UNIVERSIDADE ESTADUAL DE PONTA GROSSA

SETOR DE CINCIAS AGRRIAS E TECNOLGICAS MESTRADO EM AGRONOMIA

RESISTNCIA DE INSETOS A INSETICIDAS

Mestranda: Ana Paula de Azevedo Orientador: Prof. Dr. Ricardo Ayub

PONTA GROSSA 2012

Palavras-chave: Insect, resistance, insecticides, resistencia, insetos, Bt 1 INTRODUO O problema causado por insetos associados s atividades humanas est na competio entre vrias espcies por recursos alimentares, incluindo a humana (BOYER, 2011). Os mtodos atuais de controle de pragas so baseados no uso de inseticidas, que geralmente so as ferramentas mais eficazes e que fornecem o nico mtodo vivel de reduzir populaes de pragas de insetos a nveis aceitveis (HAREIN e DAVIS, 1992; PEREZ-MENDOZA, 1999 apud BOYER, 2011). Porm, a resistncia aos inseticidas geralmente torna-se generalizada como resultado da disseminao de fentipos resistentes em resposta presso seletiva provocada pela presena de inseticida no ambiente (MUGGLETON, 1983) (MUGGLETON, 1983 apud FRAGOSO, 2004). A resistncia de pragas a produtos qumicos tem se tornado um problema bastante srio em mbito mundial, com um elevado nmero de casos de resistncia a organofosforados, carbamatos, piretrides, em insetos e caros (GEORGHIOU, 1990 apud SATO, 2008). Embora os estudos de resistncia de inseticidas para estes insetos sejam pouco frequentes e envolvam bioensaios de deteco (apenas CHAMP e DYTE, 1976; PACHECO et al, 1990;. SARTORI et al, 1990.; GUEDES et al., 1995 apud FRAGOSO, 2003) o desenvolvimento de cultivares resistentes a pragas um importante componente do manejo integrado de pragas (LARA, 1991; PICANO et al., 1995 apud ECOLE, 2001).

2 REVISO BIBLIOGRFICA Em locais onde os inseticidas tm sido amplamente utilizados para o controle de pragas, a resistncia de muitas espcies de insetos apresenta-se evidente em populaes de campo que infestam produtos armazenados (CHAMP e DYTE, 1976; BADMIN, 1990; PACHECO et al, 1990;. GUEDES et al, 1995, 1996;. SUBRAMANYAM e HAGSTRUM, 1996 apud FRAGOSO, 2003). A utilizao de misturas de inseticidas uma estratgia reconhecida para o

gerenciamento

de

populaes

resistentes

(BRATTSTEN

et

al.,

1986;

TABASHNIK, 1990; MCKENZIE, 1996 apud CRREA, 2011). Os insetos so afetados de maneiras diferentes quando expostos aos inseticidas. importante avaliar o impacto destes produtos qumicos sobre as espcies de parasitides para o seu uso em programas integrados de gerenciamento de pragas (ELZEN et al 2000;. HILL e FOSTER 2000; ZEHNDER et al. 2007 apud VIANNA, 2009). Nos ltimos anos, mais de 504 espcies de insetos e caros com resistncia a inseticidas foram registrados, e h ainda um aumento constante na resistncia a produtos qumicos especficos, com muitas espcies resistentes a vrias famlias de molculas (GEORGHIOU, 1990; LEE, 2002 apud BOYER, 2011). Muitos organismos reagem de forma diferente quando em contato com certos compostos o que faz necessrio entender o impacto dos inseticidas sobre parasitides (ELZEN et al. 2000; HILL e FOSTER 2000 apud VIANNA, 2009). Os insetos tm sucesso de adaptao para a maioria dos inseticidas, tornando-se fisiologicamente ou comportamentalmente resistente (SAWICKI e DENHOLM, 1984 apud BOYER, 2011).

