UNIVERSIDAD IBEROAMERICANA DE CIENCIAS Y TECNOLOGA

Facultad de Medicina Veterinaria y Ciencias Agrarias y Forestales Departamento de Patologa Profesor Gua: Flavio F. Briones S. Mdico Veterinario Profesor Colaborador: Marcia L. Jarpa H. Mdico Veterinario

Tcnica de Necropsia de caracoles Helix aspersa

Trabajo de Investigacin para optar al Ttulo de Mdico Veterinario

Natalia Bustamante Molina Santiago de Chile 2007

Indice

Indice............................................................................................................................. 1 Captulo 1...................................................................................................................... 3 Introduccin .................................................................................................................. 3 1.1. Anatoma del Helix aspersa.............................................................................. 12 1.1.1. La Concha................................................................................................... 12 1.1.2. El Cuerpo.................................................................................................... 13 1.1.3. La Cabeza ................................................................................................... 13 1.1.4. La Boca....................................................................................................... 13 1.1.5. Organo Auditivo......................................................................................... 14 1.1.6. El Pie .......................................................................................................... 14 1.1.7. Organizacin interna .................................................................................. 14 1.1.8. Aparato Digestivo....................................................................................... 15 1.1.9. Aparato Circulatorio................................................................................... 15 1.1.10. Aparato Respiratorio ................................................................................ 16 1.1.11. Aparato Excretor ...................................................................................... 16 1.1.12. Aparato Reproductor ................................................................................ 16 1.1.13. Sistema Nervioso...................................................................................... 17 Captulo 2.................................................................................................................... 18 Objetivos ..................................................................................................................... 18 Captulo 3.................................................................................................................... 19 Material y Mtodo....................................................................................................... 19 3.1. Material............................................................................................................. 19 3.2. Mtodos ............................................................................................................ 19 Captulo 4.................................................................................................................... 20 Resultados ................................................................................................................... 20 4.1. Objetivo N 1 Describir una tcnica de diseccin para el caracol Helix aspersa ................................................................................................................... 20 4.1.1. Sacrificio de las muestras ........................................................................... 20 4.1.2. Diseccin .................................................................................................... 21 4.1.2.1. Caractersticas externas generales........................................................ 21 4.1.2.2. Estructuras internas .............................................................................. 27 4.1.2.3. Sistema Digestivo................................................................................. 29 4.1.2.4. Sistema Reproductivo .......................................................................... 41 4.1.2.5. Sistema Circulatorio............................................................................. 45 4.1.2.6. Sistema excretor................................................................................... 47 4.2.1. Descripcin Anatmica Sistemtica........................................................... 48 4.2.1.1. Sistema Digestivo.................................................................................... 48 4.2.1.2. Sistema Reproductivo .......................................................................... 52

4.2.1.3. Sistema Circulatorio............................................................................. 59 4.2.1.4. Sistema Respiratorio ............................................................................ 64 4.2.1.5. Sistema Excretor .................................................................................. 66 4.2.1.6. Sistema Nervioso ................................................................................. 67 4.2.1.7. Sistema Locomotor .............................................................................. 68 4.3. Objetivo N 3 Realizar una descripcin topogrfica de la anatoma del Helix aspersa ................................................................................................................... 70 4.3.1. Anatoma Topogrfica................................................................................ 70 4.3.1.1. Regin Ceflica .................................................................................... 70 4.3.1.2. Cavidad Visceral .................................................................................. 71 4.3.1.3. Regin Pulmonar.................................................................................. 71 4.3.1.4. Regin Visceral .................................................................................... 72 4.3.1.5. Regin del Pie ...................................................................................... 72 4.4. Tcnica de Necropsia........................................................................................ 73 4.4.1. Protocolo de necropsia ............................................................................... 73 4.5. Objetivo N 5 Proponer una diagramacin corporal del caracol ................... 76 Captulo 5.................................................................................................................... 80 Discusin..................................................................................................................... 80 5.1. Mtodo de eutanasia ......................................................................................... 80 5.2. Imgenes ........................................................................................................... 81 5.3. Cortes histolgicos............................................................................................ 81 5.4. Tincin de las muestras..................................................................................... 82 5.5. Descripcin anatmica...................................................................................... 82 Conclusiones ............................................................................................................... 83 Captulo 7.................................................................................................................... 85 Bibliografa ................................................................................................................. 85 Captulo 8.................................................................................................................... 88 Anexos ........................................................................................................................ 88 8.1. Calendarizacin ................................................................................................ 88

Captulo 1 Introduccin

La aparicin del caracol en el planeta, se remonta al perodo Cmbrico de la era Paleozoica, hace aproximadamente unos 570 millones de aos; de ellos se alimentaron cazadores, tribus, ms tarde hebreos, griegos y romanos (Bustamante, 2004). Se dice que para estos ltimos los caracoles eran un verdadero manjar, los conquistadores llevaban consigo en sus viajes los moluscos preparados para no pasar demasiado tiempo sin su plato favorito, y se asegura que de esta forma propagaron su consumo por toda Europa (Marti, 2006).Estos adems de ser grandes consumidores, fueron importantes criadores, ideando los primeros recintos de crianza con secciones separadas para las diferentes especies y seleccin de los mejores especimenes para su reproduccin (Pompa, 2006).

Plinio, en sus relatos de romanos, cita el nombre Fulvius Lirppinus, como especialista en gasterpodos, y seala que l apreciaba los caracoles blancos de Iliria, especie prxima a los caracoles de Borgoa (Mioulane, 1995).

Pompa (2006), comenta que Fulvius estableci en Tarquemia, ciudad toscana no muy lejos de Roma, el primer lugar de cultivo, aproximadamente en el ao 50 a.C. Ah, se engordaba a los caracoles con vino y con salvado, alcanzando tamaos de importancia. Estos primeros criaderos no solo se dedicaban a la mejora de las especies nativas de caracoles, sino que se criaban otras especies procedentes de Iliria, del norte de frica, de Boreales, de Capri y de Liguria (Pompa, 2006).

Algunos de estos parques de crianza de caracoles se establecieron junto al Vesubio, en Pompeya, donde siglos ms tarde los arquelogos descubrieron miles de conchas.

Segn

investigacin reciente hecha por la Universidad de Cdiz, los caracoles

formaban parte de los ingredientes que contenan las vasijas de Garum (salsa que se usaba como condimento en la poca antigua y que era muy apreciada), encontrados en los restos de un naufragio de la poca romana, en la Costa Mediterrnea (Pompa, 2006).

La Edad Media tambin fue un perodo importante en el consumo de estos moluscos, debido a que su carne era apta para los perodos de abstinencia cuaresmal (Pompa, 2006).

As como han sido parte importante de la alimentacin a travs de la historia, han sido tambin, elementos importantes dentro de las religiones, las artes, la medicina y las tradiciones de diferentes culturas de todas las pocas (Torres, 2001).

De esta forma, muchas especies de caracol han sido valoradas por el significado religioso que se les ha otorgado a travs de la historia de varias culturas, usados como ofrendas y adornos para ciertos dioses y estructuras. As, durante el esplendor de las culturas prehispnicas como la maya, la mexica y la totonaca, jugaron un papel importante en su cosmovisin; igual que entre fenicios, egipcios, griegos, romanos y otros, quienes los usaron como ofrenda, joyas, moneda, armas, msica, ornato y comunicacin, y en la obtencin de colorantes para teir la ropa de las clases nobles (Barragn, 1999).

En la actualidad, los caracoles

vienen a ocupar un papel preponderante, como

consecuencia de la creciente demanda mundial, de alimentos en general, y especialmente de protenas de origen animal de alta calidad y bajo costo; cada vez resulta ms necesario recurrir a nuevas fuentes con posibilidades zootcnicas, econmicas y de buena rentabilidad (Cuellar y col., 1991).

Como actividad comercial surge, del estudio de investigaciones y experiencias recogidas en los ltimos aos, desarrolladas por distintos pases, especialmente Italia, Francia, Espaa y EE.UU., actividad practicada desde hace muchos aos (Gabetta, 2004).

Las fuentes tradicionales del suministro comercial de caracoles en Europa fueron siempre las poblaciones naturales del caracol de tierra, molusco que se encuentra en estado silvestre, en campos , cultivos, jardines, debajo de las piedras y plantas e incluso en casas ubicadas en la franja costera de ros y mares (Gabetta, 2004).

