METODOLOGIA DE CAPTURA, COLETA E ARMAZENAGEM EM EXPERIMENTOS DE ENTOMOLOGIA FORENSE: TENDNCIAS E PADRONIZAO Rodrigo Cesar da Silva Castro1 Paulo Roberto

Queiroz2
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Bilogo. Aluno da Ps-Graduao em Biocincias Forense, pela Universidade Catlica de Gois/IFAR. 2 Bilogo. PhD. Biologia Animal. UnB. Professor do IFAR/PUC-GO. Endereo: IFAR Instituto de Estudos Farmacuticos. SHCGN 716 BL B Lj 05 Braslia-DF CEP: 70770-732. E-mail: pqsilva@uol.com.br RESUMO A entomologia forense consiste no estudo da associao dos insetos ao corpo em decomposio. Esse trabalho teve como objetivo apresentar as diferentes formas de armadilhas, iscas e formas de captura de Diptera de interesse forense. Faz pouco tempo que esta cincia ganhou destaque entre os acadmicos brasileiros. So necessrios mais interessados e trabalhos para preencher as lacunas e os preconceitos sobre o uso desta estratgia. A metodologia para captura, coleta e armazenagem parte bsica dos experimentos de entomologia forense. Foram analisadas metodologias de trabalhos selecionados sobre esta cincia. Observa-se uma tendncia em utilizar armadilhas que permitam apenas captura de insetos e uso de matria orgnica como principal atrativo. Palavras chave: Entomologia Forense; Dipterofauna; Metodologia de coleta;

ABSTRACT Forensic entomology is the study of the association of insects in the decaying body. This study aimed to present the different types of traps, baits and capture forms of Diptera of forensic interest. Just recently that science has gained prominence among Brazilian scholars. More needs to be concerned and work to fill gaps and prejudices about the use of this strategy. The methods for capture, collection and storage is part of the basic experiments in forensic entomology. Methodologies of selected works on this science have been analyzed. There is a tendency to use traps that allow only catch insects and use of organic matter as a main attraction. Keywords: Forensic Entomology; Dipterofauna; Collection methods;

INTRODUO

As investigaes criminais tm contado cada vez mais com a participao de outras reas do conhecimento, tais como, a Biologia, a Psicologia e a Toxicologia, entre outras, para que crimes possam ser elucidados. Um dos vrios ramos da Biologia que vem contribuindo com as investigaes h muito tempo a Entomologia, que a cincia que estuda os insetos. O primeiro relato de utilizao da entomologia a questes de carter forense vem do sculo XIII, na China, quando um lavrador foi assassinado (PUJOL-LUZ et al., 2008). O primeiro caso de Entomologia Forense documentado foi do advogado e investigador chins Sung Tzu no livro mdico legal Hs yan chi lu, que relata o caso de um esfaqueamento, onde o investigador analisou as ferramentas dos empregados, e aquela que continha resqucios de sangue atraia moscas apontando o culpado. Existem outras contribuies importantes na histria, quando Mende (1829) copilou uma lista de insetos necrfagos, incluindo moscas, besouros e outros, ajudando em clculos ps-morte, mas no anexou moscas com o tempo de morte. Em 1831, o fsico francs Orfila observou um grande nmero de exumaes e entendeu que as larvas tm um papel importante na decomposio de cadveres (BENECKE, 2001). A partir de 1850 surgiram as primeiras pesquisas na rea da Entomologia Forense, cincia que aplica os conhecimentos e estudos com os insetos a procedimentos legais (OLIVEIRA-COSTA, 2003). Esses insetos podem ser usados nas investigaes de crimes de trfico de drogas ilcitas para se determinar a possvel origem da mesma, nos crimes de maus tratos (BENECKE, 2001; MAGAA, 2001; OLIVEIRA-COSTA, 2003) ou, ainda, para a determinao do intervalo post-mortem (IPM) ou cronotanatognose, pois esses insetos colonizam a matria orgnica em decomposio, indicando assim o tempo de decomposio de cadveres (GOMES; VON ZUBEN, 2004). Durante as exumaes em massa na Alemanha e Frana mdicos legistas observaram uma lista de insetos necrfagos incluindo moscas, besouros, mas no foi feita nenhuma relao entre as moscas encontradas nos corpos com o tempo estimado de morte (GOMES; VON ZUBEN, 2006). Em 1855, Bergeret, foi o primeiro a aplicar a entomologia na determinao da data de uma morte: surgiria ali entomologia forense como cincia. Contudo, foi Mgnin, em 1894, que lanou o primeiro livro sobre o tema (BENECKE, 2001).