2.1 MTODOS DE CONTROLE DE PRAGAS

Controle Fisico Atmosferas controladas tm sido utilizadas de forma eficaz para matar uma vasta gama de pragas de quarentena e de armazenagem, incluindo os membros das famlias Tephritidae, Tortricidae, Curculionidae, Miridae e Liposcelididae (SODERSTROM et al., 1990; KE e KADER, 1992; WHITING et al, 1992;. LEONG e HO, 1995; WANG et al., 2000 apud BOYER, 2011). Entre os mtodos de controle fisco de pragas, podemos citar o dixido de carbono, utilizado nos tratamentos de atmosfera controlada para mortalidade de pragas, o resfriamento e a secagem. Sendo que, um dos principais benefcios decorrentes de melhorias na secagem e arrefecimento de processos para os produtos armazenados o controle de artrpodos, especialmente em um

ambiente onde os tratamentos qumicos estao cada vez mais sobre presso (BECKETT, 2011).

Fumigantes Dois fumigantes so atualmente utilizados para a proteo dos alimentos armazenados: fosfina e brometo de metila. Fosfina possui registro mundial como fumigante para gros (REN, 2010). No entanto, a utilizao de brometo de metila foi restringida devido s suas propriedades destruidoras do ozonio e sua toxicidade muito elevada para animais de sangue quente (DANSI et al., 1984 apud BOYER, 2011). A fosfina continua sendo um dos inseticidas mais comumente utilizados. Em paralelo com o dixido de carbono um elemento importante para aumentar a eficcia de atmosfera controlada em tratamentos destinados a aumentar a mortalidade de pragas (WANG et al., 2000).

Organoclorados O primeiro grupo de inseticidas desta classe, amplamente utilizados na agricultura, foram os organoclorados (DDT, BHC, ciclodienos, metoxicloro e policloroterfenos, entre outros) no incio de 1940, poca da Segunda Guerra Mundial (WARE, 2010 apud BORGES, 2011). Os pesticidas organoclorados so relativamente inertes e sua alta estabilidade est relacionada s ligaes carbono-cloro. Estes compostos so muito estudados devido alta toxicidade, baixa biodegradabilidade e biossolubilidade em tecido lipdico (LANA, 1996 apud RISSATO, 2004). Resistncia ao DDT, organofosforados e piretrides foram relatadas (FRAGOSO et al, 2003; RIBEIRO et al, 2003 apud BOYER, 2011). Entretanto, a conscientizao dos problemas acarretados pelo uso indiscriminado destes agrotxicos, assim como sua elevada toxicidade, reteno nos tecidos adiposos animais e a longa permanncia no ambiente, levaram sua proibio no Brasil na dcada de 1980 (BAPTISTA, 1990; GALLO et al., 2002 apud BORGES, 2011).

Organofosforados As molculas mais conhecidas desta classe de inseticidas so o acefato, metamidofs, monocrotofs, paration metil, triclorfon e diclorvs (ANDREI, 1999; GALLO et al., 2002 apud BORGES, 2011). Os organoclorados foram substitudos por compostos organofosforados, como Malation, para o controle de insetos em gros armazenados. O uso extensivo de Malation para a controle de pragas de cereais armazenados resultou em resistncia de vrias espcies, como Tribolium castaneum em 1961 na Nigria ou Sitophilus zeamais no Brasil (GUEDES et al., 1995 apud BOYER, 2011).

Piretrides Os piretrides que surgiram na dcada de 1960, atuam na transmisso axnica e so bastante conhecidos pelo seu efeito de choque (know-down) quase instantneo nos insetos (GALLO et al., 2002 apud BORGES, 2011). Organofosforados foram substitudos por piretrides, tais alfacipermetrina, deltametrina, permetrina, cipermetrina e lambda-cialotrina. A deltametrina mostra uma grande eficcia contra S. zeamais (GUEDES et al., 1995 apud BOYER, 2011).