Como consecuencia de la recoleccin indiscriminada y el uso de herbicidas y agroqumicos en la agricultura y ganadera, como tambin por la reduccin de su hbitat al ser utilizadas las tierras para fines industriales y otros, estas poblaciones naturales de caracoles han ido disminuyendo hasta estar en peligro de extincin (Gabetta, 2004).

De aqu, es que, entre las producciones animales, la cra de caracol esta recibiendo una creciente atencin mundial en los ltimos aos, impulsado por los altos precios que se pagan en el mercado mundial y el continuo aumento de su demanda (Gabetta, 2004).

Se estima que el consumo mundial de caracoles terrestres es de 300 a 350.000 toneladas anuales, cifra que en 20 aos debiera quintuplicarse (Bustamante, 2004).

Francia es el mayor consumidor, calculndose su consumo en un kilo per cpita, lo que representa casi 65.000 toneladas anuales (Gabetta, 2004). En Espaa no se conocen antecedentes ni existe estadstica sobre el consumo y cra de caracoles, estimndose en unos 250 a 300 gramos por persona al ao (Cuellar y col., 2003).

El caracol comn, caracol marrn de jardn o Helix aspersa, es un molusco perteneciente a la clase de los gasterpodos, que por la calidad de su carne es la mayor demanda mundial para su uso en la alta cocina, y sus excelentes caractersticas de adaptabilidad para la cra en cautiverio (Gabetta, 2004).

La creciente demanda y su relevante valor econmico, impulso el desarrollo de sistemas de crianza y la instalacin de criaderos de caracoles en Europa, establecindose como una actividad rentable, internacionalmente reconocida (Gabetta, 2004).

Aun as, la produccin esta muy lejos de satisfacer la demanda del mercado. Pases como Blgica, Italia, Espaa, Marruecos, Japn, EE.UU., Grecia, Suecia y otros, son productores y consumidores, pero a pesar de su produccin propia deben recurrir a la importacin (Gabetta, 2004).

Francia con sus mas de 50.000.000 de habitantes, debe importar mas del 20% del total que consume de este producto, brecha de mercado muy interesante para ser aprovechada por quien quiera encarar la produccin de caracoles. Se considera que los productores sudamericanos, Argentina, Chile y Uruguay, estn en situacin privilegiada para el desarrollo de la helicicultura, por su clima optimo y tambin por ser considerados pases libres de contaminacin ambiental (Gabetta, 2004).

La carne de caracol es un alimento completo, bajo en caloras, bajo en grasas, rico en protenas y minerales. El aporte proteico contiene casi la totalidad de los aminocidos esenciales necesarios para el hombre y en las proporciones requeridas para la sntesis proteica, lo que la hace altamente digestiva, sana y nutritiva (Benito, 2004).

Se cree que en Chile el Helix aspersa se introdujo en el perodo de la colonizacin espaola para consumo de carne, tal como otras muchas especies de plantas y animales. Los primeros antecedentes de producciones en el pas datan de la dcada del sesenta, pero datos fidedignos de criaderos son ms recientes, considerando pionera a la provincia de uble en el ao 1991 (Bustamante, 2004).

Casi la totalidad de las exportaciones realizadas en el pas tienen como destino el mercado Europeo, y debido a que los criaderos no son capaces de enfrentar este mercado, han debido utilizar caracoles de recoleccin (Bustamante, 2004).

De esta forma la crianza del Helix aspersa, perfila como una gran alternativa de desarrollo como producto no tradicional. Se han realizado diversos estudios de tipo econmico que han entregado antecedentes de valor para esta rea, con escaso valor biolgico, aspecto de vital importancia para desarrollar el negocio.

Por otra parte, la bibliografa seala que los criaderos iniciados en Chile, se caracterizan por tener un escaso nivel tcnico, siendo bsicamente de tipo artesanal, sin tener el necesario conocimiento de los ciclos, enfermedades y manejo del producto.

Debido a la escasa planificacin, investigacin y nivel tcnico-profesional requeridos para emprender una empresa de este tipo, muchos criaderos han fracasado y probablemente continuarn fracasando si no se da espacio a la profesionalizacin del

cultivo de este producto; debe quedar claro que la helicicultura como actividad zootcnica, demanda de tecnologa de procesos.

Para aumentar en forma considerable y conseguir una produccin sostenida los criadores han puesto nfasis en mantener un ambiente apto para extender el perodo de reproduccin, tanto, como les sea posible, manteniendo una humedad, temperatura y alimentacin adecuada. Sin embargo, no se ha considerado que una baja en el porcentaje de muertes producira tambin, un aumento en dicha produccin.

Cobra importancia entonces, aplicar tcnicas de laboratorio, que permitan conocer e identificar la estructura orgnica de estos moluscos y as ser capaces de diferenciar estructuras normales de anormales, tanto a nivel macro como microscpico. De esta forma se obtendrn los conocimientos necesarios para diagnosticar las patologas presentes, proponer tratamientos adecuados y contribuir con ello al profesionalismo del cultivo de este producto, y como consecuencia favorecer la produccin, una produccin de calidad.

As es que, esta investigacin, pretende dar cuenta de la anatoma del caracol, investigando una tcnica de necropsia que permita dar respuesta a los objetivos planteados y que se sealan en el captulo 2; para ello, se presentar a continuacin el marco de conocimientos tericos relevantes que les sustentar.

La helicicultura como actividad zootcnica, tiene como objetivo la produccin de caracoles terrestres, bsicamente la especie Helix aspersa, para el consumo humano (Torres, 2001).

Los caracoles terrestres pertenecen al phyllum de los moluscos (Mollusca), que constituyen un conjunto o grupo de animales ms numerosos despus de los artrpodos. Los moluscos, se caracterizan por presentar un cuerpo blando no

segmentado, desprovisto de esqueleto interno y protegido generalmente por una concha de naturaleza calcrea, que puede estar constituida por una o varias piezas (Torres, 2001). Pertenecen bsicamente a dos gneros: el Helix y el Achatina. Del primero se conocen ms de 4.000 especies, y del segundo gnero, la especie mas conocida es Achatina fulica que es la ms grande de los caracoles terrestres. Las especies de caracoles terrestres que se pueden considerar comestibles son

aproximadamente veinte (CEDEHA, 2006).

Gabetta (2004), seala que las especies mas comunes y de mayor comercializacin en los mercados mundiales son las siguientes:

Helix lactea u Otala lactea: Se lo conoce mundialmente como caracol miel o caracol espaol. Su caparazn es claro, color t con leche, y su dimetro llega a medir de 26 a 35 mm. en la adultez.

Helix pomatia: Tambin llamado, caracol romano, viadora, lunar, el alemn o escargot de Bourgogne. Su caparazn gruesa y redondeada es de color leonado rojizo y llega a medir de 39 a 45 mm de dimetro, vive casi exclusivamente en terrenos calcreos de bosques, huertos y vias, alejado de la influencia del mar y de los vientos. Normalmente est presente hasta los 1500 mts., requiere de largos

perodos de tiempo para su crecimiento y climatizacin, se le conoce comercialmente como gros blanc.

Helix lucorum: Prefiere las zonas boscosas y hmedas, llanuras o colinas, como tambin lugares cultivados. Se encuentra bajo piedras y en troncos de rboles. Es el ms grande del gnero Helix, y su caparazn es ancho y casi redonda de un dimetro de 40 a 45 mm. , su color tiende al blanco.

Helix aperta: De talla mediana a pequea, mide lo mismo de altura que de dimetro, de 23 a 27 mm., su caparazn es de color uniforme, yendo del castao al marrn rojizo o amarillento. Vive preferentemente en la llanura o en las proximidades de las costas, pero tambin en los Alpes Martimos hasta 900 mts de altura; su carne es muy delicada; se cree que el Helix aperta, era la especie que tanto apreciaban los romanos en la antigedad.

Helix cincta: Vive slo en las llanuras y colinas y frecuentemente en los lugares cultivados; su caparazn es de color marrn intenso o castao rojizo y posee franjas claras de un dimetro de 22 a 25 mm.