No Brasil, Edgard Roquette-Pinto e Oscar Freire foram os pioneiros nesse tema, publicando trabalhos relacionados entomologia forense em 1908 (PUJOL-LUZ et al., 2008). A partir da metade do sculo vinte, estudos envolvendo insetos a prticas de polcia e justia contriburam para a evoluo da entomologia forense como cincia (PANCORBO et al., 2006). A utilizao desses insetos baseada na sucesso cadavrica, ou seja, como e quando os insetos colonizam o corpo, em associao a fatores abiticos, ajudando na identificao do tempo de morte (CRUZ; VASCONCELOS, 2006). A entomofauna desempenha um importante papel na decomposio, ciclagem de nutrientes, produtividade secundria, fluxo de energia, polinizao, disperso de sementes, alm de outros. Os insetos representam em torno de 75% dos organismos j descritos no mundo, aproximadamente um milho de espcies (RUPPERT et al., 2005). A ordem de maior importncia para a entomologia forense a Diptera (OLIVEIRA-COSTA, 2003) e as famlias mais importantes so Calliphoridae, Sarcophagidae e Muscidae. Uma das mais importantes colaboraes da utilizao dos insetos como ferramenta forense a determinao do intervalo ps-morte (IPM) (OLIVEIRA-COSTA, 2003; MIRANDA et al., 2006). Cada fase da decomposio cadavrica oferece condies e caractersticas prprias que atraem um determinado grupo de insetos, desencadeando um processo de sucesso heterotrfica que, se constante, pode ser altamente informativo, como o procedimento do clculo do IPM (CATTS; GOFF, 1992). Como exemplo temos o ciclo de vida das Calliphoridae que compreende: ovo, larva I, larva II, larva III, pupa e adulto (MARILUIS, 1982). Podem servir como uma espcie de relgio, estimando o tempo de morte para duas ou mais semanas. Esse tipo de anlise pode ser mais precisa que os exames mdicos que so limitados em um ou dois dias aps a morte (GREENBERG, 1991). A entomologia forense sofreu entraves quanto ao seu reconhecimento como cincia durante dcadas, porm obtendo progressos considerveis a partir do sculo XX. Hoje, peritos criminais e legistas utilizam a entomologia forense como estratgia auxiliar em seus trabalhos. Instituies policiais reconhecidas mundialmente, tais como, o FBI, j fazem uso dessa cincia para resolver vrios casos. No Brasil, h ainda que se aplicar maiores esforos para a aplicao desses procedimentos (GOMES, 2010). Em um caso de um corpo encontrado na Floresta da Tijuca, Rio de Janeiro, utilizandose da entomologia forense, mais precisamente, da metodologia desenvolvida por Mgnin na Europa, observou-se uma estimativa muito maior do tempo real da morte. Devido ao clima e a

fauna brasileiras serem diferentes das condies europias, onde as primeiras metodologias envolvendo a entomologia forense foram desenvolvidas, no existia suporte para comparar os dados obtidos naquela regio com as condies faunsticas e climticas brasileiras. Foi proposto que o Brasil tivesse sua prpria metodologia (OLIVEIRA-COSTA, 2003; PUJOLLUZ et al., 2008). As pesquisas realizadas no exterior j detm grande quantidade de dados sobre o padro de sucesso de insetos nos corpos. Devido s condies climticas do Brasil aliadas a extenso territorial, esses dados no podem ser seguramente utilizados nos exames periciais utilizados no pas. Alm disso, os estudos brasileiros, por motivos legais, so realizados em carcaas de animais. Dessa forma, faz-se necessria uma pesquisa mais abrangente no meio pericial (OLIVEIRA-COSTA, 2003). Os avanos de tcnicas moleculares na entomologia forense esto concentrados na utilizao da reao em cadeia de polimerase (PCR), com a vantagem de recuperar a identidade do inseto por meio de qualquer vestgio morfolgico de suas fases do ciclo de vida. Os mtodos que combinam o PCR com outras tcnicas moleculares, tais como, o PCR-RFLP (reao em cadeia de polimerase - polimorfismo por comprimento do fragmento de restrio), que tem sido amplamente utilizado para a identificao de espcies de importncia forense (SPERLING et al., 1994; PANCORBO et al., 2006). Devido grande importncia da entomologia forense urgente que haja o desenvolvimento de conhecimentos, tais como, diversidade, frequncia das espcies em diferentes pocas do ano e aspectos detalhados da biologia das espcies necrfagas para que possam ser utilizadas para revelar a causa, o modo, a localizao e at o tempo de morte de um indivduo (MIRANDA et al., 2006; MISE et al., 2007). Entre 1930 e 1941 nenhum trabalho sobre entomologia forense foi publicado no Brasil (SOUZA, 1994). Devido s adversidades na coleta ou o desinteresse por muito tempo o tema ficou esquecido. No ano de 1987, Monteiro-Filho e Peneiro, publicaram um trabalho sobre a anlise qualitativa da fauna cadavrica em carcaas de rato. Souza (1994) realizou um estudo utilizando carcaas de porcos e determinou que espcies de importncia forense podem no ter o mesmo valor nas diferentes regies do Brasil sendo necessrio conhecer os dados de distribuio geogrficos dos txons avaliados. Alm disso, h a necessidade de um maior conhecimento da dipterofauna do cerrado, pois apesar do grande nmero de trabalhos que so realizados na regio, existe uma ausncia nos trabalhos envolvendo dpteros (CARVALHO, 2006).

