R$ 5,00

ano II nmero 8 maio/junho de 1999

Transferncia genmica parcial

Probiticos Algas AIDS

BACTRIAS LCTICAS

ESPECIAL

EFLORESCNCIAS DE ALGAS MARINHAS NOCIVAS

USO DA BIOTECNOLOGIA PARA O DESENVOLVIMENTO DE UMA VACINA VIVA ATENUADA MAIS SEGURA

www.biotecnologia.com.br

BIOTECNOLOGIA/KL3

BIOTECNOLOGIA/KL3

AMAZNIA
ENTREVISTA

No caminho do desenvolvimento sustentvel

Eduardo Alberto Vilela Morales, engenheiro agrnomo, Ph.D
Entrevista concedida a Lucas Tadeu Ferreira Enviado especial a Manaus

Com mais de 5 milhes de quilmetros quadrados, a Amaznia Legal estende-se por nove Estados brasileiros e ocupa 60% do territrio nacional. Se fosse um pas independente, a Amaznia talvez fosse o sexto maior do mundo em extenso territorial. O rio Amazonas o maior do mundo com quase 7.000 km de extenso e mais de 1.000 afluentes. Transporta mais de 200.000 metros cbicos de gua por segundo para o oceano Atlntico e possui uma fauna singular e diversificada. Numa pequena rea da floresta, equivalente ao Central Park, de Nova York, existem mais espcies de plantas do que em muitos pases. As grandezas amaznicas so tamanhas que se estima existirem de 5 a 30 milhes de plantas diferentes. No se sabe o nmero exato porque poucas foram estudadas at hoje, depois de cinco sculos de explorao. Contudo, as plantas conhecidas e identificas pelos pesquisadores e botnicos somam mais de 30.000 espcies e representam 30% de todas as conhecidas no mundo. Muitas tm poder medicinal e aplicao industrial e, infelizmente, so apropriadas e transportadas ilegalmente, inclusive por estrangeiros, por falta de uma legislao rigorosa e uma fiscalizao eficiente. O mesmo acontece com os pequenos animais e microrganismos, que, tambm, tm propriedades teraputicas e uso industrial. A mdia com freqncia denuncia a chamada biopirataria na Amaznia. A Regio tem ainda a maior variedade de espcies de aves, primatas, roedores, jacars, sapos, insetos, lagartos e peixes de gua doce do mundo. Por toda essa riqueza, a Amaznia indiscutivelmente o maior centro de origem de plantas, animais e microrganismos, o que pode ser sintetizado em uma nica palavrachave: megabiodiversidade. Os cientistas consideram a Regio ainda como uma espcie de refrigerador e regulador do clima planetrio. Mas, a despeito de todas essas riquezas, a Amaznia no deve ser considerada apenas uma Regio estabilizadora das condies ambientais do planeta ou como mero reservatrio da biodiversidade e, muito menos, s como um centro provedor e exportador de recursos biolgicos para instituies de pesquisa e cientistas de todo o mundo. A Amaznia deve representar para o Brasil uma opo scio-econmica vivel no contexto do desenvolvimento e da preservao ambiental. Para tanto, a utilizao de prticas e de solues sustentveis mostra-se como alternativa, alm de ser condio necessria e imprescindvel para promover o desenvolvimento sustentvel, em bases cientficas e tecnolgicas. Baseado na importncia fundamental que a Amaznia representa hoje para o Brasil, a revista Biotecnologia foi ao encontro do chefe-geral da Embrapa Amaznia Ocidental, Eduardo Alberto Vilela Morales, em Manaus. Com vasto conhecimento tcnico-ambiental, nos fala das potencialidades da regio, das pesquisas, da misso de sua Unidade na obteno do conhecimento cientfico e da tecnologia fundamental, como tambm da procura de solues tecnolgicas para o uso racional da floresta Amaznica, principalmente na forma de sistemas de produo voltados para fundamentar agronegcios para o pequeno, mdio e grande produtor e destaca a importncia da aceitao e do apoio dos rgos de financiamento e desenvolvimento no atual contexto.

Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

BC&D A Amaznia realmente fonte de recursos genticos para a biotecnologia? Eduardo Morales Sim, dentro do enfoque que dado hoje, a Amaznia uma fonte expressiva de recursos genticos com potencial de uso por processos biotecnolgicos. Ela tem uma biodiversidade bastante expressiva, com espcies ainda desconhecidas, embora possam estar sendo utilizadas pelas etnias e povos que aqui se instalaram, e que, realmente, conhecem a sua utilizao, mas sob a forma de processos primitivos ou artesanais. Alm das espcies de plantas e animais, existe uma microbiota muito expressiva e da maior importncia para a Amaznia, para o Pas e para a humanidade, como o caso de microrganismos que saram da Amaznia, foram para a Europa e voltaram para melhorar processos de produo de celulose. No caso dos anfbios, rpteis e insetos, cujos venenos podem ter uma gama de utilizao muito extensa na cura de doenas humanas, de plantas e de animais. Nessa linha, o Ministrio do Meio Ambiente e da Amaznia Legal implantou o Programa Brasileiro de Ecologia Molecular para Uso Sustentvel da Biodiversidade da Amaznia (PROBEM/AMAZNIA). BC&D dentro desse contexto que est sendo criado pelo Governo Federal o Centro de Biotecnologia da Amaznia? Eduardo Morales sim. A construo desse Centro dever estar concluda dentro de trs anos e, alm das atividades-fim, tambm dever participar da capacitao de tcnicos da regio. Sua implantao constitui fator decisivo para viabilizar a instalao de biofbricas para melhor aproveitar o potencial da biodiversidade regional. Provavelmente, no ser um Centro responsvel por todas as aes na Regio. Ao contrrio, ele vai ser um Centro dependente de parcerias com instituies de pesquisa e de vrias empresas interessadas, da regio, do pas e do exterior. Por exemplo, quem est trabalhando com venenos de animais peonhentos poder vir a se transformar num grande parceiro do PROBEM. Quem trabalha com plantas aromticas, tambm, porque ele vai disponibilizar laboratrios e recursos e estar muito prximo do setor empresarial. O Centro uma das alternativas para o desenvolvimento sustentvel da Amaznia, embora no seja a soluo final, pois ele, por trabalhar com tecnologias de ponta, no dever ter uma atuao expressiva na gerao de empregos. Na verdade, o Centro estar tornando realidade o potencial de uso da biodiversidade da Amaznia, sob controle do governo federal. BC&D Esse Centro vai dispor de equipe tcnica para se instalar e funcionar nos prximos trs anos? Eduardo Morales Esse o grande problema. A crise global que hoje est acontecendo pegou todo mundo de surpresa. Esse Centro

faz parte do Plano de Ao do Governo Federal Brasil em Ao e dentro desse Plano provavelmente poder haver recursos assegurados para sua instalao e incio de operao. Entretanto, vai exigir criatividade para compor o seu quadro de pessoal, que ser de consultores, pesquisadores, professores visitantes e contratados. Contudo, o fato de ele estar se instalando em Manaus abre perspectiva ainda para que os pesquisadores de So Paulo, Rio de Janeiro, Braslia e de outras regies, inclusive do exterior, possam terminar ou iniciar seus trabalhos de pesquisa aqui. BC&D O senhor acredita que o desenvolvimento sustentvel da Amaznia seja vivel?

voltado para o aproveitamento sustentvel no-madeireiro da floresta - pesquisando espcies produtoras de leos, substncias aromticas, frmacos etc. tem boa parte de nosso trabalho concentrado na obteno de microrganismos de uso agrcola, como micorrizas e bactrias fixadoras de nitrognio, para diminuir o uso de fertilizantes. A segunda linha est voltada para o estudo de espcies produtoras de matria-prima, com destaque para trs: dend, guaran e seringueira, sendo o dend considerado uma das principais solues tecnolgicas para a Regio Amaznica. A terceira linha a produo de alimentos. Aqui deparamos com uma situao sui generis: mandioca, piscicultura e cupuau como grandes grupos de trabalho, com destaque para a piscicultura, como o mais promissor; e, ao mesmo tempo, com uma srie de outras aes de apoio s demandas do Estado do Amazonas, tais como: frutas, hortalias, gros, produo animal etc. Finalmente, a quarta linha est voltada para um grupo de atividades de Pesquisa e Desenvolvimento, que considero o caminho das pedras para o desenvolvimento sustentvel, que so os sistemas agroflorestais. Nesse campo, o Sistema Embrapa de pesquisa referncia regional e mantm fortes laos com outras instituies pblicas e privadas, nacionais e estrangeiras, de interesse para a pesquisa fundamental e participativa, esta ltima em associao com prefeituras, comunidades e assentamentos rurais. BC&D Nesse caso, como a interao com os demais rgos de pesquisa da Regio? Eduardo Morales Nossa fora de trabalho pequena em funo das quatro grandes linhas de pesquisa que acabei de citar e, principalmente, em relao dimenso do Estado e ao fato do bioma Amaznia estar subdividido em uma quantidade muito grande de ecossistemas diferentes, com problemas e solues especficas. Uma das maneiras que encontramos para fortalecer os trabalhos e, ao mesmo tempo, superar as dificuldades, foi a parceria institucional. Nesse aspecto, o nosso relacionamento, por exemplo, com o INPA (Instituto Nacional de Pesquisa da Amaznia) um relacionamento excelente, uma vez que permite estreita associao de linhas de Cincia e Tecnologia comuns, como o caso da piscicultura, manejo sustentado madeireiro, sistemas agroflorestais etc. A Universidade do Amazonas tambm uma grande parceira. Ela tem, por exemplo, um curso de ps-graduao ao nvel de mestrado em sistemas agroflorestais no qual boa parte das aulas tericas e prticas so complementadas dentro da nossa unidade. Alm disso, mantemos ainda relacionamento com a maioria das instituies de pesquisa do Estado e da Regio Amaznica. De uma maneira geral, o conhecimento cientfico tecnolgico exisBiotecnologia Cincia & Desenvolvimento 5

Eduardo Morales Eu no s acredito que seja vivel, mas, hoje, como conheo melhor a Amaznia, o considero necessrio e estratgico para o pas. O Centro de Biotecnologia a que eu me referi, por exemplo, mais um componente do processo de desenvolvimento sustentvel da Amaznia. Entretanto, a idia da sustentabilidade bastante complexa, j que ela tem de oferecer, qualquer que seja a soluo tecnolgica, ganhos sociais em primeiro lugar, o que significa resgate da cidadania e melhores condies de vida para as famlias envolvidas. Em segundo lugar, deve oferecer ganhos econmicos adequados para que os ganhos sociais se tornem realidade e, em terceiro lugar, deve oferecer ganhos ambientais compatveis com as demandas de conservao e qualidade do ambiente. BC&D Quais as principais linhas de pesquisa da sua Unidade, na Embrapa Amaznia Ocidental? Eduardo Morales Elas podem ser resumidas em quatro grandes linhas. A primeira - recursos florestais - voltada para o manejo sustentado da floresta nativa, sob dois enfoques: o madeireiro, no qual trabalhamos em parceria com a nica empresa da Amaznia que tem Certificado Verde para explorao e o segundo enfoque, que embora seja

tente nas vrias instituies da regio muito grande. Mas, muitas vezes, esse conhecimento est mais perto das tecnologias fundamentais ou de bancada e ainda no foram validados, conseqentemente, sem potencial de uso imediato. Eis a um dos aspectos diferenciais entre nossa Unidade e as demais instituies da Amaznia, j que ns estamos selecionando linhas de pesquisas para encontrar solues tecnolgicas como oportunidades de agronegcios para o desenvolvimento sustentvel. Por exemplo, pretendemos que o dend e a piscicultura sejam produtos de desenvolvimento regional e de resgate da cidadania. A mesma filosofia de trabalho est sendo tentada no estudo dos sistemas agroflorestais. BC&D J que a piscicultura, hoje, apontada como uma das grandes possibilidades na regio, poderia nos falar mais um pouco dessa questo dentro do conceito de desenvolvimento sustentvel da Amaznia? Eduardo Morales A piscicultura uma das reas que a Embrapa vai fortalecer de forma expressiva, uma vez que nessa linha j existem algumas solues tecnolgicas. Para o Estado do Amazonas, com colinas e gua para todos os lados, a piscicultura parece ser uma das solues tecnolgicas mais adequadas. Mas, o que isso pode significar: um hectare com criao de bovinos pode produzir por volta de 300 kg de carne por ano. Entretanto, um hectare de tanque para piscicultura pode produzir at cinco toneladas de peixe, com baixa densidade, e o peso de cada um variando entre 3 a 4 kg. Esse mesmo hectare, com alta densidade de criao de peixes, produzindo fils que variem em torno de 70g, poder oferecer produes em torno de 10 a 20 toneladas por ano. Contudo, um fator importante a considerar na implantao desses projetos o monitoramento e correo dos impactos ambientais que possam ocorrer. BC&D E a explorao madeireira? Eduardo Morales A tecnologia de manejo sustentvel permite um corte de madeira seletivo muito diferente do corte raso, que destri toda uma rea para retirar as rvores de espcies comerciais. Os problemas aqui so dois: o primeiro, relacionado com a tecnologia disponvel, que somente permite retornar ao local aps 25, 50 ou at 100 anos; e, o segundo, relacionado com a inexistncia de uma sistemtica eficiente de fiscalizao da explorao madeireira. O governo, seja federal, estadual ou municipal, no est aparelhado para fiscalizar detalhadamente como esse tipo de empreendimento exige. Alm disso, no se conhece ainda, com preciso, o valor comercial de todas as espcies, uma vez que a explorao da madeira est concentrada em torno de 10 espcies, o que dificulta situaes onde ocorrem at 75 espcies pro-

dutoras de madeira. Entretanto, boa parte do potencial madeireiro da Amaznia pode ser explorado de forma racional, com planos de manejo sustentvel. Existem riscos, sem dvida. preciso que as empresas tenham Certificado Verde para faz-lo e que exista uma fiscalizao eficiente e rigorosa.

"A Amaznia uma regio que tem que ser explorada racionalmente e com dignidade, e no apenas vista como reserva ecolgica da humanidade"
BC&D Como esto as pesquisas com o guaran? Eduardo Morales A nica instituio do mundo que pesquisa o guaran a nossa. O guaran tem uma rea de produo bem localizada no Amazonas, especificamente nos municpios de Maus e Urucar, embora com oscilaes acentuadas na produo. Hoje, o guaran no mais utilizado exclusivamente em refrigerantes; ele usado tambm como estimulante, com fins medicinais e tem um grande mercado potencial. Lamentavelmente, ele faz parte de um grupo das culturas amaznicas que tm potencial, mas o mercado ainda no est bem

no Acre. As nossas principais linhas de pesquisa esto voltadas para o enxertio de copas, que permite a produo de rvores e clones dentro do prprio ambiente onde ocorre o mal das folhas. A seringueira j est presente em regies de escape, como Mato Grosso, So Paulo, Bahia e na regio dos cerrados, onde, alm de no ocorrer a doena, ela tem um nvel expressivo de adaptao e de produtividade. Somente o estado de So Paulo responde hoje por um quarto do total da produo nacional. A seringueira, contudo, tambm tem potencialidades e, de certa forma, quando olhamos a Regio, vemos a seringueira como alternativa scio-econmica e, por isso, temos que investir mais nas pesquisas e oferecer solues para a Amaznia voltar a produzir borracha em condies viveis. BC&D Johanna Dberainer e Vera Baldani afirmam, na quarta edio de BC&D ( artigo Biocombustveis), que a dendeicultura considerada uma das melhores opes de ocupao de rea desmatada, alm de evitar a eroso do solo. Como tambm o senhor j citou anteriormente que o dend poder tornar-se um dos produtos de desenvolvimento regional, gostaramos que nos falasse mais sobre o assunto. Eduardo Morales difcil entender porque, at hoje, o dend no uma cultura expressiva na Amaznia e no Brasil. O dend pode ser classificado como uma commoditie perene. At o ano 2010, dever superar a soja na produo de leo para consumo humano, um leo refinado diferente, entretanto, do leo da comida baiana. O dend a nica cultura com retornos expressivos e mercados ilimitados e que oferece empregos, uma vez que tudo nela manual. O dend exige umidade e altas temperaturas e, na Amaznia, temos mais de 70 milhes de hectares que poderiam, em tese, ser utilizados para o seu cultivo, dos quais 55 milhes s no Estado do Amazonas. Quero ressaltar que invivel e politicamente incorreto destruir a mata para cultivar o dend. O dend tem que ser utilizado para recuperar as reas degradadas ou abandonadas, o que proporcionaria excelentes resultados scio-econmicos e ambientais. O dend poder, ainda, oferecer retornos econmicos que variam de R$900,00 a R$ 1.800,00, em pequenas propriedades, de 6 a 8 hectares, dependendo do grau de organizao e associao dos produtores, os quais poderiam ainda ter as suas prprias usinas de processamento. BC&D Mudando um pouco o assunto, j que as parcerias podem proporcionar resultados significativos, no caso de sua Unidade, quais so as principais parcerias da Embrapa Amaznia Ocidental? Eduardo Morales Na rea de pesquisa e

"Alm das espcies de plantas e animais, existe uma microbiota muito expressiva e da maior importncia"
definido nem interna nem externamente. uma cultura que ainda precisa de um volume de pesquisa bastante acentuado, embora apresente um bom potencial de comercializao para o futuro. BC&D O senhor poderia falar ainda sobre a situao da seringueira? Eduardo Morales A seringueira uma dvida social em mbito federal e regional e uma prioridade que coloca a Embrapa Amaznia Ocidental como referncia nesse produto. Estamos desenvolvendo pesquisas para controlar o mal das folhas e atender s demandas regionais. Entretanto, a seringueira est com o preo muito baixo nos mercados nacional e internacional. O que mais sofre com esse problema do preo o sistema extrativista, localizado em algumas regies da Amaznia e principalmente

Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

desenvolvimento, o primeiro grupo de parcerias so as Unidades da Embrapa localizadas na Amaznia e em outras regies do Pas. O segundo grupo de parcerias so as instituies de pesquisa regionais como o INPA, no Amazonas, com o qual estamos definindo linhas e prioridades de pesquisa para uma associao institucional, onde o conhecimento cientfico j est bastante avanado. O terceiro grupo so as Universidades. A Universidade do Amazonas tem um curso de mestrado em sistemas agroflorestais, que uma das linhas prioritrias de pesquisa da Embrapa, e que, portanto, permite um trabalho conjunto, fortalecendo as aes e visando formar especialistas que tornem esses sistemas rentveis. O quarto grupo so as instituies do Estado do Amazonas, de fomento, extenso e de conservao e qualidade do ambiente. Ns temos que nos aproximar muito das demandas do Estado e municpios para conhecer o que a sociedade est querendo em termos de solues tecnolgicas dentro do contexto da realidade regional. BC&D A Unidade tem algum tipo de convnio de parceria com empresas particulares? Eduardo Morales Temos convnios de pesquisa fundamental e pesquisa participativa com empresas produtoras de guaran e de dend. No se justifica mais que os trabalhos de validao sejam realizados dentro do campo experimental da Embrapa, em funo dos altos custos, da dificuldade para obter recursos para instalar os experimentos na dimenso desejada e, a mais importante, a aceitao das tecnologias pelos produtores, os quais aceitam melhor os resultados das pesquisas quando estas so feitas com a participao das empresas e representantes das comunidades. Na regio de Humait, no Amazonas, existe uma parceria entre a Embrapa Amaznia Ocidental e empresrios, a Embrapa Rondnia, a Fundao Mato Grosso, a Embrapa Soja (localizada em Londrina, PR), a Embrapa Milho e Sorgo (Sete Lagoas, MG) e a Embrapa Arroz e Feijo (Goinia, GO), que tem permitido apresentar resultados totalmente confiveis e plenamente aceitos pelos produtores. A parceria a principal maneira de tornar vivel a pesquisa e as solues tecnolgicas na Amaznia e em outras regies do Pas. BC&D - O que pode ser feito para que os diferentes segmentos da sociedade brasileira participem do desenvolvimento sustentvel da Amaznia? Eduardo Morales A Amaznia Legal representa 60% do territrio nacional. Estados como Mato Grosso, Tocantins e Rondnia esto com um surto de desenvolvimento bastante acelerado, principalmente Mato Grosso, o que implica riscos para o meio

ambiente. A Amaznia para ser inserida no contexto nacional tem que estar contemplada no processo da poltica nacional de desenvolvimento do governo, com trs n-

em geral, na Amaznia, e a Embrapa Amaznia Ocidental, em particular, trouxe de contribuio para a regio nos ltimos 20 anos? Eduardo Morales No passado, os esforos da pesquisa foram concentrados no conhecimento cientfico e na obteno de tecnologias fundamentais. Entretanto, pouco foi investido na obteno de solues tecnolgicas voltadas para o desenvolvimento sustentvel da Amaznia. Hoje, j se fala em desenvolvimento sustentvel e agronegcio, ao mesmo tempo. Mas esses paradigmas no foram adotados no passado. Por outro lado, muitas das solues tecnolgicas sugeridas no passado priorizaram a conservao e qualidade do ambiente, mas, aparentemente, se esqueceram de inserir o homem da Regio, o que, muitas vezes, pode ter sido uma das causas de sua marginalizao. A Embrapa, a partir de 1975, desenvolveu inmeras tecnologias para o aproveitamento de vrzeas e de terra firme, embora boa parte delas bastante relacionadas com o modelo da revoluo verde. Entretanto, como contribuio da Embrapa Amaznia Ocidental, eu ressaltaria as tecnologias para cultivo do dend, j que hoje podemos cultiv-lo na Regio Amaznica, nos cerrados ou em qualquer outra regio com irrigao e manejo adequados. Mais contribuio so as tecnologias da seringueira que, graas s pesquisas que ainda so realizadas, permitem que seja possvel plant-la em diferentes ecossistemas da Amaznia e do pas, inclusive onde ocorre o mal das folhas, sua principal doena. Mas, a seringueira hoje no parece ser um cultivo vivel para a Amaznia, dadas as condies do mercado global dominado pela Malsia e Indonsia; o Brasil no soube acompanhar essa corrida, alm de estar com a sua produo e produtividade baixas. A rigor, ainda temos chances de suplant-los no futuro, j que o nosso material gentico superior. Falta apenas uma poltica agressiva e forte para resgatar essa cultura no Pas. O estoque de conhecimento disponvel mais do que suficiente para isso. Outra cultura que teve muita contribuio a do guaran, que saiu do extrativismo regional para uma opo empresarial, e que, bem ou mal, est funcionando at hoje. Temos clones e materiais superiores de guaran que poderiam permitir acrscimos economia regional, graas aos trabalhos realizados nas ltimas duas dcadas. Eduardo Alberto Vilela Morales engenheiro agrnomo, Ph.D, foi professor e Chefe do Departamento de Engenharia Agronmica da Universidade de Braslia -UnB, ChefeAdjunto de Pesquisa e Chefe-Geral do Centro Nacional de Pesquisa de Recursos Genticos e Biotecnologia Cenargen/Embrapa, localizado em Braslia, entre vrias outras atividades que exerceu ao longo da sua vida profissional.

