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TOMA, CONSERVACIN Y ENVO DE MUESTRAS PECUARIAS Y AGRCOLAS AL CENTRO DE DIAGNSTICO

GOBERNACIN DE ANTIOQUIA CONVENIO ICA- SECRETARA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL MEDELLN, 2009

La propiedad intelectual de este material pertenece a la Gobernacin de Antioquia, Secretara de Agricultura y Desarrollo Rural. Prohibida la reproduccin total o parcial, por cualquier medio o con cualquier propsito, sin la autorizacin escrita de estos. Segunda edicin: Diciembre de 2009 Financiacin de la publicacin: Convenio ICA - Secretara de Agricultura y Desarrollo Rural Diseo, diagramacin e impresin Digital Express Ltda. - Medelln Colaboradores Funcionarios Instituto Colombiano Agropecuario ICA rea Pecuaria Sandra Patricia Acevedo Garcs y Amparo Gmez Ramrez. Bacterilogas Secretara de Agricultura y Desarrollo Rural Fotografas Todas las fotografas utilizadas en la impresin de esta cartilla, fueron aportadas por funcionarios de la Secretara de Agricultura y Desarrollo Rural de Antioquia Impreso y hecho en Colombia Medelln, 2009.

TOMA, CONSERVACIN Y ENVO DE MUESTRAS PECUARIAS Y AGRCOLAS AL CENTRO DE DIAGNSTICO

Luis Alfredo Ramos Botero Gobernador de Antioquia Edgar Arrubla Cano Secretario de Agricultura y Desarrollo Rural Juan Guillermo Vlez Gonzlez Director Desarrollo Rural Nestor Yarce Garca Coordinador Regional Antioquia Instituto Colombiano Agropecuario Cristobal Jose Daz Anaya Coordinador Equipo Tcnico de Sanidad Preparado por: Francisco Javier Pabn Hernndez Mdico Veterinario Gloria Elena Guzmn Restrepo Ingeniera Agrnoma, M. Sc Susana Maya Bolvar Ingeniera Agrnoma, Ph. D

Gobernacin de Antioquia Convenio ICA - Secretara de Agricultura y Desarrollo Rural Medelln, 2009

NDICE
1. 1.1 1.1.2 1.1.3 1.1.4 2. 2.1 2.2 2.2.1 2.2.2 2.2.3 2.3 2.3.1 2.3.2 2.3.3 2.3.4 2.3.5 2.3.6 2.3.7 2.3.8 2.4 2.5 2.5.1 2.5.2 2.5.3 2.5.4 2.5.5 2.6 2.7 2.8 2.9 3. 3.1 3.1.1 3.1.2 3.1.3 3.2 3.2.1 3.2.2 Diagnstico pecuario ____________________________________________ Factores bsicos en la toma y envo de muestras al centro de diagnstico ________ Calidad de la muestra _______________________________________________ Cantidad de la muestra _____________________________________________ Tiempo en la ruta crtica de la muestra __________________________________ Recomendaciones generales para el envo de muestras al centro de diagnstico ________________________________ Pruebas diagnsticas solicitadas al centro de diagnstico ____________________ Sugerencias para toma de muestras de sangre ____________________________ Sugerencias para hematologa ________________________________________ Anticoagulantes mas usados _________________________________________ Sugerencias para qumica sangunea, suero o plasma _______________________ Sugerencias en toma y envo de muestras para bacteriologa _________________ Secrecion de oidos _________________________________________________ Secreciones oculares _______________________________________________ Secreciones vaginales ______________________________________________ Lquido cefalorraqudeo _____________________________________________ Liquidos diferentes al cefalorraqudeo___________________________________ Hemocultivos _____________________________________________________ Urocultivos ______________________________________________________ Sugerencias en cultivo bacteriolgico de leches ___________________________ Recuento de celulas somticas en leche (rcs) _____________________________ Sugerencias en la toma y envo de muestras para un estudio parasitolgico ______ Coprolgicos _____________________________________________________ Hemoparasitos parsitos en sangre ___________________________________ Ectoparasitos - parsitos externos _____________________________________ Recomendaciones para el estudio cultivo micolgico en pelos_________________ Recomendaciones para el estudio cultivo micolgico _______________________ Recomendaciones para el estudio de patologa ____________________________ Recomendaciones para examen de citologas _____________________________ Procedimiento frente a una patologa (enfermedad) en un predio ______________ Equipo bsico en oficinas de sanidad para la toma de muestras pecuarias ________ Diagnstico agrcola ____________________________________________ Factores bsicos en la toma y envo de muestras agrcolas ___________________ Calidad de la muestra _______________________________________________ Cantidad de la muestra _____________________________________________ Tiempo en la ruta crtica de la muestra __________________________________ Toma de diferentes tipos de muestras ___________________________________ Plantas grandes ___________________________________________________ Plantas pequeas __________________________________________________
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13 13 13 13 14 16 17 18 18 18 19 20 20 21 21 21 22 22 23 23 24 24 24 25 26 27 27 28 30 30 32 44 45 45 46 46 46 47 47

4.

Diagnstico de daos causados por insectos plagas (diagnstico entomolgico)________________________________ 4.1 Procedimiento general de diagnsticos entomolgicos ______________________ 4.1.1 Estructura afectada sin presencia del insecto causante ______________________ 4.1.2 rea lesionada y presencia del insecto causante ___________________________ 4.2 Como enviar muestras que contengan insectos ___________________________ 4.3 Muestra para determinar organismos benficos en insectos __________________ 4.3.1 Muestras a enviar al laboratorio _______________________________________ 4.4 Equipos de recoleccin de insectos _____________________________________ Diagnstico de daos causados por enfermedades (diagnstico fitopatolgico) ________________________ 5.1 Diagnstico de la enfermedad ________________________________________ 5.1.1 Sntomas por causas biticas _________________________________________ 5.2 Frutos y otros tejidos frescos o suculentos: _______________________________ 5.3 Flores y frutillos cuajados ____________________________________________ 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13.

48 48 49 50 50 52 52 53 57 57 57 58 59

Toma y envo de muestras para anlisis nematolgico ______________ 60 Sntomas por circustancias particulares del ambiente ______________ 61 Instrumentos para muestreo de enfermedades ____________________ 62 Muestras para determinar hongos antagnicos ____________________ 63 Sntomas de presuncin viral ____________________________________ 63 Muestras para determinar dao por herbicidas ____________________ 64 Muestras para determinar viabilidad de semillas ___________________ 65 Anexos ________________________________________________________ 66

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NDICE DE TABLA
Tabla 1. Tabla 1. Tabla 1. Tabla 2. Tabla 3. Tabla 4. Tabla 5. Tabla 6. Tabla 7. Tabla 8. Tabla 9. Muestras para exmenes bacteriolgicos_____________________________ 33 Muestras para exmenes bacteriolgicos (continuacin) _________________ 34 Muestras para exmenes bacteriolgicos (continuacin) _________________ 35 Muestras para exmenes de virologa _______________________________ 36 Muestras para exmenes de histopatologa ___________________________ 37 Muestra para exmenes de parasitologa (parsitos internos) _____________ 37 Muestras para exmenes de ectoparsitos (parsitos externos) ____________ 38 Muestras para electrolitos (Ionogramas) _____________________________ 38 Muestras para exmenes de hematozoarios (parsitos en sangre) __________ 39 Muestras para exmenes de enfermedades reproductivas ________________ 40 Muestras de qumica sangunea para enfermedades metablicas ___________ 41

Tabla 10. Muestras de biologa molecular PCR (Reaccin de la Polimerasa en Cadena) __ 41 Tabla 11. Muestras para exmenes de toxicologa _____________________________ 42 Tabla 11. Muestras para exmenes de toxicologa (continuacin) __________________ 43 Tabla 12. Sntomas ms comunes encontrados en plantas asociados a daos por insectos o artrpodos ________________________________________ 55

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PRESENTACIN
El Centro de Diagnstico Agropecuario Convenio Ica Secretaria de Agricultura y Desarrollo Rural, cuenta con profesionales calificados en las diferentes reas de la sanidad, los cuales adems de desempear labores de diagnstico como un servicio a la comunidad, se encargan de apoyar la vigilancia zoo y fitosanitaria de nuestro Departamento a travs del desarrollo de campaas de sanidad agropecuaria y proyectos de investigacin aplicada en los temas de inters para nuestra nacin y los pases con los cuales se quiere llegar a tener un comercio de productos de este subsector, con miras al establecimiento y permanencia en los mercados internacionales. Ha sido para el centro de diagnstico agropecuario del convenio una gran preocupacin el poco uso que se da al laboratorio para el diagnstico de enfermedades y plagas, principalmente en el rea agrcola y es su deseo motivar el uso de una herramienta tan importante como el laboratorio para la obtencin de diagnsticos acertados, con lo cual se puedan hacer manejos y controles mas efectivos disminuyendo as los riesgos de perdidas econmicas en la produccin agropecuaria en un alto porcentaje . Por esta razn el equipo tcnico de este centro Agropecuario Convenio Ica Secretaria de Agricultura, se dio a la tarea de elaborar una cartilla en forma ordenada, clara y prctica, con criterios precisos en lo tcnico a fin de que se convierta en una gua para los procedimientos a nivel de campo en el correcto manejo, toma, conservacin y envi del material vegetal y muestras pecuarias al centro de diagnstico. Se espera que esta cartilla sea un manual de procedimientos que permita a profesionales, tcnicos y productores del sector agropecuario prevenir, corregir o mitigar los impactos negativos generados por plagas, enfermedades y sustancias nocivas de la manera mas amigable y racional con el medio ambiente, procurando la seguridad alimentara, obtencin de productos inocuos, la investigacin y el desarrollo tecnolgico, haciendo as mas eficientes las actividades agrcolas y pecuarias de Antioquia.

EDGAR ARRUBLA CANO Secretario de Agricultura y Desarrollo Rural Departamento de Antioquia Medelln, octubre 2009.
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INTRODUCCIN
Los servicios que brinda el Centro de Diagnstico agrcola y pecuario del convenio ICA-SECRETARIA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL, dan a los profesionales del sector herramientas para desarrollar su trabajo de asistencia tcnica y asesora a los diferentes productores. Los resultados del laboratorio son valiosos siempre que se valide la informacin en campo. Aunque la experiencia y el ojo clnico conducen a los profesionales a un diagnstico presuntivo, no siempre aquellos son confiables, pues las patologas pueden tener sintomatologas semejantes que pueden llevar a diagnosticar y tratar equivocadamente la problemtica, con un incremento en los costos de produccin, desmereciendo la calidad y cantidad del producto final. Por tal motivo el uso del laboratorio es la mejor herramienta para la toma de decisiones, adems, en el Centro de Diagnstico se tiende a la bsqueda de tcnicas cada vez ms rpidas, sensibles, especficas y confiables para un correcto diagnstico. En el Centro de Diagnstico se reconocen e identifican enfermedades y plagas que afectan la produccin agropecuaria, mediante la aplicacin de modernos mtodos y procedimientos diagnsticos e investigacin aplicada de laboratorio y de campo. Los diagnsticos de laboratorio, permiten ir creando un historial fitosanitario y zoosanitario de las patologas de un municipio, una regin o un Departamento, enfocando estas problemticas desde el punto de vista de riesgo poblacional, y no individual, contribuyendo a formular los diferentes planes, programas y proyectos a travs de campaas de prevencin, control y manejo que conducen a una verdadera vigilancia epidemiolgica. El centro de diagnstico cuenta con un equipo de profesionales altamente calificados y con experiencia, que brindan la asesora indispensable en estas reas. Adems garantizamos oportunidad y calidad en los servicios brindados.