Existe, no planalto central, uma carncia de informaes sobre a diversidade de dpteros. O interesse crescente gerou uma busca de informaes e uma ampliao no interesse em relao s moscas desconhecidas na regio (SANTANA, 2006). As pesquisas sobre entomologia forense passam por um acelerado desenvolvimento pelos principais centros de investigao no mundo. No Brasil, destacam-se ncleos especializados de estudo no Rio de Janeiro, So Paulo e Braslia, sendo necessria a coleta extensiva e o estabelecimento de padres de espcies para todo o territrio nacional (MIRANDA et al., 2006). Para trabalhar com insetos de interesse forense importante saber como e o que procurar. Assim, apontamentos desde o local da coleta, dados de GPS, umidade relativa, temperatura, alm de fotografias da isca e sua pesagem so importantes aes que pesquisadores e peritos devem estar atentos. Saber o tipo de armadilha a ser usada e como coletar de acordo com o objetivo da pesquisa tambm de grande valia. Coletas ativas como as realizadas com redes entomolgicas so boas para a captura de adultos e por dar uma noo espacial do que est sendo encontrado no local. Coletas passivas com o auxlio de armadilhas tambm so muito interessantes em trabalhos longos (GOMES, 2010). Esse trabalho teve como objetivo apresentar as diferentes formas de armadilhas, iscas e formas de captura de Diptera de interesse forense.

METODOLOGIA

Foi realizado um levantamento na bibliografia especfica para saber quais mtodos so mais utilizados como ferramentas para a prtica da entomologia forense. Foram selecionados 26 artigos que abordam a entomologia forense como tema principal. Estes artigos apesar de serem pesquisas sobre diferentes assuntos em comum tinham a captura de dpteros de interesse forense. E em sua metodologia possuem alguma forma de isca, armadilha ou coleta. Os artigos foram separados em tpicos para diferentes anlises. Foi avaliado na metodologia do artigo qual era a fase alvo da sua coleta: ovo, larva, pupa ou adulta. A isca utilizada e a armadilha eram as outras caractersticas observadas. Os artigos foram obtidos na base de dados da Bireme e do Google Acadmico.