2.2 MECANISMOS DE RESISTNCIA A INSETICIDAS Classicamente, existem trs mecanismos envolvidos na resistncia de insetos a inseticidas, que so: reduo da penetrao do inseticida pela cutcula do inseto; detoxificao ou metabolizao do inseticida por enzimas; e reduo da sensibilidade no stio de ao do inseticida pelo sistema nervoso (LORINI, 1999). As barreiras de penetrao em insetos constituem um mecanismo de resistncia vivel, e a reduo da penetrao do inseticida pela cutcula efetiva quando associada ao mecanismo de defesa metablico, e mais efetiva ainda contra inseticidas prontamente degradveis. A base gentica desse mecanismo est relacionada a genes secundrios, como o gene pen da mosca domstica, que se localiza no cromossomo III e um gene recessivo. Normalmente, esse gene confere pouca ou nenhuma resistncia na ausncia de outro mecanismo de

resistncia e provavelmente no causa, por si s, significantes falhas de controle (ROUSH & DALY, 1990). A metabolizao ou detoxificao importante, e provavelmente o mais estudado, mecanismo de resistncia de insetos a inseticidas. O aumento da atividade de enzimas de desintoxicao, alm da insensibilidade no local alvo, um mecanismo bioquimico comum de resistncia a inseticidas (TAYLOR & FEYEREISEN, 1996, FFRENCH-CONSTANT, 1999; SCOTT, 1999 apud FRAGOSO et al., 2003). Esse mecanismo permite ao inseto modificar ou detoxificar o inseticida a uma taxa suficiente para prevenir a ao no stio alvo. A degradao de inseticidas pode ocorrer por vrios processos metablicos nos quais o produto convertido em forma no txica ou mesmo eliminado rapidamente do corpo do inseto. Diferentes enzimas e sistemas enzimticos esto envolvidos no processo da resistncia, como esterases, oxidases, transferases e outras enzimas que aumentam sua eficincia ou a quantidade nas raas resistentes. Cada enzima mais especfica para um tipo ou grupo de inseticidas. A resistncia associada a esses processos controlada primariamente por genes localizados no cromossomo II na mosca domstica e parece ser herdada de maneira incompletamente dominante (LORINI, 1999). Insetos usam enzimas no s para manter a sua homeostase, mas tambm para proteger-se contra xenobiticos (SODERLUND & BLOOMQUIST, 1990; COMMANDEUR et al., 1995; OMURA, 1999; STRANGE et al., 2001 apud FRAGOSO et al., 2003). O terceiro mecanismo de resistncia, que a reduo na sensibilidade do sistema nervoso, caracterizado por trs diferentes processos. Na resistncia por "knockdown" (kdr) na mosca domstica, existe demora na resposta do sistema nervoso do inseto aos inseticidas piretrides e ao DDT. O mecanismo neurotxico kdr envolve seletiva modificao na sensibilidade do canal de sdio, o qual considerado o principal stio de ao de piretrides e do DDT. Esses autores registraram que o gene kdr recessivo, assim como o super-kdr alelo, que confere resistncia maior que a do gene kdr. Outro mecanismo que altera o sistema nervoso a insensibilidade da acetilcolinesterase para inseticidas organofosforados e carbamatos. Outra vez, na mosca domstica, o gene responsvel por essa resistncia localiza-se no cromossomo II. O ltimo desses

processos confere resistncia a inseticidas ciclodienos, e o gene responsvel est localizado no cromossomo IV (LORINI, 1999). CHAPMAN & PENMAN (1979) apud BOYER (2011), descreveram a

resistncia cruzada como uma resistncia a um composto que confere resistncia a outro composto do mesmo grupo. Muitas vezes a resistncia a um determinado inseticida est relacionada com uma resistncia anterior a outra molcula (BOYER, 2011). Na literatura, a resistncia cruzada foi mencionada, porm sem nenhuma definio do mecanismo envolvido (LEE et al. ,2000, LEE, 2002 apud BOYER, 2011). Estudos em produtos armazenados demonstram que resistncias mltiplas ocorrem quando uma populao de insetos que apresentam resistncia desenvolvida para um inseticida, exibem resistncia um ou mais inseticidas que nunca estiveram em contato, com um nico ou mltiplos mecanismos de resistncia (BOYER, 2011).