UN DIAGNSTICO A TIEMPO ES MS EFECTIVO Y ECONMICO QUE UN BUEN CONTROL

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1. DIAGNSTICO PECUARIO
1.1 FACTORES BSICOS EN LA TOMA Y ENVO DE MUESTRAS AL CENTRO DE DIAGNSTICO
El xito para un diagnstico correcto y oportuno depende de tres factores: Calidad de la muestra Cantidad de la muestra Tiempo transcurrido en la ruta crtica

1.1.2 CALIDAD DE LA MUESTRA


La muestra debe ser tomada en los primeros estados de la enfermedad o aparicin del problema, para evitar contaminacin, principalmente por bacterias, hongos o microorganismos del medio ambiente. El material a enviar debe ser limpio, sin desinfectantes, no contaminado, ni con otros productos que permitan alterar la muestra. Igualmente, se debe tener presente de no maltratar al animal cuando se vaya a tomar la muestra ya que nos puede alterar los resultados, por lo tanto sujetar bien y adecuadamente el animal, sin causarle traumas. Cuando utilicemos medios o lquidos conservadores como glicerina tamponada, medios de enriquecimiento y otros, no deben estar adulterados, ya que no cumplen con el objetivo de conservar la muestra hasta su procesamiento. Adems, se debe utilizar el medio adecuado para el transporte de la muestra como refrigeracin o congelacin si la muestra lo requiere. Los instrumentos para tomar las muestras como: Tubos, agujas, pinzas, tijeras, jeringas y otros, al igual que los recipientes a usar deben ser estriles y cerrados hermticamente. La muestra debe ser transportada al laboratorio en el menor tiempo posible, toda muestra debe ser remitida con la mayor informacin posible, ya que los datos all consignados son vitales para un buen diagnstico y una buena recomendacin.

1.1.3 CANTIDAD DE LA MUESTRA


Muestra: Es el material biolgico tomado de las lesiones que ocasiona una enfermedad, y que permite al laboratorio identificar su causa. Esta puede ser: Fluidos corporales, sangre, suero, semen, orina, secreciones, materia fecal, rganos y tejidos.

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La muestra debe ser lo ms representativa en cantidad, tanto del animal como del hato (porcentaje de animales de la finca). En trastornos nerviosos: enviar fragmentos de cerebro y/o cerebelo. Trastornos digestivos: fragmentos de intestinos y/o estmagos. Trastornos respiratorios: fragmentos de pulmones y/o trquea. Lo anterior puede ir acompaado de otro tipo de muestra como orina, sangre, secreciones, materia fecal y otras.

Una muestra suficiente, reciente y limpia, tiene alta probabilidad de diagnstico 1.1.4 TIEMPO EN LA RUTA CRTICA DE LA MUESTRA
Es el tiempo transcurrido entre la notificacin del caso y la entrega de los resultados del laboratorio, es un tiempo controlado por el hombre aumentndolo o disminuyndolo, entre ms corto sea el tiempo se va obtener un diagnstico correcto y oportuno. Factores que intervienen: Notificacin del caso Visita a la finca Toma de muestras Envo de muestra al laboratorio Recibo de muestras en el laboratorio Resultado de laboratorio

El protocolo debe ser diligenciado correctamente, sin omitir datos que puedan ser tiles para el diagnstico.

SIGNOS Y SNTOMAS

Secrecin vulvar en bfala

Vulvovaginitis en bovinos

Trastornos nerviosos en ternera

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Diarrea en lechones

Signo nervioso en bovino

Erupciones en pezones bovino

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Hematuria enzotica bovina

Caquexia muscular distrfica

Desprendimiento del epitelio gingival en bovinos

Equino caquctico

LESIONES MACROSCPICAS

Lesiones petequiales en rin

lceras en botn en intestino

Inflamacin y material purulento en tonsilas

reas hemorrgicas en vejiga

rganos cavidad abdominal

Placentitis en bovinos

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Pulmn bovino, con lesiones granulomatosos por tuberculosis Bovino con lceras en lengua

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2. RECOMENDACIONES GENERALES PARA EL ENVO DE MUESTRAS AL CENTRO DE DIAGNSTICO


Al Laboratorio, se pueden enviar animales pequeos (especies menores) enfermos, rganos, tejidos, secreciones, lquidos del cuerpo, parsitos y otros. Enviar muestras de animales recientemente fallecidos, en menos de 2 horas, ya que comienza el proceso de autolisis en los tejidos. En especies de gran tamao (bovinos, equinos y otros) es preferible enviar determinadas muestras. Cuando el animal lleve ms de dos horas de muerto y no se le ha dado refrigeracin adecuada, no deben enviarse muestras al laboratorio para el anlisis microbiolgico, ya que puede haber contaminacin por otros microorganismos diferentes al agente causal. Toda muestra que llegue al laboratorio debe ir acompaada de su respectivo protocolo completamente identificado. Cuando se realicen necropsias, primero tome muestras para bacteriologa, virologa y posteriormente para histologa (tejidos) y luego para parasitologa. Los animales denominados colas (pobre condicin fsica) no deben ser enviados para exmenes, excepto si son los nicos animales enfermos. Cuando no se tenga conocimiento sobre que muestras tomar en caso de una enfermedad, se debe llamar al Centro de Diagnstico preferiblemente para solicitar la asesora e informacin requerida. Rotule e identifique la muestra adecuadamente, no utilice tinta ni cinta que se desprenda por accin de la humedad. Siempre utilice instrumental y recipientes estriles, limpios y secos para microbiologa, as como para los otros tipos de muestras.

ENVO, TRANSPORTE Y CONSERVACIN DE MUESTRAS

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Tejidos separados en bolsas plsticas y tubos plsticos estriles bien identificados

Transporte de tejidos separados en bolsas plsticas y termo con refrigeracin y su respectivo protoloco

Transporte de tejidos en bolsa plstica con refrigeracin en caja de cartn hermticamente cerrada y su respectivo protocolo

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2.1 PRUEBAS DIAGNSTICAS SOLICITADAS AL CENTRO DE DIAGNSTICO


Aislamiento e identificacin del agente patgeno de las muestras tomadas del animal, como: Bacterias, virus, hongos, parsitos y otros. Aumento o descenso de ttulos de anticuerpos en suero de un animal como respuesta a un estmulo inmungeno determinado. Determinacin de las variaciones cualitativas en muestras como orina, sangre, materia fecal (aspecto, olor, color, otros) y cuantitativas como (densidad, pH, hemoglobina, hematocrito, huevos por gramo), con respecto a los niveles establecidos segn la especie animal.

SIGNOS DE ENFERMEDADES REPRODUCTIVAS

Aborto en bovinos, es de las principales manifestaciones observadas en enfermedades reproductivas por causas infecciosas y estos se presentan generalmente despus de los 45 das de gestacin.

ENFERMEDADES REPRODUCTIVAS
Abortos y momificaciones en bovinos

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Abortos en porcinos

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2.2 SUGERENCIAS PARA TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE


La alteracin de los valores en la sangre, es por lo general debido a la Hemolisis, causada por: Jeringas, agujas o tubos hmedos. Tubos calientes por los rayos solares. Movimientos bruscos en la muestra tanto en la toma como el transporte. Congelacin de la muestra. Contaminacin bacteriana de la muestra. Friccin por agujas de reducido calibre.

2.2.1 SUGERENCIAS PARA HEMATOLOGA


El anticoagulante de eleccin es el EDTA, por preservar mejor los elementos celulares por 6 horas. Tambin se puede usar Heparina, oxalatos y citratos. El suero y el plasma no deben ser conservados ms de 6 horas en refrigeracin sin ser separados de los dems componentes sanguneos, ya que esto trae como consecuencia alteracin en los diferentes metablicos de la sangre y por lo tanto errores en los resultados del laboratorio. Desinfeccin de las zonas donde se va hacer la puncin. Relacin sangre - anticoagulante, es muy importante, la dosis es un miligramo del anticoagulante por 1 ml de sangre. Mezclar la muestra sangre-anticoagulante por inversin ms o menos 10 veces y suavemente para evitar hemlisis. No causar puncin traumtica en el animal para evitar hemlisis

TOMA, ENVO Y CONSERVACIN DE SUEROS

Insercin de la aguja en el capuchn

Toma de sangre en bovino con vacutainer en vena caudal, previa desinfeccin del sitio

Separacin del suero

Empaque, conservacin e identificacin del suero en viales

2.2.2 ANTICOAGULANTES MAS USADOS


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EDTA (sales de potasio o de sodio en concentracin de 1mg / 1 ml de sangre), valido en todas las especies. Heparina (0.5 Mg. por 4.5 ml de sangre), oxalatos (potasio y sodio) y citrato de sodio al 3.8%

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ENFERMEDADES HEMOPARASITARIAS

Anaplasma en bovinos

Babesia en bovinos

Tripanosoma en bovinos

2.2.3 SUGERENCIAS PARA QUMICA SANGUNEA, SUERO O PLASMA.


La posicin adecuada y sujecin afectiva del animal son esenciales para un muestreo con xito, un tiempo adicional para ganar confianza del animal es generalmente de gran utilidad. Minimizar manejo fsico humano, ya que un animal asustado, adrenalizado puede originar resultados equivocados en varios anlisis, por ejemplo, la glucosa. La asepsia debe realizarse en sentido contrario al crecimiento del pelo del animal y en forma circular del centro hacia la periferia .Despus de la puncin el sitio debe dejarse seco, limpio y libre de sangre, ya que cualquiera humedad o materia orgnica favorece las infecciones. Las tcnicas y sitios de puncin varan de una especie a otra, segn la localizacin de los vasos sanguneos convenientes y el espesor y dureza de la capa de la piel, por ejemplo la vena yugular, mamaria, caudal y radial ( alar) .La cantidad mxima de sangre a extraer ser la estrictamente necesaria para las pruebas, mas o menos 2 mililitros. La muestra debe separarse segn el caso en plasma o suero, rotularse correctamente, analizarse inmediatamente o conservarse adecuadamente refrigerada a 4 grados C, para el posterior anlisis de las diferentes pruebas bioqumicas.

TOMA DE SANGRE EN PORCINOS

Sujecin e inmovilizacin de porcinos en toma de sangre en la vena cava, previa desinfeccin del sitio

Serologa: En el suero se detectan anticuerpos especficos contra determinados antgenos, para lo cual se recomienda tomar muestras pareadas, de un mismo animal con un intervalo de 15 das entre ellas. Las muestras pueden ser 10 ml de sangre sin anticoagulante conservadas en refrigeracin o 2 ml de suero conservado en congelacin para la prueba deseada.
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2.3 SUGERENCIAS EN TOMA Y ENVO DE MUESTRAS PARA BACTERIOLOGA Las muestras para estudio deben ser lo ms frescas posibles, conservadas en refrigeracin (no congelar), tomadas aspticamente y antes del tratamiento con antibiticos. En caso de ser hisopados, conservar en medio de mantenimiento.

2.3.1 SECRECIN DE OIDOS


Materiales: Escobillones estriles, porta objetos estriles, guantes, Solucin salina estril, mechero y medio de transporte. Recoleccin de la muestra: La muestra se debe mantener y preservar en solucin salina si se va a enviar de inmediato al laboratorio, de lo contrario se mantiene en medio de transporte (Stuart). En las secreciones y exudados la interpretacin del examen directo es difcil, tanto por la contaminacin que generalmente se produce durante la obtencin, como por el escaso numero de microorganismos en la muestra, por esta razn el examen definitivo es el cultivo y para la toma de la muestra debern emplearse tcnicas de asepsia rigurosa. La secrecin de odo se obtiene con escobillones estriles con el cual se toma la cantidad mayor posible de ambos odos en caso de que esta este seca o muy escasa se impregna los escobillones con solucin salina estril en ambos casos la muestra se toma mediante el frotis del conducto auditivo externo sin profundizar el tmpano. Se hace el extendido en placa previamente desinfectada necesariamente hacindolo en forma circular para la coloracin de Gram ya que esta es una ayuda valiosa, para observar reaccin leucocitaria, bacterias y hongos; se introducen los escobillones en medio de transporte adecuado, es necesario tomar de ambos odos con el fin de establecer una comparacin en el crecimiento de la flora. El volumen de la muestra debe ser representativo, al igual los algodones de escobillones impregnados del material.