Helix eobonia vermiculata: Llamado tambin mongeta, xoma o vinyala; el dimetro de su caparazn llega a medir 29 mm.; se le encuentra en pases mediterrneos. En Italia, son consumidos en cierta cantidad debido a su recoleccin en la naturaleza.

Achatina fulica: Caracol chino o acatino. De origen Africano ecuatorial oriental, su caparazn llega a medir entre 20 y 30 centmetros y puede pesar hasta 250 gramos. Caracol gigante muy prolfico que ha llegado a constituir una verdadera plaga de carcter alarmante en diversos pases orientales. Son exportados a Francia. Especies del mismo genero viven en frica Ecuatorial, parte de Asia y Amrica (en Argentina se le encuentra en Corrientes y Misiones). En EE.UU. se les considera plaga y prohibida su importacin.

Helix aspersa: Caracol comn de jardn o petit gris, es el ms utilizado en los criaderos por su rusticidad, resistencia, adaptacin al cautiverio y sobre todo por su precocidad en el crecimiento. Nativo de zonas Mediterrneas (costa de Espaa y Francia). En EE.UU. (California) fueron introducidos en el ao 1800 por los

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franceses. Los espaoles e italianos lo introdujeron, en el ao 1850, a Sudfrica, Nueva Zelandia, Mxico y Argentina.

Representa el 70% del patrimonio heliccola en Europa, es el mas conocido en el mbito domestico y comercializado en el mundo entero. En gran parte de Latino Amrica se le combate como plaga, por afectar jardines y zonas con vegetacin; no existe la difusin de la costumbre de su consumo familiar, salvo en algunos restaurantes cntricos de cada cuidad.

Es de talla mediana, mide normalmente de 20 a 40 mm de alto y 24 a 45 mm de ancho en la adultez. Llega a tener de 2 a 4 desoves al ao y con posturas de 80 a 120 huevos (Wallach, 2005). Su peso promedio llega a los 10 gramos y puede decirse que cada Helix aspersa reproduce por ao, como promedio, un kilo de caracoles (Gabetta, 2004).

El color es variable y depende de la zona de cra, generalmente su caparazn es con fondo gris o amarillento granulado con franjas marrones oscuras. Fcilmente reconocible por el color y la cantidad de bandas longitudinales en su caparazn (Gabetta, 2004).

Su perodo de vida til va de 2 a 5 aos. Es la que mejor se adapta a los diferentes tipos de clima y llega a reproducirse hasta los 1000 metros de altura, siendo por ello la especie mas utilizada en los criaderos en EE.UU., Francia, Espaa, Brasil e Italia (Gabetta, 2004).

Por este motivo esta especie es considerada la ms apta para los criaderos que se desarrollan en Chile (Wallach, 2005).

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1.1. Anatoma del Helix aspersa En los Helcidos cabe distinguir dos partes externas perfectamente diferenciadas: la concha y el cuerpo (Cuellar y col, 2003).

1.1.1. La Concha

La concha univalva, globulosa y enrollada en espiral en distintos planos, generalmente de derecha a izquierda (dextrorsa) y excepcionalmente a la derecha (sinistrorsa). El eje columelar es compacto, termina en una extremidad superior o pice y en otra inferior u ombligo, situado debajo del reborde terminal o peristoma. Tiene 4 o 5 espiras segn la especie, presenta estras o lneas de crecimiento, paralelas al eje, y bandas coloreadas perpendiculares u horizontales a las estras. El lmite entre espiras se denomina lnea de sutura (Cuellar y col, 2003).

De acuerdo a la descripcin realizada por Gabetta (2004), la concha es una casa ambulante segregada por el mismo caracol a partir del calcio que absorbe. A modo de esquema, la formacin de la concha se produce de la siguiente manera:

El calcio que contienen los alimentos es inicialmente almacenado en clulas especiales

Posteriormente es difundido por la sangre. Llega al manto, que secretar la concha en forma helicoidal.

El dibujo de dicha caparazn se debe a la forma del lomo, que es enroscado y retorcido. Como el manto sigue las sinuosidades del cuerpo, la concha adquiere el caracterstico aspecto en espiral, forma que se debe a la disposicin asimtrica de los rganos.

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El enroscamiento tiene lugar de la manera siguiente:

El conjunto de rganos recubiertos por el manto empieza a desarrollar una especie de gran joroba dorsal.

Luego, el tubo digestivo se repliega en forma de V, de lo que resulta la aproximacin del ano con la boca.

Esta flexin va seguida de una torsin, a la altura de la cabeza, de toda la masa visceral en 180.

Los rganos respiratorios, el ano y los orificios genitales y urinarios estn orientados hacia adelante, justo detrs del cuello.

Tan solo el sistema nervioso permanece inalterado, ya que se concentra en la cabeza.

1.1.2. El Cuerpo

El cuerpo esta formado por un pi (que es la parte visible cuando el caracol se desplaza), una masa visceral que est protegida dentro de la concha y una cabeza, todo recubierto por el tegumento (Cuellar y col, 2003).

1.1.3. La Cabeza

La cabeza presenta dos tentculos oculares y dos tentculos tctiles. Los primeros son rganos sensibles a la luz y al tacto, pero que no pueden ser llamados propiamente ojos ya que solo permiten una apreciacin vaga de las imgenes (Mioulane, 1995).

1.1.4. La Boca

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Se distingue una boca limitada por un labio superior bilobulado, dos labios laterales y un labio inferior (Cuellar y col, 2003).

1.1.5. Organo Auditivo

No hay verdaderos odos, sino otocistos, que son rganos auditivos igualmente tiles para el equilibrio del animal. Los otocistos registran toda perturbacin mecnica gracias a algo semejante a unas piedrecillas (otolitos) que flotan en un lquido. Al menor eco, los otolitos empiezan a moverse y contactan con pestaas sensoriales que comunican con el nervio (Mioulane, 1995).

1.1.6. El Pie

El pie, es de forma alargada y representa la mitad del peso corporal. Dada su estructura de fibras lisas y su capacidad secretora de una sustancia mucosa (musina) procedente de la glndula del pie, los caracoles poseen una lenta, pero potente, capacidad de desplazamiento mediante reptacin. En la parte superior del pie, por debajo del peristoma, desembocan los orificios respiratorios, excretor y el ano. La concha se encuentra fuertemente unida al pie por el msculo columelar, que es el nico msculo impar de los gasterpodos (Cuellar y col, 2003).

1.1.7. Organizacin interna

En la masa visceral recubierta por el manto y situada en el interior de la concha, se encuentran los aparatos digestivo (con una voluminosa glndula digestiva o hepatopncreas), circulatorio, respiratorio, excretor y reproductor (Cuellar y col, 2003).

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1.1.8. Aparato Digestivo

El aparato digestivo esta formado por bulbo bucal, faringe, esfago, estmago, intestino y ano (Benito, 2004). En la cavidad bucal se encuentra un voluminoso rgano de origen muscular, recubierto por una lmina cornea denominada rdula, en su base existe una glndula llamada odontforo que permite restaurar en forma permanente la estructura radular (Cuellar y col, 2003).

El bulbo bucal se contina por el esfago que se abre en un amplio estmago, continuando con un intestino de gran longitud que posee una doble circunvalacin alrededor del hepatopncreas y terminando en el ano. Adosadas a las paredes estomacales se encuentran dos glndulas salivales que desembocan en el bulbo bucal. El hepatopncreas por su parte, posee dos lbulos y desemboca entre el estmago y el intestino (Cuellar y col, 2003).

1.1.9. Aparato Circulatorio

El aparato circulatorio, est constitudo por el corazn y los vasos sanguneos. El corazn, es rudimentario, consta tan slo de un ventrculo y una aurcula y se aloja en el interior de los pulmones, exactamente en la cavidad paleal, que es una especie de repliegue del manto, dotado de un gran nmero de vasos sanguneos y que asegura la oxigenacin del animal (Mioulane, 1995). De este corazn, salen dos arterias: la anterior que irriga el pie y la cabeza; y la posterior que dirige la sangre al hepatopncreas y la ovotstis. El lquido que recorre el sistema circulatorio es la hemolinfa, la que recibe el oxgeno en la cavidad pulmonar pasa a la aurcula, luego al ventrculo, lugar desde el cual se reparte por las arterias a todo el cuerpo del caracol (Benito, 2004).