DISCUSSO

Dos 26 trabalhos analisados 19 apresentavam metodologias para a coleta de dpteros adultos e sete desses trabalhos tambm envolviam a coleta de imaturos ou alguma fase do desenvolvimento do espcime. Os sete trabalhos restantes apresentaram metodologia de coleta para alguma fase de desenvolvimento exceto a adulta. Cada fase necessita de cuidados especiais para coleta. Assim, mtodos cientficos de coleta para a pesquisa devem ser to importantes como aqueles utilizados na investigao criminal, pois, espcimes de insetos, como a larva ou seu adulto devem ser considerados evidncia fsica, assim como, mancha de sangue, digitais, cabelo, fibras ou qualquer outro material biolgico (AMENDT, 2007). Faz-se necessria ateno para a importncia de sistemas de armadilhas especficos relacionados com mtodos de coleta eficientes. Se for utilizado o mtodo errado, as amostras estaro comprometidas para identificao. Estando em ms condies, com partes anatmicas ausentes ou prejudicadas quase impossvel realizar a identificao pelos meios taxonmicos tradicionais, pois estes se baseiam nas caractersticas especficas dos indivduos (CARREIRA et al., 2008). No total, 17 dos trabalhos incluram no texto qual a armadilha e a forma de coleta foram utilizadas. Todos os trabalhos apresentavam qual isca ou superfcie onde foram coletadas as amostras. Foram utilizadas apenas carcaas ou carne de Sus scrofa Linnaeus, porco domstico, em 12 experimentos, representando aproximadamente a metade dos textos. Outros trs trabalhos tambm utilizaram carcaas de porco, mas usaram alguma outra isca em seu mtodo de captura. O porco domstico o animal modelo nas investigaes de sucesso cadavrica (CRUZ; VASCONCELOS, 2006). A escolha do porco como modelo experimental embasado na composio histolgica muito semelhante a dos seres humanos e, algumas vezes, o peso e o tamanho podem ser parecidos com a de uma criana (GOMES, 2010). A anatomia interna, distribuio de gordura, tamanho do peito e ausncia de pelagem grossa so outras vantagens para o uso deste modelo. Alm disso, os porcos compartilham com os seres humanos uma dieta omnvora o que indica uma provvel semelhana entre sua microbitica intestinal (SCHOENLY et al., 2006). Entre os trabalhos que usaram iscas diferentes da carne de porco, ou vrias iscas associadas, obteve-se: 5 usaram peixe como atrativo, 4 utilizaram carne bovina, 4 capturaram no local e sobre o corpo na cena do crime ou IML, 2 usaram coelhos, e outros 2 roedores, 1

experimento usou lixo urbano. Dependendo do alvo de coleta e tambm do formato e tamanho da armadilha matria orgnica, para se adequar, foi usada em diferentes propores (CRUZ; VASCONCELOS, 2006; CARREIRA, 2008; CARVALHO, 2000; GOMES, 2010). Quanto s armadilhas, 10 experimentos usaram alguma forma de gaiola protegida e com modificaes para o acondicionamento e proteo da isca e para a captura das diferentes fases de desenvolvimento das dpteras. Armadilhas areas foram utilizados em 3 estudos. Os demais utilizaram alguma tcnica de coleta ativa. A gaiola um meio eficiente de adaptar a isca e separar os indivduos seja por espcie ou fase de maturao. Nos experimentos foi destacada a eficincia da gaiola, pois permite a entrada dos insetos e evita o acesso de animais necrfagos maiores, como pequenos mamferos (SANTANA, 2006; CRUZ;

VASCONCELOS, 2006). As modificaes feitas para a captura dos insetos tambm constava da literatura. Carvalho et al. (2000) utilizaram 16 carcaas de porcos, em gaiolas de metal individuais. As gaiolas foram colocadas a 10 cm com bandejas de metal posicionadas abaixo para a captura dos imaturos das espcies. Para a captura dos adultos foi feito um funil a partir de uma pelcula de ferro posicionado acima da gaiola e sacos plsticos, no topo, aprisionavam os indivduos que emergiam. Foram realizadas outras modificaes como a colocao de estacas ao redor da gaiola para sustento de uma lona plstica negra que evitava a luz solar para simular uma situao de variao de temperatura; armadilhas do tipo pitfall foram enterradas abaixo da gaiola, em diferentes profundidades, para captura de imaturos dos dpteros e tambm de colepteros; uma gaiola foi protegida apenas por uma tela de arame e foi enterrada para permitir uma maior interao da isca com o ambiente (LANNACONNE, 2003; OLIVEIRA-DA-SILVA, 2006; CRUZ; VASCONCELOS, 2006). Modificaes de tamanho e projeo das armadilhas ocorreram quando foram usadas como iscas carcaas de roedores, peixes e coelhos devido o menor porte destes animais (VON ZUBEN, 2008; KOSMANN, 2009). Armadilhas areas foram descritas em 3 artigos cientficos pesquisados. Estas armadilhas apresentam metodologias diferentes. Fato que no ocorre nos experimentos que utilizaram gaiolas, pois nestes a metodologia pouco variava. Foram usados materiais diferentes e atrativos diferentes para cada experimento. Carreira et al. (2008) confeccionou armadilhas a partir de garrafas PET e as posicionou a 180 cm do solo para capturar adultos de dptera e usou como atrativo 100 g de carne bovina. De acordo com os resultados a forma da armadilha permitiu a captura das moscas sem prejudicar sua anatomia, assim facilitando a classificao. Gomes (2000) produziu armadilhas orientadas pelo vento a partir de baldes e

