por completo, lo que da lugar a la investigacin de nitritos, producto de la combustin de los nitratos. C) Otros: se buscan adems signos, que sealan distancia de disparo (quemaduras, chamuscamientos, tatuajes y ahumamiento), u orificios de entrada (aceites de lubricantes en el anillo de limpieza y enjuagamiento). METODOS DE ESTUDIO.

Se describen los mtodos y tcnicas utilizadas en el laboratorio criminalstico de la Polica Nacional: Mtodo ptico: el uso de instrumental ptico adecuado como la lupa simple y la lupa estereoscpica es til, para la observacin de signos como quemaduras o chamuscamientos y para la observacin de micro proyectiles que se incrustan en la piel. Mtodos qumicos basados en reacciones de coloracin: por medio de reacciones de coloraciones especficas para una sustancia o elemento en particular puede investigarse la presencia de los elementos de inters, aunque el mtodo no resulte de certeza sobre el origen de stos elementos o sustancias (valor pericial). Se realizan las siguientes reacciones:

TECNICA DE PREPARACION DEL RODIZONATO DE SODIO En la balanza analtica, pesar 0,01l gr del Rodizonato de Sodio en un tubo y disolver con 0,5 ml de agua destilada. El reactivo se prepara en el momento del uso en el da y no puede ser guardado.-

I- Reaccin del Rodizonato de sodio: para la investigacin del plomo y del bario. a) embeber un trozo de papel de filtro con la solucin de Rodizonato de Sodio. b) colocar el papel de filtro sobre la muestra en estudio y presionar ligeramente. c) colocar por debajo del preparado descrito en b, un trozo de papel de filtro embebido en acido clorhdrico al 1%. d) observar la reaccin a la lupa estereoscpica. e) la reaccin puede practicarse sobre las cintas levantadoras con material de manos, heridas y sobre prendas, cuidando en estas ltimas de utilizar una pequea porcin, que permita luego utilizar la, muestra para los dems estudios.

El Rodizonato de sodio en presencia de plomo produce una coloracin violeta y en presencia de bario, una coloracin rojo castao, la presencia de plomo y bario juntos da una reaccin de certeza casi absoluta de que sean productos del disparo. La observacin de la reaccin se realiza con la ayuda de la lupa estereoscpica (epimicroscopio), y la interpretacin es la siguiente: - Si se observan puntos microscpicos de color violeta, corresponde a caractersticas semejantes del plomo proveniente del mixto fulminante. - Si se observan partculas de metal y la coloracin violeta, corresponden a micro proyectiles provenientes de la bala. La ausencia de coloracin, es decir de un resultado negativo, buscadas en las manos de un posible tirador, no significa que la persona no haya realizado disparo alguno, sino que sencillamente aunque las tcnicas utilizadas son de reconocida sensibilidad, en ocasin el material depositado en las manos del tirador, se halla por debajo de los lmites de deteccin de la reaccin calorimtrica, a lo que se suma el hecho de que estas partculas pueden desprenderse de las manos con un simple roce. Limite de apreciacin: 0,1 gamas

1 gama = 0,000001 gr Limite de apreciacin: es la medida de sensibilidad de una reaccin qumica expresada por la cantidad de substancia en gamas que se puede detectar dentro de las condiciones de ensayo Como se mencionara, la reaccin es 100% especfica para los elementos metlicos investigados, no as para establecer el origen de los mismos, ya que un mecnico, un trabajador de imprenta, tipgrafos o soldadores pueden tambin arrojar resultados positivos, aunque con marcada diferencia en cantidades.

TECNICA DE PREPARACION DEL REACTIVO DE GRIESS: REACTIVOS: *ACIDO SULFANILICO *ALFA NAFTIL AMINA *ACIDO ACETICO *AGUA DESTILADA Preparacin del reactivo: 1. Acido Sulafanlico 1 g ms 70 cc de agua destilada mas 30 cc de Acido Actico, llevar a ebullicin y sacar, dejar enfriar. 2. Alfanaftilamina 0,5 g mas 70cc de agua destilada, llevar a ebullicin y enfriar, luego agregar 30 cc de Acido Actico. 3. Mezclar ambos reactivos para usar. OBSERVACIONES: Duracin aproximada dos semanas, cambiar cuando el reactivo vire al color rosa. Conservar en frascos oscuros y al abrigo de la luz.II- Reaccin de PETER GRIESS: Para la investigacin de Nitritos.1. Embeber un trozo de papel de filtro con el Reactivo de Griess. 2. Colocar el papel de filtro sobre la muestra en estudio y presionar ligeramente. 3. Utilizar otro papel de filtro seco por encima del papel con reactivo. 4. Observar la reaccin a simple vista. El reactivo de Peter Griess en presencia de nitritos origina una coloracin fucsia o rosada en forma de puntos, lo que corresponderan a los granos de plvora combustionada del cartucho; la observacin de la coloracin en forma de manchas, puede indicar contaminacin o resultado falso positivo. La reaccin es positiva para los nitritos de cualquier origen. NOTA: Los resultados obtenidos en estos estudios, estn sujetos a una serie de factores que influyen directamente en ellos y que son: El tiempo transcurrido entre la toma de la muestra y el hecho investigado.

El nmero de disparos realizados. El tipo de arma utilizada. La cartuchera utilizada. La distancia de disparo

AREA QUIMICA FORENSE FIBRAS Engloba todos los tipos de fibras, sean textiles o no, inclusive las que provienen de vegetales naturales. Con el anlisis pericial de ellas es posible obtener la siguiente informacin: - El tipo de fibra: por ejem. Si es animal (lana), vegetal (algodn), sinttico (hecho por el hombre), o mineral (vidrio). Determina si la fibra analizada tiene el mismo color y las mismas caractersticas microscpicas de la pieza de evidencia que pertenece al sospechoso o viceversa.