"A idia da sustentabilidade bastante complexa, j que ela tem que oferecer, qualquer que seja a soluo tecnolgica, ganhos sociais em primeiro lugar"
veis de ganhos: sociais, econmicos e ambientais. O erro maior que ainda se pode cometer na regio querer desenvolv-la com tecnologias da revoluo verde uso intensivo de insumos, fertilizantes, adubos, mecanizao agrcola etc. Com o emprego dessas tecnologias, existem poucas solues voltadas para o seu desenvolvimento sustentvel. Os nossos tcnicos foram formados com base nessas tecnologias, que, ao longo das ltimas dcadas, no se mostraram viveis para esta Regio. Contudo, existe conhecimento cientfico em nveis

"O dend a nica cultura com retornos expressivos, mercados ilimitados, e que oferece empregos, uma vez que tudo nela manual"
adequados para fundamentar o desenvolvimento sustentvel da Amaznia. Muito deste conhecimento cientfico-tecnolgico est guardado em prateleiras no Brasil e no estrangeiro. O primeiro esforo que se poderia fazer seria realizar uma cruzada nacional para aumentar o nmero de parcerias e de investimentos com outras instituies do pas, de maneira que se fortaleam os cursos e o conhecimento existente na Amaznia, e apoiar o intercmbio de pesquisadores com instituies nacionais e estrangeiras. Afinal, a Amaznia uma regio que tem de ser explorada racionalmente e com dignidade e no apenas ser vista como uma reserva ecolgica da humanidade para o futuro, como quer a mdia, principalmente a internacional. BC&D Finalmente, o que a pesquisa

Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

Carta ao Leitor
A partir do momento em que cientistas descobriram a possibilidade da manipulao da cadeia de DNA, o mundo previu as grandes consequncias que adviriam a partir desse grande avano no final de sculo. Debates surgiram em escala mundial e vrias leis foram criadas. Paralelamente, cientistas do mundo inteiro se voltaram para a pesquisa da biodiversidade do planeta, na procura de princpios ativos de toda natureza. Pesquisas brilhantes esto sendo realizadas com a ajuda de outros segmentos, como a informtica e mesmo a engenharia. Novos processos e novas tecnologias esto sendo desenvolvidas em laboratrios de todo o mundo, inclusive em nossos prprios laboratrios no Brasil. Esses acontecimentos esto ocorrendo com tal velocidade e diversidade que podemos dizer que, h muito tempo, no se via tanto progresso cientfico quanto agora. Cientistas esto debruados sobre o estudo das maiores doenas que acometem os seres humanos nos dias de hoje, o que nos faz pensar que doenas como a AIDS e o Cncer esto com seus dias contados. A Organizao Mundial de Sade j alertou para o fato de que a primeira vacina contra o cncer de tero poder estar disponvel em pouco tempo, devido ao fato de j existirem vrias em teste no mundo. Muitas dessas vacinas s puderam ser feitas atravs do emprego e dos conhecimentos da engenharia gentica. Por outro lado, vrias substncias e os mais diversos alimentos esto sendo minuciosamente estudados, como por exemplo, o tomate, que recm analisado por cientistas da Universidade de Harvard, demonstrou que pode reduzir o risco de alguns tipos de cncer, como o de prstata, de estmago e pulmo, atravs da licopene, substncia que d colorao vermelha aos tomates. Um outro medicamento, base de uma substncia muito comum encontrada em xampus, j est sendo desenvolvido contra o papiloma vrus, responsvel por 90% dos casos de cncer de tero. Tambm foi no exterior que estudos realizados demonstraram, muito recentemente, que a associao de dois medicamentos doxorrubicina e paxitaxel - reduz em grande parte o cncer de mama, o que levou a um evento em So Paulo reunindo cerca de uma centena de oncologistas para a divulgao da pesquisa. Aqui no Brasil, vrias instituies esto j desenvolvendo os mais diversos medicamentos base de plantas da flora brasileira. Esse estudo de tal forma promissor, que a Faculdade de Cincias da Sade de So Paulo (FACIS) abriu inscries para o primeiro curso de plantas medicinais. o primeiro curso desse tipo em nvel de graduao no pas. De fcil entendimento a concluso a que se chega de que o apoio Cincia, hoje, no apenas fundamental, como tambm urgente. Projetos de Lei de Acesso aos Recursos Genticos so, no momento atual, prioridade para quem pretende resguardar algum direito sobre a biodiversidade no Brasil. No entanto, importante considerar que qualquer procedimento em relao proteo de direitos, royalties, seja de que forma se apresente, deveria vir acompanhado de uma poltica de explorao cientfica, apoiando, de fato, a pesquisa no Brasil. Tambm sem sentido seria o fato de nada se fazer e procurar impedir que outros o faam. Seguindo essa linha de raciocnio, e no que diz respeito a novos medicamentos, o bom senso nos faz pensar que os doentes, com certeza, at agradeceriam a biopirataria. No podemos tambm nos esquecer de que, embora existam leis, elas precisaro se fazer valer, de fato e no s de direito. O Centro de Biotecnologia, na Amaznia, uma esperana para quem pretende ver a pesquisa, principalmente a advinda da biodiversidade, sendo realizada por nossos pesquisadores aqui no Brasil, mas no ser a soluo total do problema, nem mesmo poderia corresponder a uma compensao relativa ao corte de verbas na rea cientfica. Em nossas Universidades e Institutos, pesquisas de vulto tm sido realizadas e devem, com a importncia e urgncia que o assunto merece, ser devidamente apoiadas em todas as suas fases. O pesquisador precisa de esclarecimento, principalmente, sobre o patenteamento daquilo que est desenvolvendo, uma de suas maiores motivaes. Hoje, o fundamental prever o futuro, mas trabalhando o hoje: essa a hora de investir na cincia, na pesquisa, abrir concesses, e fazer convnios. A Fiocruz, por exemplo, no Rio de Janeiro, para no interromper o Programa de Cncer de Mama e Gentica, programa esse que contm tratamentos preventivos do cncer e aconselhamento gentico familiar, est acertando parceria com o centro Epidemiolgico do Cncer, em Lyon, na Frana. Rogamos aos setores governamentais que atentem para a tecnologia do futuro, abracem um compromisso verdadeiramente responsvel, atual e moderno, apoiando no s a melhoria ao meio ambiente e a qualidade de vida, mas tambm a pesquisa que salva vidas, que diminui o sofrimento, que mata a fome, e que avana com velocidade cada vez maior, nesse histrico momento em que atravessa a cincia e nessa histrica oportunidade de explorarmos nosso maior tesouro: a riqueza da Biodiversidade.

BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento KL3 Comunicao Fundador Henrique da Silva Castro Diretor Executivo Mrcio Brasil Diretora de Pesquisa Ana Lcia de Almeida Diretor de Arte Henrique S. Castro F Departamento Comercial, Redao e Edio: SRTV/Sul - Quadra 701 Ed. Palcio do Rdio II Sala 215 - CEP 70340-902 Braslia - DF Tel.: (061) 225-1512 (061) 225-0976 Fax: (061) 224-2830 Projeto Grfico Agncia de Comunicao IRIS (034) 217-2244 (034) 259-0386 http://www.agenciairis.com.br e-mail: iris@agenciairis.com.br E-mail kl3@biotecnologia.com.br Home-Page http://www.biotecnologia.com.br Impresso e Fotolito Grfica So Francisco Assinaturas O pedido de assinatura realizado atravs da carta resposta-comercial encartada em cada revista, por telefonema ou fax diretamente KL3 ou pela Internet atravs dos nossos endereos eletrnicos. A revista no tem vendedores autorizados. ISSN 1414-4522
8 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

Conselho Cientfico
Dr. Dr. Dr. Dr. Henrique da Silva Castro - Sade; Dra. Johanna Dbereiner - Microbiologia de Solos; Maao Tadano - Agricultura; Dr. Naftale Katz - Sade; Dr. Pedro Juberg - Cincias; William Gerson Matias - Toxicologia Ambiental Vasco Ariston de Carvalho Azevedo - Gentica de Microorganismos

Colaboraram nesta edio: Adriana Janurio, Amilcar Tanuri, Andr R. Lima, Antnio Gianella Neto, Arnor Bublitz Filho, Clio Lopes Silva, Eduardo Alberto Vilela Morales, Elena Caride, Evandro Luiz Linhari Rodrigues, Fabiula A. B. Ferreira, Isabelle Poquet, Ivan Mota, Jean-Christophe Piard, Katia C. K. Kussakawa, Marcelo Martins Werneck, Maritte Sueli Baggio Brando, Pedro Canizio Binsfeld, Pedro Lopes de Melo, Philippe Langella, Rosemeire Cristina Linhari Rodrigues Pietro, Warwick Estevam Kerr, William Gerson Matias, Yves Le Loir

Conselho Brasileiro de Fitossanidade - Cobrafi Dr. Ivan Rud de Moraes - Toxicologia; Dr. Lus Carlos Bhering Nasser - Filopatologia Conselho Federal de Biologia Dr. Joo de Deus Medeiros Fundao Dalmo Catauli Giacometti Dr. Eugen Silvano Gander - Engenharia Gentica; Dr. Jos Manuel Cabral de Sousa Dias - Controle Biolgico; Dra. Marisa de Goes - Recursos Genticos Instituto de Pesquisas Energticas e Nucleares - IPEN Dr. Jos Roberto Rogero

Novas Tecnologias
Oscilaes foradas
- pg 18

Agricultura Opinio Sade

AIDS
- pg 12

Transferncia genmica parcial Imunologia

- Encarte Especial - pg 86

- pg 28

Meio-Ambiente
Algas
- pg 16

Entrevista Pesquisa

Amaznia - Eduardo Alberto Vilela Morales, Chefe Geral da Amaznia Ocidental Paracoccidioidomicose - pg 10 Substncias tensoativas - pg 30 Probiticos - pg 40 Bactrias lcticas - Encarte Especial - pg 80

- pg 04

Reportagem Legislao

Incubadora de empresas

- pg 36

Acesso e proteo biodiversidade

- pg 24

PARACOCCIDIOIDOMICOSE
PESQUISA ESTRATGIA PARA ESTUDOS IMUNOLGICOS
Adriana Janurio
adriaj@hotmail.com

Rosemeire Cristina Linhari Rodrigues Pietro

Departamento de Parasitologia Microbiologia e Imunologia da Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto-USP

Evandro Luiz Linhari Rodrigues

Departamento de Engenharia Eltrica da Escola de Engenharia de So Carlos-USP

Clio Lopes Silva

Departamento de Parasitologia Microbiologia e Imunologia da Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto USP

DIMORFISMO

as ltimas duas dcadas, tem-se constatado um crescimento expressivo do nmero de casos de infeces causadas por fungos, que est associado ao aumento de pacientes imunossuprimidos, em conseqncia direta da expanso do uso de drogas imunossupressoras em pacientes transplantados, com doenas autoimunes, com cncer, e de pessoas infectadas com o vrus da imunodeficincia humana (HIV). Alm desses fatores, o uso de antibiticos por longos perodos e o surgimento de linhagens fngicas multidrogas resistentes tambm contribuem para intensificar essa situao, que representa um problema de sade pblica emergente.

MICLIO 250 C

LEVEDURA 370 C
A paracoccidioidomicose uma micose sistmica profunda causada pelo fungo dimrfico Paracoccidioides brasiliensis, que apresenta forma micelial temperatura de 250C e forma de levedura a 370C (Figura 1). Esse processo de transformao reversvel e dependente da regulao enzimtica da sntese de glucanas que causam modificaes na parede celular do fungo. A ocorrncia da paracoccidioidomicose geograficamente restrita Amrica

Figura 1 - Dimorfismo do Paracoccidioides brasiliensis

Latina. Estima-se que nessa rea endmica exista, aproximadamente, dez milhes de pessoas infectadas e que cerca de 2% dessa populao pode apresentar predisposio para desenvolver a doena. A distribuio da paracoccidioidomicose na Amrica Latina heterognea e os pases que se destacam por apresentar o maior nmero de casos relatados so o Brasil, a Colmbia e a Venezuela (Figura 2). No Brasil, os estados do Sul, Sudeste e da regio CentroOeste apresentam maior incidncia. O habitat natural do P. brasiliensis ainda permanece um enigma; no entanto, acredita-se que esse fungo sobreviva soprofiticamente em solos midos, locais ricos em matria orgnica e com mnimas alteraes de temperatura, onde o fungo poderia crescer sob forma micelial produzindo condios. Essa hiptese tem sido baseada em alguns relatos sobre o isolamento desse fungo em solos. As evidncias indicam que a infeco adquirida predominantemente por meio da inalao de condios, que atingem o pulmo e se transformam em leveduras, que a forma patognica do fungo. As leveduras induzem uma reao inflamatria inicial, que, dependendo do estado de imunocompetncia do hospedeiro, poder progredir, levando manifestao dos sinais clnicos da paracoccidioidomicose, ou regredir com a destruio dos fungos. Essa doena mais freqente em indivduos do sexo masculino e a maioria dos pacientes exercem atividades agrcolas. Os baixos ndices dessa doena na populao feminina so atribudos ao efeito inibitrio do hormnio 17--estradiol na transformao miclio-levedura, que um fator chave no processo de invaso do hospedeiro. As manifestaes clnicas da paracoccidioidomicose so classificadas em duas formas polares principais (Figura 3). A forma polar positiva caracterizada pela presena de leses generalizadas, pelo elevado ttulo de anticorpos especficos aos antgenos de P. brasiliensis, imunidade celular enfraquecida e presena de reao inflamatria granulomatosa no organizada, contendo muitos fungos viveis. Na forma polar negativa, as leses so locali-

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Forma Polar Positiva Progresso lenta Imunidade humoral +/ Imunidade celular ++ Granulomas compactos Baixo nmero de fungos
lomatosas so compactas e com baixo nmero de fungos. No intuito de estudar os mecanismos que desencadeiam os desequilbrios imunolgicos na paracocidioidomicose, introduzimos, pela primeira vez para o estudo dessa doena, uma metodologia para investigar a expresso de citocinas, que so mediadores biolgicos responsveis pela intercomunio e regulao das clulas do sistema imune, atravs da expresso de RNAm. O RNA total de amostras teciduais de bao, fgado, linfonodos inguinais e pulmo de camundongos BALB/c infectados com P. brasiliensis foi purificado em diferentes perodos de infeco, transferido

Forma Polar Negativa Progresso rpida Imunidade humoral ++++ Imunidade celular - - - Granulomas no organizados Elevado nmero de fungos
para membrana de nilon e, posteriormente, hibridizado com sonda gentica de cDNA de interleucina-2 (IL-2), como est demonstrado na figura 4 (A e B). A quantificao da expresso do RNAm para IL-2 foi realizada por meio de densitometria. (Figura 4 C). Assim, foi constatado um aumento na expresso de RNAm para IL-2 nos rgos estudados de camundongos infectados com P. brasiliensis, na primeira semana de infeco, em relao aos camundongos controles (no infectados). Em contrapartida, na dcima semana de infeco,os camundongos infectados apresentaram uma reduo acentuada nos nveis de RNAm para IL-2 em comparao com os camundongos controles. Possivelmente a reduo de RNAm para IL-2 observada na dcima semana de infeco pode estar associada aos mecanismos que contribuem para o enfraquecimento da imunidade celular na paracoccidioidomicose, uma vez que a IL-2 constitui o principal fator de crescimento de linfcitos T, alm de exercer funes que amplificam as atividades imune efetoras dos linfcitos B, moncitos, macrfagos e clulas NK (natural killer). O interessante que na primeira semana de infeco, no foi observada a presena de fungos viveis nos linfonodos inguinais e no pulmo. Poucas leveduras foram encontradas no bao e no fgado. Contudo, na dcima semana de infeco, observou-se um aumento no nmero de leveduras viveis em todos os rgos estudados, o que refora a hiptese de que a diminuio de RNAm para IL-2 na dcima semana de infeco poderia estar envolvida nos mecanismos que promovem a deficincia na imunidade celular e permite, assim, a multiplicao e a disseminao do fungo. A aplicao dessa metodologia na investigao da expresso de citocinas contribuir para o avano nos estudos imunoregulatrios na paracoccidioidomicose. REFERNCAS: SAN-BLAS,G. - Paracoccidioidomycosis and its etiologic agent Paracoccidioides brasiliensis. J. Med. Vet. Mycol., 31: 99-113, 1993. FRANCO, M.; LACAZ, C.L.S.; RESTREPO A. M. and DEL NEGRO, G. - In Paracoccidioidomycosis (Eds). Boca Raton, CRC Press, 1994.