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1.1.10. Aparato Respiratorio

El aparato respiratorio, esta constitudo por la cavidad paleal, que forma un saco pulmonar o pseudopulmn que comunica con el exterior por el orificio respiratorio o pneumostoma; se encuentra tapizado por una gran cantidad de vasos finamente ramificados en los que se produce la hematosis y que confluyen en la vena pulmonar. Como complemento a la respiracin pulmonar, los caracoles poseen una respiracin cutnea importante (Cuellar y col, 2003).

1.1.11. Aparato Excretor

Cuellar (2003), describe el aparato excretor como de tipo nefridiano, con un slo rin u rgano de Bojanus, situado entre el corazn y el recto. Es de forma triangular, provisto de dos partes: una con funcin excretora y otra que acta como vejiga de acumulacin, de la que parte un fino canal o urter que termina en el orificio excretor, entre el pneumostoma y el ano.

1.1.12. Aparato Reproductor

De igual forma Cuellar (2003), describe el aparato reproductor como el ms complejo y compuesto por tres partes: una porcin inicial hermafrodita, otra intermedia,

constituida por las vas genitales masculinas y femeninas, y otra terminal en la que se unen dichas vas para finalizar en un orificio genital comn. La primera porcin est constituida por una glndula sexual hermafrodita u ovotestis, productora de gametos masculinos y femeninos con diferente secuencia temporal (protandria). La gnada contina por un conducto flexuoso, denominado canal hermafrodita, que desemboca en una dilatacin o cmara de fecundacin, donde tambin lo hace, la glndula de la albmina (Cuellar y col, 2003).

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La porcin intermedia se inicia en la citada cmara, a partir de la cual parte un grueso canal festoneado (ovispermiducto), formado por la yuxtaposicin de los otros dos, el oviducto y el espermiducto, que despus se separan. El espermiducto se divide para dar origen a un largo canal deferente que termina en un pene dilatado y hueco provisto de un msculo retractor, y a un conducto ciego helicoidal, tambin largo y muy fino, denominado flagelo, en el que se aglomeran los espermatozoides en forma de un filamento llamado espermatforo. El oviducto termina en una dilatacin que recibe la bolsa del dardo unida a los dos grupos de glndulas multfidas, y el canal del receptculo seminal o espermateca. La bolsa del dardo es evaginable y aloja un dardo, en forma de aguja prismtica, de naturaleza calcrea, que sirve de rgano excitador y fijador durante la cpula (Cuellar y col, 2003).

En la porcin terminal se renen los conductos genitales masculino y femenino, formando un vestbulo genital comn o vagina que termina en el orificio genital situado cerca de la base del tentculo ocular derecho (Cuellar y col, 2003).

1.1.13. Sistema Nervioso

Se compone de sistema simptico y central.

El sistema simptico esta compuesto de un par de ganglios bucales y enerva la mayor parte del tubo digestivo. El sistema nervioso central esta constituido por un collar periesofgico comprendido por ganglios cerebroides, ganglios pedios y el sistema visceral (Cuellar y col, 2003).

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Captulo 2 Objetivos

Objetivo General

Proponer una tcnica de necropsia del caracol Helix aspersa.

Objetivos Especficos

1.- Describir una tcnica para la diseccin del Helix aspersa.

2.- Describir la anatoma del caracol mediante imgenes fotogrficas e identificar cada uno de los rganos.

3.- Realizar una descripcin topogrfica de la anatoma del Helix aspersa.

4.-Realizar cortes histolgicos de los rganos para reconocer las principales estructuras orgnicas.

5.-Proponer una diagramacin corporal del caracol.

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Captulo 3 Material y Mtodo

3.1. Material Compuesto por 500 ejemplares de Helix aspersa, recolectados en el mes de Junio del ao 2006 en jardines de las comunas de La Reina y Pealoln, Regin Metropolitana, de los que se seleccion 150 caracoles adultos (presencia de peristoma), de tamao grande.

Los instrumentos utilizados fueron los equipos de diseccin, cmara fotogrfica digital y elementos del laboratorio.

3.2. Mtodos En el laboratorio de Histopatologa de la Universidad Iberoamericana de Ciencias y Tecnologa se procedi a la observacin in vivo de los especmenes recolectados, para la posterior documentacin fotogrfica de los rganos externos.

Luego se procedi a sacrificar los especmenes escogidos, sumergindolos en un frasco con alcohol al 70% por 20 minutos. Una vez corroborada la muerte del molusco, se procedi a realizar la diseccin y fijacin de muestras para el estudio histolgico.

Las muestras histolgicas se obtuvieron previa fijacin en formalina al 10% o en solucin de Bouin, posterior inclusin en parafina slida y luego cortes en

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micrtomo tipo Minot de 5 nm. En la tincin se utiliz la tcnica de Hematoxilinaeosina y posteriormente se realiz el montaje de las muestras.

Captulo 4 Resultados

En este captulo se dar cuenta de los resultados, que darn respuestas a cada uno de los objetivos planteados.

4.1. Objetivo N 1 Describir una tcnica de diseccin para el caracol Helix aspersa

4.1.1. Sacrificio de las muestras

Los sacrificios se realizaron depositando a los caracoles en un frasco plstico con alcohol al 70%, por 20 minutos (figura N 1). Antes de realizar cualquier procedimiento, se comprob que el animal estuviera sin vida, estimulando el pie muscular con una pinza diente de ratn. La no reaccin por parte del molusco y la rigidez del pie fueron indicadores de que la muerte se haba producido.

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Figura N 1. A la derecha, caracol en etanol al 70%.

4.1.2. Diseccin

4.1.2.1. Caractersticas externas generales

En el animal vivo se puede observar:

Concha o exoesqueleto:

La concha forma una cubierta contnua, contiene un espiral compuesto de 4 o 5 espiras (figura N 9).

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Figura N 9. La Concha. El borde libre, es ms engrosado en caracoles adultos, denominado peristoma.

Cabeza

Es una proyeccin libre del lbulo anterior del cuerpo. Contiene dos pares de tentculos retrctiles, un par labial ventral ms pequeo ubicados a los lados de la boca y otro par, el par ocular, ms largo y dorsal en los cuales se puede observar en cada extremo un diminuto ojo negro (figura N 2).

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Figura N 2. La Cabeza.

Boca

La boca se encuentra rodeada por un grueso labio circular, que externamente y a cada lado posee un labio lateral (figura N 3). Al observar al caracol alimentndose, se pudo apreciar la rdula (figura N 4), rgano que tiene la funcin de cortar el alimento, de color caf rojizo.

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Figura N 3. Los Labios.

Figura N 4. La Rdula.

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Glndula podal

La glndula podal, se abre en la base de una depresin ubicada entre la regin de la cabeza y el pie.

Poro genital

Se encuentra situado a corta distancia detrs de la base de los tentculos del lado derecho (figura N 5).

Figura N 5. El Poro Genital.

Cuerpo

Ventralmente se proyecta en un disco locomotor o pie (figura N 6); y dorsalmente en un saco visceral enrollado en espiral que se encuentra cubierto por el exoesqueleto o concha (figura N 7).

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Figura N 6. El Pie.

Figura N 7. La concha.

Observando al caracol desde arriba, se puede notar que la concha (y saco visceral que se encuentra dentro de esta) se encuentra desplazada al lado derecho del animal.

Tomar al molusco de su concha observar delineando el borde libre, el borde glandular del saco pulmonar. Ubicado en el mismo borde, al lado derecho, se encuentra el orificio respiratorio o pneumostoma, rodeado de una especie de vlvula (figura N 8).

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Inmediatamente al lado derecho de este se encuentra el ano. El orificio excretor tambin se abre en este punto pero no fue observable.

Figura N 8. Pneumostoma.

4.1.2.2. Estructuras internas Para comenzar con las observaciones de las estructuras internas, despojar al caracol de la concha. Esto se lleva a cabo haciendo dos cortes de 5 mm. De largo con la tijera, uno a cada extremo del peristoma, en direccin dorsal. Se debe introducir la tijera muy pegado a la concha, en primer lugar, a la altura del pneumostoma y luego hacer el segundo corte en el otro extremo del peristoma. Tomar el borde de la boca de la concha con una pinza anatmica y quebrar el trozo delimitado por los cortes con tijera. Introducir la pinza anatmica, entre la concha y el tejido pulmonar y seguir extrayendo el exoesqueleto, quebrando pequeos pedazos, efectuando un

procedimiento similar al que se realiza al extraer la cscara de un huevo cocido.