BACTERIOLOGA Y VIROLOGA

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Hisopado nasal en porcinos Hisopado traqueal en aves Hisopados y medio de conservacin para cultivo bacteriolgico o viral

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2.3.2 SECRECIONES OCULARES


Materiales: Guantes, escobilln estril o esptula estril, medio de transporte, placas estriles y solucin salina. Recoleccin de la muestra: La muestra para el estudio de una conjuntivitis, se obtiene frotando con un escobilln estril los fondos de los sacos conjuntivales o el material que se acumula en el ngulo lagrimal. Las muestras de lceras cornales las debe obtener el mdico veterinario, quien lo hace raspando la lesin muy cuidadosamente con una esptula estril, se debe realizar en ambos ojos y hacer extendido en placa estril para ambos casos. El volumen de la muestra debe ser representativo, el algodn del escobilln impregnado del material; la muestra se debe mantener y preservar en el medio de transporte (Stuart).

2.3.3 SECRECIONES VAGINALES


Materiales: Especulo estril, escobillones estriles, porta objetos estriles, medio de transporte y guantes. Recoleccin de la muestra: Se debe realizar un lavado estricto de los genitales externos con agua y jabn, secando en lo posible con toallas desechables. Realizar desinfeccin con alcohol yodado y alcohol antisptico (3 veces cada uno). Se introduce el especulo estril para proceder a la toma de la muestra con un escobilln estril el cual se introducir por todo el centro hasta llegar al crvix tratando de no tocar las paredes, se saca el escobilln con la muestra, se hace el extendido para la coloracin de Gram y se coloca en el medio de transporte adecuado. En caso de sospechar hongos o tricomonas colocar una muestra en solucin salina estril para la realizacin del directo. La muestra se debe preservar y mantener en el medio de transporte adecuado. El volumen de la muestra debe ser representativo.

2.3.4 LQUIDO CEFALORRAQUDEO


Materiales: Jeringa estril, tubos estriles tapa rosca, algodn estril y alcohol. Recoleccin de la muestra: La puncin lumbar realizada por el mdico veterinario se debe llevar a cabo bajo condiciones aspticas estrictas para evitar introducir al canal raqudeo bacterias, tambin para prevenir la contaminacin de la muestra. La muestra se recoge en tubos estriles tapa rosca para evitar la prdida del liquido o contaminacin, por ningn motivo se debe utilizar tubos tapa de algodn, es necesario desinfectar rigurosamente el rea que se va a puncionar.

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Esta muestra es necesario enviarla de inmediato al laboratorio. Ya que algunas bacterias que no sobreviven con el almacenamiento prolongado o cambios bruscos de temperatura. El volumen de la muestra debe ser representativo, aproximadamente de 3 a 4 mililitros.

2.3.5 LQUIDOS DIFERENTES AL CEFALORRAQUDEO


Materiales: Alcohol antisptico y yodo, jeringa estril, algodones estriles. Recoleccin de la muestra: La aspiracin percutnea de lquido como pleural, peritoneal, sinovial debe ser realizada aspticamente con desinfeccin previa, jeringas y agujas estriles la mayor cantidad de lquido debe ser remitida al laboratorio. Debe agregarse heparina estril en caso de grandes volmenes de lquido pleural y peritoneal (0.5 centmetros por 100 mililitros de muestra para prevenir los cogulos que atrapen los microorganismos). La muestra debe ser enviada inmediatamente al laboratorio. El volumen de la muestra debe ser representativo, aproximadamente 3-4 ml.

Recoleccin de semen en toro

2.3.6 HEMOCULTIVOS
Materiales: Alcohol yodado y antisptico, jeringa estril, mechero, algodones estriles y frascos con el medio de cultivo. Recoleccin de la muestra: Despus de haber sujetado al paciente y haber seleccionado cuidadosamente el sitio de puncin, debe hacerse una asepsia cuidadosa de la piel para reducir la incidencia de contaminacin del hemocultivo. La piel debe de desinfectarse y luego con alcohol por 3 veces del centro a la periferia. Las tapas de caucho de los frascos que contienen el medio de cultivo mas el anticoagulante que potencialmente pueden estar contaminadas, deben de desinfectarse con una solucin de yodo y el exceso de sustancia descontamnate debe removerse antes de tomar la muestra. En todos los casos debe actuar el antisptico durante un minuto, una vez que se ha descontaminado el sitio de la puncin no debe tocarse nuevamente con el dedo a menos que este haya sido desinfectado de igual manera o que se usen guantes estriles para hacer la puncin.
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La muestra debe tomarse con una jeringa de 5 ml, para pequeas especies y de 10 ml para grandes especies, aunque es preferible hacerlo directamente por medio de un aditamento especial con el cual pueden tomarse directamente en el frasco con el medio de cultivo. Los recipientes en que se toman las muestras directamente, deben colocarse por debajo del sitio de la puncin, para evitar el reflujo de la sangre. La aguja se introduce directamente en la vena, si esta se pierde o hay que efectuar una segunda puncin debe usarse una nueva aguja o un nuevo equipo para la toma de la muestra, estas precauciones deben tenerse en cuenta para reducir el riesgo de contaminacin de la muestra con flora normal de la piel. Las muestras deben mezclarse cuidadosamente e inmediatamente enviarla al laboratorio.

2.3.7 UROCULTIVOS
Materiales: Sondas estriles, catteres estriles, guantes, frascos estriles de boca ancha y alcohol yodado y antisptico. Recoleccin de la muestra: En general todos los animales para la toma hay que realizar un lavado riguroso de los genitales externos con el fin de remover los organismos contaminantes, se debe utilizar jabn y abundante agua limpia. En grandes especies la muestra de orina se puede recolectar por miccin limpia y debe ser de la mitad del chorro de la orina, la muestra se debe tomar en un frasco estril el cual no se debe destapar hasta el momento de la toma de la muestra, no tocar la boca de este y tomarla directamente en el frasco con una cantidad apropiada para el procedimiento de esta, enviar inmediatamente al laboratorio de lo contrario se debe refrigerar. Otros mtodos muy utilizados en pequeos animales son la utilizacin de sondas catter y puncin vesical, siendo esta ultima la ms utilizada. Despus de localizar la vejiga lavar y desinfectar, puncionar con jeringa estril y tomar aproximadamente 5 ml, y enviarla al laboratorio. El catter es considerado uno de los mejores mtodos pero no se ha tenido en cuenta que este puede introducir infecciones. La muestra por ningn motivo debe ser guardada en nevera ya que los cambios de temperatura afectan la viabilidad de los microorganismos. No recoger muestras del suelo porque estas llevan consigo bacterias contaminantes que se encuentran all y pueden llevar a un diagnstico errado. La muestra se debe mantener y preservar en el medio de transporte adecuado, se debe procesar inmediatamente llegue al laboratorio.

2.3.8 SUGERENCIAS EN CULTIVO BACTERIOLGICO DE LECHES


Materiales: Alcohol yodado y antisptico, tubos estriles con preservativo y nevera. Recoleccin de la muestra: Se lavan cuidadosamente los pezones con agua y jabn, se desinfectan con alcohol yodado y antisptico cada pezn, se eliminan los primeros chorros
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y se recolecta la muestra de cada cuarto individual en tubos estriles que contenga el preservativo. La muestra se debe preservar y mantener refrigerada mientras llega al laboratorio. Se debe tomar aproximadamente 10 ml de cada pezn.

Toma de muestra de leche en bovino

2.4 RECUENTO DE CLULAS SOMTICAS EN LECHE (RCS).


Materiales: Tubos estriles secos y nevera. Recoleccin de la muestra: Se lavan cuidadosamente los pezones con agua y jabn, se secan y se desinfectan con alcohol yodado luego se debe limpiar el extremo del pezn con una torunda de algodn empapada de alcohol al 70% ejerciendo presin sobre el esfnter externo para asegurar la salida de la suciedad y sustancias creas por el orificio. L a muestra debe llegar al laboratorio antes de las 2 horas, si no es posible se debe refrigerar hasta su procesamiento. Tambin en las primeras 24 horas de la toma de la muestra se puede agregar formalina lo que impedir la lisis de las clulas. Existe una variacin en los recuentos celulares segn el momento del ordeo, las muestras ms tiles son las obtenidas inmediatamente antes del ordeo del atardecer. Si las muestras se obtienen de un solo pezn bastara unos 30 ml de leche aproximadamente.

2.5 SUGERENCIAS EN LA TOMA Y ENVO DE MUESTRAS PARA UN ESTUDIO PARASITOLGICO


ste anlisis comprende: Endoparsitos, Ectoparsitos y Hemoparsitos.
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2.5.1 COPROLGICOS
Con guante o funda plstica introducir la mano en el recto del animal y estimular mediante masajes el esfnter anal.
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Recoleccin de material fecal en bovino a travs del recto

Cuando se haya obtenido la cantidad suficiente de materia fecal de 20 a 40 gramos, el guante es reversado hacia adentro. Si la muestra tardara ms de 2 horas en llegar al laboratorio, pasar una parte de la muestra a un recipiente con formalina al 10% y otra sin formalina, ni refrigeracin, especialmente cuando se desea investigar parsitos pulmonares (identificacin de larvas) y coccidias. Si la muestra puede llegar al laboratorio en menos de 2 horas, cerrar el guante o la funda. Identificar y enviar la muestra refrigerada. Cuando se quiera evaluar el estado de infestacin de un grupo de animales, deben tomarse muestras por edades. En este caso, se recolectaran pequeas muestras de heces tomadas al azar.

2.5.2 HEMOPARSITOS PARSITOS EN SANGRE

Enfermedad hemoparasitaria (Anaplasma) en bovinos

Enfermedad hemoparasitaria (Babesia) en bovinos

El sitio de puncin debe estar limpio; esto incluye, recorte de pelo, desinfeccin con solucin yodada por 2 veces y finalmente limpiar con alcohol. Tomar la muestra preferiblemente en estado febril y antes de tratamiento. La mejor muestra es de sangre capilar (Cola u oreja). Las placas para el extendido de sangre deben ser nuevas, libres de rayas y grasas.
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Los extendidos deben ser muy delgados para que los glbulos rojos queden separados y facilite la observacin de los hemoparsitos Los frotis deben protegerse de las moscas y rayos solares. Una vez secados los extendidos se envuelven en papel absorbente o papel higinico en placas separadas y se envan al laboratorio. Se recomienda recoger sangre con EDTA como anticoagulante a concentracin de 1 mgrs/ ml de sangre, esto con el fin de hacerle el hematocrito y conocer el estado de deshidratacin del animal. Tambin puede hacerse un montaje en fresco y hacer micro hematocrito para observar tripanosomas en movimiento. Rotular correctamente la muestra.

HEMOPARSITOS EXTENDIDO DE SANGRE PERIFRICA

2.5.3 ECTOPARSITOS - PARSITOS EXTERNOS.


Utilizando una gasa impregnada en glicerina y sostenida por una pinza, limpiar la zona, separando las costras poco adheridas y las escamas que se encuentren sobre o alrededor de la lesin que se va a investigar. Colocar una gota de glicerina o aceite mineral sobre un portaobjetos. Hacer un doblez en la piel del animal a nivel del rea sospechosa.
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Con la hoja de un bistur raspar la parte superior del doblez varias veces hasta lograr algo de sangrado en la zona. Transferir el material raspado a la gota de aceite o glicerina colocada sobre el portaobjeto.
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Colocar una laminilla (Cubre objeto) sobre el material a observar, y enviar al laboratorio. Tener en cuenta que los raspados se deben hacer cerca de los bordes de las lesiones activas, evitando incluir costras secas, pelos o lanas.