Figura 3 -Formas polares da paracoccidioidomicose

Figura 2 - Distribuio geogrfica da paracoccidioidomicose

zadas, o ttulo de anticorpos especficos ao P. brasiliensis baixo ou ausente, a imunidade celular preservada e as leses granu-

Figura 4 A) Metodologia para anlise da expresso de RNAm para IL-2 B) Expresso de RNAm para IL-2 C) Quantificao da expresso de RNAm para IL-2

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SADE

AIDS
o incio da dcada de 80, diversos casos de Sarcoma de Kaposi e pneumonia foram diagnosticados em homossexuais e/ou usurios de drogas injetveis, nos Estados Unidos e na Europa, sem que um agente etiolgico definido fosse identificado. Todos os pacientes apresentavam um quadro de imunodeficincia celular severa, com uma resposta de linfcitos T reduzida. O termo SIDA, ou do ingls AIDS, (Sndrome da Imunodeficincia Adquirida) comeou ento a ser empregado para definir clinicamente as vrias manifestaes dessa doena. A dcada de 80 foi ento intitulada a dcada da AIDS, causando preocupao e temor doena. No entanto, dentro do seu quadro assustador, existia uma ponta de otimismo, de que, com o fim da dcada, terminaria tambm a AIDS. No final de 1982, os casos de AIDS nos Estados Unidos no estavam mais restritos aos homossexuais e usurios de drogas injetveis, mas atingiam tambm hemoflicos, pessoas que haviam realizado transfuses de sangue, crianas nascidas de mes contaminadas, prostitutas e parceiros de membros de grupo de risco. At ento, o causador da doena no havia sido identificado, mas demostrava ser um agente etiolgico transmissvel atravs do sangue e secrees genitais. Somente em 1983, Barr-Sinousi e colaboradores detectaram atividade da enzima transcriptase reversa no linfonodo de uma paciente que apresentava sndrome de linfoadenopatia persistente. Isso sugeriu que a AIDS pudesse ser causada por um retrovrus, o qual foi denominado inicialmente como Lymphoadenopathia Associated Virus. Durante

Universidade Federal do Rio de Janeiro Departamento de Gentica Laboratrio de Virologia Molecular

Elena Caride & Amilcar Tanuri

USO DA BIOTECNOLOGIA PARA O DESENVOLVIMENTO DE UMA VACINA VIVA ATENUADA MAIS SEGURA

todo o ano de 1983, e em parte de 1984, diversos pesquisadores estudaram esse novo vrus e novas classificaes lhe foram atribudas, como, por exemplo, HTLV-III. Mas, esse vrus possua caractersticas bem peculiares e bem diferentes daquelas observadas em retrovrus como o HTLV. Embora infectassem o mesmo tipo celular, linfcitos T CD4+, esse novo vrus mostrava altos nveis de partculas virais no sobrenadante das clulas infectadas e lise destas clulas. Finalmente, em 1986, o nome Vrus da Imunodeficincia Humana (HIV) foi unificado para definir o vrus causador da AIDS. Mas somente em 1987 esse vrus foi classificado como membro de um subgrupo distinto no grupo dos retrovrus, o subgrupo dos lentivrus, os quais esto associados a infeces com longos perodos de latncia clnica. Assim, a dcada de 80 chegava ao fim e com ela a esperana de uma cura iminente. Onze anos mais tarde, a epidemia de AIDS continua a se expandir por todas as regies do mundo e em 1997 os casos notificados atingiam 30.000.000 de pessoas. Apesar dos esforos da comunidade cientfica e dos avanos j obtidos, a AIDS continua representando um grave problema de sade pblica, principalmente para os pases em desenvolvimento como no caso do Brasil, onde, em 1997, foram notificados 110.845 casos (UNIAIDS 1997). Em meados de 1998, j foram notificados 138.000 casos de AIDS e se estima que existam 550.000 pessoas infectadas com HIV no pas. Essa marcha aterradora do HIV demanda que todos os esforos sejam concentrados na pesquisa de uma vacina eficaz para o combate ao vrus. Essa

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seria uma importante arma para deter o avano da epidemia nos pases pobres. Diversas caractersticas do HIV devem ser levadas em considerao quando desenhamos uma estratgia para o desenvolvimento de uma vacina. Primeiro, sua variabilidade: como outros vrus de RNA, ele muta rapidamente, produzindo viroses antigenicamente heterogneas, mesmo dentro de um nico indivduo. Atualmente, existem identificados cinco subgrupos de vrus distintos e todos podem ser encontrados na frica. Segundo, seu modo de transmisso: o HIV transmitido atravs da mucosa pelo contato sexual, atravs do sangue contaminado e da me para o feto neonato. Embora a transmisso dos vrus na sua forma livre j tenha sido documentada, a forma de contgio mais comum deve ser pelo vrus associado clula do hospedeiro. Anticorpos neutralizantes devem ser suficientes para prevenir contra a infeco pelo HIV livre, mas no ao associado a uma clula, que no deve entrar em contato direto com o soro. Ou seja, o desenvolvimento racional de uma vacina deve ser baseado tanto em uma resposta imune humoral, como na resposta celular. Finalmente, sua clula alvo: infeces de linfcitos T e macrfagos, os alvos primrios do HIV, dependem da ligao das suas protenas do envelope, com as molculas de CD4 expressas nas superfcie dessas clulas. Outro aspecto importante quando se fala em vacinas para o HIV a avaliao de sua eficcia. A fim de se validar a eficcia de uma vacina antiHIV, necessrio que ela seja testada in vivo. Sendo assim, diversos modelos animais vm sendo testados, j que o modelo ideal seria um animal de manuteno barata e que desenvolva uma doena do tipo AIDS, induzida pelo HIV. No entanto, as nicas espcies que podem ser infectadas com o HIV so os grandes macacos, como o chimpanz e o gibo, mas estes no desenvolvem AIDS, alm de terem um custo elevado de manuteno. Nessa busca por um modelo animal, foi isolado e identificado um novo lentivrus que infecta primatas no humanos, o vrus da imunodeficincia simiana (SIV). Este possui uma alta homologia na sua seqncia de DNA com o do HIV, principalmente com o de tipo 2, indicando uma relao evolutiva bem prxima desses dois subgrupos. Esse vrus um agente infeccioso natural de diversos

Figura 1- Manipulao gentica do HIV. O material gentico do HIV constitudo por duas fitas de RNA polaridade positiva que esto associadas na sua extremidade 5 a uma molcula de tRNAlys. Ambas as fitas de RNA possuem 5CAP e poliadenilao. Ao longo do RNA, se encontram associados monmeros das protenas p7/9, que, por sua vez, interagem com as enzimas virais transcriptase reversa, integrase e protease p11. Esse complexo ribonucleoproteico circundado pela protena p24, formadora do capsdeo viral. No espao entre o capsdeo e o envelope, encontra-se a protena p17; esta miristilada no seu N terminal, o que promove sua interao com a protena do envelope gp41. O envelope constitudo por uma bicamada fosfolipdica de origem celular, onde esto inseridas as duas glicoprotenas de origem viral gp120 e gp41. Essas esto associadas no covalentemente, organizando-se em heterotrmeros ou tetrmeros na superfcie do vrion e so as responsveis pela interao com o antgeno de superfcie celular CD4. O genoma do HIV codifica para 3 genes estruturais principais: o gene gag, que codifica uma protena precursora de 55kDa, que, aps a clivagem, vai originar as protenas p17, p24 e p7/9, formadoras da matriz viral, do capsdeo e do nucleocapsdeo; o gene pol, que transcrito e traduzido juntamente com o gene gag em uma protena precursora de 160kDa, aps a clivagem, origina, alm das protena p17, p24 e p7/9, as enzimas virais transcriptase reversa, protease e integrase; o gene env codifica para uma protena precursora de 160kDa que, depois de clivada, origina as protenas gp120 e gp 41, que so as glicoprotenas formadoras do envelope viral. Alm desses genes, o genoma do HIV codifica para alguns genes acessrios e outros regulatrios, responsveis por uma srie de eventos como: transporte do mRNA viral para o citoplasma (REV), transduo de sinais na clula hospedeira (VPR), formao de canais inicos na membrana celular (VPU), ativao da transcrio dos genes estruturais(TAT), destruio dos receptores CD4 das clulas linfocitrias (NEF), etc. Em nossa estratgia de manipulao gentica, metade do gene nef foi substitudo pelo gene gpt da E. coli, que foi amplificado por uma reao de PCR e utilizado para substituir o gene viral deletado. O clone infectivo foi, ento, injetado dentro de clulas humanas e o novo vrus foi montado e exportado para fora da clula. Esse novo vrus foi nomeado de HIV-gpt.

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primatas no humanos africanos, mas, normalmente, ele no patognico nos seus hospedeiros. No entanto, alguns, quando isolados, induzem uma doena do tipo AIDS em certos macacos asiticos, caracterizada por uma depleo de linfcitos CD4, imunodeficincia, infeces com agentes oportunistas e tumores. Sendo assim, o SIV um modelo animal prtico para a pesquisa de uma vacina contra o HIV e algum progresso j tem sido alcanado com diferentes prottipos vacinais. Macacos imunizados com vrus completos inativos ou com vacinas que continham subunidades do vrus resistiram infeco com SIV patognicos. No entanto, em muitas tentativas de vacinas feitas nos ltimos anos, no foi possvel induzir uma imunidade duradoura e nenhuma proteo foi conseguida contra isolados de vrus heterlogos, infeces com altas cargas virais ou ainda vrus que no tivessem sido propagados em linhagens celulares humanas. A fim de superar esses problemas, ultimamente vm sendo conduzidos diversos estudos de vacina utilizando vrus vivos atenuados. Vrus atenuados tem sua patogenia reduzida causada primariamente pela sua baixa capacidade replicativa no seu hospedeiro natural. Idealmente, eles no causam a doena, mas induzem a uma resposta imune potente, protegendo o hospedeiro contra uma infeco subseqente com o vrus selvagem. Foi demonstrado que a deleo do gene nef no SIV reduz sua patogenia. Macacos Rhesus infectados com SIV atenuados por meio de mutaes no gene nef ficaram protegidos contra uma nova infeco utilizando altas doses de SIV selvagem. A protena Nef uma protena miristilada, encontrada somente em lentivrus de primatas. O seu mecanismo de ao ainda
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no bem compreendido, mas diversas evidncias apontam para um papel na modulao da transduo de sinais celulares, via interaes fsicas com protenas quinase da clula hospedeira. Apesar de esse tipo de estratgia de utilizar vrus vivos atenuados haver demonstrado resultados mais expressivos na tentativa de uma vacina contra AIDS, esse modelo ainda muito criticado, j que esses vrus tm uma taxa de mutao, e de recombinao com outros vrus muito alta, podendo levar a alteraes genticas que faam com que um vrus no patognico torne-se patognico. Recentemente foi descoberto na Austrlia um caso de transmisso sangnea de HIV muito interessante: um doador estava infectado com um vrus que continha uma deleo no gene nef e por doao de plasma infectou vrios receptores. Tanto o doador como os receptores no desenvolveram a doena. Esse fato inusitado foi mais uma forte evidncia de que o gene nef tambm est implicado com a patognese no HIV e isso deu um grande nimo aos preconizadores desse tipo de vacina anti-HIV. Nosso grupo vem-se dedicando ao desenvolvimento de uma cepa de HIV atenuada para uma possvel vacina. Alm da atenuao pela retirada do gene nef do genoma do HIV, preocupamo-nos em inserir um gene suicida no genoma viral. A razo de se colocar um gene suicida na amostra vacinal seria para abolir a infeco da amostra vacinal em caso de reverso virulenta. O gene suicida escolhido foi o gpt (guanina fosfo-ribosil transferase) e foi doado do cromossoma da bactria intestinal E.coli. O gene gpt codifica uma enzima que capaz de metabolizar uma droga txica para as clulas humanas. Nesse caso especfico, a 6-

Figura 2- Aborto da infeco de linfcitos humanos pelo HIV-gpt. O vrus HIV-gpt foi utilizado para iniciar uma infeco em uma cultura de linfcitos humanos, na presena e na ausncia de 6-tioxantina. Quando a droga era adicionada cultura, a enzima gpt, expressa nos linfcitos, era metabolizada e as clulas infectadas destrudas e, assim, a infeco abortada.

tioxantina que, normalmente, a clula humana no consegue metabolizar, mas, quando infectada com o novo HIV recombinante, incorpora esse produto txico no cromossoma e inviabiliza a clula infectada. Assim, utilizando-se uma cpia de cDNA do genoma do HIV clonado em um plasmdeo (clone infectivo) foi feita uma manipulao onde se retirou o gene nef e se colocou no lugar o gene gpt da E.coli (vide Fig. 1). Esse novo vrus agora conseguia replicar em linfcitos humanos, mas, na presena de 6-tioxantina, era totalmente eliminado (vide Fig 2). Dessa forma, achamos que esses resultados demonstram a utilidade desses novos vrus para uma vacina anti-HIV mais segura e eficiente, alm de abrir portas para um ensaio em macacos. O mesmo gene suicida est sendo inserido no genoma de SIV para tentarmos essa mesma experincia in vivo.

BAYER

MEIO-AMBIENTE

ALGAS
19th Session of the Intergovernmental Oceanographic Commission Assembly (IOC/UNESCO) ocorrida na Espanha em 1997, estabeleceu que o ano de 1998 seria o ano internacional dos oceanos. No Brasil, poucos foram os fruns de debate sobre o aproveitamento dos recursos dos oceanos como alternativa para o desenvolvimento social, econmico e, principalmente, cientfico em nosso pas. Em vista disso, estamos apresentando nesta edio nossa contribuio cientfica sobre a problemtica das EFLORESCNCIAS DE ALGAS MARINHAS NOCIVAS e sua relao com a mitilicultura. A importncia que a aquicultura tem para o homem moderno baseia-se no fato desta servir como promissora alternativa da pesca extrativa, a qual, segundo diversas previses, estar chegando ao seu limite mximo sustentvel na primeira dcada do sculo XXI. Uma das provveis causas que contribuiram para se chegar ao limite mximo sustentvel sem dvida apia-se no mecanismo de desenvolvimento, porque, nas regies altamente urbanizadas e industrializadas, no decorrer dos ltimos anos, ocorreu um aumento significativo de produo, com acumulao e complexidade de elementos txicos (meio aqutico, terrestre e areo), que tm gerado problemas sociais, econmicos e ambientais de grande escala. O avano tecnolgico, o crescimento demogrfico, a industrializao e o uso de novos elementos, principalmente na agricultura, tm contribudo para que entrem no ambiente, de maneira contnua, quantidades crescentes de grande nmero de substncias qumicas, sintticas e naturais, cujas interaes e efeitos adversos, tanto sobre o ambiente como sobre os seres vivos, em geral no so conhecidos ou deles se conhece muito pouco. A poluio dos recursos hdricos, alm de ser um fator limitante para a pesca, tambm limitante para a mitilicultura. Esse tipo de atividade comercial requer ambiente que contenha guas isentas de organismos patognicos e de elementos qumicos capazes de afetar a sade dos moluscos e de seus consumidores. Os mexilhes apresentam alta taxa de converso do seu alimento, transformando fitoplncton em carne utilizvel na alimentao humana. So de fcil digesto e absoro pelo organismo humano e de grande valor nutritivo, superior, inclusive, ao de outros moluscos, como as lulas e os polvos e ao de crustceos, como as lagostas. Devido sua ampla distribuio geogrfica, facilidade na sua obteno e coleta, seu elevado ndice de reteno de nitrognio e ao seu alto teor de protenas, esse molusco considerado uma importante fonte potencial de protenas e vitaminas para muitas populaes, possibilitando, ainda, o incremento da economia interna e externa, por meio da sua exportao por vrios pases. Ligado ao desenvolvimento da mitilicultura esto as eflorescncias de algas txicas. As eflorescncias marinhas (marine algal blooms) tm sido estudadas nos ltimos 200 anos. um fenmeno ligado a microalgas produtoras de toxinas e tornou-se um grande problema ambiental, econmico e de sade pblica em diversas regies do globo, por exemplo, na Europa. Atividades humanas induzem stress em sistemas ecolgicos por meio de importantes poluentes que modificam os habitat, introduzindo espcies exticas e removendo as espcies nativas. Isso sugere uma forte relao entre as atividades humanas e a crescente freqncia das eflorescncias de algas marinhas em todo o mundo. Esse fenmeno caracterizado por uma intensa proliferao ou eflorescncias peridicas e inexplicveis de algas produtoras de toxinas. De fato, certas microalgas produzem toxinas que provo-

A problemtica das eflorescncias de algas marinhas nocivas

Engenheiro sanitarista e ambientalista, doutor em Toxicologia Ambiental (Universit de Bordeaux 2 Frana). Professor do Departamento de Engenharia Sanitria e Ambiental UFSC e responsvel pelo Laboratrio de Toxicologia Ambiental UFSC. Foto cedida pelo autor

William Gerson Matias

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Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

cam leses cutneas aps o contato com a pele de banhistas e principalmente perturbaes digestivas ou nervosas mais ou menos graves devido ao consumo de frutos do mar contaminados. Essas proliferaes causam contaminaes de peixes, mexilhes e ostras. Elas constituem um problema de sade pblica, que tem importantes repercusses econmicas ligadas interdio da venda de produtos contaminados em alguns pases. Em certas condies climticas e ambientais, essas algas podem produzir toxinas que sero concentradas por peixes e mariscos que se alimentam do fitoplncton. O consumo desses frutos do mar pode acarretar muitos tipos de patologias: a sndrome da paralisia ou PSP (Paralytic Shellfish Poisoning), a sndrome neurotxica ou NSP (Neurotoxic Shellfish Poisoning), a sndrome ciguatrico, a sndrome da amnsia ou ASP (Aminesic Shellfish Poisoning) e a sndrome da diarria ou DSP (Diarrheic Shellfish Poisoning). Muitos especialistas pensam que esses blooms ou eflorescncias se tornam cada vez mais graves e freqentes: o nmero de casos devidos a espcies nocivas, os danos e os acidentes causados, os tipos de toxinas e de espcies txicas e o nmero de produtos contaminados aparentemente aumentaram. Em um primeiro momento, uma proliferao de algas txicas pode causar uma modificao de cor das guas, o que chamamos de guas coloridas ou mar vermelha. O termo guas coloridas aplica-se exclusivamente a proliferaes, em zona costeira, de organismos fitoplanctnicos que pertencem, em geral, classe dos dinoflagelados, mas tambm a outros grupos de algas unicelulares. Recentemente, na Baia de Sepetiba, litoral sul do Rio de Janeiro (31/ 01/98), houve uma grande eflorescncia de algas txicas, aproximadamente 10 km de extenso, que causou o aparecimento de queimaduras em banhistas e tambm a mortalidade de peixes e siris. Os moluscos, os mexilhes em particular, possuem mecanismos de bombeamento e filtrao capazes de concentrar os diferentes compostos e tambm os xenobiticos contidos na gua. Esses moluscos bivalves fixam em seus hepatopncreas os organismos planctnicos e suas toxinas, que o consumidor ingere ao se alimentar. Seis grandes manifestaes clnicas foram descritas. A sndrome da diarria provocada por toxinas ditas DSP (Diarrhetic Shellfish Poisoning) apareceu, pela primeira vez, na Frana, na costa da Normandia, em 1983, onde ocorreram 3.300 intoxicaes. Em 1985, 400 casos de DSP foram registrados na costa francesa mediterrnea. Essas toxinas modificam a permeabilidade

Aspectos de uma eflorescncia de algas - Litoral catarinense

nov/98

dos vasos do tubo digestivo, provocando diarrias, vmitos e dores de cabea. Uma dezena de espcies do tipo DSP, que pertencem ao gnero Dinophysis, atingem atualmente a Frana, Espanha, Itlia, Portugal, Alemanha, Holanda, a Escandinvia, Japo, Nova Zelndia, Estados Unidos, Canad, Venezuela, Argentina e Chile. A identificao, a quantificao e a deteco dessas toxinas no fitoplncton marinho e nos moluscos bivalves foram estudadas por vrios pesquisadores em diferentes pases. Um exemplo dessas toxinas marinhas o cido ocadico (AO), que vem sendo estudado de maneira acirrada por diversos pesquisadores, em todo mundo. AO foi primeiramente isolado de esponjas negras Holichondria okadaii (Tachibana e col., 1981) e Prorocentrum lima (Murakami e col.,1982). Posteriormente, foi mostrado ser um polister de cidos graxos produzido por microalgas que se acumulam em esponjas negras e em mariscos, Mytilus galloprovincialis (Tubaro e col., 1992). AO a principal toxina produzida por dinoflagelados, que acumulada nos hepatopncreas de mariscos e ostras e causa a sndrome da diarria diarrhetic shellfish poisoning em consumidores. Ele um potente promotor de tumor (Fujiki e col., 1987) e um especfico inibidor da atividade das protenas fosfatasse 1 e 2A (Bialojan e Takai, 1988). At o momento, as propriedades txicas do AO foram atribudas sua capacidade de inibir a atividade dessas enzimas, que causam efeitos em processos intracelulares e em diversos metabolismos contrcteis, genes de transcrio, estrutura de manuteno do citoesqueleto, receptor intermedirio de traduo do sinal e diviso celular. AO uma substncia neurotxica (Candeo e col., 1992), recentemente foi mostrado que ele

um inibidor da snteses de protenas em um sistema acelular (cell-free system) com uma CI50 de 6.3x1012 M-1 (Matias e col., 1996). Essa toxina marinha passa pela barreira transplacentria (Matias e Creppy, 1996a) e entra no ciclo enteroheptico em camundongos (Matias e Creppy, 1996b). Matias e Creppy (1998) mostraram que o AO altera a metilao biolgica do DNA, induzindo uma hipermetilao da m5dC, elucidando um dos mecanismos de ao dessa toxina marinha promotora de tumores. Tambm foi mostrado que o AO induz a lipoperoxidao (Matias e Creppy, 1998), conhecida como uma manifestao de danos oxidativos e causadora de efeitos de toxicidade e carcinognese. A UFSC, atravs do seu Laboratrio de Mexilhes, desenvolve desde 1985, pesquisas e formao de recursos humanos com o objetivo de incentivar o cultivo de mexilhes. Os resultados dessas pesquisas so aplicados pelos produtores por intermdio do servio de extenso da EPAGRI. Apesar de louvvel a iniciativa do Laboratrio de Mexilhes da UFSC, principalmente no aspecto econmico-social, o controle da qualidade ambiental onde esto sendo implantadas as culturas so insuficientes para garantir um produto de boa qualidade para ser consumido pela populao humana. Nesse contexto, considerando os aspectos negativos que as eflorescncias de algas txicas causam sade pblica, ao meio ambiente, economia e a grande dificuldade de reduo da poluio dos ambientes costeiros (inexistncia de sistemas de coleta e tratamento de esgoto na maioria das cidades brasileiras), entendemos que um Programa Nacional de Controle da Eflorescncias de Algas Txicas tem de ser estabelecido e implantado o mais breve possvel.
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NOVAS TECNOLOGIAS