2.3 OCORRNCIAS DE INSETOS RESISTENTES A INSETICIDAS PERSPECTIVAS FUTURAS

O gorgulho do milho, Sitophilus zeamais Motschulsky (Coleoptera: Curculionidae), uma sria praga cosmopolita de cereais armazenados, principalmente do milho, nos trpicos (TRONO, 1994; DANHO et al., 2002 apud FRAGOSO et al., 2005). O principal meio de controle de gorgulho do milho em climas quentes a utilizao de inseticidas, devido falta de outras alternativas de controle (GUEDES, 1991). Um estudo anterior de herana da resistncia a deltametrina e os esforos recentes para determinar os mecanismos subjacentes de resistncia a inseticidas em populaes brasileiras de gorgulho do milho, sugerem a provvel existncia de resistncia cruzada e mltipla em poucas populaes altamente resistentes a piretrides (GUEDES et al., 1994, 1995; FRAGOSO et al., 2003; RIBEIRO et al., 2003 apud FRAGOSO et al., 2005). Entre as principais pragas de insetos em culturas de milho no Brasil, a lagarta do cartucho, Spodoptera frugiperda (Smith, 1797)(Lepidoptera:

Noctuidae), considerada a numero um em importancia (Cruz et al., 1995,1997 apud NEGRISOLI, 2010). O controle qumico de S. frugiperda, com a utilizao de elevadas concentraes do mesmo ingrediente ativo, aliado ausncia de reas de refgio conduz a elevao da presso seletiva, resultando no desenvolvimento de resistncia a estes produtos qumicos. Os meios primrios para manejo de Bemisia foi o uso de inseticidas, o que resultou no desenvolvimento de resistncia a todas as produtos qumicos, incluindo piretrides, principais classes de carbamatos, organofosforados,

ciclodienos e reguladores de crescimento de insetos (DENHOLM et al., 1995 apud SCHUSTER & STANSLY, 2000). J no Marrocos, 50 das 51 populaes de insetos que foram estudadas apresentaram resistncia (BENHALIMA et al., 2004 apud BOYER, 2011). A resistncia aos fumigantes (fosfina, brometo de metila e dibrometo de etileno) tambm tem sido relatada em diferentes partes do mundo (SRIVASTAVA, 1980; MILLS, 1983; TYLER et al., 1983; ZETTLER, 1990; ATHIE et al., 1998 apud BOYER, 2011). O uso extensivo de atmosfera controlada no controle de insetos tambm pode levar seleo de populaes de insetos resistentes hipercarbia e hipxia (DONAHAYE, 1990; WANG et al., 2000). Infelizmente, na maioria dos casos, os mecanismos de resistncia no so relatados nem estudados (BOYER, 2011). Porm, o controle de pragas na agricultura moderna tem sofrido uma verdadeira revoluo com o surgimento da biotecnologia, que cada vez mais tem permitido o afastamento da dependncia de pesticidas exgenos para prticas mais sustentveis e ambientalmente benignas. A introduo de genes exgenos que conferem resistncia a insetos em plantas cultivadas, tem sido um grande sucesso em termos de nveis de proteo conferida pela expresso de toxinas de Bacillus thuringiensis (Bt) (FERRY, 2006). As plantas Bt atualmente dominam o mercado de transgnicos resistentes a insetos. No entanto, nem todas as pragas so suscetveis a toxinas Bt Cry e h preocupaes de que mesmo espcies sensveis possam evoluir para se tornar resistentes a estas culturas (MALONE, 2008).

A busca por alternativas a toxinas Bt Cry tem apresentado progressos significativos como a produo de culturas transgnicas expressando compostos inseticidas de plantas, tais como os inibidores da protease, lectinas e inibidores de alfa-amilase (MALONE, 2008). Sendo que, a avaliao em campo das plantas que contm genes inseticidas, um componente vital do processo global de criao e implantao de plantas transgnicas resistentes a insetos (FERRY, 2006). No futuro, a engenharia metablica de plantas poder nos permitir alterar com grande preciso as maneiras pelas quais as plantas e os insetos interagem (MALONE, 2008).

3. CONSIDERAES FINAIS Muitas so as citaes de insetos resistentes a inseticidas na agricultura, relacionadas com os mtodos tradicionais de controle de pragas. A biotecnologia tem oferecido novas ferramentas para auxiliar no desenvolvimento de novas formas de controle. Porm, estudos sobre os mecanismos de resistncia devem ser aprofundados.