2.5.4 RECOMENDACIONES PARA EL ESTUDIO CULTIVO MICOLGICO EN PELOS


Materiales: Pinzas estriles, papel de aluminio nuevo, guantes, formato de laboratorio, tijeras, cajas de Pietri y mechero. Recoleccin de la muestra: Despus de sujetar al paciente para dicha toma, observe cuidadosamente la zona afectada y encontrar que algunos de los pelos se encuentra partidos, carentes de brillo, seleccione algunos de ellos y con la ayuda de una pinza arrnquelos si se trata de pelos que estn infectados en todo su recorrido, seleccione la zona ms infectada y con una pinza arranque algunos de ellos, tome la muestra en papel aluminio, caja de Petri, sllela con esparadrapo o cinta de enmascarar y envela al laboratorio. La muestra se debe mantener y preservar bien sellada y en un lugar libre de humedad y seco. La cantidad de la muestra debe ser representativa de acuerdo al examen solicitado. Para la identificacin se debe utilizar formatos especificando los datos correspondientes, es muy importante saber si el paciente ha estado en tratamiento con algn antibitico local o sistmico, ya que este puede inhibir el desarrollo fngico, por lo tanto es necesario suspenderlo 5 das antes de solicitar el servicio al laboratorio. De la recoleccin y transporte adecuado de las muestras depende el xito del proceso y confiabilidad de los resultados.

2.5.5 RECOMENDACIONES PARA EL ESTUDIO CULTIVO MICOLGICO


Materiales purulentos de lesiones cerradas: Algodn estril, jeringas y agujas estriles, guantes estriles, alcohol yodado, tubo tapa rosca estriles. Recoleccin de la muestra: De este tipo de lesiones es aconsejable que sea el mdico veterinario quien haga la puncin. Despus de sujetar el paciente para la toma de la muestra limpie cuidadosamente la zona afectada y su periferia con algodn empapado de alcohol yodado por tres veces, con la ayuda de una jeringa estril puncione el absceso y extraiga la cantidad necesaria del material, coloque el material en un tubo de ensayo estril tapa rosca preferiblemente, o en una jeringa haciendo uso del tapn. La muestra se debe mantener y preservar bien sellada en un lugar libre de humedad y seco o en la jeringa haciendo uso del tapn envela al laboratorio inmediatamente por no tener medio de transporte. El volumen de la muestra es de 1 a 2 ml de material aproximadamente.
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Material purulento de lesiones abiertas: Escobillones estriles, tubos tapa rosca con solucin salina, agua destilada y guantes. Recoleccin de la muestra: Estas lesiones pueden ser fistulas y lceras entre otras. Para obtener la muestra limpie la zona afectada con agua destilada estril, nunca use alcohol yodado porque este lesiona los tejidos y afecta los resultados de los cultivos. Despus de sujetar el paciente prosiga con un escobilln y de un sitio poco expuesto al ambiente, tome la muestra impregnando completamente el algodn con la misma, ponga el escobilln en un tubo tapa rosca que contenga solucin salina estril, la cual debe tapar por completo la parte del escobilln que contiene la muestra. El volumen de la muestra es algodn del escobilln completamente impregnado del material.

2.6 RECOMENDACIONES PARA EL ESTUDIO DE PATOLOGA


Diagnstico integral, comprende: Necropsia, histopatologa y aislamiento bacteriolgico. La muestra se considera cada especie bovino, equino, ovino, felino o porcino (mayor de 6 meses), o un grupo de animales (3 porcinos menores de 6 meses o 10 aves) de la misma edad y alojadas en el mismo galpn, preferiblemente animales vivos.

VIROLOGA

Cerebro hemorrgico en bovio y signos nerviosos. Conservar un fragmento en refrigeracin y otro en formol al 10%

Seleccin del especmen: Los siguientes son los parmetros para una adecuada remisin de los tejidos. Seleccione los tejidos con lesiones y muestras de rganos que tengan lesiones, si no hay evidencia de lesiones, seleccionar tejidos, rganos y sistemas que den cuenta de los signos clnicos del animal. Si no hay lesiones macroscpicas, ni signos de una enfermedad especifica, se toma la muestra de varios rganos Ocasionalmente se enva el animal completo de especies menores y vivos para patologa.
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Una muestra inapropiada bien sea por mala fijacin, mala escogencia en las muestras que se envan, lisis en los rganos no permite llegar a un diagnostico correcto. Manipulacin de los tejidos: La manipulacin de los tejidos debe ser cuidadoso y delicado.
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Fijacin de los tejidos en formol al 10%. Es importante incluir partes normales del rgano enviado. El alcohol no es un sustituto del formol como tampoco lo son el agua o la congelacin. Los fragmentos enviados deben tener un espesor mximo de 0.5 centmetros. La relacin tejido formol es de 10 a 1. Los recipientes deben ser de boca ancha y en lo posible plsticos. Empacar las muestras con el formol lo ms pronto posible despus de la remocin. Colocar los especmenes de diferentes sitios anatmicos en frascos separados y con el fijador adecuado. Marcar cada frasco con la relacin del sitio anatmico de la muestra. Hacer una lista de las muestras enviadas y descripcin de cada una (Forma, color, aspecto, tamao y otros). Consistencia, tamao, distribucin de las lesiones y relacin con el sitio anatmico. Llenar el formato con la resea completa, se requiere de la informacin esencial y pertinente de una manera concisa.

Cabeza de bovino con mdula

Tallo cerebral con mdula oblonga

Obex con tallo enceflico

Mdula oblonga en formalina al 10%

TRANSPORTE, ENVO Y CONSERVACIN DE TEJIDOS

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Transporte y conservacin de tejidos separados en refrigeracin y formol al 10% para identificacin de patgenos y lesiones, se adjunta protocolos
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2.7 RECOMENDACIONES PARA EXAMEN DE CITOLOGA


Se realiza a partir de improntas de tejido o extendido de lquidos corporales en laminas portaobjetos para estudios preliminares de lesiones tisulares y observacin de agentes infecciosos. Envi: Pueden fijarse de dos maneras: Fijador lquido que puede ser alcohol absoluto, isopropanol, etanol o alcohol al 96%. Fijacin al aire. Marcar las placas por el sitio donde se hizo el extendido. Diligenciar muy bien la historia clnica. Resultados: Los informes de patologa son ledos por patlogos veterinarios y en ellos se incluye: Descripcin. Diagnostico. Notas o comentarios. Notas: El procesamiento de las muestras en el laboratorio de patologa una vez estn fijados los especmenes es largo por lo cual los resultados pueden entregarse en un lapso de 4 a 10 das hbiles. El tiempo mximo para la entrega de resultados de citologa es de 48 horas.

2.8 PROCEDIMIENTO FRENTE A UNA PATOLOGA (ENFERMEDAD) EN UN PREDIO


Notificacin Puede ser realizada por: el propietario, un tercero o vigilancia oficial Se debe recolectar la mayor informacin posible del predio. Preparacin del material Prepare el material y equipo para la atencin del caso. Visita a la finca:
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Comience diligenciando el protocolo del caso a atender, trate de definir el origen del problema y los riesgos de difusin segn la informacin recolectada.

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Examen clnico de los animales. Comience inspeccionando los animales sanos o aparentemente sanos, observe sntomas y signos clnicos de todos los animales y obtenga un DIAGNSTICO PRESUNTIVO, de lo que est sucediendo en la finca. Si el caso lo amerita y si es posible contine con los siguientes pasos. Toma de muestras Tome muestras recientes, suficientes y adecuadas segn el nmero de animales afectados o un porcentaje de los animales del hato. Limpieza y desinfeccin Limpie y desinfecte antes y despus de la toma de la muestra los elementos, equipo y lugar donde se tomo la muestra. Cambie la ropa utilizada en el procedimiento Envo de muestras al laboratorio. o o o o Use recipientes y medios de conservacin adecuada. Rotule cada muestra Anexe el protocolo, o la informacin del caso. Confirme con el laboratorio si las muestras llegaron y en qu estado.

Diagnstico del laboratorio Los resultados reportados en el laboratorio, son una herramienta fundamental para la toma de decisiones. Vigilancia y seguimiento epidemiolgico. Consiste en recolectar la mayor informacin concerniente a la presentacin de la enfermedad y sus anlisis para la toma de acciones en su prevencin, control o erradicacin. Es una herramienta bsica para la planificacin del hato. Ante un caso proceda de la siguiente forma: Identifique las fuentes de infeccin Biolgicas (insectos, roedores y otros) y mecnicas (vehculos, agujas, utensilios en general). Priorice los factores de riesgo que facilitaron su presentacin. Determine el rea de riesgo focal (finca o predio) y peri focal (predios alrededor donde se presento la enfermedad). Plantee recomendaciones para la prevencin, control y erradicacin de la enfermedad.
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SIEMPRE REALIZAR EL DIAGNSTICO DE CUALQUIER ENFERMEDAD, EN FORMA POBLACIONAL

2.9 EQUIPO BSICO EN OFICINAS DE SANIDAD PARA LA TOMA DE MUESTRAS PECUARIAS.


Balde Botas Cinta elstica Cinta para rotular (Enmascarar). Formol Guantes de caucho Hisopos Mangas desechables Pinzas de diseccin Protocolos Termmetro Tijeras
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Bolsas plsticas Cepillo de cerdas Cinta indicadora de pH Desinfectante Frascos de boca ancha Glicerina tamponada Jeringas desechables Nariguera Portaobjetos Soga o lazo Termos plsticos Toallas desechables

Tubos vacutainer (Tubos al vacio) con y sin anticoagulante Observacin: Es importante estar verificando el estado de los instrumentos y medios de conservacin para la toma de las muestras.
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Tabla 1. MUESTRAS PARA EXAMENES BACTERIOLGICOS


MEDIO Jeringas o Recipiente estril Recipientes estriles Recipiente con Tioglicolato. Refrigeracin Refrigeracin Refrigeracin CONSERVACIN OBSERVACIONES Lavado y desinfeccin de rea donde se va a puncionar. No congelar Muestras por separado de cada tejido ---

ENFERMEDAD

MUESTRA (S)

Septicemia Bacteriemia

Sangre con Anticoagulante (EDTA) Hemocultivo. Fragmentos de rganos: (bazo, hgado, Riones, ganglios linfticos

Carbn Sintomtico

Lquidos de tejidos de los msculos afectados.

Carbn Bacteridiano ntrax

--Refrigeracin Refrigeracin

--No hacer necropsia. (Zoonosis). --No haber tenido tratamientos con antibiticos en los 8 das anteriores.

Impregnar tiza, algodn, o material absorbente Recipiente estril limpio con sangre o lquido de orificios naturales. Enviar oreja desde la base. Bolsa plstica Recipiente esteril. Antes de las 24 horas

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Mastitis

Leche del cuarto (s) afectado(s).

Recipiente: Frasco, tubo estril o cuando se especifique se puede usar bolsa plstica estril.

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ENFERMEDAD Recipiente o bolsa plstica estril. Refrigeracin Refrigeracin Refrigeracin Refrigeracin Tubos con medio nutritivo Caryblair Tioglicolato. Recipiente estril. Recipiente estril con medio BHI

Enteritis

Infertilidad

Problemas Renales

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Enfermedades Hdricas

NOTA: El laboratorio prefiere preparar los extendidos a partir de los tejidos enviados

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Tabla 1. MUESTRAS PARA EXAMENES BACTERIOLGICOS


MEDIO CONSERVACIN OBSERVACIONES Tomar directamente del recto. No tomar muestras del suelo. Previo lavado del rea prepucial. Previo lavado de la zona vaginal

MUESTRA (S)

Materia fecal para Coprocultivo.

Hisopos estriles.

Semen.

Secreciones vaginales

Enviar 20-30 mililitros de orina, tomar por sonda puncin vesical. Recipiente estril

Refrigeracin

Enviar inmediatamente. Previo lavado con agua y jabn de las zonas. Enviar inmediatamente.

Uro cultivo. Recipiente estril Refrigeracin

Enviar 100 mililitros de agua

Tomar muestras de diferentes sitios.

Tabla 1. MUESTRAS PARA EXAMENES BACTERIOLGICOS


MEDIO Recipiente estril Refrigeracin CONSERVACIN OBSERVACIONES Precaucin Zoonosis

ENFERMEDAD

MUESTRA (S)

Listeriosis

Fragmentos de: Encfalo, hgado, rin Bazo. Carne.

sangre, leche y orina Recipiente estril Recipiente estril Refrigeracin Refrigeracin Precaucin Zoonosis Transporte inmediato

Salmonelosis

Ganglios linfticos mesentricos, bazo, pulmn e hgado

Ttano

Exudado del rea afectada (Herida)

Tuberculosis

Ganglios tracto respiratorio mesentricos y/o mamarios. Recipiente con cido brico al 1%.