OSCILAES FORADAS
Auxlio ao diagnstico de doenas respiratrias

Pesquisador do COPPE/UFRJ, Doutor em Engenharia Biomdica pedro@metalmat.ufrj.br Professor Adjunto do Programa de Engenharia Biomdica/COPPE/UFRJ Professor Titular do Programa de Engenharia Biomdica/COPPE/UFRJ
Foto cedida pelos autores

Pedro Lopes de Melo

Marcelo Martins Werneck

Antonio Giannella-Neto

interesse por tcnicas sensveis para a caracterizao da funo pulmonar tem aumentado com o crescimento da incidncia de doenas respiratrias. A doena pulmonar obstrutiva crnica (DPOC), por exemplo, que inclui a bronquite crnica, o enfisema e outras formas de obstruo crnica das vias areas, excluindo a asma, atualmente ocupa a sexta posio entre as principais causas de mortalidade no mundo. Estimase que em 2020 essa doena esteja entre as trs primeiras (Murray e Lopez, 1997). Pesquisas efetuadas nos EUA demonstram que, de 1979 a 1989, essas doenas e suas condies associadas apresentaram um crescimento de 69%. Estima-se que, em 1988, os custos diretos com DPOC e asma nos Estados Unidos tenham sido de 10,4 bilhes de dlares. O aumento da populao e da expectativa de vida so parcialmente responsveis por esses ndices, que projetam um nmero crescente de pacientes necessitados de assistncia respiratria. Esses fatos ressaltam a importncia do desenvolvimento de procedimentos e tcnicas visando otimizar a assistncia respiratria. Nesse contexto, a precisa determinao das propriedades mecnicas do sistema respiratrio consiste em significativa contribuio. Essas propriedades so geralmente representadas por modelos simples, limitados a fornecer apenas uma representao inicial do complexo comportamento do sistema respiratrio. Quando variaes de presso de pequena amplitude e freqncias mais elevadas que aquelas produzidas no processo de respirao espontnea so impostas ao sistema respiratrio,modelos mais completos podem ser identificados e, consequentemente, uma descrio mais detalhada do sistema respiratrio pode ser obtida. Estas consideraes fornecem a base para um procedimento de elevado potencial clnico, visto que, alm da identificao de modelos mais realsticos, re18 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

Figura 1 - Diagrama em blocos simplificado da instrumentao empregada em Oscilaes Foradas

quer uma cooperao mnima por parte do paciente, uma vez que o sinal analisado produzido por um dispositivo externo. neceu a base necessria para seu desenvolvimento (Peslin e Fredberg, 1986). Uma viso esquemtica simplificada da instrumentao empregada nesses estudos dada na figura 1. Um sinal eltrico de excitao sintetizado por um software dedicado e posteriormente processado em uma unidade eletrnica. Por sua vez, esse sinal aplicado a um alto-falante, que produzir em sua sada um sinal correspondente de presso. As pequenas oscilaes de presso so conduzidas por meio de um tubo e aplicadas ao sistema respiratrio de um indivduo respirando espontaneamente. A amplitude dessas oscilaes controlada de modo que no cause desconforto ao paciente e mantenha o sistema respiratrio em condies lineares. Uma pequena bomba produz um fluxo de ar constante (bias flow na figura 1), renovando o ar inspirado pelo indivduo. A presso aplicada e o fluxo resultante so medidos prximo boca pelos transdutores TP e TF, respectivamente. Aps o processamento desses sinais, a estimativa da impedncia respiratria efetuada via software pela razo entre a presso e o fluxo. A impedncia estimada por esse mtodo denominada impedncia de entrada do sistema respiratrio. Alm de permitir a obteno de parmetros de grande importncia para a prtica

Figura 2 - O sistema e sua aplicao

O objetivo deste trabalho descrever a tcnica baseada nesses princpios, discutir suas vantagens e desvantagens e apresentar algumas das principais reas de aplicao atualmente sob estudo. A Tcnica de Oscilaes Foradas (FOT) A tcnica de Oscilaes Foradas podia ser considerada frente de seu tempo. na poca de sua proposio original, na dcada de 50. Nos anos 70, o aprimoramento da tecnologia associada aos computadores e processamento de sinais for-

clnica, incluindo a resistncia e a complaimpedncia respiratria de entrada em cos e aleatrios na estimativa da impedncncia pulmonares, parmetros teoricaindivduos normais e em pacientes. De cia. mente sensveis a obstrues nas vias uma maneira geral, o indivduo normal Outra limitao est associada impeareas tambm so obtidos. A Figura 2 apresenta uma curva relacionada com o dncia das paredes das vias areas superiilustra a realizao desses estudos. Durancomportamento resistivo de valor constanores, incluindo as bochechas, que se ente os ensaios, os indivduos permanecem te. A reatncia em baixas freqncias aprecontram mecanicamente paralelas ao sissentados; com a cabea na posio neutra, senta-se negativa, devido complacncia tema respiratrio. Essa impedncia introso requisitados a usar um clip nasal, do sistema, exibindo um valor crescente duz uma fonte de erro que pode ser suportar suas bochechas firmemente com at um valor nulo, em torno de 6 Hz significativa na presena de elevadas imas mos e respirar calmamente atravs de (freqncia de ressonncia). A partir desse pedncias do sistema respiratrio, condium bocal. O ensaio tem incio aps um ponto, a reatncia torna-se positiva, domio usualmente encontrada em crianas e perodo de, aproximadamente, um minuto nada pelas propriedades inerciais do sisteem diversos estados patolgicos. de adaptao ao aparato, sendo composto ma. Pacientes, em geral, exibem valores A falta de especificidade no diagnstipor algumas sees de 16 segundos e mais elevados de resistncia, decrescendo co representa uma outra limitao inerente completado em aproximadamente 10 micom o aumento da freqncia. O mdulo FOT. Um mesmo padro de alterao nas nutos. da reatncia em baixas freqncias maior curvas de resistncia e reatncia foi deEm funo das complexas estruturas em funo de menores complacncias e a monstrado em pacientes com obstruo presentes no sistema respiratrio, nas vias areas superiores, nas consistindo de elementos apreseninferiores, decorrente de doena tando propriedades elsticas, repulmonar intersticial ou associasistivas e inerciais, as componenda parede torcica. Essas alterates dos sinais de presso e fluxo es provavelmente espelharam estaro normalmente fora de fase, o aumento da influncia da impeexceto para uma dada componendncia relativa s vias areas sute conhecida como freqncia de periores como conseqncia do ressonncia. A maneira mais usual aumento da impedncia do sistede descrever este deslocamento ma respiratrio. Em decorrncia no tempo dividir a impedncia da importncia social de novas em uma componente real, ou retcnicas para anlise do sistema sistncia (Rrs), e uma parte imagirespiratrio, um grande esforo Figura 3A - Ilustrao do comportamento da resisnria, ou reatncia (Xrs). A identifide pesquisa vem sendo desentncia apresentadas por indivduos normais e pacicao das propriedades mecnicas volvido nessa rea. Assim, acreentes do sistema respiratrio feita por ditamos que, semelhana das meio da estimativa dessas grandelimitaes tcnicas iniciais, esses zas em vrias freqncias, sendo a mais freqncia de ressonncia geralmente inconvenientes tambm sero minimizacomum a situada entre 2 e 32 Hz. A maior. O perfil da curva de reatncia mais dos. Algumas aplicaes importantes, do utilizao dessa faixa de freqncia aprelinear que em indivduos normais. A Figura ponto de vista clnico, so descritas a senta a vantagem de minimizar o efeito do 3 procura ilustrar o comportamento citado. seguir. sinal respiratrio, cuja freqncia fundaDiversos trabalhos sugerem que a depenmental encontra-se em torno de 0,25 Hz. dncia em freqncia da componente real Principais aplicaes atualmente Nessa faixa, os resultados refletem, princida impedncia est fortemente relacionasob investigao palmente, os efeitos das vias areas cenda com a obstruo brnquica, representrais. Freqncias abaixo de 2 Hz apresentando um parmetro muito sensvel na Deteco de problemas respiratrios tam resultados dominados pelas propriedeteco de obstruo das vias areas. dades dos tecidos. Existe uma forte evidncia na literatura A confiabilidade dos resultados obtiAtuais limitaes da tcnica de que FOT pode fornecer sensveis indidos no exame, comprometida por interfecadores de obstruo das vias areas em rncias devido aos rudos associados De maneira similar s outras tcnicas estado inicial. Essa hiptese suportada instrumentao e de natureza fisiolgica, de avaliao pulmonar, as principais limipor estudos em fumantes, onde a resistnligada ao processo de respirao esponttaes da FOT precisam ser reconhecidas. cia tende a ser mais elevada e mais depennea do paciente, pode ser avaliada por um A primeira refere-se correlao fisiolgidente da freqncia que em indivduos ndice conhecido como funo de coernca para as variaes nos diferentes ndices, no-fumantes. Resultados similares foram cia. Desta maneira, em um tempo de que permanece hipottica. Uma significaobtidos em estudos envolvendo indivduensaio relativamente curto, usualmente tiva parcela da pesquisa conduzida atualos com DPOC e asmticos. Nesses, a alguns minutos, e requerendo cooperao mente direcionada no sentido de identidependncia da componente real com a mnima do paciente, esta tcnica capaz ficar os ndices derivados da FOT mais freqncia parece mais pronunciada em de estimar o valor de resistncia respiratadequados s aplicaes clnicas visadas. pacientes com obstrues mais severas. ria (Rrs) e reatncia (Xrs) mdias em vrias Parmetros como a freqncia de ressoEssa dependncia pode refletir o efeito freqncias, juntamente com um ndice da nncia, resistncia, inertncia e complaconjunto de dois fenmenos: no-homoconfiabilidade desses resultados. Essas cncia so os mais comuns em estudos geneidade em diferentes regies do pulcaractersticas conferem tcnica um granconduzidos nos centros de pesquisa mais mo e/ou o efeito da impedncia das vias de potencial de aplicao em estudos que tradicionais. areas superiores. Outro fenmeno coenvolvam condies em que a respirao Quando o indivduo respira atravs do mum em pacientes obstrutivos um auespontnea preferida em relao s maequipamento, os resultados so contamimento da freqncia de ressonncia, usunobras respiratrias. Existe um consenso nados pelo rudo associado respirao almente atribudo s no-homogeneidana literatura sobre o comportamento da espontnea, que introduz erros sistemtides pulmonares.

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Avaliao da mecnica ventilatria infantil A necessidade de compreenso e cooperao limita a aplicao de avaliaes envolvendo espirometria em crianas de idade menor que seis anos. As crianas asmticas representam cerca de 5% a 10 % da populao peditrica, sendo que os primeiros sinais da doena se manifestam por volta dos 4 anos. Quanto mais cedo for efetuada a identificao da doena, mais efetivo ser o tratamento. Diversos trabalhos indicam que este compe um dos campos de aplicao mais promissores para a FOT, visto que a realizao destes exames mais simples e mais aceita pelas crianas, permitindo, inclusive, avaliar aquelas que ainda no sejam capazes de compreender as manobras respiratrias exigidas pelas tcnicas convencionais. Monitorizao de pacientes sob ventilao mecnica

ram que as alteraes nos ndices estimados por meio dos ensaios de impedncia refletiram as modificaes presentes nos resultados obtidos com tcnicas tradicionais. Informaes complementares aos ensaios de espirometria foram fornecidas por FOT durante a investigao de indivduos expostos a agentes respiratrios irritantes. Conforme observado nos tpicos anteriores, a aplicao clnica da FOT encontrase atualmente sob intensa discusso na literatura. Teoricamente, a quantidade de informao que pode ser extrada dos dados obtidos por meio dessa tcnica funo essencial de dois fatores: o primeiro est ligado s condies experimentais, enquanto o segundo relaciona-se com a faixa de freqncias coberta pelo estudo. O aumento dessa faixa permite a representao do sistema respiratrio por meio de

muco, contrao da musculatura brnquica, edema e infiltrao na mucosa brnquica. Nossos resultados encontram-se em concordncia com esta proposio, fornecendo evidncias adicionais de que a tcnica de FOT pode avaliar obstrues presentes nas vias areas em indivduos asmticos assintomticos. Consideraes gerais Diversos autores sugerem que a escolha da tcnica a ser empregada no exame deve basear-se nas condies do indivduo a ser examinado. Anlises em indivduos adultos, em condies de cooperar com o exame podem ser efetuadas por tcnicas tradicionais como a espirometria. Os novos parmetros derivados da anlise mais detalhada efetuada por FOT poderiam contribuir para um diagnstico mais acurado nesses indivduos fornecendo informaes complementares s obtidas pelas tcnicas clssicas. Indivduos anestesiados, de idade muito baixa ou muito alta, ou, por algum motivo, incapazes de realizar os exames tradicionais, poderiam ser beneficiados pela caracterstica de baixa cooperao exigida pela FOT. Concluses

Essa avaliao tem sido usualmente efetuada pela tcnica de ocluso das vias areas e por meio do ajuste de um modelo s relaes presso-vazo respiratria por regresso linear mltipla. A aplicabilidade desses mtodos geralmente limitada pelo requisito de que o paciente se encontre com os msculos respiraFigura 3B - Ilustrao do comportamento de reatncia trios relaxados. Por outro tadas por indivduos normais e pacientes lado, a FOT aplicvel em qualquer condio em que esteja o pacien- modelos cada vez mais detalhados, capate ao longo de todo o curso do tratamento, zes de prover maior quantidade de infordo perodo agudo, durante o uso de seda- mao. Essas afirmaes ressaltam a importivos, ao final do perodo de separao do tncia de novos estudos para o bom desempaciente do ventilador, quando este se penho e o aprimoramento da tcnica. encontra apto a respirar espontaneamente. Adicionalmente, a FOT se mostra til no Resultados tcnicos e clnicos ajuste dos parmetros do ventilador. A obtidos no COPPE/UFRJ presena do tubo endotraqueal introduz uma resistncia dependente do fluxo em Aprimoramentos tcnicos visando a srie com o sistema respiratrio constituin- minimizao do efeito do sinal respiratrio do uma fonte de erro pois, neste caso, a nos resultados dos exames vem sendo condio de linearidade no satisfeita. investigados apresentando resultados proA necessidade de superpor as oscila- missores (Melo et alii, 1988). Essa pesquisa es s grandes variaes de presso pro- particularmente importante na otimizaduzidas pelo respirador representa um se- o dos exames em crianas, devido gundo problema de ordem tcnica. interferncia provocada pelos harmnicos elevados associados s maiores freqnciMedicina do trabalho as respiratrias. Em termos clnicos, estudos iniciais Em teoria, a sensibilidade na deteco conduzidos em asmticos revelaram comde obstrues nas vias respiratrias em ponentes reais mais elevadas e maiores estado inicial torna a FOT interessante na freqncias de ressonncia que as presenavaliao de indivduos expostos a riscos tes em indivduos normais. A asma caracocupacionais. terizada por uma constrio nas vias areas, Estudos anteriores nessa rea indica- de alcance varivel, relacionada ao do

apresen-

A baixa cooperao e o nvel de detalhe do exame efetuado por FOT so caractersticas complementares s tcnicas tradicionais. Trabalhando em conjunto com essas tcnicas, a FOT, em breve, constituir uma importante alternativa para aplicaes clnicas de rotina, contribuindo para aumentar o acesso da populao aos cuidados com as doenas respiratrias. Referncias

Murray, C.J.L. e Lopez, A.D., (1997). Alternative projections of mortality and disability by cause 1990-2020: global burden of disease study. The Lancet, vol. 349: pp. 1489-1504. Peslin, R. e Fredberg, J. J., (1986b), Oscillation mechanics of the respiratory system in Handbook of physiology, Vol. 3, part I. Am. Physiol. Soc., Bethesda, Maryland, sect. 3. Melo, P. L., Werneck, M.M., GiannellaNeto, A., Linear Servocontroled pressure generator for forced oscillations measurements, Medical and Biological Engineering and Computing, vol. 36, no.1, janeiro de 1998.

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AGREVO

MELIPONNEOS
Warwick Estevam Kerr Arnor Bublitz Filho
Universidade Federal de Uberlandia warwick@umuarama.ufo.br

APICULTURA

Comportamento da Varroa jacobsoni Oudemans em duas espcies de meliponneos

Figura 1. Dois caros de Varroa jacobsoni Oudemans, um em vista dorsal e outro em vista ventral

Figura 2. Melipona scutellaris com um caro na regio entre o trax e o abdomen

ma das pragas mais prejudiciais s abelhas Apis mellifera L. o caro Varroa jacobsoni Oudemans, (Figura 1), que est arrasando a apicultura europia, norte-americana, mexicana e Argentina. No Brasil, os trabalhos de Moretto, De Jong e Gonalves indicam que as africanizadas j se selecionam contra o caro, que no mais prejudica a nossa apicultura. O Brasil tem mais de 300 espcies de meliponneos, cada um com seus caros prprios, que vm sendo estudados pelo Dr. C. Flechtman, na Universidade de So Paulo. Para os apicultores, as perguntas bvias so: sero essas abelhas (meliponneos) afetadas pela Varroa? Podero os meliponneos constituirem-se em reservatrios naturais desse caro? Para responder a essas perguntas realizamos estes experimentos. Nesta nota relatamos, de trs experimentos,

os resultados obtidos em duas espcies. MATERIAL, MTODOS E RESULTADOS 1. Colocamos 3 operrias de Melipona scutellaris Latreille recm emergidas dos alvolos e duas adultas da africanizada Apis mellifera L. junto com 7 caros, em uma placa de petri (10 cm de dimetro). Os caros quase imediatamente subiram nas abelhas mais prximas, demonstrando no terem nenhuma preferncia por uma das duas espcies. As Apis no conseguiram se livrar dos caros em 5 minutos. As jovens Melipona scutellaris Latreille, em menos de 10 segundos, se livraram deles. Em outra placa-de-petri, colocamos duas abelhas adultas de Melipona scutellaris Lat. e 4 caros Varroa jacobsoni. Em poucos minutos, um dos caros agarrou-se a uma das abelhas, a qual se livrou dele em 4 minutos. Dois caros tentaram subir na Melipona scutellaris pela pata da frente e foram mortos imediatamente. No entanto, duas Varroa conse-

2.