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El saco pulmonar y estructuras asociadas:

El saco pulmonar, es una estructura ubicada en el dorso del cuerpo del animal. Contiene una membrana que se extiende a lo largo de la pared del cuerpo, abarcando la regin antero dorsal sobre la masa visceral. Esta membrana es tan delgada que se puede ver a travs de ella. En el techo del saco pulmonar se encuentran vasos sanguneos de gran extensin (figura N 10). El recto, que termina en el ano, se extiende a lo largo del borde derecho del pseudopulmn.

Figura N 10. Se observa el saco pulmonar en el dorso con los vasos sanguneos.

La glndula excretora es una masa caf clara que se encuentra dorsal y al centro del saco pulmonar (figura N 11). El pericardio, es un pequeo saco ubicado al lado

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izquierdo de la glndula excretora, dentro del cual, se encuentra el corazn, compuesto por una aurcula y un ventrculo (figura N 12).

Figura N 11. La flecha indica la glndula excretora.

Figura N 12. Flecha indica el corazn. 4.1.2.3. Sistema Digestivo

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Luego de extraer la concha, disectar el saco pulmonar junto, con el corazn y rin. Se debe tener la precaucin de no cortar el intestino, guindose por el pneumostoma hacia caudal, medial al msculo columelar (figuras N 13 y 14).

Figura N 13.

Figura N 14.

Figuras N 13 y 14. Se observa saco pulmonar, rgano de Bojanus (fucsia), corazn (amarillo) y ltima porcin intestino (verde).

Disectar todo el borde del manto y luego la membrana que separa los sistemas reproductivo y digestivo le la cavidad pulmonar. Haciendo una apreciacin general, se puede observar gran parte del sistema reproductivo, que es de color blanquecino en estado fresco, y ms amarillento, si se ha fijado en formalina. El estmago, hacia el lado izquierdo y de color rosado, y el hepatopncreas de color caf oscuro, enroscado siguiendo la orientacin de los loop (figuras N 15, 16, 17,18 y 19).

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Figura N 15. Membrana que separa el saco pulmonar de la cavidad visceral (delimitado en rojo).

Figura N 16. Apreciacin general en caracol fijado en formalina al 10%.

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Figura N 17. Apreciacin general en caracol al estado fresco.

Figura N 18. En color fucsia, el borde del manto disectado.

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Figura N 19. En color amarillo, hepatopncreas.

Disectar la piel de la cabeza, esto se realiza efectuando un pequeo corte recto y no muy profundo que parte entre los tentculos oculares y termina en el borde del centro de la boca. Cuando el caracol se retrae en su concha al ser eutanasiado se hace ms compleja la tarea y se debe tener la precaucin de no destruir las estructuras del bulbo bucal (Figura N 20).

Figura N 20. Bulbo bucal al descubierto luego del corte del tejido de la zona.

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Para facilitar la tarea de diseccin y observacin de las estructuras digestivas, se debe eliminar todo el aparato reproductivo, dejando mas espacio para la manipulacin de los rganos de digestin. Para esto se debe tomar en pinza con el dedo pulgar e ndice las estructuras reproductivas (figura N 21), haciendo un corte a la altura del poro genital y traccionando hacia caudal (figura N 22). La glndula albmina, debe extraerse con precaucin debido a que es friable y se encuentra inmersa entre los lbulos del hepatopncreas.

Figura N 21. Modo de tomar el Sistema reproductivo.

Figura N 22. Traccin hacia caudal del Sist. Reproductivo.

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Una vez eliminado todo el sistema reproductivo, se hace observable con claridad el estmago y parte del esfago (figura N 23). Dorsal al estmago y pegadas a ste, se pueden observar dos estructuras alargadas de color amarillento, las glndulas salivales; stas se proyectan hacia craneal, a travs de los conductos salivales que desembocan en el bulbo bucal (figuras N 24 y 25).

Figura N 23. Se puede observar fcilmente el esfago y estmago.

Figura N 24. Indicadas por la aguja, glndula salival y su conducto.

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Figura N 25. Indicadas por la aguja, ambas glndulas salivales.

Posteriormente, tomar al molusco por la parte caudal del pie muscular y hacer un corte en ste, cuidando de dejar el tercio del pie, donde est ubicada la cabeza del animal para no destruir el bulbo bucal (figuras N 26 y 27). Cortar cuidadosamente los msculos que unen el pie con el resto del cuerpo (figura N 28).

Figura N 26. Corte realizado en el pie.

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Figura N 27. Corte realizado en el pie.

Figura N 28. Corte realizado en los msculos que unen el pie con el cuerpo.

Para aislar el bulbo bucal, se levanta levemente el estmago, observando hacia craneal el esfago y finalmente el bulbo bucal (figura N 29). El bulbo, se encuentra firmemente adherido a los msculos bucales y los labios. Es una estructura ovoide, que en el extremo craneal posee la rdula, de color caf rojizo. Se debe desprender los

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labios, traccionando con las pinzas. Disectar el msculo retractor, compuesto de gruesas fibras, que se encuentra en posicin ventral al bulbo (figura N 30).

Figura N 29. Observar esfago y bulbo bucal.

Figura N 30. Figura muestra msculo retractor.

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De esta manera, el bulbo bucal queda libre; se levanta tomndolo con las pinzas, y se lleva hacia caudal. Desprender el intestino, que va en direccin caudal hasta el primer loop y luego da un giro en U para dirigirse nuevamente hacia craneal por el borde del pseudopulmn y desembocando junto al pneumostoma (figura N 31). Estirar el tubo digestivo y aproximadamente en la mitad de su extensin observar unido a l, el hepatopncreas, que desemboca en esta zona, con sus dos lbulos claramente definidos (figuras N 32 y 33).

Figura N 31. Intestino y hepatopncreas.

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Figura N 32.

Al centro, hepatopncreas. A la izquierda, primera porcin del

intestino. A la derecha, ltima porcin del intestino.

Figura N 33. Se observa: bulbo bucal (flecha fucsia), glndulas salivales (flechas celestes), estmago (flecha verde) y hepatopncreas (flechas amarillas).

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4.1.2.4. Sistema Reproductivo

Extraer la concha y disectar el saco pulmonar. Al trabajar con el animal fresco, la membrana que cubre el saco visceral forma una semiesfera brillante que deja ver en su interior gran parte de los rganos. Mirando la generalidad del animal, de frente, se observa el estmago con las glndulas salivales adosadas en el dorso hacia el lado izquierdo. Cranealmente se encuentran los ojos, dos filamentos de color negro; el dardo, la bolsa del pene y el flagelo hacia el lado derecho, y caudalmente siguiendo por ese lado, se observa el conducto deferente y ovispermiducto enrollados (figura N 34).

Figura N 34. Al trabajar con el animal fresco, se observa una semiesfera brillante y transparente.

Disectar la membrana que cubre las vsceras, dejando libres todas las estructuras del interior (figura N 35 y 36). Observar nuevamente el caracol de frente. En el caso que el animal haya muerto con los tentculos retrados, se puede observar parte de estos

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en la cavidad, continuados por los ojos, dos filamentos de color negro. Caudal y en el plano medio se encuentra la bolsa del pene y el conducto deferente, de color blanquecino. Ms atrs se observa parte del hepatopncreas. Al lado derecho se observa la bolsa del dardo, el flagelo, conducto deferente, glndulas multfidas y ovispermiducto. La glndula de la albmina, canal hermafrodita y ovotestis, se encuentran entre los lbulos del hepatopncreas. La espermateca y receptculo seminal se encuentran bajo el estmago.

Figura N 35. Caracol una vez extrada la membrana que cubre la masa visceral.

Figura N 36. Sistema reproductivo al centro y a la derecha del animal.

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Para aislar de forma ms simple el sistema reproductivo y evitar destruccin de estructuras, disectar todo lo que lo rodea, incluyendo el pie muscular.