Refrigeracin

Precaucin Zoonosis

Secreciones, leche. Recipiente estril Recipiente bolsa plstica estril Recipiente estril Refrigeracin Refrigeracin Refrigeracin Previo lavado rectal

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Pasteurelosis

Fragmentos de: pulmn, bazo, hgado, sangre con anticoagulante

Paratuberculosis

Raspado de la mucosa intestinal

Exudado - trasudado

Secreciones lquidas

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ENFERMEDAD Refrigeracin o Congelacin (Sueros).

Leucosis, IBR, DVB, EEV, Neosporosis y otras. Refrigeracin o Congelacin.

Aislamiento de Virus Recipiente estril con Refrigeracin o glicerina tamponada o congelacin. Solucin saturada de azcar Jeringa Congelacin

Enfermedades vesiculares

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Rabia bovina

NOTA: En general para enfermedades virales enviar: Sangre, cerebro, ganglios linfticos, hgado, bazo, tonsilas o amgdalas, rin, pulmn; siempre por separado y congelado. Igualmente se puede usar el medio de Hanks, glicerina tamponada ms antibiticos. IBR: Rinotraquitis Infecciosa Bovina, D.V.B: Diarrea Viral Bovina y E.E.V: Encefalitis Equina Venezolana

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Tabla 2. MUESTRAS PARA EXAMENES DE VIROLOGA


MEDIO CONSERVACIN OBSERVACIONES Buscar ttulos de Anticuerpos. Historia de vacunacin. Evitar hemlisis Transportar Inmediatamente. Transporte inmediato

MUESTRA (S)

10 mililitros de sangre sin Recipiente estril Anticoagulante (Suero).

Tejidos, lquidos con antibiticos (Penicilina y/o Recipiente estril Estreptomicina).

Epitelio mamario, padal y/o lingual.

Liquido vesicular.

Transporte inmediato Transporte inmediato Precaucin de bioseguridad. Zoonosis.

Cerebro entero o la cabeza del animal que muri.

Recipiente hermtico (bolsa Refrigeracin plstica) Congelacin

Tabla 3. MUESTRAS PARA EXAMENES DE HISTOPATOLOGA


MEDIO Frascos de boca ancha Bolsa plstica frasco Sin preservativos Formol tamponado al 10% y cubrir toda la muestra. CONSERVACIN OBSERVACIONES Corte de 1 a 2 cm de espesor. Muestras individuales

ENFERMEDAD

MUESTRA (S)

Alteracin Patolgica (Neoplasias Tumores).

rgano(s), tejido sano y afectado

Papilomas Verrugas (Autovacunas)

10 gramos de papiloma

Tabla 4. MUESTRAS PARA EXAMENES DE PARASITOLOGA (PARSITOS INTERNOS)


MEDIO Frascos, bolsas plsticas limpias y secas. CONSERVACIN OBSERVACIONES Refrigeracin o adicionar Tomar del recto. 1 ml de formol al 10%.

ENFERMEDAD

MUESTRA (S)

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Parsitos Gastrointestinales y Fasciola Heptica.

10 gramos de materia fecal.

Parsitos Pulmonares y Protozoarios (Balantidium), Coccidia.

10 gramos de materia fecal fresca

Frascos o bolsas Plsticas No utilizar refrigeracin ni Tomar del recto. Transporte limpias y secas. preservativos inmediato.

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Tabla 5. MUESTRAS PARA EXAMENES DE ECTOPARSITOS (PARSITOS EXTERNOS)


MEDIO Frasco estril de boca ancha. Papel o porta objetos No usar preservativos Adicionar 1-2 ml de glicerina o aceite. CONSERVACIN OBSERVACIONES Tapar hermticamente Raspado del rea perifrica de la lesin.

ENFERMEDAD

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MUESTRA (S)

Sarna

Raspado profundo de la piel.

Dermatofitos (Hongos).

Raspado de piel, folculos pilosos (pelos).

NOTA: Para anlisis de productos garrapaticidas, enviar garrapatas vivas en frasco tapado y con orificios en la tapa y para la identificacin o clasificacin, enviar en recipientes con alcohol etlico al 70%.

Tabla 6. MUESTRA PARA ELECTROLITOS (IONOGRAMAS)


MEDIO Frasco estril CONSERVACIN Refrigeracin OBSERVACIONES Transporte inmediato

ITEM

MUESTRA (S)

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Ionogramas calcio, sodio, potasio y pH

Suero plasma

Tabla 7. MUESTRAS PARA EXAMENES DE HEMATOZOARIOS (PARASITOS EN SANGRE)


MEDIO CONSERVACIN OBSERVACIONES Preferiblemente animal en estado febril y sin tratamientos.

ENFERMEDAD

MUESTRA (S)

Babesia Anaplasma y Tripanosoma Tubos estriles Tubos estriles

Frotis de sangre perifrica Extendidos (oreja -cola) y sangre con delgados en anticoagulante (EDTA). portaobjetos. Congelacin del suero Refrigeracin. No congelacin.

No refrigeracin, transporte en seco fijar placas con alcohol metlico por 3 minutos.

10 ml de sangre sin anticoagulante. (Suero).

Prueba de Elisa para cada hemoparsito. Transporte inmediato. Validar parmetros con la clnica del animal.

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Hemograma Completo

Sangre con anticoagulante EDTA.

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Tabla 8. MUESTRAS PARA EXAMENES DE ENFERMEDADES REPRODUCTIVAS


MEDIO CONSERVACIN OBSERVACIONES

ENFERMEDAD

Tricomoniasis

Campilobacter (Vibrio Foetus)

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Brucelosis, Leucosis I.B.R, D.V.B, 10 mls. Sangre sin Leptospirosis anticoagulante (sueros) Anemia Infecciosa Equina, Neospora y otras. Tubos estriles secos

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MUESTRA (S) Solucin salina fisiolgica o Ringer lactato. No refrigerar y evitar rayos solares.

Lavado prepucial con Frasco oscuro estril. 100 ml. de solucin salina No refrigerar. fisiolgica.

Buen lavado. Estimular miccin antes de la toma Enviar inmediatamente Descanso sexual por 8 das, previo a la toma

Esmegma prepucial. (raspado prepucial).

Frasco oscuro estril Refrigeracin.

100 ml. solucin salina fisiolgica con Tioglicolato. Refrigeracin

Estimular miccin antes de la toma. Enviar inmediatamente Previo a la toma haber estado en descanso sexual por 8 das.

Refrigeracin

Buscar ttulos de anticuerpos en animales no vacunados. Historia de vacunaciones Evitar hemlisis

Tabla 9. MUESTRAS DE QUMICA SANGUNEA PARA ENFERMEDADES METABLICAS


MEDIO CONSERVACIN OBSERVACIONES Separar sueros para evitar degradacin. Medicin de los niveles en sangre de estos parmetros. Frascos estriles Refrigeracin Transporte inmediato Tener en cuenta estado fisiolgico del animal. Anexar historia clnica.

PRUEBA

MUESTRA (S)

Enzimas: ALT GPT AST GOT ALP, Glucosa, Urea, Colesterol total, Creatinina, Protenas Sricas Totales, Albumina, Bilirrubina Total.

10 ml de sangre sin anticoagulante (Suero)

ALT o GPT: Alamina aminotransferasa o Transaminasa glutamico pirvica, AST o GOT: Aspartato aminotransferasa o transaminasa oxaloacetica, ALP: Fosfatasa alcalina

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Tabla 10. MUESTRAS DE BIOLOGIA MOLECULAR PCR (Reaccin de la Polimerasa en Cadena)


MUESTRA (S) MEDIO 2 Pajillas o ampolletas Frasco estril CONSERVACIN Congelacin Refrigeracin OBSERVACIONES

ITEM

Genotipificacin de la Kappa Casena

Semen

Sangre con anticoagulante (EDTA)

Determinacin de la presencia del Gen AA, AB, BB.

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Fosforados Orgnicos y Carbamatos

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Tabla 11. MUESTRAS PARA EXMENES DE TOXICOLOGA


MUESTRA (S) Sangre con anticoagulante, orina, hgado, rin, lavado gstrico. Frasco estril Refrigeracin Alimento, contenido estomacal, hgado, rin y orina. Frasco estril Frasco estril Frasco estril Hgado y rin. Orina, hgado y rin. Pelo, contenido gstrico, orina Frasco estril y rin. Alimento, contenido ruminal. Frasco estril Congelacin o refrigeracin Refrigeracin Refrigeracin Refrigeracin Refrigeracin MEDIO CONSERVACIN OBSERVACIONES

ITEM

Urea

Mercurio

Plomo

Todas estas muestras deben empacarse por separado y transportarse de inmediato.

Talio

Cianuro

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OBSERVACIN: En tejidos se debe enviar por separado una cantidad no inferior a 100 gramos.

Tabla 11. MUESTRAS PARA EXMENES DE TOXICOLOGA


MUESTRA (S) Frasco estril Frasco estril Frasco estril Frasco estril Frasco estril MEDIO CONSERVACIN Refrigeracin Refrigeracin Refrigeracin Refrigeracin Refrigeracin Todas estas muestras deben empacarse por separado y transportarse de inmediato. OBSERVACIONES

ITEM

Clorados

Contendo estomacal, Sangre, orina, crebro, Grasa mesentrica e hgado.

Warfarinas

Sangre sin anticoagulante, hgado, contenido gstrico.

Mico toxinas

Alimento, hgado y riones.

Amonaco

Sangre con anticoagulante (EDTA), suero, orina, contenido ruminal.

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Colinesterasa

Cerebro, suero.

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3. DIAGNSTICO AGRCOLA

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3.1 FACTORES BSICOS EN LA TOMA Y ENVO DE MUESTRAS AGRCOLAS


El xito en el manejo de una plaga o enfermedad depende de su identificacin correcta y oportuna; por lo tanto, cuando no se define a tiempo y correctamente el agente causal de un problema fitosanitario, se pierde tiempo en su manejo y se aumentan los costos de produccin en los cultivos. Por lo cual toda muestra debe cumplir con unos requisitos mininos que son: 1. Calidad de la muestra 2. Cantidad de la muestra 3. Tiempo en la ruta crtica de la muestra

3.1.1 CALIDAD DE LA MUESTRA


La muestra debe ser fresca y seleccionada de plantas o de las estructuras de estas que presenten la afeccin en diferentes estados de evolucin. La muestra debe ser tomada en los primeros estados de la enfermedad o aparicin del problema, para evitar contaminacin, principalmente por bacterias, hongos o insectos secundarios. El material a enviar debe ser limpio, sin desinfectantes, no contaminado, ni con otros productos que permitan alterar la muestra. Al enviar una muestra, se debe proteger para que no se reseque o dae por calor, no es posible hacer diagnsticos correctos sobre muestras marchitas, maltratadas o en estado avanzado de descomposicin, esto conduce a diagnsticos errneos.

Tome las muestras a media maana o media tarde cuando la intensidad del sol no sea muy fuerte, evite tomar muestras inmediatamente despus de una lluvia o de aplicar algn producto por va foliar. Toda muestra debe ser remitida con la mayor informacin posible, ya que los datos all consignados son vitales para un buen diagnstico y una buena recomendacin.
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3.1.2 CANTIDAD DE LA MUESTRA


La cantidad necesaria es variable segn el tipo y fraccin del cultivo de que se trate. Muestra: Es el material biolgico tomado de las lesiones que ocasiona una enfermedad o plaga, que permite al laboratorio identificar su causa. La muestra vegetal puede estar constituida por hojas, frutos, tallos, races, si las plantas son de gran tamao se toma parte del tejido afectado del rgano correspondiente y si son plantas pequeas en lo posible enviar la planta completa y varias de ellas en las que se pueda observar diferentes estados de avance de la enfermedad o plaga. La muestra, debe estar constituida de tejidos u rganos tanto de las partes sanas como de las enfermas. Tome un nmero suficiente de plantas que sean representativas del lote en estudio. Traslade la muestra al laboratorio el mismo da que la tome, de lo contrario mantngala en refrigeracin para evitar que el tejido se deteriore se formen hongos, es recomendable que se manejen las muestras en bolsas de papel. Comunquese al laboratorio antes de muestrear o Consulte la gua respectiva.