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Figura 3. Esta abelha, Melipona quadrisfaciata tem um caro (Varroa jacobsoni) em tal posio que a operria no conseguiu retir-lo em 30 minutos

3.

guiram alojar-se entre o trax e o abdomen de uma das abelhas. Estes permaneceram aderidos abelha durante 3 horas, quando a mesma foi morta e fixada com alfinete entomolgico para ser fotografada na lupa (Figura 2). Colocamos 1 operria de Melipona quadrifasciata Lepeletier adulta em uma placa de petri juntamente com 4 caros Varroa jacobsoni . Depois de 30 minutos, um dos caros alojou-se entre o trax e o abdomem da abelha e, 1h40min. mais tarde, outro caro se fixou no mesmo local. Ambos os caros permaneceram presos abelha at o momento em que esta foi morta, aps ser fixada com alfinete entomolgico para ser fotografada (Figura 3). DISCUSSO

A fmea fecundada de Varroa deixa a abelha adulta (Apis mellifera) e penetra numa clula de cria quando esta contm uma larva de 4o e 5o estgio, prestes a ser operculada. 65 horas depois da operculao ela pe o primeiro ovo (Steiner et al., 1990) e depois mais um a cada 30 horas, de onde nascem as ninfas, que comeam sua vida de parasita, alimentado-se de abelhas adultas (faratos). Antes da abelha romper o

casulo, d-se a fecundao da Varroa; os machos morrem e as fmeas saem e passam a parasitar as abelhas adultas com forte preferncia para parasitar zanges (De Jong et al., 1982). As colnias de meliponneos se distinguem por terem uma alimentao semi-massal. Dizemos semi-massal porque as Apis tm uma alimentao progressiva, fornecida dia a dia s larvas; a Melipona bocandei, assim como os Euglossdeos, tm uma alimentao massal: uma massa homognea de plen, geleia real e secreo glandular so colocadas nos alvolos. Nos demais meliponneos, as operrias matrizes enchem o alvolo com uma mistura lquida, que se separar em 3 camadas distintas (e, por isso, chamamos de alimentao semi-massal): 1o) plen, 2o) plen + plen digerido + alimento glandular + mel, e 3o) alimento glandular + mel. Sobre esse alimento, a rainha pe o seu ovo e, em seguida, a clula operculada. Logo, mesmo que haja possibilidade da Varroa parasitar uma operria, no h possibilidade de penetrar na clula e aguardar 20 ou mais dias para parasitar a larva, ou seja, no h maneira de a larva se tornar hospedeira da Varroa. Esse pequeno experimento elimina, tambm, a possibilidade de os meliponneos se constituirem em hospedeiros para o Tropilaelaps clarea Delfinado e Baker.

SUMMARY Three experiments were carried out with Varroa jacobsoni Oudemans and two species of melpona (Melipona quadrifasciata Lep. and Melipona scutellaris Lat.). Worker of these bees clean themselves of this acari much faster than the africanized worker (Apis mellifera L.). If the acari try to climb up the Melipona bee by the anterior leg it was almost immediately killed. If the Varroa happens to lodge between the thorax and abdomen they stayed there for more than three hours, but can not eat there. Since Melipona queens lay the eggs in a waxy alveolus that is closed right after the oviposition there is no opportunity for the Varroa to reproduce in their colonies. AGRADECIMENTOS Agradecemos o apoio financeiro do CNPq e FAPEMIG. REFERNCIAS Steiner, J.; Dittmann, F.; Rosenkranz, P.; Engels, W. 1990 Oogenesis and Embryogenesis in Varroa jacobsoni. Proc. 11th Inst. Congr. IUSSI pg. De Jong, D; Morse, R.A; Eickwort, G.C. 1982. Mite Pests of Honey Bees. Ann. Ver. Entomol. 27:209-252.
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Acesso e Proteo
LEGISLAO

Assessor Jurdico do Instituto Socioambiental. Alima@socioambiental.org

Andr R. Lima

BIODIVERSIDADE
tradicionais de povos indgenas e comunidades locais como matria-prima para as pesquisas de novos frmacos vem crescendo medida que a desregulamentao prevalece. Trata-se de uma corrida contra o tempo. Outra questo preocupante relaciona-se aos procedimentos necessrios para que se garanta efetivamente o controle por parte do poder pblico das pesquisas que sero feitas a partir do uso do patrimnio gentico nacional. A Constituio Federal prev no artigo 225, 1o, II, a incumbncia ao poder pblico de preservar a diversidade e a integridade do patrimnio gentico do pas e de fiscalizar as entidades dedicadas pesquisa e manipulao de material gentico. Neste sentido, faz-se necessria a adoo de procedimentos rgidos para que o controle no seja apenas formal, contudo tal formalismo no pode se extremar a ponto de inviabilizar o investimento e o desenvolvimento em rtmo real das pesquisas cientficas. Tramitam na Cmara dos Deputados trs projetos de lei sobre o assunto que prometem estimular muita polmica na medida em que o governo federal, laboratrios e os movimentos sociais, representantes indgenas e ongs, divergem diametralmentente sobre alguns pontos centrais. O trmite dos referidos projetos de lei aguarda composio de uma comisso especial a ser integrada por membros das distintas comisses temticas da Cmara. Breve Histrico A partir, fundamentalmente, da Conferncia das Naes Unidas para Meio Ambiente e Desenvolvimento - CNUMAD, ocorrida em junho de 1992 , no Rio de Janeiro, vem consolidando-se o consenso entre os governos de todo o Planeta no que respeita estreita relao entre a conservao da diversidade biolgica e a necessidade dos Estados de implementarem mecanismos para garantir sua soberania sobre os recursos genticos existentes em seus territrios. A justa repartio dos benefcios provenientes do uso sustentvel destes recursos (tanto entre naes como entre usurios), assim como a garantia de existncia e manuteno dos direitos coletivos dos povos indgenas e tradicionais habitantes das reas mais ricas em biodiversidade tambm passaram a ser assuntos correntes quando a questo da conservao e uso da biodiversidade abordada. Vem ganhando espao a noo de que a grande riqueza dos pases do Hemisfrio Sul reside em seus recursos naturais (renovveis ou no) e que a diversidade biolgica e os recursos genticos que compem esta diversidade so recursos estratgicos em se tratando de segurana alimentar e produo de novos medicamentos. O Brasil, por exemplo, possui entre 15 e 20% de toda biodiversidade do Planeta, o que o coloca na posio de pas detentor da maior diversidade biolgica mundial (Motta, 1998). Por isso torna-se premente a regulamentao deste tema em mbito nacional. Neste contexto que o Brasil, juntamente com outros cerca de 170 pases, assinou a Conveno de Diversidade Biolgica - CDB, que tem por princpios fundamentais: promover a conservao da biodiversidade, o uso sustentvel dos seus componentes e a repartio justa e equitativa dos benefcios decorrentes da utilizao dos recursos genticos . Assinada a Conveno de Diversidade Biolgica em 1992, iniciou-se, no

Polmicas em torno da regulamentao da proteo e acesso aos recursos genticos e conhecimentos tradicionais associados.

Introduo O estabelecimento das regras de proteo e acesso aos recursos genticos e o reconhecimento dos direitos sobre os conhecimentos a eles associados (cientficos e tradicionais) ainda guarda um grande impasse. O adiamento na soluo deste impasse no tem trazido benefcio algum aos interesses nacionais em geral, muito menos queles associados ao desenvolvimento tecnolgico e cientfico. Na ausncia de regras claras, pesquisas tm sido paralisadas ou muitas delas quando so levadas adiante acarretam a fuga de conhecimentos e de recursos genticos para laboratrios estrangeiros, sem que as devidas contrapartidas e salvaguardas se efetivem. Por outro lado, sabido que as multinacionais concentram seus investimentos em pesquisa e desenvolvimento em suas matrizes, mantendo, no mximo, um segundo centro nos EUA, no caso de empresas europias, ou na Europa no caso de empresas norte-americanas (Ferreira, 1998). Alm do potencial impacto no desenvolvimento tecnolgico e cientfico nacional, este debate traz tona questes pouco enfrentadas no plano das polticas pblicas socioambientais no Brasil. Dentre as questes mais importantes a serem tratadas nos projetos de lei que sero abordados neste artigo, os direitos titularidade e posse dos recursos genticos e aos conhecimentos associados so uma das questes de fundo mais importantes. Como todos sabemos, a explorao de recursos genticos dentro de terras indgenas e unidades de conservao (parques nacionais, estaes ecolgicas, reas de proteo ambiental ...) e o uso de conhecimentos
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Brasil, um amplo debate, desencadeado pela Senadora Marina Silva do PT/AC, para que o Congresso Nacional no apenas ratificasse a CDB, mas a transformasse em uma Lei de mbito federal, visando estabelecer mecanismos para a proteo e regulamentar as formas de acesso aos recursos genticos e aos conhecimentos a eles associados considerando-se as peculiaridades nacionais. Em 03 de fevereiro de 1994, a CDB foi ratificada pelo Congresso Nacional, por meio do Decreto Legislativo no 02, e em 1995 foi apresentado pela Senadora Marina Silva o Projeto de Lei no 306. Este PL foi discutido ampla e profundamente em diversas audincias pblicas ocorridas em Braslia, Manaus e So Paulo entre 1996 e 97 e foi aprovado no Senado Federal em outubro de 1998. Visando trazer para si a responsabilidade na conduo do debate, embora atrasado em relao iniciativa da senadora do Acre, o governo federal constituiu, em 1996, o GIARG - Grupo Interministerial de Acesso aos Recursos Genticos, composto, como prprio nome sugere, por representantes dos ministrios afetos ao tema, tais como: Indstria e Comrcio; Agricultura; Cincia e Tecnologia; Justia; Sade; Meio Ambiente; Relaes Exteriores, e rgos como: Funai, Embrapa, Fiocruz, Ibama. O GIARG, - criticado pelo movimento social por no integrar em sua com-

posio nenhum representante da sociedade, povos indgenas ou comunidades tradicionais-, teve por incumbncia discutir e apresentar uma estratgia nacional para uso dos recursos genticos e apresentar um novo projeto de lei para regulamentar a questo. O projeto de lei do governo foi levado Cmara dos Deputados em agosto de 1998, sob o no 4.751/98. Antecipando-se ao governo, o Deputado Federal Jaques Wagner do PT/ BA apresentou proposta baseada no PL da Senadora Marina Silva, (na forma do substitutivo do Senador Osmar Dias), incorporando algumas inovaes e sugestes encaminhadas por ONGs e movimentos sociais ligados questo da agricultura sustentvel e dos direitos dos povos indgenas e tradicionais. Este PL tramita na Cmara Federal sob o no 4.579/98. Comparativo entre os Projetos de Lei * Dentre as principais questes abordadas nos projetos de lei de acesso aos recursos genticos, destacam-se: a) natureza jurdica / titularidade dos recursos genticos, b)atribuies institucionais, c) condies ao acesso, d) acesso aos RGs em terras Indgenas e) responsabilidades das instituies de pesquisa, f) direitos intelectuais coletivos e paten-

teabilidade. a) Natureza jurdica / titularidade dos recursos genticos Os PLs da Senadora Marina Silva e do governo (arts. 2o) estabelecem que o patrimnio gentico bem da Unio, logo, de acordo com estas propostas, o governo federal detm a propriedade sobre os recursos genticos, o que no significa que detm propriedade sobre os recursos biolgicos que abrigam os recursos genticos. O recurso gentico deve ser compreendido como a informao que compe o material gentico contido no recurso biolgico. Desta forma, ocorreria como ocorre com os bens minerais que so distintos do solo, ou seja, o proprietrio do solo no detm a propriedade dos minerais situados em suas terras. O minrio bem da Unio. O projeto de lei do Deputado Jaques Wagner (art. 2o) prope uma nova categoria de bens jurdicos, denominada bens de interesse pblico. Assim, detm a propriedade sobre os recursos genticos aquele que detiver a propriedade sobre o recurso biolgico que abriga o recurso gentico em questo. A definio sobre a titularidade dos recursos genticos ser decisiva no estabelecimento das regras de controle do uso dos recursos genticos, bem como na identificao dos beneficirios no caso

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da repartio dos benefcios decorrentes da explorao econmica destes recursos. Este debate faz emergir uma discusso importante sobre a diferena entre os conceitos de soberania do estado e de soberania popular ou soberania da nao e dos povos sobre a biodiversidade. b) Atribuies institucionais Todos os trs PLs propem a criao de uma Comisso de Recursos Genticos com a incumbncia de monitorar as decises adotadas pelo rgo federal a ser criado para executar a politica nacional de acesso aos recursos genticos. Contudo h diferenas significativas. Os projetos de lei do Deputado Jaques Wagner (art. 11) e da Senadora Marina Silva (art. 11) prevm expressamente a composio da comisso, que ter representantes dos seguintes orgos: governo federal, governos estaduais, comunidade cientfica, populaes tradicionais e indgenas, ongs, empresas privadas. A representao nesta comisso se dar de forma paritria entre poder pblico e sociedade, includas entre estas ltimas as instituies de pesquisa. O projeto de lei do governo federal (art. 8o), por sua vez, determina que a composio da comisso de recursos genticos e suas atribuies sero estabelecidas em decreto posterior. Ao mesmo tempo que o decreto se apresenta como um instrumento mais flexvel, podendo ser alterado a qualquer momento pelo Presidente da Repblica, trata-se tambm de um mecanismo centralizador e pouco democrtico pois delega ao Executivo o poder de determinar, a seu exclusivo critrio, quem integrar a comisso, o peso das participaes e suas competncias. c) Condies ao Acesso aos Recursos Genticos O projeto de lei do governo federal probe acesso ao patrimnio gentico nacional por instituio estrangeira sem que haja a participao direta de instituies nacionais na coordenao das pesquisas (art. 9o). Os PLs da Senadora Marina Silva e do Deputado Jaques Wagner no condicionam a participao de instituies estrangeiras coordenao por instituio nacional. Contudo os PLs do Deputado Jaques e da Senadora Marina impem a obrigatoriedade de acompanhamento por parte

de instituies nacionais de pesquisas ou ensino, pblicas ou privadas (art. 33). Todos os PLs impem a obrigatoriedade de celebrao de contrato ou termo de compromisso entre o interessado no acesso e o rgo competente, para a obteno de autorizao para o acesso aos recursos genticos. Os PLs da Senadora Marina e do Deputado Jaques Wagner estabelecem um rol de exigncias a serem cumpridas j na fase de solicitao de acesso, tais como: currculo e identificao completos dos pesquisadores e demais interessados envolvidos na pesquisa, informao sobre cronograma, oramento, fontes de financiamento para o trabalho, descrio detalhada do RG e/ou conhecimento tradicional a serem acessados, localizao precisa das reas a serem investigadas, descrio circunstanciada dos mtodos, tcnicas e sistemas de coleta e indicao do destino do material a ser coletado e seu provvel uso posterior (art. 15). O PL do Executivo no apresenta, expressamente, um rol de exigncias em relao ao acesso propriamente dito. Assim como a competncia e a composio da Comisso de Recursos Genticos, os termos do contrato de acesso, no PL do governo, sero detalhados em decreto. Tanto a solicitao, quanto o projeto de acesso, devero, de acordo com os PLs do Deputado Jaques Wagner e da Senadora Marina Silva, ser publicados em Dirio Oficial e devero tambm ser publicados, por 03 dias consecutivos, em rgo de comunicao impressa de grande circulao na regio onde o acesso se realizar. Neste caso, qualquer interessado poder se manifestar por escrito ao rgo competente (arts. 16, 17 e 18). O PL do executivo no prev qualquer tipo de publicidade das solicitaes ou autorizaes de acesso. No caso de solicitao de acesso a conhecimento tradicional, o PL da Senadora Marina exige prvia autorizao de visitas s populaes tradicionais ou comunidades indgenas ( 1o art. 15). O PL do executivo no pede autorizao de visita seja a terras indgenas ou de comunidades tradicionais. Em relao aos contratos de acesso, os projetos de lei da Senadora Marina Silva e do Deputado Jaques Wagner so bastante minuciosos quanto ao contedo e clusulas essenciais peculiares a este tipo contratual, enquanto que o PL do governo prev apenas as clusulas

contratuais bsicas comuns a todos os contratos. d) Pesquisa e Acesso aos Recursos Genticos em Terras Indgenas Os PLs da Senadora Marina e do Deputado Jaques condicionam o acesso aos recursos genticos em terras indgenas e de populaes tradicionais emisso de parecer dos rgos com-

petentes, bem como do consentimento prvio e informado da comunidade indgena envolvida (3o, art 17). O PL do governo federal permite a pesquisa e o acesso a RGs em terras indgenas, condicionando-os anuncia prvia do rgo indigenista oficial, ouvida a comunidade indgena envolvida. No prev este direito em relao s comunidades tradicionais (4o, art. 9o) Ressalte-se a sutil diferena entre o que propem os PLs da Senadora Marina Silva e do Deputado Jaques Wagner que mencionam consentimento prvio e informado e o que prope o governo que fala em ouvida a comunidade indgena envolvida. H grande diferena entre ser ouvido e consentir. Aqui faz-se necessrio relembrar que a Constituio Federal, no artigo 231, reconhece o direito aos povos indgenas ao usufruto exclusivo dos recursos naturais existentes em suas terras, excetuando este direito em relao aos recursos minerais e hdricos. Uma vez que os recursos genticos no esto excepcionados, o usufruto exclusivo tambm estende-se sobre os recursos genticos. Assim sendo, qualquer pesquisa ou acesso a recursos sob usufruto exclusivo dos povos indgenas deve necessariamente ser antecedido pela anuncia prvia destes. E como se disse acima, anuir no significa apenas ser ouvido. e) Responsabilidade das instituies de pesquisa Importante aspecto dos projetos de lei aqui comentados trata da questo da responsabilizao solidria das instituies de pesquisas em relao ao descumprimento das clusulas estipuladas

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Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

nos contratos de acesso aos recursos genticos. Uma vez que faz-se necessrio o acompanhamento de instituies nacionais sobre pesquisas relacionadas a recursos genticos, eventual descumprimento s clusulas contratuais, seja por pesquisador vinculado instituio nacional ou estrangeira, responsabilizar as instituies de pesquisa nacionais. No caso do PL do governo, a coordenao das pesquisas se far por instituio nacional. No caso dos PLs da Senadora Marina Silva e do Deputado Jaques Wagner, caber s instituies nacionais o monitoramento das pesquisas. Em todos os casos, as instituies nacionais de pesquisa responsabilizam-se pelo eventual descumprimento da lei ou do contrato, por dolo ou culpa. f) Direitos intelectuais coletivos e patenteabilidade Nenhum dos projetos de lei faz objeo expressa ao patenteamento, por terceiros, de conhecimentos adquiridos junto aos povos indgenas e comunidades tradicionais, inobstante os PLs da Senadora Marina Silva e Deputado Jaques Wagner determinem, no inciso V, do art. 5o, serem inalienveis, impenhorveis e imprescritveis os direitos relativos ao conhecimento tradicional detido pelas comunidades indgenas ou populaes tradicionais ou locais e aos seus cultivos agrcolas domesticados e semi-domesticados. Saliente-se que a imprescritibilidade e inalienabilidade acima mencionada deve ser interpretada como caracterstica intrnseca prpria natureza do conhecimento tradicional, que no pode ser apropriado por terceiros sem sua descaracterizao, que pode acarretar prejuzos prpria cultura do povo

ros, uma vez que o conhecimento componente essencial da prpria cultura dos povos indgenas e tradicionais. Comentrios Gerais Aps as audincias pblicas ocorridas para discusso do projeto de lei da Senadora Marina Silva muito pouco foi feito, tanto no Congresso Nacional, como no Executivo Federal, para ampliar o leque de consulta aos vrios setores envolvidos e afetados pela questo. Diante dessa realidade e considerando o potencial impacto da questo para o desenvolvimento das pesquisas cientficas, pode-se dizer que, dentre os demais setores interessados na regulamentao da matria, a comunidade cientfica um dos setores que ainda no emprestou a ateno merecida ao debate e tem participado espordica e superficialmente das discusses. A soluo para os impasses ao avano da regulamentao do tema no Congresso Nacional passa pelo maior envolvimento de outros setores da sociedade e, necessariamente, por uma interpretao do governo federal mais afinada aos princpios e filosofia apregoados pela Conveno de Diversidade Biolgica. A filosofia mercantilista e centralizadora que permeia todo projeto de lei do Executivo precisa ser revista luz do que estabelece a CDB, para reconhecer o valor intrnseco da biodiversidade e sua interface com os direitos coletivos, tanto intelectuais como de posse e propriedade dos recursos genticos. Para tanto, faz-se necessria a criao de mecanismos democrticos que visem a participao direta da sociedade e dos povos provedores de conhecimentos e

