SISTEMA FIBRINOLTICO

Mauricio Lpez Sierra PhD Unidad de Hematologa 2012

El conocimiento cientfico del proceso de coagulacin y de fibrinolisis de la sangre ayudar a cohibir la hemorragia de vasos de pequeo calibre. . Pero an no hay una anestesia eficaz y se opera en circunstancias difciles para el mdico y para el paciente

Concepto hemostasia:
Mecanismos que permitan detener el sangrado, producto de ruptura de un vaso y mantener la sangre en forma fluida.

Fibrinlisis
La fibrinlisis consiste en la degradacin de las redes de fibrina formadas en el proceso de coagulacin sangunea, evitando la formacin de trombos

Activadores Hemorragias Coagulacin Hipo

Activadores

Lsis Perturbacin de la funcin coaguloltica

Hiper Trombosis Inhibidores Inhibidores

Fibringeno

Yang Z et al. PNAS 2000;97:3907-3912

The plasminogen activation system

tPA

Componentes del sistema fibrinoltico

Fibringeno: 6 cadenas polipeptdicas (2 Aalfa-2 Bbeta-2 Gama Modificacion Postranlacional circula con MW 34kD

Molcula fibringeno

Fibringeno
1.7-5.0 g fibringeno sintetizados /da 75%: secretado al plasma 25%: ndulos linfticos y lquido intersticial Plasma: 2.5 mg/ml Considerado reactante de fase aguda y puede aumentar 10 x en respuesta: trauma, embarazo, inflamacin.

Regulacin de fibrinlisis
Lisis del cogulo Sistema compuesto plasma, plaquetas, tejido Plasmingeno monocatenaria, plasmina 2 variantes, glicosilada rol: degradacin 1968 esquema de fragmentacin

Clivaje principal en regin coiled coil entre fragmento E y D 1 remocin de cadenas Alfa, producto mas pequeo de degradacin es doble D, dmero D Dimero D + fragmento E

Plasmingeno
Precursor inactivo de plasmina, catalizador primario de degradacin de fibrina 200 mg-L t1/2 2.2 das Cr 6 q26-q27 Reactante agudo 2 elementos de respuesta a fase aguda 76-81 553 -558 Sintetizado en hepatocitos

Plasmingeno
Presente en amplios tejidos y fluidos, saliva, glndulas lagrimales, lquido seminal, secreciones prostticas Es una cadena simple glicoprotica 2 variantes en iguales concentraciones, difieren en sitio de glicosilacin

Estructura 1 plasminogeno es secretada 791 Aa con dominio de activacion NH2 t 5 res kringles dominio de protenas que se pliega en grandes bucles
estabilizados por tres enlaces disulfuro

1 dominio cataltico Primer sitio de plasminogeno Lys es en coagulo

4 dom kringles (lysyl res)son responsables de regulacion de union a plasmingeno a fibrina Competir con otros res lys (aminocaproico acido tranaxmico) Utilizados como inhibidores de fibrinolisis

Plasmingeno es zimogeno Serin proteasa clivando Arg- Val por un activador: u-PA / t-PA 3 vas activacin:
Intrnseco: sustancias con carga Extrnseco tPA / uPA exgeno

Activadores intrnsecos
Factor XII Precalikreina HMWK High-molecular-weight kininogen Factor XI La va intrnseca puede cooperar con 15% actividad fibrinoltica

Fibrinolytic System

Activadores extrnsecos
t PA: producto de cel endoteliales 5ug/L T1/2 2.4 min u PA t PA: producto de cel endoteliales-msculo liso de vasos, neuronas, megacariocitos, mastocitos, fibroblastos, monocitos Factores que inciden en su liberacin: trombina, acetilcolina, histamina, bradikinina, IL, vasooclusion

Estructura gnica
t PA Cr8 33 kb, reponde a Ac retinoico y enh. multihormona Serin proteasa 70 kd 527 aa NH2 terminal ser Cadena simple es un eficiente activador de plasmingeno en presencia de fibrina Clivado en Arg Ile 276 potente activador y se produce durante fibrinolisis

Factor Xa y kalicreina son catalizadores de esta conversin tPA dividida estructural y funcionalmente Porcin NH2 ser-Arg 275: heavy o A chain Posee caractersticas de unin a fibrina, activacion fibrino especifica de plasmingeno y mecanismo de cleareance plasmtico Dom fingerlike fibronectina asociado a la unin a tPa a fibrina 2 dominios kringles: union a tPa a fibrina: bloqueado por ac aminocaproico

28 kD: regin cataltica

Light o B chain Ile 276-pro 527 Contiene sitio cataltico de serina proteasa A y B clivan plasmingeno Arg Val 562 para plasmina Ambas en presencia de fibrina axn