3.1.3 TIEMPO EN LA RUTA CRTICA DE LA MUESTRA


Es el tiempo transcurrido entre la toma de la muestra y la entrega de los resultados del laboratorio. Es un tiempo controlado por el hombre, aumentndolo o disminuyndolo, entre ms corta sea esta ruta se obtendr un diagnstico mas oportuno y eficiente para el manejo del problema fitosanitario. Factores que intervienen: Deteccin del problema Toma de muestras Envo de muestra al laboratorio Recibo de muestras en el laboratorio Proceso de muestra en el laboratorio Resultado de laboratorio El protocolo debe ser diligenciado correctamente, sin omitir datos que puedan ser tiles para el diagnstico y recomendacin

3.2 TOMA DE DIFERENTES TIPOS DE MUESTRAS


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Debido a la gran diversidad de sntomas que se pueden presentar a nivel de campo en los diferentes cultivos, se hace necesario realizar muestreos diferenciales, los cuales son planteados a continuacin.
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La parte a muestrear depende del cultivo y etapa de desarrollo del mismo.

3.2.1 PLANTAS GRANDES


Por su gran tamao, se hace necesario enviar las partes afectadas que sean ms representativas Races Se debe enviar cuando se sospeche dao por nemtodos, hongos del suelo, bacterias o por insectos que atacan races. La sintomatologa se puede presentar como quemazn en las puntas de las hojas, defoliacin, marchitez, clorosis, enanismo, agallas, ndulos o presencia de insectos a nivel de raz. Envi la muestra acompaada de raicillas, enviar suelo y los insectos que se encuentren presentes en frascos con suelo. Hojas Cuando se observen manchas foliares, deformacin de las hojas, engrosamiento de venas, agallas, aclaramiento de venas, ampollas, clorosis, corte de hojas, raspaduras y perforaciones. Flores, yemas y ramas Presencia de superbrotamientos, estrangulamiento de tallos o ramas, cncer o callosidades, perforaciones, cada de estructuras. Frutos tubrculos y bulbos Presencia de manchas, pudriciones, roas y perforaciones. Este material se debe dejar secar, se recomienda no recoger los frutos del suelo, se prefiere material de la planta que presente la sintomatologa.

3.2.2 PLANTAS PEQUEAS


Lo ideal es colectar la planta completa, seleccionando dos o tres plantas para su envo al laboratorio. Se debe guardar en una bolsa plstica, envolviendo la parte area en papel absorbente, para que en el transporte no se contamine con el suelo.

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4. DIAGNSTICO DE DAOS CAUSADOS POR INSECTOS PLAGAS (DIAGNSTICO ENTOMOLGICO)


Consiste en determinar el insecto que por su comportamiento o sus hbitos causa un dao directo o indirecto en la produccin (calidad o cantidad) de una especie vegetal de inters para el hombre. Luego de que se ha identificado el insecto que esta causando el dao se procede a dar las recomendaciones, que consisten en seleccionar los diferentes componentes de manejo que se deben realizar para disminuir la incidencia de stos en el cultivo. Una adecuada recomendacin se fundamenta no solo en la identificacin del insecto sino que es necesario el anlisis de las condiciones en que se presenta el problema, en especial el manejo del cultivo y las interacciones planta - insecto - organismos benficos - condiciones agroclimticas, es decir, se requiere de un anlisis integral que conlleva a un acertado juicio sobre la causa del problema y los factores que lo favorecen. Es de suma importancia tener presente que para tomar la decisin del envi de una muestra al laboratorio, no se debe esperar hasta que todo el cultivo presente los sntomas del deterioro, dado que en estos casos se logra realizar la determinacin del causante del dao pero es muy complicado recuperar los cultivos o plantaciones.

4.1 PROCEDIMIENTO GENERAL DE DIAGNSTICOS ENTOMOLGICOS


Cuando un cultivo presenta daos causados por insectos es necesario realizar una observacin detallada de las estructuras vegetales, esto debido a algunas caractersticas especiales de los insectos como: a. Tamao pequeo (que en muchos casos es imperceptible al ojo humano). b. Capacidad de movimiento. c. Diferentes estrategias de defensa (que van desde quedarse quietos, huir de la planta al sentir peligro o inclusive camuflarse o sea parecerse a las estructuras de la planta que estn consumiendo). d. Hbitos nocturnos o diurnos. e. Alimentarse de estructuras vegetales internas o a nivel radical. Estas caractersticas hacen que los insectos, que estn causando el dao puedan pasar desapercibidos o no se encuentren en el tejido al momento de tomar la muestra. Por esto en un laboratorio de diagnstico vegetal se presentan dos tipos de situaciones con las muestras entomolgicas enviadas, la primera, cuando el insecto causante del dao se encuentra presente y la segunda cuando el dao se observa pero el insecto causante no se encuentra.

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4.1.1 ESTRUCTURA AFECTADA SIN PRESENCIA DEL INSECTO CAUSANTE


Este es un tipo de muestra comn. Para obviar esta situacin se sugiere recoger todo material representativo del problema en el campo.

Para el caso de plantas de PORTE BAJO (plantas pequeas) enviar de 2 a 3 plantas completas y para plantas de gran tamao enviar las estructuras o partes de la planta que muestren los sntomas ms caractersticos en los diversos estados de desarrollo del problema.

Es bsico realizar una observacin detenida de las plantas para tratar de buscar y capturar los insectos asociados al problema, para esto se puede entrar al cultivo y quedarse un tiempo quieto, para que los insectos reinicien su actividad, igualmente sacudir fuertemente la planta colocando en la parte baja de la misma una hoja blanca grande, una carpeta o algo similar que facilite la recoleccin de los insectos que caigan para su envo al laboratorio.

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4.1.2 REA LESIONADA Y PRESENCIA DEL INSECTO CAUSANTE


Es la muestra ideal dado que a travs de la determinacin o identificacin del insecto se establece el agente causal del problema. En este caso, se debe procurar enviar el mayor nmero de insectos adultos o larvas (gusanos) y la parte de la planta que presenta la lesin.

4.2 COMO ENVIAR MUESTRAS QUE CONTENGAN INSECTOS


Adultos Se deben depositar en frascos con alcohol comercial al 70%, el recipiente debe quedar lleno, bien tapado y sellado con cinta. Los insectos guardados en alcohol, pueden quedar en un lugar fresco por varios das. Pero debemos tener presente que entre ms rpido se enven al laboratorio con toda la informacin, ms pronto se obtendrn los resultados y las recomendaciones del caso.

Las mariposas, polillas o insectos de cuerpo delicado no se deben depositar en frascos con alcohol ni manipular demasiado, para stos se trabaja en empaques transitorios que consiste en hojas de papel, cartulina o papel mantequilla, dobladas en forma de triangulo. En cada una coloque un solo ejemplar.

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Larvas (gusanos) y ninfas.

Depositar en frascos con alcohol al 70%. Si el nmero de larvas o ninfas es alto, se deposita una parte en un frasco con alcohol y el resto en otro frasco con el substrato o material de donde se encontr. Esto permite hacerles a los insectos vivos un seguimiento en cmaras de cra, encontrndose en muchos casos sus enemigos naturales ya sean parasitoides u hongos entomopatgenos.

Para recolectar muestras de insectos que atacan frutos como por ejemplo moscas, recoja las frutas puede constatar la presencia de larvas, pero evite enviar las frutas partidas. Puede observar primero las frutas cadas que posean larvas de mayor tamao y prximas a empupar, estas frutas se depositan en bolsas o frascos con un poco de aserrn, suelo o papel. Cuando las frutas tienen tejidos suculentos (muy acuosos) deposite una buena cantidad de aserrn o papel para evitar que los jugos de la fruta produzcan encharcamiento en la bolsa o frasco. Pupas

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Se depositan en frascos con aserrn y con sustrato o material (tierra u hojarascas) de donde se encontr. No las deposite en alcohol porque se necesitan vivos para hacerles seguimiento en cmaras de cra, hasta obtener adultos, los cuales pueden ser identificados mas fcilmente.

4.3 MUESTRA PARA DETERMINAR ORGANISMOS BENFICOS EN INSECTOS


Los insectos estn en continua relacin con todo lo que los rodea, presentndose una gran cantidad de interrelaciones que regulan sus poblaciones como factores abiticos y biticos. Los factores biticos como hongos, bacterias, virus, parasitoides, depredadores, etc, pueden ser algunas veces detectados en el campo por algunas sintomatologas tpicas que presentan y pueden llegar a constituirse en herramientas para el manejo de los insectos plagas.

CARACTERSTICAS A NIVEL DE CAMPO


Manifestaciones visibles: o Estructuras extraas (crecimiento micelial o esporulaciones) sobre el cuerpo del insecto, insectos muertos momificados, muerte con flacidez en los tejidos y olores ftidos. o Cambio en el comportamiento comn de los insectos: como dificultades en el vuelo, movimientos lentos, disminucin de las posturas, disminucin y suspensin de la alimentacin.

4.3.1 MUESTRAS A ENVIAR AL LABORATORIO


Se debe recolectar la mayor cantidad de insectos, tanto los que se sospecha estn enfermos o tienen los sntomas y signos especficos como los que estn aparentemente sanos.
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Este material se debe enviar al laboratorio en el medio donde se encontr (suelo, hojas, troncos, etc.) o en frascos con tul o una tapa perforada, que garanticen la llegada de los insectos vivos al laboratorio, se deben transportar lo ms rpido posible. Si los insectos se encuentran muertos se envan en frascos sin adicionar ninguna sustancia.
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Nmero de especmenes a enviar El nmero ideal es de 10 especmenes.

Horas de recolecta Depende de la actividad particular de cada insecto (hbitos) de manera muy general para los insectos diurnos a partir de la 10 de la maana y para los de hbitos crepusculares y nocturnos a partir de la 6 de la tarde. Sin embargo hay que tener en cuenta que las condiciones ambientales como lluvias, vientos excesivos, granizadas, bajas temperaturas, entre otros, pueden reducir la actividad de muchos insectos, lo que hace difcil visualizarlos y recolectarlos.

4.4 EQUIPOS DE RECOLECCIN DE INSECTOS


o o o o o Red entomolgica o jamas (insectos que saltan o vuelan) Bolsas plsticas claras para facilitar ver los insectos capturados. Frascos letales u otros materiales letales (alcohol, agua caliente, acetato de etilo) Frasco aspirador o de succin Carpeta de recoleccin (hojas de papel, cartulina, costales, etc) se utiliza para los insectos que se encuentran en rboles y arbustos en vez de utilizar la jama, se utiliza por comodidad. Esta consiste en un retazo de lona o tela de 50 x 60 cms aproximadamente de color blanco. Este debe tener dos ejes diagonales de soporte que pueden ser varillas de alambre o madera; se coloca debajo de la rama con el objeto de que los insectos caigan. Por ltimo se realiza la recoleccin manual o con el tubo aspirador, segn el caso. Cribas o angeo (Esto sirve para insectos que viven dentro del suelo o deambulan por la superficie) Trampa de cada Embudo de berlese Trampa de luz Cebos trampas Trampas especficas
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o o o o o o

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Instrumentos de muestreo Empaques transitorios: estos se utilizan cuando se trata de recolecciones o muestras muy abundantes, son los adecuados para guardar mariposas o liblulas. Palas de jardinera: esta es muy til para captura de insectos subterrneos Pinzas: ms usado en laboratorio o para manipular insectos que pueden causar picaduras o mordeduras. Papel absorbente Bolsas plsticas Tijeras podadoras o machete Lpiz para el marcado de la muestra

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Tabla 12. SNTOMAS MS COMUNES ENCONTRADOS EN PLANTAS ASOCIADOS A DAOS POR INSECTOS O ARTRPODOS.
SNTOMAS AGENTE CAUSAL caros Salta hojas Larvas de moscas Gusanos Perlas de Tierra caros Thrips Moscas Insectos ESTRUCTURA VEGETAL DONDE SE UBICA Hojas Tallos Races Raz y suelo alrededor de estas. TOMA DE MUESTRA OBSERVACIONES

Agallas

Estas se envan envueltas en Recolectar hojas, tallos y papel absorbente y en una races con sintomatologa bolsa plstica. Los insectos que se encuentren se empacan en frascos con alcohol y si son numerosos se envan en el sustrato o estructura afectada.