Deputado Jaques Wagner podem ser aprimoradas na perspectiva de se garantir o controle eficz do poder pblico sobre as pesquisas e o manuseio do patrimnio gentico, sem no entanto burocratizar excessivamente o processo a ponto de desestimular ainda mais o j quase inexistente investimento em pesquisas no Brasil. O aprimoramento das propostas requer uma maior e melhor interlocuo entre os distintos atores direta ou indiretamente impactados, entre eles, comunidade cientfica, instituies de ensino e pesquisa, laboratrios nacionais, movimentos sociais, povos indgenas, populaes tradicionais e ongs ambientalistas. A partir da composio da comisso especial na Cmara para a regulamentao do acesso aos recursos genticos, espera-se que a articulao e o envolvimento necessrios para a evoluo dos debates se d de maneira real e que a Cmara Federal amplie a discusso, seguindo o exemplo do Senado. nosso dever, a partir de agora, transpor o denuncismo da biopirataria e, no debate franco e aberto com os demais interessados, enfrentarmos as controvrsias considerando os reais interesses envolvidos, buscando compatibilizar a busca pelo desenvolvimento tecnolgico e cientfico nacional, sem nos olvidarmos da garantia ao j reconhecido direito dos povos indgenas e tradicionais sobre a gesto de seus recursos naturais e seus direitos intelectuais coletivos. O desafio est lanado. * O texto dos Projetos de Lei, de autoria da Senadora Marina Silva, do Deputado Jaques Wagner e do Poder Executivo, encontram-se disposio na Home Page da Revista Biotecnologia : www.biotecnologia.com.br Referncias Motta, R.S. Manual para Valorao Econmica de Recursos Ambientais. IPEA/MMA/PNUD/CNPq, Braslia, 1998. Ferreira, S.H. Medicamentos a partir de Plantas Medicinais no Brasil. Academia Brasileira de Cincias,1998 Lima, A.R. Quadro comparativo entre os Projetos de Lei no 306-95 da Senadora Marina Silva (Subst. do Sen. Osmar Dias), no 4.579/98 do Deputado Federal Jaques Wagner e no 4.751/98 do Poder Executivo - Instituto Socioambiental, 1998

detentor do conhecimento. Ressalve-se que no se defende aqui a inutilizao ou congelamento do conhecimento, mas sim sua utilizao, por quem quer que seja, com a devida garantia do prvio consentimento, da justa repartio dos benefcios provenientes do uso do conhecimento, contudo, sem monopolizao de tais conhecimentos por tercei-

gestores dos recursos naturais na definio do destino que se dar a esses recursos estratgicos. Caso contrrio, no estaremos regulamentando a Conveno mas sim restringindo sua aplicao. Por outro lado, as propostas da Senadora Marina Silva (na verso do Substitutivo do Sem. Osmar Dias) e do

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OPINIO

IMUNOLOGIA
Sua contribuio para a sade da humanidade
Instituto Butantan Laboratrio de Imunopatologia Foto cedida pelo autor

Ivan Mota

maior e mais importante contribuio da Imunologia para a sade da humanidade foi a erradicao de uma das mais terrveis viroses que a devastavam - a varola. Dois sculos aps a introduo da vacinao contra a varola por Edward Jenner e vinte anos aps a total erradicao dessa terrvel virose, pergunta-se quais foram os avanos da vacinao contra outras doenas infecciosas. Atualmente, cinco doenas infecciosas vm sendo combatidas com sucesso por vacinao: difteria, febre amarela, hepatite B, poliomielite e coqueluche. Um processo maior est sendo obtido contra a poliomielite que se espera esteja erradicada pelo ano 2000. Infelizmente, uma vacinao eficiente no foi ainda obtida contra algumas infecces muito importantes como a malria e a Aids. A grande dificuldade na obteno de uma vacina anti-HIV a mutao antignica apresentada pelo vrus da Aids. Numerosas tentativas de produo de uma vacina anti-HIV tm sido feitas por diferentes grupos de pesquisadores com o uso de uma protena de envelope do vrus (gp 160) para obteno de anticorpos protetores. Apesar dessas e de outras tentativas, no foi possvel ainda a obteno da vacina anti-HIV. A vacina contra a tuberculose usandose uma cepa atenuada do Mycobacterium tuberculosis, o BCG (Bacilo de Calmette e Guerin), no produziu resultados to bons quanto os esperados inicialmente. Novas vacinas tm sido produzidas, como a recente vacina contra a meningite bacteriana produzida com o Haemophilus influenza B. A vacina consiste em um conjugado bacteriano que estimula a colaborao entre os linfcitos T e B para a proteo de anticorpos protetores. Essa vacina tem- se revelado como muito eficiente no s contra a meningite mas tambm contra outras formas de infeco
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como a pneumonia produzida pela mesma bactria. Alm das vacinas contra as infeces tradicionais mais comuns, outras tambm esto sendo preparadas contra agentes como o herpes simples do tipo 2, que causa o herpes genital, o vrus do papiloma humano que est associado ao cncer cervical e contra o Helicobacter pylori, que pode causar lcera pptica. Uma tcnica de vacinao que vem sendo desenvolvida com aparente sucesso a injeo intradrmica ou intramuscular de DNA para induzir imunizao. Essa tcnica envolve o preparo de plasmdios com o gene para um determinado antgeno, com a ajuda de um promotor eficiente. A injeo intramuscular de plasmdios vetores que codificam uma protena viral uma tcnica muito eficiente para induzir anticorpos e linfcitos T citotxicos (CD8+). Admite-se que o DNA injetado localize-se como epissomas nas clulas musculares, de modo que os peptdeos virais passem a ser eficientemente expressos nas fibras musculares juntamente com os antgenos classe I, gerando, assim, uma resposta imuneprotetora. Para que a vacina seja eficiente, ela freqentemente injetada com um adjuvante. Este consiste usualmente em uma mistura de substncias (muitas vezes de origem bacteriana) no relacionadas com o antgeno da vacina, que reforam a resposta imune. Admite-se que os componentes microbianos do adjuvante agem ligando-se a receptores na membrana plasmtica dos macrfagos. Um desses receptores, denominado TOLL, foi descoberto recentemente. uma protena filogeneticamente antiga, semelhante s molculas de defesa anti-microbianas existentes nas plantas e nos insetos. A funo defensiva do TOLL ainda no conhecida, mas se sugere que parte da

molcula seja capaz de potenciar a resposta imune. A importncia da vacinao atualmente foi mostrada por um recente workshop sobre a base imunolgica da vacinao realizado, em maio de 1997, no National Institute of Allergy and Infections Disease, em Bethesda, Md., USA, e na realizao de um international Meeting on Vaccines realizado pela Sociedade Brasileira de Imunologia, em Salvador (BA), de 29/11 a 02/ 12/98. A preveno por vacinas de infeces virais ou bacterianas, ou de outras patologias induzidas por esses agentes representaram at hoje a maior e mais importante contribuio da Imunologia para o bemestar da humanidade. Entretanto, muitos outros problemas ainda esto espera de soluo como, por exemplo, a constante resistncia das bactrias aos antibiticos resultando entre outros incovenientes, o problema de infeces hospitalares. O caso mencionado da Aids, as gripes e os resfriados e um grande nmero de outras patologias vo encontrar solues, esperamos, principalmente pela Imunologia. A situao presente e futura da espcie humana , sem dvida, preocupante no que diz respeito a novas e mesmo a velhas doenas, muitas das quais esto voltando a afetar as populaes humanas. O tamanho da atual populao humana, que ainda cresce de forma exagerada (clculos da ONU mostram que estamos ainda crescendo na base de um bilho de pessoas a cada 10 ou 12 anos) e as facilidades de intercmbio de pessoas entre as mais variadas populaes do planeta facilitam o aparecimento de formas de resistncia e mesmo o aparecimento e a disseminao de novas formas de doenas. Esperamos que os governos entendam esses problemas e dem sua contribuio de maior apoio ao desenvolvimento da C & T e, entre essas Imunologia.

NOVARTIS

SUBSTNCIAS
PESQUISA

TENSOATIVAS
xos) os quais se autoconstruam e se autoorganizem em fluidos funcionais previamente projetados, possibilitando o aparecimento de novas aplicaes tecnolgicas. O termo fluido complexo aqui utilizado abrange, alm de solues de tensoativos com estados altamente estruturados (monocamadas, micelas, microemulses, cristais lquidos liotrpicos, membranas ou vesculas), tambm solues de polmeros de polieletrlitos ( protenas e cidos nucleicos), cristais lquidos termotrpicos

Embrapa Meio Ambiente Ph.D. em Qumica pela Universidade de Leeds, Inglaterra, onde recebeu o prmio J.B. Cohen de 1996/1997 pela melhor tese de doutorado na escola de qumica daquele ano e devido a importante contribuio ao conhecimento na rea de fsico-qumica.

Maritte Sueli Baggio Brando

Os fenmenos de autoconstruo e auto-organizao de substncias tensoativas e sua importncia na agricultura e em biotecnologia

ubstncias tensoativas so ingredientes importantes em muitos produtos industrializados e possuem um papel de destaque em vrios processos industriais. Alm de sua presena em produtos de limpeza (detergentes, sabes, amaciantes de roupa, entre outros) e de higiene pessoal (shampoo, sabonete, pasta de dente, etc.), tensoativos naturais ou sintetizados pelo homem encontram uso em quase todos os ramos da produo industrial, como por exemplo: indstrias de alimentos, qumicas, txteis, de corantes, de tintas, de fibras, de processamento mineral, de plsticos, de produtos farmacuticos e de agroqumicos. Substncias tensoativas so tambm vitais em muitos sistemas biolgicos. Por exemplo, tensoativos conhecidos como lipdeos formam o principal componente das membranas celulares, as quais devem a estes a sua estrutura. Estudos de autoconstruo e auto-organizao de molculas tensoativas so importantes tanto do ponto de vista terico quanto prtico, uma vez que os modos de ao dessas substncias dependem dos seus estados de agregao, em vrias situaes prticas, tais como: em detergncia, emulsificao, na recuperao de petrleo, em biologia celular, entre outros. A busca da compreenso do fenmeno de autoconstruo e auto-organizao de substncias tensoativas por meio de estudos a respeito do comportamento de fase, estrutura e dinmica dessas substncias tem sido objeto de estudo de diversos autores (Kunze et al., 1997; van der Linden et al., 1996; Bergenholtz e Wagner, 1996; Oberdisse et al., 1996; Jhannesson et al., 1996; Frba e Kalus, 1995; Petrov et al.,1995; Boden et al.,1995; Boden, 1994; Diat and Roux, 1993; Sein et al., 1993) nos ltimos anos. Esses estudos abrem perspectivas que permitem o desenho e a sntese de novos materiais (novos fluidos comple30 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

Figura 1. Representao esquemtica de micelas do tipo: a) esfricas, b) cilndricas e c) discticas.

B C
(tanto de baixo peso molecular quanto variedades polimricas) e disperses coloidais. Todos os materiais anteriormente citados constituem fluidos complexos, uma vez que apresentam uma estrutura no rgida, mas sim dinmica, isto , uma estrutura que evolui com o tempo ( Boden, 1994 e 1990). Nas reas agrcola e de biotecnologia, a compreenso dos fenmenos de auto construo e auto-organizao de substncias tensoativas fundamental para a obteno de, por exemplo, formulaes adequadas de princpios ativos base de produtos naturais, quer de origem vegetal, quer de origem microbiana, obtidos de

processos fermentativos. Isto porque essas substncias so ingredientes importantes em diversos tipos de formulao (p molhvel, concentrado emulsionvel, suspenso concentrada, emulses do tipo leo em gua ou gua em leo, microemulses, entre outros), uma vez que interferem em propriedades fsico-qumicas importantes do ponto de vista de armazenamento e aplicao do produto como: molhabilidade, suspensibilidade, capacidade de emulsificao, etc. Os tensoativos interferem tambm em propriedades biolgicas quando um microrganismo e/ou seus metablitos so utilizados como ingredientes ativos. Por exemplo, uma associao qumica entre o tensoativo e a membrana do defensivo biolgico deve ocorrer para que o organismo apresente uma maior molhabilidade em gua. Porm, essa associao qumica pode causar incompatibilidade e perda de viabilidade ou capacidade antagnica do microrganismo. No trabalho de Angus e Luthy (1971) so apresentadas revises bibliogrficas a respeito da compatibilidade de diversos microrganismos: vrus, fungos e bactrias, frente a diferentes tensoativos em testes de laboratrio e de campo. Diversos autores, destacando-se o trabalho de Rode e Foster (1960) demonstraram que tensoativos catinicos e aninicos afetam de maneira negativa a viabilidade de diversos microrganismos, enquanto estes ltimos mostram-se indiferentes presena de tensoativos no-inicos. O objetivo deste trabalho fornecer uma reviso a respeito do comportamento de fase, estrutura e dinmica dos principais tipos de substncias tensoativas usualmente encontradas no mercado. Enfoque especial ser dado importncia da geometria molecular e das interaes intra e intermoleculares no processo de autoorganizao e auto-associao de molculas anfiflicas, fatores responsveis pela origem de uma grande variedade de estru-

turas dessas molculas em solues aquosas, de potencial interesse tecnolgico. Entre essas estruturas, especial ateno ser dada s perspectivas de uso de vesculas anfiflicas nas reas agrcola e de biotecnologia, entre outras. Sabes convencionais e substncias tensoativas do tipo sabo, como todas as molculas anfiflicas, consistem tipicamente de uma poro hidroflica polar (inica ou no-inica), conhecida como cabea polar, ligada a uma cadeia hidrocarbnica hidrofbica. Algumas substncias anfiflicas utilizadas como tensoativos esto indicadas na tabela 1. Essas caractersticas opostas associadas a uma mesma molcula conduzem a um fenmeno de auto construo das molculas em solues aquosas diludas, de maneira a blindar a poro hidrofbica do meio aquoso ao mesmo tempo que expe a poro polar hidrofilica gua. A formao de agregados por molculas anfiflicas, tais como tensoativos em um meio aquoso, favorecida pelo efeito hidrofbico, enquanto vrias outras interaes se opem a isso, o que gera o conceito de foras opostas (Tanford, 1980; Israelachvili, 1992), que agem principalmente na regio interfacial ( interface gua-cadeia hidrocarbnica) do agregado. Uma fora - o efeito hidrofbico tende a diminuir a rea interfacial por molcula (a rea da cabea polar) e a outra fora tende a aumentar essa rea (sendo esta ltima muito mais complicada j que resulta de vrios tipos de interaes, incluindo repulso de hidratao, repulso eletrosttica entre cabeas polares e interaes de impedimento estrico entre as pores polares ou hidrocarbnicas da molcula). Esse conceito sugere que h, nas condies de equilbrio termodinmico, uma rea superficial tima ao, em que a energia de interao por molcula anfiflica atinge um mnimo. Assumindose que cadeias hidrocarbnicas comportam-se como fluidos incompressveis (ou seja, que seu volume v constante a uma temperatura fixa), ento possvel se definir um parmetro adimensional denominado parmetro de empacotamento crtico como v/a0lc, onde lc o comprimento efetivo mximo da cadeia, tambm conhecido como comprimento crtico. Uma vez especificado o valor desse parmetro para uma dada molcula anfiflica, possvel se determinar os tipos de agregados nos quais ela poder se organizar. A tabela 2 ilustra as estruturas usualmente formadas por sabes, detergentes e fosfolipdeos para vrios valores de parmetros de empacotamento crticos. Substncias tensoativas, quando dilu-

Tabela 1: Exemplos de algumas substncias tensoativas.

carga aninico aninico catinico catinico No-inico

Tensoativos de cadeia simples frmula nome - + C12H25 OSO3 Na Docecilsulfato de sdio (SDS) + C7F15 COO NH4 Pentadecafluorooctanoato de amnia + C12H25 N (CH3)3Cl Cloreto de dodeciltrimetilamnio + Brometo de hexadeciltrimetilamnio C16H33 N (CH3)3Br Dodecilter de pentaoxietileno C12H25 (OCH2CH2)5OH Fosfolipdios de cadeias duplas

cabea polar zwiterinico zwiterinico aninico catinico

+

Cadeia hidrocarbnica

nome do fosfolipdio Fosfatidilcolina (lecitina) Fosfatidiletanolamina

(CH2)2N (CH3)3 diC14: dimeristoil + (CH2)2NH3 diC12: dilauroil Outros tensoativos de cadeia dupla C4H9 CH(C2H5)CH2COOCH2 - + C4H9 CH(C2H5)CH2COOCHSO3 Na C16H33 + N (CH3)2Br C16H33

Aerosol OT Brometo de dihexadecildimetilamnio

das em gua, inicialmente tendem a formar pequenos agregados denominados micelas, acima de uma certa temperatura (ponto Krafft), e concentrao (concentrao micelar crtica, cmc). Esses agregados podem assumir diferentes formas, tais como: esfrica, cilndrica (tambm denominada bastonete) ou disctica (vide figura 1). A topologia dos agregados depende, alm da natureza da molcula anfiflica (conforme ilustra a tabela 2), das condies da soluo (concentrao, tem-

peratura, pH, salinidade, entre outras). Essas estruturas so freqentemente formadas pela mesma molcula anfifilica, sendo que uma transio de uma forma para outra muitas vezes induzida por uma simples mudana na concentrao do tensoativo em soluo. Com o crescente aumento da concentrao de tensoativo em soluo, as micelas formadas tendem a se auto-organizarem, dando origem a diferentes fases lquido-cristalinas (tambm denominadas mesofases). Um aumento da
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tambm podem ser obtidas. Uma vescula unilamelar clssica formada quando uma nica bicamada lipdica forma uma estrutura mais ou menos esfrica compleCone Micelas esfricas Tensoativos de cadeia simples com tamente fechada, conforme indica a fireas de cabea polar grandes < 1/3 gura 3b. Um diagra(ex.: SDS em presena de baixos teores ma de fase tpico obde sal) servado para molculas anfiflicas zwitTensoativos de cadeia simples com Cone truncado Micelas cilndricas terinicas de cadeia reas de cabea polar pequenas 1/3-1/2 dupla, tais como os (ex.: SDS em presena de altos teores fosfolipdios, est de sal) ilustrado na figura 4. No caso, essa figura Tensoativos de cadeias duplas com Cone truncado Bicamadas flexveis, vesculas representa o diagrareas de cabea polar grandes ma de fase parcial ob1/2-1 (ex.: fosfatidilcolina) tido para o sistema dimeristoilfosfatidilCilindro Bicamadas planares Tensoativos de cadeias duplas com colina/gua (DMPC/ reas de cabea polar pequenas gua). A partir dessa 1 figura, observa-se (ex.: fosfatidiletanolamina) que a altas concentraes de DMPC, Cone truncado invertido Micelas inversas Tensoativos de cadeias duplas com uma fase lamelar pura reas de cabea polar pequenas >1 - L - formada, na (ex.: fosfatidiletanolamina) qual as cadeias hidrocarbnicas adotam uma conformaconcentrao de tensoativo no sistema compostos de bicamadas esferoidais cono fluida (semelhante a um lquido). sabo convencional/gua conduz a um cntricas e coerentes (vide figura 3a). medida que se aumenta o contedo de diagrama de fase essencialmente univerQuando tais estruturas so obtidas por gua no sistema, mais gua incorporada sal, o qual ilustrado esquematicamente meio de molculas anfiflicas sintticas, entre as lamelas a fim de reduzir a repulso na figura 2, em termos de temperatura (T) usualmente elas so denominadas de veentre as pores polares das bicamadas. em funo de frao de volume de tensosculas multilamelares ou estruturas do Esse entumescimento continua at que as ativo (A). Esse diagrama de fase genrico tipo cebola. Alm de sistemas vesiculabicamadas lipdicas atinjam uma certa disindepende da estrutura da cabea polar da res multilamelares, vesculas unilamelares tncia entre si, que permite a ocorrncia de molcula. Mesofases com ordem um balano entre suas foras atratitranslacional unidimensional (lavas e repulsivas. Alm do chamado melar), bidimensional (hexagonal limite de hidratao, o excesso de ou retangular) e tridimensional (cgua introduzido no sistema no pode bica) so formadas, porm fases mais ser incorporado entre as camanemticas esto ausentes. A caractedas lamelares e uma soluo isotrpirstica dominante que a transio ca se forma ( a qual contm o excesso de uma mesofase para a prxima de gua introduzido no sistema) em est associada a uma mudana draequilbrio com a fase lamelar, dando mtica na topologia do agregado, origem a uma regio bifsica no conforme indica a figura 2. sistema, aqui representada por: L + Diferentemente do que ocorre gua . A presena de uma regio com os sabes convencionais, quanbifsica - soluo isotrpica/fase lado fosfolipdios (ou outros tensoatimelar - em uma grande faixa de vos inicos de cadeia hidrocarbniconcentrao e temperatura , caracca dupla) so misturados com gua, terstica dessas substncias anfifilicas estruturas lamelares organizadas so (fosfolipdios), onde a geometria do formadas - muitas vezes denominaagregado controlada por considedas figuras de mielina - mesmo a raes sobre seu empacotamento e a Figura 2. Diagrama de fase esquemtico baixas concentraes de tensoativo em transio para uma fase lamelar pura (Frao de volume de tensoativo A gua. Os lipossomas de Bangham so uma determinada por interaes interagregaversus Temperatura T) para um forma particular de figuras de mielina, a dos. Conforme indicado na figura 4, fostensoativo do tipo sabo em gua. qual corresponde a sistemas fechados folipdios como DMPC formam vesculas