Muestra para de estudio: en todos los objetos de pericia, que requiera de la comparacin, se necesitarn de dos tipos de muestras, las dubitadas y las indubitadas o testigos. OBJETO DE LA PERICIA: establecer semejanza o diferencia entre muestras; y / o determinar procedencia natural de las muestras. LIMITACIONES DE LA PERICIA DE FIBRAS: no es considerada evidencia inequvoca, pero es una buena evidencia circunstancial. Mtodos de estudio Utilidad: el estudio morfolgico y / o comparativo de las fibras puede resultar de utilidad en todos los tipos de hechos punibles investigados, ya que al tratarse de micro huellas su intercambio prcticamente es inevitable en el tringulo de un hecho (Vctima Victimario Lugar del hecho).

a) METODO OPTICO: epimicroscopa, la observacin de las fibras se realiza en forma directa. En esta observacin se tendr en cuenta parmetros como: Color. Tipo: Sinttico Algodn Vegetal Otros. Trama: Si es un fragmento textil: oblicuo, perpendicular, etc. Conformacin: Simple: una sola hebra Compuesta: dos o mas hebras. Imperfecciones. Aspecto: Enlazado torcido sobre su eje liso etc. Medidas: Dimetro de la fibra compuesta y de las micro fibrillas que la componen. Nmero: Cantidad de fibras que la componen. b) METODO FISICO: reaccin a la temperatura, apoyando una fuente de calor a la muestra y observar: si se quema, se derrite, se desprende humo, olor caracterstico, etc. c) METODO QUMICO: Medicin cualitativa, de la resistencia del color; utilizando diferentes solventes, empezando por el agua con lo que se ve y se compara la resistencia del color en la fibra tratada. TIERRA OBJETO DE LA PERICIA: Determinar semejanza o diferencia entre las muestras. LIMITACIONES DE LA PERICIA: La tierra muestra grandes variaciones de un punto a otro de la superficie terrestre, aun mas con la profundidad, por lo que no es posible decir que una muestra de tierra proviene de un cierto lugar con exclusin a todos los dems. METODOS DE ESTUDIO: el cotejo de estas muestras se basa en una serie de pasos en los que se ir observando el comportamiento y la composicin morfolgica. a) Mtodo ptico: las muestras se observan en forma macroscpica y epimicroscpica, asentando todos los detalles observados. b) Mtodo Fsico: 1. Determinacin del pH: suspender una porcin de la fraccin fina en agua destilada y medir el ph. 2. Determinacin de la sedimentacin por centrifugacin: Colocar 1 2 gramos de arena en un tubo de centrfuga con agua y centrifugarla a una velocidad media por 10 minutos, retirar el sobrenadante, observar una posible distribucin de elementos en capas o fases.Muestra M1 M2 pH Velocidad de Sedimentacin (cm./seg.) Fases de Centrifugado

M3 M4 OBSERVACION EPIMICROSCOPICA Muestra Caracteres Observados Granos de Arena Rojizo Opaco Granos de Arena Incoloro Transparente Granos de Arena Rojizo Marrn Aglomerados de Arena Marrn Oscuro Partculas de Materiales Construccin Hojas Secas, Restos de Races.Restos de Fibras.Pedazo de madera Carozo de Coco Resto de Papel Granulometra Fina Intermedia Gruesa

ACELERANTES DE LA COMBUSTIN Sustancia o mezcla de ellas, que agregadas intencionalmente o accidentalmente a un material combustible, tiene la propiedad de facilitar el desarrollo del fuego, transformando un material combustible, en uno de alta inflamalidad. - Objeto de la pericia: Investigar la presencia de sustancias acelerantes de la combustin. a) Caracteres organolepticos: Describir en detalle los caracteres organolpticos de las muestras como el color, olor, aspecto, ya que la mayora de estas sustancias son hidrocarburos derivados del petrleo, por lo que poseen aspecto oleoso y olor caracterstico aportando as una valiosa informacin. b) Mtodo analtico: (Mtodo Macoum) Consiste en el aislamiento de hidrocarburos livianos como el kerosn y la nafta. Procedimiento: 1. Colocar la muestra en cantidad suficiente de alcohol absoluto, en un recipiente tapado. 2. Dejar en reposo 24 horas. 3. Transvasar el alcohol, escurrindolo al mximo. 4. Medir y agregarle el doble de su volumen en agua. En caso de mucha turbiedad se puede filtrar con gasa o algodn. 5. Destilar el lquido obtenido y recoger las tres primeras fracciones de 25 ml cada una, en probetas de 50 ml.

6. Agregar a cada fraccin 9 ml de dicromato de potasio al 2 % y 3 ml de cido Clorhdrico concentrado. Dejar 24 hs. en reposo. 7. Observar en la superficie de cada fraccin, la eventual aparicin de una fase de separacin debida a hidrocarburos. PINTURAS Se refiere a toda sustancia coloreada depositada sobre cualquier tipo de soporte. METODOS DE ESTUDIO: Mtodo ptico: A simple vista: con luz blanca. Considerando los parmetros de color y aspecto. Con elementos pticos: lupa, Epimicroscpio (Estereoscopio).

Se consideran como parmetros el nmero de capas que forman la pintura, describiendo: a) El color. b) El espesor de cada una. c) El orden de repeticin de las capas. d) Inclusiones presentes. e) Aspectos generales como transparencia, homogeneidad, refringencia, etc. El valor analtico y pericial de este estudio es de carcter orientativo, pues una semejanza no implica identidad.-