Ndulos y agallas en races

Recolectar races y suelo

Torcimiento

Hojas, Recolectar todas las En el formulario enfatice Ramas Tallos, estructuras con la labores culturales, factores Cogollos sintomatologa ms tpica. ambientales y de manejo Tallos Frutos Recolectar las estructuras sintomatologa toda Enfatice humedad del suelo, con condiciones ambientales y de manejo

Edema

Roa

caros

Frutos

Se deben recolectar muchos frutos con esta No tome muestras en avanzado sintomatologa. No se estado de descomposicin. recomienda recoger las muestras del suelo. Si las plantas son de gran tamao, se seleccionan las partes de tallo, frutos o races afectadas. La muestra se debe acompaar con partes de las plantas sanas y enfermas. Si son plantas pequeas, se seleccionan dos o tres plantas completas. Hojas realizar observacin detenida una Tenga presente que este tipo de sntoma, puede obedecer a afecciones en las races o en la base del tallo. Por lo cual debe revisar la presencia de lesiones o agallas que puedan tener la raz, el tronco o las ramas. Esta sintomatologa se observa generalmente cuando el problema ha avanzado mucho. Se requiere el uso de jama o red entomolgica. Revisar el sistema de races.

Marchitez Muerte repentina

Larvas de cucarrones Perlas de tierra Larvas de Mariposas

Races Tallos Ramas Hojas

Parches, calvas en potreros

Chinches, chizas o morrongos y saltahojas caros Thrips Chinches Deficiencia nutricional

Hojas Cuello de raz

Clorosis o pigmentaciones foliares

Hojas

Envolver en papel absorbente Por lo general son insectos de y luego meter en bolsas tamao pequeo. plsticas

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SNTOMAS

AGENTE CAUSAL caros, Thrips y otros insectos

ESTRUCTURA VEGETAL DONDE SE UBICA Hojas

TOMA DE MUESTRA

OBSERVACIONES

Hojas encrespadas o torcidas

Estas se envan envueltas en Resaltar prcticas culturales, y papel absorbente y en una condiciones climticas bolsa plstica. La muestra se enva igual que las de muerte repentina. Se recomienda no recoger los Resaltar prcticas culturales frutos del suelo, se prefiere material del rbol que presente la sintomatologa Plantas pequeas En plantas pequeas recolecte una o dos plantas con diferente estado de desarrollo del problema. Plantas de porte alto recolecte una porcin de cada estructura enve muestra de las diferentes partes de la planta (raz, ramas, hojas) La mayora de los insectos que causan este problema son de hbitos nocturnos Empaque por separado la raz y el suelo de tallos, ramas y hojas. Algunos de los insectos causantes se pueden quedar quietos o camuflarse con el tejido vegetal.

Estructuras perforadas

Gusanos Termitas

Tubrculos Tallos Ramas Frutos

Plantas cortadas a ras de suelo

Gusanos

Tallos

Defoliaciones

Larvas de mariposas Larvas de cucarrones

Races Tallos Ramas Hojas

Flores abortadas Muerte del cogollo

Polinizacin deficiente Larvas de moscas Condiciones ambientales extremas Cucarrones pequeos a menudo de colores brillantes. Gusanos Hormigas Grillos Chinches

Flores

Estas se envan envueltas en papel absorbente y en una bolsa plstica. Se envan flores, cogollos y Especifique condiciones ramas climticas de la zona (lluvias, veranos prolongados, vientos fuertes)

Hojas con agujeros pegadas tatuadas o con minas

Hojas

Estas se envan envueltas en papel absorbente y en una bolsa plstica.

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Estos sntomas pueden ser causados por otros organismos como hongos, bacterias, micoplasma, virus, nematodos o problemas abiticos ver diagnstico de daos causados por enfermedades.

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5. DIAGNSTICO DE DAOS CAUSADOS POR ENFERMEDADES (DIAGNSTICO FITOPATOLGICO)


5.1 DIAGNSTICO DE LA ENFERMEDAD
A continuacin se presentan una serie de sntomas tpicos, para los cuales se determinan algunos de sus agentes causales en orden de importancia. Entre parntesis se indica como clave la primera letra de las siguientes causas: Hongo(H), Bacteria(B), Micoplasma(M), Virus(V), Nematodo(N) y Abitica(A).

5.1.1 SNTOMAS POR CAUSAS BITICAS


MANCHAS FOLIARES (royas, oidiosis, mildius, sarna, antracnosis, tizones, etc.) Clorticas (A,B,H,M,V), oscuras (H,N), mosaicos(V), traslcidas (B), venales (V,H), intervenales (H,B,V,A), redondas (H,B), angulares (H,B), alargadas (H,N), corchosas (V), necrticas (H,B,V), gomosas (V), pstulas (H), y chancros (H,B). Ocurren en necrosis terminal (H,B,A): destruyen la punta de crecimiento en tallo, tubrculo o raz y matan un rgano como la flor, rganos sexuales y frutos.

En este caso colecte al menos 15 hojas representativas de todos los estados de infeccin. Para plantas con hojas pequeas, corte una rama con sus hojas intactas. Empaque en papel toalla y luego en bolsa plstica sellada. Para las hojas muy suculentas limpie el exceso de humedad y empquelas individualmente en doble papel toalla seco y colquelas en una bolsa de plstico. Adjunte informacin sobre aplicacin de pesticidas y condiciones ambientales que precedieron la toma de la muestra.
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MARCHITEZ, MUERTE REGRESIVA, PUDRICIONES RADICULARES Y DEFOLIACIN,

TAPONAMIENTOS VASCULARES, AMARILLEZ (H,B,M,A):


Las sustancias producidas o inducidas por determinados patgenos, reducen la translocacin en el xilema (marchitez) o en el floema (tuberizacin area, malnutricin subterrnea). Otros factores causantes de esta sintomatologa pueden ser el exceso de agua, sales solubles, sequa o toxicidad.

En este caso colecte toda la planta, de ser posible, con raz y suelo. Extraiga las plantas herbceas cuidadosamente del suelo, de tal forma que las races se mantengan intactas con su rizsfera (suelo alrededor de las races), Coloque las races con su rizsfera en una bolsa plstica; y empaque la parte area con papel toalla y bolsa plstica sellada. En el caso de plantas perennes colecte un manojo generoso de las races alimenticias (las ms delgadas) con su rizsfera y empaque en una bolsa plstica sellada; incluya adems races largas que muestren pudricin con suelo. En este caso colecte adems varias ramas o ramillas con follaje mostrando un rango de sntomas, empaque con papel toalla y bolsa plstica sellada. Describa correctamente la sintomatologa observada como decoloracin de races, chancros, etc.

PUDRICIN (B,H):
La desintegracin de tejidos ocurre por accin de patgenos. Mas comn en rganos de reserva (frutos, races, tubrculos)

5.2 FRUTOS Y OTROS TEJIDOS FRESCOS O SUCULENTOS:


Evitar empacar frutos u otros rganos frescos mostrando estados avanzados de pudricin. Seleccione muestras con estados tempranos de la infeccin o dao. Limpie el exceso de humedad y envuelva los frutos o vegetales individualmente en doble papel toalla seco y colquelo en una bolsa de plstico. Enve el material en un empaque a prueba de choque (nevera de icopor y papel toalla de relleno). Para evitar la maceracin de los tejidos.
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5.3 FLORES Y FRUTILLOS CUAJADOS:


Colecte buena cantidad de flores y frutillos con pednculos y ramas, empaque en papel toalla y luego en bolsa plstica sellada, evite que la muestra est hmeda.

CRECIMIENTO ANORMAL: Se hace evidente en las formas de hipertrofia, hiperplasia, fasciacin, epinastia, distorsin abscisin prematura (B,H,N,V) CHANCROS Y AGALLAS: Seleccionar ramas o ramillas con agallas jvenes. Cortar ramas sanas y afectadas. Colocar las muestras sin humedad en un papel grueso sellado o en un envase hermtico, no en bolsa plstica. Colecte el suelo circundante al pie de la planta y empaque en una bolsa plstica sellada.

CARBONES EN ESPIGAS, MAZORCAS, TUBRCULOS: Colecte varias espigas (cereales, pastos, forrajes, caa de azcar, etc.) y frutos (mazorcas de maz, tubrculos de papa, etc.) y envulvalos individualmente en papel toalla y luego en bolsa de plstico selladas. Empaque la muestra en el sitio de infeccin del cultivo dado que este patgeno se distribuye fcilmente y contamina el resto del cultivo.

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6. TOMA Y ENVO DE MUESTRAS PARA ANLISIS NEMATOLGICO


En cualquier ambiente que los nematodos se encuentren, su distribucin es irregular. Debido a su poca movilidad, se encuentran localizados en ciertas zonas de un campo. Como no es posible examinar todo el ambiente en que los nematodos se encuentran y muchas veces no se sabe en qu zonas estn, es necesario hacer un muestreo segn la finalidad que se persiga: Con fines de diagnosis: Se realiza cuando se observan los sntomas en el campo, a fin de relacionar la sintomatologa con la densidad poblacional de nemtodos. Muestreo de Cultivos anuales Con un barreno o una palita se toman tres muestras por parche o zona afectada. La primera muestra se toma dentro del parche; la segunda en el lmite entre el parche y las plantas sanas; y la tercera fuera del parche donde crecen plantas aparentemente sanas. Muestreo de Cultivos perennes (frutales): En rboles se deben tomar muestras alrededor del rbol, justo en la proyeccin de la copa, las que luego se mezclan. A veces es recomendable muestrear rboles con diferentes grados de la enfermedad. Con fines de determinacin de la densidad media Se realiza para determinar la poblacin de nemtodos presentes en el campo. Los resultados se utilizan para decidir las medidas de control a implementar. Se recomiendan tomar muestras de 30 puntos por hectrea, quitar la capa superficial del suelo, luego se toma la submuestra hasta una profundidad entre 0 30 cm. las que se juntan en un balde. No tome muestras en las calles ni de plantas muertas y evite el efecto de borde (orillas del cultivo). NODULACIONES: Colecte suelo y los tejidos con diferentes grados de sntomas, empaque conjuntamente en bolsa plstica sellada.

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7. SNTOMAS POR CIRCUSTANCIAS PARTICULARES DEL AMBIENTE


Los factores del ambiente no bitico (temperatura, humedad, toxicidad, deficiencias nutricionales etc.), pueden afectar las plantas directamente o predisponerlas al ataque de agentes causantes de enfermedades. CAUSAS ABITICAS Las enfermedades pueden resultar de temperaturas inapropiadas, exceso o falta de agua o nutrientes, toxicidad por residuos de cultivos anteriores o productos qumicos aplicados a estos, toxicidad ambiental y hasta la cada de un rayo. La distribucin de la enfermedad en un campo puede ser la clave de algunas de stas.

Deficiencia de calcio

Estrs hdrico

Dao por granizo

Recolecte: todos los detalles de la afeccin, especifique humedad del suelo y las condiciones ambientales precedentes, anote la distribucin de la sintomatologa en la planta y en el campo, as como las labores culturales realizadas (aplicaciones de plaguicidas, herbicidas, fertilizantes etc.). FACTORES DE PREDISPOSICIN Los factores ambientales que favorecen la incidencia y afeccin por los patgenos son temperaturas y humedades desfavorables a la planta y favorables al patgeno; deficiencias nutricionales o excesos de fertilizacin favorables para el crecimiento de patgenos; acumulacin de sustancias metablicas en condiciones de almacenaje; carencia de oxgeno (por exceso de agua); carencia o exceso de radiacin solar; efecto residual de herbicidas usados para otros cultivos no susceptibles; prcticas culturales inapropiadas (dao a la deshierba, riegos o podas inoportunas y suelos compactos).