Tabela 2. Formas de empacotamento possveis para molculas de substncias tensoativas em funo de diferentes valores do parmetro de empacotamento crtico. Adaptado de Israelachvili, 1992. Tensoativo Parmetro de Forma do Estruturas formadas empacotamento empacotamento Crtico (v/a01c) Crtico

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Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

na regio bifsica (L + gua) quando a fase lamelar clssica L dispersa na soluo isotrpica diluda de DMPC. Ainda se considerando o diagrama de fase do sistema DMPC/gua, observa-se que uma estrutura lamelar com cadeias hidrocarbnicas mais rgidas (com uma conformao c do tipo slida), denominada L , ocorre a baixas temperaturas e altas concentraes de DMPC . Essa estrutura muitas vezes denominada gel, a qual tem uma organizao de bicamadas lipdicas paralelas entre si, onde as cadeias hidrocarbnicas se encontram completamente estendidas, porm inclinadas com relao ao plano normal da bicamada, mas empacotadas em um retculo quase hexagonal distorcic do. A estrutura P , indicada na figura 4, consiste de lamelas (formadas por bicamadas lipdicas) distorcidas por uma ondulao peridica no plano das lamelas, onde as cadeias hidrocarbnicas so rgidas e inclinadas porm parecem estar empacotadas em um retculo hexagonal regular, de acordo com Turnbull (1990). Uma caracterstica interessante dos fosfolipdios, que merece ateno, que ao se reduzir o comprimento da cadeia hidrocarbnica de tais molculas, estruturas vesiculares estveis passam a no ser mais obtidas no sistema. No seu lugar, micelas cilndricas ou esfricas passam a ser as estruturas preferidas, conforme observado, para lecitinas de cadeia dupla com 12 ou menos tomos de carbono por cadeia. Isso pode ser racionalizado em termos do efeito da cadeia hidrocarbnica no modulus de curvatura da estrutura da bicamada ( Israelachvili, 1992). Por exemplo, as micelas para o sistema binrio C8-lecitina/gua foram identificadas como sendo do tipo cilndrico por Tausk et al. (1974), e foi observada a ocorrncia de uma separao de fase lquido-lquido (muitas vezes denominada ponto de nvoa cloud-point) exibindo um ponto crtico superior, ao ser construdo o diagrama de fase deste sistema. Grande nmero de pesquisadores temse dedicado ao estudo das propriedades fsico-qumicas de lipossomos desde a sua descoberta em 1965 (Bangham, 1983). Desde aquela data at os dias de hoje, o desenvolvimento e a diversificao de modelos de membrana a partir de lipossomos tm sido fascinantes. Eles tm sido utilizados como membranas- modelo para ao anestsica, leitos- teste para enzimas de membranas, carregadores de materiais encapsulados para o interior de clulas, como barreiras contra invases de vrus e bactrias, antgenos para serem

atacados por anticorpos anti-lipdios, ligantes para drogas, substratos para testar canais inicos, sistemas para liberao de drogas na rea mdica ou veterinria (Carmona-Ribeiro, 1992). A partir de 1976, sistemas compostos

Figura 3. Ilustrao esquemtica de: a) uma vescula multilamelar e b) uma vescula unilamelar.

de molculas anfiflicas sintticas inicas com cadeias hidrocarbnicas duplas e longas, que imitam membranas, foram propostos dando origem a vesculas anfiflicas sintticas. De acordo com suas dimenses as vesculas podem ser classificadas como: a) pequenas: cujo tamanho varia de 0,02 a

Figura 4. Diagrama de fase parcial do sistema dimeristoilfosfatidilcolina/ gua (DMPC/gua). Adaptado de Janiak et al. (1979) e Turnbull (1990).

0,1 m, b) grandes : com dimetro variando de 0,1 a 1 m e c) gigantes: com dimetro de at 50 m (Lasic, 1988). A ocorrncia de vesculas grandes relatada na literatura para uma grande variedade de substncias tensoativas; contudo, usualmente, mtodos mais sofisticados que o mtodo convencional, baseado na sonifi-

cao ou disperso de uma fase lamelar L numa soluo isotrpica diluda de tensoativo, so aplicados para originar essas estruturas em soluo, tais como o mtodo de injeo ( Lasic, 1988; Carmona e Chaimovich, 1983) e o mtodo e depleo de detergente ( Lasic, 1988; Nozaki et al., 1982). A formao espontnea de estruturas vesiculares tambm relatada na literatura por diversos autores ( Talmon, 1983; Ninham et al., 1983; Hoffmann et al., 1992) para certos lipdios biolgicos, bem como para tensoativos sintticos e suas misturas. De acordo com Talmon (1983) e Ninham et al.(1983), o tensoativo sinttico com cabea polar carregada hidrxido de didodecildimetilamnio organiza-se espontaneamente em vesculas unilamelares termodinamicamente estveis em gua, as quais so monodispersas e pequenas com um dimetro mdio de 300 . Atribuise a espontaneidade formao de vesculas por este ltimo-tensoativo, ao fato de que seus grupos OH encontram-se extremamente solvatados, dando origem a grandes reas de cabea polar em comparao com outros grupos, como brometo ou cloreto, e isso favorece a curvatura da bicamada e conduz formao de vesculas. Kaler et al.(1989) relataram a ocorrncia de formao espontnea de vesculas em misturas aquosas de tensoativos de cadeias simples aninicos e catinicos ( por exemplo: dodecilbenzenosulfonato de sdio e tosilato de cetiltrimetilamnio). Acredita-se que a estabilidade de tais estruturas, nesse caso, causada por uma diferena na razo de mistura dos dois surfactantes em cada monocamada da bicamada lipdica, o que proporciona um modo de controlar a curvatura dessa bicamada de maneira que a fase vesicular tenha uma menor energia livre que a fase lamelar (Safran et al., 1990). Um exemplo interessante do uso de tensoativos estruturados na forma de vesculas encontrado na rea de pesquisa de pesticidas. A presso de grupos de eclogos em prol do ambiente em que vivemos tem demandado a remoo de alguns solventes prejudiciais sade humana e ao ambiente de certas formulaes de alguns pesticidas (sobretudo aquelas do tipo concentrado emulsionvel). Porm, muitas formulaes convencionais base de gua para princpios ativos insolveis ou pouco solveis nesse meio, tm se mostrado ineficientes, exibindo baixa atividade, tempo de armazenamento no adequado para fins de comercializao dos produtos (vida de prateleira ruim) e/ou alta viscosidade. Para contornar

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esses problemas, uma formulao base de tensoativos estruturados citada na literatura ( Newton et al., 1993), e consiste em uma suspenso de um pesticida slido insolvel em uma soluo aquosa que contenha um tensoativo estruturado. Nesse tipo de formulao, esto presentes vesculas multilamelares (algumas vezes tambm denominadas de esferulitos) (vide figura 5). De acordo com Newton et al. (1993), as partculas de pesticidas esto suspensas entre os esferulitos (vide figura 5) e so assim impedidas de sedimentar. Desde que os esferulitos (ou vesculas) so deformveis, a formulao escoa facilmente. Portanto, formulaes base de tensoativos estruturados tm propriedades reolgicas excepcionais, combinando baixa viscosidade com boa estabilidade e longa vida de prateleira. Quando possvel, os tensoativos so escolhidos para aumentar a molhabilidade e penetrao dos pesticidas nos seus alvos, assim melhorando sobremaneira sua atividade biolgica. Formulaes base de tensoativos estruturados so aplicveis a uma grande variedade de herbicidas, fungicidas e inseticidas. Agradecimentos: A autora deste trabalho agradece a bolsa de estudos, modalidade: Doutorado no Exterior, concedida pelo CNPq (Sub programa Biotecnologia-RHAE), que permitiu a pesquisa que deu origem a este artigo. Referncias bibliogrficas: Angus, T.A. e Luthy, P. (1971). Formulation of Microbial Inseticides, in Burges and Hussey eds., Microbial Control of Insects and Mites, London Academic Press Inc., p.623-639. Bangham, A.D. ed. (1983). Lipossome Letters , Academic Press, London. Bergenholtz, J. e Wagner, N. J. (1996). Formation of AOT/Brine Multilamellar Vesicles. Langmuir,12, 3122-3126. Boden, N. (1990). Self-assembly and self-organization in fluids, Chemistry in Britain, 345-348. Boden, N.(1994). Micellar Liquid Crystals, in Micelles, Membranes, Microemulsions and Monolayers, Gelbart, W.M.; BenShaul, A.; Roux, D. eds., Springer Verlag, captulo 3. Boden, N.; Harding, R.; Gelbart, W.M.; Ohara, P; Jolley, K.W.; Heerdegen, A.P.; Parbhu, A.N. (1995). J.Chem. Phys, 103(13), 5712. Carmona-Ribeiro, A.M. (1992). Synthetic Amphiphile Vesicles, Chemical Socie-

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Figura 5. (a) esferulito, (b) formulao contendo um tensoativo estruturado (adaptado de Newton et al.,1993).

Hoffmann, H.; Thunig, C.; Munkert , U.; Meyer, H.W.; Richter, W. (1992). From vesicles to the L3 (sponge) phase in Alkyldimethylaminoxide-Heptanol Systems, Langmuir, 8(11), 2629. Israelachvili, J. N. (1992). Intermolecund lar and Surface Forces, 2 ed. Academic Press Ltd, captulo 17. Janiak, M.J.; Small, D.M.; Shipley, G.G. (1979). The Journal of Biological Chemistry, 254(13), 6076. Jhannesson, H.; Fur, I.; Halle, B. (1996). Orientational order and micelle size in the nematic phase of the cesium pentadecafluorooctanoate-water system from the anisotropic self-diffusion of water, Physical Review E, 53(4), 1-14. Kaler, E.W.; Murthy, A.K., Rodrigues,

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SOJA ROUNDUP READY

Incubadora de
REPORTAGEM

Empresas
o tempo do Cinema Novo, nos anos 60, a frase do cineasta Gluber Rocha uma cmera na mo e uma idia na cabea dava a exata medida do que se julgava ser suficiente para fazer um filme. O resto, a genialidade do diretor seria capaz de resolver. Fossem problemas de produo, financiamento, seleo de atores ou comercializao. Improvisar era a palavra de ordem, numa exaltao ao amadorismo e glorificao do jeitinho. bem verdade que, do ponto de vista empresarial, a proposta fazer um filme acabava se consumando e alguns at conseguiram sucesso de crtica e de pblico, ganharam prmios e se firmaram como paradigmas do novo cinema brasileiro. Hoje, os pequenos e mdios investidores j sabem que no s com boas idias que se constri um sonho. So necessrios, alm de dinheiro e disposio, conhecimentos tcnicos, econmicos e uma ampla viso de mercado para se ter xito em algum empreendimento. nessa hora que o pequeno empresrio tem que pensar como um grande investidor, pois a globalizao acirrou a competio entre empresas, e hoje s sobrevive quem est atualizado e se prepara para enfrentar com criatividade as oscilaes do mercado.

INSTRUMENTO DE INOVAO E MUDANA CULTURAL

Paulo Euler T. Pires

Parque tecnolgico agroindustrial do oeste

Mas a primeira dificuldade que os futuros pequenos empresrios encontram , justamente, a falta de orientao para atingir seus objetivos. De pouco adiantam programas e incentivos governamentais para inovao, se no existem mecanismos que os conduzam a projetos de financiamento. Nesse contexto que surgiram diversas iniciativas, inclusive, com o propsito de ensinar o caminho das pedras. Entidades como o Sebrae- Servio Brasileiro de Apoio s Micro e Pequenas Empresas e instituies como universidades, organismos internacionais de fomento, agncias de financiamento e fundaes passaram a otimizar seus recursos fsicos, humanos e materiais desenvolvendo parcerias entre si e com empresrios e empreendedores, no apenas para atingir os propsitos j mencionados, mas tambm para adequar-se aos novos tempos de alta competitividade pelos recursos financeiros disponveis, fossem eles de origem pblica ou privada. Programas governamentais de qualificao de mo-de-obra, de normatizao, de Gesto da Qualidade, Treinamento Gerencial e Escolas de Formao de Empreendedores foram criados em mbito federal, estadual e municipal, juntamente com projetos de incentivo fiscal e criao de plos temticos de desenvolvimento com vistas a atrair empresas e empresrios para esses plos. O paradigma de todo esse processo foi a criao do Silicon Valley ou Rota 128, na dcada de 50, localizado entre San Francisco e San Jose, abrangendo 12 cidades da Califrnia-EUA, onde, por iniciativa do ento reitor da

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Stanford University, Frederik Lemon, criou-se o que Lemon chamou de Stanford Industrial Park, ao qual foi acrescido o Stanford Research Park.. Nascia o conceito de incubadora de empresas/empresas incubadas, segundo o qual uma instituio oferecia determinadas condies e facilidades que estimulassem a criao e o desenvolvimento de empresas inovadoras de base tecnolgica. E foi assim que ali surgiram alguns dos gigantes atuais da informtica como a Hewlett Packard, Atari, Varian e Microsoft. Na dcada de 70, na Frana, surge ento o Parque Tecnolgico de Sophia Antipoles, que foi a instalao, pelo Detalhe da parte interna governo francs, de infra-estrutura para da incubadora na UnB Foto: Renato Marins um Parque Tecnolgico, abrangendo uma rea de 2.300 ha. No Brasil, as primeiras incubadoras empresa que tem loteamento poder surgiram entre os anos de 1984 e 1986, utilizar servios e dependncias coem Florianpolis(SC), So Carlos(SP), muns do prdio central. J a UniverCampina Grande(PB) e Braslia(DF). sidade de Braslia (UnB), cobra 1% do Hoje, segundo dados da Associao valor do faturamento da empresa, a Nacional de Entidades Promotoras de ttulo de royalties e o empresrio tem Empreendimentos de Tecnologias Avanque informar, mensalmente, esse faadas Anprotec, j so 32 as incubaturamento Universidade. Mas agora doras brasileiras em funcionamento e esse vnculo corresponde apenas ao mais de 15 em planejamento. O Centro perodo em que a empresa esteve de Referncia em Tecnologias Inovadoincubada, e no mais em regime ras Fundao CERTI, j recebeu o vitalcio, como antes. O Padetec, na ttulo de melhor incubadora do Brasil. Universidade Federal do Cear, que Com 10.500 m2, engloba tambm emabriga empresas com significativas presas de servios como restaurante, conquistas, informa que, hoje, o probancos, correio e outros. A vantagem cedimento varia: sendo o produto tambm que, findo o contrato entre desenvolvido e elaborado dentro do empresa incubada e incubadora, nada Padetec, cabe discutir posteriormenmais cobrado do pesquisador a ttulo te um valor a ser negociado. Atualde royalties. Esse item varia de instituimente, s duas das dezessete empreo para instituio. Por exemplo, na sas incubadas pagam mensalmente Bio-Rio, no Rio de Janeiro, que, alm de ter o servio de encaminhamento de Incubadora de Empresas da Universipatentes ao INPI, no cobra dade de Braslia - UnB - que funciona no Campus junto faculdade de tecnologia nada a ttulo de royalties, Foto: Renato Marins no recebendo porcentagem nenhuma sobre o produto final do pesquisador, e portanto, o vnculo totalmente desfeito depois que o contrato termina. Na Bio-Rio, alm da incubadora, funciona tambm o parque industrial, que contm lotes industriais urbanizados, em torno de 1.000 m2 a 5.000 m2, para serem alugados e construdos pela empresa. O contrato de aluguel por 25 anos, renovveis por mais 25 anos. A

um valor negociado. Mas, caso o empresrio tenha o produto j pronto ou semi-pronto, e apenas quer transform-lo em um empreendimento comercial, no h nenhum pagamento a ser feito ao Padetec, a no ser o uso de taxas comuns a todos (aluguel de salas, equipamentos, servios, etc). Como funciona Normalmente, a cada ano, as entidades que mantm incubadoras divulgam um edital de inscrio e chamada de propostas para o programa de Incubadora de Empresas. Os interessados apresentam, ento, um plano de proposta ou projeto, descrevendo os produtos ou servios que pretendem desenvolver, o mercado existente ou potencial, os custos do seu empreendimento e do seu produto, quais sero os fornecedores e a estimativa de retorno. O plano ou o projeto analisado por comisso que julga a proposta segundo sua viabilidade tecnolgica, financeira e mercadolgica, alm da aderncia do projeto aos objetivos da incubadora. Uma vez aprovado, o inscrito recebe apoio institucional e de infra-estrutura, comeando pelo treinamento gerencial e administrativo. Na Universidade de Braslia, por exemplo, dado em convnio com o Sebrae. Depois so providenciados documentos e assinado o convnio para dar incio s atividades na incubadora. No Plo Bio-Rio - Plo de Biotecnologia do Estado do Rio de Janeiro,

tanto na Incubadora de Empresas quanto nos lotes industriais, devem ser apresentados projetos de pesquisa e desenvolvimento na rea de biotecnologia, os quais so avaliados por uma comisso tcnica formada por pesquisadores da Universidade Federal do Rio de Janeiro. A empresa incubada conta, normalmente, com consultorias diversas e especializadas e acesso a laboratrios e equipamentos disponveis nas instituies para o desenvolvimento de seus produtos. Poder optar por utilizar tambm o espao fsico para instalao, servios administrativos, xerox, biblioteca, acesso internet e demais recursos existentes nas entidades. Mas nada disso de graa: todos os servios so cobrados pelas incubadoras; desde luz, telefone e aluguel de salas, at o uso de equipamentos, etc. O perodo de incubao varia, normalmente, de 3 a 7 anos, dependendo da instituio. Existem vrias outras importantes incubadoras em todo o pas e, entre elas, podemos citar: o CINET- Centro Incubador de Empresas Tecnolgicas, criado em So Paulo em 1985; o CELTA Centro Empresarial para Laborao de Tecnologias avanadas, criado em 1986 em Santa Catarina; o PaqTc-PB Fundao Parque Tecnolgico da Paraba, criado em 1988, na Paraba; o CIETEC Centro Incubador de Empresas Tecnolgicas, em So Paulo-SP, situado na Cidade Uni-

I-Tec, uma das empresas incubadas na UnB

versitria, no Instituto de Pesquisas Energticas e NuclearesIPEN e articulado com a USP, IPT, Sebrae-SP e Secretaria de Cincia, Tecnologia e Desenvolvimento Econmico de So Paulo; o COPPE/UFRJ; a Incubadora Tecnolgica da UFPB; e os Parques de Desenvolvimento Tecnolgico ligados s universidades do Paran e Minas Gerais. O diretor do CDT/UnB Universidade de Braslia, Luiz Afonso Bermudez, diz que a relao da Universidade - incubadora/empresa incubada, s funciona nas reas em que a universidade tem competncia e esse j um fator direcionador das propostas de incubao. Ele cita tambm um outro

Algumas empresas instaladas no Plo Bio-Rio:

EMPRESAS Baktron Dalmatia Ecobac Extracta Nutriente Q-Controll Silvestre Labs Trianel Vectron Vitrogen AMBIO Brasco M&N
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SETOR LOCAL Kits Diagnstico, Meios de Cultura e Anlises para Controle de Qualidade Incubadeira Cosmticos Incubadeira Prod. p/ Biodegradao de Matria Orgnica usados em Tratamento de Efluentes Incubadeira Pesquisa e Desenvolvimento de Molculas Naturais Incubadeira Nutrio Enteral, Parenteral e Quimioterapia Incubadeira Softwares para Controle de Processos e para Treinamento Incubadeira Medicamentos e Antisspticos Incubadeira Consultoria na Elaborao de Protocolo e Anlise de Dados na rea de Sade Incubadeira Kits Diagnstico Incubadeira Mudas Micropropagadas Incubadeira Estaes de Tratamento de Efluentes e Equipamento para Purificao de gua Lotes Produtos Farmacuticos Lotes Produtos Farmacuticos Lotes

fator que considera importante para as empresas incubadas: o prestgio da universidade (incubadora) que se transfere para a incubada. Um exemplo atual o da Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria Embrapa, que conta com 39 unidades em todo o Pas e se prepara para implantar incubadoras nessas unidades. Para isso, a Embrapa contratou a Fundao CERTI para desenvolver o seu projeto Transferncia de Tecnologia atravs de Empreendimentos de Tecnologia Agropecuria TTENTAR. Paralelamente s incubadoras, existem programas mantidos por entidades como o Sebrae, que oferecem alternativas para o empresrio ou empreendedor que no deseja incubar sua empresa. Entre eles esto o Empretec, desenvolvido em parceria com o PNUD Programa das Naes Unidas para o Desenvolvimento e ABC/MRE Agncia Brasileira de Cooperao do Ministrio das Relaes Exteriores, o PATME Programa de Apoio Tecnolgico s Micro e Pequenas Empresas. Todos eles com alguma forma de subsdio nos custos e destinados a agregar tecnologia s empresas existentes ou a serem criadas. Outra ferramenta de ajuda a disponibilizao de informaes atravs da Internet, onde o tema Incubadora de Empresas est bastante difundido atravs de homepages disposio dos interessados.