Comenzar, haciendo un corte al inicio del bulbo bucal con el objetivo de liberar las estructuras digestivas. Con la pinza, levantar y dirigir hacia caudal, disectando el msculo retractor. De esta forma el pie muscular queda unido al resto del cuerpo solo por el msculo columelar y la apertura del poro genital; que debe disectarse cuidadosamente cortando el msculo y liberando el poro genital dejando solo una aureola de tegumento alrededor (figura N 37 y 38).

Eliminar todo el tubo digestivo y el hepatopncreas, que se encuentra unido a este aproximadamente en la mitad de su extensin. Tener la precaucin de traccionar cuidadosamente para no destruir las estructuras reproductivas adyacentes al hepatopncreas y estmago (figuras N 39).

Figura N 37. Disectar el msculo columelar.

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Figura N 38. Msculo columelar disectado.

Figura N 39. Sistema reproductivo completo.

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4.1.2.5. Sistema Circulatorio

Del sistema circulatorio, son observables slo algunas estructuras debido a la circulacin sencilla y abierta, que posee una fina y extensa red en la cual se intercalan lagunas sanguneas que forman el sistema vascular arterio-venoso. El corazn se encuentra en el dorso, en el techo del saco pulmonar y a la izquierda de la glndula excretora (figura N 40).

Figura N 40. Flecha indica el corazn.

Eliminar la concha y disectar el saco pulmonar. Levantando el tejido pulmonar y dirigindolo hacia caudal, se aprecia claramente la ubicacin del corazn. Hacer un fino corte en el pericardio, un tejido grueso y firme que cubre a este rgano.

Observar, un corazn compuesto por una aurcula piriforme anterior de color blanquecina en posicin craneal y un ventrculo alargado posterior de color caf amarillento, caudal a la aurcula (figura N 41). Observar los vasos sanguneos claramente visibles alrededor del corazn, pegados al tejido pulmonar. Identificar los

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vasos pulmonares eferentes que forman un plexo pulmonar y se encuentran casi en el borde del manto, que, hacia caudal se unen, para formar la vena pulmonar y que posteriormente desemboca en la aurcula (figura N 42). Observar tambin la aorta, que es un vaso corto, que surge de la base del ventrculo y posteriormente se subdivide en una rama anterior y otra posterior.

Figura N 41 .Aurcula y ventrculo del corazn.

Figura N 42. Plexo pulmonar y vasos eferentes.

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4.1.2.6. Sistema excretor

De este sistema, slo es observable el rin u rgano de Bojanus debido a que el urter es un canal demasiado fino.

Extraer la concha, observar el rgano de Bojanus a travs del tejido pulmonar, en el dorso y a la derecha del corazn. Disectar el tejido pulmonar y levantarlo dirigindolo hacia caudal con el objetivo de observar con mayor claridad el nombrado rgano. Es claramente identificable, de forma triangular y con un surco medial que lo divide en dos (figuras N 13 y 14).

Una vez realizada la diseccin se pasar a describir la Anatoma Sistemtica del caracol Helix aspersa, con el fin de dar respuesta a los Objetivos N 2 y 4.

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4.2. Objetivo N 2 Describir la anatoma del caracol e identificar cada uno de los rganos. Objetivo N 4 Realizar cortes histolgicos de los rganos para reconocer las principales estructuras orgnicas.

4.2.1. Descripcin Anatmica Sistemtica 4.2.1.1. Sistema Digestivo

El sistema digestivo comienza en la boca, formada por un labio circular grueso, que externamente posee a cada lado un labio lateral. Hacia caudal, contina con el bulbo bucal, una estructura de origen muscular redondeada de consistencia firme (figuras N 43 y 44). A la entrada de este, en el borde dorsal, se encuentra la rdula, rgano quitinoso de color caf rojizo, que utiliza este molusco para cortar el alimento. El bulbo bucal, contina con el esfago, que desemboca en un saco alargado, de aspecto estriado y color rojo, el estmago. Siguiendo hacia caudal, se encuentra el intestino que al llegar a la altura del hepatopncreas, da un giro en U. De esta forma cambia su direccin en 180 y continua hacia craneal, finalizando en el ano, que tiene su desembocadura a la izquierda del pneumostoma.

Figura N 43. En la figura se observa la boca, labios laterales y rdula.

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Figura N 44. Bulbo Bucal.

Glndulas Asociadas

Glndulas Salivales

Las glndulas salivales son dos rganos de color blanquecino que se encuentran adosadas al dorso del estmago y desembocan sus conductos en el techo del bulbo bucal (figura N 45).

Figura N 45. Glndulas salivales.

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Hepatopncreas

El hepatopncreas es un rgano caf oscuro, de gran tamao con ubicacin caudal en el cuerpo, para luego enroscarse e inclinarse al lado derecho, formando gran parte de los loop del caracol (figuras N 46, 47 y 48). Posee dos lbulos: el derecho, de pequeo tamao y el izquierdo de mayor extensin, subdividido en tres y adaptndose al giro en 180 del intestino en este sitio. De cada uno de los lbulos, nace un ducto, que finalmente se unen y forman el ducto digestivo que desemboca en la regin central del intestino.

Figura N 46. Hepatopncreas.

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Figura N 47. Vista microscpica del hepatopncreas con aumento 4x.

Figura N 48. Vista microscpica del hepatopncreas con aumento 40x.

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4.2.1.2. Sistema Reproductivo

El sistema reproductivo comienza en el poro genital, orificio que se encuentra al lado derecho del animal, inmediatamente detrs de los tentculos ocular y tctil. El poro genital contina hacia el interior con el vestbulo genital comn o vagina, donde se unen los conductos genitales masculino y femenino. Este segmento es una dilatacin del oviducto donde confluyen, el pene y la bolsa del dardo (figuras N 50 y 51), muy cerca de la apertura del poro genital (figura N 49), inmediatamente siguiendo hacia el interior las glndulas mutfidas (figura N 52) y ms adelante el canal del receptculo seminal o espermateca, donde desemboca el divertculo seminal y que termina en la espermateca (figuras N 53 y 54).

El pene, por su parte, contina en una bifurcacin; por un lado se encuentra un conducto ciego, largo y muy fino, el flagelo, y por otro, un largo conducto deferente que luego pasa a ser el espermiducto (figuras N 55 y 56).

Figura N 49. Poro genital, bolsa del dardo y bolsa del pene.

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Figura N 50. Vista microscpica de la bolsa del dardo con aumento 4x.

Figura N 51. Vista microscpica de la bolsa de dardo con aumento 40x.

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Figura N 52. Glndulas multfidas y vagina.

Figura N 53. Espermateca, divertculo seminal y canal del receptculo seminal

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Figura N 54. Vista microscpica del espermateca, aumento 4x.

Figura N 55. Flagelo y bolsa del pene.

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Figura N 56. Conducto deferente y ovispermiducto.

El oviducto, se contina con el ovispermiducto, canal que se compone de la yuxtaposicin del oviducto y espermiducto. Este canal finaliza al llegar a la cmara de fecundacin, que contina con el canal hermafrodita para finalizar en la glndula hermafrodita u ovotestis (figuras N 57 y 58). La glndula de la albmina se ubica entre los lbulos del hepatopncreas y desemboca en el canal hermafrodita.

Figura N 57. Glndula de la albmina y ovotestis.

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Figura N 58. Canal hermafrodita y cmara de fecundacin.

Figura N 59. Ubicacin Glndula Albmina.

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Figura N 60. Sistema Reproductivo Completo.

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4.2.1.3. Sistema Circulatorio

Del sistema circulatorio slo son observables algunas estructuras, debido a que estos moluscos poseen una circulacin sencilla y abierta, compuesta por una fina y extensa red, en la cual se intercalan lagunas sanguneas que forman el sistema arterio- venoso. El corazn, es un rgano que se encuentra en el dorso del cuerpo del animal, pegado al saco pulmonar y a la derecha del rgano de Bojanus. Est compuesto por una aurcula de color blanquecina en posicin craneal y un ventrculo alargado color caf amarillento caudal a la aurcula (figuras N 61, 62, 63 y 64 ). Se encuentra cubierto por el pericardio (figura N 65, 66 y 67).

Figura N 61. Corazn.

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Figura N 62. Vista microscpica de la aurcula con aumento 4x.

Figura N 63. Vista microscpica de la unin auriculoventricular con aumento 10x.