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SIGNOS DEL PATGENO Algunos patgenos son reconocidos a simple vista sobre las plantas afectadas. El aspecto algodonoso o pulverulento de otros, los delata. Los picndios de algunos hongos, en cambio, son apenas perceptibles, pero con una lupa de 10X se observa su presencia. Las hembras de algunos nemtodos forman quistes o agallas caractersticos en ciertos cultivos, que pueden ser reconocidos a simple vista por los especialistas. Las bacterias pueden formar exudados caractersticos, pero los micoplasmas y virus, solo se pueden ver con equipos especializados. Cuando las causas del dao fitopatolgico no pueden determinarse en forma directa, es necesario seguir una serie de tcnicas de laboratorio que nos permitan llegar a la conclusin del diagnstico.

Carbn del maz

Monilia en cacao

Roya

Escoba de bruja

Por lo anteriormente expuesto, cada sintomatologa de campo requiere de un material vegetal y de unas tcnicas de diagnstico especificas.

8. INSTRUMENTOS PARA MUESTREO DE ENFERMEDADES


Se requiere: o o o o o o Papel absorbente, el cual puede remplazarse por hojas de papel peridico Bolsas plsticas en lo posible de color oscuro Tijeras podadoras o machete para tomar el trozo de la planta a enviar Cinta de enmascarar Lapicero para el marcado de la muestra Nevera de icopor con hielo seco o en su defecto con bolsas con agua congeladas aisladas de la muestra para evitar que esta se queme por el fro, o se moje al descongelarse, tener a la mano el protocolo para consignar la informacin, o en su defecto una hojas en blanco donde se recopile los datos mas relevantes.

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9. MUESTRAS PARA DETERMINAR HONGOS ANTAGNICOS

Para el diagnstico de hongos antagnicos, se recomienda observar en el cultivo que esta siendo afectado, las plantas que aparentemente se encuentran ms sanas o que muestren tolerancia a la enfermedad, de estas se debe tomar en diferentes partes una cantidad de aproximadamente 500 gramos del suelo que esta alrededor de las races, el cual se empaca y enva al laboratorio, para que los hongos sean diagnosticados, aislados y repicados masivamente.

Trichoderma sp

Beauveria bassiana

10. SNTOMAS DE PRESUNCIN VIRAL


DEFORMACIN DE HOJAS, MOSAICO, ACLARACIN DE VENAS, MANCHAS ANILLADAS, ENANISMOS.
Colecte tres o cuatro hojas del cogollo (hojas ms jvenes) y otras dos o tres con la expresin de los sntomas representativos, las hojas deben ir envueltas en papel aluminio o papel toalla y con bolsa plstica sellada. Si el envo va tardar ms de un da debe enviarse refrigerado evitando a toda costa que la muestra se moje, en caso de que el envo se haga el mismo da puede enviarse las hojas en un sobre de Manila. El mantenimiento de muestras frescas es esencial para el diagnstico de virus.

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Virus en papa Virus en tomate

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11. MUESTRAS PARA DETERMINAR DAO POR HERBICIDAS

Este tipo de diagnstico se realiza en laboratorios especializados, y necesita ser especifico en la demanda del servicio o sea tener claro de cual grupo de herbicida se sospecha. La visita del tcnico, en este caso es importante dado que realiza una observacin integrada de la problemtica como el estado del cultivo, rea afectada, estado de las malezas, revisin de la sintomatologa, tanto en el cultivo como en las malezas de hoja ancha. Cuando se toman este tipo de muestras se deben hacer observaciones a nivel de campo que pueden ayudar al diagnstico como son: encrespamiento de hojas nuevas, engrosamiento de venas, la lamina foliar aparece encorvada hacia arriba o hacia abajo, observar si la sintomatologa es generalizada o en focos, si los potreros cercanos estn quemados o no, si la sintomatologa es mas fuerte en las orillas del cultivo, si las malezas dentro del cultivo se encuentran afectadas. Aclarar si la toxicidad es por una aplicacin o por la utilizacin de abono orgnico no madurado y con residuos de herbicidas. Para el diagnstico se debe recolectar material de planta severa, mediana y levemente afectadas y enviar material suficiente de hojas, tallos a fin de determinar el producto que caus la toxicidad.

Fototoxicidad

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12. MUESTRAS PARA DETERMINAR VIABILIDAD DE SEMILLAS

Las semillas son las estructuras responsables de perpetuar la especie, stas se encuentran biolgicamente en reposo, contienen un embrin con actividad metablica. Poseen la facultad de germinar, emerger y dar origen a plantas sanas y vigorosas. Para lo cual deben estar intactos sus componentes, de manera que le permitan mantenerla no solo viva, sino con altos ndices de vitalidad. La semilla tiene 3 partes bsicas: el embrin, tejidos de reserva alimenticia y la cubierta. La cual va siendo modificada durante el desarrollo, en la madurez presenta una apariencia caracterstica, generalmente seca, endurecida, engrosada y de color caf. La envoltura proporciona a la semilla proteccin mecnica para el embrin, haciendo posible manejar la semilla sin daarla, pudiendo as ser almacenada por perodos considerables de tiempo. La viabilidad es la capacidad de la semilla para conservarse viva y germinar. La prueba estndar para determinar la viabilidad es la prueba rpida de TZC (tetrazolio) que es un compuesto orgnico que en contacto con las partes vivas de la semilla colorea los tejidos de rojo, siendo esta una reaccin enzimtica. La cantidad de muestra a enviar es de ms o menos 100 gramos de semilla. La prueba tiene una duracin de 18 a 24 horas. Esta prueba no diferencia semillas vivas de semillas latentes.

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13. ANEXOS

SERVICIO NACIONAL DE DIAGNSTICO VETERINARIO FORMATO NICO DE RECEPCIN DE MUESTRAS


1. OFICINA RECEPTORIA

No.
USO DIAGNSTICO Y PROCESAMIENTO

FECHA DE RECEPCIN:

A PREDIO: VEREDA: DEPARTAMENTO: TELFONO: TELFONO:

2. IDENTIFICACIN Y LOCALIZACIN
PROPIETARIO: MUNICIPIO: MED. VETERINARIO:

3. MOTIVOS DE SOLICITUD
Diagnstico Movilizacin Cuarentena Compraventa Otro Cul

4. TPO DE EXPLOTACIN
BOVINOS Leche Carne Doble propsito Raza: AVES Comercial postura Comercial engorde Comercial reproduccin Comercial postura engorde Traspatio Raza: PORCINOS Comercial cra Comercial engorde Comercial completo Urbano Rural Raza: EQUINOS Labor Deporte Paso fino Raza: OVINOS-CAPRINOS OTRA ESPECIE Comercial Urbano Rural Raza: Cul

5. NOTIFICACIN
Predios vecinos afectados CUNTOS S NO

6. CRONOLOGA
Da Primer enfermo Notificacin Primera visita Md. Vet. Mes Ao

7. SINTOMATOLOGA

8. LESIONES EN LA NECROPSIA

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9. DIAGNSTICO PRESUNTIVO:

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10. IDENTIFICACIN - MANEJO


Identif. Sexo Edad meses Vacunas y fecha (mes y ao) SISTEMA DE ALIMENTACIN:

TRATAMIENTO:

11. TOMA DE MUESTRAS


Tipo de muestra: Lugar y nombre laboratorio de envo: Edad: Sexo: TOMA ENVO Da Mes Ao

12. POBLACIN
ESPECIE B O V I N O S Terneros (as)< 1 ao Hembras 1-2 aos Hembras>2 aos Machos 1-2 aos Machos>2 aos TOTAL P Lactantes<2 meses O R Machos 2-6 meses C Hembras 2-6 meses I N Machos>6 meses O S Hembras>6 meses TOTAL OVI-CAPRINOS EQUINOS <4 semanas A 4-7semanas V 8-22semanas E S >22 semanas TOTAL POBLACIN Enfermos Muertos(1) Total
C A N I N O S F E L I N O S
S I L V E S T R E

ESPECIE Hembras 1-2 aos Hembras>2 aos Machos 1-2 aos Machos>2 aos TOTAL Hembras 1-2 aos Hembras>2 aos Machos 1-2 aos Machos>2 aos TOTAL Hembras 1-2 aos Hembras>2 aos Machos 1-2 aos Machos>2 aos TOTAL OTROS

POBLACIN Enfermos Muertos(1) Total

(1) Los muertos se consideran que enfermaron, inclyalos en los enfermos.

13. PRUEBAS SOLICITADAS


VIROLOGA TOXICOLOGA / QUMICA PARASITOLOGA BACTERIOLOGA HISTOPATOLOGA

14. RESULTADOS

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DIAGNSTICO VEGETAL INFORMACIN QUE DEBE ACOMPAAR SU MUESTRA


Seccional: ANTIOQUIA

Muestra

Fecha

1. INFORMACIN GENERAL
1.1 Interesado: 1.3 FAX: DIRECCIN: 1.4 Telfono: 1.2 Ciudad:
Anlisis

1.5 Patolgico 1.6 Entomolgico

2. INFORMACIN FINCA
2.1 Nombre de la finca: 2.3 Municipio: 2.2 Vereda: 2.4 Departamento: PROPIETARIO: 2.5 Altitud msnm: TEMPERATURA MEDIA:

TEXTURA DEL SUELO

PESADA

MEDIA

LIVIANA

3. INFORMACIN CONDICIONES CLIMTICAS UNA SEMANA ANTERIOR A LOS PRIMEROS SNTOMAS


3.1 Vientos 3.2 Lluviosidad 3.3 Humedad Relativa Escasos Alta Alta Normales Media Media Fuertes Baja Baja

4. INFORMACIN SOBRE EL CULTIVO AFECTADO


4.1 Nacional 4.3 Especie/Cultivo 4.2 Material importado 4.2.1 Procedencia (pas de origen) 4.2.2 Firma 4.6 Edad

4.4 rea cultivada 4.5 Variedad

PROCEDENCIA DE LA SEMILLA
4.7 Estado de desarrollo del cultivo: (marcar con x)

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4.7.1 Semilla 4.7.5 Produccin

4.7.2 Semillero o vivero 4.7.6 Poscosecha

4.7.3 Vegetativo

4.7.4 Floracin

DENSIDAD DE SIEMBRA

PLANTAS / ha

Kg / ha

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5. INFORMACIN DE LA PARTE AFECTADA (indique con X)


EXTENSIN CULTIVADA
5.1 Semilla 5.6 Flores 5.2 Raz 5.7 Frutos Cuales: 5.3 Tallo 5.8 Bulbos 5.4 Hojas 5.9 Tubrculo

EXTENSIN AFECTADA
5.5 Ramas Otro

6. INFORMACIN SOBRE APARIENCIA GENERAL (Solo para muestras fitopatolgicas) (Indique con X)
6.1 Marchitez 6.5 Enanismo 6.2 Con reas muertas 6.6 Pudricin Cuales: 6.3 Amarillamiento 6.7 Manchas 6.4 Quemazn Otro

7. INFORMACIN DAOS (Solo para muestras entomolgicas) (Indique con X)


Estado: 7.1 Adulto 7.5 Barrenador 7.9 Comedor de follaje 7.2 Larva 7.6 Raspador Otros 7.3 Ninfa 7.7 Minador 7.4 Otros 7.8 Chupador Cuales Cuales

Cuales:

8. INFORMACIN DAOS (Indique con X)


Distribucin: 8.1 General 8.5 Plano Severidad: 8.9 Alta 8.10 Media 8.11 Baja 8.2 Por Zonas 8.6 Zonas altas 8.3 Plantas aisladas 8.7 Zonas bajas 8.4 Pendiente 8.8 Zonas hmedas

9. AGROQUMICOS APLICADOS (fungicidas, insecticidas, herbicidas, fertilizantes, etc.)


NOMBRE DOSIS FRECUENCIA DE APLICACIN

10. RESULTADOS

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CONVENIO ICA - SECRETARA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL - MEDELLN, 2009