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CARGILL

PROBITICOS
PESQUISA
INTRODUO A arrancada para o desenvolvimento da avicultura brasileira teve incio na dcada de 60, juntamente com a utilizao de antibiticos e outros quimioterpicos em larga escala na produo de frangos de corte, para prevenir determinadas enfermidades. Com o passar do tempo, comearam a ser usados tambm como promotores de crescimento em doses subteraputicas. A partir da dcada de 80, tanto pesquisadores quanto produtores comearam a notar que determinadas cepas bacterianas haviam se tornado resistentes aos antibiticos utilizados e que uma parcela considervel da flora normal do trato gastrintestinal havia sido diminuda ou at mesmo eliminada devido a sua ao no seletiva. Dentro desse contexto, comeou a ser formado um novo conceito de aditivo, dentro da comunidade cientfica internacional, que poderia vir a substituir os antibiticos na produo de frangos de corte sem causar danos a flora intestinal normal e sem deixar resduos na carcaa dos animais. Esses aditivos receberam o nome de probiticos. Segundo FULLER (1989), os probiticos so suplementos alimentares base de microrganismos vivos que afetam beneficamente o animal hospedeiro, promovendo o balano da microbiota intestinal. MECANISMOS DE AO DOS PROBITICOS Aproximadamente 90% da flora intestinal das aves composta por bactrias facultativas produtoras de cido ltico (Lactobacillus, Enterococcus, etc.) e bactrias anaerbicas estritas (Fusobacterium, Eubacterium, etc.). Os 10% restantes consistem de Escherichia coli, Clostridium, Staphylococcus, Pseudomonas, e outros (FOX, 1988). As aves so submetidas a vrios fatores de estresse, tais como, transporte do incubatrio s granjas comer40 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

Fabiula A. Bortolozo Ferreira

Zootecnista Curitiba - Paran bortoloz@zaz.com.br

Zootecnista, M.Sc. Produo Animal Professora e Pesquisadora do Centro de Cincias Agrrias Faculdades Integradas Esprita - FIES Pontifcia Universidade Catlica - PUC PR kussakawa@ineparnet.com.br

Katia Cristina Kira Kussakawa

USO DE PROBITICOS NA ALIMENTAO DE FRANGOS DE CORTE

ciais, superpopulao nos avirios, vacinaes e mudanas de temperatura. Isto tende a induzir um imbalano na microflora intestinal e prejuzos ao mecanismo de defesa corporal da ave (JIN et al., 1997), causando uma baixa performance produtiva e infeces intestinais, como putrefao do intestino com formao e liberao de toxinas; comprometimento do crescimento, reduo da qualidade da carne e reduo da eficincia reprodutiva; possibilidade de bactrias oportunistas tornaremse patognicas; aparecimento de infeces, diarrias e anemias (FOX, 1988). Ao se pesquisar alternativas para a substituio dos antibiticos na produo animal, estudiosos centralizaram suas atenes em um dos mecanismos de defesa natural dos animais, os microorganismos presentes no trato gastrintestinal. Assim, os probiticos passaram a ser uma alternativa eficaz de substituio dos antibiticos, agindo como promotor de crescimento no tratamento de diarrias alimentares e/ou bacterianas. Os microrganismos utilizados como probiticos so Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus casei, Lactobacillus faecium, bactrias grampositivas produtoras de cido ltico, habitantes naturais do trato gastrintestinal e que agem efetivamente como probiticos, aderindo ao epitlio intestinal e colonizando o trato. Outros, como Bacillus subtilis, Bacillus toyo e Bacillus bifidum so utilizados combinados, isolados ou as vezes associados a leveduras, enzimas e outros agentes, com a finalidade de auxiliar as bactrias produtoras de cido ltico na sua colonizao (MARUTA, 1993). Dentre estes, os microrganismos mais utilizados so Bacillus subtilis (classificado como transitrio no trato gastrintestinal, pois no possui a capacidade de se fixar ao epitlio intestinal, mas a de auxiliar na multiplicao e colonizao dos produtores de cido ltico); Lactobacillus acidophylus (bactria que produz cido ltico a partir da fermentao de aucares, anaerbica facultativa e exigente nutricionalmente, necessitando para o seu crescimento das vitaminas: niacina, riboflavina e cido flico); alm do Enteroccoccus faecium (microrganismo bastante agressivo e um pouco mais resistente a altas temperaturas do que os Lactobacilus. Os probiticos agem por excluso competitiva, aderindo a stios especficos localizados no epitlio intestinal diminuindo, dessa maneira, a colonizao por microrganismos patognicos. O mecanismo de excluso competitiva no est totalmente esclarecido, entretanto vrias pesquisas foram feitas e pode-se levantar algumas formas de atuao dos probiticos (FOX, 1988 e JIN et al., 1997): No intestino, os microrganismos do probitico realizaro uma rpida metabolizao de substratos (aucares, vitaminas, aminocidos, protenas), tornando-os indisponveis aos patgenos e, por consequncia, impedindo a proliferao destes (Figura 1). Atravs da produo do cido ltico, provocam uma reduo no pH intestinal, tornando o meio imprprio para a multiplicao dos agentes patognicos. Secretam protenas (bacteriocinas) que tm uma ao inibitria ou destrutiva contra uma cepa especfica de bactria. As bactrias produtoras de cido ltico podem estimular a produo de anticorpos e a atividade fagoctica contra patgenos no intestino e em outros tecidos do corpo (Figura 2). Bactrias benficas aumentam a atividade enzimtica no trato gastrintestinal. Aumento da rea de absoro do intestino delgado. A interao desses mecanismos promovem um equilbrio da microbiota intestinal, o que trar diversos benefcios ao animal (Figura 3).

Utilizao de Probiticos na Alimentao de Frangos de Corte Tortuero (1973), citado por JERNIGAN et al. (1985), comparou o uso de probitico Lactobacillus acidophilus na gua de beber e/ou antibitico Bacitracina de Zinco na rao. O autor concluiu que frangos alimentados com probitico e antibitico apresentaram melhor ganho de peso e converso alimentar. Com a administrao do probitico Bacillus subtilis em granjas de frangos de corte, MARUTA (1993) observou um aumento da musculatura e uma diminuio da quantidade de gordura abdominal, principalmente nos machos, e uma reduo no cheiro caracterstico da carne de frango. Sobre as bactrias nocivas ao trato gastrintestinal, o autor verificou que a adio de Bacillus subtilis diminuiu a porcentagem de isolamento da Salmonella de 60 para 20%. A ao benfica do probitico tambm foi confirmada por CANALLI et al. (1996). Estes autores estudaram a influncia do probitico Bacillus natto sobre a microflora intestinal de frangos de corte. Foram testadas a adio de 0, 50, 75 e 100 g do probitico (109 Bacillus natto/g) por tonelada de rao e concluram que o probitico causou uma reduo no nmero de coliformes fecais, em relao ao controle. Os autores sugerem uma dosagem mnima de 100 g do probitico/t de rao. Com o intuito de verificar a influncia do probitico sobre a atividade de enzimas digestivas (tripsina, amilase e lipase) em frangos de corte FRIZZAS et al. (1996) utilizaram dois lotes de frangos (machos e fmeas) alimentados com dietas contendo 2900 e 3200 kcal EM/kg e 200 ppm de probitico Bacillus subtilis (1010 clulas viveis/g do produto). Os pesquisadores observaram que a dieta contendo um maior nvel de energia e com adio de probitico proporcionou maiores atividades de todas as enzimas. WOHLKE et al. (1996) utilizaram o probitico Bacillus natto em diferentes dosagens (0, 50, 75 e 100 x 109 esporos/ t de rao ) na alimentao de frangos de corte, avaliando o desempenho quanto ao consumo de rao, ganho de peso e converso alimentar. Os pesquisadores concluram que os frangos machos apresentaram uma melhora na converso alimentar, ganho de peso e consumo de rao.
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Figura 1: As bactrias patognicas e no patognicas geralmente competem por nutrientes. As no patognicas tm maior poder de competio, colonizando melhor o intestino (FOX, 1988)

Figura 2: As bactrias no patognicas atuam como antgenos potencializando a resposta imunolgica no hospedeiro. Os patgenos so repelidos pelos receptores nas clulas epiteliais (FOX, 1988)

Figura 3: Efeitos das bactrias no patognicas no trato intestinal

TABELA 1: Parmetros zootcnicos de frangos de corte alimentados com antibitico e/ou probitico TRATAMENTO Consumo de Rao (Kg) Ganho de Peso (Kg) Converso Alimentar Mortalidade (%) Controle 4,30 2,26 1,95 2,91 b Antibitico Antibitico 1 4,28 2,29 1,93 5,42 a Antibitico 2 4,25 2,27 1,94 5,63 a Controle 4,27 2,28 1,95 6,88 a Probitico Probitico 1 4,28 2,27 1,93 3,54 b Probitico 2 4,28 2,27 1,92 3,54 b
HENRIQUE et al. (1997)

TABELA 2: Efeito da utilizao de antibitico ou probitico sobre o ganho de peso, consumo de rao e converso alimentar de frangos de corte (1 a 42 dias de idade) FATORES Caractersticas Ganho de Peso (g) Consumo de Rao Converso Alimentar Antibitico SEM 2079 3813 1,850 COM 2103 3869 1,851 Probitico SEM 2107 3868 1,848 COM 2075 3815 1,854
GONZALES et al., (1998a)

TABELA 3: Mdias de parmetros zootcnicos de frangos de corte recebendo diferentes probiticos e antibiticos aos 42 dias TRATAMENTO Consumo de Rao Ganho de Peso Converso Fator de Mortalidade (Kg) (Kg) Alimentar Produo (%) Controle 4,30 2,19 1,94 260,69 3,13 Virgianiamicina 4,28 2,22 1,91 260,18 5,83 Antibiticos Avilamicina 4,25 2,18 1,93 255,88 6,04 Controle 4,27 2,17 1,94 247,30 7,29 Mistura 4,28 2,20 1,93 265,79 3,54 Probiticos Isolado 4,28 2,21 1,92 263,65 4,17
HENRIQUE et al. (1998)

Testando os efeitos da utilizao de probitico composto por Enterococcus faecium, Lactobacillus acidophylus e Saccaromyces cerevisiae e o antibitico Virginiamicina sobre o desempenho de frangos de corte (ganho de peso, converso alimentar, fator de produo e mortalidade) Bertechini e Hossain (1993), citados por GONZALES et al. (1998a), verificaram uma melhor converso alimentar e ganho de peso diante dos tratamentos que continham probiticos. HENRIQUE et al. (1997) compararam 4 tratamentos, sendo: a) Virginiamicina (antibitico 1) rao nas fases inicial e de crescimento nas dosagens de 30 e 20g/t de rao; b) Avilamicina (antibitico 2) adicionada rao nas fases inicial e de crescimento na dosagem de 400 g/t de rao; c) Mistura de probiticos (probitico 1) adicionados rao em todas as fases na dosagem

de 100 g/t de rao e d) Probitico composto por Bacillus subtilis (probitico 2) adicionado rao na proporo de 30g/t de rao. O probitico 1 era composto por uma mistura de Enterococcus faecium, Lactobacillus acidophylus e Saccharomyces cerevisiae. No foi observado pelos pesquisadores um efeito significativo tanto dos probiticos quanto dos antibiticos sobre os seguintes parmetros: ganho de peso e converso alimentar, entretanto pode-se verificar que a mortalidade foi reduzida pela presena dos probiticos nas raes em 48,5% (Tabela 1). Utilizando o probitico constitudo por Enterecoccus faecium e o antibitico Avoparcina, GONZALES et al. (1998a) observaram que, dentro dos parmetros estudados, ganho de peso, consumo de rao e converso alimentar, as aves que no receberam probitico

obtiveram resultados superiores para ganho de peso e consumo de rao (Tabela 2). HENRIQUE et al. (1998) compararam dois tipos de probiticos (uma mistura de Lactobacillus acidophylus, Saccaromyces cerevisiae e Enterococcus faecium, e outro composto por Bacillus subtilis) e dois de antibiticos (Nirginimicina e Avamicina) para testar a eficincia dos mesmos diante dos seguintes parmetros: ganho de peso, consumo de rao, converso alimentar, fator de produo e rendimento de carcaa. Observaram que a utilizao tanto de antibiticos quanto de probiticos no promoveu melhoria significativa no ganho de peso, consumo de rao, fator de produo e converso alimentar (Tabela 3). Esses resultados discordam daqueles obtidos por Bertechini e Hossain (1993), citados por GONZALES et al. (1998a), que verifica-

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ram melhora no ganho de peso e converso alimentar de frangos de corte suplementados com probiticos. Os resultados referentes ao rendimento de carcaa no revelaram diferena entre os tratamentos. Com o intuito de avaliar o rendimento de carcaa de frangos de corte, GONZALES et al. (1998b) utilizaram o probitico composto de Enterococcus faecium e o antibitico Avoparcina como aditivos da rao. O probitico foi utilizado tanto isoladamente quanto em associao com o antibitico. Os melhores resultados para o rendimento de carcaa (%) foram obtidos quando houve associao do probitico com o antibitico. Esses resultados confirmam aqueles obtidos por HENRIQUE et al. (1998), que no encontraram diferenas para o rendimento de carcaa entre tratamentos de probiticos e antibiticos utilizados isoladamente. Ao estudar o desempenho de frangos de corte alimentados com raes contendo o antibitico Avoparcin e o probitico Toyocerin 50 (1 kg contem 1010 esporos de Bacillus toyoi) adicionados isoladamente, associados ou em uso sequencial (fase inicial e fase final de criao), ZUANON et al. (1998) concluiram que na fase inicial, aves alimentadas com 10 ppm de Avoparcin tiveram melhor ganho de peso e converso alimentar, em relao testemunha. Na fase final, no houve diferenas no desempenho dos frangos. Consideraes Finais A utilizao de probiticos como aditivos alimentares tem sido cada vez mais pesquisada e empregada, entretanto, colocamos algumas consideraes a respeito do assunto, pois h a necessidade de precauo ao interpretar os resultados publicados. Quando se pretende usar algum probitico deve-se ter em mente que nem todos os probiticos podem ser utilizados em determinados tipos de processamento de rao devido pouca resistncia que apresentam a altas temperaturas. Este fato pode ser considerado como uma desvantagem apresentada pelos probiticos. Outro fator que deve ser observado e assimilado de que nem sempre os probiticos apresentam resulta-

dos positivos em relao a ganho de peso e converso alimentar das aves, isso se deve a diversas variantes, tais como: sanidade das aves, tempo de desocupao do galpo e nvel de contaminao ambiental. Aves alojadas em locais que se apresentam h bastante tempo desocupados tendem a apresentar resultados pouco significativos em relao utilizao de probiticos, ocorrendo o mesmo para locais com baixo nvel de contaminao ambiental. H a necessidade de probiticos com concentraes adequadas e suficientemente estveis, tanto para armazenamento quanto durante a administrao s aves. Sendo assim, pode-se considerar que a utilizao de probiticos na alimentao de frangos de corte no pode ser vista como algo milagroso, mas sim, como um aditivo que poder auxiliar em problemas de diversas naturezas dentro do avirio, alm de no deixar resduos indesejveis na carcaa da ave. Referncias Bibliogrficas CANALLI, L.S., FLEMMING, J.S., MIRA, R.T., et al. Alterao da microbiota intestinal de frangos de corte pela utilizao de probitico na alimentao. Revista do Setor de Cincias Agrrias, v. 15, n. 1, p. 125 132, 1996. FOX, S.M. Probiotics: Intestinal inoculants for production animals. Veterinary Medicine, v. 83, n. 8, p.: 806-829, 1988. FULLER, R. Probiotics in man and animals. Journal Applies Bacteriology, 66, p.: 365-378, 1989. FRIZZAS, A.C., PIZAURO, J.M., HARNICH, F.A.R., et al. Efeito do uso de probitico sobre o desempenho de frangos de corte e atividade de enzimas digestivas. In: CONFERNCIA APINCO DE CINCIA E TECNOLOGIA AVCOLAS, 1996, Curitiba. Anais... Curitiba: APINCO, 1996, p. 53. GONZALES, E., MENDES, A.A., LODDI, M.M., et al. Efeito da adio de probitico e antibitico como promotores de crescimento sobre o de-

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Necessito informaes sobre propagao de microtubrculos de batata em meio lquido, vantagens e desvantagens. Formulao do meio e vazo de ar necessria por minuto. Soube que Cuba tem usado este sistema com exito! Grato pela ateno! Marcelo Massayoshi Morisawa Companhia do Cogumelo Guarapuava -PR cogumelo@gol.psi.br Publicamos seu e-mail para que leitores entrem em contato. llll Cumprimento pelo artigo Melhoramento de Plantas na Virada do Sculo, no encarte especial da 7 edio. O artigo fez uma exposio muito importante e que vem complementar a revista. Parabns. Virgnia Pinheiro Cuiab MT. llll A revista excelente. Gostaria que todas as edies trouxessem reportagens sobre os mais recentes avanos em biologia molecular no estudo das doenas tropicais e de ver tambm matrias sobre estudos em Biologia de Desenvolvimento e como esto as instituies brasileiras de pesquisa. Ademir de Jesus Martins Jnior Rio de Janeiro RJ Informamos que seu pedido foi encaminhado. llll Gostaria de saber se existe algum meio natural de combater formigas, com algum tipo de planta que eu possa ter em casa para evitar este tipo de inseto. Obrigado.

Elton ecardoso@ramo.com.br Publicamos seu e-mail para que leitores entrem em contato. llll Por favor, gostaria de receber mensagens a respeito da biotica e seus desafios. Obrigado. Marcelo Gomes mgomes@globalmail.com.br Aluno de Direito, terceiro ano. Pesquisa Cientfica. Publicamos seu e-mail para que leitores entrem em contato. llll Comunicamos que site do Colgio Brasileiro de Cirurgies www.cbc.org.br voltado unicamente para a rea mdica. Os cirurgies contam com o link Help CBC que se prope a responder questes, dvidas e esclarecer condutas para cirurgies que necessitem apoio quando no exerccio de sua profisso. A Revista BIOTECNOLOGIA parabeniza o pesquisador Marcos Machado, coordenador do Laboratrio de Citricultura do Instituto Agronmico de Campinas (IAC) pela admisso na Ordem Nacional do Mrito Cientfico. Devido incorreo (edio n7, pg. 44 Seo de Cartas) informamos que, para aquisio do livro Marcadores Moleculares em Plantas, de autoria da prof. Sandra Milach, o e-mail correto : milach@vortex.ufrgs.br.