usou como isca carne de fgado bovino. Moura e Rodriguez (2004) utilizaram seis pares de copos plsticos posicionados a 130 cm do solo e separados por 20 m de distncia, cada par possua um copo contendo carne bovina ou peixe cru. Os estudos no revelaram se o mtodo testado preservou a integridade dos espcimes coletados. Os trs experimentos tiveram sucesso em coletar os adultos das espcies alvo de cada pesquisa. No constava na literatura armadilhas para captura de ovos, larvas e pupas, apenas para alguma das fases separadamente. Porm, foram descritas vrias tcnicas de coleta e armazenamento dos animais. Em apenas um experimento foi demonstrado, diferente daqueles que utilizavam gaiolas como armadilha, outra forma de captura de ovos (LECESSE, 2004). Neste foram usadas placas de petri e pedaos de carne de porco como atrativo para coletar ovos de dpteros. Na placa foi depositada uma quantia de areia esterilizada e um pedao de carne no centro. Durante o perodo do experimento a areia recebeu doses dirias de gua para permanecer mida. No final foram capturados ovos de trs famlias de dpteras de interesse forense. As formas de coleta de imaturos descritas utilizaram meios de coleta ativa como as prprias mos do pesquisador ou por meio de algum tipo de instrumento. Miranda et al. (2006) indicam o uso de pinas e pincis para uma cuidadosa coleta de imaturos, evitando leses post-mortem no corpo ou alterao de algum vestgio. No caso de ovos recomendam o uso de um recipiente com papel filtro umedecido, e caso a captura seja de larvas o acondicionamento deve se feito em local contento algum tipo de protena para a alimentao destas. Andrade (2005) coletou larvas e puprios com pinas em diferentes partes de corpos em decomposio. Carvalho et al. (2000) tambm capturou imaturos diretamente de cadveres usando um frceps e depositando-os em frascos de plstico. Oliveira-Costa e Mello-Patiu (2004) utilizaram pincis e frceps na captura de imaturos em um cadver no Rio de Janeiro. Alm das armadilhas e formas de coleta os experimentos tinham como cruciais os meios para preservao e transporte dos indivduos coletados. Os meios de coleta e a armazenagem divergiam sendo at o tema principal entre os artigos pesquisados. Von Zuben (2008) em seu trabalho acompanhou o desenvolvimento de ovos de certa espcie de dptera. O acondicionamento destes ovos foi feito em recipientes de vidro a base de uma dieta de carne moda em putrefao. Neste caso, no foi descrita a fonte de onde foi retirada a carne utilizada. Estrada et al. (2009) coletaram ovos de dpteros da famlia Calliphoridae. Os ovos foram retirados cuidadosamente da isca com o auxlio de um pincel fino, mantidos em papel

de filtro umedecido com gua destilada e contados sob microscpio estereoscpico. Em seu trabalho foi avaliado a taxa de desenvolvimento do ovo desta famlia em diferentes dietas. Assim, toda matria usada nos cuidados dos ovos foi descrita. Fgado bovino, msculo bovino, rmen bovino e corao de galinha foram base para as dietas experimentais. Foram totalizados 8 trabalhos que utilizaram frascos contendo lcool como meio para acondicionamento do material coletado. Miranda et al. (2006) em sua cartilha, padronizam o tratamento dos indivduos coletados em uma cena de crime: adultos devem ser conservados em frascos fechados contendo lcool a 70%. Pupas devem ser fechadas em frascos com vermiculita. Larvas devem ser contadas e metade morta em gua quente e preservada em frascos contendo lcool 70% e a outra parte fixada viva em frascos contendo vermiculita. Ovos devem ser mantidos em placa de petri revestida com papel filtro umedecido. Os estudos que envolviam os insetos em outros tipos de pesquisa apresentavam mtodos de coleta e armazenagem parecidos, mas com algumas modificaes. Kosmann (2009) manteve indivduos capturados acondicionados em microtubos etiquetados contendo etanol 96% e preservados em freezer a -20C. O trax destes indivduos foram posteriormente utilizados na extrao do DNA. Thyssen et al. (2005) preservou as moscas coletadas em recipientes contendo lcool absoluto para posteriormente tambm realizar a extrao do DNA. Moscas coletadas com redes entomolgicas ou armadilhas areas foram mortas por congelamento, ou anestesiadas com algum inseticida e acondicionadas em frascos contendo lcool 70% em temperatura ambiente e baixas temperaturas (CARVALHO et al., 2004; LECCESE, 2004). Larvas foram mortas com gua quente e colocadas em frascos contendo lcool a 70%. Algumas larvas foram mantidas vivas em diferentes recipientes como placas de petri, caixas de vidro ou incubadoras, recebendo algum tipo de dieta para acompanhar sua maturao. Carvalho (2006) utilizou gua destila aquecida entre 70 C a 80 C e depois acondicionou larvas em primeiro nstar em lcool 70%. Oliveira da Silva et al. (2006) conservou em lcool 80% algumas de suas larvas coletadas para anlise. As metodologias para coleta de ovos foram iguais nos trabalhos citados. Os ovos foram coletados de superfcies como cadveres humanos, carcaa de animais ou outro tipo de matria em decomposio, utilizando-se pinas, pincis ou frceps. Em seguida, os ovos foram mantidos em algum recipiente contendo papel de filtro umedecido ou uma gaze para