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Figura N 64. Vista microscpica del ventrculo con aumento 4x.

Figura N 65. Pericardio.

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Figura N 66. Vista microscpica de corazn y pericardio con aumento 4x.

Figura N 67. Vista microscpica del pericardio con aumento 40x.

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Claramente observable es el plexo pulmonar, que confluye formando la vena pulmonar, ubicada en el techo del saco pulmonar en posicin medial, con direccin caudal hasta entrar en la aurcula (figura N 68). Del ventrculo, sale la aorta que atraviesa la pared dorsal del cuerpo, dejando de ser visible.

Figura N 68. Plexo pulmonar.

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4.2.1.4. Sistema Respiratorio

El sistema respiratorio esta formado por un saco pulmonar o pseudopulmn. Es el principal rgano respiratorio y esta constituido por la cavidad paleal. Se encuentra en el dorso del cuerpo del animal. Se comunica hacia el exterior por el pneumostoma. Su techo se encuentra cubierto por una red de vasos en la cual se produce la hematosis (figuras N 69, 70 y 71).

Los caracoles poseen tambin una respiracin cutnea importante.

Figura N 69. Red de vasos sanguneos que realizan la hematosis.

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Figura N 70. Vista microscpica del tejido pulmonar con aumento 4x.

Figura N 71. Vista microscpica de tejido pulmonar con aumento 10x.

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4.2.1.5. Sistema Excretor

Del sistema excretor slo es observable el rgano de Bojanus o rin, ubicado a la izquierda del corazn. Es un rgano de color amarillo oscuro, de forma triangular con un surco medial que lo divide en dos. Del rin sale un fino canal que no fue observable, el urter, que termina en el orificio excretor entre el pneumostoma y el ano (figura N 72).

Figura N 72. rgano de Bojanus.

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4.2.1.6. Sistema Nervioso

Del sistema nervioso, slo es observable el collar periesofgico, ubicado detrs del bulbo bucal y como su nombre lo indica, en la periferia del esfago (figura N 73).

Figura N 73. Aguja muestra el anillo periesofgico.

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4.2.1.7. Sistema Locomotor

El sistema locomotor, est compuesto por el pie, rgano sobre el cual reposa el resto del cuerpo del caracol. Es una estructura alargada de origen muscular, de color gris oscuro (figuras N 74, 75 y 76). Posee una glndula que se encuentra a lo largo de todo ste en posicin medial y observable si se pone el caracol boca arriba.

Figura N 74. Glndula del Pie.

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Figura N 75. Vista microscpica del pie con aumento 10x.

Figura N 76. Vista microscpica del pie con aumento 40x.

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4.3. Objetivo N 3 Realizar una descripcin topogrfica de la anatoma del Helix aspersa

4.3.1. Anatoma Topogrfica

Con el objeto de dar una idea ms global de la ubicacin de los rganos en el caracol Helix aspersa y dando respuesta al Objetivo N 3 de este trabajo de investigacin se dividir el cuerpo en tres grandes regiones: Regin Ceflica, Cavidad Visceral y Regin del Pie.

4.3.1.1. Regin Ceflica

La regin ceflica, est delimitada cranealmente por la boca con dos labios laterales externos y un anillo labial ms interno. Caudalmente, se encuentra limitada por una lnea transversal imaginaria trazada en el borde del peristoma (figura N 77).

Figura N 77. Regin Ceflica.

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La regin ceflica contiene la boca, el bulbo bucal (con la rdula y el odontforo en su interior), parte del esfago, y dorsal a ste, los conductos de las glndulas salivales. Inmediatamente caudal al bulbo bucal se encuentra el anillo nervioso periesofgico.

Externamente, se observa dorsal a la boca un par de tentculos tctiles, uno a cada lado, y ms arriba, un par de tentculos oculares con un pequeo ojo de color negro en sus extremos. Detrs de los tentculos del lado derecho del animal se observa el poro genital. Continuando desde el poro genital al interior, en la regin ceflica se puede encontrar el dardo, bolsa del pene, parte de las glndulas multfidas y conducto vaginal.

4.3.1.2. Cavidad Visceral

La cavidad visceral, est comprendida por todos los rganos que se encuentran dentro de la concha del caracol. Cranealmente, delimitada por el borde del manto y caudal y lateralmente, por el manto en s. Se subdivide en dos regiones: Regin Pulmonar y Regin Visceral.

4.3.1.3. Regin Pulmonar

La regin pulmonar, est limitada en el dorso por el tejido pulmonar, caudalmente por parte del hepatopncreas; centralmente por la membrana que cubre las regin visceral (piso de la cavidad pulmonar) y cranealmente por el borde del manto.

En su interior, se encuentra el pseudopulmn en el techo de la cavidad, y pegado a ste en el sector medial se encuentra el corazn y el rgano de Bojanus. Tambin pueden observarse, los grandes vasos sanguneos como el plexo pulmonar, vena pulmonar y aorta.

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4.3.1.4. Regin Visceral

La regin visceral, se encuentra limitada craneal, dorsal y caudalmente por una membrana delgada y transparente, que deja ver muchos de los rganos en su interior. Ventralmente se encuentra limitado por el pie muscular.

En su interior se encuentra todo el sistema digestivo y reproductivo, con el hepatopncreas dispuesto en espiral.

4.3.1.5. Regin del Pie

La regin del pie, se encuentra limitada cranealmente por la lnea transversal imaginaria que divide esta regin de la regin ceflica. Dorsalmente, se encuentra limitando con la regin visceral y, caudal y ventralmente se encuentra libre.

Es una estructura alargada, de origen muscular que en su interior posee una glndula productora de mucus, la glndula podal.

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Finalmente con el objeto de dar respuesta al Objetivo General de esta investigacin se proceder a dar cuenta de la Tcnica de Necropsia utilizada.

4.4. Tcnica de Necropsia

La necropsia es un procedimiento tcnico y cientfico de diseccin anatmica que comprende el estudio morfolgico y fisiopatolgico del cadver. Es una diseccin sistemtica del animal despus de su muerte para descubrir la causa de la misma. Es igual a un examen posmortem.

4.4.1. Protocolo de necropsia

1.- Caractersticas generales externas del caracol provisto de concha:

Observar integridad de la concha, espiral de cuatro o cinco loops y peristoma en caracoles adultos.

Observar la cabeza, presencia de dos tentculos oculares y dos tctiles; presencia de boca, labios y a la derecha y detrs de los tentculos del mismo lado, el poro genital.

Observar integridad del pie muscular.

2.- Caractersticas generales externas del caracol desprovisto de concha:

Observar el saco pulmonar, el corazn, la glndula excretora y los grandes vasos sanguneos en el dorso.

Hacia caudal y siguiendo la forma de los loops, observar el hepatopncreas.

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Todas las muestras de rganos y tejidos que se tomen a continuacin deben ser fijadas en solucin fijadora de Bouin.

3.- Diseccin del saco pulmonar:

Disectar el saco pulmonar, levantarlo y dirigirlo hacia caudal. Volver a observar el corazn y las estructuras asociadas a ste. Tomar muestra de tejido pulmonar y hacer corte en el pericardio para exteriorizar el corazn. Extraer el corazn y fijarlo. Debido a que el rgano de Bojanus se rompe con facilidad, disectarlo completo con tejido pulmonar alrededor y sin tocar sus bordes. Hacer un corte cuidadoso con bistur y eliminando, de esta forma, lo que queda de las estructuras antes mencionadas. Observar la porcin final del intestino, que se encuentra pegada al msculo columelar, al lado derecho.

4.- Observacin general de las vsceras:

Disectar la membrana que cubre la vsceras, dejando los rganos al descubierto. Observar las estructuras presentes; de estmago e intestino dorsal y a la izquierda del animal, bolsa del pene, flagelo, glndulas multfidas, ducto vaginal, bolsa del dardo en el lado derecho y medial, y hacia caudal por el mismo lado, conducto deferente y ovispermiducto enrollados.

5.- Diseccin del sistema reproductivo:

Disectar el tegumento que rodea el poro genital, liberando, de esta forma el resto de las estructuras reproductivas. Levantar y llevar hacia caudal cuidadosamente la conjuncin de la bolsa del pene, bolsa del dardo y ducto vaginal, para posteriormente extraer todo el resto.