Regulacin tPA
Control sitio cataltico va dependencia de fibrina Control de niveles funcionales de tPA: clearenace heptico Control niveles actividad tPA en sitio de dao por competencia de aumento de secrecin de tPA vs PAI 1 de las plaquetas

tPA 70 kD
NH2 Finger

EGF

kringle1

Kringle 2 275

catalitico 276

plasmina

Sc uPA 54 kD
NH2

EGF

kringle 158 159

catalitico

Plasma calicrena Plasmina Catepsina L

t Pa es fibrinoltico + unin fibrina: Unin alinea t PA y Pmg en superficie de fibrina : eficiencia es mayor Por lo tanto se requiere localizacin de plasmina y generacin en sitio de depsito de fibrina Plaquetas liberan serotonina que induce de cel endoteliales liberacin de tPA

Activador extrnseco. Urokinasa activador de plasmingeno

Descubierto en orina 40-80 ug/L Detectado tb : cel rin, endoteliales malignas, tumores y plasma Serin protesa Cadena simple uPA prourokinasa o single chain uPA scuPA t1/2 5 min metabolismo en hgado y rin Baja actividad proteoltica

scuPA
Plasmina cliva Lys Ile 159 convirtiendo 2 cadenas de scuPA en tcuPA Mecanismo pobremente conocido Postulado: trombo t PA activa plasmingeno unido fibrina (plasmina) Unin activa scuPA generando una cascada de generacin de plasmina Extravascular por tratarse de matriz metaloproteinasas

scuPA
Gen 6,4 kb cr 10 Pt 431 aa Ratones viven, menor cantidad de trombos vasculares, menor fibrina Excesiva cantidad en caso de lesin Aumenta susceptibilidad a infecciones

scuPA
12 S-S Cys Cys 279 unin cataltica
NH2 EGF kringle 158 159 catalitico Tipo serin proteasa

Plasmina kalicreina catepsina L

Activacin por hidrlisis Lys-Ile 159 NH2 unin S-S dominio cataltico

Activacin
Plasmina es activador (fibrinolisis) Kalicreina y Factor XIIa generan la hidrlisis 2 forma activa: low MW scuPA Ocurre segunda protelisis Lys Lys 136 Puede unirse a dominio cataltico por S-S en Cys Cys 279 Activador ms eficiente (terapia trombtica)

Funcin
1 activador de plasmingeno en vasculatura scu PA convertido en tcuPA

Activador extrnseco: Factor VII proteasa

Serin proteasa hialoronan binding protein Hialuroproteasa Potente activador FVII y scu PA FSAP cr 10 560 aa

FSAP activacin
Single chain glycoprotein 12 ug/ml Estructura: cadena amino terminal (1-52) 3 dom EGF (53-166), 1 kringle y dominio serin proteasa COOH t Activacin a 2 cadenas clivando Arg Ile 291 Generando cadena pesada + cadena liviana unidas por SS Heparina. afectada :V-Va VII VIIIa fibringeno fibronectina

Funcin
2 cadenas FSAP convierten factor VII contribuyendo en sus niveles de mantencin Localizacion F VIIa 2 cad FSAP Activa scu PA

Inhibidores sistema fibrinoltico

Plasma, clulas sanguneas, tejido matriz extracelular Inhibir la plasmina o bloquear conversin plasmingeno a plasmina

tPA

Thrombin Activable Fybrinolisis activator: TAFI

Hgado, circula complejo con plasmingeno Pt 423 aa Pptido seal-dom activacin- dom cataltico 4 sitios de glicosilacin (dom activacin) TAFIa inhibido por quelantes de Zn Inestable a pH fisiolgico y T t 10 min
Complejo trombina trombomodulina Plasmina

TAFI
Zimgeno activacin por clivage generando una carboxipeptidadasa Tripsina trombina complejo trombina trombomodulina lo catalizan Polmeros de fibrina y fibrinopeptidos contienen residuos de arg COOH t, los que son sustratos para TAFIa

Plasminogen activator Inhibitor -1

PAI-1inhibidor fisiolgico primario del plasmingeno blancos: tPA uPA Cadena simple 379 aa Complejo con tPA uPA se realiza por uniones covalentes entre grupos aa que puede ser reversible

Plasminogen activator Inhibitor -1

Rxn con sct PA y tct PA T1/2 tPA -1min Solo forma complejo con tcu PA

Plasminogen activator Inhibitor -2

Serpina 415 aa Descrita en placenta No es detectable, embarazos Secretado por cel blancas, lneas epiteliales y tumorales tct PA tcu pA inhibe pero ms lento PAI-1 2 formas:
intracelular no glicosilada secretada glicosilada

2 antiplasmina
Inhibidor de plasmina Protena de cadena simple 464 aa, sitio primario de sntesis hgado Existen dos variantes NH2 t Miembro de serin proteasas Sitios de unin para plasmingeno

2 antiplasmina
3 sitios funcionalmente importantes Sitio reactivo Sitio unin plasmingeno/plasmina rxn con kringles Sitio cross linking Estabiliza fibrina, protegiendo la degradacin Fibrina es clave para activacion de plasminogeno x t PA

tPA