evitar a desidratao. Tambm foram mantidos em observao na prpria isca (OLIVEIRACOSTA; MELLO-PATIU, 2004; VELEZ; WOLFF, 2008).

CONSIDERAES FINAIS

A tendncia dos estudos em entomologia forense utilizar armadilhas e iscas cada vez mais adaptadas para simular uma situao mais prxima do real. Neste sentido, interessante ressaltar como a maioria dos estudos utiliza a carne de porco como isca. Apesar dos dpteros serem a famlia que chega primeiro ao corpo, a tendncia dos atuais trabalhos em Entomologia Forense avaliar todos os processos de decomposio e fauna cadavrica associada. Armadilhas confeccionadas a partir de gaiolas modificadas permitem a coleta da dipterofauna, assim como, outros insetos e artrpodes. Quando se trata de experimentos que se referem sucesso cadavrica observada a escolha de uma armadilha modificada a partir de uma gaiola. Neste caso, a preferncia se deve a facilidade de capturar os insetos e evitar outros animais. Capturas de espcies especficas ou diferentes fases de desenvolvimento de um espcime podem utilizar outros meios de captura. Tratando-se da coleta de indivduos adultos as armadilhas areas esto entre as mais escolhidas. So poucos os trabalhos que utilizam diferentes formas de captura, o que pode ser interessante para uma padronizao facilitando o cruzamento e anlise de dados e informaes. As iscas utilizadas nas armadilhas no obedecem uma padronizao. Isso talvez tenha embasamento nas diferentes reas de estudo da entomologia forense. A isca mais utilizada para simular a sucesso cadavrica ou o clculo do IPM a carne ou a carcaa de porco. Porm, estudos como os que utilizam a entomologia forense para tratar de situaes como o correto armazenamento de produtos industriais ou problemas envolvendo a construo civil utilizam diferentes tipos de iscas. Para a coleta utilizando armadilhas areas a carne de porco no to utilizada como a bovina. Nessas situaes tambm podem ser testados diferentes substratos para observar a influncia da fauna cadavrica isoladamente ou entre eles. Evidente a utilizao de matria em decomposio nos trabalhos. As formas de coleta, armazenamento (etiquetagem em caso de evidncia forense) e transporte so as que demandam mais informao. Os ovos, larvas e as pupas dos dpteros podem ser coletadas por inmeras ferramentas. Mas a sua armazenagem e transporte podem

variar at quando o objetivo da pesquisa o mesmo. A coleta dos imaturos guardada em recipientes plsticos, de vidro ou at mesmo em pequenas gaiolas. J a dieta, principalmente em se tratando de experimentos que visem maturao dos indivduos na forma de ovos e larvas, diverge completamente. No caso das larvas possvel observar que surgem algumas formas de coleta, preservao e armazenamento padres. Frascos contendo lcool so as formas mais comuns de preservar amostras entomolgicas, o que varia neste caso a porcentagem do lquido dependendo da utilizao posterior do animal. Existem trabalhos de extrao de DNA de larvas que variam a porcentagem do lcool entre 70% e 90%, outros utilizam lcool puro e realizam a mesma forma de extrao. Isto demonstra que existem alternativas diferentes quanto metodologia de armazenamento. A partir dos trabalhos observados fica evidente a necessidade de um sistema com qualidade assegurada para coleta, preservao, armazenamento e transporte das amostras entomolgicas, independente de ser uma pesquisa cientfica ou uma cena de crime. Isto no visa apenas preveno de contaminaes ou destruio, mas o cuidado que requer a entomologia forense por lidar com organismos vivos.

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