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Una vez separado todo el sistema reproductivo, observar rgano por rgano. Yendo de craneal hacia caudal: poro genital, ducto vaginal, glndulas multfidas, bolsa del pene, flagelo, msculo retractor del pene, bolsa del dardo. Mas atrs, divertculo seminal y espermateca. Por otro lado, conducto deferente, ovispermiducto, cmara de fecundacin, canal hermafrodita, glndula hermafrodita y glndula de la albmina.

Fijar todo el aparato reproductivo para luego tomar muestras de rganos que no presenten aspecto normal.

6.- Diseccin del sistema digestivo:

Hacer un corte al comienzo del bulbo bucal desprendiendo los labios de ste y seguidamente desprender el msculo retractor. Levantar con la pinza el bulbo y tirar hacia caudal, desprendiendo todo el resto del tubo digestivo. Disectar el msculo columelar que impide la separacin de las vsceras con el pie muscular.

Una vez separado el sistema digestivo del resto del cuerpo, observar rgano por rgano. Desde el bulbo bucal hacia caudal observar: rdula, bulbo bucal, esfago, estmago con las glndulas salivales adosadas en el dorso, primera porcin del intestino, hepatopncreas, ltima porcin del intestino y ano.

Fijar todo el aparato digestivo y posteriormente tomar muestras del bulbo bucal, estomago, hepatopncreas e intestino, en caso de observar estructuras anormales.

75

4.5. Objetivo N 5 Proponer una diagramacin corporal del caracol

Con el objeto de dar cumplimiento al objetivo N 5, a continuacin se dar a conocer algunos aspectos anatmicos a travs de diagramaciones.

Diagrama del cuerpo del caracol:

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Diagrama del caracol desprovisto de concha:

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Diagrama del Sistema Reproductivo:

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Diagrama del Sistema Digestivo:

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Captulo 5 Discusin

Dada las caractersticas del estudio, de tipo descriptivo, no hay datos estadsticos que puedan ser analizados y discutidos, por lo que este captulo tendr como objetivo analizar y comentar la informacin obtenida, en relacin a los objetivos planteados, con el fin de rescatar aquellos datos que puedan contribuir a mejorar la metodologa: el mtodo de eutanasia utilizado, como de la calidad de las imgenes,

procedimientos de tincin. Poder comentar tambin las dificultades y falencias presentadas, con el fin de sentar precedentes y evitar que se vuelvan a presentar en investigaciones posteriores.

En primer lugar se har referencia al mtodo de eutanasia, seguidamente a las imgenes logradas, posteriormente a los cortes histolgicos, al procedimiento de tincin de muestras, para terminar con la descripcin anatmica.

5.1. Mtodo de eutanasia

Despus de haber revisado la bibliografa en relacin a mtodos de eutanasia, se opt, por la solucin de etanol, usada en laboratorios de zoologa.

Tal como se seal en el captulo anterior, para este estudio se utiliz, una solucin de etanol al 70%, donde se sumergieron los caracoles por un perodo de tiempo de 20 minutos; solucin que permiti la muerte del animal, con un mayor porcentaje de su cuerpo fuera de la concha, facilitando el trabajo realizado con el fin de dar respuesta a uno de los objetivos propuestos.

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Al comparar este mtodo con otros, como p.e el de Fox, en que el caracol se sumerge en agua tibia, hasta que el animal muere, se obtiene una muerte con cuerpo fuera de la concha, y extendido, situacin inicialmente ideal, sin embargo, se produce absorcin de agua, que vuelve turgente los rganos y por lo tanto se destruyen ms fcilmente. Por otro lado, el tiempo en que ocurre el deceso del animal es largo, entre 2 y 4 hrs.

Sera interesante, sin embargo, investigar otras formas de eutanasiar a los caracoles, con mtodos menos invasivos y en menor tiempo.

5.2. Imgenes

En referencia al registro de imgenes cabe sealar, que la mayor dificultad se present al momento de obtener las imgenes de las muestras histolgicas, esto, debido a que fue muy complejo hacer coincidir el lente de la cmara fotogrfica con el lente del microscopio ptico.

En relacin a este punto, se sugiere la utilizacin de un microscopio con cmara fotogrfica incluida, con el objeto de mejorar la calidad de las imgenes, obteniendo un registro de mejor calidad, claridad y nitidez, que pueda llevar a mejores observaciones, y por ende una mejor descripcin de las muestras.

5.3. Cortes histolgicos

En este punto, cabe destacar la cantidad de muestras utilizadas que se destruyeron, debido a la fragilidad de los tejidos y a las caractersticas de la hoja de la navaja del micrtomo, cuyo filo se pierde rpidamente. Ocurri tambin, que parte de la muestra, al ser depositada sobre el portaobjetos, no se estir completamente, y luego de teidas y fijadas, no sirvi para ser observadas al microscopio, debido a las numerosas capaz celulares superpuestas.

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Es posible que a travs de la experiencia en tcnicas de laboratorio, se puedan obtener mejores resultados en el rea histolgica, con cortes ntegros, de mejor calidad, que permitan una mayor proyeccin.

5.4. Tincin de las muestras

La tincin utilizada para todas las muestras de este estudio fue, Hematoxilina-eosina, que permite una clara observacin de las estructuras celulares del animal, sin

embargo, se hace necesario sugerir la utilizacin de alguna otra tincin , para otras funciones con objetivos ms especficos.

5.5. Descripcin anatmica

Tal como se seal, en el objetivo N 2, la pretensin de esta investigacin fue describir la anatoma del caracol e identificar cada uno de los rganos del animal. Al respecto cabe sealar que esto se logr en la mayora de los sistemas, sin embargo, al describir el sistema circulatorio y nervioso, este presenta ciertas debilidades debido a que hay estructuras que no fue posible ubicar .

Para el sistema circulatorio se sugiere utilizar un medio de contraste, que al ser inyectado en los vasos principales, se pueda mostrar el sistema completo.

En relacin al sistema nervioso, fue posible identificar el anillo periesofgico; en este punto cabe sealar que, dada la caracterstica del tejido y la complejidad del sistema, es que se sugiere hacer una investigacin para cada sistema, tomando cada sistema por separado, con el objetivo de dar cuenta en profundidad de cada uno de ellos.

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Captulo 6 Conclusiones

Finalmente y a modo de conclusin se puede sealar que la investigacin, cumpli con los objetivos planteados, entregando los conocimientos anatmicos, que

permiten conocer e identificar la estructura orgnica normal del caracol Helix aspersa, tanto a nivel macro como microscpico.

Cabe sealar que este estudio entrega una tcnica de diseccin, que conlleva el cumplimiento del objetivo general de la investigacin, que es establecer una tcnica de necropsia para el caracol Helix aspersa, y que podr ser utilizado por estudiantes o profesionales del rea, interesados en el tema.

Entrega adems, un marco de normalidad, para el caracol Helix aspersa, que permite observar y determinar, lo que se sale de estos parmetros, y desde este punto, identificar lo patolgico, pudindose diagnosticar adecuados. y establecer los tratamientos

Dentro de las debilidades de la investigacin, cabe destacar la calidad de los instrumentos, y las limitaciones de su uso. Al respecto cabe sugerir el uso de instrumentos de mayor tecnologa y de mejor calidad, que permitan conservar tanto la integridad de los tejidos, al momento de los cortes y proceso de tincin; como tambin la calidad del registro de imgenes.

Por ltimo, invitar a otros estudiantes de pregrado y a profesionales del rea a continuar esta lnea de investigacin, para seguir fomentando el profesionalismo en el cultivo de este animal, contribuyendo a favorecer la produccin en cantidad y calidad,

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que permita competir dentro y fuera del pas, respondiendo a estndares tanto nacionales como internacionales.

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Captulo 7 Bibliografa

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Captulo 8 Anexos

8.1. Calendarizacin

Actividad Recoleccin de muestras Diseccin de muestras Preparacin de las muestras Finalizacin de actividades en Laboratorio Presentacin del Proyecto Defensa de Tesis

Fecha Mayo-Noviembre del 2006 Mayo-Noviembre del 2006 Mayo-Noviembre del 2006 Diciembre del 2006 Agosto del 2006 Abril del 2007

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