REFERNCIAS BECKETT, S.J. Insect and mite control by manipulating temperature and moisture before and during chemical-free storage. Journal of Stored Products Research 47, 284 e 292, 2011. BORGES, L.R. & NOVA, M.X.V. Associao de inseticidas qumicos e fungos entomopatognicos no Manejo Integrado de Pragas uma reviso. Ambincia Guarapuava (PR) v.7 n.1 p.179 - 190 Jan./Abr. 2011. BOYER, S. ZHANG, H. & LEMPRIRE, G. A review of control methods and resistance mechanisms in stored-product insects. Bulletin of Entomological Research, Page 1 of 17. Cambridge University Press 2011. ECOLE, C. C. PICANO, M. C. GUEDES, R. N. C. & BROMMONSCHENKEL, S. H. Effect of cropping season and possible compounds involved in the resistance of Lycopersicon hirsutum f. typicum to Tuta absoluta (Meyrick) (Lep., Gelechiidae). J. Appl. Ent. 125, 193200, 2001. FERRY, N. EDWARDS, M.G. GATEHOUSE, J. CAPELL, T. CHRISTOU, P. GATEHOUSE, A.M.R. Transgenic plants for insect pest control: a forward looking scientific perspective. Transgenic Research, 15:1319, 2006. FRAGOSO, D. B. GUEDES, R. N. & REZENDE, S. T. Glutathione S-transferase detoxification as a potential pyrethroid resistance mechanism in the maize weevil, Sitophilus zeamais. Entomologia Experimentalis et Applicata 109: 2129, 2003. FRAGOSO, D. B. GUEDESA, R. N. C. PETERNELLI, L. A. Developmental rates and population growth of insecticide resistant and susceptible populations of Sitophilus zeamais. Journal of Stored Products Research 41, 271281, 2005. GUEDES, R.N.C. Manejo integrado para a proteo de gros armazenados contra insetos. Revista Brasileira de Armazenamento 15: 348, 1991.

LORINI, I. Gros armazenados: resistncia de pragas a inseticidas qumicos. Comunicado tcnico on line EMBRAPA Trigo. N 45, dez./99. MALONE, L.A. GATEHOUSE, A.M.R. BARRATT, B.I.P. Beyond Bt: Alternative Strategies for Insect-Resistant Genetically Modified Crops. Progress in Biological Control, Volume 5, 357-417, 2008. REN, Y. LEE, B. PADOVAN, B. Penetration of methyl bromide, sulfuryl fluoride, ethanedinitrile and phosphine into timber blocks and the sorption rate of the fumigants. Journal of Stored Products Research 47, 63 e 68, 2011. RISSATO, S.R. Determinao de pesticidas organoclorados em gua de manancial, gua potvel e solo na regio de Bauru (SP). Quim. Nova, Vol. 27, No. 5, 739-743, 2004. ROUSH, R. T. & DALY, J. C. The role of population genetics in resistance research and management. In: ROUSH, R. T.; TABASHNIK, B. E. (Ed.). Pesticide resistance in arthropods. New York: Chapman and Hall, p.97-152, 1990. SATO, M.E. Resistncia de insetos pragas em gros armazenados. Biolgico, So Paulo, v.70, n.2, p.93-95, jul./dez., 2008. SCHUSTER, D.J. & STANSLY, R.A. Response of two lacewing species to biorational and broad-spectrum insecticides. Phytoparasitica 28(4):297-304. 2000. VIANNA, U. R. PRATISSOLI, D. ZANUNCIO, J.C. LIMA, E.R, BRUNNER, J. PEREIRA, F.F. PEREIRA, J. E. SerraInsecticide toxicity to Trichogramma pretiosum (Hymenoptera:Trichogrammatidae) females and effect on descendant generation. Ecotoxicology 18:180186, 2009. WANG, J., ZHAO, Z. & TSAI, J.H. Resistance and some enzyme activities in Liposcelis bostrychophila Badonnel (Psocoptera: Liposcelididae) in relation to

carbon dioxide enriched atmospheres. Journal of Stored Products Research 36, 297308, 2000.