ELECTROFORESIS La electroforesis es un mtodo de laboratorio en el que se utiliza una corriente elctrica controlada con la finalidad de separar biomoleculas segn

su tamao y carga elctrica a travs de una matriz gelatinosa. FUNDAMENTO Cuando una mezcla de molculas ionizadas y con carga neta son colocadas en un campo elctrico, estas experimentan una fuerza de atraccin hacia el polo que posee carga opuesta, dejando transcurrir cierto tiempo las molculas cargadas positivamente se desplazaran hacia el ctodo (el polo negativo) y aquellas cargadas positivamente se desplazaran hacia el nodo (el polo positivo).

El movimiento de las molculas esta gobernado tambin por dos fuerzas adicionales; inicialmente la friccin con el solvente dificultar este movimiento originando una fuerza que se opone , por otro lado las molculas tienen que moverse en forma aleatoria o movimiento browniano debido a que poseen energa cintica propia denominado difusin. La energa cintica de las molculas aumenta con la temperatura, por ello a mayor temperatura mayor difusin.

La suma de todas estas fuerzas provoca que las molculas no migren de una manera homognea, de tal manera que, si las molculas son colocadas en un cierto lugar de solucin, los iones comenzaran a moverse formando un frente cuya anchura aumentara con el tiempo. Para reducir la anchura de este frente podemos reducir el movimiento de las molculas empleando un medio que oponga mas resistencia a dicho movimiento. Una forma comn de hacer esto es formar un gel. El gel consiste de un polmero soluble de muy alto peso molecular que atrapa molculas de agua y forma un tamiz que dificulta el movimiento de los solutos, consecuentemente, la migracin electrofortica de las molculas ser mas lenta, pero el ensanchamiento del frente se vera reducido tambin.

Factores que afectan a la electroforesis

En general la electroforesis depende directamente del campo elctrico y este depende de distintos parmetros. Basndose en la ley de Ohm se tiene que

Diferencia de potencial (V): define el campo elctrico; la velocidad de avance es directamente proporcional a ella. Resistencia (R): la movilidad de las molculas es inversamente proporcional a ella. Intensidad (I) : cuantifica el flujo de carga elctrica, se relaciona directamente con la distancia recorrida por las molculas. Por ltimo, otro factor que afecta significativamente a la electroforesis es la temperatura, esta es importante puesto que por el efecto Joule el paso de una corriente elctrica va a producir calor y este es directamente proporcional a la diferencia de potencial y a la resistencia. Por lo tanto, es necesario controlar de manera estricta la temperatura para que esta no afecte a la muestra desnaturalizndola.

Bibliografa

E.D.P. de Robertis, E.M.F. de Robertis I y II. Biologa Molecular y Celular

Krause, U., Thomson-carter, F.M.? Pennington, T.H. 1996. Molecular Epidemiology of Escherichia coli O157:H7 by Pulsed-Field Gel Electrophoresis and Comparison with That by Bacteriophage Typing. J.Clin. Microbiol. 34:959-961 Berkelman T., Stenstedt T. 2-D Electrophoresis using immobilized pH gradients. Principles & methods. Amersham Pharmacia Biotech Inc. 1998 . Electroforesis. Factores que afectan a la electroforesis lo ubicamos en la siguiente referencia webgrafica : http://es.wikipedia.org/wiki/Electroforesis#Factores_que_afectan_a_la_elect roforesis